Определение бактерий группы кишечной палочки в почвах Тульской области

Определение бактерий группы кишечной палочки в почвах Тульской области Я. В. Евстратова, асс. Е. В. Акатова Тульский государственный университет, chnittt@gmail.com, katiakatova@gmail.com.

Почва представляет собой поверхностный слой суши, участвующий во всех важнейших процессах функционирования наземных экосистем и биосферы в целом. Во всех этих процессах ключевую роль играют микроорганизмы. Одними из них являются бактерии группы кишечной палочки (БГКП) БГКП — это санитарно-показательными микроорганизмами. В норме БГКП — постоянные обитатели микрофлоры кишечника, но среди них бывают и патогенные штаммы, вместе с фекалиями в больших количествах выделяющиеся в окружающую среду. Обнаружение БГКП в объектах внешней среды свидетельствует о загрязнении выделениями человека или животного.

В работе определяли бактерии группы кишечной палочки в образцах почв Тульской области, прямым высевом на среду Эндо и проводили дальнейшую идентификацию выделенных штаммов с помощью теста ТИМАЦ.

Объектом исследования являлась почва взятая из:

1) Леса близ города Белёв.

2) Самого города Белёв.

3) Косогорского металлургического завода.

4) Леса Ясной поляны.

5) Залежи на Куликовом поле Общую численность бактерий группы кишечной палочки (БГКП) определяли прямым высевом из трех последовательных разведений на селективную среду Эндо. В результате на чашках выросли колонии различного цвета от темнорозовых до бесцветных. Среда Эндо — это дифференциально-диагностическая среда для выявления БГКП. На ней растут только грамотрицательные бактерии, какими и являютя БГКП. Для точного определения, выросших штаммов к БГКП мы провели оксидазный тест, и все штаммы давшие положительный результат отсеяли. В результате получили общую численность БГКП в исследуемых почвах. В почве № 1 — 1×104, № 2 — 2×105, № 3 — 1×103, № 4 — 6×102, и в почвепод номером 5 — 1×104 КОЕ/г. По данные верзультатам, ни одна из исследуемых почв не удовлетворяет санитарно-гигиеническим нормам, и является сильно загрязнённой.

Далее все отобранные штаммы БГКП подвергли биохимическому анализу ТИМАЦ.

ТИМАЦ — комплекс тестов для дифференцирования отдельных родов бактерий группы кишечных палочек Т — температурный тест (тест Эйкмана);

И — тест индолообразования;

М — реакция с метиловым красным;

А — реакция на ацетилметилкарбинол (реакция Фогеса — Проскауэра);

Ц — цитратный тест;

Л — сбраживание лактозы.

Сравнивая результаты по ТИМАЦ, полученные для выделенных штаммов, с данными полученными для бактерий группы кишечной палочки удалось установить родовую принадлежность 9 штаммов.

Соотношение исследуемых штаммов с родами БГКП.

кишечный палочка штамм почва Вероятнее всего, что штамм 2−1-4 относится к роду Enterobacter, штамм 2−3-1 и 5−5 к роду Proteus, штамм 3−1-1, 5−7-1 и 5−7-2 принадлежит роду Ervinia, 3−1-2 к роду Klebsiella. Для более точного определения нужно провести ещё ряд тестов, например тест на образование H2S, тест на рост культуры в присутствии KCN, гидролиз мочевины и другие. Штамм 5−12 к роду Enterobacter. Штаммы из почвы № 1 не удалось идентифицировать, нужно сделать больше тестов. Штамм 5−10 удалось определить до вида, он относится к Escherichia vulneris.

Роды Enterobacter, Klebsiella и Ervinia имеют патогенные штаммы, и могут вызывать опасные заболевания у человека. В ряде случаев нам удалось выяснить к каким родам относятся выделенные нами БГКП, что может помочь нахождению более эффективных методов борьбы с ними. По данным этой работы можно сделать выводы о районах Тульской области, которым нужно проведение дезинфекции и профилактических мероприятий, с целью уничтожения патогенных бактерий, вызывающих заболевания кишечными инфекциями у населения.

«Методы микробиологического контроля почвы. Методические рекомендации» Текст документа по состоянию на январь 2011 года.

Определителю бактерий Берджи", ред.Дж.Хоулт и др., 9-е издание, т.1. М.: Мир, 1997.