Структурные основы регуляции метаболизма липопротеинов плазмы крови человека при нормо-и гипертриглицеридемии

5. ВЫВОДЫ- 325.

4.5.5.

Заключение

324.

1. Изучить структуру и стабильность апобелков в растворе и липид-ассоциированном состоянии и роль индивидуальных доменов и частично-свернутых структур в связывании и обмене апобелков между липопротеинами.

2. Изучить особенности организации и динамики липидной фазы и связь с субстратными и лигандными свойствами липопротеинов разных классов.

3. Изучить влияние апобелков через белок-белковые и апобелок-липидные взаимодействия на эффективности гидролиза триглицеридов, генерации эфиров холестерина и связывания с ЛНП-рецептором.

4. Разработать и использовать метаболом-подобный подход для визуализации структурно-детерминированных компартментов системы транспорта липидов.

5. Оценить связи-между липиди апоЕ-содержащими компартментами и роль апоЕ в сопряжении метаболизма триглицерид-богатых липопротеинов и липопротеинов высокой плотности при нормои гипертриглицеридемии.

6. ОСНОВНЫЕ ЗАЩИЩАЕМЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ.

7. Разработан и использован метабол ом-подобный, подход для анализа системы транспорта липидов с параллельной детекцией распределения апоЕ и аналога церамида между липопротеинами.

8. Меньшая стабильность и специфическое междоменное взаимодействие в молекуле апоЕ4 приводят к накоплению апоЕ4 в ЛОНП.

9. АпоЕ является лигандом при взаимодействии ЛОНП с ЛНП-рецептором и эффективность взаимодействия возрастает при кластеризации нескольких молекул апобелка на поверхности частиц.

10. Белок-белковые взаимодействия в частицах ЛОНП возрастают при гипертриглицеридемии и апоС-Ш модулирует апоЕ-опосредованное взаимодействие частиц с ЛНП-рецептором.

11. С увеличением содержания триглицеридов плазмы конкуренция ЛОНП и ЛНП за ЛНП-рецептор in vivo нарастает.

12. АпоС-II активировал, а апоС-Ш бесконкурентно ингибировал. гидролиз триглицеридов липопротеинлипазой коровьего молока in vitro.

13. Активация печеночной липазы и ингибирование липопротеинлипазы, наиболее выраженные для апоЕ2, приводят к дефициту a-частиц ЛВП при гипертриглицеридемии.

14. Эффективность клиренса триглицеридов плазмы реципрокно контролируется апоЕ и апоС-III. Сниженный клиренс триглицеридов плазмы у пациентов с" апоЕ4 по сравнению с апоЕЗ и апоЕ2 ассоциирован со сниженным клиренсом ЛНП.

15. ПУБЛИКАЦИИ И АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ 1.6.1. Публикации По включенным в диссертацию материалам опубликовано 46 статей:

16. Дергунов А. Д., Шуваев В. В., Сокольников A.A., Метельская В. А., Перова Н. В. Кинетика гидролиза триолеина липопротеидлипазой в присутствии апобелка C-II // Доклады Академии Наук СССР. 1985. Т. 281, № 1. С. 195−200.

17. Шуваев В. В., Дергунов А. Д., Метельская В. А., Перова Н. В. Спектрофотометрическое определение активности липопротеидлипазы. В книге: Новые методы практической биохимии. М.: Наука, 1988. С.170−173.

18. Дергунов А. Д., Шуваев В. В., Перова Н. В. Белок-липидные взаимодействия в липопротеидах очень низкой плотности плазмы крови человека // Доклады АкадемииНаук СССР. 1988. Т. 299, № 6. С. 1498−1502.

19. Dergunov A.D., Shuvaev V.V., Perova N.V. VLDL substrate properties and efficiency of their metabolic transformation by LPL // Experientia. 1989. V. 45. P. 461−463.

20. Dergunov A.D., Shuvaev V.V., Perova N.V. Topo-dynamic characteristics of human plasma VLDL apolipoproteins and efficiency of triacylglycerol hydrolysis by lipoprotein lipase // Biochim. Biophys. Acta. 1989. V. 1005. P. 79−86.

21. Babaev V.R., Dergunov A.D., Chenchik А.А., Tararak E.M., Yanushevskaya E.V., Trakht I.N., Sorg C., Smirnov V.N. Localization of apolipoprotein E in normal and atherosclerotic human aorta // Atherosclerosis. 1990. V. 85. P. 239−247.

22. Дергунов А. Д., Шуваев B.B., Перова H.B. Динамическое поведение апобелков липопротеидов очень низкой плотности плазмы крови человека и регуляция процесса липолиза// Биохимия. 1990. Т. 55, № 1. С. 134−146.

23. Бабаев В Р., Дергунов А. Д., Трахт И. Н., Сироткин В. Н., Тарарак Э. М., Дедюева Е. Ю. Иммуноцитохимический г анализ распределения апопротеина Е в тканях человека // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1990. Т. 98, № 6. С. 71−76.

24. Бабаев В. Р., Дергунов А. Д., Курашвили Л. Р., Сироткин В. Н., Янушевская Е. В., Трахт И. Н., Тарарак Э. М. Локализация апопротеина Е в стенке аорты человека в норме и при атеросклерозе // Архив патологии. 1990. Т. 52, № 7. С. 52−56.

25. Motti С., Funke Н., Rust S., Dergunov A., Assmann G. Using mutagenic polymerase chain reaction primers to detect carriers of familial defective apolipoprotein B-100 // ClinicalChemistry. 1991. V. 37. P. 1762−1766.i.

26. Дергунов А. Д., Шуваев B.B., Янушевская E.B. Надмолекулярная организацияIаполипопротеина Е в растворе // Биохимия. 1991. Т. 56, вып. 7. С. 1312−1321.

27. Шуваев B.B., Дергунов А. Д., Перова H.B. Иммунохимическое обнаружениеотделения апобелков от частиц липопротеинов очень низкой плотности плазмы кровичеловека // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1992. Т. CXIV, № 11. С. 485−487.

28. Дергунов А. Д. Конкуренция сывороточного амилоидного белка и апобелка Е за связывание с сывороточным альбумином человека // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1992. Т. CXIV, № 12. С. 598−600.

29. Дергунов А. Д., Воротникова Ю. Ю. Взаимодействие сывороточного альбумина с апобелком Е и липопротеидами очень низкой плотности плазмы кровит человека // Биохимия. 1993. Т. 58, вып. 6. С. 944−952.

30. Dergunov A.D., Vorotnikova Y.Y., De Pauw M., Rosseneu M. Apolipoprotein E self-association in solution studied by nonradiative energy transfer // Journal of Biochemical and Biophysical Methods. 1994. V. 29. P. 259−267.

31. Dergunov A.D., Rosseneu M. The significance of apolipoprotein E structure to the metabolism of plasma triglyceride-rich lipoproteins (Review) // Biological Chemistry Hoppe-Seyler. 1994. V. 375. P. 485−495.

32. Dergunov A.D., Taveirne J., Vanloo В., Caster H., Rosseneu M. Structural organization of lipid phase and protein-lipid interface in apolipoprotein-phospholipid recombinants. Influence of cholesterol // Biochim. Biophys. Acta. 1997. V. 1346. P. 131−146.

33. Де Пау M., Ванлоо Б., Дергунов А. Д., Девриз А.-М., Баерт И., Брассер Р., Розеню М. Состав и структурно-функциональные свойства комплексов дискоидальной и сферической форм апобелка ЕЗ с фосфолипидом // Биохимия. 1997. Т. 62, № 3. С. 296 309.

34. Dobretsov G.E., Dergunov A.D., Taveirne J, Caster H., Vanloo В., Rosseneu M. Apolipoprotein localization in reconstituted HDL particles: fluorescence energy transfer study // Chemistry and Physics of Lipids. 1998. V. 97. P. 65−77.

35. Dergunov A.D., Dobretsov G.E. Apolipoprotein A-I localization and dipalmitoylphosphatidylcholine dynamics in reconstituted high density lipoproteins // Chemistry and Physics of Lipids. 2000 V. 104. P. 161−173.

36. Dergunov A.D., Dobretsov G.E., Visvikis S., Siest G. Protein-Lipid Interactions in Reconstituted High Density Lipoproteins: Apolipoprotein And Cholesterol Influence // Chemistry and Physics of Lipids. 2001. V. 113. P. 67−82.

37. Добрецов Г. Е., Дергунов А. Д. Пространственная структура дискоидальных липопротеинов высокой плотности // Биологические мембраны. 2001. Т. 18. С. 339 352.

38. Dergunov A.D., Vorotnikova Y.Y., Visvikis S., Siest G. Homoand hetero-complexes of exchangeable apolipoproteins in solution and’in lipid-bound form // Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy. 2003. V. 59. P. 1127−1137.

39. Дергунов А. Д. Связь структуры апобелка Е, субстратных свойств и рецепторной активности триглицерид-богатых липопротеинов плазмы крови при нормои гипертриглицеридемии (обзор) // Биохимия. 2004. Т. 69. С. 887−906.

40. Dergunov AD, Perova N.V., Visvikis S., Siest G. Time-dependent lipid response on fluvastatin therapy of patients with hypercholesterolemia sensitive to apoE phenotype // Vascular Pharmacology. 2004. V. 40. P. 237−245.

41. Barbier A., Clement-Collin V., Dergunov A.D., Visvikis A., Siest G., Aggerbeck L.P. The structure of human apolipoprotein E2, E3 and' E4 in solution. 1. Tertiary and quaternary structure//Biophysical Chemistry. 2006. V. 119. P. 158−169.

42. Дергунов А. Д. Роль апоЕ в «конформационных» патологиях и атеросклерозе // Биохимия. 2006. Т. 71. С. 876−881.

43. Dergunov A.D., Visvikis-Siest S., Siest G. Statins as effectors of key activities involved inapoE-dependent VLDL metabolism: review and hypothesis // Vascular Pharmacology. 2008. V. 48. P. 70−75.

44. Озвучивание смеси апобелка, ФЛ и ХС 117- 125. с генерацией в случае апоА-1 бислойных дисков с молярным отношением белок/ФЛ около 1:100 [125- 126];