Информативность факторов врожденного иммунитета в диагностике туберкулеза женских гениталий и оценке его активности

Актуальность темы

: По данным ВОЗ, треть населения планеты инфицирована туберкулезом, который признан глобальной проблемой, несущей колоссальный экономический и биологический ущерб [WHO, Weekly Epidemiological Record, № 32, 1995], и согласно прогнозу, после 2005 г. от туберкулеза ежегодно в мире будут умирать 4 млн. человек [M.S. Fenton, M.W.Vermeulen, 1996]. Еще более проблематичной становится диагностика внелегочного туберкулеза, для которого на фоне широчайшего клинического полиморфизма, свойственного каждой локализации, в целом характерны: малая частота обнаружения возбудителя в патологическом материале [А.И. Коротяев, С. А. Бабичев, 2000]- невозможность воспользоваться данными рентгенологических и гистологических исследований на начальных стадиях заболевания (урогенитальный туберкулез, собственно туберкулез глаз, туберкулезно-аллергические поражения глаз)[М.И. Перельман, 2002]. Заболеваемость внелегочным туберкулезом в России за период с 1991;2000г возросла на 12,5% и составила 3,6 на 100 000 населения[М.В.Шилова, 2005]. Как справедливо утверждает, Ю. Н. Левашов [2003] увеличение удельного веса среди впервые выявленных больных внелегочным туберкулезом больных с одновременным поражением нескольких органов и систем (на 45%) свидетельствует о несвоевременности выявления внелегочного туберкулеза и поздней диагностике. В структуре клинических форм внелегочного туберкулеза преобладает мочеполовой туберкулез (36,8%), при этом у половины больных (42,8−53,1%) отмечались деструктивные изъяны [Н.В. Алексеева, В. Б. Галкин, Н. М. Чужова, 2001]. Показатель удельного веса больных туберкулезом женских гениталий в структуре внелегочного туберкулеза относительно стабилен и составляет 12,5−14,5% [М.Н.Кочорова, 2001]. Элиминация возбудителя туберкулеза возможна только при достаточно высоких показателях активности врожденного и адаптивного иммунитета [В.М. Аверченков, Р. Я. Мешкова, 2001]. Сенсибилизация при туберкулезе проявляется в виде гиперчувствительности замедленного типа и опосредуется системой макрофагов и Т-лимфоцитов. Наряду с макрофагами в генезе и исходе инфекционно-воспалительных заболеваний существенную роль играют нейтрофилы. Однако их значимость при туберкулезном процессе не достаточно изучена. В связи с этим изучение состояния фагоцитарного звена иммунной системы больного туберкулезом имеет не только диагностическое, но и прогностическое значение.

Наличие в крови циркулирующих противотуберкулезных антител, независимо от выраженности (или невыраженности) специфического клеточного ответа, является одним из характерных, диагностически значимых признаков туберкулеза [А.В. Васильев, 2000].

Современные представления о роли патологического очага в конкретных органах (местный иммунный ответ) делают патогенетически обоснованными обнаружение противотуберкулезных антител (ПТАТ) и изучение функций макрофагов в биологических жидкостях из анатомических зон поражения. Особенно повышается эффективность такой диагностики на фоне туберкулиновых проб. При оценке очаговой реакции существует определенная степень субъективизма, которого можно избежать с помощью ряда конкретных функциональных показателей. В литературе имеются единичные сведения об изучении биохимических показателей в зоне, максимально приближенной к очагу поражения, на фоне сегментарных проб. Так А. Н. Олейник [2001] определяла уровень активности аденозиндезаминазы в биологических жидкостях. Однако этот фермент, участвующий в обмене пуринов и катализирующий гидролитическое дезаминирование аденозина, очень нестабилен, поэтому процедура его определения достаточна трудоемка.

В то же время сведений об изучении иммунологических показателей в зоне, максимально приближенной к очагу поражения, на фоне сегментарных проб, для дифференциальной диагностики туберкулеза внелегочной локализации и оценке степени его активности, в доступной литературе нами не найдено, что и обуславливает актуальность настоящего исследования.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ: изучить показатели врожденного иммунитета на системном и местном уровне у больных туберкулезом женских гениталий и определить критерии его активности ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:

1. Провести сравнительное изучение местного и системного иммунитета у больных активным и неактивным туберкулезом женских гениталий:

1.1 Оценка фагоцитарной функции нейтрофильных гранулоцитов, моноцитов и макрофагов;

1.2 Оценка активности микробицидной оксидазной системы нейтрофильных гранулоцитов, моноцитов и макрофагов;

1.3 Оценка содержания иммуноглобулинов основных классов (G, A, M) и специфических противотуберкулезных антител в сыворотке крови и перитонеальной жидкости;

1.5 Оценка концентрации интерлейкина—1 (ИЛ-1а, ИЛф) и острофазного белка — церулоплазмина в сыворотке крови;

2. Систематизировать выявленные нарушения показателей системного и местного врожденного иммунитета при генитальном туберкулезе с определением наиболее значимых дифференциально-диагностических критериев активности воспалительного процесса.

3.Определить диагностическую значимость исследуемых показателей врожденного иммунитета, а также общих и специфических иммуноглобулинов при их оценке после постановки туберкулиновых проб.

НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЯ.

1. Впервые показана диагностическая и прогностическая значимость показателей местного иммунитета (активность нейтрофильных гранулоцитов, моноцитов крови и макрофагов в очагах местного воспаления) у больных активным и неактивным туберкулезом женских гениталий.

2. Впервые определен характер изменения активности фагоцитов, а также содержания интерлейкина-1 на системном и местном уровне после постановки пробы Манту у практически здоровых лиц и при туберкулезном процессе.

3. Установлены новые критерии оценки активности воспалительного процесса при туберкулезе женских гениталий.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

1. При туберкулезе женских гениталий выявлены специфические изменения показателей врожденного иммунитета в виде существенных дефектов функциональной активности нейтрофилов и моноцитов на системном (периферическая кровь) и местном (перитонеальная жидкость) уровне, выраженность которых усиливается после дополнительной нагрузки туберкулином in vivo (проба Манту).

2. Выявленные специфические изменения в системе фагоцитов позволяют не только дифференцировать туберкулезное воспаление от нетуберкулезного (хронические неспецифические заболевания), но и определить диагностически-значимые маркеры активности туберкулезного процесса.

3. При туберкулезе женских гениталий, в отличие от здоровых лиц и больных хроническими неспецифическими заболеваниями, наблюдается достоверное увеличение содержания сывороточного церулоплазмина, наиболее выраженное — при активном туберкулезном процессе.

4. Маркерами активности туберкулеза гениталий следует считать достоверно более высокое содержание сывороточных иммуноглобулинов основных классов, чем при неактивном туберкулезе. Нагрузка туберкулином in vivo угнетает IgAи IgG-синтез у больных туберкулезом гениталий и усиливала продукцию IgM при активном туберкулезе гениталий. В перитонеальной жидкости их содержание возрастает относительно контроля и по сравнению с исходными данными после пробы Манту при АТЖГ.

5. При активном туберкулезе женских гениталий имеет место значительное увеличение содержания ПТАТ с соответствующим усилением их синтеза после пробы Манту, а также резкое увеличение концентрации ИЛ-1 (ИЛ-1а и ИЛ-IP) с преобладанием содержания ИЛ-1а над уровнем ИЛ-ip.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ.

Предложен новый способ более ранней и достоверной диагностики активности туберкулеза женских гениталий по результатам оценки показателей врожденного иммунитета на местном и системном уровне.

Данные проведенного исследования могут быть использованы в научно-исследовательском и учебном процессах на профильных кафедрах медицинских ВУЗов.

ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ В ПРАКТИКУ: Материалы по диагностике туберкулеза женских гениталий и определения его активности внедрены в практику работы ГУЗ «Клинический противотуберкулезный диспансер» департамента здравоохранения Краснодарского края, а также на кафедрах Кубанской государственной медицинской академии (аллергологии, клинической иммунологии и лабораторной диагностикифтизиопульмонологии).

Результаты проведенных исследований опубликованы в центральной печати и доложены (всего 12 научных печатных работ). Получен патент Российской федерации на изобретение «Способ диагностики туберкулеза женских гениталий» № 2 002 125 787/14(227 344).

ВЫВОДЫ:

1. Туберкулез женских гениталий сопровождается достоверной депрессией количества активных фагоцитов ПК и ПЖ, их поглотительной и переваривающей способности, независимо от активности туберкулезного процесса. 1.1 Проба Манту при АТЖГ позволяет выявить более существенное, чем в контроле и НТЖГ, увеличение переваривающей способности моноцитов и поглотительнойнейтрофилов крови, относительно исходного уровня.

2. При АТЖГ выявлено двукратное снижение оксидазной биоцидности нейтрофилов и моноцитов/макрофагов ПК и ПЖ при нагрузке туберкулином in vitro, тогда как при НТЖГ имеет место отсутствие ответа на антиген. 2.1 Проба Манту у больных АТЖГ вызывает снижение в 2,5 раза величины коэффициента мобилизации фагоцитов крови, в то время как в перитонеальной жидкости показатели спонтанного и стимулированного NBT-теста не отличались от контроля.

3. В сыворотке крови у больных ТЖГ обнаружено увеличение концентрации ИЛ- 1а, ИЛ-1(3 (главным образом за счет ИЛ-1а), наиболее значительное при АТЖГ.

4.Содержание церулоплазмина в сыворотке крови больных ХНЗГ не отличается от такового в контроле, при НТЖГ возрастает в 1,5 раза относительно здоровых лиц, а при АТЖГ — максимально превышает контрольный уровень (в 3 раза).

5. При ТЖГ выявлена гипериммуноглобулинемия, характеризующаяся более значительным увеличением IgG в сыворотке крови больных АТЖГ и IgMу больных НТЖГ. 5.1 Проба Манту не влияет на уровень содержания иммуноглобулинов основных классов у здоровых лиц и при НТЖГ, тогда как у больных АТЖГ наблюдается достоверное снижение содержания в сыворотке IgA и IgG, относительно исходного, а также увеличение содержания сывороточного IgM и IgG в перитонеальной жидкости.

6. У больных туберкулезом женских гениталий установлено достоверное увеличение концентрации специфических противотуберкулезных антител крови и перитонеальной жидкости, наиболее выраженное при АТЖГ. В отличие от здоровых лиц, больных ХНЗГ и НТЖГ. 6.1 Проба Манту вызывает увеличение концентрации ПТА при АТЖГ, тогда как при НТЖГ и ХНЗГ содержание специфических антител не претерпевает изменений .

7.Предложенный алгоритм диагностики активности ТЖГ с помощью ПТАТ крови до и после сегментарной пробы, а также в пунктате из брюшной полости свидетельствуют о его высокой диагностической значимости (чувствительность метода составила 88.5%).