Болезнь Марека

Факультет ветеринарной медицины Кафедра морфологии и микробиологии Курс ветеринарной вирусологии Курсовая работа Решение диагностической задачи № 11

Выполнил Лобанов А. В Курс: 3

Группа: ВВ-331

Введение

Болезнь Марека (лат. — Morbus Marek; англ. — Mareks Disease; нейролимфатоз птиц, паралич птиц, инфекционный нейролимфатоз птиц, энзоотический нейроэнцефаломиелит птиц, БМ). Впервые болезнь описана в 1907 г. венгерским профессором Й. Мареком как полиневрит. В последующие годы болезнь была зарегистрирована в различных странах под другими названиями (нейролимфатоз, паралич птиц, неврит, инфекционный нейрогрануломатоз и др.). Несколько позже (1926— 1929 гг.) американские исследователи Паппенгеймер, Дан и Зэйдлин установили, что кроме параличей и парезов у птиц возникают лимфоидные опухоли, сходные с опухолями, развивающимися при лимфоидном лейкозе. Это дало повод к объединению болезни Марека и разных форм лейкоза птиц в так называемый нейролимфоматоз.

В настоящее время доказано, что болезнь Марека и лимфоидный лейкоз различают как с точки зрения патологии, так и в этиологическом отношении.

Заболевание встречается во всех странах, в том числе и в России. Несмотря на 100%-ную вакцинацию птицы, в птицеводческих хозяйствах отмечаются вспышки болезни. В птицеводческих хозяйствах России болезнь Марека занимает одно из первых мест среди инфекционных заболеваний.

Болезнь Марека, являясь одной из наиболее распространенных болезней кур, встречается во всех странах мира. Наличие инфекции подтверждено во всех промышленных стадах птицы, которые были обследованы во всех частях света. До широкого применения вакцины в странах с хорошо развитым промышленным птицеводством из каждых 20 кур одна погибла от болезни Марека. Потери США от этой болезни перед началом применения вакцин составляли около 160 млн долларов в год.

За последние 40 лет после изоляции вируса изменилось вызываемое им заболевание. Со временем инфекция становится все более генерализованной, более острой, тяжелой. Расширяется хозяинный спектр. Основная причина изменения вируса БМ заключается в мутациях специфических вирусных генов, вызывающих изменения времени индукции опухолей, потерю А-АГ, снижение скорости репликации in vitro, снижение цитолитической активности in vivo, потерю способности размножаться в лимфоцитах и т. д. Данная эволюция ВБМ, возможно, является результатом иммунологического пресса, вызванного систематической поголовной вакцинацией цыплят, а также возможной рекомбинацией с другими вирусами.

Систематика герпесвирусов.

Герпесвирусы [греч. herpes, ползучее поражение кожи] представлены группой сравнительно крупных ДНК-геномных вирусов диаметром 150−200 нм. Нуклеокапсид герпесвирусов организован по типу кубической симметрии; геном представлен двухнитевой молекулой ДНК, содержащей короткий (18%) и длинный (82%) компоненты. В отличие от прочих одетых вирусов, суперкапсиды герпесвирусов образованы фрагментами ядерных мембран, так как созревание дочерних популяций происходит на внутренней мембране ядер заражений клетки. Суперкапсид герпесвирусов пронизывают гликопротеиновые шипы, образованные белками внутренней ядерной мембраны поражённых клеток. Между нуклеокапсидом и суперкапсидом герпесвирусов расположен покровный слой-тегумен [лат. tegumentum, покрытие], толщина которого варьирует у различных вирусов.

Таблица 1: Систематика герпесвирусов.

Герпесвирусы относительно нестабильны при комнатной температуре, термолабильны и быстро инактивируются растворителями и детергентами.

Герпесвирусы вызывают острые и латентные инфекции, а также обладают определённым онкогенным потенциалом. Доказана роль герпесвирусов в развитии болезней злокачественного роста у животных (например, болезнь Марека у цыплят), а также эпидемиологическая связь с образованием некоторых опухолей у человека. Современная систематика разделяет семейство Herpesviridae на подсемейства Alphaherpesviruses, Betaherpesviruses и Gammaherpesviruses.

* Альфагерпесвирусы проявляют высокую цитопатическую активность и патогенны для большого числа хозяев. Патогенные для человека виды включены в состав родов Simplexvirus (вирусы герпеса 1-го и 2-го типа, вирус В герпеса) и VariceUovims (вирус герпеса 3-го типа).

* Бетагерпесвирусы проявляют менее выраженную цитопатичность и патогенны для более узкого круга хозяев. Патогенные для человека виды включены в состав родов Cytomegalovirus (вирус герпеса 5 типа) и Roseolovirus (вирусы герпеса 6А, 6 В и 7 типов).

* Гаммагерпесвирусы также патогенны для небольшой группы хозяев и способны размножаться в лимфоидных клетках. Патогенные для человека виды включены в состав рода Lymphocryptovirus (вирус герпеса 4 типа).

Рис.1: Схема строения герпес-вируса.

2. Условие задачи Диагностическая задача № 11

На птицефабрике быстро распространяется заболевание кур всех возрастов. Гибель цыплят 70 — 80%, среди кур — 20−30%. Угнетение, сонливость, затруднение дыхания, кашель, слёзотечение, понос, шаткость походки, парез крыльев и ног.

На вскрытии катаральное воспаление слизистой оболочки глаз, гортани, трахеи, в сердечной мышце — кровоизлияния, слизистая оболочка ЖКТ гиперемирована с кровоизлияниями

3. Этиология заболевания Впервые болезнь описана в 1907 г. венгерским профессором Й. Мареком как полиневрит. В последующие годы болезнь была зарегистрирована в различных странах под другими названиями (нейролимфатоз, паралич птиц, неврит, инфекционный нейрогрануломатоз и др.). Несколько позже (1926— 1929 гг.) американские исследователи Паппенгеймер, Дан и Зэйдлин установили, что кроме параличей и парезов у птиц возникают лимфоидные опухоли, сходные с опухолями, развивающимися при лимфоидном лейкозе. Это дало повод к объединению болезни Марека и разных форм лейкоза птиц в так называемый нейролимфоматоз.

В настоящее время доказано, что болезнь Марека и лимфоидный лейкоз различают как с точки зрения патологии, так и в этиологическом отношении. Заболевание встречается во всех странах, в том числе и в России. Несмотря на 100%-ную вакцинацию птицы, в птицеводческих хозяйствах отмечаются вспышки болезни. В птицеводческих хозяйствах России болезнь Марека занимает одно из первых мест среди инфекционных заболеваний.

Возбудитель болезни. Возбудитель относится к семейству Herpesviridae, неклассифицирован в пределах подсемейств, роду Herpesvirus, группы В. Вирус болезни Марека может быть клеточносвязанным и свободным от клеток. Вирусные частицы обнаруживают в ядрах клеток. Антигенная структура вируса сложная. В его основе выделено шесть антигенов, из которых А, В и С считаются наиболее важными. Антиген, А содержится как в надосадочной жидкости инфицированной культуры клеток,

так и в экстракте зараженных клеток. Антигены В и С связаны с

зараженными клетками и обнаруживаются только в экстракте

инфицированных клеток. Антиген В является общим для вируса болезни Марека и вируса герпеса индеек, в то время как антигены этих вирусов родственны, но не идентичны. Антигены, А и В представляют собой гликопротеиды.

По современной классификации группу вируса болезни Марека подразделяют на три серотипа. К серотипу 1 относят все патогенные вирусы, способные вызывать у цыплят опухолевые поражения. Штаммы серотипа 2 не вызывают опухолевых изменений у цыплят, так как, вероятно, они природно ослаблены. Их используют для приготовления вакцин. Серотип 3 представлен вирусом герпеса индеек. В пере больной птицы и в пыли, взятой из птичника, неблагополучного по заболеванию, вирус остается жизнеспособным при 37 °C в течение 190 дней, при комнатной температуре и температуре бытового холодильника — 316 дней. В пыли, хранившейся при температуре от — 12 до 37 °C, вирус сохраняет активность до 459 дней, в перьевых фолликулах — до 445 дней. При воздействии 3%-ного раствора гидроксида натрия, креолина, лизола, 1%-ного раствора формальдегида, осветленной хлорной извести, содержащей 3% активного хлора, и других дезинфицирующих средств вирус инактивируется за 20 мин.

лимфоидный лейкоз животное герпесвирус энцефаломиелит

4. Выбор патматериала, методы консервирования Возбудитель болезни Марека относится к пантропным вирусам: с током крови, лимфы разносится по всем органам и тканям. Для исследования берут: при жизни — кровь, очины вырванных перьев; от трупов — селезёнка, печень, яичник, сердце, лёгкие, фабрицева сумка, тимус и опухолевые образования.

Рис. 2: опухолевый процесс в печени при болезни Марека Рис. 3: Воспаление бедренного нерва при болезни Марека Патматериал лучше исследовать в свежем виде, при необходимости проводят консервирование. Методы консервирования:

1. Замораживание.

2. 50% водный раствор глицерина. Недостаток этого метода — материал нельзя использовать для люминесцентной микроскопии.

3. Консервирование антибиотиками. Используются пенициллин, стрептомицин.

Кроме того, у каждой птицы с наружной поверхности бедра

выщипывают по 10… 15 перьев с наличием производящей ткани (эпителия перьевых фолликулов) внутри очина. Патологический материал используют для вирусологических (не позднее 2…3 ч после взятия) и патоморфологических исследований. При гистологическом исследовании характерным признаком считают наличие очаговодиффузных, инфильтративногиперпластических процессов в периферических нервах, внутренних органах, поперечнополосатой мускулатуре и коже. Характерным полиморфным составом инфильтратов считают такой, в котором преобладают лимфоидные клетки.

5. Подготовка патматериала для вирусологического исследования Проводится с целью освобождения вируса из клетки перед проведением вирусологического исследования. Этапы:

1) Освобождение от консерванта части материала. Вторую половину хранят в холодильнике до получения результатов исследования. При консервировании глицерином материал промывают в нескольких порциях стерильного физраствора.

2) Приготовление мазков.

3) Приготовление суспензии. Сначала материал измельчают, затем растирают до получения однородной суспензии в фарфоровых ступках со стерильным кварцевым песком, используют гомогенизаторы или ультразвуковые дезинтеграторы.

4) Центрифугирование суспензии при 1500 оборотов в минуту.

5) Полученную надосадочную жидкость отсасывают в стерильные пробирки.

6) К полученной жидкости добавляют антибиотик и выдерживают 1 час при комнатной температуре. Или проводят фильтрование через стерилизующие азбестовые фильтры.

7) Контроль полученного вируссодержащего материала на загрязнённость: проводится посев на питательные среды. При отсутствии посторонней микрофлоры вируссодержащий материал используется для вирусологического исследования.

6. Методы лабораторной диагностики

6.1 Экспресс-методы Для экспресс-диагностики используют:

1 РИФ.

2 Обнаружение телец-включений.

Метод флуоресцирующих антител (РИФ) В основе — взаимодействие специфических антител, меченных флуохромами с антигеном. Для мечения используются флуохромы, которые не изменяют основных свойств антител и их способности взаимодействовать с антигенами. Для постановки используются диагностические люминесцирующие сыворотки, содержащие меченные антитела.

Постановка реакции: 1) Прямой метод. На зафиксированный мазок наносят раствор флуохрома и окрашивают 25 минут при температуре 37 0 С во влажной камере (чашка Петри с фильтровальной бумагой, увлажнённой дистиллированной водой). Промывают водой, обрабатывают в фосфатно-буферном растворе для исключения неспецифического свечения.

2) Непрямой метод. Ставится в 2 варианта: а) с использованием антивидовой люминесцирующей сыворотки. На первом этапе на зафиксированный мазок наносят иммунную нефлуоресцирующую сыворотку с антителами, специфичными к возбудителю. После контакта тщательно промывают препарат. На втором этапе наносят антивидовую люминесцирующую сыворотку со специфичными антителами к глобулинам первой сыворотки. Контакт. Тщательно промывают, высушивают, микроскопируют.

б) с использованием антикомплиментарной люминесцирующей сыворотки. На первом этапе на мазок наносят смесь комплимента и иммунной нефлуоресцирующей сыворотки, содержащей антитела, специфичные предполагаемому возбудителю. Контакт. Препарат промывают. На втором этапе наносят антикомплиментарную люминесцирующую сыворотку. Контакт, промывают, высушивают, микроскопируют.

Обнаружение телец-включений По Романовскому-Гимзе азур-эозином. На приготовленный мазок наносят азур-эозин и окрашивают 10 минут. Тельца-включения при микроскопии будут фиолетового цвета, так как вирус болезни Марека ДНК-содержащий.

Применяют специальную окраску по Павловскому. Берут истечения из носовой полости, делают мазок, высушивают на воздухе, не фиксируют, на препарат наносят краску Павловского и окрашивают 10 минут, промывают водой, высушивают, микроскопируют. Цитоплазма эпителиальных клеток — бледно-розового цвета, ядро — фиолетового цвета. В ядре красного цвета тельца-включения.

6.2 Вирусологические методы

Herpesvirus удаётся культивировать на однодневных цыплятах; на куриных эмбрионах; на хорионаллантоисной оболочке в виде плотных очагов; в клеточной культуре куриных эмбрионов с образованием микроскопических телец-включений.

Биопроба на цыплятах.

Биопробу на цыплятах проводят с целью определения патогенности возбудителя дифференциации заболевания от некоторых форм гиповитаминозов, лейкоза, а также при экспериментальном изучении болезни Марека.

Цыплят получают из хозяйств, благополучных по инфекционным болезням птиц, где не проводится вакцинация против болезни Марека.

Тридцать однодневных цыплят заражают двукратно с интервалом в 2 дня по 0,3—0,4 мл внутрибрюшинно. В контроле одновременно содержат в аналогичных условиях 10—15 незараженных цыплят такого же возраста.

За птицей ведут ежедневно наблюдение в течение 85—90 дней при диагностике острой, формы болезни Марека и до 120 дней — классической формы.

Оценку результатов биопробы проводят по комплексу признаков, учитывая клиническое проявление болезни у зараженных цыплят, наличие вирусспецифического антигена в эпителии перьевых фолликулов, специфических микроскопических изменений в тканях (через 3—8 недель), опухолевых поражений в органах и специфических изменений в нервах через 1—4 месяца.

Биопроба на куриных эмбрионах. Для заражения используют куриные эмбрионы из хозяйств, благополучных по инфекционным болезням птиц, где не проводят вакцинацию цыплят против болезни Марека.

В первом варианте заражают 11—12-дневные куриные эмбрионы в хориоаллантоисную оболочку. Эмбрионы, зараженные на хорионаллантоисную оболочку, инкубируют в течение 7—8 дней. Гибель их считают специфической через 72 ч после заражения. При положительной биопробе появляются пустулы и очаги пролиферации. Признаком инфицирования эмбрионов вирусом болезни Марека считают их гибель и образование на хорионаллантоисной оболочке серовато-белых пролиферативных очажков-бляшек размером до 3 мм в диаметре, увеличение селезенки и печени эмбриона. Для учета очажков-бляшек хорионаллантоисную оболочку помещают в чашку Петри, наполненную физиологическим раствором, несколько раз отмывают, расправляют и просматривают с помощью, лупы на титропляторе или под микроскопом.

Микрои макроскопические бляшки и количество их на оболочке могут варьировать в зависимости от чувствительности куриных эмбрионов к вирусу болезни Марека и вирулентности штамма возбудителя.

Во втором варианте заражают 4-дневные эмбрионы в желточный мешок. В положительных случаях у 30% инфицированных эмбрионов через 12 — 14 дней на хорионаллантоисной оболочке развиваются пустулы. Гибель зародышей считается специфической с 8—9-го дня инкубации.

Выделение вируса на культуре клеток.

Для выделения вируса болезни Марека из патологического материала используют 24—48-часовую культуру первичнотрипсинизированных куриных фибробластов или 72-часовую культуру почек куриных эмбрионов или цыплят, которых готовят общепринятым методом и выращивают в стеклянных флаконах (матрасах) со смещенным горлом. .

В качестве питательной среды для культивирования клеток используют гидролизат лактальбумина, среду Игла или Эрла, или среду № 199. В ростовую среду добавляют 10% сыворотки крупного рогатого скота, в поддерживающую — 2%.

Культуру клеток заражают материалом, или 10%-ной суспензией из клеток почек больной птицы. Суспензию готовят по следующей методике: из почек вырезают кусочки размером 2—3 мм, дважды отмывают раствором Хенкса, вносят в колбу и заливают 0,25%-ным раствором трипсина в объеме 1: 10, Колбу помещают на магнитную мешалку, суспензию перемешивают в течение 20—30 мин при комнатной температуре. Затем клеточную взвесь фильтруют через 2 слоя марли и центрифугируют при 1 тыс. об/мин в течение 10—15 мин. Осадок ресуспензируют в культуральной питательной среде из расчета, чтобы в 1 мл взвеси было 3—4 млн, клеток. В суспензию добавляют по 1000 ЕД пенициллина и стрептомицина и 40—50 ЕД нистатина на 1 мл суспензии, выдерживают в холодильнике в течение 30—60 мин при температуре 4 °C, после чего используют для заражения. Перед заражением из матраса (флакона) удаляют ростовую среду и на сформированный монослой клеток вносят исследуемый материал в дозе по 3 мл на флакон размером 4X5 см.

После контакта в термостате в течение 30 мин клетки заливают поддерживающей средой и продолжают инкубировать. По мере закисления (изменение цвета среды, величины рН) поддерживающую среду заменяют.

На 7—8-й день проводят второй пассаж вируса. Для этого поддерживающую среду осторожно удаляют, вносят на монослой одного матраса 1—2 мл подогретого до 30—37 °С 0,125%-ного раствора трипсина и оставляют на контакте при комнатной температуре в течение 2—3 мин. Затем трипсин полностью сливают, а в матрас вносят питательную среду и путем энергичного встряхивания клетки отслаивают от стекла. Полученной суспензией клеток заражают свежий монослой из расчета 1:3, т. е. вирусом, собранным с одного флакона, можно заразить монослой 3 флаконов (из расчета 3—4 млн. вируссодержащих клеток на монослой 1 флакона). После контакта в течение 30 минут клетки заливают поддерживающей средой и продолжают инкубировать 48—72 ч.

Через 6 — 7 дней проводят третий пассаж вируса по такой же методике.

Учет результатов пассажей ведут по характеру цитопатогенного действия (ЦПД) вируса, имея в виду, что вирус болезни Марека вызывает цитопатические изменения монослоя в виде фокусов, состоящих из скопления округлых рефрактильных клеток, синцитиев и микроскопически видимых бляшек — негативных пятен.

Сроки наступления ЦПД зависят от дозы вируса и количества пассажей. При первичном выделении возбудителя специфические морфологические изменения клеток обычно проявляются во втором, третьем пассажах вируссодержащего материала через 48—96 ч. Специфичность ЦПД подтверждается путем исследования отдельных проб материала в РДП.

В качестве антигена для РДП используется культуральная жидкость, сконцентрированная в 20—50 раз диализом против глицерина или сахарозы в целлофановых мешочках.

Сроки установления диагноза.

По данным лабораторного исследования, диагноз на болезнь Марека ставят через 4 дня по результатам РДП и цитологического метода и через 14 дней — по результатам гистологического исследования.

Из серологических методов используют РДП для обнаружения в перьевых фолликулах специфического антигена.

От каждой исследуемой птицы с наружной поверхности бедра выщипывают по 15 перьев с наличием производящей ткани (эпителия перьевых фолликулов) внутри очина. Очины пера измельчают ножницами на кусочки по I—2 мм, затем их растирают в ступке или гомогенизаторе. Полученную массу заливают физиологическим раствором 1:10, замораживают и оттаивают, после чего выдерживают сутки при 4 °C. Надосадочную жидкость используют в качестве испытуемого антигена.

Цель: Обнаружение вирусного антигена в эпителии перьевых фолликулов и антител в сыворотке крови в реакции диффузионной преципитации.

1. В РДП исследуют не менее 10 проб сывороток крови птиц и 10 антигенов (проб пера) от цыплят 30—150-дневного возраста и взрослой птицы.

2. РДП ставят в агаровом геле.

3. Компоненты реакции: специфическая преципитирующая сыворотка; контрольная отрицательная сыворотка; специфический антиген; контрольный отрицательный антиген; испытуемый материал.

Перед постановкой реакции агар расплавляют и разливают тонким слоем в чашки Петри или на обезжиренные предметные стекла. В слое застывшего агара при помощи штампа нарезают лунки.

Постановка реакции:

а) Цель: для идентификации антигена в центральные лунки вносят специфическую сыворотку, а в периферические — испытуемый антиген.

Контроли: 1) специфический антиген+специфическая сыворотка; 2) специфический антиген+отрицательная сыворотка.

б) Цель: для выявления антител в сыворотке крови в центральную лунку вносят специфический антиген, а в периферические — исследуемые сыворотки.

Чашки Петри или предметные стекла помещают во влажную камеру, выдерживают сутки при температуре 37 °C, затем — сутки при комнатной.

Учет реакции. Результаты реакции учитывают предварительно через 24—48 ч и окончательно — через 72 ч.

Реакцию считают положительной при наличии четко выраженных полос преципитации между лунками с испытуемым антигеном и специфической сывороткой, а также между контрольным положительным антигеном и специфической сывороткой при отрицательном результате с отрицательной сывороткой.

Также антиген обнаруживают в пораженных участках хорионаллантоисной оболочки и в экстраэмбриональной жидкости.

Подготовка для РДП. Собирают пораженные участки хорионаллантоисной оболочки и экстраэмбриональную жидкость. Хорионаллантоисные оболочки растирают в ступке с песком или измельчают в гомогенизаторе, добавляют физиологический раствор в объеме 1:3 и центрифугируют. Надосадочную жидкость соединяют с экстраэмбриональной жидкостью и концентрируют в 20 раз выпариванием в токе воздуха от вентилятора. Полученный концентрат используют в качестве антигена в РДП.

6.3 Ретроспективная диагностика Ретроспективная диагностика — это исследование парных сывороток крови у переболевших животных по приросту титра антител в серологических реакциях. Эта диагностика не применяется при болезни Марека.

6.4 Дифференциальная диагностика Болезнь Марека дифференцируют от лимфоидного лейкоза, авитаминозов В, Е, D, инфекционного энцефаломиелита, ньюкасловской болезни, гриппа, листериоза и некоторых отравлений.

Практическое значение имеет дифференциальная диагностика болезни Марека и заболеваний лейкозо-саркомной группы (лимфоидный лейкоз), поскольку они распространены наиболее широко.

Лимфоидный лейкоз — слабоконтагиозная болезнь, протекает хронически и бессимптомно, вызывает незначительный или умеренный (до 3—5%) отход птицы обычно в возрасте 6—12 месяцев. В отличие от болезни Марека при лимфоидном лейкозе нет макрои микроскопических изменений в центральной и периферической нервной системах, практически нет лимфоидных опухолей в коже и мышцах, но поражается, как правило, фабрициева сумка. Опухоли развиваются чаще в печени, селезенке и реже в других органах.

Микроскопические изменения в тканях при лейкозе и болезни Марека различаются по характеру клеточных инфильтратов. Характерным полиморфным составом инфильтратов при болезни Марека считают такой, в котором преобладают лимфоидные клетки.

При дифференциации болезни Марека от лимфоидного лейкоза необходимо также учитывать характеристику возбудителей, относящихся к разным таксономическим группам и имеющим различные биологические свойства.

В нашей стране принята схема дифференциальной диагностики болезни Марека, лимфоидного лейкоза и инфекционного энцефаломиелита, прилагаемая к действующей инструкции по борьбе с болезнью Марека.

Таблица 1: Дифференциальная диагностика острой (висцеральной) формы болезни Марека и лимфоидного лейкоза птиц по данным патологоанатомического и гистологического исследований

Характерным диагностическим признаком для болезни Марека считают наличие очагово-диффузных инфильтративно-гиперпластических процессов в периферических нервах, внутренних органах, поперечнополосатой мускулатуре и коже. Характерен полиморфно-клеточный состав инфильтратов, в которых преобладают лимфоидные, в меньшем количестве — бластные клетки, большое количество недифференцированных крупных опухолевых клеток.

Для дифференциации лейкоза от болезни Марека проводят лабораторную диагностику. Лабораторная диагностика лейкоза птиц основана на выявлении группоспецифического антигена в реакции связывания комплемента.

В этом случае компонентами бактериолитической системы являются: исследуемый вируссодержащий материал; диагностическая сыворотка с заведомо известными антителами; комплемент.

Компоненты гемолитической системы, которая нужна для визуального определения реакции: гемолизин; эритроциты.

Учёт: При положительной реакции: в день постановки и на следующий день жидкость в пробирке мутная красного цвета, на следующий день — осадок из эритроцитов, жидкость над осадком прозрачная.

При отрицательной реакции: в день постановки и на следующий день жидкость прозрачная лаково-красного цвета.

Для прижизненной серологической диагностики компонентами реакции являются: Исследуемая сыворотка с неизвестными антителами; диагностикум; комплемент.

Учёт: При положительной реакции: в день постановки и на следующий день жидкость в пробирке мутная красного цвета, на следующий день — осадок из эритроцитов, жидкость над осадком прозрачная.

7. Специфическая профилактика и терапия В настоящее время рекомендуются вакцинация против БМ в суточном возрасте и ревакцинация в возрасте между 14-м и 21-м днем. Принимаемый на выращивание молодняк вакцинируют против болезни Марека в суточном возрасте, однократно, непосредственно в инкубатории. Привитую птицу содержат изолированно от птиц других возрастных групп. Иммунитет у привитых цыплят вырабатывается на 21…28-й день. Вакцинацию птицы проводят одной из перечисленных ниже вакцин:

1) жидкой культуральной вирусвакциной из штамма ФС-126 вируса герпеса индеек; 2) сухой культуральной вирусвакциной из штамма ФС-126 вируса герпеса индеек; 3) жидкой культуральной бивалентной вирусвакциной против болезни Марека из апатогенного штамма ВНИВИП вируса болезни Марека и авирулентного штамма ФС-126 вируса герпеса индеек; 4) сухой вирусвакциной из штамма ВНИИЗЖ для вакцинации бройлеров; 5) жидкой культуральной вирусвакциной из штамма 3004 (серотип 1). Кроме вакцин отечественного производства широко используются зарубежные («TAD Марек», «Керамвак» и др.).

Лечение не разработано.

Заключение

По всем патологоанатомическим признакам, клинической картине и эпизотологической ситуации видно, что возбудителем является вирус болезни Марека. Эту болезнь удалось дифференцировать от лимфоидного лейкоза по лабораторным методам диагностики — РСК, РДП, РИФ.

Степень выраженности и формы болезни зависят от вирулентности вируса и генетически обусловленной породой чувствительности кур. Одни штаммы вируса обладают высокой патогенностью и вызывают острую форму болезни Марека, другие — менее патогенны и вызывают классическую форму, третьи вообще непатогенны. Такие штаммы вируса могут одновременно встречаться в одном хозяйстве.

Herpesvirus удаётся культивировать на однодневных цыплятах; на куриных эмбрионах; на хорионаллантоисной оболочке в виде плотных очагов; в клеточной культуре куриных, эмбрионов с образованием микроскопических телец-включений.

1. Лабораторные исследования в ветеринарии: Вирусные, риккетсиозные, паразитарные болезни: Справочник/под ред. Б. И. Антонова.- М.:Агропромиздат, 1987.

2. Инфекционные болезни животных / Б. Ф. Бессарабов, А. А. Вашутин, Е. С. Воронин; Под ред. А. А. Сидорчука. — М.: Колосс, 2007

3. Ветеринарная вирусология / В. Н. Сюрин, Р. В. Белоусова, Н. В. Фомина.- 2-е изд., перераб. и доп.- М.:Агропромиздат 1991

4. Алтухов Н. Н. Краткий справочник ветеринарного врача Москва: Агропромиздат, 1990

5. Справочник ветеринарного врача/ А. Ф. Кузнецов. — Москва: «Лань», 2002. 896с.

6. Справочник ветеринарного врача/ П. П. Достоевский, Н. А. Судаков, В.А., Атамась и др. — М.: Агропромиздат, 1990. — 784с.

7. Гавриш В. Г. Справочник ветеринарного врача, 4 изд. Колосс, 2007