Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Совершенствование средств мониторинга блютанга на основе полимеразной цепной реакции

Диссертация: Совершенствование средств мониторинга блютанга на основе полимеразной цепной реакции
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Основной объем исследований проведен автором самостоятельно. Консультативную и методическую помощь при выполнении отдельных этапов работы оказывали следующие сотрудники института: к.б.н. Малоголовкин A.C. (освоение молекулярно-биологических методов, клонирование рекомбинантной плазмиды). Часть работы по выделению вируса выполнена совместно с аспирантом лаборатории Диагностики Вялых И. В… Читать ещё >

Совершенствование средств мониторинга блютанга на основе полимеразной цепной реакции (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
  • 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Характеристика вируса блютанга
      • 1. 1. 1. Устойчивость к физико-химическим воздействиям
      • 1. 1. 2. Структурная организация генома и полипептидный состав вируса
    • 1. 2. Антигенные свойства вируса блютанга
    • 1. 3. Патогенез, тропизм, цикл репродукции вируса
    • 1. 4. Клиническая картина блютанга
      • 1. 4. 1. Клинические признаки у КРС
      • 1. 4. 2. Клинические признаки у овец
    • 1. 5. Эпизоотическая ситуация по блютангу в мире
    • 1. 6. Эпизоотическая ситуация по блютангу в Европе
    • 1. 7. Диагностика блютанга
      • 1. 7. 1. Применение ПНР в идентификации вируса блютанга

Актуальность.

В 2006 г. в Западной Европе было зарегистрировано заболевание блютангом. В последующем установлено, что болезнь вызывается вирусом, относящимся к 8 серотипу. Актуальность блютанга для Российской Федерации значительно возросла с начала 2006 г., когда российскими внешнеторговыми организациями был начат импорт племенного крупного рогатого скота из стран Евросоюза, в том числе из неблагополучных по нему стран. Блютанг может быть занесен в Россию не только из стран Евросоюза, но и из стран Центрально-Азиатского и Дальневосточного регионов. Кроме того, на территории России есть все условия для «укоренения» заболевания. Прежде всего — это наличие различных видов мокрецов, потенциальных резервуаров и переносчиков вируса (С. йеюиЩ, С. оЪяоШш, С. риИсаггх и др), которые вызвали распространение болезни в странах Европы (Захаров В.М., 2007, 2009). В целом необходима строгая целенаправленная система, предусматривающая комплекс мер по недопущению заноса болезни, включающих раннюю диагностику, четкие схемы мониторинга и надзора, эффективные противоэпизоотические мероприятия. Согласно «Санитарному кодексу наземных животных МЭБ» основными методами диагностики блютанга при экспорте животных являются ИФА и ОТ-ПЦР. Одним из достоинств ПЦР-анализа является обнаружение вирусного генома у животных, начиная с первых дней заболевания, когда еще не сформировался иммунный ответ организма.

Таким образом, при ввозе животных из неблагополучных стран или зон, а таюке в ходе проведения противоэпизоотических мероприятий при вспышках блютанга необходимо проведение быстрых и эффективных лабораторных исследований, позволяющих в кратчайшие сроки выявить возбудитель.

Избирательная амплификация отдельных участков вирусного генома с помощью полимеразной цепной реакции, дополняя серологические методы, открывает новые возможности для разработки тест-систем для идентификации вируса блютанга. В 2003 г. Снетковым К. А. были разработаны наборы препаратов для выявления РНК вируса блютанга и ЭГБО методом ПЦР с электрофоретической детекцией результатов. В 2008 г. сотрудниками лаборатории Биофизики ГНУ ВНИИВВиМ был усовершенствован набор препаратов для выявления генома вируса блютанга методом ПЦР с электрофоретической детекцией.

Одним из перспективных направлений является использование метода ПЦР в режиме реального времени. Его принципиальной особенностью является количественная оценка динамики накопления продуктов полимеразной цепной реакции с автоматической регистрацией результатов. Он позволяет получать результат в 2−3 раза быстрее по сравнению с классической ПЦР с электрофоретической системой детекцииснижает риск контаминации, связанный с исключением 3-го этапа ПЦР (электрофореза) — использование внутреннего контрольного образца (ВКО) позволяет проследить прохождение реакции в каждой пробе, что согласно новым рекомендациям МЭБ (OIE, 2008) является необходимым условием при создании тест-систем на основе ПЦР.

Цель и задачи исследований.

Целью данной работы является совершенствование и разработка молекулярно-биологических средств мониторинга блютанга в пробах крови и патологического материала на основе полимеразной цепной реакции.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Подобрать специфические праймеры и олигонуклеотидные зонды для идентификации генома вируса блютанга.

2. Разработать тест-систему на основе метода ПЦР в режиме реального1 времени для идентификации генома вируса блютанга, содержащую внутренний контрольный образец (ВКО), при исследовании материала от инфицированных животных.

3. Провести сравнительное изучение чувствительности и специфичности разработанных тест-систем с использованием праймеров, комплементарных различным участкам генома вируса блютанга.

4. Провести мониторинговые исследования на наличие генома вируса блютанга в пробах крови, взятых от импортированных животных, с использованием разработанных тест-систем.

Научная новизна работы.

Подобраны специфические олигонуклеотиды к различным сегментам генома вируса блютанга, использование которых в ПНР позволяет выявлять вирус в низкой концентрации.

Разработана «Тест-система» с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов реакции в режиме реального времени для выявления генома вируса блютанга с использованием внутреннего контрольного образца. Показана высокая чувствительность метода, которая составила 1,5 ^ ТЩЬо/см3. Модифицированная методика ОТ-ПЦР в режиме реального времени с предварительной амплификацией специфического участка кДНК позволила повысить чувствительность метода до 0,5 ^ ТЦД50/см3.

С помощью комплекса молекулярно-биологических методов (ОТ-ПЦР в режиме реального времени, нуклеотидного секвенирования и последующего филогенетического анализа 10-го сегмента генома) при исследовании животных, импортированных из стран ЕС, идентифицирован 8-ой серотип вируса блютанга.

Установлено, что геном вируса блютанга выявляется в пробах крови и патологического материала от инфицированных животных в течение 90 дней у овец и 173 дней у КРС (период наблюдения), начиная с 3 дня после заражения.

Практическая значимость.

Разработанная «Тест-система для выявления генома вируса блютанга (ВБ) методом ОТ-ПЦР в режиме реального времени» утверждена Россельхознадзором (ПВР-1−5.0/2 618 от 30.08.2010 г.) и внедрена в практику для выявления РНК вируса блютанга в пробах крови, патологического материала и в инфицированных культурах клеток.

Для использования ветеринарнойшрактикой разработаны «Методические рекомендации по выявлению генома вируса блютанга (ВБ) методом ОТ-ПЦР в режиме реального времени», утверждены директором ГНУ ВНИИВВйМ Россельхозакадемии (28- 1 212 009 г.), а также рассмотрены и одобрены на секции «Инфекционной патологии» Отделения ветеринарной медицины РАСХН (30.09.2010г.).

Публикации результатов исследований По теме диссертации опубликовано: 5 научных статей, в том числе 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК РФ. '.

Апробация работы Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на заседаниях Ученого совета ГНУ ВНИИВВйМ (2008;2010 гг.).

Материалы" диссертации доложены на конференции молодых ученых. ГНУ ВНИИВВйМ Россельхозакадемии «Актуальные проблемы инфекционной, патологии ветеринарной медицины» (г. Покров, 2009 г.), Международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов», посвященной! 40-летию ВНИТИБП (г. Щелково, 2009 г.).

Основные положения, выносимые иа защиту:

1. Получена". тест-система на основе ОТ-ПЦР в режиме реального времени, содержащая внутренний контрольный образецдля идентификации генома вируса блютанга в пробах крови и патологического материала от инфицированных животных.

2: Установленачувствительность и специфичностьусовершенствованных и разработанных тест-систем с использованием праймеров, гомологичных различнымсегментам генома вируса блютанга.

3. Получены данные мониторинговых исследований распространения блютанга на территории РФ с использованием разработанных тест-систем на основе ОТ-ПЦР.

Структура и объем диссертационной работы.

Диссертация изложена на 145 страницах, включая приложение. Иллюстрирована 26 таблицами и 28 рисунками.

Список литературы

включает 135 источников, в том числе 99 зарубежных авторов.

Личный вклад автора в выполнении работы.

Основной объем исследований проведен автором самостоятельно. Консультативную и методическую помощь при выполнении отдельных этапов работы оказывали следующие сотрудники института: к.б.н. Малоголовкин A.C. (освоение молекулярно-биологических методов, клонирование рекомбинантной плазмиды). Часть работы по выделению вируса выполнена совместно с аспирантом лаборатории Диагностики Вялых И. В. и сотрудником Отдела биологического и технологического контроля (ОБТК) Бобровской Н.К.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

5. ВЫВОДЫ.

1. На основе анализа банка нуклеотидных последовательностей подобраны уникальные праймеры, комплементарные участку 5 сегмента генома вируса блютанга, а также дополнительный специфический праймер, комплементарный участку 10 сегмента генома. Отработаны оптимальные условия постановки «полугнездовой» ОТ-ПЦР, позволяющей выявлять геном вируса блютанга в пробах крови и патологического материала.

2. Разработанная тест-система на основе ОТ-ПЦР в режиме реального времени, содержащая внутренний контрольный образец, позволяет выявлять наличие генома вируса блютанга с аналитической чувствительностью 1,5 lg.

3 3.

ТЦД50/см (675 копии кДНК/см) в пробах крови больных животных, начиная с 3 суток после заражения.

3. Модифицированная методика ОТ-ПЦР в режиме реального времени с предварительной амплификацией специфического участка кДНК, л обеспечивает увеличение пороговой чувствительности до 0,5 lg ТЦД50/см .

4. Установлено, что геном вируса блютанга персистирует в организме экспериментально зараженных животных в течение 173 (КРС) и 90 (MPC) суток после заражения (период наблюдения) с пиком виремии, приходящимся на 7−9 сутки после заражения.

5. Установлено различными вариантами ОТ-ПЦР наличие генома вируса блютанга в пробах крови КРС, импортированных из Голландии, Германии, Швейцарии и Австрии. За период 2008;2009гг выявлено 100 положительных из 85 390 проб крови.

6. По результатам филогенетического анализа изолят ФКл/4−09 (Суворовский), выделенный в ГНУ ВНИИВВиМ, имеет высокую степень гомологии (98%) с группой европейских и южно-африканских изолятов, формирующих один генетический кластер 8-го серотипа вируса блютанга.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Разработана и утверждена Россельхознадзором (ПВР-1−5.0/2 618 от 30.08.2010 г.) тест-система на основе ОТ-ПЦР в режиме реального времени, позволяющая в короткие сроки выявлять геном вируса блютанга в пробах крови и патологического материала при проведении мониторинговых исследований.

На основании проведенных исследований разработаны, утверждены и рекомендованы для практического использования в диагностических лабораториях Российской Федерации, а также научно-исследовательских учреждениях:

1. «Методические рекомендации по выявлению генома вируса блютанга (ВБ) методом ОТ-ПЦР в режиме реального времени» утверждены директором ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии (28.12.2009г.). Рассмотрены и одобрены на секции «Инфекционной патологии» Отделения ветеринарной медицины РАСХН (30.09.2010г.).

Показать весь текст

Список литературы

  1. Анализ риска заноса блютанга (катаральной лихорадки овец) со скотом, импортируемым в Россию из стран Западной Европы/ А. К. Караулов,
  2. B.М. Гуленкин, М. А. Титов, В. М. Захаров, Н. С. Дудникова, CA. Дудников// Российский ветеринарный журнал СХЖ. — 2008. — Спец. выпуск сентябрь.1. C.33−35.
  3. Блютанг скрытая угроза/ Д. В. Кол басов, A.A. Коломыцев, К. А. Снетков, A.B. Книзе, С.А. Коломыцев// Ветеринарная жизнь. — 2006. — № 17. -С.6.
  4. Блутанг (катаральная лихорадка овец)// Российский ветеринарный журнал СХЖ. 2008. — Спец. выпуск. — сентябрь. — С.49−50.
  5. Вирусные болезни животных/ В. Н. Сюрин, А. Я. Самуйленко, Б. В. Соловьев, Н. В. Фомина.- М.: ВНИТИБП, 1998.- 928с.
  6. Вспышка катаральной лихорадки овец в Бурятии/ В. П. Левченко, Г. А. Угрюмов, В. Г. Гончиков, Б. Б. Цыдыпов, А. К. Пуев, М. Г. Штыбова, Д.А. Петухов// Ветеринария. 1995. — № 4. — С.7−8.
  7. , В.М. Комплексность мер по предотвращению заноса и распространения блютанга в Российской Федерации/ В.М. Захаров// Ветеринария. 2009. — № 5. — С.3−5.
  8. Идентификация и типирование вируса катаральной лихорадки овец/ И. Ф. Вишняков, A.A. Стрижаков, М. Б. Новикова, А. В. Луницин, В. В. Куриннов, Г. М. Карпов, В. И. Балышева, К.С. Волокитина// Ветеринария. -1995. -№ 4.-С.20−25.
  9. , A.B. Блютанг продвигается на восток эффективные методы его предотвращения/ A.B. Луницин// Ветеринарная жизнь. — 2008. -№ 21. — С.З.
  10. Метод ингибирования ИФА для серологического мониторинга блютанга/ A.A. Стрижаков, М. Б. Новикова, В. В. Куриннов, A.B. Луницин// Ветеринария. 2003. — № 12. — С.23−25.
  11. , П.М. Патологоанатомическая диагностика малоизвестных инфекционных болезней сельскохозяйственных животных. -Саранск, 1997.- 105с.
  12. Сборник статей Международной научно-практической конференции/ ГНУ ВНИИВВиМ.- Покров, 2000. С. 143−146.
  13. , М.Б. Непрямой вариант ТФ ИФА для выявления антител, специфичных к вирусу KJIO/ М. Б. Новикова, И. Ф. Вишняков, Б.В. Новиков// Институт экспериментальной ветеринарной медицины: информ. бюл. 1994. — Харьков, 1995.-С.55.
  14. Особо опасные болезни животных. Справочник/ И. А. Бакулов, В. М. Котляров, A.C. Донченко, И. Ю. Хухоров, С. Ф. Терновая, A.B. Книзе.- Покров-Новосибирск, 2002. С.99−109.
  15. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)/ H.A. Федоров, Ю. С. Суханов, А. Х. Асади Мобархан, М. И. Артемьев, — М., 1996.- С. 36.
  16. ПЦР «в реальном времени"/ Д. В. Ребриков, Г. А. Саматов, Д. Ю. Трофимов, П. А. Семенов, A.M. Савилова, И. А. Кофиади, Д. Д. Абрамов.-М.: Бином. Лаборатория знаний, 2009.- 223с.
  17. Распространение блютанга в Европе и его реальная угроза для животноводства России/ В. М. Захаров, В. М. Гуленкин, А. К. Караулов, С.А.Дудников// Российский ветеринарный журнал. 2007. — № 4. — С.4−6.
  18. Система эпизоотологического мониторинга особо опасных экзотических, малоизученных, в том числе зооантропонозных болезней животных/ И. А. Бакулов, A.B. Книзе, В. М. Котляров, И. В. Дмитренко, A.A. Коломыцев, A.JI. Семенихин. М., 2001. — 76с.
  19. , К.А. Идентификация возбудителей блютанга и эпизоотической геморрагической болезни оленей с помощью ПЦР: Дис.канд. биол. наук 03.00.06/ Константин Александрович Снетков -Покров, 2003.-116с.
  20. , А.В. Разработка методов диагностики микоплазмозов кур и изучение изолятов Mycoplasma gallisepticum, выявленных на территории Российской Федерации: Дис.канд. биол. наук 03.00.23/ Александр Владимирович Спрыгин Щелково, 2009. — 144с.
  21. , А.А. Получение и использование моноклональных антител к вирусу KJIO: автореф. дис. канд. биол. наук 03.00.06/ Всерос. НИИ вет. вирусологии и микробиологии. Покров, 1994 — 25с.
  22. , А.А. Создание средств эпитопного анализа структурных и неструктурных полипептидов вируса блютанга/ А.А. Стрижаков// Вестник РАСХН. 2003. — № 3. — С.63−66.
  23. , В.Н. Частная ветеринарная вирусология/ В. Н. Сюрин, Н. Ф. Фомина,-М.: Колос, 1979.- С. 174−181.
  24. , В.Н. Диагностика вирусных болезней животных. Справочник/ В. Н. Сюрин, Р. В. Белоусова, Н. В. Фомина.- М.: ВО Агропромиздат, 1991.- С.254−270.
  25. Сэндвич-метод твердофазного иммуноферментного анализа на основе моноклональных антител для обнаружения антигенов вируса блютанга/
  26. A. А. Стрижаков, М. Б. Новикова, В. В. Куринов, А.В. Луницин// Сельскохозяйственная биология. 2003. — № 4. — С. 114−120.
  27. , A.M. Разработка ПЦР в реальном времени для выявления и количественной оценки Mycoplasma hyopneumoniae/ A.M. Тимина, М. В. Челышева, А.В. Щербаков// Российский ветеринарный журнал СХЖ. 2008. -Спец.выпуск .— сентябрь. — С.53−55.
  28. , Д. Особенности проявления инфекционной катаральной лихорадки овец в Намибии/ Д. Шоопала// Ветеринария. 2005. — № 12. — С.22−23.
  29. , Б.Ф. Блутанг новая угроза животноводству России?/ Б. Ф. Шуляк // Российский ветеринарный журнал. — 2007. — № 1. — С.2−3.
  30. Эпизоотология и меры борьбы с блютангом/ А. А. Стрижаков, Н. И. Закутский, А. А. Коломыцев, А.В. Книзе// Ветеринария. 2008. — № 8. — С. 1822.
  31. Эпизоотологический лексикон: учебное пособие для с.-х. вузов/
  32. B.В. Макаров, А. А. Гусев, Е. В. Гусева, О. И. Сухарев. М.: Колосс, 2001. -176с.
  33. A comparison of different orbivirus proteins that could affect virulence and pathogenesis/ H. Huismans, V. Van Staden, W.C. Fick, M. van Niekerk, T.L. Meiring //Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N4. — P.417−425.
  34. A possible overwintering mechanism for bluetongue virus in the absence of the insect vector/ H. Takamatsu, P. S. Mellor, P.C. Mertens, P.A. Kirkham, J.N. Burroughs, M.E. Parkhouse// J. Gen. Virol. 2003. -Vol.84, N1. — P.227−235.
  35. Abu Elzein, E.M.E. Bluetongue in Sudan/ E.M.E. Abu Elzein// Rev. sci. tech. OffintEpiz. 1985. — Vol.4, N4. -P.795−801.
  36. Alexander, G.I. Bluetongue research in Australia —1993/ G.I. Alexander, G. Gpgard // Australian Veterinary Journal.- 1994.- Vol.71, N6.-P.182−183.
  37. Bandyopadhyay, S.K. Detection of bluetongue vims genome segment 6 sequences by RT-PCR/ S.K. Bandyopadhyay, R.S. Kataria, A.K. Tiwari// Indian J. of Experimental Biology. 1998. — Vol.36.- P. 1034−1037.
  38. Barrat-Boyes, S.M. Pathogenesis of bluetongue virus infection of cattle/ S.M. Barrat-Boyes, N.J. MacLachlan// J. Am. Vet. Med. Assoc. 1995. -N206. -P.1322−1329.
  39. Bexiga, R. Differential diagnosis of bluetongue 8/ R. Bexiga, H. Guyot, G. Saegerman // Bluetongue in northern Europe. 2008.- P.57−68.
  40. Bluetongue in Northern Europe/ E. Thiry, C. Saegerman, H. Guyot, M. Bodmer et al.// Vet.Rec.- 2006.- P. 159,327.
  41. Bluetongue virus detection by two real-time RT-qPCRs targeting two different genomic segments/ J.F. Toussaint, C. Sailleau, E. Breard, S. Zientara, K. De Clercq //J. of Virological Methods. 2007. -N140. — P. l 15−123.
  42. Bluetongue virus isolations from midges belonging to the Obsoletus complex (Culicoides, Diptera: Ceratopogonidae) in Italy/ G. Savini, M. Goffredo, F. Monaco, A. Di Gennaro, M.A. Cafiero et al.//Vet. Rec. 2005. — N157. — P. 133 139.
  43. Bluetongue virus isolations from vectors and ruminants in Central America and the Caribbean/ C.L. Mo, L.Ii. Thompson, E.J. Homan et al.// Am. J. Vet. Res. 1994. — Vol.55, N2. — P.211−215.
  44. Bluetongue virus replication, molecular and structural biology/P.P.C. Mertens, J. Diprose, S. Maan, K.P. Singh, H. Attoui and A.R. Samuel// Vet. Ital. -2004. Vol.40, N4. — P.426−437.
  45. Bluetongue Virus Structural Components/ H. Huismans, A.A. Van Dijk// Current Topics in Microbiology and Immunology.- 1990.- Vol.162.- P.21−41.
  46. Bluetongue virus surveillance in a newly infected area/ A. Giovannini, P. Calistri, A. Conte, L. Savini, D. Nannini, C. Patta, U. Santucci and V. Caporale //Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N3. — P.188−197.
  47. Bluetongue virus: European Community inter-laboratory comparison tests to evaluate ELISA and RT-PCR detection methods/C.A. Batten, K. Bachanek-Bankowska, A. Bin-Tarif, L. Kgosana, A.J. Swain et al//Vet. Microbiol. 2007. -nov. — P. 17.
  48. Bluetongue: Laboratory diagnosis/ K. De Clercq, F. Vandenbussche, V T. anbinst, E. Vandemeulebroucke, N. Goris, S. ZientaraII Bluetongue in northern Europe. 2008, — P.68−80.
  49. Brewer, A.W. The pathogenesis of bluetongue virus infection of bovine blood cells in vitro: ultrastructural characterization/ A.W. Brewer, N.J. MacLachlan// Arch. Virol. 1994. — Vol.136, N3−4. — P.287−298.
  50. Brightwell, G. Development of internal controls for PCR detection of Bacillus anthracis/ G. Brightwell, M. Pearce, D. Leslie// Mol. Cell. Probes. 1998. — Vol.12. -P.367−377.
  51. Campbell, C.H. Current Knowledge on the Biochemistry and Immunology of Bluetongue/ C.H. Campbell, J. Marvin and Grubman// Prog. Vet. Microbiol. Immun.- 1985.- Vol.1.- P. 58−79.
  52. Climate change and the recent emergence of bluetongue in Europe/ B.V. Purse, P. S. Mellor, D.J. Rogers, A.R. Samuel, P.P. Mertens and M. Baylis// Nat. Rev. Microbiol. 2005.- Vol.3, N2. -P.171−181.
  53. Clinical aspects of bluetongue in ruminants/ H. Guyot, A. Mauroy, N. Kirschvink, F. Rollin, C. Seagerman// Bluetongue in northern Europe. 2008.-P.34−53.
  54. Comparison of genome segments 2, 7 and 10 of bluetongue viruses serotype 2 for differentiation between field isolates and the vaccine strain/ E. Breard, C. Sailleau, H. Coupier, K. Mure-Ravaud, S. Hammoumi et al.//Vet Rec.2003. Vol.34, N6. — P.777−789.
  55. Detection of bluetongue virus in clinical samples by polymerase chain reaction/ G.Y. Akita, J. Glenn, A.E. Castro, B.I. Osburn// Journal-of-Veterinary-Diagnostic-Investigation.- 1993.- Vol.5, N2.- P.154−158.
  56. Detection of bluetongue virus serogroup by polymerase chain reaction/ G.Y. Akita, J. Chinsangaram, B.I. Osburn, M. Ianconescu, R. Kaufman //Journal-of-Veterinary-Diagnostic-Investigation.- 1992.- Vol.4, N4.- P.400−405.
  57. Differential diagnosis of bluetongue virus using a reverse transcriptase-polymerase chain reaction for genome segment 7/ S. Anthony, S. Maan, A.R. Samuel, P. S. Mellor, P.P.C. Mertens// Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N4. — P.546−551.
  58. Differentiation between field and vaccine strain of bluetongue virus serotype 16/ F. Monaco, C. Camma, S. Serini and G. Savini // Vet. Microbiol. — 2006.-N116.-P.45−52.
  59. Differentiation of Italian field and South African vaccine strains of bluetongue virus serotype 2 using real-time PCR/ G. Orru, P.D. Santis, E. Solinas, G. Savini, V. Piras and V. Caporale // J. Virol. Methods. 2004. — N122. — P.37−43.
  60. Distribution of bluetongue in the United States of America, 1991−2002/ E.N. Ostlund, K.M. Moser, D.J. Johnson, J.E. Pearson, B.J. Schmitt // Vet. Ital.2004. Vol.40,N3. — P.83−88.
  61. Eaton, B.T. Developing new orbivirus diagnostic platforms/ B.T. Eaton and G.R. White // Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N.4 — P.525−530.
  62. Emergence of bluetongue in the Mediterranean Basin and Entomological surveillance in France/ T. Baldet et al.// Rev. clevage Med. Veter. Pays. Trop. 2005. — Vol.58, N3. — P.125−132.
  63. Epidemiological surveillance of bluetongue in Sicily/ S. Caracappa, M. Bagnato, P. Sghembry, A. Guercio et al.// Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N3. — P. 124 130.
  64. First occurrence of Culicoides obsoletus-transmitted Bluetongue virus epidemic in Central Europe/ H. Mehlhom, V. Walldorf, S. Klimpel, B. Hahn, F. Jaeger, J. Eschweiler, B. Hoffmann and M. Beer// Parasitol. Res. 2007. — Vol.101, N1. -P.219−228.
  65. Fukusho, A. Variation in the bluetongue virus neutralization protein VP2/ A. Fukusho, G.D. Ritter, P. Roy// J. Gen. Virol.- 1987, — Vol.68.- P. 29 672 973.
  66. Genetic Characterization of Toggenburg Orbivirus, a new Bluetongue virus, from goats, Switzerland/ M.A. Hofmann, S. Renzullo, M. Mader, V. Chaignat et al.// Emerging Infectious Diseases.- 2008.- Vol.14, N13. P.1855−1861.
  67. Gomez-Tejedor, C. Brief overview of bluetongue situation in Mediterranean Europe, 1998−2004/ C. Gomez-Tejedor// Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N3. — P.57−60.
  68. Gorman, B.M. The bluetongue viruses/ B.M. Gorman //Current topics in Microbiology and Immunology. 1990. — Vol.162 — P. 1−19.
  69. Gould, A.R. Relationships amongst bluetongue viruses revealed by comparisons of capsid and outer coat protein nucleotide sequences/ A.R. Gould and L.I. Pritchard //Finis Res. 1990. -N17. -P.31−52.
  70. Grubman, M.J. Identification of bluetongue virus type 17 genome segments coding for polypeptides associated with virus neutralization andintergroup reactivity/ M.J. Grubman, J.A. Appleton, C.J. Letchworth // Virology.-1983.- Vol.131.-P.355−366.
  71. Hamblin, C. Bluetongue virus antigen and antibody detection, and the application of laboratory diagnostic techniques/ C. Hamblin// Vet. Ital. 2004. -N40. — P.538−545.
  72. Huismans, H. Control of transcription during the expression of the bluetongue virus genome/ H. Huismans, D.W. Verwoerd // Virology.- 1973.- Vol. 52, — P.81−88.
  73. Hwang, G.Y. Analyses and conservation of sequences among the cognate L3 segments of the five United States bluetongue viruses/ G.Y. Hwang, M. Xiang, J.K.K. Li// Virus-Research.- 1994.- Vol.32, N3.- P.381−389.
  74. Identification and characterization of conserved and variable regions in the neutralization VP2 gene of bluetongue virus/ H. Ghiasi, A. Fukusho, Y. Eshita and P. Roy//Virology. 1987.-N160.-P. 100−109.
  75. Identification of a novel bluetongue virus vector species of Culicoides in Sicily/ S. Caracappa, A. Torina, A. Guercio, R. Vitale, A. Calabro, G. Purpari et al// Vet. Rec.- 2003.- Vol.153, N3. -P.71−74.
  76. Isolation of bluetongue virus serotype 12 from an outbreak of the disease in South America/ A. Clavilo et al.// Vet. Rec. 2002. — Vol.151, N10. -P.301−302.
  77. Johnson, D.J. Validation of a reverse transcriptase multiplex PCR test for the serotype determination of U.S. isolates of bluetongue virus/ D.J. Johnson, W.C. Wilson, P. S. Paul //Vet. Microbiology. -2000. -N76. -P.105−115.
  78. Kirkland, P.D. Bluetongue viruses, vectors and surveillance in Australia the current situation and unique feature/ P.D. Kirkland// Vet. Ital. — 2004. — Vol.40, N3. — P.47−50.
  79. La fievre catarrhale ovine (bluetongue): quand une maladie du sud s"invite au nord/E. Albina, S. Zientara, C. Sailleau, A. Perrin, C. Cetre-Sossah, E. Breard, C. Grillet //Virology. 2007. -Nil.- P.63−74.
  80. Lager, I.A. Bluetongue virus in South America: overview of viruses, vectors, surveillance and unique features/ I.A. Lager // Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N3. — P.89−93.
  81. Lecatsas, G. Electron microscopic study of the formation of bluetongue viruses/ G. Lecatsas // Onderstepoort J. Vet. Res.- 1968.- Vol. 35.- P.139−149.
  82. MacLachlan, N.J. Bluetongue and equine viral arteritis viruses as models of virus-induced fetal injury and abortion/ N.J. MacLachlan, A.J. Conley and P.C. Kennedy// Anim. Repwd. Sci. 2000.- N.60−61. — P.643−651.
  83. MacLachlan, N.J. Bluetongue: pathogenesis and duration of viremia/ N.J. MacLachlan //Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N4. — P.462−467.
  84. MacLachlan, N.L. The pathogenesis and immunology of bluetongue virus infection of ruminants/ N.L. MacLachlan //Comp. Immunol. Microbiol. Infect. Dis. 1994. -N17. -P.197−206.
  85. McColl, K.A. Bluetongue virus infection in sheep: haematological changes and detection by polymerase chain reaction/ K.A. McColl and A.R. Gould// Aust. Vet. J. 1994. — N71. — P.97−101.
  86. Meiswinkel, R. Potential new culicoides vector in northern Europe/ R. Meiswinkel, P. van Rijn, P. Leijs// Vet. Rec. 2007. -N161. — P. 564−565.
  87. Mellor, P. S. Bluetongue virus in the Mediterranean basin 1998−2001/ P. S. Mellor and E. Wittmann //Vet. J. 2002. — Vol.164. — P.20−37.
  88. Mellor, P. S. Infection1 of the vectors and bluetongue epidemiology in Europe/ P. S. Mellor // Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N3. — P. 167−174.
  89. Mellor, P. S. The Replication of Bluetongue Virus in Culicoides Vectors/ P. S Mellor// Current Topics in Microbiology and Immunology.- 1990.- Vol. 162.-P.143−161.
  90. Mellor, P. S. The transmission and geographical spread of African horse sickness and bluetongue viruses/ P. S. Mellor and J. Boorman //Ann. Trop. Med. Parasitol.- 1995. Vol.89-P. 1−15.
  91. Melville, L.F. Bluetongue surveillance methods in an endemic area: Australia/ L.F. Melville// Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N3. — P. 184−187.
  92. Mertens, P.P. Assignment of the genome segments of bluetongue virus type 1 to the proteins which they encode/ P.P. Mertens, F. Brown and D.V. Sangar// Virology. 1984. -N135. -P.207−217.
  93. Murray, M.D. The seasonal abundance offemal biting-midges, Culicoides brevitarsis (Diptera, Ceratopogonidae), in coastal south-eastern Australia/ M.D. Murray // Aust. J. loot. 1991.- N39. — P.333−342.
  94. Nomikov, K. Overview of bluetongue in Greece/ K. Nomikov, O. Mangana-Vougiouka and D.H. Panagiotatos //Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N3. -P.108−116.
  95. OIE quality Standard and Guidelines for Veterinary Laboratories: infectious diseasis. OIE, Paris, 2008.
  96. Osburn, B.I. Bluetongue virus/ B.I. Osburn //Veterinary-Clinics-of-North-America-Food-Animal-Practice. 1994. — Vol.10, N3. -P.547−550.
  97. Polymerase chain reaction and non radio labeled DNA probe for detection of BTV/ Y. Malik, G. Prasad, Minakshi and S. Maan// Indian J. of Animal Sciences. 2001.- Vol.71, N5. — P.405−409.
  98. Ramadevi, N. Bluetongue virus core protein VP4 has nucleoside triphosphate phosphohydrolase activity/ N. Ramadevi, P. Roy// J. Gen. Virol. -1998. Vol.79, N10. — P.2475−2480.
  99. Rapid and simple method for purification of nucleic acids/ R. Boom, S.J.A. Sol, M.M.M. Salimans, C.L. Jansen, P.M.E. Wertheim-van Dillen and J. van der Noordaa// J. of Clinical Microbiology. 1990. — Vol.28, N3. -P.495−503.
  100. Rapid detection and quantitation of bluetongue virus (BTV) using a Molecular Beacon fluorescent probe assay/ G. Orru, M.L. Ferrando, M. Meloni, M. Liciardi, G. Savini, P. De Santis // Journal of Virological Methods. 2006. — N137. — P.34−42.
  101. Regional overview of bluetongue viruses in South-East Asia: viruses, vectors and surveillance/ P.W. Daniels, I. Sendow, L.I. Pritchard, Sukarsih and B.T. Eaton // Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N3. — P.94−100.
  102. Results of current surveillance of likely bluetongue virus vectors of the genus Culicoides in Catalonia, Spain/ V. Sarto i Monteys, C. Aranda, R. Escosa, N. Pages and D. Ventura// Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N3. — P. 130−133.
  103. Rossmann, M.G. Courageous science: structural of bluetongue virus core/ M.G. Rossmann and Y. Tao// Structure.- 1999.- Vol.7.- N3.- P.43−46.
  104. Roy, P. Bluetongue virus genetic and genome structure/P. Roy// Virus Research.- 1989.- Vol.13, N3, — P.179−206.
  105. Roy, P. Bluetongue virus proteins/ P. Roy// Gen. Virol. 1992. — N73. -P.3051−3064.
  106. Roy, P. Structure of the bluetongue virus genome and its encoded proteins/ P. Roy, J.J. Marshall, T.J. French // Curr. ToP. Microbiol. Immunol. -1990. -N162. -P.43−87.
  107. Seagerman, C. Bluetongue: Epidemiology in the European Union/ C. Seagerman, D. Berkvens, Ph. Mellor // Bluetongue in northern Europe. 2008. -P. 13−24.
  108. Segment 10 based molecular epidemiology of bluetongue virus (BTV) isolates from Turkey: 1999−2001/ A. Ozkul, A. Erturk, E. Caliskau, F. Sarae, C. Ceylan et al.// Virus Rec. 2009. — Vol.142, N1−2. — P. 134−139.
  109. Sequence analysis of the S10 gene of six Bluetongue virus isolates from India/ G.S. Desai, M. Hosamane, R.S. Kataria, S.S. Patil, K. Prabhudas et al.// Trasbound Emerg Dis. 2009. — Vol.56, N8. — P.329−336.
  110. Serogrouping of United States and some African serotypes of bluetongue virus using RT-PCR/ I.E. Aradaib, M.E. Mohamed, T.M. Abdalla, J. Sarr, M.A. Abdalla et al.// Vet. Microbiol. 2005. — N111(3−4). — P.145−150.
  111. Singer, R.S. Maximal predicted duration of viremia in bluetongue virus-infected cattle/ R.S. Singer, N.J. MacLachlan, T.E. Carpenter// J. Vet. Diagn. Invest. 2001. -N13. -P.43−49.
  112. Tabachnick, W.J. Culicoides and the global epidemiology of bluetongue virus infection/ W.J. Tabachnick// Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N3. — P.145−150.
  113. Taylor, W.P. The epidemiology of Bluetongue/ W.P. Taylor// Rev. sci. tech. Off int. Epiz. 1986. — Vol.5, N2. -P.351−356.
  114. The atomic structure of the bluetongue virus core/ J.M. Grimes, J.N. Burroughst, P. Gouet, J.P. Diprose, P. Malby, S. Zientara, P.P.C. Mertens- D.I. Stuart//Nature.- 1998.- Vol.395, N1.- P.138−146.
  115. The current situation of bluetongue in Turkey/ A. Erturk, N. Tatar, O. Kabakli, S. Incoglu, S.G. Cizmeci and F.M. Barut //Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N3. -P.137−140.
  116. The epizootiological occurrence of bluetongue in the central Balkans/ B. Djuricic, D. Nedic, D. Lausevic and M. Pavlovic // Vet. Ital. 2004. — Vol.40, N3. -P.105−107.
  117. The membrane trafficking protein calpactin forms a complex with bluetongue virus protein NS3 and mediates virus release/A.R. Beaton, J. Rodriguez, Y.K. Reddy, P. Roy// Proc. Nat. Acad. Sci. U. S. A. 2002.- Sep. 16.
  118. Thiry, E. Bluetongue: virology, pathogenesis and biology of the culicoides vector/ E. Thiry, J.Y. Zimmer, E. Haubruge // Bluetongue in northern Europe 2008. — P.3−13.
  119. Verwoerd, D.W. Characterization of Bluetongue Virus Ribonucleic Acid/ D.W. Verwoerd, H. Louw, and R.A. Oellermann // Journal of Virology.-1970, — Vol.5, N1.- P.1−7.
  120. Verwoerd, D.W. Purification and characterization of bluetongue virus/ D.W. Verwoerd// Virology. 1969. -N38. -P.203−212.
  121. Wade-Evans, A.M. Development of the polymerase chain reaction for the detection of bluetongue virus in tissue samples/ A.M. Wade-Evans, P.P. Mertens and C.J. Bostock //J. Virol. Methods 1990. -N30. — P. 15−24.
  122. Ward, M.P. The epidemiology of bluetongue virus in Australia a review/ M.P. Ward // Austr. Vet. J. — 1994. — Vol.71, N1. — P.3−7.
  123. Wilson, W.C. Nested and multiplex polymerase chain reactions for the identification of bluetongue virus infection in the biting midge, Culicoides variipennis/ W.C. Wilson and C.C. Chase// J. Virol. Methods 1993. — N45. — P.39−47.
  124. Wittmann, E. J. Effect of temperature on the transmission of orbiviruses by the biting midge, Culicoides sonorensis/ E. J. Wittmann, P. S. Mello, M. Baylis// Med. Vet. EntomoL- 2002.- N2.- P. 147−156.
  125. Yongue, A.D. Bluetongue in western Turkey/ A.D. Yongue, W.P. Taylor// Vet. Rec. 1982. — Vol.111, N7. — P. 144−146.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!