Антимикотическая активность препарата-пробиотика «Бактиспорин» " in vitro и его использование в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии

Актуальность проблемы Микотическая инфекция является одной из актуальных проблем дерматологии. По различным данным микозами страдает от 10 до 40% населения планеты всех возрастов [Сергеев А.Ю., Сергеев Ю. В., 2003].

Заболеваемость дерматофитиями в Республике Башкортостан (РБ) за 2003 год составила: микроспорией — 29,0 на 100 тыс. населения, трихофитией -11,7 на 100 тыс. населения [Информационное письмо для врачей, 2004]. В Республике Башкортостан показатели по трихофитии превышают общероссийские в 6−7 раз [Потекаев Н.Н., 2002].

Изучению проблем дерматофитий посвящены исследования Е. А. Медведевой (1968), П. Н. Кашкина (1978), П. Н. Пестерова (1988), З.Р. Хисматулли-ной (1995), Х. С. Фахретдиновой (2004). В них освещены особенности морфологии грибов-возбудителей, эпидемиологии и клиники заболеваний, предложены новые подходы к лечению. Однако часто встречающийся полиморфизм грибов-возбудителей в материале от больного при диагностических исследованиях, большое количество нагноительных форм (до 51,7% случаев при зооантропо-нозной трихофитии), длительный срок лечения (от 30 до 70 дней) и побочные явления традиционной терапии (развитие дисбиоза кишечника, снижение функциональной активности нейтрофилов, присоединение респираторных заболеваний) указывают на необходимость дальнейшего изучения этих вопросов.

Несмотря на достаточно широкий спектр современных антимикотиков основным препаратом для лечения больных зооантропонозными дерматофитиями является гризеофульфин. Однако при его применении наблюдается ряд побочных эффектов (диспепсия, головная боль, аллергические реакции и др.) [Машковский М.Д., 2000], а длительное применение может привести к нарушению состояния кишечной микрофлоры [Гафаров М.М., 2001; Болотовский Г. В., 2002]. Ввиду наличия интеркуррентных заболеваний [Давыдова И.Р., Норманнская Т. Н., 2002], присоединения вторичной инфекции [Новиков А.И., Логинова Э. А., 2001], несостоятельности иммунного ответа [Медведев Ю.А., 1986; Хам-зина О.Ш., 1996] при лечении зооантропонозных дерматофитий часто приходится использовать комплексную терапию.

Сложность лечения зооантропонозных дерматофитий делает актуальным поиск новых препаратов, обладающих, помимо антимикотической, дополнительно антибактериальной активностью, иммуномодулирующими и ферментативными свойствами, не вызывающих побочных эффектов, удобных в применении, а также ценодоступных.

Такими препаратами являются пробиотики из бактерий рода Bacillus, например «Бактиспорин». Препарат «Бактиспорин» применяется для профилактики дисбиоза кишечника, при гнойно-воспалительных заболеваниях, бактериальном вагинозе [Михайлова Н.А. и др., 1999]. Однако антагонистическая активность Бактиспорина в отношении грибов-дерматофитов не изучена.

Исходя из вышеизложенного, изучение антимикотического действия пробиотика «Бактиспорин» в отношении тест-штаммов грибов-дерматофитов в тестах in vitro и клинической эффективности его использования в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии является актуальным.

Цель исследования Изучение антимикотической активности препарата-пробиотика «Бактиспорин» в отношении грибов-дерматофитов в тестах in vitro, а также возможности его использования в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии для повышения эффективности лечения.

Задачи исследования.

1. Изучить особенности морфологии возбудителей зооантропонозной трихофитии, а также клиники, эпидемиологии и методы ее диагностики.

2. Изучить антимикотическую активность препарата «Бактиспорин» в отношении грибов-дерматофитов (Tr. mentagrophytes var. gypseum и М. canis) в тестах in vitro.

3. Исследовать состояние кишечной микрофлоры у больных зооантро-понозной трихофитией до лечения и в динамике лечения при традиционной и комплексной терапии с использованием препарата «Бактиспорин».

4. Изучить состояние функциональной активности нейтрофилов у больных зооантропонозной трихофитией в очаге воспаления и периферической венозной крови до лечения и в динамике лечения при традиционной и комплексной терапии с использованием препарата «Бактиспорин».

5. Провести сравнительную оценку эффективности традиционной терапии зооантропонозной трихофитии и комплексного лечения с использованием препарата «Бактиспорин».

Научная новизна Впервые: — выявлена антимикотическая активность препарата «Бактиспорин» в тестах in vitro в отношении грибов-дерматофитов Tr. mentagrophytes var. gypseum и М. canis и разработаны критерии ее оценки в тесте отстроченного антагонизмаразработана новая среда для культуральной диагностики грибов-дерматофитов на основе среды Сабуро с добавлением гидролизата кератина, позволяющая сократить срок диагностики на 2−3 дняустановлено, что при зооантропонозной трихофитии в очаге воспаления (капиллярная кровь) нейтрофилы обладают более высокой функциональной активностью, чем в центральном кровотоке (венозная кровь) — установлена способность Бактиспорина повышать функциональную активность нейтрофилов как в центральном кровотоке (венозная кровь), так и в очаге воспаления (капиллярная кровь) при зооантропонозной трихофитии;

• предложен новый метод ранней оценки эффективности проводимой терапии зооантропонозной трихофитии (на 10-й день лечения) на основе показателей фагоцитарной активности нейтрофилов в очаге воспаления.

Научно-практическая значимость работы Разработаны критерии оценки антагонистической активности препарата-пробиотика «Бактиспорин» в отношении грибов-дерматофитов в тесте отсроченного антагонизма in vitro.

Предложен новый метод ранней оценки эффективности проводимой терапии зооантропонозной трихофитии на основе показателей фагоцитарной активности нейтрофилов из очага воспаления на 10-й день лечения.

Предложен новый способ комплексного лечения зооантропонозной трихофитии, сочетающий использование препарата-пробиотика «Бактиспорин» с гризеофульвином, позволяющий сократить сроки излечения больных и повысить качество проводимой терапии.

Внедрение результатов исследования в практику Результаты исследования вошли в методические рекомендации «Зооан-тропонозная трихофития» для врачей дерматовенерологов, ординаторов, интернов, слушателей ИПО (Уфа, 2004) — изложены в монографии «Зооантропо-нозная трихофития у детей: аспекты иммуномодулирующей терапии» (Уфа, 2005).

Получены патент на изобретение («Способ оценки эффективности лечения трихофитии» № 2 246 113 С1 РФ, G 01 N 33/52 Заявл. 30.03.2004; Опубл. 10.02.2005 // Бюл. — 2005. — № 4), положительное решение о выдаче патента на изобретение от 14.11.2005 (по заявке № 2 004 129 925 от 14.10.2004 «Способ диагностики дерматомикозов и питательная среда для дерматофитов»).

Способ лечения внедрен в практику и применяется в Республиканском кожно-венерологическом диспансере, Уфимском городском кожно-венерологи-ческом диспансере, Бирском кожно-венерологическом диспансере.

Материалы диссертации используются в учебном процессе кафедры инфекционных болезней с курсом дерматовенерологии ИПО БГМУ.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Препарат «Бактиспорин» обладает антимикотической активностью в отношении грибов-дерматофитов (Tr. mentagrophytes var. gypseum и М. canis) в тестах in vitro.

2. У больных зооантропонозной трихофитией еще до начала лечения существуют дисбиотические нарушения кишечной микрофлоры. Проведение традиционной терапии с использованием гризеофульвина усугубляет дисбиоз кишечника. Включение Бактиспорина в комплексную терапию улучшает состояние микробиоценоза кишечника.

3. При традиционной терапии зооантропонозной трихофитии в процессе лечения гризеофульвином повышается функциональная активность нейтро-филов в очаге воспаления и снижается в венозной крови, что свидетельствует об истощении резервных возможностей клеточного звена иммунитета. Применение Бактиспорина повышает функциональную активность нейтрофилов в очаге воспаления и в центральном кровотоке.

4. Использование препарата «Бактиспорин» в комплексном лечении зооантропонозной трихофитии повышает эффективность лечения, что проявляется: сокращением сроков элиминации возбудителя из очага воспаления, ускоренным регрессом клинических проявлений инфекции, отсутствием присоединения сопутствующих респираторных заболеваний, и приводит к сокращению сроков лечения в среднем на 3−4 дня.

Апробация работы Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на Респубс V/ 1 ликанскои итоговой научно-практическои конференции студентов и молодых ученых Республики Башкортостан с международным участием «Вопросы теоретической и практической медицины» (Уфа, 2003) — XI Российском конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2004) — World Conference on Magic Bullets Celebrating Paul Ehrlich’s 150th Birthday (Нюрнберг, 2004) — Всероссийской научной конференции молодых ученых «Актуальные вопросы инфекционной патологии человека, клинической и прикладной иммунологии» (Уфа, 2004) — Заседании Уфимского филиала Всероссийского научного общества дерматовенерологов (Уфа, 2004).

Публикации По материалам диссертации опубликовано 25 научных работ, в том числе одна монография и пять статей в центральной печати.

Объем и структура диссертации Диссертация изложена на 134 страницах, содержит 20 таблиц и 34 рисунка. Она состоит из введения, обзора литературы (2 главы), собственных исследований (6 глав), заключения, выводов и практических рекомендаций.

Список литературы

включает 199 источников (159 отечественных и 40 зарубежных).

Практические рекомендации У больных зооантропонозной трихофитией рекомендуется проводить комплексное лечение с использованием препарата-пробиотика «Бактиспорин». Препарат назначается с первого дня лечения одновременно с гризеофульвином перорально: 3 дня по 3 дозы 3 раза в день, затем 3 дня по 2 дозы 3 раза в день и 14 дней по 2 дозы 2 раза в день. Общий курс лечения 20 дней. Бактиспорин принимают натощак за 30 минут до еды.