Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Протеолитические ферменты и их ингибиторы в высших грибах

Диссертация: Протеолитические ферменты и их ингибиторы в высших грибах
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Процессы протеолиза у бактерий, растений и животных изучен достаточно широко и полно. Однако уровень знаний о протеолитических ферментах грибных организмов неравнозначен. Особое место среди мицелиальных грибов занимают базидиомицеты, которые сегодня по праву рассматриваются как перспективные продуценты белка кормового и пищевого достоинства (Бухало А.С., 1988). Дефицит животного сырья… Читать ещё >

Протеолитические ферменты и их ингибиторы в высших грибах (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • 1. Обзор литературы
    • 1. 1. Протеолитические ферменты в растениях и их роль
    • 1. 2. Протеолитические ферменты в высших грибах, распространение и их роль
    • 1. 3. Содержание и питательная ценность белков в высших грибах. f 1.4 Ингибиторы протеолитических ферментов, свойства и и распространение в растениях
      • 1. 4. 1. Ингибиторы протеиназ из пасленовых
      • 1. 4. 2. Ингибиторы протеиназ из злаковых
      • 1. 4. 3. Ингибиторы протеиназ из тыквенных и других семейств
      • 1. 4. 4. Белки — ингибиторы протеиназ в семенах
      • 1. 4. 5. Роль ингибиторов протеолитических ферментов в растениях
    • 1. 5. Ингибиторы протеолитических ферментов в высших и несовершенных грибах
  • 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
    • 2. 1. Определение количества белка
      • 2. 2. 1. Определение активности ферментов по природным субстратам
      • 2. 2. 2. Определение активности ферментов по синтетическим субстратам
    • 2. 3. Определение ингибитора химотрипсина
    • 2. 4. Определение ингибитора трипсина
    • 2. 5. Определение активности по молоку цистеиновых и сериновых протеиназ
    • 2. 6. Методы изучения физико — химических свойств ферментов
  • 3. РЕЗУЛЬАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
    • 3. 1. Количество общего и растворимого белка в соке плодовых тел базидиомицетов
    • 3. 2. Ингибиторы протеолитических ферментов
      • 3. 2. 1. Ингибиторы трипсина
      • 3. 2. 2. Ингибиторы химотрипсина
    • 3. 3. Активность протеолитических ферментов
      • 3. 3. 1. Активность ферментов по синтетическим субстратам
      • 3. 3. 2. Динамика изменения активности трипсиноподобных и химотрипсиноподобных ферментов при хранении
    • 3. 4. Активность протеолитических ферментов по природным субстратам
      • 3. 4. 1. Молокосвертывающая активность ферментов, действие ингибиторов, физико-химические свойства
      • 3. 4. 2. Динамика изменения активности молокосвертывающих ферментов при хранении
      • 3. 4. 3. Активность щелочных и кислых протеиназ и их свойства
      • 3. 4. 4. Физико — химические свойства щелочных и кислых протеиназ
      • 3. 4. 5. Протеолитические ферменты и их ингибиторы у вида
  • Amanita phalloides

Актуальность проблемы. Протеолитические ферменты выполняют разнообразные физиологические функции в живом организме, начиная с переваривания белков пищи и запасных белков семян до специфических регуляторных процессов, таких как активация зимогенов, образование гормонов и других физиологически активных пептидов из их предшественников, транспорт белков, защитные реакции. В связи с этим изучение механизмов регуляции активности протеолитических ферментов приобретает особую актуальность. Взаимодействие протеиназ с эндогенными белковыми ингибиторами является одним из главных и наиболее древним в эволюционном отношении механизмов регуляции активности протеиназ у живых организмов.

Процессы протеолиза у бактерий, растений и животных изучен достаточно широко и полно. Однако уровень знаний о протеолитических ферментах грибных организмов неравнозначен. Особое место среди мицелиальных грибов занимают базидиомицеты, которые сегодня по праву рассматриваются как перспективные продуценты белка кормового и пищевого достоинства (Бухало А.С., 1988). Дефицит животного сырья и несовершенство микробных препаратов — стимулировали интерес к базидиальным грибам как возможным продуцентам протеолитических ферментов (Белова Н.В., 1992). Два обстоятельства оправдывают поиск ферментов пищевого и медицинского назначения среди высших базидиомицетов: наличие среди них большого числа съедобных грибов и отсутствие спороношения в культуре, что уменьшает опасность профессиональных заболеваний в условиях производства (Псурцева Н.В. с соавт., 1994).

Протеолитические ферменты применяются в пищевой, кожевенной, легкой, молочной промышленности. С увеличением выработки сыров возрос интерес к замене животного химозина ферментами другого происхождения. Исследованы культуры базидиомицетов (Kawai М., 1973) способных синтезировать молокосвертывающие ферменты и установлено, что виды Irpex lacteus и Fomitopsis pinicola — образуют протеазы, являющиеся хорошими заменителями химозина.

Особое внимание обращает на себя роль протеолитических ферментов и их ингибиторов в процессе пищеварения у человека и животных. Ингибиторы протеиназ могут в существенной степени затруднять пищеварение белков. С другой стороны, находящиеся в растениях протеолитические ферменты стимулируют этот процесс.

В связи с этим изучение содержания протеиназ и их ингибиторов в пищевых продуктах приобретает особое значение при разработке вопросов питания человека.

Данные о содержании протеиназ и их ингибиторов в растениях, обнаруженные нами в литературных источниках, касаются, в основном, представителей семейств бобовых, злаковых, пасленовых и тыквенных, реже — зонтичных и крестоцветных. Еще меньше литературных сообщений об активности протеаз и их ингибиторов в представителях класса базидиомицетов.

Исследование специфичности протеиназ по отношению к синтетическим и природным субстратам у базидиомицетов различных таксономических и экологических групп закладывает научные основы понимания функциональной роли этих ферментов в жизнедеятельности базидиальных грибов, взаимосвязи грибных организмов с другими компонентами биоценозов, позволяет оценить уровень пластичности ферментных систем базидиомицетов в различных экологических условиях.

Способность синтезировать протеиназы трипсиноподобных и химотрипсиноподобных ферментов в плодовых телах базидиомцетов изучается впервые. Исследование возможностей использования плодовых тел базидиомицетов в качестве продуцентов протеолитических ферментов представляет перспективным направлением экспериментальной микологии.

Цели и задачи исследования. Целью работы было детальное исследование протеолитической активности по природным и синтетическим субстратам, количественное определение содержания общего и водорастворимого белка, а также установление ингибиторной активности трипсина и химотрипсиноподобных ферментов в плодовых телах высших базидиомицетов, наиболее распространенных в Краснодарском крае.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1) Исследовать количество белка, активность трипсиноподобных, химотрипсиноподобных, эластолитических, кислых и щелочных протеиназ.

2) Количественно охарактеризовать активность ингибиторов трипсина и химотрипсина.

3) Установить характер распределения протеолитической активности по таксономическим группам.

4) Изучить свойства протеиназ высших грибов: термостабильность, оптимум рН активности, интервал рН стабильности.

Научная новизна. Впервые количественно определена активность протеолитических ферментов по природным и синтетическим субстратам, а также активность ингибиторов трипсина и химотрипсина в 18 видах высших грибов, наиболее распространенных в Краснодарском крае. Изучены свойства протеолитических ферментов: термостабильность, оптимум рН активности, интервал рН стабильности.

Установлена связь уровня протеолитической и ингибиторной активности с эколого-трофическими свойствами базидиомицетов. Наибольшая активность протеиназ и ингибиторов обнаружена у сапротрофов, меньшая у ксилотрофов и минимальная у симбиотрофов.

На основе полученных данных в качестве продуцентов молокосвертывающих ферментов, нами рекомендованы виды Boletus edulis, В. castanus, Leccinum auranticum, Cantarellius aurantiaca порядка Boletales и Lactarius piperatus порядка Russulales.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Высшие грибы, наиболее распространенные в Краснодарском крае, относящие к классу базидиомицетов, содержат значительное количество общего и водорастворимого белка.

2. В грибах обнаружена протеолитическая активность ферментов по молоку, казеину, гемоглобину, а также по синтетическим субстратам определена активность эластолитических, трипсиноподобных и химотрипсиноподобных ферментов.

3. Установлена активность ингибиторов трипсина и химотрипсина в исследованных видах.

4. Предложена модификация метода Бредфорд для определения количества водорастворимого белка в образцах, содержащих небелковые, а также интенсивно окрашенные примеси в растительных экстрактах.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

выводы.

1. Систематическое исследование базидиомицетов, принимаемых в пищу в Краснодарском крае, показало, что их водные экстракты содержат белок, трипсиноподобные, химотрипсинподобные, эластолитические ферменты, кислые и щелочные протеиназы, а также ингибиторы трипсина и химотрипсина.

2. Содержание общего белка составляет от 12 до 49%, высоким содержанием белка обладали виды порядка Boletales, далее следуют виды порядков Agaricales, Russulales, Aphyllophorales. Водорастворимый белок в плодовых телах грибов составляет от 7 до 17% от общего белка. Предложенная нами модификация метода Бредфорд позволяет количественно определять белок в окрашенных растворах.

3.Наиболее высокой активностью трипсиноподобных, химотрипсиноподобных, эластолитических, молокосвертывающих ферментов определено у видов порядка Boletales, далее следуют Agaricales, Russullales и Aphyllophorales.

4. Установленные для различных таксономических и экологических групп базидиомицетов закономерности распределения протеолитических ферментов с разной субстратной специфичностью (молоко, казеин, гемоглобин, БАПНА, СФПНА) позволяют прогнозировать поиск видов с заданными биохимическими характеристиками и уточнить систематическое положение отдельных видов базидиомицетов.

5. Наиболее высокой протеолитической, в том числе и молокосвертывающей аквностью обладали виды Boletus edulis, В. castanus, Leccinum aurantiaca, Cantarellus auantiaca порядка Boletales и Lactarius piperatus порядка Russulales. Считаем их перспективными для поисков протеиназ, используемых в пищевой промышленности. б. Активность ингибиторов трипсина обнаружена во всех исследованных видах, максимальное содержание у видов порядка Boletales. Активность ингибитора химотрипсина обнаружена в 6 исследованных видах из различных таксономических групп. Высокое содержание ингибиторов химотрипсина наблюдалось у вида Armillaria mellea порядка Agaricales.

7.Установлен оптимум рН активности и стабильности щелочных, кислых и молокосвертывающих ферментов. Оптимум активности щелочных протеиназ была в интервале рН от 7,5 до 9,5. Оптимум кислых протеиназ находился при рН от 2,5 до 3,5. Интервал рН стабильности молокосвертывающих ферментов был в диапозоне 7 — 10.

8. Выявлена динамика изменения активности трипсиноподобных, химотрипсиноподобных, молокосвертывающих ферментов при хранении в замороженном состоянии в течение 7 месяцев. Химотрипсиноподобные и молокосвертывающие ферменты, в исследованных видах высших грибов, более стабильны, чем трипсиноподобные ферменты.

9. Отличительным признаком ядовитого гриба Amanita phalloides от съедобных, была высокая стабильность трипсиноподобных ферментов при хранении.

10. Прослеживается положительная корреляционная зависимость между щелочными, кислыми, молокосвертывающими, трипсиноподобными, химотрипсиноподобными ферментами, а также между содержанием белка и ингибитора трипсина.

Заключение

.

В результате проделанной нами работе исследовано 18 видов высших базидиомицетов, наиболее распространенных в Краснодарском крае. Установлено было наличие химотрипсинподобных, трипсиноподобных, молокосвертывающих, эластолитических, кислых и щелочных протеиназ, а также ингибиторной активности трипсина и химотрипсина.

Определено количество общего и водорастворимого белка в исследованных видах, установлено что растворимый белок от общего составляет от 7 до 17% в зависимости от вида. Сравнивая данные, полученные методом Лоури и Бредфорд, с использованием калибровочного графика, построенного по казеину, пришли к заключению, что метод Лоури дает значительно завышенные, не реальные результаты количества растворимого белка по сравнению с данными, полученными методами Кьельдаля. Таким образом, метод Лоури не позволяет определить белок в интенсивно окрашенных продуктах без калибровочной, полученной по очищенному белку грибов. Максимальное количество общего и водорастворимого белка обнаружено в Boletus edulis порядка Boletales. Предложенная нами модификация метода Бредфорд позволяет количественно определять белок в окрашенных растворах.

Ингибиторы трипсина и химотрипсина в исследованных видах обнаружены впервые. Ингибиторы протеолитических ферментов затрудняют пищеварение белков и приводит к отрицательным физиологическим показателям, поэтому полученные данные имеют большое значение при составлении рационов питания человека.

Ингибиторы трипсина обнаружены во всех видах и установлен закономерный характер распределения активности ингибитора трипсина по таксономическим группам: максимальное содержание у видов Boletales, далее следуют порядки Agaricales, Russullales, Aphyllophorales.

Активность ингибиторов химотрипсина обнаружена в 6 из 18 видов и от 1,1 до 36 раз выше активности ингибитора триписна в зависимости от вида, минимальная разница у вида Leccinum melanum порядка Boletales и максимальная у вида Coriolus versicolor порядка Aphyllophorales. У видов порядка Russulales активность ингибитора химотрипсина не обнаружено.

Наличие активности трипсиноподобных, химотрипсиноподобных и эластолитических ферментов было обнаружено впервые. Максимальной активностью по синтетическим субстратам обладали виды порядка Boletales, которые по типу эколого — трофических связей относятся к сапротрофам. Установлена динамика изменения активности трипсиноподобных, химотрипсиноподобных и молокосвертывающих ферментов в течение 7 месяцев при хранении в замороженном состоянии. Проанализоировав динамику изменения активности протеиназ в исследованных видах базидиомицетов, можно сказать, что стабильность в замороженном состоянии у химтрипсиноподобных ферментов выше, чем трипсиноподобных, но ниже молокосвертывающих.

Во всех видах установлена активность молокосвертывающих ферментов, максимальная активность наблюдалась в видах порядка Boletales. Можно предположить, что наиболее перспективными видами для поисков заменителями химозина являются Boletus edulis, В. Castanus, Leccinum auranticum, Cantarellius aurantiaca порядка Boletales и Lactarius piperatus порядка Russulales. Ингибиторный анализ молокосвертывающих ферментов показал, что во всех исследованных видах установлена активность цистеиновых и сериновых протеиназ, причем активность сериновых протеиназ более выражена. Проанализировав характер распределения протеолитической активности по таксономическим группам можно сказать, что наиболее активными по природным и синтетическим субстратам являлись виды порядка Boletales, далее следуют Agaricales, Russulales и Aphyllophorales.

Нами выявлена и количественно измерена активность кислых и щелочных протеиназ у видов порядка Boletales и Agaricales и менее выражена у видов порядка Russulales и Aphyllophorales. Максимальную активность щелочных протеиназ наблюдали у видов Boletus edulis и Flammulina velutipes, кислых у вида Leccinum auranticum и L. melanum. Установлена положительная корреляционная зависимость между щелочными и кислыми протеиназами.

Впервые рассчитаны интервал рН стабильности и оптимум рН активности по природным субстратам. Проанализировав распределение протеолитической активности с учетом трофических связей базидиомицетов установили, что биосинтез протеиназ более выражен у макромицетов с сапротрофным типом питания, тяготеющих органикой к древесным или богатым органикой (лигнино — целлюлозными компонентами) субстратам.

Проанализировав полученные данные у вида Amanita phaloides по сравнению с другими видами, нами установлено, что отличительным признаком была высокая стабильность трипсиноподобных ферментов при хранении в замороженном состоянии. По остальным показателям Amanita phaloides не выделялся по сравнению со съедобными.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Е.П. Протеолитические ингибиторы фасоли, их получение и свойства / Е. П. Абрагимов // Автореф. для канд. биол. наук -1967.- 18 с.
  2. И.А. Сериновая протеиназа из высшего базидиомицета рода Coprinus / И. А. Алехина, Н. П. Денисова., К.А., Шагинян // Биохмия -1990. Т. 55, № 8. — С. 1387 — 1395.
  3. С. В. Физиологические соединения и биологическое действие глубинного мицелия базидиомицета Ganoderma Lucidum / Бабицкая С. В., Хлюстов Л. В., Пленина В. В // Биотехнология 2003, № 4. -С. 35−44.
  4. Н.В. Базидиомицеты источники биологически активных веществ / Н. В. Белова // Раст. ресурсы. — 1991. — № 2. — С. 23 — 27.
  5. М.А. Выделение и свойства протеиназ из семян гречихи / М. А. Белозерский, И. А. Ельцева, Т. А. Курсанова // Тезисы симпозиума «Химия протеолитических ферментов» Вильнюс. — 1973.- С. 99.
  6. М.А. Полная аминокислотная последовательность анионного ингибитора протеаз BWI 4а из семян гречихи / М. А. Белозерский, Я. Е. Дунаевский, А. Х. Мусомолямов, Ц. А. Егоров // Биохимия — 2000. — Т.65, № 10. — С. 1347 — 1352.
  7. М.А. Регуляция активности протеаз, осуществляющих гидролиз запасных белков у растений / М. А. Белозерский, Я. Е. Дунаевский // В кн.: Тезисы III симпозиума «Химия протеолитических ферментов» -1993.- 37с.
  8. А.С. Высшие базидиомицеты продуценты пищевого белка в глубинной культуре // Тез. докд. всесоюзн.конф. и мицелиальные грибы. Пущино- 1983.- 99с.
  9. А.С. Высшие съедобные базидиомицеты в чистой культуре /
  10. A.С. Бухало. Киев: Наукова думка, 1988. — 125с.
  11. Т.А. Белки — ингибиторы протеолитических ферментов у растений / Т. А. Валуева, В. В. Мосолов // Прикладная биохимия и микробиология 1995.- Т.31, № 6. — С.579 — 589.
  12. Т.А. Роль ингибиторов протеиназ в защите картофеля / Т. А. Валуева, Т. А. Ревина, E.JI. Гвоздева, Н. Г. Герасимов, О. Л. Озерцковская // Биоорганическая химия. 20 003. — Т.29, № 5. — С. 499 — 504.
  13. Т.А. Белки ингибиторы протеиназ в семенах. 1. Классификация, распространение, структура и свойства / Т. А. Валуева,
  14. B.В. Мослов // Физиология растений. 1999. — Т. 46, № 3. — С. 362 — 378.
  15. А.П. Активность щелочных протеиназ прорастающих семян пшеницы при тепловом стрессе / А. П. Веселов, И. В. Александрова, Т. Н. Алексеева // Тезисы V симпозиума «Химия протеолитических ферментов» М. — 2002. — 25с.
  16. С.П. Биосинтез гидролитических ферментов при совместном культивировании макро- и микромицетов / С. П. Виноградов,
  17. C.Н. Кушнир // Прикладная биохимия и микробиология. 2003. — Т.39. -С. 652−655.
  18. С.В. Выделение и свойства ингибитора пшеницы / С. В. Вовчук, Е. А. Волчявская, А. П. Левицкий, В. Г. Адамовская // Прикладная биохимия и микробиология. 1993.- Т. 29, № 1. — С 91 -96.
  19. Н.Е. Ингибитор металлопротеиназы из покоящихся семян гречихи / Н. Е. Воскобойникова, Я. Е. Дунаевский, М. А. Белозерский // Биохимия. 1990. — Т.55 — С. 839 — 847.
  20. B.C. Определение белка по связыванию с красителем кумасси бриллиантовым голубым G- 250 / B.C. Гаспаров, В. Г. Дегтярь // Биохимия. 1994.- Т.59, № 26- С. 456−466.
  21. Х.Г. Ферментные свойства дереворазрушающих высших базидиальных грибов / Х. Г. Гайбаров // Тез. Докл.1 всес. конф., Ташкент. -1988.-С. 48 —49.
  22. Н.П. Протеолитическая активность культур высших базидиомицетов / Н. П. Денисова // Микология и фитопатология. — 1982. -Т. 16, С.-458−465.
  23. Н.П. Протеолитические ферменты базидиальных грибов, таксономические и экологические аспекты их изучения / Н. П. Денисова // Автореф., дисс., на соис. канд., биол., наук. 1991.- 31с.
  24. Н.П. Природа и биологическая роль протеиназ базидиальных грибов / Н. П. Денисова // Микология и фитопатология. — 1984.- Т.2,№ 2. С. 116 — 119.
  25. Н.П. Ферментативная активность препарата из зимнего опенка Flammulina velutipes / Н. П. Денисова, Н. Н. Фалина // Микология и фитопатология. 1981.- Т. 15, № 2.- С. 123- 125.
  26. В.И. Протеолитические ферменты и белки ингибиторы люпина / В. И. Домаш, О. В. Буснюк, Т. Ф. Сосновская // В кн.: Тезисы V симпозиума «Химия протеолитических ферментов». — М. — 2002.- С. 81.
  27. Я.Е. Сульфигидрильная протеиназа в эндосперме прорастающих семенах ржи / Я. Е. Дунаевский, М. А. Белозерский // В кн.: Тезисы симпозиума «Химия протеолитических ферментов». — Углич. -1979.-С. 70−71.
  28. Я.Е. Протеиназа из семян гречихи, гидролизующая основной запасной белок этих семян / Я. Е. Дунаевский, М. А. Белозерский, Е. Н. Элпидина // Биохимия. 1983. — Т. 48. — С. 572 — 576.
  29. А.В. Ингибитор триписна из листьев амаранта / А. В. Зимачева, В. В. Мосолов, Е. В. Иевлева // Прикладная биохимия и микробиология. 2000. -Т. 36. — С. 541 — 544.
  30. В.Я. Аспартильная протеаза клубней картофеля / В. Я. Зобенко, М. Т. Проскуряков // В кн.: Тезисы III симпозиума «Химия протеолитических ферментов». — Москва. 1993. — С. 67 — 68.
  31. Р.И. Ингибиторы экзопротеиназ патогенного гриба Fussarium sp., в семенах и вегетативных органах растений / Р. И. Ибрагимов // Прикладная биохимия и микробиология. 1998.- Т. 34, № 34. С. 666 — 669.
  32. Р.И. Активность и молекулярная множественность ингибиторов трипсина и химотрипсина в семенах злаков / Р. И. Ибрагимов, Р. Г. Ахметов // Вестник Башкирского университета. 1996.- № 21. -С. 37 — 40.
  33. Е.В. Новая протеиназа из прорастающего зерна ячменя / Е. В. Иевлева, А. В. Зимачева, В. В. Мосолов // В кн.: Тезисы III симпозиума «Химия протеолитических ферментов». — Москва. 1993.- С. 44 — 45.
  34. Е.В. Ингибитор трипсина из листьев амаранта / Е. В. Иевлева, Ю. А. Руденская, А. В. Зимачева, В. В. Мосолов // Прикладная биохимия и микробиология. 2000. — Т. 36,№ 5. — С.541 — 544.
  35. Е.В. 7,5 кДа ингибитор цистеиновых протеиназ из семян тыквы / Е. В. Иевлева, Ю. А. Руденская, Я. Е. Дунаевский, В. В. Мосолов // В кн.: Материалы IV симпозиума «Химия протеолитических ферментов». -Москва.-1997.-91с.
  36. Т.Д. Протеазы хлопчатника / Т. Д. Касымова, Л. Г. Петросян, М. А. Кученкова, П. Х. Юлдашев // В кн.: Тезисы симпозиума «Химия протеолитических ферментов». — Углич. 1979.- 51с.
  37. О.В. Протеолитические ферменты и ингибиторы протеиназ из растений их влияние на пищеварительные протеиназы позвоночных животных / О. В. Ковалева // Автореф., дисс., на соис. канд. биол. наук.-1998.-220с.
  38. П.Г. Амарант перспективная культура XXI века / П. Г. Кононков // Фитоэкология. — 1988. — 296с.
  39. Г. А. Практическое руководство по энзимологии / Г. А. Кочетов. — Москва: Высшая школа, 1980. — 282с.
  40. Г. Ф. Биометрия / Г. Ф. Лакин // Высшая школа, 1990. 135с.
  41. Т.А. Тромбоолитическая активность базидиомицета Flammulina velutipes / Т. А. Леонтьева // Актуальные проблемы патофизиологии- 1997.-Т.2, С. 19−21.
  42. Н.А. Протеолитическая активность аффилофоровых грибов в поверхностной культуре / Н. А. Маттисон, Н. Н. Фалина // Микология и фитопатология 1973.- Т.7, С. 394 — 399.
  43. Р.А. Производство высших съедобных грибов в ССС Р / Р. А. Маслова. Киев: 1978. — 86 с.
  44. В.В. Растительные белковые ингибиторы протеолитических ферментов / В. В. Мосолов, Т. А. Валуева. — Москва: Наук.-1993.-207с.
  45. В.В. Протеолитические ферменты / В. В. Мосолов. М. Наук.-1971.-414с.
  46. В.В. Ингибиторы протеолитических ферментов белковой природы / В. В. Мосолов // В кн.: Тезисы III симпозиума «Химия протеолитических ферментов». 1993. — М. — С. 22 — 29.
  47. В.В. Новое о природных ингибиторах проетолитических ферментах / В. В. Мосолов // Биоорганическая химия. 1998. -Т.24, № 5. -С. 332−340.
  48. И.А. Защитная роль ингибиторов протеаз из семян подсолнечника современных сортов / И. А. Москвич // Пищевая технология.- 2003.- № 2−3. С. 35 -39.
  49. О.П. К сравнительно физиологической характеристике грибов из порядка афиллофоровых и агариковых грибов / О. П. Низковская, Н. М. Милова // В кн.: Кормовые белки и физиологически активные вещества для животноводства. М.: Наука.- С. 6 — 11.
  50. Д. Кристаллические ферменты / Д. Нортроп, М. Кунитц. -Изд.ин.лит. 1950.- 346с.
  51. О.П. Протеолитические ферменты и их ингибиторы в традиционных пищевых продуктах Гвинеи / О. П. Онивоги // Автореф. дисс. канд. биол. наук. — Краснодар. 1983. — 21с.
  52. Е.М. Механизм действия аспартатных протеиназ / Е. М. Попов // В кн.: Материалы IV симпозиума «Химия протеолитических ферментов» 1997. — С.69.
  53. Н.В. Биотехнологические возможности использования коллекционных культур базидиомицетов / Н. В. Псурцева, Н. В. Белова, И. А. Алехина // Биотехнология. 1994.-№ 7, С. — 35 — 39.
  54. Н.В. Культуральная характеристика и активность экзопротеиназ базидиомицетов рода Flammulina. I. Поверхностное культивирование / Н. В. Псурцева, А. Я. Мнухина // Микология и фитопатология. 1996.-Т. 30, № 1, — С. 44- 49.
  55. Н.П. Определение активности химотрипсина по скорости створаживания молочно ацетатной смеси / Н. П. Пятницкий, М. Т. Проскуряков // В кн.: Материалы 17 научной конференции физиологов Юга РСФСР. — Ставрополь. — 1969.- Т. 2, С. 80 -82.
  56. Т.А. Выделение и характеристика ингибитора трипсина и химотрипсина из клубней картофеля / Т. А. Ревина, Т. А. Валуева // Биотехнология. Т.60, № 11. — С. 1845 — 1850.
  57. В.И. Цистеиновые протеиназы прорастающих семян фасоли / В. И. Ротарь, В. И. Сенюк, К. М. Хорстман, И. А. Вайтрауб // В кн.: Материалы IV симпозиума «Химия протеолитических ферментов». — М. — 1997.-С. 50.
  58. Г. Н. Карбоксильная протеиназа из базидиального гриба Russula decolorans / Г. Н. Руденская, А. В. Гайда, А. В. Степанов // Биохимия. 1980.- Т.45, № 3, С. 54 — 56.
  59. Г. Н. Сериновая протеиназа плодов Maclura ponifera / Г. Н. Руденская, В. М. Степанов, Е. А. Богданова, Л. П. Ревина // В кн.: Тезисы III симпозиума «Химия протеолитических ферментов». М. — 1993. — С. 54.
  60. A.M. Запасание белка в семенах растений / A.M. Соболев. -Москва.: Наука, 1985. 112с.
  61. В.М. Эволюция протеиназ. Аналогии и параллели / В. М. Степанов // В кн.: Материалы IV симпозиума «Химия протеолитических ферментов». 1998. — С.5
  62. И.А. Ферментные системы высших базидиомицетов / И. А. Трутнева, Н. В. Даниляк, В. Д. Семичаевский. Киев: Наук. Думка, 1989.-247с.
  63. Н.Г. Активность и свойства протеолитических ферментов в прорастающих семенах риса / Н. Г. Туманьян, М. Т. Проскуряков // Физиология растений. 1989.-Т.36, № 37, — С. 520 — 525.
  64. Н.Н. Некоторые итоги изучения базидиальных грибов как источника получения кормового белка и дефицитных аминокислот / Н. Н. Фалина, Р. А. Маслова, П. А. Якимов, С. М. Андреева, Е. В. Алексеева // Растительные ресурсы. 1965. — № 1, С. 122 — 127.
  65. Е.П. Современные направления в изучении биологически активных веществ базидиальных грибов / Е. П. Феофилова // Прикладная биохимия и микробиология. 1998.-Т. 34, № 6. — С. 597 — 608.
  66. JI.H. Динамика протеолитической активности в культурах высших грибов / J1.H. Федорова, А. Н. Шифрина // Микология и фитопатология. 1975, — Т.7, № 6. — С. — 542 — 544.
  67. JI.H. Протеолитическая активность высших грибов в поверхностной и погруженной культуре / JI.H. Федорова // Микология и фитопатология. Т.7, № 6. — С. 542 — 544.
  68. JI.H. Протеазы сычужного действия в культурах высших грибов / JI.H. Федорова, А. Н. Шифрина // Микология и фитопатология. -1974. -Т.8, № 1. -С.22 -25.
  69. Л.Н. Биосинтез молокосвертывающего фермента базидиальных грибов Russula decolorans / Л. Н. Федорова, Т. Н. Дроздова, В. П. Гаврилов // Микология и фитопатология. 1974. — Т.8, № 1. — С.22 -25.
  70. Д.В. Ингибитор химотрипсина и субтилизина из эндосперма зерновок пшеницы / Д. В. Хлуднев, Н. В. Пивненко, В. В. Мосолов // Биохимия. — 1992. — Т. 52, № 12. -С. 1974 — 1978.
  71. Т.А. Катионные ингибиторы сериновых протеиназ из семян гречихи / Т. А. Цыбина, Я. Е. Дунаевский, А. Х. Мусомолямов, Ц. А. Егоров, М. А. Белозерский // Биохимия. 2001. — Т. 66, № 9. -С. 1157 — 1164.
  72. Т.А. Катионные ингибиторы сериновых протеиназ из семян гречихи: изучение взаимодействия с экзогенными ферментами / Т. А. Цыбина, Н. А. Попыкина, Н. И. Ларионова, Я. Е. Дунаевский, М. А. Белозерский // Биохимия. 2004. -Т 5, № 3. -С. 1127 — 1134.
  73. А.Д. Цистеиновая протеиназа из прорастающих семян пшеницы: частичная очистка и гидролиз клейковины / А. Д. Шутов, Н. К. Белтей, И. А. Вайнтрауб // Биохимия. 1984. — Т. 49, № 7. — С. 1171 — 1177.
  74. Е.Н. Обнаружение SH протеиназной активности в белок -запасающих органеллах проростков гречихи / Е. Н. Элпидина, Я. Е. Дунаевский, М. А. Белозерский // Биохимия. 1992. -Т. 57, № 10.- С. 1527 -1534.
  75. Anson М. The estimation of pepsin, trrypsin, papain and cathepsin with hemoglobin / M. Anson // J. Gen. Physiol. 1938. — Vol. 22, № 1. — P. 79 — 89.
  76. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitaion of microgram quantities of protein utilizing of protein dye bindig / M.M. Bradford // Anal. Biochim. — 1976. — Vol. 72, № 2. — P. 127 — 129
  77. Birk Y. Trypsin Inhibitor from Garden Bean (Phaseolus vulgaris) / Y. Birk // In.: Methods in Enzymology. — Vol. 45. — N. Y. — S.F. — L.: Acad. Press. -1976.-P. 710−716.
  78. Bode W. Natural Protein Proteinases Inhibitors and Their intraction with Proteinases / W. Bode, R. Huber // Eur. J. Biochem. 1992. — Vol. 204. P. 433 -451.
  79. Burton K.S. Purification and characterization of a serine proteinase from senescent sporophores of the commercial mushroom (Agaricus bisporus) / K.S. Burton, Z. Wood // J. of Gen. Microbiology. Vol. 139., P. 1379 1386.
  80. Crisans E. The Biology and cultivation of edible mushrooms / E. Crisans, A. Sands // New. York etc. Acad. Press. 1978. — P. 137 — 168.
  81. Chabala J. Inhibitor of trypsin and chymotrypsin in winged / J. Chabala, A. Reseday // Agr. And food chem. 1981. -№ 29. — P. 884 — 880.
  82. Caricia Olneedo F. Plant Proteinaseous inhibitor of Proteinase and Amylase / F. Caricia — Olneedo, G. Saleedo, Sanches — Monge, L. Gomez, J. Royo, P. Carbonero // Oxford surveys of Plant Molecular and Cell Biology. -1987. P. 275−334.
  83. B. / Biotehnology. 1995. — Vol. 13, № 1.-P. 120−121.
  84. Denisova N.P. Proteinases of higer basidiomycetes / N.P. Denisova // 10 th. Congr. of eur. Mycol, Tallin, Estonian SSR, Aug. 1989. — P. 26 — 32.
  85. Erlanger B.F. The action of chymotrypsin on two New Chromogenic Substrates / B.F. Erlanger // Arch. Biochem. Biophys. 1996. — Vol. 115.- P. 206−210.
  86. Feller V. Pattents of proteolytic enzyme activities in different tissues of germination corn / V. Feller, T.S. Soong, R.H. Hageman // Planta. 1978.- Vol. 170, № 2.-P. 155−162.
  87. Feng F. The Amino Acid Sequence of double headed trypsin from the sees of Momordica chantia Linn., Cucurbitaceae / F. Feng, R. Qian, Y. Wang // Acta Chim. — Sin. — 1989.- Vol. 1. — P. 79 — 85.
  88. Harvey B.M. The hydrolysis of endosperm protein in zea mays / B.M. Harvey, A. Daks // Plant Physiol. 1974. — Vol. 53, № 3. — P. 453 — 457.
  89. Hayes W.A. Ediblemushrooms / W.A. Hayes, S. Wright // Microbiol. Biomass. London. — 1979. — P. 41 — 76.
  90. Hearder J. Squach trypsin inhibitors from Momordica cochinchinensis exhibitat atyp cal macrocyclic structure / J. Hearder, J. Gagnon, L. Chiche // Biochemestry. 2000. — Vol. 39, № 19. — P. 5722 — 5730.
  91. Hirayama K. Purification and characterization of three cystein proteinase inhibitors from seeds of Wistaria florubunda / K. Hyrayama, F. Ogata, I Hirashiki, S. Miksumu // Mem. Fal. Sci. Kyushu Univ. Ser. C. — 1989.- Vol. 17.-P. 87−100.
  92. Janos V. Trypsin inhibitor activity of basidiomycetous mushrooms / V. Janos // Eur Food. Res Technol. 2000. — Vol. 211. — P.346 — 348.
  93. Kalisa H. M. Some characteristics of extracellular proteinase from Coprinus cenereus / H. Kalisa, D. A. Wood, D. Moore // Mycol. Res. 1989.-Vol. 92, № 3. — P. 278−285.
  94. Kawai M. Productivity of proteolytic enzymes and distribution of its milk clothing activity among the Basidiomecetes / M. Kawai // J. Agr. Chem. Soc. Japan. — 1973. — Vol. 47, № 8. — P. 467 — 472.
  95. Kawai M. Studies on milk clotting enzymes produced by Basidiomycetes / M. Kawai // Agr. Boil. Chem. 1971. — Vol. 35. P. 1517 — 1525.
  96. Kekeawa F. Antitumor polisacharides of Flammulina velutipes / F. Kekeawa // J. Pharmacol. -Dyn. 1982.- Vol. 5, № 8, P. 576 — 581.
  97. Kojima S. Requiriment for hydrophobic Phe residues in Plreurotus ostreatus proteinase A inhibitor 1 for stable inhibition / S. Kojima, Y. Hisano // Protein Eng. 2002. — Vol. 15, № 4. — P. 325 -329.
  98. Micola J. Purification and properties of a trypsin inhibitor from barley / J. Micola, E. Suolinna // Europ J. of Biochem. 1969. — Vol. 9, № 4. — P. 555 -560.
  99. Meyer H.J. Occurrence of an inhibitor of Tissue Type Plasminogen Activation in seeds and in vitro cultures of Erytrina caffa Thunb / H. J. Meyer, J. Staden // Plant Physiol. — 1991. — Vol. 96. — P. 1150 — 1156.
  100. Mannen J. F. Nodulin specifically expressed in Senscent Nodulles of Winged of Winged Bean is a pritease inhibitor / J.F. Mannen, P. Simon, J. Slofen, M., Osteras // Plant Cell. 1991. — Vol. 44, P. — 953 — 955.
  101. Maeda K. The complete Amino. Acid. Sequence of the Endogenous Amylase inhibitor in Wheat / K. Maeda // Biochem. Biophys. Acta. 1986. -Vol. 871.-P. 250 — 256.
  102. Odani S. Proteinase inhibitor from a Mimosoideae legume. Albizza julibrissin Homologues of soybean trypsin inhibitor / S. Odani, T. Onot, T. Ikenaka // J. Biochem. 1979. — Vol.86. — P. 371 — 375.
  103. Odani S. Trypsin inhibitors. Isolation and Structural characterization ofЬsingle headed and double — inhibitors of the Bowman Birk Type / S. Odani, T. Koide, T. Ono // J. Biochem. — 1986. — Vol. 100. — P. 975 — 983.
  104. Oliva M.L. Purification and Partial characterzation of thiol proteinase inhibitor from Enterlobium contorisiliquum Bean // Biol. Chem. Hoppe. 1988. -Vol. 369.-P. 229−232.
  105. Prybylowier P. Shiitake growers handbook. Dubuque: Kendol / P. Pry by lower, J. Donoghae // Hunt Publ. Co. 1991. — 217p.
  106. Pham T.C. Purification and characterization of the trypsin inhibitor from Cucurbita pepo var. partissonina fruits / T.C. Pham, J. Leluk, A. Polanowski, T. Wilusz // Biol. Chem. Hoppe Seyler. 1985. — Vol. 366, № 10. — P. 939 — 944.
  107. Polanows K.A. A new family of serine proteinase inhibitors from Squash seeds / K.A. Polanows, Otlewski, J. Leluk, T. Wilusz // Biol. Zentralb. 1988. -ш Vol. 107, P. 45−49.
  108. A. // Planta. 1972. — Vol. 107, № 1. — P. 121 — 129. Piligrim H. Untersuchungen zur inhibitorsichen wirkung von wabrigen Evtraktcn aus Basidiomyceten aur trypsin / H. Piligrim, M. Darwaza // Pharmazie 40. — 1985. — Vol. 3. — P. 655.
  109. Pilgrim H. Trypsin inhibitor activity of Basidiomycetes / H. Pilgrim, S. Haasman, K. Schroder // Zentralb. Microbiol. -1992. Vol. 147. — P. 400 — 404.
  110. Richardson M. Proteinase inhibitors of Plants and Microorganisms / M. Richardson // Phytochemistry. 1977.- Vol. 16. — P. 159 — 169.
  111. C.A. // Ann. Rev. Phytopatol. 1990. — Vol. 28. — P. 425 — 449. Shin H. Purification and characterization of cysteine protease from Pleurotus ostreatus / H. Shin, H. Choi // Biosci., Biotechnol. And Biochem. -1998. — Vol. 62, № 7. — P. 1416 — 1418.
  112. Shinobu S. Isolation and characterization of a proteinase inhibitor from spinach leaves / S. Shinobu, S. Emi., W. Tsuneo, F. Tadashi // Phytochemistry.1995. Vol. 24, № 3. — P. 419 — 423.
  113. Saarikoski P. Wound inducible gene from Salex viminales Coding for a trypsin inhibitor / P. Saarikoski, D. Claphon, S. Arnold // Plant Mel. Biol.1996. Vol. 31. -P. 465−478.
  114. Svedsen I. Isolation and characterization of a trypsin inhibitor from the Seeds of kohlarabi Belonging to the Napin Family of storage proteins / I. Svedsen, D. Nicolova, I. Goshev, N. Genov // Carlsberg Res. Commun. 1989. -Vol.54.-P. 231−239.
  115. Sonne U. Targeting and glycosylation of papain the maior potato tubers protein in leaves of transgenic tobacco / U. Sonne, A. Sturnn, M. Chrispeels, J. Willmitzer // Planta. 1989. — Vol. 179, № 2, P. 171 — 180.
  116. Terashita Т. Purification and some properties of carboxyl proteinase in mycelium of Lentinus edodes / T. Terashita, K. Oda, M. Kono, S. Murao // Agr. Biol. Chem. 1981. — Vol. 15, № 9. — P. 1929 — 1935.
  117. Terada S. Purification and characterization of three Proteinase inhibitors from Canavalia lineata / S. Terada, S. Fujimura, S. Kimoto // Biotech. Biochem. 1994.- Vol.58. — P. 371 — 375.
  118. Tashiro M. The complete Amino Acide Sequence of Major trypsin inhibitor from seeds of Fox tali / M. Tashiro, T. Asao, C. Hirata, K. Takashi, M. Kamamori // J. Biochem. -1990. — Vol. 108.- P. 669 — 672.
  119. Tuppy H. Amino soure-p- nitroanilide als substrat fur aminopeptidasen and andere proteolytycs fement / H. Tuppy, U. Wiessbauer, E. Winterberger // Hoppe Selers. Z. Physiol. Chem. — 1962. — Vol. 329, № 6. — P. 278 — 288.
  120. Volpicella M. Functional expression on bacteriophage of the nustard trypsin inhibitor MTI 2 / M. Volpicella, R. Galeerani, A. Marten // Biochem. And Biophys. Res. Commun. — 2001. — Vol. 280, № 3. — P. 813 — 887.
  121. Wong P.P. Kuo Т., Ryan C.A. // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1975. Vol. 63, № 1. — P. 121 — 125.
  122. H. Механизм SP I ингибирования активности кислой протеазы и объяснения стимулирования с его помощью образования плодовых тел / Н. Zeng, G. Xianghong, Z. Xuebao // Acta mycol. Sin. 1994. -Vol.13, № 3.-P. 223−228.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!