Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Разработка биотехнологических процессов получения биологически активных соединений из медоносных пчел и исследование их свойств

ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Обосновано использование кутикулы пчелиных для получения различных соединений. Разработана комплексная технологическая схема переработки пчелиного подмора с получением таких биологически активных веществ, как водорастворимый меланин и низкомолекулярный хитозан-меланиновый комплекс. Определены основные оптимальные параметры переработки пчелиного подмора на каждой стадии обработки. Учитывая… Читать ещё >

Разработка биотехнологических процессов получения биологически активных соединений из медоносных пчел и исследование их свойств (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • 1. Обзор литературы
    • 1. 1. Природные полисахариды хитин и хитозан: строение, физико-химические свойства
    • 1. 2. Области применения
    • 1. 3. Основные источники хитина и хитозана
      • 1. 3. 1. Ракообразные (
      • 1. 3. 2. Грибы (Fungi)
      • 1. 3. 3. Насекомые (Insecto)
      • 1. 3. 4. Нетрадиционные источники
    • 1. 4. Способы переработки хитинсодержащего панциря ракообразных
      • 1. 4. 1. Получение хитина с помощью химических и биотехнологических способов обработки
      • 1. 4. 2. Получение хитозана с использованием химических и ферментативных методов
      • 1. 4. 3. Способы гидролиза хитозана
    • 1. 5. Получение хитина и хитозана из насекомых
  • 2. Экспериментальная часть.'
    • 2. 1. Объекты исследований, исходные материалы и химические реагенты
    • 2. 2. Методы исследования
      • 2. 2. 1. Технологические стадии
      • 2. 2. 2. Методы анализа
      • 2. 2. 3. Изучение некоторых свойств полученных веществ
  • 3. Результаты и их обсуждение
    • 3. 1. Разработка технологии получения биологически активных веществ из подмора пчел
      • 3. 1. 1. Водная экстракция
      • 3. 1. 2. Депротеинирование
      • 3. 1. 3. Обесцвечивание
      • 3. 1. 4. Деацетилирование
      • 3. 1. 5. Ферментативный гидролиз
    • 3. 2. Технология переработки подмора пчел
    • 3. 3. Физико-химические свойства полученных продуктов
    • 3. 4. Биологические свойства полученных продуктов
      • 3. 4. 1. Антиоксидантные свойства
      • 3. 4. 2. Генопротекторные свойства
      • 3. 4. 3. Фотопротекторные свойства
  • 4. Выводы

Полисахариды хитин и хитозан, а также их производные, считаются, перспективными биоматериалами будущего. По некоторым оценкам, предполагаемый объем производства изделий из этих биополимеров в 2005 г. составит около 2 млрд. долларов, из которых — 75% будет использовано в пищевой, косметической и фармацевтической промышленностях, биотехнологии, сельском хозяйстве. Уникальная структура макромолекулы хитозана и наличие положительного заряда обусловливают проявление ряда полезных свойств (антиоксидантные, радиопротекторные, волокнои пленкообразующие, иммуномодулирующие, противоопухолевые и др.), а также его низкую токсичность и способность к биодеградации.

Пигмент меланин представляет собой высокомолекулярный биополимер нерегулярной структуры, относящийся к классу конденсированных фенольных соединений, обусловливающих темную окраску покрова насекомых, волос человека, клеточной стенки грибов, растений и микроорганизмов. Наличие разнообразных функциональных групп, высокостабильных парамагнитных центров, сопряженной системы двойных связей в молекуле меланина обеспечивают разнообразное применение в качестве фото-, радиопротекторов и антиоксидантов в различных областях промышленности.

На сегодняшний день основным источником для получения хитина и хитозана являются панцири ракообразных (крабы, креветки, криль). Технология обработки включает постадийное удаление сопутствующих веществ с использованием химических и ферментативных способов обработки. Основными субстратами для выделения меланинов являются чернильная сумка каракатицы Sepia officinalis, микрои макромицеты, грибы и дрожжи, темные сорта винограда, проявляющие сходные биозащитные свойства с меланинами животного происхождения.

Расширение областей примененияданных биополимеров обусловливает поиск новых перспективных источников хитина и меланина. Как известно, в покровах насекомых до 50% занимает полимер хитин, наряду с белками придающий прочность экзоскелету. Вместе с хитином и белком в кутикуле присутствуют эумеланины, ковалентно связанные с остальными компонентами, обусловливающие окраску насекомого и некоторые защитные свойства. Таким образом, кутикулу насекомых можно рассматривать как источник различных биологически активных веществ с возможностью выделения в отдельном виде или в виде комплексов. Благодаря традиционно развитому пчеловодству в нашей стране в качестве источника биологически активных веществ можно предложить подмор пчел — медоносные пчелы Ар1Б теШ/ега Ь., погибшие во время зимовки в улье. Согласно расчетам, сырьевая база подмора пчел может составить от 6 до 10 тыс. тонн в год.

Цель настоящей работы — разработка биотехнологических процессов получения хитина, хитозана, меланина и их комплексов из подмора пчел, изучение некоторых физико-химических и биологических свойств данных полимеров.

Для достижения поставленной цели были определены основные задачи исследования: разработать технологию переработки подмора пчел с учетом особенностей сырья и определить оптимальные параметры на каждой стадии обработкисогласно выбранным оптимальным параметрам осуществить комплексную переработку подмора пчел с получением интересующих биологически активных веществизучить основные физико-химические свойства промежуточных и основных продуктов, полученных на каждой стадии переработкиисследовать некоторые биологические свойства водорастворимого меланина и низкомолекулярного хитозан-меланинового комплекса.

Научная новизна работы.

Обосновано использование кутикулы пчелиных для получения различных соединений. Разработана комплексная технологическая схема переработки пчелиного подмора с получением таких биологически активных веществ, как водорастворимый меланин и низкомолекулярный хитозан-меланиновый комплекс. Определены основные оптимальные параметры переработки пчелиного подмора на каждой стадии обработки. Учитывая особенность сырья, обоснована необходимость включения стадии обесцвечивания в технологию переработки с целью более полного удаления пигмента. При исследовании ферментативного гидролиза показано, что хитозан-меланиновый комплекс может гидролизоваться с использованием специфических и неспецифических ферментов. Показано, что, варьируя условиями ферментативного гидролиза, существует возможность полученияхитозан-меланинового комплекса с различной молекулярной массой и степенью деацетилирования в зависимости от целей использования. Исследованы антиоксидантные, генопротекторные и фотопротекторные свойства хитозан-меланинового комплекса и меланинсодержащих продуктов из подмора пчел.

Впервые показана возможность использования кутикулы пчелы Apis mellifera L. для одновременного выделения меланиновых пигментов и комплекса хитозана с меланином с различной молекулярной массой и степенью деацетилирования.

Практическая значимость работы.

Разработана комплексная схема переработки подмора пчел с получением таких биологически активных веществ, как водорастворимый меланин и хитозан-меланиновый комплекс. Предложены оптимальные параметры для осуществления каждой стадии. Разработана рецептура косметического крема на основе водорастворимого меланина и низкомолекулярного хитозана для обеспечения фотозащитных свойств.

Структура и объем диссертации

.

Диссертация состоит из введения, литературного обзора, методической части, раздела с обсуждением экспериментальных результатов, выводов, списка литературы и приложения. Работа изложена на 152 страницах машинописного текста, содержит 27 таблиц и 25 рисунков, библиографию из 158 наименований.

4. ВЫВОДЫ.

1. Разработана технологическая схема комплексной переработки подмора из медоносных пчел {Apis mellifera) с получением водорастворимого меланина (до 35%) и хитозан-меланинового комплекса (до 4−6%) различной молекулярной массы. Оптимизирован технологический процесс и определены оптимальные условия для каждой стадии.

2. Обоснована возможность исключения из технологической схемы переработки стадии деминерализации из-за низкого содержания минеральных веществ в подморе пчел (3−4%), и показана необходимость включения стадии обесцвечивания меланиновых пигментов, влияющих на дальнейший процесс обработки и свойства полученных продуктов.

3. Показана возможность гидролиза высокомолекулярного ХзМК ферментными препаратами со специфической и неспецифической активностью. Гидролиз ХзМК промышленным препаратом Целловиридин Г20х в оптимальных условиях позволяет получать низкомолекулярные фрагменты (20−50кДа), хорошо растворимые в нейтральных водных растворах.

4. Установлено, что меланины и низкомолекулярный ХзМК обладают антиоксидантной активностью, проявляющейся в способности предотвращать перекисное окисление липидов и пероксидазное окисление аминобифенилов. Ингибирующая активность меланинов снижалась в ряду субстратов: БДо-ДА — ТМБД.

5. Показана способность меланинов, полученных на стадии водной экстракции при температурах 20−80°С, предотвращать повреждение ДНК фага А, продуктами окисления бензидина. Защитное действие обусловлено способностью меланинов дезактивировать свободные радикалы и активные формы кислорода, образующиеся при окислении, за счет присутствия неспаренных электронов в молекуле.

6. Разработана рецептура крема с добавлением меланина отдельно и совместно с ХзМК (0,3%) в качестве биологически активных веществ, предотвращающих окисление кремовой основы под действием УФ-облучения. Фотопротекторное действие меланина проявлялось в снижении перекисного числа в 2,3 раза по сравнению с контролем. Использование в рецептуре крема меланина с ХзМк увеличивало этот эффект еще на 20%.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Muzzarelli R.A.A. Chitin. 1977. Oxford: Pergamon Press. P. 309.
  2. Cauchie H-M. Chitin production by arthropods in the hydrosphere // Hydrobiologia. 2002. -V. 470. — N. 1/3.- P. 63−95.
  3. Majeti N.V., Kumar R. A review of chitin and chitosan applications // Reactive & Functional Polymers.-2000.- V.46.- N.I.- P. l-27.
  4. Tolaimate A., Desbrie’res J., Rhazi M., Alagui A., Vincendon M., Vottero P. On the influence of deacetylation process on the physicochemical characteristics of chitosan from squid chitin // Polymer.- 2001.-V.41.- N.7.- P. 2463−2469.
  5. Zhang M., Haga A., Sekiguchi H., Hirano S. Structure of insect chitin isolated from beetle larva cuticle and silkworm (Bombyx mori) pupa exuvia // Int. J. Biological Macromolecules.- 2000.-V.27.- N.l.-P. 99−105.
  6. Е.П. Клеточная стенка грибов.- М.: Наука, 1983.- 248с.
  7. Muzzarelli R.A.A. The discovery of chitin a > 570 Megayear old polymer // In: Chitosan in pharmacy and chemistry / Ed. R.A.A Muzzarelli, C. Muzzarelli. Atec, Italy, 2002.-P. 1−8.
  8. Chatelet C., Damour O., Domard A. Influence of the degree of acetylation on some biological properties of chitosan films // Biomaterials.- 2001.-V.22.- N.3. P. 261−268.
  9. Domard A. Some physicochemical and structural basis for applicability of chitin and chitosan. // Proc. 2nd. Asia Pacific Symposium «Chitin and chitosan» / Ed. F. Stevens, M.S. Rao, S. Chandrkrchang. Bangkok, Thailand, 1996.- P. 1−12.
  10. Kumara G., Bristowa J.F., Smith P.J., Payne G.F. Enzymatic gelation of the natural polymer chitosan // Polymer.- 2000.- V.41.-N.6.-P.2157−2168.
  11. Juang R-S., Shao H-J. A simplified equilibrium model for sorption of heavy metal ions from aqueous solutions on chitosan // Water Research.- 2002.-V.36.-N.12.- P.2999−3008.
  12. Т.М. Применение хитозана в производстве пищевых продуктов приведено в «Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение» / Под. ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова М: Наука, 2002.-С. 346−359.
  13. Rhoades J., Roller S. Antimicrobial actions of degraded and native chitosan against spoilage organisms in laboratory media and foods // Applied and environmental microbiology.-2000.- V.66.- N.l.-P. 80−86.
  14. А.И., Самуйленко А. Я., Фролова M.А. Хитозан в косметике приведено в «Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение"/ Под.ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова.- М: Наука, 2002.-С. 360−363.
  15. Gain В. Natural products gain flavor// Chemical week.-1996. .-V.158.- N.48.-P.35−36.
  16. Cho Y-W., Cho Y-N., Chung S-H., Yoo G., Ко S-W. Water-soluble chitin as a wound healing accelerator // Biomaterials.- 1999.- V.20.-N.22.-P. 2139−2145.
  17. Jagur-Grodzinski J. Biomedical application of functional polymers // Reactive & Functional Polymers.- 1999.-V.39.-N.2.- P.99−138.
  18. Khora E., Lim L. Implantable applications of chitin and chitosan // Biomaterials. 2003.- V.24.-N.13.- P.2339−2349.
  19. В.П., Ильина A.B., Банникова Г. Е., Немцев С. В., Ильин JI.A., Чертков К. С., Андиранова И. Е., Платонов Ю. В., Скрябин К. Г. Способ получения низкомолекулярного хитозана для противолучевых препаратов. Патент РФ № 2 188 829. Россия. 10.09. 2002.
  20. Vongchan P., Sajomsang W., Subyen D., Kongtawelerta P. Anticoagulant activity of a sulfated chitosan // Carbohydrate Research.- 2002.- V.337.- N.13.-P.1233−1236.
  21. Ilium L. Chitosan and its use as a pharmaceutical excipient // Pharmaceutical Pesearch.-1998.-V. 15 .-N.9.-P. 1326−1331.
  22. Zechendorf B. Sustainable development: how can biotechnology contribute? // Trends in Biotechnology.- 1999.- V.17.- N.6.-P.219−225
  23. B.E. Технико-экономические перспективы производства хитина и хитозана из антарктического криля // Мат. VII Международной конф. «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана».-М.: ВНИРО, 2003.-С. 7−9.
  24. Vincent J.V. Arthropod cuticle: a natural composite shell system // Composites: Part A.- 2002.-V.33.- N.10.- P.1311−1315.
  25. Stankiewicz В., Mastalerz M., Hof C. J., Bierstedt A., Flannery M.B., Derek E. G., Evershed B. Biodegradation of the chitin-protein complex in crustacean cuticle//Org. Geochem.-1998.-V.28.-N.l/2.-P. 67−76.
  26. B.M., Немцев C.B. Сырьевые источники и способы получения хитина и хитозана приведено в «Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение» / Под. ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова.- М: Наука, 2002.-С.7−23.
  27. О.Я., Лысова А. С., Григорьева Е. В. Гаммарус балтийский -потенциальный источник получения хитина и хитозана // Мат. VII Международной конф. «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана».-М.: ВНИРО, 2003 .-С. 32−33.
  28. Антарктический криль: Справочник. / Под. ред. В. М. Быковой. М: ВНИРО, 2001.-207с.
  29. Lipke P. N., Ovalle R. Cell Wall Architecture in Yeast: New Structure and New Challenges //Journal of Bacteriology.- 1998.- V.180.- N.15.-P.3735−3740.
  30. В.И., Солодовник Т. В. Хитин- и хитозансодержащие комплексы из мицелиальных грибов: получение, свойства, применение // Биополимеры и клетка.-2001.-Т. 17.- № 6.-С.526 533.
  31. А.Я., Воеводина И. Н., Галкин А. В., Львова Е. Б., Никифорова Т. А., Николаев С. В., Михайлов Б. В., Козлов В. П. Способ получения глюкан-хитозанового комплекса Патент № 2 043 995. Россия. 1995.
  32. Pochanavanich P., Suntornsuk W. Fungal chitosan production and its characterization // Letters in Applied Microbiology.-2002.-V.35.- N.1.-P.17−21.
  33. В.П. Физиология насекомых. Уч. Пособие.-М: Высш. шк, 1986.-303с.
  34. Chapman R.F. The insects. Structure and function. London: The English universities press. 1969.-P. 600.
  35. Giraud-Guille M-M. Chitin-protein supramolecular order in arthropod cuticles: analogies with liquid crystals // In: Chitin in life science / Ed. Giraud-Guille M-M. France, 1996.- P. 1−10.
  36. Hamodrakas S.J., Willis J.H., Iconomidou V.A. A structural model of the chitin-binding domain of cuticle proteins // Insect biochemistry and molecular biology.-2002.-V.32.- N. l 1.-P.1577−1583.
  37. Tellam R.L., Eisemann G. Chitin is only a minor component of the peritrophic matrix from larvae of Lucilia cuprina // Insect biochemistry and molecular biology.-2000.-V.30.- N. 12.-P. 1189−1201.
  38. P. Физиология насекомых. Перевод с фран. В. В. Хвостовой / Под. ред. Е. Н. Павловского.-М: Ин. Лит-ры, 1953.-494с.
  39. А.И. Биохимия насекомых. Кишинев: Карта, 1976.-С.170−181.
  40. В.П., Кукулянская Т. А., Новиков Д. А. Физико-химические и биологические свойства меланиновых пигментов // Мат. VII Международной конф. «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана».-М.: ВНИРО, 2003 .-С. 23- 31.
  41. В.А. Меланин: структура, биосинтез биологические функции // Украинский биохимический журнал.-1999.-Т.71.-№ 4.-С. 5−13.
  42. Г. Биохимия природных пигментов. М: Мир, 1986.-436с.
  43. Riley Р.А. Melanin // Int. Biochem. Cell Biol.-1997.-V.29.-N.1 l'.-P. 12 351 239.
  44. Л.Н., Сенчук В. В. Влияние меланинов на перекисное окисление липидов // Прикладная биохимия и микpoбиoлoгия.-2001.-T.37.-N^l.-C.105−109.
  45. М.И., Васильева С. М. Развитие представлений о биохимии и фармакологии меланиновых пигментов // Вопросы медицинской химии.-1999.- Т.45 .-№ 1 .-С.7−15
  46. В.А. Структура, биосинтез меланинов, их биологическая роль и перспективы применения//Успехи современной биологии.-2001.-Т.121.-№ 1.-С.36−46.
  47. Е.П. Ключевая роль хитина в образовании клеточной стенки грибов приведено в «Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение» /
  48. Под. ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова, — М: Наука, 2002.-С.91−99.
  49. Н.П. Альгология: Уч. пособие для вузов по спец. «Ботаника» -М.: Высш.шк., 1991. 256с.
  50. В.А., Харвуд Д. М. Морфология, таксономия и система классификации центрических диатомовых водорослей. — СПб.: Наука, 2002. -118с.
  51. Н.С. Основы биологии дробянок, водорослей, грибов и лишайников: Уч. пособие. — Саранск: Из-во Мордов. ун-та, 2001.-172с.
  52. Place A.R. The biochemical basis and ecological significance of chitin digestion // In: Chitin Enzymology / Ed. R.A.A. Muzzarelli. Atec, Italy, 1996.-V.2.- P. 39−54.
  53. No H.K., Meyers S.P. Preparation of chitin and chitosan. // In: Chitin handbook / Ed. R.A.A. Muzzarell, M. G Peter. Atec, Italy, 1997.-P.475−489.
  54. Tolaimate A., Desbrieres J, Rhazi M., Alagui A. Contribution to the preparation of chitins and chitosans with controlled physico-chemical properties // Polymer.- 2003.- V.44.- N.26.-P.7939−7952.
  55. P., Тесманн X., Свеннинг P., Ользен P., Стенберг Э. Катионные полимеры биологического происхождения. Патент № 2 159 253. Россия. 1995.
  56. Percot A., Viton С., Domard A. Optimiztion of chitin extraction from shrimp shells // Biomacromolecules. 2003.-V.4.- N.1.-P.12−18.
  57. Е.Э., Водолажская C.B. Способы получения и активации хитина и хитозана приведено в «Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение» / Под. ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова.- М: Наука, 2002.-С.44−63.
  58. В.В., Львович Ф. И., Фрайман Д. Б. Способ получения хитозана. Патент № 2 073 017. Россия. 1997.
  59. Teng W-L., Khor E., Tan Т., Lim L-Y., Tan S-C. Concurrent production of chitin from shrimp shells and fungi // Carbohydrate Research.-2002.-V.332.- N.3.-P.305−316.
  60. Tsai G-J., Su W-H., Chen H-C., Pan C-L. Antimicrobial activity of shrimp chitin and chitosan from different treatments and applications of fish preservation // Fisheries science.-2002.- V.68.- N.1.-P.170−177.
  61. Wang S-L., Chio S-H. Deproteinization of shrimp and crab shell with the protease of Pseudomonas aeruginosa K-187 V/ Enzyme and microbial technology. -1998.-V.22.- N.7.-P.629−633.
  62. Yang J-K., Shih I-L., Tzeng Y-M., Wang S-L. Production and purification of protease from a Bacillus subtilis that can deproteinize crustacean wastes // Enzyme and microbial technology.-2000.-V.26.- N.5/6.-P. 406−413.
  63. E.A. Модификация «холодного способа» деацетилирования хитина // Мат. VII конф. «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана».-М.: ВНИРО, 2003. С. 17−19.
  64. К. L. В., Tsai G., Lee J., Fu W.-R. Heterogeneous N-deacetylation of chitin in alkaline solution // Carbohydrate Research.- 1997.-V.303.-№ 3.-P.327−332.
  65. Rege P.R., Block L.H. Chitosan processing: influence of process parameters during acidic and alkaline hydrolysis and effect of the processing sequence on the resultant chitosan’s properties // Carbohydrate Research.-1999.-V.321.- N.3−4.-P.235−245.
  66. Tsigos I., Martinou A., Varum K. l M., Boutiotis V. Enzymatic deacetylation of chitinous substrates employing chitin deacetylases // In: Advan. Chitin Sci. / Ed. A. Domard, C. Jeuniaux, R. Muzzarelli. G. Roberts. France, 1995.-V.1.-P. 59 69.
  67. Tsigos I., Martinou A., Kafetzopoulos D., Bouriotis V. Chitin deacetylases: new, versatile tools in biotechnology // Trends in biotechnology.-2000.-V.18.- N.7. P.305−312.
  68. Martinou A., Tsigos I., Koutsioulis D., Bouriotis V. Chitin deacetylases: from basic research to biotechnological applications // In: Chitin Enzymology / Ed. R.A.A. Muzzarelli. Atec, Italy, 2001.- P. 503−510
  69. Martinou A., Kafetzopoulos D., Bouriotis V. Chitin deacetylation by enzymatic means: monitoring of deacetylation processes / Carbohydrate Research.-1995.-V.273.- N.2.-P.235−242.
  70. Win N-N., Stevens W.F. Enzymatic deacetylation of chitin // In: Chitin Enzymology / Ed. R.A.A. Muzzarelli. Atec, Italy, 2001.- P.553−563.
  71. Pettersen H., Sannes A., Holme H.K., Kristensen A.H., Dornish M., Smidsrod.O. Thermal depolymerization of chitosan salts // In: Advan. Chitin Sci. / Ed M. G. Peter, A. Domard, R.A.A.Muzzarelli. Potsdam. Germany,-1999.- V4.-P.422−428.
  72. C.B., Ильина C.M., Шинкарев C.M., Албулов А. И., Варламов В. П. Получение низкомолекулярного водорастворимого хитозана // Биотехнология.-2001 .-№ 6.-С. 37−42.
  73. Tommeraas К., Va°rum К. М., Christensen В. Е, Smidsrod О. Preparation and characterisation of oligosaccharides produced by nitrous acid depolymerisation of chitosans // Carbohydrate Research. -2001. -V. 333.- N.2.-P. 137−144.
  74. Allan G.G., Peyron M. Molecular weight manipulation of chitosan II: prediction and control of extent of depolymerization by nitrous acid // Carbohydrate research. -1995.-V.277.-N.2.- P.273−282.
  75. Kubota N., Tatsumoto N., Sano Т., Toya K. A simple preparation of half N-acetylated chitosan highly soluble in water and aqueous organic solvents // Carbohydrate Research.-2000.-V.324.- N.4.-P.268−274.
  76. Sato K., Kishimoto Т., Morimoto M., Saimoto H., Shigemasa Y. Hydrolysis of acetals in water under hydrothermal conditions // Tetrahedron Letters.-2003.-V.44.- N.47.-P.8623−8625.
  77. Hai L., Diep Т., Nagasawa N., Yoshii F., Kume T. Radiation depolymerization of chitosan to prepare oligomers // Nuclear instruments and methods in physics research B.-2003.-V.208.-P.466−470.
  78. Yoksan R., Biramontri S., Chirachanchai S. Structural characterization of y-ray irradiated chitosan // In: Advan. Chitin Sci. / Ed. K. Suchiva, S. Chandrkrachang, P. Methacanon, M.G. Peter. MTEC. Thailand, 2002.-V.5, P. 180−184.
  79. Kardos N., Luche J-L. Sonochemistry of carbohydrate compounds // Carbohydrate Research.- 2001.-V.332.-N.2.- P. 115−131.
  80. Chen R.H., Chang J.R., Shyur J.S. Effect of ultrasonic conditions and storage in acidic solutions on changes in molecular weight and polydispersity of treated' chitosan // Carbohydrate Research.- 1997.-V.299.- N.4.-P.287−294.
  81. Kasaai M.R., Chin S.L., Arul J. Kinetic aspects of chitosan fragmentation by femtosecond laser // Journal of photochemistry and photobiology A: Chemistry.-2003.-V.159.- N.3.-P.207—211.
  82. Kasaai M.R., Arul J., Chin S.L., Charle G. The use of intense femtosecond laser pulses for the fragmentation of chitosan // Journal of photochemistry and photobiology A: Chemistry.-1999.-V. 120.- N.3.-P. 201−205.
  83. C.A., Никольский В. Г. Твердофазное деформационное разрушение и измельчение полимерных материалов. Порошковые технологии // Высокомол. соед. Серия Б.-1994.-Т.36.-№ 6.- С.1040−1056.
  84. С.З., Акопова Т. А. Модификация полисахаридов в условиях сдвиговых деформаций // Высокомол. соед.-1994.-Т.36.-№ 4. С. 593−600.
  85. Г. А., Роговина С. З., Акопова Т. А., Зеленецкий С. Н., Гальбрайх JI.C. Изучение фракционного состава хитозана, полученного твердофазным и суспензионным методами // Высокомол. соед.-1996.-Т.38.-№ 10.-С.1781−1785.
  86. Meens J., Schreiber С., Hain М. Screening of marine fungi for new chitin deacetylase enzymes // In: Chitin Enzymology / Ed. R.A.A. Muzzarelli. Atec, Italy, 2001.- P. 533−539.
  87. Howard M.B., Ekborg N.A., Weiner R.M., Hutcheson S.W. Detection and characterization of chitinases and other chitin-modifying enzymes // J. Ind. Microbiol. Biotechnol.-2003.-V.30.- N. l 1.-P.627−635.
  88. Koga D. Biological functions and properties of chitinase isozymes from yam // In: Advan. Chitin Sci. / Ed. A. Domard, C. Jeuniaux, R.Muzzarelli. G.Roberts. France, 1995.-V.1.-P. 70 77.
  89. Reetarani S. P., Ghormade V., Deshpande M. V. Chitinolytic enzymes: an exploration // Enzyme and Microbial Technology.-2000.-V.26.-№ 7.- P.47383.
  90. Schrempf H. The chitinolytic system of Streptomysetes // In: Advan. Chitin Sci. / Ed. A. Domard, C. Jeuniaux, R. Muzzarelli. G.Roberts. France, 1995.-V.1.-P. 123 128.
  91. Ilyina A.V., Tatarinova N.Yu., Varlamov V.P. The preparation of low-molecular-weight chitosan using chitinolytic complex from Streptomyces kurssanovii И Process Biochemistry.-1999.- V.34.- N.9.-P.875−878.
  92. A.B., Варламов В. П., Мелентьев А. И., Актуганов Г. Е. Деполимеризация хитозана хитинолитическим комплексом бактерии рода Bacillus sp. 739 // Прикладная биохимия и микробиология.-2001.-Т. 37.-№ 2.-С. 160−163.
  93. В.Ю., Мухин В. А. Деполимеризация хитозана под действием ферментов гепатопакреаса камчатского краба Paralithodes camtschaticus // Прикладная биохимия и микробиология.-2003.-Т.39.- № 5.-С.530−535.
  94. А.В., Ткачева Ю. В., Варламов В. П. Деполимеризация высокомолекулярного хитозана ферментным препаратом Целловиридин Г20х // Прикладная биохимия и микробиология.-2002.-Т.38.-№ 2.-С.132−135.
  95. Kittur F.S., Kumar A.B.V., Tharanathan R.N. Low molecular weight chitosans preparation by depolymerization with Aspergillus niger pectinase, and characterization // Carbohydrate Research.-2003.-V.338.-№ 12.-P.1283 -1290.
  96. Kumar A.B.V., Gowda L.R., Tharanathan R.N. Non-specific depolymerization of chitosan by pronase and characterization of the resultant products // Eur. J. Biochem.-2004.-V.271.-N.4.-P.713−723.
  97. Kumar A.B.V., Varadaraj M.C., Lalitha R.G., Tharanathan R.N. Low molecular weight chitosans: preparation with the aid of papain and characterization // Biochimica et Biophysica Acta.-2004.-V.1670.-N.2.- P. 137- 146.
  98. Muzzarelli R.A.A., Xia W., Tomasetti M., Ilari P. Depolymerization of chitosan and substituted chitosan with the aid of a wheat germ lipase preparation // Enzyme and microbial technology.- 1995.-V.17. N.6. P. 541−545.
  99. Zhang H., Du Y., Yu X., Mitsutomi M., Aiba S. Preparation of chitooligosaccharides from chitosan by a complex enzyme // Carbohydrate Research.-1999.-V.320.-N.¾. -P. 257−260.
  100. C.A., Папков B.A., Варламов В. П. Гидролиз хитозана иммобилизированными ферментными препаратами // Мат. VII конф. «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана». М.: ВНИРО, 2003.-С 398−402.
  101. В.П., Быкова В. М., Головкова Г. Н. Хитин и хитозан из биомассы личинок мух. // Тез. 4-ой Всерос. конф. «Производство и применение хитина и хитозана». М: ВНИРО, 1995.- С. 10−12
  102. Шыш С.И., Винокурова Г. В. Способ получения хитина и способ получения хитозана. Патент № 2 139 887. Россия. 1996.
  103. С.В., Зуева О. Ю., Исмаилов В .Я., Варламов В. П. Кутикула жуков станет новым источником хитина и хитозана // Мат. VII конф. «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана».-М.: ВНИРО, 2003.-С. 36−42.
  104. .А., Бабиевский К. К., Прохоренко Г. К., Кузин А. Б. Способ получения хитозана. Патент № 2 067 588. Россия. 1996.
  105. Struszczyk М.Н., Hahlweg R., Peter M.G. Comparative analysis of chitosans from Insects and Crustacean // In: Advan. Chitin Sci. / Ed. M.G. Peter, A. Domard, R.A.A. Muzzarelli. Potsdam. Germany, 2000.-V 4.-P 40−49.
  106. C.B., Зуева О. Ю., Хисматуллин Р. Г., Хисматуллин M.P., Лариков В. В., Варламов В. П. Хитозан из подмора пчел новый продукт пчел // Пчеловодство.-2001.-№ 5.-С. 50−51.
  107. ГОСТ 7636–85 Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. 116 с.
  108. Lim S., Hattori К., Hudson S.M. Preparation of a fiber-reactive chitosan derivative with enhanced antimicrobial activity / In: Advan. Chitin Sci. / Ed. M.G. Peter, A. Domard, R.A.A. Muzzarelli. Potsdam, Germany, 2000.-V 4.-P 454−459.
  109. И.И. Конформация макромолекул (визкозиметрический метод оценки). -М.: Химия, 1981.- 281с.
  110. W., Во S., Li S., Qin W. Determination of the Mark-Houwink equation for chitosans with different degree of deacetylation // Int. J. Biol. Macromol.-1991 .-V. 13 .-N.5 .-P.281−285.
  111. T. //Anal. Biohem.-1978.-V.86.-P. 141 -146.
  112. Westall F., Hesser H. Fifteen-minute acid hydrolysis of peptides //Anal Biochem.- 1974.- V.61.-N.2.- P.610−613.
  113. G.L. //Anal.Biochem.-1957.-V.31.-N.3.-P.426−428.
  114. В. А. Основные микрометоды анализа органических соединений.-М.: Химия, 1967.-207с.
  115. Лях С.П., Рубан E. JL Микробные меланины.-М.: Наука, 1972.-185с.
  116. У. Термические методы анализа / пер. с англ. Под ред. Степанова В. А., Берштейна В. А. .-М.: Мир, 1978. 526с.
  117. ГОСТ. Р 50 457−92. Жиры и масла животные и растительные. Определение кислотного числа и кислотности.
  118. ГОСТ 17 362–71 Изделия косметические. Метод определения числа омыления.
  119. ГОСТ Р 51 487−99. Изделия косметические. Метод определения перекисного числа.
  120. Ионная имплантация полимеров / Под. ред. В. Б. Оджаева, И. П. Козлова, В. Н. Попок, Д. В. Свиридова. Минск: Изд-во БГУ, 1998. — 197 с.
  121. В.П., Гавриленко Н. В., Исмаил И., Пикулев А. Т. Кинетика окисления бензидина и его производных с участием различных гемопротеинов // Вестник БГУ. 1991. — № 2. — С. 28−31.
  122. O’Brien P. Multiple mechanisms of metabolic activation of arilamone cancerogens // Free Radicals in Biology / Ed. W. Pry or. 1984. -Vol. 6.-314 p.
  123. JI.A. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: электрофорез и ультрацентрифугирование. М.: Наука, 1981.-260 с.
  124. Т.А., Курченко Н. В., Курченко В. П., Бабицкая В. Г. Физико-химические свойства меланинов, образуемых чагой в природных условиях и при культивировании // Прикладная биохимия и микробиолоия. -2002.- Т.38.- № 1.-С. 68−72.
  125. А.Д., Иванкин А. Н., Бердутина А. В. Свойства и применение белковых гидролизатов // Прикладная биохимия и микробиология.-2000.-Т.36.-№ 5-С. 525−534.
  126. Лях С. П. Микробный меланиногенез и его функции. М.: Наука. 1981. 274с.
  127. Slokar Y.M., Majcen Le Marechal A. Methods of decoloration of textile wastewaters // Dyes and Pigments.-1998.- V.37.-N.4.- P. 335−356.
  128. Brooks R.E., Moore S.B. Alkaline hydrogen peroxide bleaching of cellulose // Cellulose.-2000.-V.7. N.3. -P. 263−286.
  129. Bartkowiak A. Binary polyelectrolyte microcapsules based on natural polysaccharides. Dissertation. Szczecin. 2001. P. 102.
  130. Vachoud L., Zydowicz N., Domard A. Physicochemical behaviour of chitin gels // Carbohydrate Research.-2000.-V.326. N.4.- P.295−304.
  131. Yang B.Y., Montgomery R. Degree of acetylation of heteropolysaccharides // Carbohydrate Research.-2000.-V.323.- N. l-4. -P. 156−162.
  132. И.А., Варламов В. П. Очистка и некоторые свойства хитиназ из Streptomyces kurssanovii II Биотехнология.-1993.- № 2.- С. 29−36.
  133. Azarkan М., Moussaoui A., Wuytswinkel D., Dehon G., Looze Y. Fractionation and purification of the enzymes stored in the latex of Carica papaya И Journal of Chromatography B. 2003. V.790.-N.½.-P. 229−238:
  134. Rubin B.R., Talent J.M., Kongtawelert P., Pertusi R.M., Forman M.D., Gracy R.W. Oral polymeric N-acetyl-D-glucosamine and osteoarthritis // J. Am. Osteopath. Assoc. -2001. V. 101. N.6. — P- 339−344.
  135. Д.А., Курченко В. П., Азарко И. И. Фотопротекторные свойства меланинов из винограда (Vitis vinifera) и черного чая (Thea sinensis) // Радиационная биология. Радиоэкология.-2001.-Т.41.-№ 6. С. 664−670.
  136. В.Г., Щерба В. В. Природа меланиновых пигментов некоторых микро- и макромицетов // Прикладная биохимия и микробиология. -2002.-Т.38.-№.3. С. 286−291.
  137. ЮЛ., Сава В. М., Богатский A.B. Исследование природы парамагнетизма эномеланинов. 1. Индуцированный анаон-радикал семихинона// Журн. общ. химии. 1983. — Т.53. — № 1. — С. 164−172.
  138. Жеребин lO. JL, Сава BJVL, Богатский A.B. Исследование природы парамагнетизма эномеланинов. II. Феноксильный радикал // Журн. общ. химии. 1983. — Т. 53- - № 2. — С. 272−276.
  139. ЮЛ., Сава В. М., Богатский A.B. Исследование природы парамагнетизма эномеланинов. III. Донорно-акцепторные взаимодействия // Журн. общ. химии. 1984. — Т. 54. — № 6. — С. 1340−1348.
  140. Н., Скотт Дж. Деструкция и стабилизация полимеров.-М.: Мир, 1988.- 246 с.
  141. Д.А. Биохимические свойства меланинов из винограда (Vitis vinifera) и черного чая (Thea sinensis).: Автореф. .дис.кан.биол.наук.-Минск, 2002.-21с.
  142. В.Ф. Термодинамика хитина и хитозана приведено в «Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение» / Под.ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова. М: Наука, 2002.-С. 119−129.
  143. В.В., Бабицкая В. Г., Курченко В.П, Иконникова Н. В., Кукулянская Т. А. Антиокислительные свойства меланиновых пигментов грибного происхождения // Прикладная биохимия и микробиология.-2000.-Т.36.-Ж5.- С. 569−574.
  144. В.А., Обухова Г. В., Домнина Н. С., Кондакова Н. В., Топчиев Д. А. Конъюгаты хитозана с некоторыми природнымиантиоксидантами // Мат. 7-ой конф. «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана».М.: ВНИРО, — С. 218−220.
  145. В.П., Сенчук В. В. Современные подходы для экспресс-анализа генотоксичности ксенобиотиков // Мат. Международной научной конф. «Ксенобиотики и живые системы». Минск, 2000 — С. 273−276.
  146. В.П., Новиков Д. А., Желдакова Р. А. Антимутагенные свойства эномеланина // Мат. V Международного съезда «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения» СПб., 2001 г. — С.74−78.
  147. Naml K-S., Choi Y-R., Shonl Y-H. Evaluation of the antimutagenic potential of chitosan oligosaccharide: Rec, Ames and Umu tests // Biotechnology Letters.-2001.-V.23.-N.12.- P. 971−975.
  148. Yevdokimov Yu. M., Salyanov V.I. Liquid crystalline dispersions of complexes formed by chitosan with double-stranded nucleic acids // Liquid crystals.-2003.- V.30.-N.9.-P. 1057−1074.
  149. Je J-Y., Park P-J., Kim S-K. Radical scavenging activity of hetero-chitooligosaccharides // Eur. Food Res. Technol.-2004.-V.219.- N.I.- P.60−65.
  150. Xie W., Xu P., Liu Q. Antioxidant activity of water-soluble chitosan derivatives // Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. -2001.-V.11.-N.13.-P. 1699−1701.
  151. Schulz P.C., Rodriguez M.S., Del Blanco L.F., Pistonesi M., Agullo' E. Emulsification properties of chitosan // Colloid and Polymer Science.- 1998,-V.276. N.12.- P. 1159−1165.
Заполнить форму текущей работой