Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Влияние чумного микроба и его антигенов на функционально-метаболическую активность электрокинетически гетерогенных субпопуляций фагоцитов

Диссертация: Влияние чумного микроба и его антигенов на функционально-метаболическую активность электрокинетически гетерогенных субпопуляций фагоцитов
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

В настоящее время хорошо известно, что все процессы, связанные с изменением функциональной активности иммунокомпетентных V клеток (в том числе макрофагов), начинаются с изменения свойств клеточных мембран (Ляшенко В.А., 1988; Petty R., 1980; Lewie С.Е., 1992; Bauer J., 1994). Мембрана фагоцитов рассматривается как динамичная, постоянно изменяющаяся структура. При активации или дифференцировке… Читать ещё >

Влияние чумного микроба и его антигенов на функционально-метаболическую активность электрокинетически гетерогенных субпопуляций фагоцитов (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • ГЛАВА 1. ЭЛЕКТРОКИНЕТИЧЕСТКИЙ ПОТЕНЦИАЛ КЛЕТОК И ЕГО ИЗМЕНЕНИЕ В ПРОЦЕССЕ ИММУНОГЕНЕЗА (обзор литературы)
  • ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
  • ГЛАВА 3. ИЗМЕНЕНИЕ ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОЙ ПОДВИЖНОСТИ КЛЕТОК СИСТЕМЫ ФАГОЦИТИРУЮЩИХ МОНОНУКЛЕАРОВ В ПРОЦЕССЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ (IN VIVO И IN VITRO) С ВАКЦИННЫМ ШТАММОМ ЧУМНОГО МИКРОБА
    • 3. 1. Изменения электрофоретической подвижности макрофагов белых мышей, иммунизированных штаммом У. ревИв EV
    • 3. 2. Изменения электрофоретической подвижности макрофагов мышей линии CC57W, иммунизированных Y. pestis EV 4g
    • 3. 3. Изменения электрофоретической подвижности макрофагов белых мышей в процессе взаимодействия in vitro с Y. pestis EV ^
    • 3. 4. Изменение электрофоретической подвижности моноцитов крови людей в процессе взаимодействия in vitro с Y. pestis EV qq
  • ГЛАВА 4. ИЗМЕНЕНИЯ ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОЙ ПОДВИЖНОСТИ КЛЕТОК СИСТЕМЫ ФАГОЦИТИРУЮЩИХ МОНОНУКЛЕАРОВ ПРИ ВЗАИМОДЕЙСТВИИ IN VIVO И IN VITRO С АНТИГЕНАМИ ЧУМНОГО МИКРОБА
    • 4. 1. Изменение электрофоретической подвижности индуцированных перитонеальных макрофагов белых мышей в процессе взаимодействия с основным соматическим антигеном чумного микроба in vivo
    • 4. 2. Изменение электрофоретической подвижности индуцированных перитонеальных макрофагов белых мышей в процессе взаимодействия с антигеном чумного микроба Fl in vivo
    • 4. 3. Изменение электрофоретической подвижности индуцированных перитонеальных макрофагов морских свинок в процессе взаимодействия с антигеном чумного микроба Fl in vivo
    • 4. 4. Изменение электрофоретической подвижности моноцитов крови людей в процессе взаимодействия с основным соматическим антигеном чумного микроба in vitro
    • 4. 5. Изменение электрофоретической подвижности моноцитов крови людей в процессе взаимодействия in vitro с антигеном чумного микроба FI
  • Глава 5. ИССЛЕДОВАНИЕ (ПРИ ВЗАИМОДЕЙСТВИИ С Y. PESTIS EV IN VITRO) ФУНКЦИОНАЛЬНО-МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЭЛЕКТРОФОРЕ-ТИЧЕСКИ ГЕТЕРОГЕННЫХ СУБПОПУЛЯЦИЙ ФАГОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
    • 5. 1. Исследование (при взаимодействии с Y. pestis EV in vitro) функциональной активности электрокинетически гетерогенных субпопуляций нейтрофильных лейкоцитов
    • 5. 2. Исследование (при взаимодействии с антигенами Y. pestis EV in vitro) метаболической активности элек-трофоретически гетерогенных субпопуляций моноцитов

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Совершенствование специфической профилактики чумы является одной из актуальных задач иммунологии. Решение этой проблемы требует комплексного подхода, который включает в себя исследование механизмов формирования противочумного иммунитета. Фундаментальными исследованиями ряда ученых (Пустовалов В.Л. с соавт., 1984; Васильева Г. И. с соавт., 1990;1998; Ледванов М. Ю. с соавт., 1990;1997; Веркина Л. М., 1994) было доказано, что течение вакцинного и инфекционного процессов при чуме в значительной степени зависит от исхода взаимодействия клеток макрофагального звена с возбудителем инфекции.

К настоящему времени изучено влияние чумного микроба и его антигенов на ряд функциональных, метаболических и морфологических изменений клеток системы мононуклеарных фагоцитов (СМФ). Современные представления о роли клеток СМФ основываются на их гетерогенности по функциональной активности, экспрессии поверхностных структур, регуляторным и эффекторным свойствам. Мононук-леарные фагоциты выполняют множество функций в большинстве из которых участвует клеточная поверхность и большое количество мембран-связанных плазматических молекул клеток (рецепторы к Рс-части иммуноглобулина, к компонентам комплемента, к терминалу сахарных остатков и т. д.). Необычайная сложность проблемы гетерогенности фагоцитарных клеток требует разработки новых нетрадиционных подходов к ее анализу. Одним из методов тестирования функционального состояния клеток СМФ является определение их элек-трофоретической подвижности (ЭФП), обусловленной величиной электрического заряда клеток. Электрический заряд, структура поверхностной мембраны и функциональные свойства клетки находятся в тесной взаимосвязи. Метод проточного распределительного клеточного электрофореза в свободном потоке дает возможность изучить характер изменений ЭФП клеток под действием на организм или непосредственно на мононуклеарные фагоциты различных антигенов и вакцин. В работах ряда исследователей (Ермакова Г. В., 1982; Корсуков В. Н., 1984; Ледванов М. Ю., 1984; Тихомирова Л. А., 1985; Тихомирова Е. И., 1990) показана возможность использования данного метода в качестве важного иммунологического критерия, характеризующего изменения ЭФП лимфоцитов в процессе иммуногенеза к чуме. Тем не менее, нами не было найдено работ, касающихся динамики изменений ЭФП фагоцитирующих клеток при формировании иммунитета к чуме. Неизвестна популяционная и функциональная гетерогенность фагоцитов, различающихся по признаку электрофоретиче-ской подвижности. Известно, что популяции клеток СМФ различаются по экспрессии ключевых ферментов окислительного и гликолитиче-ского пути метаболизма (Хаитов P.M., 1995). Однако сравнительной оценки биохимических показателей электрокинетически гетерогенных популяций фагоцитов при взаимодействии с различными штаммами чумного микроба до настоящего времени не проводилось.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: изучить влияние чумного микроба и его антигенов на функционально-метаболическую активность электрокинетически гетерогенных популяций фагоцитирующих клеток, определить возможность использования показателей электрофоретической подвижности фагоцитов для оценки иммунобиологических свойств чумного микроба и его антигенов, а также иммуномониторинга противочумного вакцинного процесса.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1. Изучить влияние иммунизации мышей (беспородных и инбредных) вакцинным штаммом Y. pestis EV на изменение электрофоретической подвижности перитонеальных макрофагов.

2. Определить характер и количественные критерии изменения электрофоретической подвижности перитонеальных макрофагов при взаимодействии in vitro с клетками Y. pestis EV.

3. Изучить влияние иммунизации мышей и морских свинок основным соматическим и капсульным антигенами Y. pestis на изменение электрофоретической подвижности перитонеальных макрофагов.

4. Установить изменения электрофоретической подвижности моноцитов крови людей при взаимодействии in vitro с основным соматическим и капсульным антигенами Y.pestis.

5. Провести сравнительный анализ изменений ключевых ферментов пентозофосфатного пути обмена углеводов (глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы), цикла Кребса (сукцинатдегидрогеназы) и гликолиза (лактатдегидрогеназы) в электрокинетически гетерогенных фракциях фагоцитов в динамике взаимодействия с основным соматическим и капсульным антигенами Y.pestis.

6. Изучить функциональную активность электрокинетически гетерогенных популяций макрофагов при взаимодействии in vitro с клетками Y. pestis EV.

7. Определить возможность использования показателей электрофоретической подвижности фагоцитов для оценки иммунобиологических свойств чумного микроба и его антигенов, а также для иммуномонито-ринга противочумного вакцинного процесса.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые с использованием свободного распределительного клеточного электрофореза в потоке показано, что иммунизация белых мышей вакцинным штаммом Y. pestis EV сопровождается снижением электрофоретической подвижности основного пула перитонеальных макрофагов и появлением электрофоретически гетерогенных популяций. Обнаружено, что изменения электрокинетических свойств макрофагов в процессе иммуногенеза к чуме зависят от генотипа животных. Инбредная линия мышей CC57W реагирует меньшим, по сравнению с беспородными, снижением электрофоретической подвижности (ЭФП) макрофагов. Выявлены характерные для линии CC57W особенности формирования электрофоретически гетерогенных популяций перитонеальных макрофагов.

Впервые установлено, что иммунизация белых мышей основным соматическим и капсульным антигенами чумного микроба вызывает снижение ЭФП основной массы макрофагов, формирующих в большинстве сроков исследования две электрофоретически различающиеся популяции. Капсульный антиген обладает более выраженной, по сравнению с основным соматическим, способностью снижать ЭФП фагоцитов. Макрофаги неиммунизированных морских свинок формируют пять электрофоретически гетерогенных популяций. Иммунизация морских свинок капсульным антигеном сопровождается резким снижением ЭФП макрофагов и преобладанием трех элекрофоретически различающихся популяций клеток.

Новыми являются данные, показавшие, что адгезия макрофагов к стеклу, сопровождающаяся активацией клеток, приводит к фазному изменению ЭФП популяций фагоцитов — снижению ЭФП, сменяющемуся повышением их электрокинетического потенциала. Взаимодействие in vitro макрофагов животных и моноцитов крови людей с клетками и антигенами Y. pestis EV сопровождается характерными изменениями конфигурации кривой распределения макрофагов по электрофорети-ческой подвижности.

Впервые исследован в электрокинетически гетерогенных популяциях фагоцитов характер изменений активности ключевых ферментов углеводного обмена. Показано, что взаимодействие in vitro антигенов чумного микроба с моноцитами крови людей сопровождается снижением их электрофоретической подвижности и увеличением внутриклеточной активности ключевых ферментов пентозофосфатного пути обмена углеводов — глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и гиколитического пути — лак-татдегидрогеназы. Под влиянием капсульного антигена активность сукци-натдегидрогеназы снижается. Внутри общего пула выделенных моноцитов максимальные ферментативные активности регистрируются в субпопуляциях, характеризующихся более высокой электрофоретической подвижностью.

Комплексный анализ функциональной (фагоцитарного индекса и фагоцитарной активности) и метаболической активности различных типов фагоцитов позволил выявить наличие стереотипной реакции мембран в процессе активации клеток, выражающейся в снижении их электрокинетического потенциала.

На модели взаимодействия (in vivo и in vitro) фагоцитирующих клеток с чумным микробом и его антигенами подтверждена необходимость пересмотра представлений и подходов к оценке роли этих клеток в иммунопатогенезе чумы с учетом их популяционной гетерогенности.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. Определены количественные критерии изменений электрофоретической подвижности маки рофагов, нейтрофильных лейкоцитов и моноцитов при контакте in vivo и in vitro с чумным микробом и его антигенами. Расширены границы области практического применения проточного клеточного распределительного электрофореза для изучения функциональной активности отдельных популяций фагоцитирующих клеток. Показана эффективность использования тестирования электрофоретической подвижности фагоцитов для характеристики иммунобиологических свойств антигенов чумного микроба и иммуномониторинга противочумного вакцинного процесса. Метод определения электрофоретической подвижности фагоцитирующих клеток (тестирование формирования электро-кинетически гетерогенных популяций фагоцитов) рекомендуется для использования на этапах испытания новых или усовершенствованных противочумных вакцинных препаратов, а также при составлении рациональных схем иммунизации и при экспериментальной разработке патогенетически обоснованных способов иммунокоррекции.

ВНЕДРЕНИЕ В ПРАКТИКУ. По материалам экспериментальных исследований составлены методические рекомендации: «Оценка попу-ляционного состава клеток системы мононуклеарных фагоцитов методом разделительного клеточного электрофореза», которые были обсуждены и одобрены Ученым Советом РНИПЧИ «Микроб» (протокол № 15 от 19 ноября, 1996г), утверждены директором 19 ноября, 1996 г. Метод применяется в научных исследованиях на кафедре гистологии (СГМУ), НИИ кардиологии при СМУ, 5-ой детской объединенной инфекционной больницы г. Саратова, о чем имеются соответствующие акты о внедрении. Материалы диссертационного исследования используются при чтении лекций на курсах специализации врачей по особо опасным инфекциям и курсах усовершенствования врачейбактериологов и иммунологов общей медицинской сети (при институте «Микроб»).

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

Характеристика основных закономерностей влияния in vivo и in vitro чумного микроба на функционально-метаболическую активность электрокинетически гетерогенных субпопуляций фагоцитирующих клеток.

2.Зависимость изменения электрокинетических свойств макрофагов в процессе иммуногенеза к чуме от генотипа животных.

3.Новые данные сравнительного анализа электрокинетических свойств макрофагов, моноцитов, нейтрофильных лейкоцитов при взаимодействии с основным соматическим и капсульным антигенами чумного микроба.

4.Новые данные сравнительного анализа изменений активности ферментов углеводного обмена (глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа, сукцинатдегидрогеназа, лактатдегидрогеназа, малатдегидрогеназа) в электрокинетически гетерогенных субпопуляциях фагоцитов в динамике иммунногенеза к чуме.

5.Установление обратной коррелятивной зависимости между функционально-метаболической активностью фагоцитов и их электрокинетической подвижностью.

6.Доказательства эффективности использования свободного распределительного клеточного электрофореза для оценки популяцион-ной гетерогенности и функциональной активности клеток системы мо-нонуклеарных фагоцитов в динамике иммуногенеза к чуме.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Материалы диссертации представлены: -на межгосударственной научной конференции, посвященной 100-летию открытия возбудителя чумы, Алматы, 1994;

— на научной конференции, посвященной 60-летию Иркутского ПЧИ, Иркутск, 1994;

— на итоговой научной конференции в РНИПЧИ «Микроб», Саратов, 1994;

— на международной конференции по иммунореабилитации, Дагомыс, 1994;

— на международной конференции «Гомеостаз и инфекционный процесс», Саратов, 1996;

— на научной конференции «Эколого-эпидемиологический надзор за природно-очаговыми инфекциями в Северном Прикаспии», Астрахань, 1996;

— на научно-практической конференции, посвященной 100-летию образования противочумной службы России, Саратов, 1997; -на съезде аккушеров-гинеколов, Самара, 1997; -на Российской научной конференции «Человек и здоровье», С. Петербург, 1997.

Диссертация обсуждена и одобрена на расширенной научной конференции лаборатории иммунологии РосНИПЧИ «Микроб» в 1998 г.

ПУБЛИКАЦИИ. По материалам диссертации опубликовано 17 научных работ.

ВЫВОДЫ.

1. Иммунизация белых мышей вакцинным штаммом Y. pestis EV сопровождается снижением электрофоретической подвижности основного пула перитонеальных макрофагов и появлением электрофо-ретически гетерогенных популяций.

2. Изменения электрокинетических свойств макрофагов в процессе иммуногенеза к чуме зависят от генотипа животных. Инбредная линия мышей CC57W реагирует меньшим, по сравнению с беспородными, снижением электрофоретической подвижности макрофагов. Выявлены характерные для линии CC57W особенности формирования электрофоретически гетерогенных популяций перитонеальных макрофагов.

3. Адгезия макрофагов к стеклу, сопровождающаяся активацией клеток, приводит к дифференцированному изменению электрофоретической подвижности популяций фагоцитов. Через 60 минут после адгезии наблюдается выраженное снижение электрофоретической подвижности большинства клеток, сменяющееся повышением через 180 и 360 минут.

4. Взаимодействие in vitro макрофагов с клетками Y. pestis EV приводит к значительному изменению конфигурации кривой распределения макрофагов по электрофоретической подвижности. На 60 минуте инкубации тестируются до четырех электрофоретически гетерогенных популяций, одна из которых (46−47 фракция — 30±4.12% клеток) обладает резко выраженной высокой элеткрофоретической по-жвижностью.

5. Иммунизация белых мышей основным соматическим и кап-сульным антигенами чумного микроба вызывает снижение электрофоретической подвижности основной массы макрофагов, формирующих в большинстве сроков исследования две электрофоретически различающиеся популяции. Капсульный антиген обладает более выраженной, по сравнению с основным соматическим, способностью снижать электрофоретическую подвижность фагоцитов.

6. Макрофаги неиммунизированных морских свинок формируют пять электрофоретически гетерогенных популяций. Иммунизация морских свинок капсульным антигеном сопровождается резким снижением электрофоретической подвижностью макрофагов и преобладанием трех элекрофоретически различающихся популяций клеток.

7. Адгезия моноцитов крови людей к стеклу приводит к выраженному дифференцированному изменению электрофоретической подвижности популяций фагоцитов. Спустя 30 минут наблюдается снижение электрофоретической подвижности большинства клеток, разделившихся на 2 популяции. Инкубация in vitro моноцитов человека с антигенами чумного микроба (капсульным FI и основным соматическим) сопровождается снижением электрофоретической подвижности с формированием характерной кривой распределения клеток по данному свойству.

8. Взаимодействие in vitro антигенов чумного микроба с моноцитами крови людей сопровождается снижением их электрофоретической подвижности и увеличением внутриклеточной активности ключевых ферментов пентозофосфатного пути обмена углеводов — глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и гиколитического пути — лактатдегидрогеназы. Под влиянием капсульного антигена активность сукцинатдегидрогеназы снижается. Внутри общего пула выделенных моноцитов максимальные ферментативные активности регистрируются в субпопуляциях, характеризующихся более высокой электрофоретической подвижностью.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

В настоящей работе с использованием комплекса современных иммунологических, биохимических, физико-химических методов изучена функционально-метаболическая активность электрокинетиче-ски-гетерогенных субпопуляций фагоцитирующих клеток в процессе иммуногенеза к чуме (под действием клеток вакцинного штамма EV, а также важнейших антигенов чумного микроба — капсульного и основного соматического). Объектами исследования служили перитоне-альные макрофаги экспериментальных животных (морских свинок и мышей различных линий), моноциты и нейтрофильные лейкоциты крови человека. Интерес к изучению макрофагов был обусловлен не только тем, что в активированных макрофагах происходит киллинг чумного микроба, но и определяющей ролью этих клеток в инициации и регуляции клеточного иммунного ответа (Коробкова Е.И., 1960; Пус-товалов В.Л., 1984; Васильева Г. И., 1990; Une T., Brubaker R.R., 1984). По изменению свойств моноцитов и нейтрофильных лейкоцитов крови людей, в свою очередь, представлялось возможным судить о направленности и особенностях функциональных сдвигов в фагоцитирующих клетках иммунной системы человека.

В итоге выполненных исследований получены представленные ниже в обобщенном виде следующие основные результаты.

Противочумный вакцинный процесс в организме экспериментальных животных сопровождается изменением электрофоретических свойств мононуклеарных фагоцитов. Иммунизация мышей вакцинным штаммом Y. pestis EV во все сроки наблюдения (1, 3, 7, 14 и 21 сутки иммуногенеза) приводила к снижению электрофоретической подвижности перитонеальных макрофагов по сравнению с контролем неиммунизированные животные). Уже на 1 сутки иммуногенеза было обнаружено разделение общего пула макрофагов на две субпопуляции. Большая по количеству клеток субпопуляция макрофагов обладала более низкой электрофоретической подвижностью. Наиболее значимое разделение перитонеальных макрофагов на субпопуляции с различной электрофоретической подвижностью было зарегистрировано на 7 и 14 сутки иммуногенеза. На 21 сутки формиробания иммунитета к чуме вся популяция перитонеальных макрофагов была представлена одним пулом клеток со значительно сниженной электрофоретической активностью по сравнению с контролем (р<0,001).

Электрокинетические свойства макрофагов иммунизированных животных зависели от генотипа мышей. Инбредная линия мышей CC57W также реагировала снижением электрофоретической подвижности макрофагов и формированием электрофоретически различающихся субпопуляций. Однако эти сдвиги отличались от зарегистрированных у беспородных мышей как качественно (по срокам появления и характеристикам субпопуляций), так и количественно — по уровню о л снижения электрофоретической подвижности. У исследуемой линии снижение электрофоретической подвижности (особенно на 21 сутки) было менее заметно.

В настоящее время хорошо известно, что все процессы, связанные с изменением функциональной активности иммунокомпетентных V клеток (в том числе макрофагов), начинаются с изменения свойств клеточных мембран (Ляшенко В.А., 1988; Petty R., 1980; Lewie С.Е., 1992; Bauer J., 1994). Мембрана фагоцитов рассматривается как динамичная, постоянно изменяющаяся структура. При активации или дифференцировке любых клеток на мембране происходят процессы пространственного перераспределения специфических рецепторов, молекул межклеточной адгезии, присоединившихся цитокинов, биологически активных веществ, антигенов и др. (Filho F.С., 1987; Hansen Е., 1989; Frendl G., 1990). Результатом фагоцитарных реакций может явиться также интернализация участков мембраны (Lewis С.Е., 1992). Все это закономерно приводит к изменению плотности и топологии молекулярных групп, определяющих электрический заряд клетки. Причем, изменение электрического заряда происходит как в результате перераспределения анионов и катионов на клеточной поверхности, так и в результате перераспределения их в примыкающем диффузном слое (Slivinsky G.G., 1990; Golovanov M.V., 1991). Последнее во многом определяется направленностью клеточных метаболических реакций. В связи с этим тестирование электрического заряда иммунокомпетентных клеток, по мнению большинства авторов (Schutt W., 1990; Thomanek U., 1991; Shimizu M., 1992), является надежным критерием для мониторинга изменения их функциональной активности. Обнаруженное нами снижение электрофоретической подвижности макрофагов, вероятно, связано с изменением мозаики поверхностных антигенов, выражающемся в уменьшении количества (интернализация мембраны) детерминант, несущих отрицательный заряд (Filho F.С., 1987; Bauer J., 1994) или их маскировкой вновь образующимися или присоединенными молекулами (иммуноглобулинами, цитокинами и т. д.). Полученные нами данные согласуются с результатами исследований (Knyszynski А., 1978; Malkosky М., 1980; Bauer J., 1992), показавших, что снижение отрицательного элекртокинетического потенциала клеток системы фагоцитирующих мононуклеаров связано с их активацией. На разных этапах иммуногенеза к чуме в процесс иммунобиологической перестройки, очевидно, вовлекаются различные субпопуляции клеток системы фагоцитирующих мононуклеаров. Особенно четко в условиях наших опытов идентифицировались две субпопуляции макрофагов на 7 сутки иммуногенеза. Обращает внимание, что к 21 дню (сроку развития максимально выраженного протективного иммунитета) наибольший процент клеток системы мононуклеарных фагоцитов у беспородных мышей обладал сниженной электрофоретической подвижностью. Последнее, по видимому, свидетельствует о значительной степени генерализации процесса иммунобиологической перестройки под влиянием живой чумной вакцины (штамма EV).

При анализе взаимосвязи изменений электрофоретической подвижности у беспородных мышей и мышей линии CC57W было отмечено, что линейные мыши реагировали меньшим снижением электрофоретической подвижности макрофагов в ответ на иммунизацию чумной вакциной. Следует отметить, что линия CC57W является более чувствительной к чумной инфекции и интоксикации, чем беспородные мыши (Бландова З.К., 1983). В результате иммунизации живой чумной вакциной у СС57А/-мышей формируется менее выраженный протективный иммунитет, чем у беспородных (Назарова Л.С., 1984; Задумина С. Ю., 1990). Не исключено, что последнее может быть связано с недостаточной активацией клеток системы мононуклеарных фагоцитов (в условиях наших опытов — отсутствие на 21 сутки значительного пула активированных макрофагов с пониженной электрофоретической подвижностью).

Таким образом, электрофоретическое тестирование клеток системы мононуклеарных фагоцитов с определенной степенью достоверности позволяет судить о генетически детерминированном формировании субпопуляционной гетерогенности и доле активированных макрофагов на отдельных этапах иммуногенеза к чуме.

Обнаруженные нами изменения электрофоретической подвижности макрофагов при иммунизации мышей живой чумной вакциной EV могли быть связаны не только с влиянием чумного микроба или различных цитокинов, действующих in situ, но и явиться следствием рециркуляции, миграции и адгезии макрофагов (т.е. постоянно происходящих в перитонеальном экссудате популяционных сдвигов). Для выяснения роли непосредственного контакта чумного микроба с фагоцитирующими клетками в изменении их электрофоретической подвижности были проведены эксперименты in vitro.

Для постановки фагоцитарной реакции использовался монослой прикрепившихся к стеклу макрофагов. Адгезия фагоцитов к стеклу, являющаяся, как известно, фактором активации системы фагоцитирующих мононуклеаров (Маянский А.Н., 1983; Ройт А., 1991 — Пол У., 1989) также вызывала изменение электрофоретической подвижности исследуемых клеток. Через 60 минут после адгезии наблюдалось выраженное снижение электрофоретической подвижности макрофагов, сменяющееся повышением электрофоретической подвижности через 180 и 360 минут. Взаимодействие макрофагов с микробными клетками Y. pestis EV сопровождалось изменениями конфигурации кривой распределения макрофагов по электрофоретической подвижности. Так на 60 минуте фагоцитарной реакции тестировалось четыре субпопуляции одна из которых (10.7±1.65% клеток) обладала резко выраженной сниженной электрофоретической подвижностью. В остальные сроки исследований электрофоретические кривые во многом повторяли конфигурацию контрольных гистограмм и не отклонялись от них более чем на пять фракций.

Для понимания механизмов развития иммунобиологической перестройки в зараженном или вакцинированном организме необходимо иметь четкие представления об особенностях влияния на макрофаги отдельных компонентов возбудителя. Среди антигенов Y. pestis EV особое значение представляют такие антигены как капсульный и основной соматический. Интерес к их изучению обусловлен не только многообразием их иммунобиологических функций (Грибоедов A.B., 1984; Вейнблат В. И., 1977), но и возможностью эффективного применения в составе химической чумной вакцины (Мохин K.M., 1988; Белов Л. Г., 1989; Кутырев В. В., 1992; Наумов A.B., 1992; Будыка Д. А., 1993; Алексеева Н. Ю., 1997).

Результаты проведенных исследований показали, что иммунизация животных основным соматическим антигеном (ОСА) чумного микроба приводит к изменению электрофоретической подвижности пери-тонеальных макрофагов. Во все сроки исследований наблюдали снижение электрофоретической подвижности основной массы макрофагов, по сравнению с контролем, и лишь к 21 суткам иммуногенеза происходило некоторое увеличение электрофоретической подвижности клеток. На 1, 7 и 21 сутки после введения животным ОСА чумного микроба профиль электрофореграммы характеризовался одним пиком. На 3 и 21 сутки иммуногенеза клетки распределялись по электрофоретической подвижности на две основные группы.

Введение

животным капсульного антигена также вызывало выраженное изменение электрокинетических свойств перитонеальных макрофагов. Во все сроки исследования наблюдалась более низкая элек-трофоретическая подвижность макрофагов, по сравнению с контролем. Лишь на 3 сутки иммуногенеза основная часть клеток характеризовалась высокой электрофоретической подвижностью. В первые сутки после иммунизации белых мышей капсульным антигеном (F1) наблюдалось появление трех преобладающих популяций макрофагов с различной электрофоретической подвижностью. На 3 и 7 сутки иммуногенеза профиль электрофореграммы был представлен двумя пиками, В более поздние сроки исследований (14 и 21 сутки) преобладал выход одной электрофоретически высокоподвижной популяции макрофагов после их сортировки.

Наряду с белыми мышами наиболее распространенной экспериментальной моделью изучения противочумного иммунитета является морская свинка (Бландова З.К., 1983). Процессы иммунобиологической перестройки организма морских свинок при взаимодействии с антигенами чумного микроба наиболее близки к регистрируемым у человека (Доморадский И.В., 1966). В связи с этим в сравнительном аспекте исследование влияния капсульного антигена на электрокинетические свойства макрофагов было проведено также на морских свинках.

Проведенные нами исследования позволили установить резкое снижение Электрофоретической подвижности (ЭФП) перитонеальных макрофагов (МФ) морских свинок во все сроки иммуногенеза. Максимальное снижение ЭФП МФ наблюдали на 7 сутки. К 21 суткам иммуногенеза регистрировалось некоторое восстановление ЭФП клеток. Важно отметить, что МФ неиммунизированных морских свинок характеризовались большей гетерогенностью по электрокинетическим характеристикам, чем клетки иммунизированных животных. На 1 сутки иммуногенеза 53.06±5.44% МФ тестировалось с 68 по 70 фракции, в то время как в контроле 55.92±6.07% тестировалось с 38 по 48 фракции. Во все сроки после иммунизации морских свинок наблюдали появление на электрофореграммах трех пиков максимального процента выхода клеток, в то время как для электрофореграммы контроля было характерно наличие пяти пиков.

В сравнительном аспекте, а также с целью возможной экстраполяции данных полученных в эксперименте на организм человека были проведены опыты с использованием моноцитов и нейтрофильных лейкоцитов, выделенных из крови людей. Проведенные исследования показали, что популяция интактных моноцитов в процессе адгезии на стекло разделяется на субпопуляции, обладающие различной электрофоретической активностью. Этот факт может быть весьма интересен в плане оценки адгезивных свойств моноцитов как в норме, так и при патологии как один из тестов, применяемых для характеристики основных этапов фагоцитарного процесса. Зарегистрированное нами явление разделения общего пула интактных моноцитов на субпопуляции при проведении адгезии на стекло свидетельствует о том, что общая популяция моноцитов состоит из клонов элек-трокинетически-гетерогенных клеток, каждая из которых, очевидно, обладает различным уровнем функциональной активности.

Взаимодействие моноцитов крови in vitro с Y. pestis EV приводило к значительным сдвигам в состоянии электрокинетических свойств клеток, выражающееся в повышении электрофоретической подвижности моноцитов на 10 минуте инкубации и разделение общего пула на три субпопуляции с разными электрофоретическими свойствами. Далее наблюдалось выраженное снижение уровня электрофоретической подвижности и разделение клеток на две основных субпопуляции.

Инкубация in vitro моноцитов периферической крови человека и антигенов чумного микроба (капсульного и основного соматического) сопровождалась меньшим снижением электрофоретической подвижности, по сравнению с результатами опытов, в которых использовались макрофаги, полученных от иммунизированных антигенами животных. Однако, инкубация моноцитов как с ОСА, так и с F1 приводила к формированию большего количества гетерогенных субпопуляций.

Анализ влияния каждого из используемых антигенов на ЭФП моноцитов показал, что основной соматический антиген вызывал снижение в опытах in vitro ЭФП моноцитов крови и формирование трех субпопуляций клеток. Взаимодействие адгезированных моноцитов с кап-сульным антигеном приводило к формированию уже на 10 минуте трех субпопуляций со сниженной ЭФП. Разделение клеток на субпопуляции регистрировалось во все сроки исследования, однако, к 60 минуте наблюдалось постепенное восстановление ЭФП.

Таким образом, приведенные выше данные свидетельствуют, что преобладающим направлением в изменении ЭФП фагоцитарных клеток при контакте с чумным микробом или его антигенами было снижение.

Следующий раздел работы был посвящен выяснению взаимосвязи между уровнем снижения ЭФП (соотношением популяций фагоцитов с разным электрокинетическим потенциалом) и функционально-метаболической активностью фагоцитирующих клеток.

Анализ электрофоретической подвижности нейтрофилов при взаимодействии с Y. pestis EV и показателей функциональной активности (фагоцитарный индекс и фагоцитарная активность) полученных фракций фагоцитов, показал, что через 10 минут взаимодействия чумного микроба и нейтрофилов крови человека происходило разделение общей популяции нейтрофилов на три субпопуляции, различающихся не только по электрофоретической подвижности, но и по уровню фагоцитарной активности. Показано, что в этот период взаимодействия нейтрофилов с У. резШ ЕУ наряду со снижением ЭФП, увеличивалась способность нейтрофилов к фагоцитозу. Нейтрофилы, составившие субпопуляцию с наименьшей ЭФП, обладали наиболее высокими показателями фагоцитарной активности. Фракции с наибольшим количеством клеток содержали наиболее активные по фагоцитарной способности нейтрофилы. Через 30 минут инкубации регистрировалось наличие всего одной популяции нейтрофилов. ЭФП этой популяции была снижена по сравнению с контролем. Фагоцитарный индекс составил в среднем 6.75±0.72 (р<0.001) микробных клеток на один нейтрофил. Почти все клетки популяции находились в состоянии фагоцитоза (94.2±2.76%, р<0.001). Взаимодействие нейтрофилов крови и микробных клеток У-ревИв ЕУ в течение 60 минут характеризовалось отсутствием разделения общего пула на субпопуляции по ЭФП. На гистограмме регистрировался один пик выхода клеток, которые обладали низкой ЭФП. В основном все клетки популяции находились в состоянии фагоцитоза (100%, р<0.001). Число захваченных микробных клеток на один нейтрофил составляло 9.2±0.37 (р<0.001). Наблюдалась прямая корреляционная зависимость между степенью подвижности клеток, изменением заряда и фагоцитарной активностью, наиболее выраженные на 10 и 60 минутах взаимодействия с У. реэНв ЕУ (индекс корреляции соответственно составил 0.46±0.13, р<0.001 и 0.74±0.25, р<0.05).

В следующем разделе работы был проведен сопоставительный анализ изменений метаболической активности электрофоретически-гетерогенных субпопуляций моноцитов крови человека под влиянием антигенов чумного микроба. С этой целью изучались: глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа — ключевой фермент пентозофосфатного пути, лактатдегидрогеназа — ключевой фермент гликолитического пути, малатдегидрогеназа и сукцинатдегидрогеназа — ферменты цикла Кребса. Обнаруживалась обратная корреляция между активностью ключевого фермента пентозофосфатного пути обмена углеводовглюкозо-6-фосфатдегидрогеназа и ЭФП моноцитов. Взаимодействие моноцитов с основным соматическим антигеном сопровождалось снижением активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы на 10 и 30 минуте взаимодействия. Капсульный антиген, напротив, увеличивал ферментативную активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы моноцитов во все сроки исследования и снижал электрофоретическую подвижность клеток.

Инкубация in vitro моноцитов крови с капсульным антигеном чумного микроба сопровождалась повышением активности фермента цикла Кребсамалатдегидрогеназы и фермента гликолиза — лактат-дегидрогеназы. Интересно отметить, что внутри общего пула выделенных клеток субпопуляции с большей ферментативной активностью характеризовались более высокой ЭФП. Активность сукцинатде-гидрогеназы снижалась при взаимодействии моноцитов с антигенами чумного микроба. Максимальные активности ключевого регуляторно-го фермента цикла Кребса идентифицировались в высокоподвижных фракциях. Регистрировалась высокая степень коэффициента корреляции (г=0.98±-0.01) между активностью сукцинатдегидрогеназы и ЭФП моноцитов.

Таким образом, использование физико-химического метода определения электрофоретической подвижности и биохимических методов определения ферментативной активности позволило дать интегральную общую характеристику изменениям функциональной активности фагоцитирующих клеток при их взаимодействии in vitro и invivo с чумным микробом и его антигенами. Полученные данные могут иметь важное значение при оценке иммунобиологических свойств разных штаммов и антигенов чумного микроба.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Г. П. Исследование некоторых поверхностных маркеров и функциональной активности моноцитов и нейтрофильных лейкоцитов в процессе совместного культивирования клеток// Иммунология, — 1992, N1.-С.32−35.
  2. Г. П. Роль адгезии клеток в рецепторных механизмах взаимодействия поли- и мононуклеарных фагоцитов крови человека// Иммунология, — 1995, — N4, — С. 29−30.
  3. Г. П. Взаимодействие поли- и мононуклерных фагоцитов крови человека: продукция цитокинов в смешанной культуре нейтрофилов и моноцитов, культивируемых в адгезивных и суспензионных условиях// Иммунология, — 1995, N6, — С.37−39.
  4. Адо А.Д., Маянский А. Н. Современное состояние учения о фагоцитозе// Иммунология.- 1983, — N1, — С.20−26.
  5. В.В., Шанина Л. Н., Метлин В. Н., Дальвадянц С. М., Белобородое P.A. Роль некоторых антигенов в вирулентности, токсичности, имму-ногенности и аллергенности чумного микроба// Материалы к конф., посвящ. 50-летию ин-та «Микроб», — 1968, — С.101−103.
  6. С.К., Ляшенко В.А.// Журн. Микробиол, — 1975, N6.- С. 2831.
  7. Н.Ю. Конструирование вакцин нового поколения против сальмонеллезов и чумы// Иммунология, — 1997, N5.- С. 14−18.
  8. П.И., Кравцов А. Л., Мареев В. И., Белобородов P.A. Изучение первичного иммунного ответа лимфоцитов белых мышей на введение фракции I чумного микроба методом проточной цитометрии// Мол. биол. и генетика возб ООИ. Часть 2, — Саратов, — 1982, — С.3−6.
  9. Э.Асадов Ч. Д., Нумерова Л. С., Мирзоева Л. Э. Связь между фагоцитарной функцией и цитотоксическими показателями нейтрофилов крови// Лаб. Дело, — 1990, — N11,-С.19−21.
  10. Ю.Атчабаров Б. Б., Исин Ж. М., Сулейменов Б. М. Мутагенное действие полиморфно-ядерных лейкоцитов на Yersinia pestis// ЖМЭИ.- 1989.- N4.-С.10−14.
  11. И.Г., Наумов A.B., Тараненко Т. М. и др. Особенности им-муномодулирующей активности капсульного антигена чумного микроба у мышей различных линий// Иммунол. и специф. проф. ООИ: Тез. докл. конф.-Саратов, 21−23 сент, — 1993, — С. 5.
  12. Н.И., Александрова Л. З., Титов В. Н., Бахов Ю. И., Насонов Е. Л. Нейтрофилы, их роль в регуляции метаболизма тканей// Успехи совр. биол. и мед.- 1987, — Т.104, вып.2(5).- С.281−296.
  13. Н.И., Александрова Л. З., Титов В. Н. Роль нейтрофилов в регуляции метаболизма тканей//Лаб. Дело, — 1988, — N6.- С.3−13.
  14. Е.Э., Егорова В. Ф., Филиппов А. Ф. Влияние температуры выращивания на химический состав чумного микроба//ЖМЭИ.- 1963, — С.29−33.
  15. Е.Э., Тараненко Т. М. Изучение химического состава аллергена пестина ПП. Сообщение 1. Очистка пестина фильтрацией через гель се-фадекса// Пробл. ООИ, — 1968, — N2, — С. 146−153.
  16. Е.Э., Тараненко Т. М., Дальвадянц С. М. Изучение химического состава аллергена пестина ПП. Сообщение 4. Соотношение специфических компонентов пестина при многократной экстракции// Пробл. ООИ,-1970.
  17. Е.Э., Вейнблат В. И. Соматические полисахаридсодержащие антигены чумного микроба// ЖМЭИ.- 1972.-N3.- С. 12−16.
  18. А. Выделение лимфоцитов, гранулоцитов и макрофагов. В кн.: Лимфоциты: выделение, фракционирование и характеристика.-М.:Медицина, — 1980.- С.9−20.
  19. Л.Г., Дальвадянц С. М. Иммуноаллергенные свойства чумной живой сухой вакцины и основных антигенов чумного микроба// Микробиол., лаб. диагн. и специф. профилакт. карантинных инф.- Саратов, 1989, — С.84−90.
  20. З.К., Душкин В. А., Малашенко A.M., Шмидт Е. Ф. Линии лабораторных животных для медико-биологических исследований.- М.: Наука.-1983, — 189с.
  21. Л.В., Абезгауз H.H., Трошина В. М., Козинец Г. И. Исследование электрофоретической подвижности лейкоцитов в процессе их замораживания.// Пробл. гематологии и перелив, крови.-1975, N5, — С.31−33.
  22. Л.А. Физиологические показатели у инбредных и неин-бредных мышей в половозрелом возрасте// Тез. конф."Лабораторные животные для медико-биологических и биотехнологических исследований".-М., 20−22 ноября, 1980,-С.9.
  23. В.Д. Т-лимфоциты и их рецепторы в иммунологическом рас-позновании.- М.: Наука.- 1987, — 472 с.
  24. Д.А., Пинкер А. И., Фунтикова Т. Н. Специфическая активность препаратов чумной вакцины ЕВ, обогащенной протективным антигеном// Иммунология и специф. проф. ООИ: Матер. Рос. научн конф. (21−23 сент., 1993, Саратов).- Саратов., 1993, — С. 147.
  25. Г. И., Ткаченко Л. Н. Гетерогенность и перераспределение субпопуляций перитонеальных макрофагов морских свинок под влиянием иммунизации вакцинным штаммом чумного микроба.// Иммунология, — 1990, N1, — С.23−26.
  26. Г. И. Роль макрофагов в иммуногенезе чумы.// ЖМЭИ,-1990. -N12-C.98−104.
  27. Г. И. Роль взаимодействия Y.pestis с клетками системы мононуклеарных фагоцитов в реализации вакцинного и инфекционного процессов.//Дисс. докт. мед. наук, — Саратов.-1990.
  28. Г. И., Ткаченко Л. Н., Веркина Л. М., Дорошенко Е. И. Характеристика протективных свойств противочумных препаратов с помощью индекса перераспределения субпопуляций макрофагов//ЖМЭИ, — 1994, N6.-С.94−96.
  29. Г. И., Веркина Л. М., Ермоленко Т. Д. Презентирующая активность тканевых макрофагов разной локализации и их фракций при первичном и вторичном иммунном ответе к возбудителям чумы// Иммунология.1994, N6.- С.55−56.
  30. Г. И., Веркина Л. М., Ермоленко Т. Д. Участие клеток системы мононуклеарных фагоцитов в индукции противочумного иммунитета// Иммунология, — 1994, N6, — С.57−58.
  31. Г. И., Мишанькин М. Б., Козловский В. Н. и др. Цитокинин-дуцирующая активность «мышиного» токсина Yersinia pestis// ЖМЭИ, — 1998, N1.- С.61−64.
  32. В.И. Антигены Yersinia pestis (биохимические и иммунологические аспекты)//Автореф. дисс.. докт. мед. наук, — Саратов, — 1974.
  33. В.И., Белобородов P.A., Узенцов С. А. и др. Аллергические свойства ЛПС «основного» соматического и капсульного антигенов чумного микроба// Пробл. ООИ.- 1977, — Вып.4 (56).- С.20−23.
  34. Л.М. Оцека эффективности вакцинации против чумы по модуляции функиональных свойств макрофагов при подкожном и аэрогенном введении вакцин: Автореф. дисс.. канд. мед. наук, — Ростов-н/Д, 1994,-136с.
  35. A.A., Медуницын Н. В. Клеточная теория иммунитета И.И.Мечникова и концепция антиинфекционной резистентности// ЖМЭИ.1995, — N3.-C. 36−42.
  36. Е.Д., Барсуков A.A., Годков М. Д. и др. Подавление кислородного метаболизма фагоцитов капсульным белком// Актуальн. вопр. теор. и прикл. инф. иммунол.- механизмы противочумн. иммунитета: Тез докл. II Всерос. конф.- М., 1987.- С. 36.
  37. Э., Медьмин Г., Верецкая Л. Электрофорез в разделении биологических макромолекул,— М.: Мир, — 1982.
  38. Е.П., Борсук Г. Н., Зонова И. В. и др. Активность ферментов полиморфноядерных лейкоцитов при фагоцитозе чумы// Проф. при-родноочаг. инф.: Тез. докл. Всес. научно-практ. конф, — Ставрополь.-1983,-С.183−185.
  39. Е.П., Осипенко И. И., Скворцрва Р. Г. и др. Использование ЭФП лимфоцитов для характеристики действия вакцин// Патогенез и механизмы форм-я иммунитета к ООИ.- Саратов, 1987, — С.93−99.
  40. A.B., Павлова Л. П., Тихомирова Е. И. Клеточные механизмы формирования иммунитета к чуме.// Актуальн. вопр. теор. и прикп. инф. иммунол. Механизмы противочумного иммунитета: Тез. докл. II Всес. конф,-М., 1987.- С. 38.
  41. H.H., Чернявская A.C., Лебедева С. А., Иванова B.C. Изучение фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов в отношении Yersinia pestis с дефектными и полноценными Fra-антигенами// ЖМЭИ,-1990, — N5.-C.7−11.
  42. A.B., Барабаш Г. П. «Основной» соматический антиген или антиген, полученный по методу Буавена-Месробеану из Y.pestis.-ЖМЭИ, — 1985, N3, — С.108−115.
  43. В.А., Брусов О. С., Панченко Л. Ф. Супероксиддисмутаза радиобиологическое значение и возможности// Вопр. Мед. химии.- 1980.- N3,-С.291−301.
  44. С.М. Иммуногенные и аллергенные свойства соматического антигена чумного микроба, изолированного по методу Буавена и Вестфаля-Людерица: Автореф дисс.. канд. мед. наук.- Саратов, — 1968,-16с.
  45. С.М., Боровикова Т. П. Содержание «основного» соматического антигена в чумном и псевдотуберкулезном микробах, — В кн.: Пробл. ООИ, — Саратов,-1971, вып.6, — С. 108−112.
  46. С.М., Пономарев Н. Г., Сероглазов В. В. Некоторые стороны иммунологической перестройки морских свинок, привитых препаратами соматических антигенов бактерий чумы и псевдотуберкулеза// Пробл. ООИ, — 1972, — Вып.5(27).- С.134−138.
  47. И.М., Левин А. Д., Луценко Г. В., Николаева И. С., Баг-лаев Т.Н. Характеристика электрофоретически разделяемых субпопуляций лимфоцитов крови человека.// Иммунология.- 1984, N6.- С.43−48.
  48. И.М. //Итоги науки и техники. Сер. Иммунология, — 1984, N13.-C. 166−194.
  49. И.И., Зурочка A.B., Чукичев A.B. Регуляторные пептиды нейтрофилов// Иммунология.- 1995.- N4, — С. 40−45.
  50. И.В. Проблемы перекресного иммунитета.- М.: Медицина, 1973.- 136с.
  51. И.В. Чума: современное состояние, гипотезы, проблемы." Саратов, 1993, — 129с.
  52. А.Н., Писарева Л. Н., Семенова С. Б. Изменение мембранного потенциала перитонеальных макрофагов крысы при экстраклеточном действии АТФ//Цитология,-1994, — Т.36, N11.- С. 1091−1001.
  53. Г. Л. В кн.: Иммунологические методы, — М., 1979,-С.323−327.
  54. .М. Изменение активности кислородзависимого метаболизма полиморфноядерных лейкоцитов периферической крови и макрофагов перитонеального экссудата при экспериментальном заражении мышей возбудителем чумы//ЖМЭИ, — 1985.- N10, — С.69−76.
  55. .М., Тугамбаев Т. И. Структурнофункциональные свойства и биологическая активность капсульного антигена, «мышиного» токсина и эндотоксина Y.pestis//>KM3M.- 1987, N4, — С.91−98.
  56. И.В., Назарова Л. С., Павлова Л. П. и др. Изучение влияния различных антигенов Y.pestis на клеточное звено иммунитета// ЖМЭИ.-1990, — N9.- С.85−89.
  57. И.Д. Морфологические и биохимические особенности крови лабораторных животных// Тез. конф, — Лаб. животные для медико-биол. и биотехнол. исследований.- М., 20−22 ноября, — 1990.- С. 13−14.
  58. М.А., Фрейдлин H.C.II Бюл. Экспер. биол, — 1980, N 4,-С.439−441.
  59. Г. Б., Наумов A.B., Ледванов М. Ю. и др. Влияние бел-ковополисахаридного комплекса и чистого белка фракции 1 чумного микроба на метаболические показатели макрофагов// Бюлл. эксп. биол. и мед,-1993, N5, — С.494−497.
  60. Л.В., Соколова Е. В., Бурцева Л.В.// Бюлл. экспер. биол.-1976, N8,-С. 972−975.
  61. Г. И., Борзова Л. В., Кульман P.A. Поверхностный заряд клеток крови и некоторые аспекты его биологической роли.//Лаб. дело.-1975, N5, — С.284−289.
  62. Е.И. Фагоцитоз в приобретенном иммунитете к чуме// Тр. ин-та «Микроб».- 1960, — Вып.4, — С.32−34.
  63. В.Н., Тихомирова Л. А., Ермакова Т. В. Применение метода непрерывного клеточного электрофореза для изучения иммунологического процесса// Мол. биол., генетика и иммунология возб. ООИ.//Тез. докл. Всес. конф.-Ростов-на-Дону, 1984, — С.115−117.
  64. Н.О. О преимуществах использования линейных животных при испытании стимуляторов заживления ран кожи, — В кн.: Генетика лаб. животных и эксперимент: Матер, конф. научно-иссл. лаб. экспер.-биол. моделей, — М., 1974, — С.46−48.
  65. Г. В. Некоторые молекулярно-кинетические характеристики ферментов пентозофосфатного пути метаболизма углеводов// Успехи совр. биол, — 1980,-Т.89, вып.1,-С.74−89.
  66. Л.В. Сравнительное изучение фагоцитарной активности пе-ритонеальных и альвеолярных макрофагов в отношении штаммов чумного микроба// Механизмы формирования иммунитета к ООИ, — Саратов, 1986.-С.22−32.
  67. М.Ю., Адамов А. К., Анисимова Т. И. Состояние адениловой системы лимфоцитов с различной электрофоретической подвижностью в условиях антигенной стимуляции.// Иммунол. и проф. ООИ.- Саратов.-1982,-С.60−64.
  68. М.Ю., Адамов А. К., Наумов A.B., Корсуков В. Н., Кравцов А.Л.// Пат. физиология, иммунология и аллерг. ООИ.- Саратов, 1984, — С.50−56.
  69. М.Ю. Метаболизм лимфоцитов и функциональная активность иммунной системы в противохолерном вакцинном процессе. Автореф. дисс.. докт. мед. наук, — Саратов, 1987.
  70. М.Ю., Таран В. И., Шведун Г. П. и др. Значение признака пигментсорбции в реализации вирулентных свойств Y.pestis на уровне взаимодействия микроб-макрофаг// Микробиол., биохимия и специф. проф. карантинных инф, — Саратов.-1990.- С. 16−22.
  71. ЭЗ.Ледванов М. Ю., Дроздов И. Г., Пронин A.B. и др. Механизмы формирования противочумного имунитета у людей и экспериментальных животных// I съезд иммунологов России: Тез. докл. (Новосибирск, 22−25 июня, 1992).- Новосибирск, 1992, — С. 272−273.
  72. Т.Ю. Влияние чумного микроба и его антигенов на функционально-метаболическую активность клеток системы мононуклеарных фагоцитов: Автореф.дисс. канд. мед. наук.- Саратов, 1995.- 161с.
  73. Эб.Ленинджер А. Основы биохимии.- М.: Мир, 1985, — Т.2.- 368с.
  74. В.А., Дроженников В. А., Молотовская И. М. Механизмы активации иммунокомпетентных клеток,— М.:Медицина.-1988.
  75. В.А. Макрофаги в инфекционном процессе// Иммунология.-1995, N4.-C.48−52.
  76. В.М., Хаитов P.M. Иммунокомпетентные клетки (поверхностные структуры и субпопуляционная организация)// Итоги науки и техники. Иммунлогия.-1987.-Т.18- С.3−25.
  77. ЮО.Маянский А. Н., Маянский Д. Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге.-Новосибирск: Наука, — 1983, — С. 196.
  78. А.Н., Цырендоржиев Д. Д. Активация макрофагов// Успехи совр. биол, — 1990, — Т. 109, вып. 1−3, — С.352−369.
  79. А.Н. Фагоцитоз: проблемы и перспективы// Вестн. Рос. АМН, — 1993.- N4.- С.52−55.
  80. А.Н., Невмятулин А. Л., Маянский H.A. Проблемы управления фагоцитарными механизмами иммунитета//ЖМЭИ, — 1995, — N3.- С. 2126.
  81. H.A. Линейные мыши.- М.: Медицина.-1964.- 180с.
  82. Юб.Мирошников А. И., Фомченков В. М., Иванов А. Ю. Электрофоретиче-ский анализ и разделение клеток.- М.:Наука.- 1986.- С.72−99.
  83. Юб.Мохин K.M., Адамова Г. В., Анисимова Т. И., Никитина Г. А. Антигенный спектр живой чумной вакцины как критерий ее качества / Всес. науч,-иссл. противочумн. ин-т «Микроб».- Саратов, 1988, — 7с.- Библиогрю: бназв.-Деп. В ВИНИТИ, — 12.08.88, N6544.
  84. Л.С., Исупов И. В., Павлова Л. П., Доморадская Т. И. Моделирование чумной интоксикации на линейных мышах// Информ. бюл.: изобрет., рацпредлож. и метод, рекоменд. N19, — Саратов, 1984, — С. 8.
  85. Л.С., Исупов И. В., Павлова Л. П. и др. Морфологическое изучение чумной интоксикации при статусе инбридинга// Иммунология и специф. проф. ООИ, — 1986, — Саратов.- С. 9.
  86. Л.С., Исупов И. В., Павлова Л. П. и др. Морфологическое изучение повреждающего действия вакцинного штамма чумного микроба у инбредных мышей// Бюл. экспер. биол. и мед.- М.: Мед.- 1988, N6.- С. 761 764.
  87. Ю.Назарова Л. С., Исупов И. В., Кирилличева Г. Б., Сучкова О. П. Влияние чумной живой вакцины ЕВ и сальмозана на ферментативную и функциональную активности макрофагов и тимоцитов инбредных мышей// Иммунология, — 1991, N1, — С. 80.
  88. A.B., Дроздов И. Г., Ледванов М. Ю. Иммунология чумы,-Саратов,-1992.
  89. А.Г., Васильева В. Ю. Исследование дифференциров-ки моноцитов крови человека в суспензионном и адгезивном состоянии// ЖМЭИ, — 1993, N4,-С.14−18.
  90. И.Николаев Н. И., Пономарев Н. Г., Филиппов А. Ф., Дальвадянц С. М. Вакцинопрофилактика чумы// Профилакт. чумы.- 1973, — С. 129−137.
  91. A.A. Некоторые вопросы современного учения о поли-морфноядерных лейкоцитах//Архив патологии.- 1988, N8.-С.85−90.
  92. P.B. Формы взаимодействия генетически-различающихся клеток лимфоидных тканей (трехклеточная система иммуногенеза)// Усп. совр. биол, — 1970, — Т.60, N2, — С.261−271.
  93. Р.В., Чередеев А. Н., Михайлова A.A., Сидорович И. Г. Взаимодействие и кооперация клеток при индукции иммунного ответа.// Итоги науки и техники. Общие вопросы патологии, — М ., 1972, — т.З. С. 106−153.
  94. Р.В., Дозоморов И. М., Леви А. Д. и др. Характеристика субпопуляций лимфоцитов, полученных препаративным электрофорезом.// Иммунология, — 1980, N5.- С.5−8.
  95. Р.В., Ковальчук Л. В., Ганковская Л. В. и др. Феномен спонтанной миграции макрофагов и лейкоцитов in vitro.// Иммунология.-1983. -N1- С.44−49.
  96. Р.В. Иммунология,— М.:Медицина.- 1987.-415с.
  97. Д.В., Потапнев М. П., Вознюк A.B. Усиление бактерицид-ности, но не фагоцитарной активности нейтрофилов человека под действием ИЛ-6// Иммунология, — 1993, — N6, — С. 29−30.
  98. В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства.- М, — 1978.
  99. С.А., Самойлова Л. В. Изучение с помощью НСТ-теста бактерицидного потенциала нейтрофильных лейкоцитов морских свинок, привитых чумной живой вакциной// Информ. бюл. изобрет., рацпредлож. и метод, рекоменд.- Саратов.- 1987, N26.- С. 29.
  100. Пол У. Иммунология. М.: Мир.- 1989,-Т.З.-С. 179−185.
  101. М.П., Печковский Д. В. Иммунорегуляция антимикробной активности нейтрофилов человека// Иммунология, — 1994, N5.- С.4−6.
  102. М.П., Печковский Д. В., Гарбузенко Т. С. и др. Зависимость функции лимфокинактивированных киллерных клеток человека от присутствия моноцитов/ макрофагов// Иммунлогия.- 1995, N4, — С.30−32.
  103. В.Л., Васильева Г. И., Киселева А. К. Особенности фагоцитоза авирулентных штаммов чумного микроба, лишенных антигенов Fl, V и W// Вопр. иммунол. и молекул. Биол.: Тез. докл. конф, — Нальчик, 1981,-Т.1.- С.31−32.
  104. В.Л., Васильева Г. И., Киселева А. К. Устойчивость к фагоцитозу вирулентных штаммов чумного микроба в зависимости от температуры культивирования// Вопр. профилакт. природноочаг. инф, — Саратов, 1983,-С.16−21.
  105. В.Л., Васильева Г. И., Киселева А. К., Дорошенко Е. П. Индекс завершенности фагоцитоза как критерий оценки иммуногенности вакцинного штамма чумного микроба// Генетика и микробиол. природноочаг. инф.- Саратов, 1984, — С.44−48.
  106. В.Л., Васильева Г. И. Антигенный состав и антифагоцитарные свойства чумного и псевдотуберкулезного микробов// Мол. биол. и микробиол. природноочаг. инф, — Саратов, 1986.- С.50−56.
  107. А. Основы иммунологии,— М.: Мир.- 1991.- 327с.
  108. Л.В., Пионтковский С. А., Кузнецова К. А. и др. О формировании прививочного и постинфекционного иммунитета к чуме.// Иммунология и иммунопроф. чумы и холеры, — Саратов, 1980. С.50−54.
  109. В.М., Локтев H.A., Басилова Г. И., Пилипенко В. Г. Цитохимические изменения в лейкоцитах периферической крови у морских свинок, привитых против чумы, туляремии и сибирской язвы//ЖМЭИ, — 1982.-N7, — С.73−76.
  110. Л.В. Пролиферация и популяционный состав иммуноком-петентных клеток в динамике вакцинного и инфекционнго процессов при чуме: Автореф. дисс.. канд. мед. наук, — Саратов, 1991, — С.92−122.
  111. Л.Н. Полиморфизм капсульного антигена чумного микроба: Автореф. Дисс.. канд. мед. наук, — Саратов, 1984.- 19с.
  112. В.Р., Осадчий П. В., Лунько А. Л. Дисперсия ЭФП эритроцитов, хранимой и донорской крови// Гематология и трансфузиол, — 1994, N3, — С.27−29.
  113. Л.А., Ольхова Н. В., Нерадовский В. А. Изучение чувствительности мышей различных линий к возбудителю чумы, — В кн.: Лаб. животные в мед. исследованиях.- М., 1974, — С.54−60.
  114. Л. Биохимия: В Зт.- М: Мир, 1985, — Т.2.- 307с.
  115. Т.М., Вейнблат В. И. Основные представления о структуре О-соматического антигена чумного микроба// Иммунохимия и лаб. ди-агн. ООИ.- Саратов, 1985.- С.10−17.- Библиогр.: 50 назв.
  116. Т.М. Углеводсодержащие антигены чумного и псевдотуберкулезного микробов (теоритические и прикладные аспекты): Автореф. дисс.. Дюкт.биол. наук.- Саратов, 1988.-41с.
  117. Т. Иммунный ответ Т- и B-клеток// Эйсэй Кэнса, — 1979, T.28.-N2-C. 107−115.
  118. A.B., Мирошников А. И., Тищенко В. В. Влияние антикоагулянтов на электрокинетические характеристики клеток// Проблемы гемотологии, — 1982, N1, — С.29−34.
  119. Л.А., Ермакова Г. В., Корсуков В. Н., Горькова A.B. ЭФП Т- и B-лимфоцитов крови и селезенки в динамике развития противочумного иммунитета// Пробл. специф. профилактики чумы и холеры.- Саратов, 1985,-С. 19−24.
  120. И.Я. Макрофаги в иммунитете.- М.: Медицина, 1978.- 199с.
  121. И.С., Залевская А. Г., Кравцов В. Д. Уровень содержания лизосом в мононуклеарных фагоцитах как показатель их функциональной активности// Структура и функции лизосом: Тез. докл. II Всес. симпоз.- Новосибирск, 1980.-С. 182−183.
  122. И.С. Система мононуклеарных фагоцитов.- М.: Медицина, 1984,-272с.
  123. Г., Брок И. Основы иммунологии.- М.:Мир, 1986.-254с.
  124. P.M., Земсков В. М. Некоторые избранные проблемы функциональной активности макрофагов// ЖМЭИ.- 1995.- N3.- С.27−32.
  125. P.M., Пинегин Б. В. Современные подходы к оценке основных этапов фагоцитарного процесса// Иммунология.- 1995, N4.- С.3−7.
  126. С.С., Ракитянская A.A. Электрофорез клеток крови в норме и патологии.-Минск:"Беларусь".- 1974.- 40с.
  127. П., Андерсон Л. Фракционирование иммунокомпетентных клеток, обладающих различными физическими свойствами.// Лимфоциты: выделение, фракционирование и характеристика.- М.: Медицина, 1980.-с.43−63.
  128. Л.Б., Абалкин В. А. Разделение форменных элементов крови человека в градиенте плотности верографин-фикол// Лаб. Дело.- 1973, N10, — С. 59.
  129. А.Н., Ковальчук Л. В. Мембранные белки мононуклеарных фагоцитов в межклеточных взаимодействиях//ЖМЭИ.- 1995, — N3.- С.12−20.
  130. В.Д., 1969 Соматические антигены, изолированные из чумного микроба с помощью мочевины. Автореф. Дисс.. канд. Мед. Наук.-Саратов, 1970.
  131. Т.Н., Корсуков В. Н. Популяционный состав макрофагов в динамике иммунологического ответа на вакцинацию холерной вакциной «холероген-анатоксин+ О-антиген».- В кн.: Молекул. Биол., генетика и имму-нол. Возб. ООН- Ростов-н/Д.- 1984, — С. 156−158.
  132. Antony V.B. The influence of immunologically commited lymphoid cells on macrophage activity in vivo// N.Engl. J.Med.- 1985, N319.- P.146−151.
  133. Baker E.E. Sommer H., Fester L.E. et al. Studies on immunization against plague. The isolation and characterization of the soluble antigen of the Past, pestis//J.Immunol.- 1952,-Vol.64.- P.139−141.
  134. Bauer J., Hanning K. Changes of the electrophretic mobility of human monocytes are regulated by lymphocytes// Electrophoresis.- 1984, — N5.- P.269−274.
  135. Bauer J., Kachel V., Hannig K. The negative surface charge density is a maturation marker of human B-limphocytes.// Cellular immunology 111, — 1988.-P.354−364.
  136. Bauer J., Stunkel Klaus G.E., Kachel Volker. Linkage between monokine production and regulatin of the negative surface charge density of human monocytes// Immunol. invest.-1992.- 21, N6, — P.507−521.
  137. Bauer J. Cell electrophoresis.- CRC Press Inc.- 1994.- 328p.
  138. Baugham A.D., Pethica B.A., Seaman G.V.F. The charged groups at the interface of some blood cells.//J. Gen. Physiol.- 1958, — N69, — P. 12−18.
  139. Biscy A.N. et al. Alterations in electrophoretic mobility of 50 mouce macrophages treated with microtubule inhibitors// Indian J. exp. biol.- 1977.- 15, N11- P.970−972.
  140. Boehmer H. The separation of T- and B-limphocytes// J.Immunol.-1974, — V.112, N1, — P.70−78.
  141. Boivin A., Mesrobiamu J., Mesrobiamu L. Extraction d’un complexe toxige et antigenigue a partir du bacille d’Aertrycke// C.R.Soc. Biol.- 1933,-V.114.- P.307−310.
  142. Bretscher M.S.// Nature New Biol.-1971.-Vol.231.- P.229.
  143. Brown K.A., Wolstencroft R.A., Booth C.G., Dumonde D.C. A reappraisal of the macrophage electrophoretic mobility test for the measurment of lymphokine activity.//J Immunol, meth.- 1985, — 82, N2, — P. 189−198.
  144. Brubaker R.R. The genus Yersinia: biochemistry and genetics of virulence//Curr. Trop. Microbiol. Immunol.- 1972,-Vol.57.- P.111−158.
  145. Burrows T.W. Virulence of Pasterella pestis and immunity of plague// Ergebn. Microbiol. Immunitat.- 1963,-Vol.37.- P.59−113.
  146. Butler T. Plague and other Yersinia infections. Chapter 5. Pathogenesis and toxins// New York, London: Plenum Med. Boeh. Co.-1983, — XII, — 220p.
  147. Chen L., Collins J. Monocyte superoxide secretion triggered by human Ig A// Immunol.- 1989, — Vol.68, N4, — P.491−496.
  148. Chen Т.Н. The antigenic structure of Pasterella pestis and its relationship to virulence and immunity// Acta Trop.- 1965.- Vol.22, N2, — P.97−117.
  149. Cordier G., coron G., Mornex J.F. Role du monocyte-macrophage dans L’immunite// Re. Fc. Lab.-1991,-Vol.19, N221, — P.55−64.
  150. Corvaia N., Reischl I.G., Kroemer E., Mudde G.C. Modulation of Fc-receptor-mediated early events by the tyrosine phosphate CD45 in primary human monocytes// Eur. J.lmmunol.- 1995, — 25, N3- P.738−744.
  151. De Maele M. Leukocyte adherence defect// J.Clin. Invest.- 1983,-P. 1457−1465.
  152. Eggleton P., Crawford N., Fisher D. Fractionating of human neutrophils into subpopulations by countercurrent distribution: surface charge and functional heterogenity// Eur J. Cell Biol.- 1992, — 57(2).- P.265−272.
  153. Eggleton P., Fisher D., Crawford N. Heterogenity in the circulating neutrophil pool: studies on subpopulations separated by continuous flow electrophoresis//J.leukoc. Biol.- 1992, — 51(6).- P.617−625.
  154. Eylar E.H., Madoff H.A., Broudy O.K., Oncley J.L. The contribution of cialic asid to the surface charge of the erythrocytes// J.Biol. Chem.- 1992,-Vol.237.- P. 1992−2000.
  155. Filho F.S., Santos B.S., Tecia M.U. de Carvalho, Wanderley de Souza. Surface charge of resident, elicited, and activated mouse peritoneal macrophages. //J. Leukocyte biology.- 1987, N 41.- P.143−149.
  156. Frendl G., Fenton M.J., Beller B.D. Regulation of macrophage activation by IL-3. II. IL-3 and lypopolysaccharide act synergistically in the regulation of IL-1 expression//J.Immunol.- 1990, N144.- P.3400−3410.
  157. Furth R. Origin and turnover of monocytes and macrophages// Cell kinet. Inflammatory React.- Berlin etc., 1989, — C. 125−150.
  158. Golovanov M.V. New concept on the structure of an electric double layer on the cell surface under the conditions of action of a high concentration electrolite// Biophisics.-1991, N36, — P.463.
  159. Haimovitz A., Fuks Z., GaliliN., Treves A.J. Changes in peanut agglutinin binding to human monocytes during their maturatin to macrophages.// J.Reticuloendothel. Soc.- 1982.-N 31.- P.187−192.
  160. Hannig K., Zeiller K. Electophoretic methods and its application in biology// J.Physiol.Chem.- 1969,-Vol.359.- P.467.
  161. Hannig K. Continuous free flow electrophoresis// J.Chromatogr.- 1993, N15, — P.193.
  162. Hansen E., Wustrow T., Hannig K. Antigen-specific electrophoresis cell separation for immunological investigations.// Electrophoresis.- 1989, N10.-P.645−652.
  163. Hashimoto N. Clinical application of cell electrophoresis// Physico-Chem. Biol. (Jpn).- 1992, N36, — P.323.
  164. Janssen W.A., Surgalla M. Plague bacills: survival within host phagocytes//Science.- 1963,-Vol.113, N2, — P. 139−143.
  165. Johnston R.B. Current concepts: immunology- monocytes and macrophages// Engl. J.Med.- 1989, N318, — P747.
  166. Kapur R., Lilien J., Picciolol GL., Black J. Human monocyte morphology is a affected by local substrate charge heterogenity// J.Biomed. mater. Res.-1996, N32(1).- P.133−142.
  167. Kimura A.K., Rubin B., Anderson L.C.// Scand. J.Immunol.- 1977.-Vol.6.- P.787−792. (Mm. no BpoHfl3, 1987).
  168. Klebanoff S.J., Clark R.A. The neutrophil: function and clinical disorders.-Amsterdam.- 1978.
  169. Knippel E., Rychly J., Thomaneck U., Schutt W. Particle electrophoresis in medicine and biology// Med. Focus Int.- 1992, N3.- P.8.
  170. Koenig U.D. The charges of lymphocyte electrophoretic mobility in cancer patients// Eur. J. Cancer Clin Oncol.- 1985, N2, — P. 1463.
  171. Kotzsh M., Grossman H. Studies of lymphokine activity in cancavalin A-stimulated lymphocyte supernatants using the macrophage electrophoretic-mobility test// Exp. pathol.- 1982,-V.21, N3,-P.143−148.
  172. Kraskina N., Bliacher M., Fedorova I., Knippel E., Schutt W. Some aspects of cell electrophoresis application in immunologic investigation.// Cell. Electrophor. Proc. Int. Meet., Rostock.(Sept. 24−28, 1994).-Berlin, New York, 1985, — P. 565−580.
  173. Letari O., Nicosia S., Chiavarodi C., et al. Activation by bacterial lypopolysaccharide causes changes in the single peritoneal macrophages// J.Immunol.-1991,-Vol.147, N3.- P.980−983.
  174. O.Lewis C.M., McGee J. O'D. The macrophage.- IRL Press, Oxford Univ.-1992,-423p.
  175. Maddox D.E., Shibata S., Goldstein S.M. Mous mononuclear phagocyte antigenic heterogenity detected by monoclonal antibody// Infect. Immun.- 1982, N29, — P.520−525.
  176. M.A., Ebbe S., Baldini M. //J.Clin. Invest.- 1964, — Vol.43.- P.870.
  177. Malkosky M., Bubenic J., Jakoubkova J. et al. The macrophage electrophoretic mobility assay in patients with renal cell carcinoma// Neoplasma.-1981, N28(2).- P.245−251.
  178. Mason D.W.// J.Exp. Med. (USA), 1976,-Vol.143.-P.1111−1119. (Mm. no Kynb6epr, 1986).
  179. Mehrishi J.N. Sulfhydril groups on the surface of intact Ehrlich ascites tumor cells, human blood platelets and lymphocytes.- British Empire Cancer Campaign for Reserch, Annual report. L.-1969.-243p.
  180. Mehrishi J.N. Positively charged aminogroups on the surface of normal and cancer cells.- Europ. J.Cancer.-1970, vol 6.- P. 127−137.
  181. Mehrishi J.N. Surface molecular components of human lymphocytes// Int. Arch. Allergy and Appl. Immunol.- 1972, — Vol.42.- P.69−92.
  182. Moonis M., Ahmad G., Bachawat B. Macrophages in host defence// Indian J. Bichem. and Biophys.- 1992,-V.29, N2, — P.115−122.
  183. Moretta L" Mingari E.// J.Exp. Med. (USA).- 1980, — Vol. 154, — P.581−589. (Mi/it. no BpoHA3, 1987).
  184. Nielsen H. Chemotaxis of human monocytes. Methodological and clinical aspects// Dan. Med. Bull.- 1990, — V.37, N5.- P.406−423.
  185. Petty H.R., Ware B.R., Remold H.G., Rocklin R.E. The effects of stimulated lymphocyte supernatants on the electrophoretic mobility distribution of peritoneal macrophages.//J.Immunol.- 1980.-124, N1.- P.381−387.
  186. Pick E., Keisari V.- Superoxide anion and hydrogen peroxide production by chemically elicited peritoneal macrophages induction by multiple nonphagocytic stimuli// Cell Immunol.-1981, — V.59, N2, — P.301−318.
  187. Poligano A., Tostorello C., Venzia A., Jirillo E., Antonaci S. Age-assotiated changes of neutrophil responsiveness in a human healthy elderly population// Citobios.- 1994.- N4, — P. 29−30.
  188. Ruhenstroth-Bauer G., Fuhr mann G.F., Naturforsch Z. I/ Biol.-1961, N166.-P.252.
  189. Sabolovic D., Hashimoto N. Alterations of uninfected red blood cell membranes during in vitro and in vivo parasite growth// Phys. Chem. Biol. (Jpn.).- 1992, N36, — P.323.
  190. Schutt W., Thomaneck U., Knippel E. et al. Biomedical and clinical applications of automated single cell electrophoresis// Phys. Chem. Biol.(Jpn.).-1990, N34, — P.293.
  191. Seidel A., Hammer G., Rolzer G. Separation by carrier-free electrophoresis of subpopulations of bovine alveolar macrophages.// Vet. Immunol, and Immunopathol.- 1990, — 24, N3, — P.285−291.
  192. Shenton B.R., Jenssen H.L., Werner H. et al. A comparison of the kinetic of the macropahge electrophoretic mobility and the tanned sheep erythrocyte electrophoretic mobility test.// J. Immunol, meth.- 1977,14, — P.123−139.
  193. Shimizu M., Iwaguchi T. Analysis of lymphocyte electrophoresis// Phys. Chem. Biol. (Jpn.).- 1992, N36, — P.329.
  194. Shold C.M., Eklude A., Hallden G. Different cell surface and phagocytic properties in mononuclear phagocytes from blood and alveoli// APMIS.- 1990.-VI.98, N5, — P.415−422.
  195. Shutt W., Grummer G., Preece A., Goetz P. Principles of cell electrophoresis, in Physical Charact. Of Biol. Cells, Schutt W. et al.- Verlag Gesundheit GmbH, Berlin.-1991.- 215p.
  196. Shutt W., Hashimoto N., Shimizu M. Application of the cell electrophoresis for clinical diagnosis. In: Cell Electrophoresis, Bauer J.- Crc Press, Boca Ranton, Fl.- 1994, — Chap. 13.
  197. Simmon M.I. Summary: the cell surface regulates information flow, material and transport, and cell identity// Cold Spring Harbor Symph. Quant. Biol.- 1992, N57, — P.673.
  198. Slivinsky G.G., Magda I.N. The surface charge of the NK/Ly ascites tumor cells differing in proliferative capacity, stage of cell cycle and ploidy// Tsitologiya.- 1990, N32, — P.61.
  199. Solbach W., Moll H., Rollinghoff M. Lymphocytes play the music but the macrophage call the tune// Immunol. Today.-1991.-V.12, N1, — P.4−6.
  200. Springer T.A., Unkeless J.C. Analysis of macrophage differentiation and function with monoclonal antibody. // Contemp. Top. Immunobiol.- 1984, N 14,-P.1−31.
  201. Stoddard B.L. Mononuclear phagocytes// Curr. Opt. In immunol.- 1992, N1, — P.26−35.
  202. M., Donnenberg A.M. // Amer. J. Path.- 1980.-Vol.99.- P.305−324.
  203. Surgalla M.J. Properties pf virulent and avirulent strains of Pasterella pestis//Ann. N.Y.Acad. Sci.- 1960,-Vol.88.-P.1136−1145.
  204. Surgalla M.J., Busley E.D. Infectivity and virulence of Non-Pesticinogenic Pasterlella pestis// Infect. Immunol.-1971.-Vol.4, N4.- P.416−418.
  205. Thomaneck U., Hashimoto N. Current application of the electrophoresis mobility test. In: Physical Characteriz. of Biological Cells, Shutt W. et al.- Verlag Gesundheit GmbH.- Berlin.- 1991, — 265p.
  206. Une T., Brubaker R.R. In vivo comparison et avirulent Vwa- and Pgm-or Pst phenotypes of Yersinia// Infect. Immunol.- 1984, — Vol.43, N3, — P.895−900.
  207. Van Dyke K. Mediators of immunity//Adv. Immunol.- 1990, N29.- P. 136.
  208. Van Furth R. Cells of the mononuclear phagocyte system. Nomenclature in terms of sites and conditions. In: Mononuclear Phagocytes: Functional Aspects, edited by R. Van Furth.- P. 1−30, — Martinus Nijhoff Publishers, The Hague.- 1980.
  209. Velde A.A., Koningchbruggen P.J. Monocyten en macrofagen// Analyse.- 1990, — B.45, N4, — P.82−85.
  210. Werb Z., Cohn Z.A. Plasma membrane synthesis in the macrophage following phagocytosis of polystyrene latex particles// J.Biol. Chem.- 1988, N247, — P.2439.
  211. Wilkins D.T., Ottewill R.H., Baughan A.D. On the flocation of cheep leucocytes: (.Electrophoresis studies//J.Theor. Biol.- 1962, N2.- P.165−175.
  212. Williams R.S., Gewurs H., Quie P.C. Effects of fraction I from Yersinia pestis on phagocytosis in vitro// J.Infect. Dis.- 1972, — Vol.126, N3.- P.235−241.
  213. Wolf-Watz H. Plasmid-mediated virulence of Yersinia// Bioechnol. Comp. Med.- 1987,-Vol.3.-P.159−178.
  214. Zamparo O., Comper W.D. Model anionic polisaccharide matrices exibit lower charge selectivity than is normaly assotiated with kidney ultrafiltration// Biophys. Chem.- 1990, N38, — P. 167.
  215. Zeiler K., Hannig K. Evidence for specific organ distributions of the lymphoid cells// Hoppe-Seyler's Z.Physiol. Chem.-1971, N352.- P.1162.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!