Поведенческие тесты. 
Нейротропное и антигипоксическое действие нейротрофического фактора головного мозга (BDNF) in vitro и in vivo

Тест «Открытое поле». Установка для теста «Открытое поле» представляет собой круглую камеру диаметром 90 см с пластиковыми стенками высотой 28 см. Пол изготовлен из белого пластика, на нем черной краской нанесена решетка, делящая его на 25 равных квадратов со стороной 15 см. Лампы накаливания (4 лампы по 75 Вт) располагаются по кругу диаметром 60 см на высоте 80 см от поверхности поля. Освещенность площадки во время опыта 200 Лк. Животное помещалось в центральный квадрат и над ним велось автоматическое наблюдение с помощью видеокамеры. Визуально подсчитывалось количество отдельных поведенческих актов.

С целью определения ориентировочно-исследовательской активности животных в «открытом поле» регистрировались следующие показатели поведенческой активности мышей: горизонтальная двигательная активность (ГДА) — число пересеченных квадратов в «открытом поле»; вертикальная двигательная активность (ВДА) — число стоек — подъемов на задние лапы. Также отмечались реакции принюхивания, замирания, верчения, пячения, акты груминга и дефекации (Буреш Я. с соавт., 1991).

Метод исследования навигационного научения и долговременной памяти в тесте «Водный лабиринт Морриса». Лабиринт представляет собой циркулярный бассейн (диаметром 90 см), заполненный непрозрачной водой, в которую погружена небольшая платформа (диаметром 10 см), не видимая животному.

Протокол теста состоял из пяти сеансов обучения, по пять попыток в каждом. Сеансы проводились в одно и то же время через 48 часов. Помещение животных с края бассейна в течение всего эксперимента производилось в одном и том же секторе лабиринта, выбранного случайным образом. Максимальная длительность первого сеанса составляла 90с. В том случае, если животное не могло самостоятельно найти платформу, экспериментатор помогал ему. После обнаружения платформы, животное находилось на ней 30с. Последующие 4 сеанса по продолжительности составляли 60с. В случае не обнаружения платформы, животное вынималось из бассейна и находилась за границами лабиринта в течение 30с. Расположение платформы за все время проведения теста не менялось и находилось в противоположном от запуска животного секторе на границе зоны тигмотаксиса.

После окончания обучения животные подвергались условиям острой гипобарической гипоксии. Повторное тестирование на сохранение следов долговременной памяти проводили через 24 часа после острой гипоксии. Тест состоял из одной пробы длительностью 60 с. При этом платформа в лабиринте отсутствовала. Траектория движения животного фиксировалась с помощью установки для видеорегистрации объектов. Анализ данных выполнялся с помощью разработанного в программной среде Matlab оригинального пакета алгоритмов MouseTrack и Traceman. При оценке результатов значимыми считались следующие показатели: время достижения платформы, траектория свободного плавания при поиске платформы.

Кроме того, для каждой группы животных рассчитывался отсроченный коэффициент сохранения долговременной памяти (оКс). оКс — доля времени пребывания мыши в квадранте, где находилась платформа, по отношению в общему времени пребывания особи в «водном лабиринте Морриса». При этом считается нормой, если животное провело в квадранте, где находилась платформа, около 23−27% общего времени пребывания в лабиринте (D'Hooge R. and De Deyn P.P., 2001).