Результаты и обсуждение

Изучение посевных качеств семян Platycladus orientalis, отобранных с четырех образцов дали следующие результаты. Полнозерность семян, по образцам 1, 2, 3, 4 составляла: 76,9%; 52,3%; 82,4%; 31,4%. Масса 1000 семян была равна соответственно: 14,10 г; 12,87 г; 19,02 г; 15,69 г. Всхожесть и энергия прорастания семян Platycladus orientalis представлены в таблице 2.

Таблица 2 Всхожесть и энергия прорастания семян Platycladus orientalis

Установлено, что семена Platycladus orientalis не имеют органического покоя. Вместе с тем, холодная стратификация, продолжительностью не более 30 суток повышает скорость прорастания семян, что важно при выращивании сеянцев этого вида в промышленном разведении (табл. 3, 4).

Таблица 3 Всхожесть и энергия прорастания семян Platycladus orientalis в зависимости от продолжительности холодной стратификации.

Таблица 4 Продолжительность, период и скорость прорастания Platycladus orientalis в процессе холодной стратификации.

Таким образом, регулярное и обильное семеношение, высокие посевные качества семян, устойчивость сеянцев к заболеваниям делает семенное размножение несортовых образцов основным способом разведения. Семенное размножение сортов возможно с последующим отбором экземпляров, соответствующих исходному образцу. Наиболее это подходит для форм Aurea, когда сеянцы могут быть отобраны по окраске. Так среди сеянцев Platycladus orientalis cv. Pyramidalis Aurea доля сеянцев с окраской аurea в зависимости от года может составлять от 57 до 90%. Однако эти сеянцы сильно варьируют по форме кроны и размерам. Поэтому вегетативное размножение культиваров и разработка его методов является важной задачей региональной дендрологии.

Установлено, что оптимальными сроками вегетативного размножения Platycladus orientalis, является первая декада апреля. При этом, обработка черенков препаратом «Корневин» способна значительно повышать процент укоренения (табл. 5). Кроме того, «Корневин» существенно повышает количество образовавшихся корней в расчете на один черенок. При совместном действии препаратов «Радифарм» и «Корневин» суммарная длина корней повышается в два раза.

Таблица 5 Влияние препаратов «Радифарм» и «Корневин» на укоренение черенков Platycladus orientalis (доверительные интервалы при Р = 95%).

Применение технологии микроклонального размножения снимает ряд проблем, связанных с семенным размножением, в частности возможности тиражирования высокодекоративных форм и сортов.

Развитие побегов в условиях культуры in vitro было отмечено на 3 неделе выращивания на среде МС с добавлением 0,2 мг/л БАП. Побеги выросли в длину в среднем на 30%. На 5-й неделе в условиях той же питательной среды на побегах замечено появление многочисленных почек. В среднем на каждом побеге сформировалось около 30−40 почек. В результате последующих пассажей на свежую среду МС с той же концентрацией фитогармонов, почки развивались в побеги, пригодные для укоренения.

Пересадка адвентивных побегов на среду с более высокой концентрацией фитогармонов (БАП 0,5−2 мг/л) индуцирует каллусообразование и ингибирует рост всех побегов, образующихся на экспланте. На наш взгляд, целесообразно чередование в пассажах питательных сред с фитогармонами и сред свободных от фитогармонов. Так пересадка адвентивных почек на среду без фитогармонов обеспечила развитие нормальных побегов платикладуса, на которых затем снова можно индуцировать развитие адвентивных побегов.

Кроме того, была предпринята попытка непрямого клонирования [12] платикладуса. Это подразумевает целенаправленный процесс калусообразования, затем индукцию соматического эмбриогенеза и получение регенерантов.

Наиболее эффективным сочетанием фитогармонов для образования каллуса на среде МС оказались БАП (2 мг/л) и 2,4 дихлорфеноксиуксусная кислота (2,4 Д) (0,08 мг/л). При этом экспланты экспонировались в темноте в течение 6 недель. Каллусная ткань бесцветная, сахаристая, имеет рыхлую структуру. Каллусогенез на свету удалось провести благодаря воздействию трех фитогармонов, а именно, БАП (2 мг/л), индолилуксусная кислота (ИУК) (0,2 мг/л) и 2,4 Д (0,01 мг/л). Каллус образовывался на 5−6 неделю выращивания в виде плотной светло-зеленой ткани.

Каллусные культуры, полученные двумя путями помещались на среду МС с добавлением БАП в концентрации 0,2 мг/л и экспонировались на свету. Каллус, образованный в темноте, дифференцировался быстрее и продуктивнее, чем образцы каллуса, выращенные на свету.

Получаемые в процессе микроклонального размножения новые побеги нуждаются на заключительном этапе асептического культивирования в образовании корневой системы. Ризогенез у мериклонов проводили на Ѕ среде МС с добавлением 5 мг/л ИУК. На второй неделе культивирования отмечали появление придаточных корней, а к 6 неделе переводили регенеранты в условия теплицы.