Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Разработка усовершенствованного метода синтеза 5-фосфотиоэфирных аналогов олигодезоксирибонуклеотидов

Диссертация: Разработка усовершенствованного метода синтеза 5-фосфотиоэфирных аналогов олигодезоксирибонуклеотидов
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Основными вопросами, решению которых посвящена данная работа, являются следующие. Во-первых, проведено систематическое исследование кинетики реакции алкилирования на примере взаимодействия Tps с иодпроизводными lTpsCN Et и IT в ]Щк с целью выяснения ее механизма и поиска путей увеличения ее скорости. Во-вторых, определена зависимость реакционной способности иодпроизводных в данной реакции… Читать ещё >

Разработка усовершенствованного метода синтеза 5-фосфотиоэфирных аналогов олигодезоксирибонуклеотидов (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Глава I. Методы химического синтеза аналогов НК, модифицированных по межнуклеотидным фосфатным группамС обзор литературы)
    • 1. 1. Введение
    • 1. 2. Тиофосфатные аналоги НК
      • 1. 2. 1. Синтез 5'-фосфотиоэфирных (5'1^) аналогов Ж
      • 1. 2. 2. Синтез фосфотионатных аналогов НК
    • 1. 3. Фосфамидные аналоги НК.,
      • 1. 3. 1. Синтез 5'-фосфамидных (5'Рм) аналогов НК
      • 1. 3. 2. Синтез зЦ&осфамидных (3'Рм) аналогов НК
      • 1. 3. 3. Синтез амвдофосфатных аналогов НК
    • 1. 4. Фосфонатные аналоги НК
      • 1. 4. 1. Синтез 3- и б^-фосфонатныхСЗ^и 5jP0) аналогов НК
      • 1. 4. 2. Синтез бЁ-фосфонатныхСЙР^) аналогов НК
      • 1. 4. 3. Синтез 5^-метилфосфонатных (51Р0+) аналогов НК
      • 1. 4. 4. Синтез фосфонометильных (Рс) аналогов НК
    • 1. 5. Синтез фосфотриэфирных (Р^) аналогов НК
    • 1. 6. Синтез фосфитныхСР^) аналогов НК
  • Глава 2. Результаты и обсуждение результатов
    • 2. 1. Исследование кинетики реакции алкилирования
    • 2. 1. Л. Определение порядка реакции алкилирования
      • 2. 1. 2. Зависимость констант скорости реакции алкилирования от различных факторов
        • 2. 1. 2. 1. Зависимость ^ реакции алкилирования от природы противокатионов реагентов
        • 2. 1. 2. 2. Зависимость Kj реакции алкилирования от концентрации воды в реакционной смеси
        • 2. 1. 2. 3. Зависимость Kj реакции алкилированияот добавок солей
        • 2. 1. 2. 4. Зависимость Kj реакции алкилирования от рН. .43 2.1.2.5.Зависимость Kj реакции алкилирования от температуры
      • 2. 1. 3. Рекомендации для синтеза 5'Р^-аналогов НК
    • 2. 2. Синтез электронейтральных мономеров INpgR+
      • 2. 2. 1. Выбор структуры и метода синтеза мономеров
      • 2. 2. 2. Синтез алкилирущего реагента (R+Br)I"
      • 2. 2. 3. Синтез алкилтиофосфатов NpsR+*
      • 2. 2. 4. Реакция иодирования NpsR+
      • 2. 2. 5. Синтез 1Тр^+реакциеЙ переалкилирования ITpsCNEt
    • 2. 3. Исследование кинетики реакции INpsR+o Тр£ в ДШ? А
    • 2. 4. Синтез б’Р^-аналогов олигодезоксирибонуклеотидов
      • 2. 4. 1. Синтез ^-аналогаТ-С*!^ (ХХШ)
      • 2. 4. 2. Синтез б’Р^-аналога гексадекадезоксирибонуклеотида (ХШ
  • Глава 3. Экспериментальная часть
    • 3. 1. Исходные материалы
    • 3. 2. Основные методы работы
    • 3. 3. Методики синтеза
      • 3. 3. 1. Синтез 2−6poM-[N-(п-диэтилметиламино)фенил]прошонамида иодида (R+Br)1~
      • 3. 3. 2. Синтез мономеров INpgR
      • 3. 3. 3. Синтез ITpsR+H3 ITpgCN Et реакцией переалкилирования
      • 3. 3. 4. Синтез 5'Р5-аналогов (ХХШ) и (XXIV)
    • 3. 4. Методики кинетических измерений
    • 3. 5. Реакция циклизации мономеров INpsR+
  • Выводы

Быстрое развитие исследований в области молекулярной биологии и генной инженерии стимулирует не только разработку новых методов синтеза олигонуклеотидов[1,2], но и их разнообразных аналогов [3−5]. Интерес к таким соединениям обусловлен наличием у них специфических физико-химических и биологичест-ких свойств, отсутствующих у природных НК. Основными областями применения таких соединений являются физико-химические исследования, направленные на изучение структуры и функций НК [31, а также исследования, связанные с изучением молекулярных механизмов действия и субстратной специфичности ферментов метаболизма НК [4,5]. Некоторые аналоги НК проявляют противовирусную активность [6,7].

Одними из наиболее перспективных соединений этого типа являются 5^-фосфотиоэфирные аналоги НК, содержащие неприродные Р-$-0(5*)-межнуклеотидные связи Ш-Ю]. Замена 0(5)-атомов на атомы серы приводит к некоторому удлинению межнуклеотид-ной связи в таких производных НК, изменению ее геометрии [II], [12] и появлению новых свойств. Так, они проявляют большую устойчивость к ферментативному гидролизу по сравнению с природными прототипами [10,13], но легко расщепляются окислителями [14]. Вторичная структура таких аналогов похожа на структуру Ж, они образуют комплементарные комплексы с полинуклеоти-дами[9,141. Рассматриваемые аналоги являются субстратами ряда ферментов метаболизма НК, таких, как ДНК-полимераза IE. coli [15], полинуклеотидлигаза и полинуклеотидкиназа фага Т4 СЕ6], а также различных нуклеаз [10,13]. Дальнейший прогресс в этой исследований области связан с расширешешфизико-химических и субстратных свойств таких производных НК с целью выявления перспектив их практического применения. Для обеспечения таких исследований разнообразными по длине и составу 5'Р$-аналогами НК необходим эффективный и быстрый метод их синтеза. Известные методы не обеспечивали решение этой задачи. Они немногочисленны [9,10,17], однотипны и основаны на использовании высокой нуклеофильности тиофосфата[18] и его производных. Ключевой стадией в этих способах является реакция алкилирования Psкомпонента (на первой стадии Nps) 5-активированными нуклеотидными мономерами, например, 5^-0-тозил-[9]или 5Цдезокси-5-иоднуклеозид-30-(5 —Р-цианэтил) тиофосфатами [19,20] в ДИФА или смесях его с водой. Ранее нами было показано, что наибольшая скорость реакции алкилирования достигается при применении Li^-солей Nps и иод-мономеров lNp$CNEt[20−22]. Но скорость реакции и в этом случае была невысокой, уменьшаясь значительно к тому же на конечных стадиях синтеза при увеличении длины и отрицательного заряда Psкомпонента. Нацример, длительность реакции алкилирования на первой стадии синтеза 5PS-аналога нонатимидилата составляла 1ч, а на восьмой — 20ч. Увеличение длины Р5-компонента сопровождается резкш ухудрекием растворимости его Li^-солей в да$А, вследствие чего реакция большую часть времени протекает в гетерофазном режиме, что также приводит к значительному уменьшению ее скорости121]. Перечисленные недостатки ограничивают сферу применения метода [21], наиболее эффективного. из известных, синтезом сравнительно коротких 5'РБ-аналогов НК.

Таким образом, разработка усовершенствованного метода синтеза З^-аналогов олигодезоксирибонуклеотидов, отличающегося от известных способов большей скоростью и эффективностью, являлась весьма актуальной задачей. Ее решение затруднялось практически полным отсутствием данных о механизме реакции алкилирования, лежащей в его основе.

Основными вопросами, решению которых посвящена данная работа, являются следующие. Во-первых, проведено систематическое исследование кинетики реакции алкилирования на примере взаимодействия Tps с иодпроизводными lTpsCN Et и IT в ]Щк с целью выяснения ее механизма и поиска путей увеличения ее скорости. Во-вторых, определена зависимость реакционной способности иодпроизводных в данной реакции от их строения, в частности, от их заряда, aкомпонента — от типа соли. На основе найденных закономерностей выбрана структура иодмономеров и тип соли Ps-компонента, обеспечивающие повышение скорости реакции алкилирования, и разработан метод синтеза таких моно-ров. В-третьих, проведено исследование кинетики реакции полученных мономеров с Tps в ДМФА.

В результате решения указанных задач разработан усовершенствованный метод синтеза 5 Ps-аналогов олигодезоксирибо-нуклеотидов, ключевой стадией которого является реакция алкилирования Вьц//±солей Np^ новыми мономерами — 2', 5-дщдезок-си-5-иоднуклеозид-3−0-^ -P-[lV -(п-диэтилметиламино) фенил]кар-бамоилэтил]тиофосфатами, представляющими собой электронейтральные внутренние соли, в безводном ДМФА. Средние затраты времени на проведение одной стадии синтеза снижены в 10 раз, в том числе на проведение реакции алкилирования — в 100 раз, по сравнению с известным методом [21]. Достигнута независимость скорости реакции алкилирования от длины и заряда Psкомпонента. Эффективность метода продемонстрирована на примере синтеза-аналогов гексатимидилата и гексадекадезоксирибонуклеотида. Структура последнего соответствует одному из фрагментов гена гормона человека ангиотензина I. Доступность 5 Pg-аналогов такой длины позволила существенно расширить, исследование их биохимических свойств, в частности, провести изучение их матричных свойств в системе ДНК-полимеразы I E. coli [15].

— 87 -ВЫВОДЫ.

1. Разработан усовершенствованный метод синтеза 5ч) юсфотж>-эфирных аналогов олигодезоксирибонуклеотидов, содержащих нецри-родные РS-С (b)-межнуклеотидные связи, ключевой стадией которого является реакция алкилирования Buz, A/±солей Nps новыми электронейтральными мономерами IWpsR+ в ДОА. Применение таких мономеров и солей Nps приводит к увеличению скорости реакции алкилирования в среднем, на одну стадию синтеза, более чем в 100 раз по сравнению с известным методом и достижению ее независимости от длины и заряда Psкомпонента. Данным методом синтезированы 5-фосфотиоэфирные аналоги гексатимидилата и гексадекадезоксирибо-нуклеотвда с выходом, соответственно, 51,6 и 12%.

2. Изучен механизм образования нецриродной РS-С (Ймежнук-леотидной связи реакцией алкилирования на примере взаимодейст-. вия различных солей «Ips с галоидпроизводными RX (RX =ITpsCNEt дт,.

BrEt) в ДОА и 96% водном ДОА при 22°. Показано, что: а) порядок этой реакции по 1ps зависит от типа его соли и концентрации: цри увеличении последней в диапазоне 0,001−0,1 М он уменьшается от I до 0 в случае Li и №а±солей Tps и не изменяется в случае тетраалкиламмониевых солей Tps, равняясь Iпорядок реакции. по галоидцроизводным ИХ не зависит от их концентрации и равен Iб) эффективная константа скорости второго порядка реакции алкилирования зависит от типа соли Tps и заряда RX, а константа скорости первого порядка этой реакции — от концентрации воды в реакционной среде, природы и концентрации добавляемой соли, от рН. Наибольшая скорость данной реакции достигается в случае электронейтральных галоидпроизводных RX, Bu^N^cojie Тр$, при рН 7,5−8 в отсутствии воды и солейв) наиболее вероятной причиной обнаруженных зависимостей является. образование ионных аосоциатов реагентов с катионами.

3. На основании полученных кинетических данных предложено использовать в качестве мономеров для синтеза 5^-фосфотиоэфирных аналогов олигодезоксирибонуклеотидов новые соединения — иодпро-изводные нуклеотидов INp$R+, представляющие, собой электронейтральные внутренние соли, и разработан метод их синтеза.

4. Исследована кинетика реакции алкилирования ВьцМ^-солиТрд новыми мономерами INpsR+b №Ш>к при 22°. Установлено, что: а) кинетика данной реакции подчиняется закону второго порядкаб) константа скорости второго порядка изученной реакции в 40 раз превышает соответствующую константу скорости реакции отрицательно-заряженных мономеров INpsCNEt вследствие нейтрализации, отрицательного заряда, осуществленной в иодпроизводных INpsR* .

Показать весь текст

Список литературы

  1. З.А. Методы синтеза фрагментов ДНК.- В кн.: Итоги та-уки и техники, ВИНИТИ АН СССР, сер. молекул, биология, 1980, т. 12, ч.2, 0.6−61
  2. Wu R., Bahl С.P., Narang S.A. Synthetic oligodeoxynuclecfa. des for analyses of ША structure and function, — In: Progress in Hucleic Acids Res, and Mol. Biology, 1978, v.21, Academic Press Hew York etc., p. 102−141
  3. З.А., Гиллер С. А. Модельные аналоги нуклеиновых кислот.- В кн.: Успехи химии гетероцшслов. Рига, 1976, с.307−322
  4. Eckstein Р, Investigation of enzyme mechanisms with nucleosidephosphorothioates.- Angew.Chem.int.edn., 1975, v.14, N 3, p.160 166.5*Eckstein P. Phosphorothioate analogues of nucleotides.- Accounts Chem. Res, 1979, v.12, N 1, p.204−210
  5. Clercq E. de, Eckstein P., Merigan T.C. Interferon induction through chemical modification of a synthetic polyribonucleotide. Science, 1969, v.165, N 3898, p.1137−1143
  6. Eckstein P., Gindl H. Polynucleotides, containing a thiophos-phate backbone, — Eur, J.Biochem., 1970, v.13,N 2, p.558−564
  7. Michelson A.M. Polynucleotides.IY.The synthesis of oligonucleotides analogs, substituted in sugar’s residue.- J.Chem.Soc., 1962, N 3, p.979−982
  8. Nagyvary J., Chladek S., Roe J# The synthesis of 5'-thioanalogs of polydeoxyribonucleotides.- Biochem.Biophys.Res.Commun., 1970s v.39, N 5, p.878−882
  9. Cook A.P. Nucleoside S-alkyl phosphorothioates.IV.Synthesis of nucleoside phosphorothioate monoesters.- J.Amer.Chem.Soc., 1970, v.92, Ы 1, p.190−195
  10. В.A., Рыбаков B.H., Богачев B.C., Ривкин М. Й. Думарев В.
  11. П. Репарирующая репликация 5−5-тиофосфатного аналога гексаде-кадезокоирибонуклеотида, катализируемая ДНК-полимеразой I E.coli.-Биоорган. химия, 1983, т. 9, Ж7, с. 954−957
  12. В.Н., Ривкин М. И., Богачев B.C., Кумарев В. П. Сшивка аналогов олигодезоксинуклеотидов с P-S-ССЙ-связями полинук-леотвдлигазой фага Т4.- Биоорган. химия, 1981, т.7, $ 9, с.1423−1425
  13. A.C.9I065KCCCP). Способ получения олигодезокситиотимцдила-тов/ В. П. Кумарев, В. С. Богачев, Л. В. Баранова, В. Ф. Кобзев.-Опубл. в Б.И., 1982, № 9
  14. В.А. Основы количественной теории органических реакций. -2-е изд.перераб. и доп.- Л: Химия, Ленинградское отд., 1977, с. 335, 94−95
  15. A.C.9I0650(CCCP). Производные дезокситионуклеотидов как мономеры для синтеза полидезокситионуклеотвдов и способ их получения/ В. П. Кумарев, В. С. Богачев, В. Ф. Кобзев, Л.В.
  16. Баранова, — Опубл. в Б.И., 1982, В 9
  17. В.П., Богачев B.C., Кобзев В. Ф., Баранова А.вУшофосфатные аналоги нуклеиновых кислот.II. Синтез и свойства б-Б-тиофосфатных аналогов олигодезоксирибонуклеотидов.- Биоорган, химия, 1982, т.8, 16 II, с.1525−1534
  18. А.С.89 9571(СССР). Олигодезокситионуклеотиды, проявляющие матричные свойства в РНК-полимеразной системе E. coli/ В. П. Кума-рев, B.C.Богачев, В. Ф. Кобзев, Л. В. Баранова, М. И. Ривкин.-Опубл, в Б.И., 1982, Л 3
  19. Nemer M.J., Ogilvie К.К. Ribonucleotide analogues having novel intemucleotide linkages.- Tetrahedron lett., 1980, v.21, H 43, p.4149−4152
  20. Letsinger R.L., Lunsford W.B. Synthesis of thymidine oligonucleotides by phosphite triester intermediates.- J.Amer. Chem.Soc., 1976, v.98, Ж 11, p.3655−3661
  21. Г. Новые направления в химии биологически важных эфи-ров фосфорной кислоты.-М. :Мир, 1964, с. ПО-143
  22. Letsinger R.L., Muiigall W.S. Phosphoroamidate analogs of oligonucleotides." J.Org.Chem., 1970, v.35, N 11, p.3800−3803
  23. Agarwal K.L., Yamazaki A., Cashion P.I., Khorana H.G. Chemical synthesis of polynucleotides.- Angew.Chem.int.edn.Engl., 1972, v.11, N 6, p.451−459
  24. Eckstein P. Diuridine-3', 5 '-thiophosphate.- Tetrahedron Lett., 1967, N 36, p.3495−3499
  25. P. Структура и механизм реакций фосфорорганических соединений,— М.: Мир, 1967, с.146−149
  26. Malkieviez А., Smrt J. Synthesis of thymidinephosphorothio-yl (0^)thymidine via phosphorothioate-0,0,S-triesters.~ Tetrahedron Lett., 1973, N 7, p.491−492
  27. Malkievicz A., Smrt J. Oligonucleotidic compounds.XLII. Synthesis of thymidi^hosphorothioylCO^'-O^')thymidinephosphoro-thioylCO^'-O5')thymidine.- Coll.Czech.Chem.Commun., 1973, v.38, H 10, p.2953−2961
  28. Malkievicz A., Smrt J. Oligonucleotidic compounds.XLIII.Synthesis of some diribonucleoside phosphates analogues containing the phosphorothioic-0,0-diester bond.- Coll.Czech.Chem.Commun<1973, v.38, N 10, p.2962−2975
  29. Burgers P.M.J., Eckstein P. Diastereomers of S'-adenosyl^'-O-uridyl-phosphorothioate: chemical synthesis and enzymatical properties.- Biochemistry, 1979, v.18, N 4, p.592−596
  30. Burgers P.M.J., Eckstein P. Synthesis of dinucleosidemono-phosphorothioates via addition of sulphur to phosphite tri-esters.-Tetraheron Lett., 1978, N 40, p.3835−3838
  31. Marlier I.P., Bencovic S.I. A highly efficient chemical synthesis of Rp and Sp adenylO'-S'Jadenyl-OjO-phosphorothioate.-Tetrahedron Lett., 1980, v.21, N 12, p.1121−1124
  32. Lesnikowski Z.J., Smrt J., Stec W.J., Zielinski W.B. A new rout to 0,0-dinucleoside esters of phosphorothionic acids.-Bull.Acad.pol.Sci.ser.sci.chim., 1978, v.26, N 9, p.661−663.
  33. Uznanski В., Wiewiarowski W., Stec W.J. The chemical synthesis of Rp and Sp diastereomers of thymidyl-(3'-5')thymidyl-0,0-phosphorothioate.- Tetrahedron Lett., 1982, v.23, Iff 41, p.4289−4292
  34. Green G.L., Letsinger R.L. Formation of internucleotide 3'-5' phosphoroamidate links by direct coupling of a phosphoryl and amino groups.- Nucl. Acids Res., 1975, v.2, N 7, p.1123−1127
  35. Letsinger R. L, Heavner G.A. Synthesis of phosphoromonoami-date diesters nucleotides via the phosphite-azide coupling method.- Tetrahedron Lett., 1975, U 2, p.147−150
  36. A.B., Кочеткова С. В., Озоло A.M., Цилевич Т.А. Синтез
  37. З-амино-З-дезоксинуклеозидов и их производных.-В кн.: Новости химии нуклеозидов и нуклеотидов. Рига, I978, c.9-II
  38. Н.И., Киселева Е. Г., Горкун А. Ф., Шабарова З. А. Новый метод синтеза олигодезоксирибонуклеотидов с фосфамид-ной межнуклеотидной связью.- Биоорган. химия, 1984, т. 10,1. I, с.75−78
  39. О.Е., Соколова Н. И., Мельникова В. И., Шабарова З. А., Прокофьев М. А. Динуклеозидфосфо-(Рм-«н)-аминокислоты.- Докл. АН СССР, 1966, т.166, J& I, с.95−98
  40. Н.И., Гурова Г. И., Шабарова З. А., Прокофьев М. А. Нуклеопептиды. Синтез тимидилил- (35) -аденозино (Р N)-амидов. Вестник МГ7, сер. химия, 1969, № 5, с. 104−105
  41. Н.И., Пономаренко И. В., Шабарова З. А., Прокофьев М. А. Обратимая модификация межнуклеотидных фосфатных груш в олигодезоксирибонуклеотидах.- Докл. АН СССР, 1980, т.253, В 6, с.1395−1398
  42. Н.И., 1*урова Г.И., Гатинская А. Г., Шабарова З. А., Прокофьев М. А. Свойства межнуклеотидного-(Рм-*н)-узла в модельных соединениях.- Мол. биология, 1969, t.3,b.6,c.837−845
  43. В.К., Вейко В. П., Шабарова З. А. Блокирование межнуклеотидной фосфатной группы при твердофазном синтезе олиго-дезоксирибонуклеотидов.- Биоорган. химия, 1979, т.5,113,с.468−470
  44. Nemer M. J#, Ogilvie К.К. Phosphoramidate analogues of diri-bonucleoside monophosphates.- Tetrahedron Lett., 1980, v.21, N 43, p.4153−4154
  45. Letsinger R.L., Schott M.E. Selectivity in binding a phenan-thridium-dinucleotide derivative to homopolynucleotides.- J. Amer.Chem.Soc., 1981, v.103, N 24, p.7394−7396
  46. Jones G.H., Albrecht H.P., Damodaran N.P., MoffattJ.G. Synthesis of isosteric phosphonate analogs of some biologically important phosphodiesters.- J.Amer.Chem.Soc., 1970, v.92,1. К 18, p.5510−5511
  47. Holy A., Guinberger D., Smrt J., Sorm P. Synthesis of a GpUpU analogues containing 5,-deoxyuridine-5,*-phosphonicacid and its effect upon the binding ofдУа1уд ^ 14c alanyl-tRNA to ribosomes.- Biochim.Biophys.Acta, 1967″ v. 138, N 1, p.207−209
  48. Rammler D.H., Bagdasarian A., Morris F. Inhibition of mic-rococcal nucleas with 5'-deoxythymidine-5'-phosphonic acid containing oligomers.-Biochemistry, 1972, v.11,N 1, p.9−12
  49. Rammler D.H., Yengoyan L., Paul A.V., Bax P. S. Nucleoside phosphonic acids, II, The synthesis of 5'-deoxythymidine 5'-phosphonic acid and its pyrophosphate derivatives.- Biochemistry, 1967, v.6, N 6, p.1828−1837
  50. Holy A. Synthesis and biological activity of some analogues of nucleic acid components.- Ins Phosphorus chemistry directed towards biology. New York, 1980, p.53−54
  51. Agarwal K.L., Riftina P. Synthesis and enzymatic properties of deoxyribooligonucleotides containing methyl and phenyl phosphonate linkages.- Nucl. Acids Res., 1979, v.6, N 9, p. 3009−3024
  52. Miller P. S., Yano J., Yano E., Carrol C., Yagraman K., Ts’o P.O.P. Nonionic nucleic acid analogues. Synthesis and characterization of dideoxyribonucleoside methyl phosphonates.-Biochemistry, 1979, v.18, N 23, p.5134−5143
  53. Catlin J.C., Cramer P. Deoxyoligonucleotide synthesis via the triester method.- J#Org.Chem., 1973, v.38,N2,p.245−252
  54. Stawinski J., Hozumi Т., Narang S.A., Bahl C.P., Wu R. Aryl-sulfonyltetrazoles, new coupling reagent and further improv-ments in the triester method for the synthesis of deoxyribooligonucleotides.- Nucl. Acids Res., 1977, v.4,N1,p.353−371
  55. Kraszewski A, Stawinski J., Wiewiorowski M. The case of SUlphonation in the chemical synthesis of oligonycleotides.-Nucl.Acids Res., 1980, v.8, N 10, p.2301−2305
  56. Knorre D.G., Zarytova V.F. Reactive phosphorylating intermediates in nucleic acid chemistry.- In: Phosphorus chemistry directed towards biology. New York, 1980, p.13−31
  57. Miller P. S., Dicon N., Pulford M., Mc. Parland K.B. Oligo-thymidilate analogues having stereoregular alternating me-thylphosphonate/ phosphodiester backborn.- J.Biol.Chem., 1980, v.255, N 20, p.9659−9665
  58. Miller P. S., Agris C.H., Murakami A., Reddy P.M., Spits S.A., Ts’o P.O.P. Preparation of oligodeoxyribonucleoside methyl-phosphonates on a polysterene support.- Nucl. Acids Res., 1983, v.11, N 18, p.6225−6242
  59. Michelson A.M., Todd A.R. Nucleotides. Part XXXII. Synthesis of a dithymidine dinucleotide containing a 3':5'-internuc-leotidic linkage.- J.Chem.Soc., 1955* ^ 8, p.2632−2638
  60. Letsinger R.L., Mahadevan V. Oligonucleotide synthesis on a polymer support.- J.Amer.Chem.Soc., 1965, v.87,N15,p.3526−3527
  61. Eckstein P., Rizk J. Synthese von oligonucleotiden uber phosphorsauretriester.- Angew.Chem., 1967, bd.79,N 1513.684−687
  62. Rees C.B., Saffhill R. Oligonucleotide synthesis via phos-photriester intermediates: the phenyl-protecting group.-J.Chem.Soc.Chem.Commun., 1968, N 13, p.767−768
  63. Miller P. S., Pang K.N., Kondo N.S., Ts’o P.O.P. Synthesis and properties of adenineand thymine nucleosides alkyl phos-photriesters, the neutral analogs of dinucleoside monophosphates.- J.Amer.Chejjt.Soc., 1971 „v.93, H 22, p.6657−6665
  64. Miller P. S., Barrett J.S., Ts'o P.O.P. Synthesis of oligode-oxyribonucleotide ethyl phosphotriesters and their specific complex formation with transfer Ribonucleic acid.- Biochemistry, 1974, v.13, IT 13, p.4887−4896
  65. Smrt J. Protection of the internucleotidic bond after its synthesis. An approach to the synthesis of oligonucleotidic chain“. -Tetrahedron Lett., 1972, IT 33, p.3437−3438
  66. Boer de, G., Miller P. S., Ts’o P.O.P. Hydrogen-bonded complexes of adenine and thymine nucleoside alkyl phosphotri-esters in deuteriochloroform.- Biochemistry, 1973, v.12, N 4, p.720−726
  67. В.A., Поздняков П. И., Сиволобова Г. Ф., Шубина Т. Н. Неионные аналога олигонуклеотидов. Синтез триэфирных олиго-нуклеотидов. реакцией переэтерификации.- Биоорган. химия, 1980, т.6, Xt 3, с.431−435.
  68. В.А., Поздняков П.й. Синтез триэфирных аналогов ди^езоксинуклеози^осфатов, содержащих остаток гидроксил-амина.- Биоорган. химия, 1983, т. 9, № 6, с.832−837
  69. Т.В., Лебедев А. В. Исследования диастереомеров неионных аналогов олигонуклеотидов. Синтез и разделение диастереомеров этиловых эфиров ди- и тетратимидилатов.- Биоорган, химия, 1983, т.9, № 6, с.824−831
  70. Doub G.W., Tamelen, van, E. E, Synthesis of oligoribonucleo-tides based on facile cleavage of methyl phosphotriester intermediates. -J. Amer. Chem, Soc., 1977, v, 99, N40, p. 3525−3528
  71. Kraus С.A. The ion-pair concept.: its evolution and some application.» J.Phys.Chem., 1956, v.60, N 2, p.129−141
  72. А. Д. Скорости реакции бимолекулярного. замещения в протонных и диполярных апротонных растворителях.- Успехи химии, 1971″ т.40, в.12, с.2203−2249
  73. HO.Winstein S., Savedoff L.G., Smith S., Stevens J.D.R., Gall J. S, Ion pair, nucleophilicity and salt effect in bimolecular nucleophilic substitution.- Tetrahedron Lett. ,.*I960,N9,p.24−3!
  74. Evans C.C., Sugden S. Exchange reactions and electrolytic dissociation in non-aqueus solvents.- J.Chem.Soc., 1949, H 2, p.270−273
  75. Berg A., Ugelstad J. The effect of the solvent on the reaction of Na+ and K+PhO~ in nucleophilic substitution reactions. Part II. Relative reactivity of Na+ and K+PhO~ in different aprotic solvents.-Acta Chem.Scand., 1965"v.19, N 3, p* 742−750
  76. ИБ.Широбоков Й. Ю., Островский В. А., Колдобский Г. И. Тетразолы. 1У. Кинетика реакции алкилирования калиевой, соли 5-фенилтет-разола диметилсульфатом в ацетонитриле, — Ж.Орган.химии, 1979, т.15, вып.4, с.839−844
  77. Н.М., Кнорре.Д. Г. Курс химической.кинетики.- 3^-е изд., перераб. и доп.-М. :Высшая школа, 1974, с. 114,116−117,120
  78. П7.Ингольд К. Теоретические основы органической химии.- М.: Мир, 1973, с.372−373, 391−392тто
  79. J-xo*Verheyden J.P.H., Moffatt J.G. Halosugar nucleosides. Iodination of the primary hydroxyl groups of nucleosides with methyl-triphenoxyphosphonium iodide.- J.Org.Chem., 1970, v.35, N 7, p.2319−2326
  80. А.С.98 8824(СССР). Способ получения иодпроизводных дезокси-тионутслеотидов/ В. П. Кумарев, В. С. Богачев, В. Ф. Кобзев, Л. В. Баранова, Н. С. Кобзева.- Опубл. в Б.И., 1982, № 2
  81. Терней А. Современная органическая химия.-М:Мир, 1981, т2,с548
  82. Микельсон А. Химия нуклеозидов и нуклеотидов.М.:Мир, 1966, с510
  83. Jardetzky О., Roberts С.К. NMR in molecular biology.- New York etc.: Academic Press, 1981, p.187
  84. Kumarev V.P., Rivkin M.I., Bogochev V.S., Baranova L.V., Merculov VM." Rybakov V.N. Molecular cloning of synthetic angio-tensine I gene in E.coli. Rout to phisiologically active hormone. FEBS Lett., 1980, v.114,N 2, p.273−277
  85. A.C.92 5964(СССР).Способ получения полидезоксинуклеотидов/ В. П. Кумарев, B.C.Богачев, Л. В. Баранова, М. И. Ривкин.-Опубл.в Б.И., 1982, № 17
  86. Schwarz/mann radiochemical/biochemical catalog, 1977, p.91
  87. Tu C.P.D., JayE., Bahl C.P., Wu R. A reliable mapping metbod for sequence determination of oligodeoxyribonucleotides by mobility shift analysis.-Analyt.Biochem., 1976, v.74,N1,p.74−93
  88. Jay E., Bambara R., Padmanabhan R., Wu R. DNA sequence analysis: a general, simple and rapid method for sequencing large oli-godeoxyribonucleotide fragments by mapping.- Nucl. Acids Res., 1974, v.1, N 2, p.331−353
  89. К., Хильгетаг Г. Методы эксперимента в органической химии.- М. :Химия, 1968, с.235
  90. А., Сержент Е. Константы ионизации кислот и оснований.-М.-Л. :Химия, 1964, с.63
  91. ТЗО.Беккер Г., Бергер В. и др.Органикум.- М. :Мир, 1979, т.2,с.353
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!