Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Иммунобиологические свойства различных углеводсодержащих препаратов Haemophilus influenzae

Диссертация: Иммунобиологические свойства различных углеводсодержащих препаратов Haemophilus influenzae
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Высокая степень очистки и специфическая активность КПС 1095 Hib позволяет рекомендовать его использование в качестве референс-препарата, а также для создания современных диагностических и профилактических препаратов. В рамках выполнения федеральной целевой программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технического комплекса России на 2007;2012 гг.» КПС 1095 Hib… Читать ещё >

Иммунобиологические свойства различных углеводсодержащих препаратов Haemophilus influenzae (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
  • 1. ВВЕДЕНИЕ
  • 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 2. 1. РОЛЬ HAEMOPHILUS INFLUENZAE В ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ ЧЕЛОВЕКА
    • 2. 2. АНТИГЕННЫЙ СОСТАВ ШТАММОВ HAEMOPHILUS INFLUENZA
    • 2. 3. ХАРАКТЕРИСТИКА ИММУННОГО ОТВЕТА У ЛЮДЕЙ, СТРАДАЮЩИХ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ, ВЫЗВАННЫМИ H. INFL UENZAE
    • 2. 4. ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ГЕМОФИЛЬНОЙ ИНФЕКЦИИ. РОЛЬ УГЛЕВОДНЫХ КОМПОНЕНТОВ В ИХ СОСТАВЕ
  • 3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
    • 3. 1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
      • 3. 1. 1. Штаммы Н. influenzae, использованные в работе
      • 3. 1. 2. Биомасса Н. influenzae
      • 3. 1. 3. Сыворотки
      • 3. 1. 4. Животные
      • 3. 1. 5. Антигены, диагностические наборы и другие препараты
      • 3. 1. 6. Коммерческие препараты
      • 3. 1. 7. Методы выделения и очистки бактериальных антигенов
      • 3. 1. 8. Детоксикация липоолигосахаридов
      • 3. 1. 9. Методы химического анализа
      • 3. 1. 10. Методы физико-химического анализа
      • 3. 1. 11. Методы иммунохимического анализа
      • 3. 1. 12. Методы оценки иммунобиологических свойств препаратов на животных
      • 3. 1. 13. Методы статистической обработки результатов исследования
    • 3. 2. ВЫБОР НАИБОЛЕЕ РАСПРОСТРАНЕННЫХ В ПОПУЛЯЦИИ СУБТИПОВ БЕСКАПСУЛЬНЫХ ШТАММОВ H. INFLUENZAE
      • 3. 2. 1. Распространенность субтипов ЛОС среди бескапсульных штаммов
  • Н.influenzae по результатам SDS-электрофореза в ПААГ
    • 3. 2. 2. Сравнительная характеристика специфического гуморального ответа к ЛОС NTHi у клинически здоровых и больных различными бронхолегочными заболеваниями людей
    • 3. 3. ХАРАКТЕРИСТИКА ХИМИЧЕСКИХ, ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ И ИММУНОХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ УГЛЕВОДСОДЕРЖАЩИХ АНТИГЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ H. INFLUENZAE
    • 3. 3. 1. Химический состав антигенных препаратов
    • 3. 3. 2. Исследование молекулярно-весовой гетерогенности антигенных препаратов Н. influenzae
    • 3. 3. 3. Изучение серологической специфичности антигенных препаратов H. influenzae
    • 3. 4. ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ РАЗЛИЧНЫХ ДЕТОКСИЦИРУЮЩИХ АГЕНТОВ НА ЖИРНОКИСЛОТНЫЙ СОСТАВ И ТОКСИЧНОСТЬ ЛИПООЛИГОСАХАРИДОВ H. INFLUENZAE
    • 3. 5. ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ УГЛЕВОДСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ H. influenzae
    • 3. 5. 1. Влияние углеводсодержащих препаратов H. influenzae на показатели поглотительной способности лейкоцитов: фагоцитарного индекса и фагоцитарной активности
    • 3. 5. 2. Влияние антигенных препаратов H. influenzae на продукцию цитокинов
    • 3. 5. 3. Влияние антигенных препаратов H. influenzae на уровень экспрессии поверхностных маркеров мононуклеарных лейкоцитов селезенок мышей
    • 3. 5. 4. Изучение гуморального иммунного ответа на углеводсодержащие антигенные препараты H. influenzae у мышей
    • 3. 5. 5. Сравнительная характеристика токсичности и протективной активности углеводсодержащих антигенов H. influenzae
  • 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
  • 5. ВЫВОДЫ

Инфекции, вызываемые Haemophilus influenzae, являются важной причиной заболеваемости и смертности в экономически развитых и развивающихся странах, прежде всего, среди детей раннего возраста [18, 35]. Фактические данные, накопленные в последние годы, свидетельствуют о том, что эти инфекции имеют широкое распространение на территории России и являются актуальной проблемой здравоохранения [36, 37].

Заболевания, вызываемые наиболее вирулентным капсульным штаммом Н. influenzae типа b — Hib — (гнойный менингит, гнойный эпиглоттит, пневмония, септический артрит, остеомиелит, целлюлит, бактериемия), имеют широкое распространение и тяжелое течение, вместе с тем, нельзя недооценивать медико-социальную значимость заболеваний, вызываемых бескапсульными или нетипируемыми (NTHi) штаммами гемофильной палочки (сепсис, средний отит, синусит, обострение хронического бронхита, конъюнктивит) [9, 87].

Если вопрос защиты от инфекций, вызванных капсульными штаммами H. influenzae, в настоящее время решается применением конъюгированных вакцин на основе капсульного полисахарида H. influenzae типа b (КПС Hib) и белков-носителей, то вакцины против инфекций, вызванных NTHi, до сих пор нет. В качестве основы для вакцинных препаратов, направленных на профилактику заболеваний, вызванных бескапсульными штаммами H. influenzae, за рубежом изучается роль белков наружной мембраны и липоолигосахаридов (ДОС) [3, 42, 51]. Следует отметить, что JIOC NTHi имеют уникальную структуру, и среди бескапсульных штаммов Н. influenzae обнаружено более 10-ти субтипов, различающихся по электрофоретической подвижности ДОС [28, 55].

В нашей стране субтипирование циркулирующих NTHi штаммов не проводилось. Вместе с тем, решение этого вопроса может способствовать определению наиболее распространенных в популяции субтипов возбудителей с дальнейшим получением из них детоксицированных JIOC, обеспечивающих перекрестную защиту от NTHi. Не изучена также возможность создания вакцинного препарата на основе двух Т-независимых антигенов (КПС и JIOC) H. influenzae для одновременной защиты от капсульных и бескапсульных штаммов.

Учитывая высокую эффективность вакцинных препаратов, получаемых из грамнегативных бактерий с помощью солянокислого гидроксиламина, содержащих в своем составе ЛПС, КПС и, вероятно, белки наружной мембраны [13, 14], представляется целесообразным включение гидроксил-аминового препарата Н. influenzae (ГАП) в состав изучаемых углеводсодержащих антигенов.

Цель и задачи исследования

.

Целью настоящего исследования является получение углеводсодержащих антигенов H. influenzae и характеристика их иммунобиологических свойств.

Задачи исследования:

1. Провести выбор бескапсульных штаммов H. influenzae, наиболее распространенных в популяции больных бронхолегочными заболеваниями (БЛЗ).

2. Получить препараты капсульного полисахарида Hib, гидроксил-аминовые препараты капсульного и бескапсульного штаммов H. influenzae, ЛОС NTHi и охарактеризовать их по химическим, физико-химическим и иммунохимическим свойствам.

3. Изучить влияние гидроксиламингидрохлорида, безводного гидразина, гидроксида натрия на жирнокислотный состав липида, А липоолигосахарида бескапсульного штамма и его токсичность.

4. На основании результатов изучения иммунобиологических свойств антигенных препаратов Н. influenzae определить наиболее перспективный препарат для разработки вакцины, направленной на профилактику заболеваний, вызываемых капсульными и бескапсульными штаммами Н. influenzae.

Научная новизна.

Впервые при использовании SDS-электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ) проведен скрининг ДОС, выделенных из 62 бескапсульных штаммов Н. influenzae, циркулирующих на территории России (Москва) среди больных с бронхолегочными заболеваниями. По электрофоретической подвижности ДОС выявлено 10 основных субтипов, имеющих один электрофоретический компонент, и 13 дополнительных, включающих 2−3 основных компонента в различных сочетаниях. Наиболее распространены среди больных — VI (17,7±4,8%), VIII (12,9±4,3) и X (12,9±4,3) субтипы.

Впервые при использовании твердофазного ИФА на основе ДОС 67 штаммов NTHi определена частота повышенного уровня ДОС-специфических IgG-антител к Н. influenzae у больных бронхолегочными заболеваниями и здоровых доноров. Наиболее часто повышенный уровень антител наблюдали к 11 штаммам (16,7−54,8%), которые также имели признаки или принадлежали к трем основным субтипам (VI, VIII, X).

Выделены и охарактеризованы по химическим, физико-химическим и иммунохимическим свойствам три группы бактериальных антигенов: КПС 1095 HibГАП 1095 Hib и 58 NTHiДОС штаммов 45, 54, 58, 65 NTHi и 1095 Hib. По результатам иммунохимических исследований наиболее выраженной перекрестной активностью обладал ДОС штамма 45 NTHi (X субтип).

Впервые проведено сравнительное изучение детоксицирующих свойств безводного гидразина (БГ), солянокислого гидроксиламина (ГА) и гидроксида натрия. На примере ДОС 45 NTHi показано, что при использованных концентрациях БГ и ГА приводят к удалению основной массы жирных кислот из липида А, что, в свою очередь, ведет к уменьшению токсичности препарата в опытах на животных в 31,5−25 раз (1Х>50ЛОСисх=0,063 мкг- 1ЛЭ50дЛОСБг=1,99 мкгLD50 дЛОСГА=1,58 мкг).

Изучение иммунобиологических свойств КПС, ГАП, ЛОС, дЛОС и смесей КПС с ЛОС 45 NTHi и КПС с дЛОСГА показало, что смесь КПС Hib (10 мкг) и дЛОСга 45 NTHi (0,1−10мкг) является наиболее перспективным углеводсодержащим препаратом в качестве основы для разработки новой вакцины против гемофильной инфекции, обусловленной как капсульными, так и бескапсульными штаммами. При испытанных дозах и схемах введения смесь указанных препаратов обладает низкой токсичностью, высокой перекрестной протективной активностью при заражении иммунизированных мышей капсульным и бескапсульными штаммами H. influenzae и вызывает активацию эффекторов системы врожденного и адаптивного иммунитета, приводя к повышению фагоцитарной способности лейкоцитов мышей, продукции провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, увеличению числа Т-клеток, экспрессирующих молекулы cd4, активационные молекулы cd25 и МНСИ, повышению продукции специфических IgG-антител к ЛОС.

Практическая значимость.

Установлено, что циркулирующие на территории России (Москва) NTHi штаммы по структуре ЛОС относятся к десяти основным субтипам, среди которых VI, VIII и X субтипы наиболее распространены у больных бронхолегочными заболеваниями. Предложенный способ субтипирования может быть использован для проведения эпидемиологического мониторинга штаммов в разных географических регионах России.

Высокая степень очистки и специфическая активность КПС 1095 Hib позволяет рекомендовать его использование в качестве референс-препарата, а также для создания современных диагностических и профилактических препаратов. В рамках выполнения федеральной целевой программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технического комплекса России на 2007;2012 гг.» КПС 1095 Hib использовали для создания количественной иммуноферментной тест-системы для оценки поствакцинального иммунитета.

Солянокислый гидроксиламин может быть использован в качестве детоксицирующего агента для JIOC NTHi штаммов.

Смесь капсульного полисахарида Hib и детоксицированного JIOC NTHi может быть использована в качестве основы для разработки вакцины с серотиповой (Hib) и видовой (NTHi) перекрестной протективной активностью.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Бескапсульные штаммы H. influenzae, циркулирующие в популяции больных бронхолегочными заболеваниями людей, по электрофоретической подвижности ДОС относятся к 10 основным субтипам, наиболее распространенными из которых являются VI, VIII и X.

2. Среди выделенных углеводсодержащих препаратов — КПС 1095 Hib, ГАП 1095 Hib и 58NTHI, ДОС 45, 54, 58, 65 NTHi и 1095 Hib — высокой перекрестной серологической активностью обладают ГАП и ДОС 45 NTHi.

3. Действие 1% водного раствора гидроксиламингидрохлорида приводит к удалению из липида, А ДОС NTHi 3-гидроксикаприновой, миристиновой, олеиновой и стеариновой кислот и снижению токсичности полученного дЛОС в 25 раз.

4. Низкая токсичность, высокая степень внутривидовой перекрестной защиты смеси КПС Hib и дЛОС NTHi, способность этой смеси активировать эффекторы врожденного иммунитета, а также инициировать процесс формирования адаптивного иммунитета является основанием для разработки новой вакцины, направленной на профилактику заболеваний, вызванных капсульными и бескапсульными штаммами Н. influenzae.

Апробация работы. Основные материалы диссертации представлены и обсуждены: на Всероссийской научной конференции «Объединенный Иммунологический Форум», Санкт-Петербург, 2008; на конференции молодых ученых НИИВС им. И. И. Мечникова РАМН, Москва, 2009. Апробация работы состоялась на конференции отдела иммунологии НИИ вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова РАМН 18 ноября 2010 г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 научных работ в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на 149 страницах компьютерного текста, иллюстрированы 18 рисунками и 20 таблицами, состоят из введения, четырех глав обзора литературы, пяти глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка литературы, включающего 109 источников, в том числе, 41 на русском языке.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

выводы.

1.Бескапсульные штаммы H. influenzae, циркулирующие на территории Москвы, по структуре JIOC относятся к 10 основным субтипам, наиболее распространенными из которых являются VI, VIII и X.

2.Сыворотки больных бронхолегочными заболеваниями достоверно чаще, чем сыворотки клинически здоровых людей содержат повышенный уровень IgG-антител к ДОС NTHi (что доказывает важную роль бескапсульных штаммов в инициации заболеваний).

3.Сыворотки больных бронхолегочными заболеваниями достоверно чаще, чем сыворотки клинически здоровых доноров, содержат повышенный уровень IgG-антител к JIOC разных субтипов, что свидетельствует о частой смене субтипа возбудителя.

4.В сыворотках больных бронхолегочными заболеваниями, достоверно чаще, чем у клинически здоровых доноров определяется повышенный уровень антител к 11 бескапсульным штаммам Н. influenzae, относящимся к VI, VIII и X субтипам.

5.Установлено, что 3 группы антигенов, полученных из капсульного (1095) и бескапсульных (45, 54, 58 и 65) штаммов H. influenzae, различны по химическому составу. В иммунохимических реакциях КПС Hib проявляет серотиповую специфичностьГАП Hib и NTHi — серотиповую и видовую специфичностьДОС NTHi — внутривидовую специфичность, причем наибольшей перекрестной серологической активностью обладает ДОС штамма 45 NTHi (X субтип).

6.Детоксикация ДОС 1% раствором гидроксиламингидрохлорида приводит к удалению 4-х из 6-ти ВЖК липида, А и 25-кратному снижению токсичности по сравнению с нативным препаратом ДОС.

7.Установлено, что при испытанных дозах и схемах иммунизации КПС Hib, ГАП капсульного и бескапсульного штаммов и ДОС H. influenzae вызывают активацию эффекторов системы врожденного иммунитета, что проявляется в повышении фагоцитарной активности лейкоцитов мышей, продукции провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, при этом смеси КПС Hib с ДОС и КПС Hib с дЛОС 45NTHi обладают наиболее высокой стимулирующей активностью.

8. Смесь КПС Hib с ДОС и дЛОС45ГА NTHi вызывает у мышей повышение количества клеток, экспрессирующих поверхностные маркеры (CD4, CD25, CD4/CD25, CD19, MHCII) в большей степени, чем введение монопрепаратов.

9. Смесь КПС Hib с дЛОС45ГА NTHi обладает более высокой протективной активностью при заражении вирулентным капсульным штаммом H. influenzae типа b по сравнению с монопрепаратами ГАП и КПС Hib. Наиболее выраженной внутривидовой перекрестной протективной активностью обладают ГАП NTHi, ДОС и дЛОС45ГА NTHi, а также смеси КПС Hib с ЛОС 45 NTHi и КПС Hib с дЛОС45ГА NTHi.

10. Способность смеси КПС 1095 Hib с дЛОС45ГА NTHi к активации систем врожденного и адаптивного иммунитета позволяет рекомендовать эту комбинацию в качестве основы для создания вакцины для профилактики инфекций, вызываемых капсульными и бескапсульными штаммами Н. influenzae.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Н.К. Молекулярные и клеточные механизмы действия иммуномодуляторов микробного происхождения на функциональную активность эффекторов врожденного иммунитета: дис.. докт. мед. наук. Москва, 2006. — 289 с.
  2. Бактериальные гнойные менингиты, Биографии Рихард Пфайффер, Маргарет Питтман // Информационный бюллетень Вакцинация. 1999. — № 2. — http://medi.ru/doc/15b0201.htm
  3. Т. А. Рекомендации ВОЗ по профилактике гемофильной инфекции тип b // Информационный бюллетень Вакцинация. 2003. — № 2(26). — С. 4−5.
  4. Л.Г. Микробиологические аспекты инфекций, вызванных Haemophilus influenzae, у детей: Автореф. дис. .д-ра мед. наук. Санкт-Петербург, 2007. 38 с.
  5. И.К., Козловский М. Т., Никитина Л, В. Гидразин и гидроксиламин и их применение в аналитической химии. Алма-Ата.: Наука, 1967.- 175 с.
  6. Л.Д., Винарская Н. В. Структура, функция, биологическая активность эндотоксинов грамотрицательных бактерий // Современные проблемы токсикологии. 2002. — С. 1−7.
  7. Л.Д., Здоровенко Г. М., Книрель Ю. А. Методы исследования эндотоксинов // Киев.: Наукова думка, 2006. —237 с.
  8. Выделение, идентификация и определение чувствительности к антибиотикам Haemophilus influenzae: Методические рекомендации. -Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия, 2000. -№ 2-Т. 2.-С. 93−109.
  9. С. Медико-биологическая статистика: пер. с англ. М.: Практика, 1998.-459.
  10. С.Г., Орлова O.E., Захарова Н. Е. с соавт. Результаты динамического наблюдения за детьми раннего возраста в закрытом коллективе, иммунизированными вакциной «АКТ-ХИБ» // Бюллетень Вакцинация. 2003. — № 2(26). — С. 6−7.
  11. П., Буртен П. Иммуноэлектрофоретический анализ. М.: Изд-во иностр. лит., 1961. — 305 с.
  12. Н.Б., Мансурова H.JL, Кузьмина JI.A. с соавт. Протективная активность поликомпонентной вакцины из антигенов условнопатогенных микроорганизмов при оральном введении // Журнал микробиол., иммун., и эпидем. 1993. -№ 6. — С. 48−51.
  13. Л.Ф. Энтеральная иммунизация антигенными комплексами сальмонелл и шигелл в экспенрименте // Дис. канд. мед. наук. -М.- 1980.- 167с.
  14. Н.Е. Определение влияния гидроксиламингидрохлорида на состав и свойства антигенов Shigella dysenteriae 1: Дис.. канд. биол. наук. Москва, 2001. — 121с.
  15. Н.А., Заплатников А. Л. Пневмонии у детей // Информационный бюллетень Вакцинация 2003. — № 5(29). — С. 4−5
  16. Л.М., Рузаева А. А. Современные аспекты гемофильной инфекции у детей раннего возраста // Красноярск, ООО «Версо».-2010.- 148 с.
  17. В.А., Пак С.Г., Суджян Е. В. Синдром интоксикации в инфекционной патологии: новый взгляд на старую проблему //
  18. Журн.микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1994. -№ 5.-С.105−109.
  19. В.В. Определение пентоз в нуклеотидах и нуклеозидах посредством реакции Биаля // Биохимия. 1945. — 10, № 5. — С. 353−358.
  20. Микробиология и иммунология: Учебник // под редакцией А. А. Воробьева. М.: Медицина, 1999. — 464с.
  21. К.О. Метод мультилокусного секвенирования-типирования N. meningitidis и Н. influenzae серотипа b в эпидемиологическом надзоре за бактериальными менингитами: дис. канд. мед. наук. Москва, 2004. — 136с.
  22. С.Д. Значение представителей рода Haemophilus в инфекционной патологии человека // Инфекции и антимикробная терапия. 2005. — Т.07. — № 1 — http://old.consilium-medicum.com/media/infektion/0501/32.shtml
  23. Одрит JL, Огг Т. Химия гидразина: Пер. с англ. М.: Изд. иностр. Лит., 1954.-238 с.
  24. Г. Г. Письмо Минздрава РФ от 30 декабря 1997г. № 2510/10 099−97−32 О профилактике гемофильной инфекции // Информационный бюллетень Вакцинация. 2003. -№ 2(26). — С. 5.
  25. Орлова О.Е.: Автореф. дис.. канд. мед. наук. Москва, — 2004. -23 с.
  26. О.Е., Елкина С. И., Ванеева Н. П. с соавт. Питательная среда для культивирования бактерий Haemophilus influenzae типа b // Патент № 2 258 737, 2005.
  27. О.Е. Поверхностные антигены нетипируемых штаммов Haemophilus influenzae II Журн.микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2006. — № 5. — С. 113−120.
  28. Л.Р. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование.- М.: Наука, 1981. -286 с.
  29. X. Заболевания, вызванные Haemophilus influenzae тип b, в начале 21-го столетия: глобальный анализ актуальности инфекции после 10 лет использования конъюгированных вакцин // Информационный бюллетень Вакцинация 2003. — № 2(26). — С. 3.
  30. O.K. Медицинская микробиология. М.: ГЕОТАР-МЕД, 2002.-768с.
  31. В.И., Таточенко В. К. Гемофильная инфекция тип b // Информационный бюллетень Вакцинация. — 2003. № 2(26). — С. 2.
  32. С.В., Гучев И. А. Острый средний отит: современный взгляд на проблему с позиций доказательной медицины // Инфекции и антимикробная терапия. 2005. — Т.07. — N 1.
  33. Н.И., Лобачева Л. А. Щадящий метод выделения растворимых антигенов из патогенных бактерий // Использование разных методов в изучении и изготовлении вакцин и анатоксинов: Сб.науч. тр. М., 1964. — С. 8−9.
  34. В.К. Инфекция, вызванная Haemophilus influenzae тип b, (вопросы и ответы) // Информационный бюллетень Вакцинация.2003. № 2(26). — обложка.
  35. В.К. Перспективы развития иммунопрофилактики в России // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. -2010.-№ 15.-С. 92.
  36. Л.У. Вести из регионов // Информационный бюллетень Вакцинация. 2003. — № 2(26). — С. 11.
  37. В.Ф., Шамшева О. В. Гнойные менингиты: клиника и вакцинопрофилактика Гнойные менингиты: клиника и вакцинопрофилактика // Информационный бюллетень Вакцинация -1999.-№ 2(2).-С. 6.
  38. Ю.С., Новикова О. В., Ахматова Н. К. с соавт. Действие рекомбинантного белка теплового шока Mycobacterium tuberkulosis (rHSP70) на иммуногенную активность капсульного полисахарида
  39. Haemophilus influenzae типа b // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2009. — № 6. — С. 83−89.
  40. Г. А., Королева И. С., Платонов А. Е. с соавт. Генетическая характеристика штаммов Haemophilus Influenzae серотипа В, изолированных в регионах России // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2010. — № 1. — С. 24−28.
  41. И.Ю., Кулькина В. Ф., Огурцов A.A. с соавт. Проблема гемофильной инфекции в Тюменской области // Информационный бюллетень Вакцинация. 2003. — № 2(26). — С. 10−11.
  42. Alrawi A.M., Chern K.C., Cevallos V., et al. Biotypes and serotypes of Haemophilus influenzae ocular isolates // Br.J.Ophthalmol. 2002. -Vol.86. — p. 276−277.
  43. Apicella M.A., Dudas K.C., Campagnari A. et al. Antigenic Heterogeneity of Lipid A of Haemophilus influenzae II Infection and Immunity. 1985.- Vol.50. — № 1.- p. 9−14.
  44. Boivin, A., Mesrobeanu, I., Mesrobeanu, L. Extraction D’un Complexe Toxique Et Antigdnique A Partir Du Bacille D’aertrycke // Compt. Rend. Soc. Biol. 1933. — Vol. 114.-p. 307−310.
  45. Buscher A.Z., Burmeister К., Barenkamp S J. et al. Evolutionary and Functional Relationships among the Nontypeable Haemophilus influenzae
  46. HMW Family of Adhesins // J.Bacteriol. 2004. — Vol. 186(13). — p. 42 094 217.
  47. Cox R.A., Slack M.P.E. Clinical and microbiological features of Haemophilus influenzae vulvovaginitis in young girls // J.Clin.Pathol. -2002. Vol.55. — p. 961−964.
  48. Daniel M. Musher, Hague-Park M., Robert E. Baughn, et al. Opsonizing and bactericidal effects of normal human serum on nontypable H. influenzae // Infection and immunity. 1983. — 297. — C. 39−40.
  49. Dubois M., Gillor K.A., Hamilton J.K. et al. A colometrie method for the determinayion of sugars. // Anal.Chemistry. 1959. — Vol.28. — p. 350
  50. Foxwell A.R., Jennelle M.K. et al. Nontypeable Haemophilus influenzae: Pathogenesis and prevention // Microbiol mol Biol Rev. — 1998. Vol.62. — № 2. — p. 294−308.
  51. Gotschlich E.C., Liu T.Y., Artenstein M.S. Human immunity to the meningococcus. 3. Preparation and immunochemical properties of the group A, group B, and group C meningococcal polysaccharides // J.Exp.Med. -1969.-Vol. 129(6).-p. 1349−1365.
  52. Green B. A, Farley J. E, Quinn-Dey T, et al. The e (P4) outer membrane protein of Haemophilus influenzae: biologic activity of anti-e serum and cloning and sequencing of the structural gene // Infect Immun. -1991. № 59(9). — p. 3191−3198.
  53. Gu X.X., Tsai Tsai C-M., Apicella M.A. et al. Quantitation and Biological Properties of Released and Cell-Bound Lipooligosaccharides from Nontypeable Haemophilus influenzae II Infection And Immunity. -1995.-Vol.63. № 10.- p. 4115−4120.
  54. Gu X.X., Sun J., Jin S. et al. Detoxified lipooligosaccharide from nontypeable Haemophilus influenzae conjugated to proteins confers protection against otitis media in chinchillas. Infect.Immun. — 1997. -Vol.65. — № 11. — p. 4488−4493.
  55. Gu X.X., Tsai C.M., Ueyama T. et al. Synthesis, characterization, and immunologic properties of detoxified lipooligosaccharide from Nontypeable Haemophilus influenzae conjugated to proteins // Infect, immun. 2001. -Vol.69 (4).-p. 2636−2642.
  56. Harabuchi Y., Faden H., Yamanaka N., et al. Nasopharyngeal colonization with nontypeable Haemophilus influenzae and recurrent otitis media//J.Infect.Dis. 1994.- Vol.170. — C. 862−868.
  57. Heiander I.M., Lindner B., Brade H. et al. Chemical structure of the lipopolysaccharide of Haemophilus influenzae strain 1−69 Rd-/b+. Description of a novel deep-rough chemotype. Eur J. Biochem. 1988. — Vol. 177(3). -p. 483−492.
  58. Hitchcock P.J., Brown T.M. Morphological heterogeneity amond Salmonella lipopolysaccharide chemotypes in silver-stained polyacrylammide gels // J.Bacteriol. 1983. — № 4. — p. 269−277
  59. Hou Y., Gu X.X. Development of Peptide Mimotopes of Lipooligosaccharide from Nontypeable Haemophilus influenzae as Vaccine Candidates // J.Immunol. 2003. — Vol. 170(8). — p. 4373−4379.
  60. Jianjun L., Cox A.D., Hood D.W. et al. Electrophoretic and mass spectrometric strategies for profiling bacterial lipopolysaccharides // Mol. Biosyst. 2005. — Vol.1. — p. 46−52.
  61. Jones C. Vaccines Based On The Cell Surface Carbohydrates Of Pathogenic Bacteria // An Acad.Bras.Cienc. 2005. — Vol.77(2). — p. 293 324.
  62. Jones PA, Samuels NM, Phillips NJ, Haemophilus influenzae type b strain A2 has multiple sialyltransferases involved in lipoologosaccharide sialylation // J.Biol.Chem. 2002. — Vol.277(17). — p. 598−611.
  63. Kaur R., Sharma A., Majumdar S., et al. Outer-membrane-protein subtypes of Haemophilus influenzae isolates from North India // J.Med.Microbiol. 2003. — Vol.52(8). — p. 693−696.
  64. Kimura A., Hansen E.J. Antigenic and phenotypic variations of Haemophilus influenzae type b lipopolysaccharide and their relationship to virulence // Infect. Immun. 1986.- Vol.51. — p. 69−79.
  65. Kimura A., Patrick C.C., Miller E.E. et al. Haemophilus influenzae type b lipooligosaccharide: stability of expression and association with virulence // Infect Immun. 1987. Vol.55(9). — p. 1979−1986.
  66. Laemmli U. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. 1970. — Vol.227. — p. 680 — 685.
  67. Loeb M.R., Woodin K.A. Cross-Reactivity of Surface-Exposed Epitopes of Outer Membrane Antigens of Haemophilus influenzae Type b // Infect Immun. 1987. — Vol.55. — № 12. — p. 2977−2983.
  68. Loosmore S. M, Yang Y. P, Coleman D. C, et al. Outer membrane protein D15 is conserved among Haemophilus influenzae species and may represent a universal protective antigen against invasive disease // Infect Immun. 1997. — Vol 65. — № 9. — p. 3701−3707.
  69. Lowry O. H., Rosebrough N. J., Farr A. L. Protein measurement with the Folin phenol reagent // J.Biol.Chem. 1951. — Vol.193, — p. 265−275.
  70. Lundstrom S. Detailed structural studies towards the understanding of lipopolysaccharide glycan expression in non-typeable Haemophilus influenzae: thesis for Ph.D. Stockholm, 2008. — 63 p.
  71. Mansson, M., Hood, D.W., Li, J., Richards, J.C., Moxon, E.R. & Schweda, E.K.H. Structural analysis of the lipopolysaccharide from nontypeable Haemophilus influenzae strain 1003 // Eur. J. Biochem. — 2002. -№ 269.-p. 808−818.
  72. Mattsby-Baltzer I., Gemski P., Alving C.R. Heterogeneity of Lipid A: Comparison of Lipid A Types from Different Gram-Negative Bacteria // Journal of Bacteriology. 1984. — Vol.159. — № 3. — p. 900−904.
  73. Mertsola J., Cope L.D., Saez-Llorens X. et al. In vivo and in vitro expression of Haemophilus influenzae type b lipooligosaccharide epitopes // J.Infect.Dis. 1991.- Vol. 164(3).-p. 555−563.
  74. Mikhail I., Yildirim H.H., Lindahl E.C.H et al. Structural characterization of lipid A from nontypeable and type f Haemophilus influenzae: Variability of fatty acid substitution // Analytical Biochemistry. -2005.- Vol.340. № 2.-p. 303−316.
  75. Moller L.V., Regelink A.G., Grasselier H. Multiple Haemophilus influenzae strains and strain variants coexist in the respiratory tract of patients with cystic fibrosis II J.Infect.Dis. 1995. — Vol. 172(5). — p. 13 881 392.
  76. Novotny L.A., Jurcisek J.A., Pichichero M.E., et al. Epitope Mapping of the Outer Membrane Protein P5-Homologous Fimbrin Adhesin of Nontypeable Haemophilus influenzae II Infect Immun. 2000. — Vol.68(4). -p.2119−2128.
  77. Ouchterlony O. Antigen-antibody reaction in gels. IV. Types of reactions in coordinated systems of diffusion // Acta.Patol.Microbiol. -1953.-Vol. 32.- p. 231−240.
  78. Patrick C.C., Kimura A., Jackson M.A. et al. Antigenic Characterization of the Oligosaccharide Portion of the Lipooligosaccharide of Nontypable Haemophilus influenzae II Infection and Immunity. 1987. -Vol.55.-№ 12.-p. 2902−2911.
  79. Peltola H., Salo E., Saxen H. Incidence of Haemophilus influenzae type b meningitis during 18 years of vaccine use: observational study using routine hospital data II BMJ. 2005. — Vol.330(7481). — p.18−19.
  80. Pieroni R.B., Broderich E.J., Bundeally A. et al. A simple method for the quentitation of submicrogram amounts of Bacterial endotoxin. -Proc.Soc.Exp. Biol.Med. -1970. Vol.133. — № 3. — p. 790−794.
  81. Poolman J. T, Bakaletz L, Cripps A, et al. Developing a nontypeable Haemophilus influenzae (NTHi) vaccine // Vaccine, 2000, № 8. P. 108−115.
  82. Porras O., Caugant D.A., Gray B. et al. Difference in structure between type b and nontypable Haemophilus influenzae populstions // Infection and immunity. 1986. — Vol.53. — №.1. — p.79−86.
  83. Rahman M.M., Gu X.X., Tsai C-M. et al. Structural heterogeneity of the lipooligosaccharide (LOS) expressed by pathogenic non-typeable Haemophilus influenzae strain NTHi 9274 // Glycobiology. 1999- Vol.9. — № 12.- p. 1371−1380.
  84. Rao V. K, Krasan G.P. et all. Molecular determinants of the pathogenesis of disesae due to non-typable Haemophilus influenzae II FEMS Microbiol. Rev. 1999. — № 23. — p. 99−129.
  85. Rodriguez C.A., Avadhanula V., Buscher A. et al. Prevalence and Distribution of Adhesins in Invasive Non-Type b Encapsulated Haemophilus influenza // Infect Immun. 2003. — Vol.71(4). -p. 1635−1642.
  86. Roitt I., Brostoff J., Male D. Immunology, 5th ed. London.: Mosby-Wolfe, 1998.-423 p.
  87. Sethi S, Murphy T.F. Bacterial infection in cronic obstructive pulmonary disease in 2000: a state-of-art review //Clin. Microbiol. Rew. -2001.-Vol. 14.-№ 2.-p. 336−363.
  88. Sethi S., Wrona C., Grant B.J.B, et al. Strain-specific Immune Response to Haemophilus influenzae in Chronic Obstructive Pulmonary
  89. Disease // American Journal Of Respiratory And Critical Care Medicine. -2004,-Vol.169.-p. 448−453.
  90. Sikkema D.J., Murphy T.F. Molecular analysis of the P2 porin protein of nontypeable Haemophilus influenzae // Infect Immun. 1992. -Vol.60(12). — p.5204−5211.
  91. Snow J. B Jr. Progress in the prevention of otitis media through immunization // Otol. Neurotol. 2002. — № 23(1). — p. 1−2.
  92. Spinola S.M., Peacock J., Denny F.W., et al. Epidemiology of colonization with nontypable Haemophilus influenzae in children: A longitudinal study // J.infect.Dis. 1986. — Vol.154. — № 1. — C. 100−109.
  93. St. Gerne J.W., III. Molecular and cellular determinants of nontypeable Haemophilus influenzae adherence and invasion // Cellular Microbiol. 2002. — Vol.4. — № 4. — p. 191−203.
  94. Tolan R.W., Munson R.S., Granoff D.N. Lipopolysaccharide gel profiles of Haemophilus influenzae nype b are not steble epidemiologic markers // J.Clin.Microbiol. 1986. — № 8. — p. 223−227.
  95. Todar K. Haemophilus influenzae and Hib meningitis // Todar’s Online Textbook of Bacteriology. Wisconsin, 2009. — p. 388−395.
  96. Weeke B. Rocket immunoelectrophoresis // Scand.J.Immunol. 1973. -2, № 1.-p. 37−46
  97. Weiser, J.N., Shchepetov, M., Chong, S.T.H. Decoration of lipopolysaccharide with phosphorylcholine: a phase-variable characteristic of Haemophilus influenzae II Infect. Immunity. 1997. — № 65. — p. 943 950.
  98. Westphal O., Jann K. Bacterial lipopolysaccharides. Extraction with phenol-water and further applications of the procedure. Meth. Carbohyd. Chem. 1965. — № 5 — p.83−91.
  99. Yi K.} Murphy T.F. Importance of an immunodominant surface-exposed loop on outer membrane protein P2 of nontypeable Haemophilus influenzae II Infect. Immun. 1997 — № 65. — 150−155.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!