Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Изыскание питательной среды и оптимизация условий культивирования сальмонелл

Диссертация: Изыскание питательной среды и оптимизация условий культивирования сальмонелл
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

По интенсивности роста в синтетических средах с отдельными аминокислотами выявлены штаммовые отличия. Рост Salmonella cholerae suis ТС-177 значительно усиливали цистин, аспарагиновая кислота, аспарагин, фенилаланин, триптофан, аланин, глицин, серин, норвалин, цистеин, норлейцин, треонин и гистидин (опт. пл. 0,40−0,65 ед.). У Salmonella typhimurium шт. 371 наиболее интенсивный рост отмечался… Читать ещё >

Изыскание питательной среды и оптимизация условий культивирования сальмонелл (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • 1. Введени е
  • 2. Обзор литературы
    • 2. 1. Систематика сальмонелл, культурально-морфологические, биохимические и антигенные свойства возбудителей сальмонеллеза сельскохозяйственных животных
    • 2. 2. Питательные потребности сальмонелл и питательные среды для их культивирования
    • 2. 3. Современные способы культивирования микроорганизмов
  • 3. Собственные исследования
    • 3. 1. Материал и методы исследования
    • 3. 2. Результаты исследований
      • 3. 2. 1. Изучение культурально-морфологических, серологических и биохимических свойств сальмонелл
      • 3. 2. 2. Определение питательной потребности сальмонелл
      • 3. 2. 3. Физико-химические показатели основного ферментативного гидролизата плацентарно-эмбриональной массы (ФМПГ)
      • 3. 2. 4. Сравнительная оценка эффективности различных питательных сред
      • 3. 2. 5. Изучение биологических свойств сальмонелл при культивировании на питательных средах, приготовленных из ФМПГ
      • 3. 2. 6. Влияние посевной дозы, аэрации и перемешивания на рост сальмонелл при культивировании в ФМПГ
      • 3. 2. 7. Определение экономической эффективности питательной среды, приготовленной из ФМПГ
  • 4. Обсуждение результатов исследований
  • 5. Выводы
  • 6. Практические предложения

Актуальность темы

В условиях, рыночной экономики обеспечение сохранности и повышение продуктивности животных, наряду с другими факторами, имеет важное значение в производстве конкурентоспособной и высококачественной продукции животноводства.

В связи с этим недопущение возникновения и распространения инфекционных заболеваний среди сельскохозяйственных животных является актуальной задачей. Среди инфекционных болезней молодняка большой удельный вес занимает сальмонеллез, который распространен повсеместно, наносит большой ущерб животноводству и представляет угрозу здоровью людей (Б.Ю. Шустер, Ю. А. Малахов, 1981; Б. Ю. Шустер, 1987; Ф. С. Сибгатуллин с соавт., 1994; A.M. Алимов, 1998; A.B. Иванов, М. А. Сметанин, 2000).

В основе борьбы с сальмонеллезом наряду с общими ветеринарно-санитарными и диагностическими мероприятиями, большую роль играет специфическая профилактика. Для специфической профилактики сальмонеллеза сельскохозяйственных животных широкое применение получили живые и инактивированные вакцины (Б.Ю. Шустер, A.A. Бывальцев, 1974; К. Linde, 1980; A.M. Алимов, 1998; P.M. Ахмадеев, Х. Р. Ахмадеева, 2000). Их производство сопряжено использованием питательных сред с целью получения бактериальной массы.

В нашей стране в качестве основы для приготовления питательных сред применяют мышечную ткань (В.И. Заерко, 1996; А. З. Равилов с соавт., 1999), которая является дорогим и ценным пищевым продуктом. Поэтому изыскание более дешевых белковых источников для приготовления бактериальных питательных сред давно привлекает внимание исследователей. С этой целью рекомендованы белки молока (A.M. Алимов, O.A. Котылев, 1975; Д. В. Абрамов, 1990), казеиново-дрожжевые и кровяно-дрожжевые лизаты (JI.A. Коротеева, 1984; Н. Г. Шептун, 1989), куриные эмбрионы (В.И. Заерко, 1996), раститель.

— 5 ные белки, отходы рыбной промышленности (Л.Я. Телишевская, 2000), плацента человека, плацентарно-эмбриональная масса крупного рогатого скота (J1.A. Дерябина, 1971; С. Х. Хаертынов, В. А. Никитина, 1991) и т. д.

Некоторые из них широко применяются в производстве биопрепаратов и лабораторной работе. В связи с расширением производства биологических препаратов потребность в питательных средах растет. Поэтому необходимость поиска новых и стандартизация существующих питательных сред остается актуальной задачей.

Вместе с тем, сохраняется необходимость усовершенствования технологии культивирования сальмонелл для получения бактериальной массы при изготовлении диагностикумов и вакцин, что вызвано с растущими потребностями животноводства в биологических препаратах, вследствии широкого распространения сальмонеллеза среди сельскохозяйственных животных. В этом аспекте перспективным является культивирование микроорганизмов в ферментерах при аэрации и перемешивании (A.M. Алимов, 1972; B.C. Русалеев, В. Ю. Кулаков, 1995; В. И. Ситьков с соавт., 2000; В. И. Заерко, 2000; A.M. Алимов с соавт., 2000; Т. Г. Колотилова с соавт., 2000), которое обеспечивает наибольший выход бактериальной массы, обладающей высокими антигенными и иммуно-генными свойствами. Однако вопрос оптимизации культивирования сальмонелл, особенно при использовании новых более дешевых питательных сред, остается недостаточно разработанным.

Цель и задачи исследований. Целью работы явилось изучение питательных потребностей сальмонелл, изыскание непищевого белкового источника и разработка на его основе технологии изготовления питательной среды и усовершенствование условий культивирования сальмонелл.

Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить биологические свойства разных штаммов сальмонелл и определить их питательные потребности.

— 62. Разработать технологию приготовления питательной среды на основе ферментативного маточно-плацентарного гидролизата.

3. Оценить пригодность питательной среды, приготовленной из ФМПГ, для стационарного и глубинного культивирования сальмонелл.

4. Оптимизировать условия глубинного культивирования сальмонелл.

Научная новизна. Впервые на основании определения питательных потребностей сальмонелл разработана технология изготовления питательной среды на основе ферментативного маточно-плацентарного гидролизата и доказана ее пригодность для наработки бактериальной массы сальмонелл методом глубинного культивирования.

Установлено, что сальмонеллы для своего роста в синтетической среде в качестве органического азотистого источника могут использовать каждую из 19 белковых аминокислот и их рост в синтетической среде значительно стимулируют цистин, гистидин, фенилаланин, триптофан, аланин, глицин, серин, аспа-рагиновая и глутаминовая кислоты. В отношении отдельных аминокислот имеются штаммовые различия.

При культивировании вакцинного и вирулентных штаммов сальмонелл в питательных средах из ферментативного маточно-плацентарного гидролизата их основные биологические свойства остаются стабильными. Оптимизированы условия глубинного культивирования вакцинного штамма сальмонелл ТС-177 в среде из ФМПГ.

Практическая значимость. Разработана технология приготовления питательной среды из отходов мясной промышленности — маточно-плацентарной массы, которая рекомендуется для использования при производстве диагности-кумов, живых и инактивированных вакцин против сальмонеллеза. Данная питательная среда в 4,8−9,4 раза дешевле традиционных питательных сред, изготавливаемых с использованием мышечной ткани.

Разработана «Методическая рекомендация по изготовлению питательной среды из гидролизата маточно-плацентарной массы крупного рогатого скота.

— 7 для культивирования сальмонелл", которые одобрены научно-методическим советом (протокол № 8 от 19 декабря 2001 г.) и утверждены директором ВНИВИ (27 декабря 2001 г.). Оптимизированы условия глубинного культивирования сальмонелл при изготовлении живой вакцины против сальмонеллеза. Для наработки бактериальной массы целесообразнее глубинное культивирование сальмонелл с аэрацией, перемешиванием и периодической коррекцией рН среды.

Апробация работы. Основные положения работы были доложены и обсуждены на:

1. Научных сессиях ВНИВИ в 1998;2001 гг.;

2. Республиканской научно-производственной конференции «Актуальные проблемы животноводства в ветеринарии» (Казань, май, 1999);

3. Всероссийской конференции молодых ученых «Молодые ученые — агропромышленному комплексу» (Казань, март, 2000);

4. Международной научной конференции, посвященной 70-летию образования зооинженерного факультета КГАВМ (Казань, май, 2000);

5. Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 30-летию института (Щелково, 8−9 июня 2000);

6. Международной научной конференции по проблемам ветеринарии и зоотехнии (Казань, май-июнь, 2001);

7. Международной научной конференции «Научные основы производства ветеринарных и биологических препаратов» (Щелково, май, 2001 г.).

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:

— Питательные потребности различных штаммов сальмонелл и их биологические свойства;

— Эффективность питательной среды, приготовленной из ферментативного маточно-плацентарного гидролизата, для культивирования сальмонелл;

— 8- Оптимизация условий глубинного культивирования сальмонелл с использованием питательной среды из ферментативного маточно-плацентарного гидролизата.

Публикация. По материалам диссертации опубликовано 7 работ в материалах международных, всероссийских и республиканских научных конференций.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 115 стр., состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений и приложения, списка литературы. Работа иллюстрирована 20 таблицами и 1 рисунком. Список использованной литературы включает 206 источников, из них 60 иностранных.

— 85 -5. Выводы.

1. На основании изучения роста сальмонелл в синтетических средах установлено, что исследуемые штаммы в качестве органического источника азота могут использовать каждую из 19 белковых аминокислот. Однако наиболее значительно стимулировали рост сальмонелл цистин, гистидин, фенилаланин, триптофан, аланин, глицин, серин, аспарагин, аспаргиновая и глутаминовая кислоты.

2. По интенсивности роста в синтетических средах с отдельными аминокислотами выявлены штаммовые отличия. Рост Salmonella cholerae suis ТС-177 значительно усиливали цистин, аспарагиновая кислота, аспарагин, фенилаланин, триптофан, аланин, глицин, серин, норвалин, цистеин, норлейцин, треонин и гистидин (опт. пл. 0,40−0,65 ед.). У Salmonella typhimurium шт. 371 наиболее интенсивный рост отмечался в присутствии цистеина, цистина, гистиди-на, аспарагина, аспарагиновой кислоты, триптофана, аланина, глицина, серина (опт. плотность составляла 0,42−0,47 ед.). Для Salmonella enteritidis характерна более высокая питательная потребность по сравнению с Salmonella cholerae suis и Salmonella typhimurium, о чем свидетельствуют данные по выходу бактериальной массы при культивировании их в одинаковых условиях.

3. На основании сравнительного изучения роста сальмонелл на разных питательных средах разработана технология изготовления питательной среды на основе ферментативного маточно-плацентарного гидролизата, доказана ее пригодность для культивирования сальмонелл и наработки бактериальной массы методом глубинного культивирования.

4. Многократное пассирование сальмонелл на средах, приготовленных из ферментативного маточно-плацентарного гидролизата и глубинное культивирование в них, не оказывает существенного влияния на культурально-морфологические, биохимические, антигенные и иммуногенные свойства сальмонелл.

— 865. Наибольший выход бактериальной массы при глубинном культивировании вакцинного штамма сальмонелл ТС-177 достигается при аэрации воздухом — 2 л/мин на 1 л питательной среды и перемешивании со скоростью 100 об/мин с периодическим подравниванием рН и добавлением глюкозы. При этом наиболее оптимальной является посевная доза 100 млн. м.к. на 1 см" 5 питательной среды из культуры, находящейся в экспоненциальной фазе роста. В этих условиях культивирования максимальное число живых клеток к 14 часам составило 43,7±2,9 млрд. м.к./см .

6. Вакцинные препараты, изготовленные методом глубинного культивирования в среде из ФМПГ, обладали высокой иммуногенностью (90,0%) и по этому признаку были сходны с культурами, полученными в бульоне Хоттингера (86,6%).

7. Использование питательной среды на основе ФМПГ в 4,8−9,4 раза экономичнее по сравнению с бульоном Хоттингера и мясопептонной средой.

— 87.

6. Практические предложения.

1. Для первичного выделения, пересевов и наработки бактериальной массы сальмонелл рекомендуется дешевая питательная среда на основе ферментативного маточно-плацентарного гидролизата, приготовленная согласно «Методической рекомендации по изготовлению питательной среды из ферментативного, маточно-плацентарного гидролизата крупного рогатого скота для культивирования сальмонелл» (одобрены научно-методическим советом ВНИВИ и утверждены директором института, 2001 г.).

Показать весь текст

Список литературы

  1. Д.В. Технология гидролизатов сывоточных белков молока для ветеринарных целей, их физико-химические и биологические свойства. Автореферат. дисс. канд. биол. наук. -М. -1990, -24 с.
  2. В.А., Булганов Н. М., Зверева Г. В., Субботина Л. Г., Шипилов B.C. Практикум по акушерству гинекологии и искусственному осеменению с.-х. животных -М.: Колос, -1968. -295 с.
  3. Е.К. Культурально-морфологические свойства бруцелл шт.82 при периодическом и хемостатном методе культивирования. //Материалы международной конференции, посвященной 70-летию образования зооинженер-ного факультета. -Казань, -2000, С. 284.
  4. A.M. Изменение аминокислотного состава питательной среды при глубинном культивировании вакцинного штамма листерий АУФ // Ученые записки КВИ, -Казань, -1972, -т. 113, -с. 93−97.
  5. A.M. Изучение аминокислотного обмена и иммунохимии листерий различной вирулентности. Дисс. канд.биол.наук. Казань, 1974, -202 с.
  6. A.M., Котылев O.A. Сравнительная оценка питательных сред при культивировании вакцин, штамма листерий АУФ. -Казань, -1991, 40 с.
  7. A.M., Сазонова Т. Я. Эффективность различных питатаельных сред для культивирования бруцелл. // Актуальные вопросы ветеринарии и зоотехнии. Тез. докл. Респуб. научно-производственной конф. -Казань, 1992,-с. 41.
  8. Т.В., Шапиро Н. И. Новая питательная среда из горохового ав-толизата для выращивания дизентерийных бактерий //Материалы по обменуопытом. М. -1954, -№ 1. — С .44.
  9. Ю.Аткинсон Б. Биохимические реакторы. М.: Пищ. пром., -1979, -280 с.
  10. A.M. Сальмонеллезы молодняка. М.: Колос. -1983. -256 с.
  11. И.П., Воробьев A.A. Статистические методы в микробиологических исследованиях. -Ленинград, -1962. 250с.
  12. И.А., Третьяков А. Д. Руководство по общей эпизоотологии. М.: Колос, -1979, — 424 с.
  13. И.А. Патология и физиология микробов. Усовершенствование технологии культивирования // Микробиология. -1982. № 12. -С. 28−33.
  14. И.А. Оптимизация культивирования микроорганизмов в иммуно-биотехнологии //Микробиология, 1989. № 5, — С. 90−96.
  15. И.А., Дубинина Г. П. Морфологические особенности в сопоставлении с физиолого-биохимическими закономерностями жизнедеятельности микроорганизмов при периодическом и непрерывном культивировании // Микробиология. 1974. -№ 7, — С. 3−8.
  16. И.А., Боровкова В. М., Запорожцев JI.H. Классификация процессов культивирования микроорганизмов //Тр. Моск. науч. -исслед. ин-та вакцин и сывороток им. Мечникова, -М. -1981. -С.5−17.
  17. H.A., Боровкова В. М., Кузьмин С. Н. Патология и физиология микробов. Сообщение 1. Общие вопросы //Микробиология. 1981. -№ 9. -С.14−19.
  18. Краткий определитель бактерий Берги. Под ред. Г. А. Заварзина Пер. с англ. М.Ш.Тер-Казарьяна. М.: Мир, 1980, — 496 с.
  19. М.О. Справочник по микробиологическим методам исследования. -М.: Медицина. -1973. -453с.
  20. В.А., Мармалевская Л. Я., Кузьмина А. Н. Метод концентрации и очистки анатоксинов Perfrinqens, приготовленных на казеиновых средах //Материалы по обмену опытом. М. -1960. — 2/58. -С. 68−75.
  21. И.Н., Носова Л. С. Некоторые особенности аминокислотного обмена энтеробактерий. //В сб. «Биохимия микробов». -Горький, -298 с.
  22. Р.И., Алферова В. Б. М-концентрация бактерий Флекснера в процессе глубинного выращивания //Микробиология и эпидемиология бактериальных и вирусных болезней в Узбекистане, -Ташкент, 1959. С .73−76.
  23. В.А., Лемешко В. В., Белоус A.M. Нарушение структуры мембран митохондрий при воздействии замораживания-оттаивания //Криобиология и криомедицина. Харьков, -1977. -вып.З. — С.41−43.
  24. Н.Ф., Быкова С. А., Зямских Н. В. Специфические фаги сальмонелл как средство индикации обсемененности внешней среды. //Иммунология и биотехнология. Межвузовский сборник НИИ эпидемиологии и микробиологии, -Горький. -1989. -С. 59.-91
  25. A.C. Материалы научно-производственной конференции. Влияние экологических факторов на биологические свойства сальмонелл. Калининград,-1998.-280с.
  26. Д.Д., Корпуть И. М., Якубовский М. В. и др. Справочник по болезням сельскохозяйственных животных. 2-ое изд., перераб. и доп. М.: Урожай, -1990, — С. 74−352.
  27. И.Ш. Предпосылки комплексной оценки физиологического состояния бактерий и их популяций //Микробиологии, 1984. -№ 4, — С.3−8.
  28. Д.С., Сидоров Е. А., Нестеров Б. В. Приборы для культивирования микроорганизмов. //В сб. «Биофиз. микробов и биоинженерия». Л., -1976. -С. 101−108.
  29. H.H. Использование протеолитических ферментов плесневых грибов в производстве питательных сред для глубинного выращивания // Научные основы производства вакцин и сывороток. -М., -1955. С. 83−87.
  30. H.H. Новые питательные среды и их применение в производстве бактериальных препаратов //Проблемы эпидемиологии и микробиологии. -М., 1959.-№ 2,-С. 141−152.
  31. У.Е., Кристапсонс М. Ж., Былинкина Е. С. Культивирование микроорганизмов. -М.: Пищевая промышленность, -1980, -231 с.
  32. В.Е., Виноградова И. Н., Палкина H.A. Получение анатоксина С1. ocdematiens на питательной среде из гидролизата казеина и изучение его антигенных иммуногенных свойств //Микробиология. -1960. -№ 2. -С. 108−114.
  33. Е.К., Плотникова В. А. Глубинный способ выращивания бактериальных культур для получения биопрепаратов //Труды н.-контр, ин-та ветеринарных препаратов. -М., 1954. -№ 3,-С.241−250.
  34. A.A. Проблемы физико-химической биологии и биотехнологии в микробиологии и иммунологии //Микробиологии, -1982, -№ 11. С. 3−8.
  35. И.М. Казеиновая среда для дизентерийного бактериофага //Сб. тр. Горьковского ин-та эпидемиол. и гигиены. -Горький, 1959. -№ 4, — С. 125 128.
  36. Г. В., Лебедева З. И. Антигенные и иммуногенные свойства стафилококковых анатоксинов, приготовленных на мясных и казеиновых средах//Микробиология, 1958. -№ 9. С.16−20.
  37. Г. В. Комбинированные препараты для активной профилактики раневых инфекций //Проблемы эпидемиол. и микробиол. М., 1959. -№ 2. -С. 3−13.
  38. В.Д., Яковлева A.B. Применение синтетических сред для приготовления кишечных вакцин //Вопросы активной иммунизации против кишечной инфекции. М., 1955. — С. 9−20.
  39. Р. Хранение микроорганизмов //Методы общей бактериологии. Под ред. Ф. Герхардта и др.: Пер. с англ. М.: Мир, 1983. — т. 1. — С. 512−534.
  40. М.П., Червяков М. П., Старобинец Г. М. Среды для получения сильного столбнячного токсина //Тр.Мечниковского института, 1935. т.1. -№ 2. — С.379−380.
  41. И.В., Килессо В. А., Киселева Б. С. и др. Энтеробактерии: (Руководство для врачей). М.: Медицина, 1985. -321с.
  42. Л.В. Справочник по санитарной микробиологии. -Кишинев: Картя Молдовеняскэ, -1981. -206 с.
  43. И.М., Жданова Л. Г., Нисилева В. Ф. и др. Кинетика процессов периодического культивирования в зависимости от физиологического состояния посевной культуры //Микробиология, -1986. -№ 2. -С. 3−7.
  44. Т.А., Ременцова М. М., Меньшиков Л. Ф., Ишанова Р. Ж. Испытание бета-глобулиновых сред для выращивания бруцелл //Тр. института эпидемиол. и инфекц. болезней М. З. Казах. ССР. -1978, -т. 15, -С. 59−65.-93
  45. Е.М. Основные процессы обмена веществ у микробов. -М.: Медгиз. -1961. -150с.
  46. Н.С., Лысенко C.B. Действие дегидратации на микроорганизмы //Науч. докл. высш. шк. Биол. науки, -1987. -№ 8, — С.50−62.
  47. JI.A. Плацента человека как перспективный источник для получения белковых гидролизатов. Автореф. дис. канд. мед. наук. -Рига, -1971, -22 с.
  48. Э., Мельник Д. Л., Эйдельберг Э. А. Руководство по медицинской микробиологии. Пер. с англ. М.: Медицина, -1982. -С. 366.
  49. К.Е. Научно-проблематические основы технологии изготовления сухих биопрепаратов //Сб. тр.межинст.науч. конф. -290с.
  50. Г. П., Баснакьян И. А., Волкова Н. В. Особенности морфологии и инфраструктуры тифозных бактерий в условиях лимита и избытка глюкозы //Микробиология, -1977. -№ 8. С. 20−26.
  51. Н.В. Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов //Экспресс-информ. Всесоюз. науч,-иссл. и техн. ин-та биол.пром., -1978. вып. 7. стр. 3.
  52. A.B., Сметанин М. А. Ветеринария на службе человека. -Казань. -2000, 53с.
  53. В.Н., Угодчиков Г. А. Клеточный цикл микроорганизмов и гетерогенность их популяций. Киев: Наукова Думка, -1984. -157с.
  54. A.A., Жильцов Г. К. Возможность обнаружения «нуклеоидов» в клетках бактерий в зависимости от возраста их культур //Микробиология, 1965. т. 34. — С. 305−312.
  55. А. М., Жуков В. Н., Улумнев А. А. Сублимационная сушка в биологической промышленности //Обзор информ. ОНТИТЭИ микробиопром. Сер. 6,-1975. С. 75.
  56. В.В. Токсичность и иммуногенность производственных штаммов Salmonella typhimurium, выращенных в реакторе// Тр. Всесоюз. гос. науч,-контр. ин-та ветпрепаратов, -1978. т.27. -С. 57−60.
  57. Н.И. Экспериментальное обоснование технологии производства кишечных вакцин, приготовленных из бактерий, выращенных на синтетических средах в глубинных культурах с аэрацией. Дис. док. мед. наук М., 1958. -209с.
  58. Н.И., Кузьмина А. Г. Динамика потребления питательных веществ бактериями кишечной группы в процессе роста на синтетической среде в условиях аэрации //Вопросы активной иммунизации против кишечных инфекций. М., -1955. — С.41−57.
  59. Н.И., Яковлева А. В. Закономерности размножения бактерий ки-шечно-тифозной группы на синтетических средах в глубинных культурах с аэрацией //Микробиология, 1960. -№ 6, -С. 31−34.
  60. Н.М., Госманов Р. Г. Ветеринарная микробиология и иммунология.- Омск.: Изд-во ОМГАУ, -1996. — 552 с.
  61. Я.Е. Ветеринарная микробиология. М.: Колос, 1965. — 432 с.
  62. Коротеева J1.A. Питательные среды на основе ферментативного козеинова дрожжевого гидролизата (ФКДГ) для культивирования вакцинных штаммов колибактерий и пастерелл. Автореф. дисс.. канд. биол. наук. -М.: -1984, -22 с.
  63. А. Б., Бритова C.B. Применение полимеразной цепной реакции для обнаружения сальмонелл в кормах и продуктах животноводства. //Материалы научно-производственной конференции. Калининград, -1998.- С. 97−98.
  64. А. С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. -М.: Медицина, -1978. -240с.
  65. Н.Е. Новые методы выращивания микроорганизмов и изготовление бактериальных препаратов. Автореф.дис. докт., -М., -1950. -18с.
  66. Ю.И., Юдицкая Н. М., Герок Г. И., Голованова М. А. Оценка эффективности элективно-дифференциальных сред и их сочитаний для выделения шигелл и сальмонелл //Лаб. дело, -1986, -№ 10, -С. 66−69.
  67. Лозицкая Н. Д. Методы консервации бактерий Pseudomonas denitrificans
  68. Конф. мол. ученых: Тез. докл. Рига, 1987. — С. 138.
  69. Ю.П. Бактериологические методы острых кишечных инфекций //Военно-мед.ж., 1982. -№ 8, — С. 31−35.
  70. К.И. Ботулизм. М.: Медгиз, 1959. -150с.
  71. Г. М., Левина Л. А., Рагинская В. П. и др. Оптимизация процесса культивирования бактерий рода Провиденция и изучение антигенной активности культур //Тр. Моск. науч.-исслед. ин-та вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова, 1981. С.25−39.
  72. В.А., Баснакьян И. А., Ражникова Т. К. и др. Патология и физиология микробов. Сообщение 3. Критерии оценки функциональных состояний/Микробиология, 1984. -№ 1, С. 42−46.
  73. Методическое руководство по физико-химическому методу контроля ингредиентов, питательных средств и биопрепаратов. -М. -1970, -С. 11−13.
  74. Методическое руководство по лабораторной оценке качества бактерийных и вирусных препаратов. -М. ГКИ им. Тарасевича. -1972.
  75. Методические рекомендации по физико-химическому и биологичскому контролю белковых гидролизатов для бактериологических питательных сред. ВНИ и ТИБП, ВГНКИ. -М. -1983, -26 с.
  76. А. С., Варгина А. К. Усвоение микробами кишечной группы питательных веществ в процессе выращивания с аэрацией и накопление ими антигена//Поливакцины. М., 1956. -С.294−310.
  77. Е.Е., Звягин И. В. Замораживание и высушивание биологических препаратов. М.: Колос, -1971. — 343 с.
  78. Н.С., Петухов В. Г., Осипова Н. В. и др.//Тр.Моск. науч.-исслед. ин-та вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова, -1978. -Вып.4. С.213−217.
  79. Л.Г. Разработка селективной среды для выделения сальмонелл //В кн.: Вопр. физиол. метаболизма и идентификации микроорганизмов. -М. -1987, -С.74.75.
  80. В.Г. Проблема вирулентности бактерий. -Л.: Медицина, Ленин-97 градское отделение. -1967, -263 с.
  81. C.B., Утмелидзе О. Г. Влияние возраста культур и концентрации спор дерматофитов на устойчивость к высушиванию //Бюл. Всесоюзн. ин-та эксп. ветеринарии. -1981. Вып. 42. — С.25−26.
  82. В.И., Ющук Сальмонеллез. Руководство по инфекционным болезням. -Москв, «Медицина». -1986, -462 с.
  83. O.A. Испытание стимулятора роста микроорганизмов ТС-1 на выживаемость сальмонелл из культуры патологического материала //В кн.: Диагностика, лечение и профилактика заболевания с.-х. животных. -Ставрополь. гос. с.-х. академия, -1996, -С. 21−24.
  84. Г. И. Опыт освоения глубинного производства вакцин //Сб. трудов Горьковского ин-та эпидемиол. и гигены. -Горький. -1959. -№ 3, С. З-16.
  85. Н.С., Белоус A.M., Цветков Ц. Д. Теория и практика криогенного и сублимационного консервирования.-Киев: Наукова Думка, -1984. -264 с.
  86. И.Л. Теория и практика непрерывного культивирования микроорганизмов //Микробиология. Итоги науки и техники. -М. -1975, -т. 4, -209 с.
  87. И.Л. Об изучении физиологического состояния исследуемых микроорганизмов //Микробиология. -1980. -т. 49, -вып. 4. -С.634−638.
  88. И.Л. Культивирование микроорганизмов //Микробиология. Итоги науки и техники. -М. -1981, -т. 11, -214 с.
  89. А.З., Гильмутдинов Р. Я., Хусаинов М. Ш. Микробиологические среды. Казань: ФЭН, 1999. — 398 с.
  90. H.A. Испытание политропной среды для дифференциации эн-теробактерий //Ветеринария, 1984. -№ 2. С.76−77.
  91. Е.Л. и др. Биосинтез аминокислот микроорганизмами. -М.: Наука.-981 968, -296 с.
  92. П.Н., Хафизов Д. Ф., Игнаткин В. И. Влияние температуры хранения и замораживания-высушивания на выживаемость микроорганизмов в суспензиях//Тр. Всесоюз. науч.-иссл. ин-та ветеринарной санитарии, -1982. -С .45−48.
  93. B.C., Кулаков В. Ю. Рецептура питательной среды для сальмонелл //Тез. докл. Всерос. научно-практической конф. «Вирусные болезни с,-х. животных». -Владимир. -1995, -С. 224.
  94. P.C., Попов В. Г. Биотехнология перспективы развития //Под ред. А. А. Баева /Биотехнология. — М., -1984. — С. 13−20.
  95. Ф.С., Сафин М.А, Хисамутдинов А. Г. Болезни животных передающиеся от животных человеку. -Казань.: Татарское книжное издательство. -1994, -107 с.
  96. М.А., Скородумов Д. И., Федотов В. Б. Определитель зоопато-генных микроорганизмов. -М.: Колос, -1995.
  97. Лаб. дело, -1982. -№ И. С. 685−687.
  98. В.Н. Итоги науки и техники. Аппаратура для культуральнотех-нических процессов в микробиологии. Серия микробиология. Том 14. Под ред. И. Л. Работновой. М., 1984. -305с.
  99. И.Ф. Влияние условий культивирования на размножение брюшнотифозной палочки //Вопросы эпидемиологии и микробиологии кишечных инфекций. -Киев, -1960. С .80−82.
  100. Телишевская Л. Я Белковые гидролизаты. -М.: -2000. -295с.
  101. Тец В.В., Каминский Г. Д. Фазовые изменения в периодических бактериальных культурах //Микробиология. 1984. -№ 8. -С. 24−30.
  102. В.Д. Микробиология -М.: Медицина. -1973, -432 с120.. Тимаков В. Д., Гольдфарб Д. М. Основы экспериментальной медицинской микробиологии. М.: Медгиз, -1968.
  103. К.Н. Важнейшие инфекционные болезни, общие для животных и человека. Ленинград: Медицина, -1979. — С.219.
  104. Торанюк 3. Е. Производство холерной вакцины глубинным методом. Ав-тореф.дис. .канд.мед.наук. Горький, -1959, -18 с.
  105. Г. В., Никулнинкова Н. С., Шапиро Н. И., Элькин С. В. Усовершенствование методики глубинного культивирования бактерий кишечной группы //Материалы по обмену опытом. -М., -1960, -№ 2, -57 с.
  106. М.В., Никитина Т. Н., Шерман Ф. Б. Выживаемость и диагностические свойства дрожжей после лиофилизации и хранения // Изв. АН СССР. Сер.биол., -1976. -№ 4, С.611−617.
  107. С.Х., Никитина В. А. Новые бактериологические и питательные среды для культивирования микроорганизмов. -Казань, -1991, -22 с.
  108. С.Х., Никитина В. А. Новые бактериологические и питательные среды из гидролизатов белок содержащих отходов мясокомбинатов.-100
  109. Ветеринария, -1991, -IV, -63 с.
  110. Н.З., Котылев O.A., Алимов A.M. Изучение аминокислотной потребности листерий при глубинном культивировании // Мат. Всесоюзной конференции, посвященной 100-летию Казанского ордена Ленина ветеринарного института, -Казань, 1974, том № 113, -190с.
  111. .П. Строение и физиологические изменения половой системы само домашних животных. -Симферополь, — 1955, -53 с.
  112. М.А., Закардонец B.C. Анализ мясо-костной муки на сальмонеллы. //Ветеринария. -1979, -№ 4.
  113. Н.Г. Биохимические обоснования к получению и использованию гидролизатов фибрина и отходов производства препаратов и иммуноглобулинов. Автореф. дисс.. канд. биол. наук. -Воронеж, -1989, -22 с.
  114. Г. Общая микробиология. Перевод с немецкого Л. В. Алексеевой, Г. А. Куреллы и Н. Ю. Несытовой под редакцией С. Н. Кондратьевой. -М.: Мир, — 101 -1987.- 567 с.
  115. Шур И. В. Заболевание сальмонеллезной этиологии. -М.: Медицина, -1970
  116. .Ю. Сальмонеллезы у животных. //В кн.: Инфекционные болезни животных. Справочник. -М.: ВО «Агропромиздат», -1987. 195с.
  117. .Ю., Малахов Ю. А., Соловьева B.C. Сальмонеллезы и колибак-териоз //Ветеринарные препараты. М., -1981. -С .216−236.
  118. .Ю., Лиходед В. Г., Сергеев В. В. и др. Трансдукционный анализ вирулентности ревертантов стрептомицинзависимых мутантов //Микробиология. 1971. -№ 12. — С. 58−62.
  119. .Ю., Малахов Ю. А. Штамм № 6 для использования вакцины против сальмонеллеза телят //Авторское свидетельство СССР № 1 197 186, -1984.
  120. .Ю., Сергеев В. В., Елкина С. И. Получение стрептомицинзависимых мутантов сальмонелл методом трансдукции //Микробиология. 1970. — № 9, -С. 83−84.
  121. .Ю., Лиходед В.Г, Экспериментальное изучение стабильности авирулентных свойств и иммуногенности супрессорных ревертантов стрептомицинзависимых мутантов сальмонелл //Микробиология. 1970, -№ 1. — С. 39−44.
  122. .Ю., Сергеев В. В., Елкина С. И. Патогенные и иммуногенные свойства, стрептомицинзависимых мутантов //Микробиология. 1970 — № 1.- 102 -С.144−145.
  123. .Ю., Сергеев В. В., Елкина С. Л. и др. Вирулентные свойства ре-вертантов стрептомицинзависимых мутантов сальмонелл //Микробиология. -1971,-№ 7, -С. 29−33,
  124. В.П. Иммуногенетика -М.: Медицина.-1971, 335с.
  125. Anderson J.О., Nath Т., Harner E.G. Effects of freezepreservation on some pollen enzyms. Freezing and freezedrying stresses // Cryobiol. -1978. -Vol.15. -N4. -p.469−477
  126. Bager F. Petersen J. Sensitivity and specifity of different methods for the isolation of salmonella from pigs // Acta, Vet. Scand., 1991, V.32, N4, p.473−481.
  127. Barach J.T., Enders G.L., Kamara B.J., Improved stability of freeze-dried cultures. Патент 259 739 (ЕР). МХИ C12Nl/04/(USA) Заявл. 31.08.87- Опубл. 16.03.88. Bull. 88/11−1 ОС.
  128. Bartolome R., Xairo M., Olsina M. et al. Nuevo medio de cultivo para 1992 // Enferm. infeec. у microbiol. clin., 1992, c.10, Supl. N2, p.93.
  129. Behrens O.K., Ensminger P.N. Pertussis vaccine preparation // Patent N 2. -CI. 167−78.-USA. -1958.
  130. Bergander E. Verfahren zur Herstellung eines zur Weiterverarbeitung auf Mikrobennaehrboeden geeigneten Hefeextraktes // Patent N 8707. -Kl. 30h. 14. -1954.
  131. Ceddia Т., Giota G., Mancini A. et al. Simplified identification of bacteria belonging to the genus salmonella // Zbl. Bacteriol., Microbiol und Hud., 1987, A266, N3−4, p.438−442.- 103
  132. Chen H., Fraser A., Vamazaki H. Modes of inhibition of Foodborne NonSalmonella Bacteria by Selenite Cystihe Selective Broth //Jnt. J. Food Microbiol., 1994, V.22, N2−3, p.217−222.
  133. Cohen G.N. The Regulation of Cell Metabolism, Hermann Raris. 1968. p.236−239.
  134. Delia S., Lagana P., Milici G., Bella F. Nostre esperienze sulhiso del Rambach Agar in campo umano // Riv. ital. ig., 1993, V.53, N1, p.34−39.
  135. Denis F., Villeval F., Doleans F., Evalution d’un nouveau milieu avec substrat3 chromogenes pour la recherche de sallmonelles dans les corpocultures- de rates milieu. SMID // Rev. fr. lab., 1994, V.23, N27.
  136. De Smedt J., Bolderdijk R., Milas J. Salmonella detection in cocoa and choca-late by motility enrichment on modified semisolid Rappaport Vassibiadis Medium-collaborative study // J. Aoac Jnt., 1994, V.77, N2, p.365−373.
  137. Dicker D.T., Higgins L. Cell cycle changes in the biogant density of exponential-phase cells of Streptococcus faecium // J. Bacteriol. -1987. Vol.169. N3. -p.1200−1204.
  138. Dolezal L, Kapralek F. Physiological characteristics of chemostatically grown Cytobacter freundii as a function of the specific growth rate and type of nutrient limitation// Folia Microbiol. -1976. -Vol.2. -N3. -p. 165.
  139. J.M., Cherry A., Pons M. -N. et al. Estimation de l’etat physiologique des microorganismes dans un bioprocede // APII. -1990, -Vol.23. -N3. -p.211 -220.
  140. Freydiere A., Gille V. Detection of Salmonellae by using Rambach Agar and by a C8 esterase spot test // J. Clin Microbiol., 1991, v.29, p.2357−2359.
  141. Cossens H., Butzler J.-P. Jsolation of campyloboeter spp. from stool specimens with a semisolid medium // J. Clin. Microbiol., 1991, V.29, N11, p.2681.
  142. Habeeb A.F. A study of bacteriological media, the examination of peptides in casamin E 11 Canad. J. Microbiol. -1960. -N6. -p.237−242.
  143. Hine E., Steffen E., Wagner J. New semisolid agar for the detection of motile salmonellas // J.Clin. Microbiol., 1988, V.26, N5, p.875−878.
  144. Hottinger R. Nachpruefung und Kritik der ueblichen Bouillonbereitung // Zbl. -Bakt. -1913. -1. -V.67. -N3. -S. 178−206.
  145. Humbert F., Salvat G., Colin P. et al. Rapid identification of salmonella from poultry meat products by using «Mucap test» // Jnt J. Food. Microbiol., 1989, V.8, N1, p.79−83.
  146. Jensen A.M., Feld N., Nielsen B.B., Schirmer A.L., Madsen E.B. Salmonella dublin infection Оценка результатов программы ликвидации сальмонеллеза в восьми стадах молочных коров (Дания)., s.397−403. Dansk. Veter.-Tidsskr, 1994, Arg.77, N9.
  147. Johansen E. Survival of L. bifidus after freezedrying // Appl. Bact. -1972. Vol. 35. -N3. -p.415−421.
  148. Kucsera C.J., Wong J.C., Eis R.L. Developmen of a chemically altered Pas-teurella multocida vaccinal atrain // Am.J.Vet.Res. -1981. Vol.42. -N8. -p.1389- 105
  149. Kuhn H., Wonde В., Reissbodt R. Evaluation rambach agar for detection of salmonella subspecies I-IV // Appl. Environ. Microbiol., 1994, V.60, N2, p.749−751.
  150. Kussovsky V.K., Veljanov D.K. Investigation into phagocytosis sensitivity of certain salmonellae, depending on the phase development of the culture in vitro // докл. Болг. АН. -1985. -Vol.38. N10. -p.1363−1365.
  151. Larsen S., Vig J.L., Pedersen O.G. Salmonella i en dansk svinebesaetning K проблеме распространения сальмонеллеза среди свиней в Дании. Dansk veter. -Tidsskr, 1994- Arg. 77, N5. -s.215−216.
  152. Le Hir M., Sarhel С., Bourlioux P. Actualite du depista-gebes salmonella en pathologie infectieuse: etude critique et experimentale // Fereill. biol., 1991, N183, p.25−33.
  153. Lederberq J. Isolation and Characterization of Biochimical mutants of Bacteria. Methads in Med. Restarch., 1950, 3, 5, 22.
  154. Linde К. Herstellung von stabilen Salmonella-Iinpfstammen Durch Kopplung von zwei unabhangig voneinander nichtvermehrungbegrenzenden attenuierenden Markern // Arch.Exp.Vet.Med. -1980. N34. -p. 19−32.
  155. Marshall B.J., Cocte G.G., Scott W.J. Effect of various gase son the survival of dried bacteria during storage // Appl. Microbiol. -1973. -Vol.26. -N2. -p.206−210.
  156. Meiners M., Rupmundt W., Wania N. et al. Analysis of process dynamics in bioreactors// J. Chem. Teclrn. Biotechnol. -1983. -Vol.33. N3. -p.164−176.
  157. Patil M., Parhad N. Growth of salmonellas in differend enrichment media // J. Appl. Bacteriol 1986, v.61, N1, p.19−24.- 106
  158. Perales J., Erkiaga E. Comparison between semisolid Rappaport and modified semisolid Rappaport Vassiliadis media, the isolation of salmonella spp from foods and feeds // Jnt. J. Food Microbiol 1991, v. 14, N1, p.51−58.
  159. Petersen L.A. Comparison of EF-18 agar and modiffed brilliant green agar with lutensit for isolation of Salmonella from poultry samples // Acta vet. scand, 1997, v.38, N1, p.79−85.
  160. Pignato S., Giammanco G., Gammanco G. Rambach agar and SM-JD medium sensitivity for presumptive idenfication of salmonella subspecies J-VI // J. Meg. Microbiol., 1995, v.43, N1, p.68−71.
  161. Quail E., Mc Gibbon L., Fricker C. A. stuby of the relative efficiencies of three commercially avialable de sydrated Rappaport -Vassiliadis media // J. Hug., 1986, v.96, N3, p.425−429.
  162. Rambach A. New plate medium for faciliatet differentiation of salmonella spp. from Rroteus spp. and other enteric bacterua // Appl. Environ. Microbiol., 1990, v.56, p.301−303.
  163. Robertson D.S., McCullough W.G. Glucose catabolism of Erysipelothrix rhu-siopatiae // J. of Bacteriology. -1968. -Vol.95. -N6. -p.2112−2116.
  164. Schechata T.E., Marr A.G. Effect of nutrient concentration on the growth of Escherichia coli // J. Bacteriol. -1971. -Vol.107. -Nl. -p.210−216.
  165. Smith P., Bolton F., Gayner V., Eceles A. Improvements to a lysine medium for detection of salmonellas by electrical conductance // Lett. Appl. Microbiol., 1990, v. ll, N2, p.84−86.
  166. Smith B. Bovine salmonellosis: experimental production and choracterization of the disease in calves, using oral challenge with salmonella typhimurium // Am. J. Vet. Res. 1979. 40, 11: 1510−1513.
  167. Svastova A., Skalka B., Smola J. A modified medium for salmonellasiolation be the selective motility test // Zbl. Veter. -Med. Reilie B., 1984, Bd.31,H.5, s.396−399.-107
  168. G., Kusiak В. Аэрированная глубинная культура hemophilus pertussis в применении к продукции вакцины // Med. Doswiadczalna i Microbiol. -1959. -v.10. -p.4. -p.493−499.
  169. Ushiba D., Yoshioka M., Iwaliata R. Studies on the immunity of experimental typhoid. II. Effect on the immunization with killed vaccines of Salmonella enteriti-dis infection of mice // Keio J. Med. -1953. -v.2. -N75. -p.90−92.
  170. Ushiba D., Iwahata R., Saito K. Studies of the immunity of experimental typhoid. III. A compararive study of active and passive immunization against the infection of mice with Salmonella enteritidis // Keio J. Med. -1954. -v.3. -N2. -p.73−78.
  171. Vaggessen D., Wegener H. Ravisning of Salmonella hos svin // Dansk Veter. -Tidsskr., 1993, Agr.76, N23, s.1017−1022.
  172. Vrana D., Votruba J., Placek J. Age related changes in the physiological state of budding yeast cells // Exp. Cell. Res. -1982. -Vol.138. -Nl. -p.57−62.
  173. Walker A.A. Note of th Jnhibition of Preudomonas aeruginosa by a modification of brilliant green agar for Improved Salmonella isolation //J. Appl. Bacteriol., 1981, v.51, N3, p.405−408.
  174. Приготовление ферментативного маточно-плацентарногогидролизата (ФМПГ)
  175. Определение триптофана по М.А. Пешкову- ш
  176. Метод дает завышенные результаты для питательных сред, но удобен для сравнительных исследований в процессе гидролиза.
  177. Реактивы: 1% р-р хлорамина Б (хлорамин Б содержит 26−29% свободного хлора) 1 г сухого хлорамина растворяют в 99 мл воды и фильтруют.1. Ход определения
  178. Расчет: X = А • 100, где %
  179. X количество триптофана, мг%-
  180. А количество хлорамина, пошедшее на титрование, мл-100 пересчет на 100 мл испытуемого р-ра.
  181. Определение общего азота по методу Къельдаля
  182. После охлаждения содержимое колбы переносят в колбу для отгона, добавляют 10−12 мл дистиллированной воды. Полноту переноса проверяют по индикатору метиловому оранжевому.
  183. Последняя порция смывных вод должна оставаться желтой.
  184. В приемную колбу аппарата Къельдаля наливают 20 мл 0,1н раствора серной кислоты и 2 капли индикатора Таширо.
  185. Одновременно ставят контрольный опыт на реактивы, для чего вместо ферментативного маточно-плацентарного гидролизата берут 1 мл дистиллированной воды.
  186. Содержимое общего азота (X) в ферментативном маточно-плацентарномгидролизате вычисляют по формуле, мг%:
  187. У, — У/,&bdquo-) • 0,0014 ¦ 100 А- -—-, где.2
  188. Определение содержания аминного азота методом формольного титрования по Зеренсен-Гаврилову в ФМПГ
  189. Определение аминного азота проводят методом формольного титрования по Зеренсен-Гаврилову. Метод основан на титровании карбоксильных групп аминокислот и низких полипептидов, эквивалентно связанных формальдегидом аминогруппам.
  190. Непосредственно перед работой формольную смесь (не менее 30 мл) нейтрализуют 0,1н р-р ЫаОН до рН-7.
  191. Н объем 0,1н ЫаОН для титрования испытуемой пробы.
  192. Приготовление питательной среды из основного ФМПГ
  193. Для приготовления питательной среды основной ферментативный маточ-но-плацентарный гидролизат разводят дистиллированной водой до содержания 150−200 мг% аминного азота.
  194. Потребное количество основного гидролизата рассчитывают по следующей формуле: д1. X = — х К, где Б
  195. X потребное количество основного гидролизата плацентарно-эмбриональной массы для приготовления питательной среды (л) —
  196. А требуемое количество аминного азота в питательной среде (мг%) — Б — концентрация аминного азота в основном ферментативном маточно-плацентарном гидролизате (мг%) —
  197. К количество питательной среды, которое необходимо приготовить (л). После установления в питательной среде рН (7,4−7,6) и аминного азота 150−200 мг% к ней добавляют следующие ингредиенты (на 1 л объема):
  198. Двузамещенный фосфорнокислый натрий, безводный 8,5 г (Ш2НР04 ГОСТ 11 773–66)или 12-водный (Ка2НР04 ¦ 12Н20) 21,3 г
  199. Однозамещенный фосфорнокислый калий (КН2Р04) 998 мг ГОСТ 4198–65)
  200. Лимоннокислый натрий 400 мг4. Сернокислый аммоний 1,0 г
  201. Лимоннокислое железо 50 мг6. Сернокислый магний 100 мг
  202. Приготовленную питательную среду фильтруют и автоклавируют в автоклаве при 1 атм (120°С) в течение 30 минут.
  203. Стерильность приготовленной питательной среды определяют инкубацией 2−3 пробирок со средой в термостате при 37 °C в течение 7 суток.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!