Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Экспрессия рафт-образующих белков при немелкоклеточном раке легкого и ее влияние на свойства неопластических клеток

Диссертация: Экспрессия рафт-образующих белков при немелкоклеточном раке легкого и ее влияние на свойства неопластических клеток
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Изучение рафт-образующих белков разных семейств и возможных путей их взаимной регуляции позволит расширить фундаментальные знания о механизмах опухолевой трансформации и прогрессии, что крайне актуально и представляет не только большой теоретический научный интерес, но и может широко применяться при решении проблем современной молекулярной онкологии. Гиперэкспрессия флотиллина-2 приводит… Читать ещё >

Экспрессия рафт-образующих белков при немелкоклеточном раке легкого и ее влияние на свойства неопластических клеток (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ
  • ГЛАВА 1. ЛИПИДНЫЕ РАФТЫ И РАФТ-ОБРАЗУЮЩИЕ БЕЛКИ. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. липидные рафты — микродомены в составе клеточных мембран
    • 1. 2. Общие представления о строении и функционировании липидных рафтов
    • 1. 3. Рафт-образующие белки: разнообразие и отдельные представители
    • 1. 4. Структура и локализация рафт-образующих белков
      • 1. 4. 1. Строение кавеолинов и каееод
      • 1. 4. 2. Строение и локализация флотиллинов
      • 1. 4. 3. Семейство стоматинов: строение и локализация
    • 1. 5. Функции рафт-образующих белков
      • 1. 5. 1. Везикулярный транспорт
      • 1. 5. 2. Миграция и образование клеточных контактов
      • 1. 5. 3. Деградация внеклеточного матрикса
      • 1. 5. 4. Гомеостаз холестерола
      • 1. 5. 5. Транспорт глюкозы
      • 1. 5. 6. Роль флотиллинов в активации Т-лимфоцитов
      • 1. 5. 7. Участие стоматина в регуляции активности натриевых каналов
    • 1. 6. Роль рафт-образующих белков в опухолевой трансформации и прогрессии
      • 1. 6. 1. Двоякая роль кавеолина-1 в канг{ерогенезе
      • 1. 6. 2. Роль флотиллинов в канцерогенезе
      • 1. 6. 3. Роль стоматин-подобных белков в канцерогенезе
  • ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
    • 2. 1. Характеристика исследованных опухолевых образцов
    • 2. 2. Клеточные линии
    • 2. 3. Выделение нуклеиновых кислот
      • 2. 3. 1. Выделение плазмидной ДНК
      • 2. 3. 2. Выделение РНК из клеточных культур и образцов опухолевых тканей
      • 2. 3. 3. Выделение фрагментов ДНК из агарозных гелей
    • 2. 4. Аналитический электрофорез ДНК в агарозных гелях
    • 2. 5. Молекулярное клонирование
      • 2. 5. 1. Получение компетентных клеток Е. col
      • 2. 5. 2. Трансформация компетентных клеток E. col
      • 2. 5. 3. Обработка ДНКрестрицирующими эндонуклеазами
      • 2. 5. 4. Реакция лигирования
      • 2. 5. 5. Клонирование кодирующей последовательности генов с кДНК
      • 2. 5. 6. Клонирование предшественников малых шпилечных РНК
    • 2. 6. Обратная транскрипция РНК
    • 2. 7. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
      • 2. 7. 1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в реальном времени
      • 2. 7. 2. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) на плазмидных ДНК
    • 2. 8. Трансфекция
    • 2. 9. Инфекция псевдовирусными частицами
    • 2. 10. Анализ белков
      • 2. 10. 1. Приготовление белковых лизатов
      • 2. 10. 2. Вестерн-блот гибридизация
      • 2. 10. 3. Приготовление образцов для определения ферментативной активности протеиназ
      • 2. 10. 4. Анализ желатиназной активности
      • 2. 10. 5. Анализ активности иРА
    • 2. 11. Исследование клеточных характеристик in vitro
      • 2. 11. 1. Анализ динамики роста клеток
      • 2. 11. 2. Анализ клеточной подвижности в тесте на зарастание «раны» in vitro (wound healing assayj
      • 2. 11. 3. Анализ клеточной подвижности в камерах Бойдена
      • 2. 11. 4. Выделение ядер клеток и проведение исследования клеточного цикла на проточном цитофлуориметре
    • 2. 12. Статистическая обработка результатов
    • 2. 13. Список растворов, сред и реактивов
  • ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
    • 3. 1. Анализ продукции рафт-образующих белков в образцах НМРЛ
      • 3. 1. 1. Определение продукции белков флотиллин-1, флотиллин-2 и стоматин методом Вестерн-блот анализа
      • 3. 1. 2. Корреляционный анализ изменения продукции флотиллина-1, флотиллина-2 и стоматина
      • 3. 1. 3. Определение уровня относительной экспрессии гена FL0T-2 в груше АК с помощью ПЦР в реальном времени
      • 3. 1. 4. Обсу.ждение результатов исследования клинических образцов
    • 3. 2. Анализ продукции рафт-образующих белков в клеточных линиях НМРЛ
    • 3. 3. Получение ретровирусных векторов и клеточных линий А549 и Н358 с гиперэкспрессией генов FLOT-l, FLOT-2 и STOM
    • 3. 4. Получение лентивирусных векторов с мшРНК к генам FL0T-1 и FLOT-2 и клеточных линий А549 и Н460 с подавленной экспрессией данных генов
    • 3. 5. Исследование характеристик полученных клеточных линий в культуре in vitro
      • 3. 5. 1. Изучение экспрессии рафт-образующих белков в клеточных линиях с гиперэкспрессией генов FLOT-l, FLOT-2 и STOM
      • 3. 5. 2. Изучение экспрессии рафт-образующих белков в клеточных линиях с подавленной экспрессией генов FLOT-1 и FLOT
      • 3. 5. 3. Изучение динамики роста полученных клеточных линий
      • 3. 5. 4. Анализ клеточного цикла линий с подавленной экспрессией флотиллина
      • 3. 5. 5. Исследование миграционной активности полученных клеточных линий
      • 3. 5. 6. Изучение активности протеаз, разрушающих внеклеточный матрикс
      • 3. 5. 7. Влияние изменения экспрессии флотиллина-1, флотиллина-2 и стоматина на экспрессию и активность некоторых белков, участвующих в регуляции внутриклеточных сигнальных путей
      • 3. 5. 8. Обсуждение результатов исследования клеточных линий НМРЛ

Актуальность. В последние годы в молекулярной биологии все больший интерес вызывает изучение липидных рафтов — микродоменов в составе клеточных мембран, богатых холестеролом и сфинголипидами, а также различными сигнальными белковыми молекулами. Липидные рафты могут представлять собой чрезвычайно маленькие, лабильные и короткоживущие структуры, но наряду с такими существуют и гораздо более крупные и стабильные микродомены, которые поддерживаются особыми рафт-образующими белками. Особой и наиболее значимой функцией рафт-образующих белков является их способность формировать «сигнальные платформы», и тем самым регулировать передачу клеточных сигналов. В настоящее время известно большое количество рафт-образующих белков, но наиболее изученными среди них являются белки семейства кавеолинов, основным представителем которых является кавеолин-1. Роль кавеолина-1 в канцерогенезе обусловлена его способностью влиять на пролиферацию, клеточную миграцию, программируемую гибель клеток, ангиогенез и другие процессы, имеющие важнейшее значение при опухолевой трансформации и прогрессии, а изменения его экспрессии фиксируются во многих типах опухолей человека [1−2].

До настоящего времени изучению других семейств рафт-образующих белков, среди которых наибольший интерес представляет группа БРРНотайпб, РгоЫЬШпб, ЕЫШшб, НАК/С), уделялось значительно меньше внимания. Одними из представителей этой группы являются белки семейства флотиллинов. Они широко экспрессируются в тканях человека, локализуются в клетках преимущественно на плазматической мембране, способны к олигомеризации и принимают участие в регуляции многих сигнальных путей, часто пересекаясь в своих функциях с кавеолинами [3]. На сегодняшний день роль флотиллинов в канцерогенезе практически не изучена, что делает их особенно привлекательными объектами для исследования. Кроме того, 8 различные рафт-образующие белки могут являться функциональными аналогами друг друга, что наводит на мысль о их возможной взаимозаменяемости. Однако до сих пор не проводилось совместных скрининговых исследований экспрессии различных рафт-образующих белков в опухолях человека.

В качестве объекта исследования экспрессии некоторых представителей группы 8РРН белков нами был выбран немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ). Исследование молекулярных механизмов возникновения и прогрессии опухолевого роста на модели рака легкого, как одного из самых распространенных, неблагоприятно текущих и сложно поддающихся лечению онкологических заболеваний [4], предоставляет возможность в полной мере оценить значимость изменения тех или иных факторов, ассоциированных с канцерогенезом. На сегодняшний день важнейшими факторами прогноза для больных НМРЛ остаются клинические параметры, и в первую очередь степень дифференцировки опухолевых клеток и статус метастазирования. Некоторые успехи достигнуты и в изучении молекулярных маркеров, однако поиск дополнительных факторов представляет собой одну из наиболее актуальных проблем современной молекулярной онкологии.

Целью данной работы являлось изучение экспрессии флотиллина-1, флотиллина-2 и стоматина при немелкоклеточном раке легкого (НМРЛ) и исследование возможных механизмов влияния данных рафт-образующих белков на свойства опухолевых клеток.

В соответствии с указанной целью были поставлены следующие экспериментальные задачи:

1. Оценить продукцию флотиллина-1, флотиллина-2 и стоматина в образцах первичных опухолей НМРЛ.

2. Сопоставить изменения продукции флотиллина-1, флотиллина-2 и стоматина с клинико-морфологическими показателями, такими как гистологический тип опухолей, степень дифференцировки опухолевых клеток, статус метастазирования.

3. Исследовать влияние гиперэкспрессии генов FLOT-1, FLOT-2 и STOM, а также подавления экспрессии генов FLOT-1 и FLOT-2 на характеристики клеточных линий А549 (АК легкого) и Н460 (крупноклеточная карцинома легкого) человека.

4. Изучить влияние изменения экспрессии генов FLOT-1, FLOT-2 и STOM на уровень продукции и статус фосфорилирования некоторых белков, участвующих в передаче клеточных сигналов.

5. Оценить взаимное влияние изменения экспрессии различных рафт-образующих белков в клеточных линиях А549 и Н460.

Научная новизна. В данной работе проведено скрининговое исследование продукции флотиллина-1, флотиллина-2 и стоматина при HMPJI, которое впервые показало, что содержание стоматина снижается в большинстве исследованных случаев HMPJI человека.

На модельных системах клеточных линий PJI показано влияние флотиллина-1, флотиллина-2 и стоматина на такие важнейшие свойства клеток, как пролиферация, миграция, способность к деградации внеклеточного матрикса. Получены приоритетные данные о существовании взаимного влияния изменения экспрессии рафт-образующих белков. Изменение экспрессии одного из рафт-образующих белков может сопровождаться изменением эндогенного уровня и других представителей этой группы белков, что, очевидно, изменяет структуру и функционирование мембранных рафтов. Возможные механизмы взаимного влияния рафт-образующих белков являются одной из неисследованных на сегодняшний день, но крайне актуальных проблем, поскольку данные изменения могут приводить к модификации важнейших путей передачи сигналов, ассоциированных с опухолевой трансформацией и прогрессией.

Научно-практическая значимость. Исследование экспрессии рафтобразующих белков флотиллина-1, флотиллина-2 и стоматина, а также определение молекулярных механизмов их влияния на свойства опухолевых клеток открывает новые перспективы для поиска дополнительных маркеров.

10 одного из самых прогностически неблагоприятных онкологических заболеваний — рака легкого.

Анализ полученных результатов позволил выявить корреляционные связи между уровнем продукции рафт-образующих белков и клинико-морфологическими показателями опухолевого роста при НМРЛ человека. Так, обнаруженная в исследуемой выборке НМРЛ корреляционная связь между уровнем продукции флотиллина-2 и степенью дифференцировки опухолевых клеток позволяет использовать этот белок в качестве маркера дифференцировки при данном онкологическом заболевании.

Изучение рафт-образующих белков разных семейств и возможных путей их взаимной регуляции позволит расширить фундаментальные знания о механизмах опухолевой трансформации и прогрессии, что крайне актуально и представляет не только большой теоретический научный интерес, но и может широко применяться при решении проблем современной молекулярной онкологии.

Выводы.

1) Впервые выявлено изменение содержания рафт-образующих белков флотиллина-1, флотиллина-2 и стоматина в образцах НМРЛ по сравнению с условно нормальной тканыо.

2) Обнаружена статистически значимая связь между содержанием флотиллина-2 и степенью дифференцировки опухолевых клеток: опухоли с высокой или умеренной степенью дифференцировки характеризуются равным или повышенным уровнем белка, в низко дифференцированных опухолях уровень флотиллина-2 чаще снижается.

3) Рост клеток линий А549 и Н460 НМРЛ усиливается при гиперэкспрессии стоматина, снижается при гиперэкспрессии флотиллина-1, а также при подавлении экспрессии флотиллина-2.

4) Миграционная способность клеток линий А549 и Н460 прямо пропорциональна уровню экспрессии флотиллина-2, но не зависит от флотиллина-1 и стоматина.

5) Гиперэкспрессия флотиллина-2 приводит к снижению фосфорилирования киназ ЕЮС-½ и р38, а подавление экспрессии флотиллина-1 усиливает фосфорилирование ЕКК-½. Гиперэкспрессия флотиллина-1, а также подавление экспрессии флотиллина-2 сопровождается увеличением продукции белков р53 и р21. Подавление экспрессии флотиллина-2 увеличивает фосфорилирование РАК киназы.

6) Подавление экспрессии флотиллина-2 в клеточных линиях А549 и Н460 НМРЛ сопровождается снижением содержания флотиллина-1 и возрастанием уровня стоматина и кавеолина-1. Подавление экспрессии флотиллина-1 не влияет на уровень других рафт-образующих белков. Обнаруженная взаимосвязь между рафт-образующими белками действует на посттранскрипционном уровне.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Koleske, A. J. Reduction of caveolin and caveolae in oncogenically transformed cells / A. J. Koleske, D. Baltimore, M. P. Lisanti // Proc Natl Acad Sci USA.- 1995. 92(5). — P. 1381−1385.
  2. Williams, Т. M. Caveolin-1 in oncogenic transformation, cancer, and metastasis / Т. M. Williams, M. P. Lisanti // Am J Physiol Cell Physiol. 2005. -288(3). — P. 494-C506.
  3. Browman, D. T. The SPFH domain-containing proteins: more than lipid raft markers / D. T. Browman, M. B. Hoegg, S. M. Robbins // Trends Cell Biol. 2007. — 17(8).-P. 394−402.
  4. , M. И. Смертность от злокачественных заболеваний / М. И. Давыдов, Е. М. Аксель // Вестник РОЩ имени Н. Н. Блохина РАМН. 2008. -т. 19, № 2, Приложение 1.-С. 91−119.
  5. Singer, S. J. The fluid mosaic model of the structure of cell membranes / S. J. Singer, G. L. Nicolson // Science. 1972. — 175(23). — P. 720−731.
  6. Mellman, I. Membranes and sorting / I. Mellman // Curr Opin Cell Biol. -1996.- 8(4). P. 497−498.
  7. Lingwood, D. Lipid rafts as a membrane-organizing principle / D. Lingwood, K. Simons // Science. 2010. — 327(5961). — P. 46−50.
  8. Simons, K. Functional rafts in cell membranes / K. Simons, E. Ikonen // Nature. 1997. — 387(6633). — P. 569−572.
  9. Brown, D.A. Functions of lipid rafts in biological membranes / D. A. Brown, E. London//Annu Rev Cell Dev Biol. 1998. — 14. — P. 111−136.
  10. Munro, S. Lipid rafts: elusive or illusive? / S. Munro // Cell. 2003. — 115(4). -P. 377−388.
  11. Simons, K. Lipid rafts and signal transduction / K. Simons, D. Toomre // Nat Rev Mol Cell Biol. 2000. — 1(1). — P. 31−39.
  12. Simons, K. Revitalizing membrane rafts: new tools and insights / K. Simons, M. J. Gerl //Nat Rev Mol Cell Biol. 2010. — 11(10). — P. 688−699.
  13. Seminario, M. C. Signal initiation in T-cell receptor microclusters / M. C. Seminario, S. C. Bunnell // Immunol Rev. 2008. — 221. — P. 90−106.
  14. Lajoie, P. Lattices, rafts, and scaffolds: domain regulation of receptor signaling at the plasma membrane / P. Lajoie, J. G. Goetz, J. W. Dennis, I. R. Nabi // J Cell Biol. 2009. — 185(3). — P. 381−385.
  15. Razani, B. Caveolae: from cell biology to animal physiology / B. Razani, S. E. Woodman, M. P. Lisanti // Pharmacol Rev. 2002. — 54(3). — P. 431−467.
  16. Lindner, R. Domains in biological membranes / R. Lindner, H. Y. Nairn // Exp Cell Res. 2009. — 315(17). — P. 2871−2878.
  17. Yanez-Mo, M. Tetraspanin-enriched microdomains: a functional unit in cell plasma membranes / M. Yanez-Mo, O, Barreiro, M. Gordon-Alonso, M. Sala-Valdes, F. Sanchez-Madrid // Trends Cell Biol. 2009. — 19(9). — P. 434−446.
  18. Tang, Z. Molecular cloning of caveolin-3, a novel member of the caveolin gene family expressed predominantly in muscle / Z. Tang, P. E. Scherer, T. Okamoto, K. Song, C. Chu, D. S. Kohtz // J Biol Chem. 1996. — 271(4). — P. 22 552 261.
  19. Parton, R. G. Biogenesis of caveolae: a structural model for caveolin-induced domain formation / R. G. Parton, M. Hanzal-Bayer, J. F. Hancock // J Cell Sci. -2006. 119 (Pt 5). — P. 787−796.
  20. Navarro, A. A role for caveolae in cell migration / A. Navarro, B. nand-Apte, M. O. Parat//FASEB J. 2004. — 18(15). -P. 1801−1811.
  21. Sanguinetti, A. R. Fyn is required for oxidative- and hyperosmotic-stress-induced tyrosine phosphorylation of caveolin-1 / A. R. Sanguinetti, H. Cao, M. C.
  22. Corley//Biochem J.-2003.-376 (Pt 1).-P. 159−168.130
  23. Radel, C. Integrin mechanotransduction stimulates caveolin-1 phosphorylation and recruitment of Csk to mediate actin reorganization / C. Radel, V. Rizzo // Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2005. — 288(2). — P. 936−945.
  24. Yamada, E. The fine structure of the gall bladder epithelium of the mouse / E. Yamada // J Biophys Biochem Cytol. 1955. — 1(5). — P. 445−458.
  25. Sandvig, K. Clathrin-independent endocytosis: from nonexisting to an extreme degree of complexity / K. Sandvig, M. L. Torgersen, H. A. Raa, D. B. van // Histochem Cell Biol. 2008. — 129(3). — P. 267−276.
  26. Hill, M. M. PTRF-Cavin, a conserved cytoplasmic protein required for caveola formation and function / M. M. Hill, M. Bastiani, R. Luetterforst, M. Kirkham, A. Kirkham, S. J. Nixon//Cell. 2008. — 132(1).-P. 113−124.
  27. Sowa, G. Caveolae, caveolins, cavins, and endothelial cell function: new insights / G. Sowa // Front Physiol. 2012. — 2. — P. 120.
  28. Bucci, M. In vivo delivery of the caveolin-1 scaffolding domain inhibits nitric oxide synthesis and reduces inflammation / M. Bucci, J. P. Gratton, R. D. Rudic, L. Acevedo, F. Roviezzo, G. Cirino // Nat Med. 2000. — 6(12). — P. 13 621 367.
  29. Yamamoto, M. Caveolin is an activator of insulin receptor signaling / M. Yamamoto, Y. Toya, C. Schwencke, M. P. Lisanti, M. G. Myers, Y. Ishikawa // J Biol Chem. 1998. — 273(41). — P. 26 962−26 968.
  30. Lisanti, M. P. Caveolae, caveolin and caveolin-rich membrane domains: a signalling hypothesis / M. P. Lisanti, P. E. Scherer, Z. Tang, M. Sargiacomo // Trends Cell Biol. 1994. — 4(7). — P. 231−235.
  31. Morrow, I. C. Flotillins and the PHB domain protein family: rafts, worms and anaesthetics /1. C. Morrow, R. G. Parton // Traffic. 2005. — 6(9). — P. 725−740.
  32. Langhorst, M. F. Scaffolding microdomains and beyond: the function of reggie/flotillin proteins / M. F. Langhorst, A. Reuter, C. A. Stuermer // Cell Mol Life Sci. 2005. — 62(19−20). — P. 2228−2240.
  33. Babuke, T. Dissecting the molecular function of reggie/flotillin proteins / T. Babuke, R. Tikkanen // Eur J Cell Biol. 2007. — 86(9). — P. 525−532.
  34. Langhorst, M. F. Trafficking of the microdomain scaffolding protein reggie-l/flotillin-2 / M. F. Langhorst, A. Reuter, F. A. Jaeger, F. M. Wippich, G. Luxenhofer, H. Plattner // Eur J Cell Biol. 2008. — 87(4). — P. 211−226.
  35. Yao, Y. The differential protein and lipid compositions of noncaveolar lipid microdomains and caveolae / Y. Yao, S. Hong, H. Zhou, T. Yuan, R. Zeng, K. Liao // Cell Res. 2009. — 19(4). — P. 497−506.
  36. Li, Y. DHHC5 palmitoylates flotillin-2 and is rapidly degraded on induction of neuronal differentiation in cultured cells / Y. Li, B. R. Martin, B. F. Cravatt, S. L. Hofmann // J Biol Chem. 2011. — 567. — P. 245−247.
  37. Solis, G. P. Reggie/flotillin proteins are organized into stable tetramers in membrane microdomains / G. P. Solis, M. Floegg, C. Munderloh, Y. Schrock, E. Malaga-Trillo, E. Rivera-Milla // Biochem J. 2007. — 403(2). — P. 313−322.
  38. Ludwig, A. Flotillin microdomains interact with the cortical cytoskeleton to control uropod formation and neutrophil recruitment / A. Ludwig, G. P. Otto, K. Riento, E. Hams, P. G. Fallon, B. J. Nichols // J Cell Biol. 2010. — 191(4). — P. 771−781.
  39. Neumann-Giesen, C. Role of EGF-induced tyrosine phosphorylation of reggie-l/flotillin-2 in cell spreading and signaling to the actin cytoskeleton / C. Neumann-Giesen, I. Fernow, M. Amaddii, R. Tikkanen // J Cell Sci. 2007. -120(Pt3).-P. 395−406.
  40. Lande, W. M. Missing band 7 membrane protein in two patients with high Na, low K erythrocytes / W. M. Lande, P. V. Thiemann, W. C. Mentzer // J Clin Invest. 1982. — 70(6). — P. 1273−1280.
  41. Fricke, B. The «stomatin» gene and protein in overhydrated hereditary stomatocytosis / B. Fricke, A. C. Argent, M. C. Chetty, A. R. Pizzey, E. J. Turner, M. M. Ho // Blood. 2003. — 102(6). — P. 2268−2277.
  42. Wang, D. Purification of band 7.2b, a 31-kDa integral phosphoprotein absent in hereditary stomatocytosis / D. Wang, W. C. Mentzer, T. Cameron, R. M. Johnson // J Biol Chem. 1991. — 266(27). — P. 17 826−17 831.
  43. Stewart, G. W. Hemolytic disease due to membrane ion channel disorders / G. W. Stewart // Curr Opin Hematol. 2004. — 11(4). — P. 244−250.
  44. Zhu, Y. Stomatocytosis is absent in «stomatin"-deficient murine red blood cells / Y. Zhu, C. Paszty, T. Turetsky, S. Tsai, F. A. Kuypers, G. Lee // Blood. -1999.-93(7).-P. 2404−2410.
  45. Gallagher, P. G. cDNA structure, tissue-specific expression, and chromosomal localization of the murine band 7.2b gene / P. G. Gallagher, M. Romana, J. H. Lieman, D. C. Ward // Blood. 1995. — 86(1). — P. 359−365.
  46. Salzer, U. Stomatin, flotillin-1, and flotillin-2 are major integral proteins of erythrocyte lipid rafts / U. Salzer, R. Prohaska // Blood. 2001. — 97(4). — P. 11 411 143.
  47. Snyers, L. Oligomeric nature of the integral membrane protein stomatin / L. Snyers, E. Umlauf, R. Prohaska // J Biol Chem. 1998. — 273(27). — P. 1 722 117 226.
  48. Umlauf, E. Association of stomatin with lipid bodies / E. Umlauf, E. Csaszar, M. Moertelmaier, G. J. Schuetz, R. G. Parton, R. Prohaska // J Biol Chem. 2004. -279(22). — P. 23 699−23 709.
  49. Snyers, L. Cysteine 29 is the major palmitoylation site on stomatin / L. Snyers, E. Umlauf, R. Prohaska // FEBS Lett. 1999. — 449(2−3). — P. 101−104.
  50. Umlauf, E. Characterization of the stomatin domain involved in homo-oligomerization and lipid raft association / E. Umlauf, M. Mairhofer, R. Prohaska // J Biol Chem. 2006. — 281(33). — P. 23 349−23 356.
  51. Goldstein, B. J. Cloning and characterization of SLP3: a novel member of the stomatin family expressed by olfactory receptor neurons / B. J. Goldstein, H. M. Kulaga, R. R. Reed // J Assoc Res Otolaryngol. 2003. — 4(1). — P. 74−82.
  52. Wang, Y. Identification and characterization of human SLP-2, a novel homologue of stomatin (band 7.2b) present in erythrocytes and other tissues / Y. Wang, J. S. Morrow / J Biol Chem. 2000. — 275(11). — P. 8062−8071.
  53. Strauss, K. Exosome secretion ameliorates lysosomal storage of cholesterol in Niemann-Pick type C disease / K. Strauss, C. Goebel, H. Runz, W. Mobius, S. Weiss, I. Feussner // J Biol Chem. 2010. — 285(34). — P. 26 279−26 288.
  54. Schubert, W. Caveolae-deficient endothelial cells show defects in the uptake and transport of albumin in vivo / W. Schubert, P. G. Frank, B. Razani, D. S. Park, C. W. Chow, M. P. Lisanti // J Biol Chem. 2001. — 276(52). — P. 48 619−48 622.
  55. Frank, P. G. Caveolin, caveolae, and endothelial cell function / P. G. Frank, S. E. Woodman, D. S. Park, M. P. Lisanti // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2003. -23(7).-P. 1161−1168.
  56. Minshall, R. D. Caveolin regulation of endothelial function / R. D. Minshall, W. C. Sessa, R. V. Stan, R. G. Anderson, A. B. Malik // Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2003. — 285(6). — P. 1179−1183.
  57. Frick, M. Coassembly of flotillins induces formation of membrane microdomains, membrane curvature, and vesicle budding // M. Frick, N. A. Bright, K. Riento, A. Bray, C. Merrified, B. J. Nichols // Curr Biol. 2007. — 17(13). — P. 1151−1156.
  58. Ait-Slimane, T. Basolateral internalization of GPI-anchored proteins occurs via a clathrin-independent flotillin-dependent pathway in polarized hepatic cells / T.
  59. Ait-Slimane, R. Galmes, G. Trugnan, M. Maurice // Mol Biol Cell. 2009. — 20(17). — P. 3792−3800.
  60. Glebov, O. O. Flotillin-1 defines a clathrin-independent endocytic pathway in mammalian cells / O. O. Glebov, N. A. Bright, B. J. Nichols // Nat Cell Biol. -2006.- 8(1).-P. 46−54.
  61. Riento, K. Endocytosis of flotillin-1 and flotillin-2 is regulated by Fyn kinase / M. Frick, T. Schafer, B. J. Nichols J // Cell Sci. 2009. — 122(Pt 7). — P. 912−918.
  62. Babuke, T. Hetero-oligomerization of reggie-l/flotillin-2 and reggie-2/flotillin-l is required for their endocytosis / T. Babuke, M. Ruonala, M. Meister, M. Amaddii, C. Genzler, A. Esposito // Cell Signal. 2009. — 21(8). — P. 1287−1297.
  63. Nevins, A. K. Caveolin-1 functions as a novel Cdc42 guanine nucleotide dissociation inhibitor in pancreatic beta-cells / A. K. Nevins, D, C. Thurmond // J Biol Chem. 2006. — 281(28). — P. 18 961−18 972.
  64. Lin, M. Regulation of pancreatic cancer cell migration and invasion by RhoC GTPase and caveolin-1 / M. Lin, M. M. DiVito, S. D. Merajver, M. Boyanapalli, K. L. van Golen // Mol Cancer. 2005. — 4(1). — P. 21.
  65. Shakirova, Y. Increased Rho activation and PKC-mediated smooth muscle contractility in the absence of caveolin-1 / Y. Shakirova, J. Bonnevier, S. Albinsson, M. Adner, B. Rippe, J. Broman // Am J Physiol Cell Physiol. 2006. -291(6)-P. 1326−1335.
  66. Haglund, K. Recruitment of Pyk2 and Cbl to lipid rafts mediates signals important for actin reorganization in growing neurites / K. Haglund, I. Ivankovic-Dikic, N. Shimokawa, G. D. Kruh, I. Dikic // J Cell Sci. 2004. — 117(Pt 12). — P. 2557−2568.
  67. Lopez-Casas, P. P. Regulation of flotillin-1 in the establishment of NIH-3T3 cell-cell interactions / P. P. Lopez-Casas, J. del Mazo // FEBS Lett. 2003. -555(2). — P. 223−228.
  68. Kioka, N. Vinexin, CAP/ponsin, ArgBP2: a novel adaptor protein familyregulating cytoskeletal organization and signal transduction / N. Kioka, K. Ueda, T.
  69. Amachi // Cell Struct Funct. 2002. — 27(1). — P. 1−7.136
  70. Solis, G. P. Reggies/flotillins regulate E-cadherin-mediated cell contact formation by affecting EGFR trafficking / G. P. Solis, Y. Schrock, N. Hulsbusch, M. Wiechers, H. Plattner, C. A. Stuermer // Mol Biol Cell. 2012. — 23(10). — P. 1812−1825.
  71. Meyer, A. Integrin-linked kinase complexes with caveolin-1 in human neuroblastoma cells / A. Meyer, C. M. van Golen, M. Boyanapalli, B. Kim, M. E. Soules, E. L. Feldman // Biochemistry. 2005. — 44(3). — P. 932−938.
  72. Chun, J. The subcellular localization control of integrin linked kinase 1 through its protein-protein interaction with caveolin-1 / J. Chun, S. Hyun, T. Kwon,
  73. E. J. Lee, S. K. Hong, S. S. Kang// Cell Signal. 2005. — 17(6). — P. 751−760.
  74. Schrock, Y. Regulation of focal adhesion formation and filopodia extension by the cellular prion protein (PrPC) / Y. Schrock, G. P. Solis, C. A. Stuermer // FEBS Lett. 2009. — 583(2). — P. 389−393.
  75. Williams, T. M. Caveolin-1 gene disruption promotes mammary tumorigenesis and dramatically enhances lung metastasis in vivo. Role of Cav-1 in cell invasiveness and matrix metalloproteinase (MMP-2/9) secretion / T. Williams,
  76. F. M. Medina, I. Badano, R. B. Hazan, J. Hutchinson, W. J. Muller // J Biol Chem. 2004. — 279(49). — P. 51 630−51 646.
  77. Cornfine, S. The kinesin KIF9 and reggie/flotillin proteins regulate matrix degradation by macrophage podosomes / S. Cornfine, M. Himmel, P. Kopp, A. K. El, C. Wiesner, M. Kruger // Mol Biol Cell. 2011. — 22(2). — P. 202−215.
  78. Uittenbogaard, A. Characterization of a cytosolic heat-shock protein-caveolin chaperone complex. Involvement in cholesterol trafficking / A. Uittenbogaard, Y. Ying, E. J. Smart // J Biol Chem. 1998. — 273(11). — P. 6525−6532.
  79. Roitbak, T. A polycystin multiprotein complex constitutes a cholesterol-containing signalling microdomain in human kidney epithelia / T. Roitbak, Z. Surviladze, R. Tikkanen, A. Wandinger-Ness // Biochem J. 2005.- 392(Pt 1). — P. 29−38.
  80. Ge, L. Flotillins play an essential role in Niemann-Pick CI-like 1-mediated cholesterol uptake / L. Ge, W. Qi, L. J. Wang, H. H. Miao, Y. X. Qu, B. L. Li // Proc Natl Acad Sci U S A. 2011. — 108(2). — P. 551−556.
  81. Thorens, B. Glucose transporters in the 21st Century / B. Thorens, M. Mueckler // Am J Physiol Endocrinol Metab. 2010. — 298(2). — P. 141−145.
  82. Mueckler, M. Facilitative glucose transporters / M. Mueckler // Eur J Biochem. 1994. — 219(3). — P. 713−725.
  83. Zhang, J. Z. Overexpression of stomatin depresses GLUT-1 glucose transporter activity / J. Zhang, Z. W. Abbud, R. Prohaska, F. Ismail-Beigi // Am J Physiol Cell Physiol. 2001. — 280(5). — P. 1277−1283.
  84. Czech, M. P. Signaling mechanisms that regulate glucose transport / M. Czech, P. S. Corvera//J Biol Chem. 1999. — 274(4). — P. 1865−1868.
  85. Baumann, C. A. CAP defines a second signalling pathway required for insulin-stimulated glucose transport / C. A. Baumann, V. Ribon, M. Kanzaki, D. C. Thurmond, S. Mora, S. Shigematsu // Nature 2000. 407(6801). — P. 202−207.
  86. Jiang, M. Protein disregulation in red blood cell membranes of type 2 diabetic patients / M. Jiang, L. Jia, W. Jiang, X. Hu, H. Zhou, X. Gao // Biochem Biophys Res Commun. 2003. — 309(1). — P. 196−200.
  87. Langhorst, M. F. Preformed reggie/flotillin caps: stable priming platforms for macrodomain assembly in T cells / M. Langhorst, F. A. Reuter, G. Luxenhofer, E. M. Boneberg, D. F. Legler, H. Plattner // FASEB J. 2006. — 20(6). — P. 711−713.
  88. Rajendran, L. Flotillins are involved in the polarization of primitive and mature hematopoietic cells / L. Rajendran, J. Beckmann, A. Magenau, E. M. Boneberg, K. Gaus, A. Viola//PLoS One. 2009. — 4(12). — P. 8290.
  89. Affentranger, S. Dynamic reorganization of flotillins in chemokine-stimulated human T-lymphocytes / S. Affentranger, S. Martinelli, J. Hahn, J. Rossy, V. Niggli // BMC Cell Biol. 2011. — 12. — P. 28.
  90. Price, M. P. Stomatin modulates gating of acid-sensing ion channels / M. P. Price, R. J. Thompson, J. O. Eshcol, J. A. Wemmie, C. J. Benson // J Biol Chem.2004. 279(51). — P. 53 886−53 891.
  91. Stewart G. Stomatin / G. Stewart // Int J Biochem Cell Biol. 1997. — 29(2). -P. 271−274.
  92. Mark P.Mattson. Membrane Microdomain Signaling: Lipid Rafts in Biology and Medicine / Mark P. Mattson // Humana Press. 2005. — P. 161−203.
  93. Ross, D. T. Systematic variation in gene expression patterns in human cancer cell lines / D. T. Ross, U. Scherf, M. B. Eisen, C. M. Perou, C. Rees, P. Spellman // Nat Genet. 2000. — 24(3). — P. 227−235.
  94. Ravid, D. Caveolin-1 inhibits anoikis and promotes survival signaling in cancer cells / D. Ravid, S. Maor, H. Werner, M. Liscovitch // Adv Enzyme Regul. -2006.-46.-P. 163−175.
  95. Zenklusen, J. C. Mutational and functional analyses reveal that ST7 is a highly conserved tumor-suppressor gene on human chromosome 7q31 / J. C. Zenklusen, C. J. Conti, E. D. Green // Nat Genet. 2001. — 27(4). — P. 392−398.
  96. Hayashi, K. Invasion activating caveolin-1 mutation in human scirrhous breast cancers / K. Hayashi, S. Matsuda, K. Machida, T. Yamamoto, Y. Fukuda, Y. Nimura//Cancer Res. 2001. — 61(6). — P. 2361−2364.
  97. Chen, S. T. Mutational, epigenetic and expressional analyses of caveolin-1 gene in breast cancers / S. T. Chen, S. Y. Lin, K. T. Yeh, S. J. Kuo, W. L. Chan, Y. P. Chu // Int J Mol Med. 2004. — 14(4). — P. 577−582.
  98. Cui, J. Hypermethylation of the caveolin-1 gene promoter in prostate cancer / J. Cui, L. R. Rohr, G. Swanson, V. O. Speights, T. Maxwell, A. R. Brothman // Prostate. 2001. — 46(3). — P. 249−256.
  99. Sanna, E. Binding of nuclear caveolin-1 to promoter elements of growth-associated genes in ovarian carcinoma cells / E. Sanna, S. Miotti, M. Mazzi, S. G. De, S. Canevari, A. Tomassetti // Exp Cell Res. 2007. — 313(7). — P. 1307−1317.
  100. Feng, X. Caveolin-1 associates with TRAF2 to form a complex that is recruited to tumor necrosis factor receptors / X. Feng, M. L. Gaeta, L. A. Madge, J. H. Yang, J. R. Bradley, J. S. Pober // J Biol Chem. 2001. — 276(11). — P. 83 418 349.
  101. Zundel, W. Caveolin 1-mediated regulation of receptor tyrosine kinase-associated phosphatidylinositol 3-kinase activity by ceramide / W. Zundel, L. M. Swiersz, A. Giaccia // Mol Cell Biol. 2000. — 20(5). — P. 1507−1514.
  102. Woodman, S. E. Caveolin-1 knockout mice show an impaired angiogenicresponse to exogenous stimuli / S. E. Woodman, A. W. Ashton, W. Schubert, H.1.e, T. M. Williams, F. A. Medina // Am J Pathol. 2003. — 162(6). — P. 2059−2068.141
  103. Yang, G. Caveolin-1 expression in clinically confined human prostate cancer: a novel prognostic marker / G. Yang, L. D. Truong, T. M. Wheeler, T. C. Thompson // Cancer Res. 1999. — 59(22). — P. 5719−5723.
  104. Tahir, S. A. Preoperative serum caveolin-1 as a prognostic marker for recurrence in a radical prostatectomy cohort / S. A. Tahir, A. Frolov, T. G. Hayes, M. P. Mims, B. J. Miles, S. P. Lerner // Clin Cancer Res. 2006. — 12(16). — P. 4872−4875.
  105. Suzuoki, M. Impact of caveolin-1 expression on prognosis of pancreatic ductal adenocarcinoma / M. Suzuoki, M. Miyamoto, K. Kato, K. Hiraoka, T. Oshikiri, Y. Nakakubo // Br J Cancer. 2002. — 87(10). — P. 1140−1144.
  106. Tanase, C. P. Caveolin-1: a marker for pancreatic cancer diagnosis / Tanase, C. P. // Expert Rev Mol Diagn. 2008. — 8(4). — P. 395−404.
  107. Joo, H. J. Increased expression of caveolin-1 and microvessel density correlates with metastasis and poor prognosis in clear cell renal cell carcinoma / H. J. Joo, D. K. Oh, Y. S. Kim, K. B. Lee, S. J. Kim // BJU Int. 2004. — 93(3). — P. 291−296.
  108. Yoo, S. H. Expression of caveolin-1 is associated with poor prognosis ofpatients with squamous cell carcinoma of the lung / S. H. Yoo, Y. S. Park, H. R.142
  109. Kim, S. W. Sung, J. H. Kim, Y. S. Shim // Lung Cancer. 2003. — 42(2). — P. 195 202.
  110. , В. В. Иммуногистохимическое исследование экспрессии кавеолина-1 при плоскоклеточном раке пищевода / В. В. Делекторская, Г. Ю. Чемерис, П. В. Кононец, Ю. В. Бондаренко, И. Б. Зборовска // Технологии живых систем. 2012. — № 3. — С. 8−13.
  111. Cho, D. S. Impact of caveolin-1 expression on the prognosis of transitional cell carcinoma of the upper urinary tract / D. S. Cho, H. Yim, K. S. Cho, S. J. Hong, N. H. Cho, S. I. Kim // J Korean Med Sci. 2008. — 23(2). — P. 296−301.
  112. Lin, C. Knockdown of FLOT1 impairs cell proliferation and tumorigenicity in breast cancer through upregulation of F0X03a / C. Lin, Z. Wu, X. Lin, C. Yu, T. Shi, Y. Zeng // Clin Cancer Res. 2011. — 17(10). — P. 3089−3099.
  113. Gomez, V. Regulation of aurora В kinase by the lipid raft protein flotillin-1 / V. Gomez, M. Sese, A. Santamaria, J. D. Martinez, E. Castellanos, M. Soler // J Biol Chem. 2010. — 285(27). — P. 20 683−20 690.
  114. Chang, D. SLP-2 overexpression is associated with tumour distant metastasis and poor prognosis in pulmonary squamous cell carcinoma / D. Chang, К. Ma, M. Gong, Y. Cui, Z. H. Liu, X. G. Zhou //Biomarkers. 2010. — 15(2). — P. 104−110.
  115. Cui, Z. Stomatin-like protein 2 is overexpressed and related to cell growth in human endometrial adenocarcinoma / Z. Cui, L. Zhang, Z. Hua, W. Cao, W. Feng, Z. Liu // Oncol Rep. 2007. — 17(4). — P. 829−833.
  116. Cao, W. High-level SLP-2 expression and HER-2/neu protein expression are associated with decreased breast cancer patient survival / W. Cao, B. Zhang, Y. Liu, H. Li, S. Zhang, L. Fu // Am J Clin Pathol. 2007. — 128(3). — P. 430−436.
  117. Cao, W. SLP-2 overexpression could serve as a prognostic factor in node positive and HER2 negative breast cancer / W. Cao, B. Zhang, J. Li, Y. Liu, Z. Liu, B. Sun // Pathology. 2011. — 43(7). — P. 713−718.
  118. , К. А. Координированное изменение экспрессии кавеолина-1 и других рафт-образующих белков в опухолевых клетках человека: Дис. канд. биол. наук: 14.00.06 / К. А. Архипова. Москва, 2010. — 64−73 с.
  119. Stuermer, С. A. The reggie/flotillin connection to growth / С. A. Stuermer // Trends Cell Biol. 2010. — 20(1). — P. 6−13.
  120. Wei, J. p53 Family: Role of Protein Isoforms in Human Cancer / J. Wei, E.
  121. Zaika, A. Zaika // J Nucleic Acids. 2012. — 2012. — P. 687 359.144
  122. Feng, Z. p53 regulation of the IGF-1 /AKT/mTOR pathways and the endosomal compartment / Z. Feng // Cold Spring Harb Perspect Biol. 2010. — 2(2). -P. 1 057.
  123. Yu, X. The regulation of the endosomal compartment by p53 the tumor suppressor gene / X. Yu, T. Riley, A. J. Levine // FEBS J. 2009. — 276(8). — P. 2201−2212.
  124. Sasaki, Y. Identification of flotillin-2, a major protein on lipid rafts, as a novel target of p53 family members / Y. Sasaki, Y. Oshima, R. Koyama, R. Maruyama, H. Akashi, H. Mita // Mol Cancer Res. 2008. — 6(3). — P. 395−406.
  125. Duffy, M. J. The urokinase plasminogen activator system: role in malignancy / M. J. Duffy // Curr Pharm Des. 2004. — 10(1). — P. 39−49.
  126. Hanahan, D. Hallmarks of cancer: the next generation / D. Hanahan, R. A. Weinberg Cell. 2011. — 144(5). — P. 646−674.
  127. Garces, C. A. Vascular endothelial growth factor receptor-3 and focal adhesion kinase bind and suppress apoptosis in breast cancer cells / C. A. Garces, E. V. Kurenova, V. M. Golubovskaya, W. G. Cance // Cancer Res. 2006. — 66(3). -P. 1446−1454.
  128. Mitra, S. K. Focal adhesion kinase: in command and control of cell motility / S. K. Mitra, D. A. Hanson, D. D. Schlaepfer // Nat Rev Mol Cell Biol. 2005. -6(1).-P. 56−68.
  129. Calalb, M. B. Tyrosine phosphorylation of focal adhesion kinase at sites in the catalytic domain regulates kinase activity: a role for Src family kinases / M. B. Calalb, T. R. Polte, S. K. Flanks // Mol Cell Biol. 1995. — 15(2). — P. 954−963.
  130. Harris, S. L. The p53 pathway: positive and negative feedback loops / S. L. Harris, A. J. Levine // Oncogene. 2005. — 24(17). — P. 2899−2908.
  131. Matsuoka, M. Phosphorylation of p53 protein in A549 human pulmonary epithelial cells exposed to asbestos fibers / M. Matsuoka, H. Igisu, Y. Morimoto // Environ Health Perspect. 2003. — 111(4). — P. 509−512.
  132. Malumbres, M. To cycle or not to cycle: a critical decision in cancer / M.
  133. Barbacid // Nat Rev Cancer. 2001. — 1(3). — P. 222−231.145
  134. Fernow, I. Reggie-1 and reggie-2 localize in non-caveolar rafts in epithelial cells: cellular localization is not dependent on the expression of caveolin proteins / I. Fernow, A. Icking, R. Tikkanen // Eur J Cell Biol. 2007. — 86(6). — P. 345−352.
  135. Frame, M. C. The FERM domain: organizing the structure and function of FAK / H. Patel, B. Serrels, D. Lietha, M. J. Eck // Nat Rev Mol Cell Biol. 2010. -11(11). — P. 802−814.
  136. Gupta, P. B. Cancer stem cells: mirage or reality? / P. B. Gupta, C. L. Chaffer, R. A. Weinberg // Nat Med. 2009. — 15(9). — P. 1010−1012.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!