Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Высокоэффективная жидкостная хроматография порфиринов и косвенное спектрофотометрическое детектирование органических молекул

Диссертация: Высокоэффективная жидкостная хроматография порфиринов и косвенное спектрофотометрическое детектирование органических молекул
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Синтезированы феофитинаты, а и Ъ меди, цинка, ртути, свинца и церия. Найдены условия для разделения лигандов (феофитины, а и Ь) и их комплексов с металлами N^(11), Щ (П), РЬ (П), Си (П), Се (1У) в условиях нормальнои обращенно-фазовой ВЭЖХ. Подтверждено, что удерживание соединений этого класса зависит от свойств неподвижной и подвижной фаз, природы лиганда, центрального атома металла. Цель… Читать ещё >

Высокоэффективная жидкостная хроматография порфиринов и косвенное спектрофотометрическое детектирование органических молекул (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Елава 1. Косвенное спектрофотометрическое детектирование неэлектролитов в высокоэффективной жидкостной хроматографии (обзор литературы)
  • Глава 2. Исходные вещества, аппаратура, расчетные формулы
  • Глава 3. Хроматографическое поведение растительных пигментов и их производных
    • 3. 1. Нормально-фазовая ВЭЖХ
    • 3. 2. Обращенно-фазовая ВЭЖХ
    • 3. 3. Обсуждение результатов
  • Глава 4. Хроматографическое поведение некоторых синтетических порфиринов на различных сорбентах
    • 4. 1. Силасорб
    • 4. 2. Нуклеосил С^
    • 4. 3. Диасорб-130-фенил
    • 4. 4. Диасорб-130-амин
    • 4. 5. Обсуждение результатов
  • Глава 5. Изучение адсорбции порфиринов
    • 5. 1. Использование моделей Скотта-Кучеры и Снайдера-Сочевинского
    • 5. 2. Построение изотерм адсорбции по данным ВЭЖХ
    • 5. 3. Обсуждение результатов
  • Глава 6. Косвенное спектрофотометрическое детектирование органических молекул
    • 6. 1. Косвенное детектирование некоторых фенолов и спиртов
    • 6. 2. Определение жирорастворимых витаминов Е и Б
    • 6. 3. Определение краун-эфиров
    • 6. 4. Определение некоторых углеводов

Актуальность темы

В настоящее время одним из направлений в развитии высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) является разработка новых детектирующих систем. Метод косвенного спектрофотометрического детектирования позволяет расширить круг веществ, определяемых методом ВЭЖХ, а в ряде случаев повысить чувствительность определения соединений, не поглощающих или имеющих низкое поглощение в ультрафиолетовой или видимой областях спектра. Однако результаты определения неэлектролитов трудно прогнозировать, поскольку не вполне ясен механизм возникновения косвенного отклика и мало исследована концентрационная зависимость площади аналитического сигнала. Поэтому актуальна разработка различных вариантов косвенного детектирования в ВЭЖХ и поиск новых модификаторов подвижных фаз, поглощающих в видимой области спектра. В соответствии с этим в настоящей работе для косвенного спектрофотометрического детектирования органических молекул (фенолы, спирты, витамины, краун-эфиры, углеводы) предлагается использовать порфирины. Порфирины удовлетворяют основным требованиям, предъявляемым к модификаторам подвижных фаз для косвенного спектрофотометрического детектирования неэлектролитов, однако ранее для этих целей не использовались.

Цель работы: изучение хроматографического поведения порфиринов в различных подвижных фазах на различных сорбентах для выбора модификаторов подвижных фаз и использование этих модификаторов для косвенного спектрофотометрического детектирования органических молекул в видимой области спектра.

Для достижения поставленной цели.

— изучено влияние природы, состава подвижных фаз, природы неподвижных фаз, структурных особенностей лигандов и их комплексов с металлами на хроматографические параметры удерживания порфиринов;

— рассмотрены механизмы сорбции порфиринов и металлопорфиринов в условиях нормальнои обращенно-фазового вариантов ВЭЖХ;

— спектрофотометрически исследованы эффекты слабых взаимодействий порфирин — сорбат;

— систематически исследованы зависимости косвенного отклика от концентрации анализируемого соединения, концентрации модификатора в подвижной фазевлияние концентрации модификатора на относительное удерживание и чувствительность определения соединений;

— проанализированы фармацевтические препараты, содержащие витамины Е и Б.

Научная новизна. В условиях нормальнои обращенно-фазового вариантов ВЭЖХ на сорбентах Силасорб 600, Диасорб-130-фенил, Диасорб-130-амин, Нуклеосил С18 исследовано и сопоставлено поведение ряда растительных (феофитины, а и Ъ и их комплексы с (II), Ь^ (II), РЬ (II), Си (II), Хп (II), Се (IV)) и синтетических пигментов (тетрафенилпорфирин и некоторые его производные). Найдены условия для разделения лигандов с заместителями различной полярности и их комплексов с металлами. Данные по хроматографическому удерживанию порфиринов обработаны согласно моделям Скотта-Кучеры, Снайдера-Сочевинского, рассчитаны и построены изотермы адсорбции. Предложена теоретическая интерпретация полученных результатов, рассмотрены возможные механизмы удерживания порфиринов на различных сорбентах. В качестве модификаторов подвижных фаз выбраны шесть порфиринов. В результате изучения электронных спектров поглощения (ЭСП) модификаторов — хлорофилла (а+Ь), тетрафенилпорфирина, Рс!(и-метоксифенил)порфирина — в присутствии витаминов Е и 03, краун-эфиров (18-краун-6 и дибензо-18-краун-6), углеводов (рамноза, сорбит, мальтоза) показана возможность использования эффекта слабых взаимодействий для косвенного спектрофотометрического детектирования некоторых классов органических молекул (фенолы, спирты, витамины, краун-эфиры, углеводы). Предложены механизмы возникновения косвенного отклика.

Практическая значимость. Показано, что методом ВЭЖХ можно идентифицировать феофитины, а и Ъ и их комплексы с металлами (II), Р^ (II), РЬ (II), Си (II), Ъп (II), Се (IV)) в процессе их синтеза, а также определять эти.

Выводы.

1. Синтезированы феофитинаты, а и Ъ меди, цинка, ртути, свинца и церия. Найдены условия для разделения лигандов (феофитины, а и Ь) и их комплексов с металлами N^(11), Щ (П), РЬ (П), Си (П), Се (1У) в условиях нормальнои обращенно-фазовой ВЭЖХ. Подтверждено, что удерживание соединений этого класса зависит от свойств неподвижной и подвижной фаз, природы лиганда, центрального атома металла.

2. Сопоставлением селективности хроматографического разделения тетрафенилпорфирина, тетра (2,6-дифторфенил)порфирина и его комплекса с никелем, тетра (п-метоксифенил)порфирина и его комплекса с палладием, тетрамезитилпорфирина, никель-тетра (2,5-диметилфенил)порфирина, тетрапентафторфенилпорфирина на сорбентах Силасорб 600, Нуклеосил С!8, Диасорб-130-фенил, Диасорб-130-амин в условиях нормальнои обращенно-фазовой ВЭЖХ установлено, что модифицированные силикагели можно использовать для разделения порфиринов с заместителями различной полярности. Построены шкалы селективности.

3. С целью уточнения механизма удерживания порфиринов разных структурных групп методом ВЭЖХ получены и проанализированы изотермы адсорбции. Установлено, что классические модели Скотта-Кучеры и Снайдера-Сочевинского описывают зависимость удерживания порфиринов только в ограниченном диапазоне концентраций полярной добавки подвижной фазы. Подтверждено, что квазихимическую модель равновесной адсорбции, общую для нормальнои обращенно-фазовой ВЭЖХ, целесообразно применять для адекватного описания механизмов удерживания феофитинагов металлов и производных тетрафенилпорфирина.

4. Установлено, что порфирины удовлетворяют основным требованиям, предъявляемым к модификаторам подвижных фаз для косвенного спектрофотометрического детектирования неэлектролитов, не поглощающих или имеющих низкое поглощение в видимой области спектра. Предложены 6 соединений: хлорофилл а, Ъ, феофитин Ъ, тетрафенилпорфирин, тетра (2,6-дифторфенил)порфирин, тетра (п-метоксифенил)порфирин и его комплекс с палладием в качестве модификаторов подвижных фаз для косвенного спектрофотометрического детектирования неэлектролитов.

5. Найдены условия для разделения и количественного определения витаминов Е и 03, 18К6 и ДБ18К6 с косвенным фотометрическим детектированием. Проанализированы фармацевтические препараты, содержащие витамины е и Б.

6. На основании анализа ЭСП модификаторов подвижных фаз — хлорофилла а, Ь, тетрафенилпорфирина и Рс1-тетра (п-метокси-фенил)порфирина в присутствии неэлектролитов: витаминов (Е, 03), краун-эфиров (18К6, ДБ18К6), углеводов (мальтоза, рамноза, сорбит) — предложены механизмы возникновения косвенного отклика.

Показать весь текст

Список литературы

  1. M.F., Kennedy J.F. // Carbohydrate analysis, a practical approach. IRL Press, Oxford, 1986.
  2. J., Schill G., Herne P. // Chromatographia. 1988. V.25. P.397.
  3. Small H., Miller T.A.//Anal.Chem. 1982. V.54. P.462.
  4. H. // Anal.Chem. 1983. V.55. P.235A.
  5. BidlingmeyerB.A., WarrenF.V. //Anal.Chem. 1982. V.54. P.2351.
  6. J.J., Deining S.N. // Anal.Chem. 1982. V.54. P.1540,2251.
  7. H., Gnanasambandan T. // Anal.Chem. 1982. V.54. P. 1282.
  8. J.E. // J.Chromatogr. 1984. V.287. P.457.
  9. Vigh G., Leitold A.//J.Chromatogr. 1984. V.312. P.345.
  10. Parkin J.e., Lau H.T. // J.Chromatogr. 1984. V.314. P.488.
  11. S. //Anal.Chem. 1985. V.57. P.2590.
  12. J.e. //J.Chromatogr. 1986. V.351. P.532.
  13. Glavina L.L.M., Cantwell F.F. //Anal.Chem. 1993. V.65. P.268.
  14. S., Castrogivanni M.A. // J.Chromatogr. 1987. V.396. P. 169.
  15. J.e. //J.Chromatogr. 1984. V.303. P.436.
  16. P., Renson M., Crommen J. // Chromatographia. 1984. V.19. P.274.
  17. Lu В., Stefansson M., Westerlund D. //J.Chromatogr., A. 1995. V.697. P.317.
  18. J.e. //J.Chromatogr. 1986. V.370. P.210.
  19. J.e. //J.Chromatogr. 1987. V.407. P.389.
  20. G., Arvidsson E. // J.Chromatogr. 1989. V.492. P.299.
  21. McCrossen S.D. Simpson C.F. // Anal.Proc. 1994. V.31. P.9.
  22. McCrossen S.D., Simpson C.F. // J.Chromatogr., A. 1995. V.697. P.53.
  23. L., Schill G. // Chromatographia. 1982. V.15. N7. P.437.
  24. Т., Ishii D. // J.Chromatogr. 1987. V.396. P. 149.
  25. В.Д., Сахартова O.B. Высокоэффективная жидкостная хроматография. Рига: Зинатне, 1988. 390 с.
  26. J., Schill G., Westerlund D., Hackzell L. // Chromatographia. 1987. V.24. P.252.
  27. G., Crommen J. // TRAC. Tends in anal. ehem. 1987. V.6. N5. P. l 11.
  28. Barber W.e., CarrP.W. //J.Chromatogr. 1984. V.316. P.211.i о л1 JJ>
  29. S., Grushka E. //Anal.Chem. 1986. V.58. P.1602.
  30. S.A., Wangsa J., Danielson N.D. //Anal. Chem. 1992. V.64. N6. P.583.
  31. Т., Watanabe S., Murase K., Ishii D. // Chromatographia. 1988. V.25 P.107.
  32. Berthod A., Click M" Winefordner J.D. // J.Chromatogr. 1990. V.502. P.305.
  33. G.K., Gnanasambandan T. //Anal.Chim.Acta. 1984. V.164. P.267.
  34. P. // J.Pharm.Belg. 1990. V. 45. N2. P.151.
  35. McCormick R.M., Karger B.L. // J.Chromatogr. 1980. V.199. P.259.
  36. X., Regnier F.E. //J.Chromatogr. 1985. V.332. P.147.
  37. Scott R.P.W., Simpson C.F. // Faraday Symp.Chem.Soc. 1980. V.15. P.69.
  38. J., Almgren M. // Anal.Chem. 1985. V.57. P.817.
  39. J.W., Harris J.M. // Anal.Chem. 1986. V.58. P.626.
  40. J.J., Dorsey J.G. //J.Chromatogr. 1988. V.457. P.85.
  41. J., Almgren M. //Anal.Chem. 1989. V.61. P. l 109.
  42. Knox .Т.Н., Hartwick R.A. //J.Chromatogr. 1981. V.204. P.3.
  43. E., Crommen J., Schill G., Westerlund D. // J.Chromatogr. 1989. V.461. P.429.
  44. Gnanasambandan Т., FreiserH. //Anal.Chem. 1981. V.53. P.909.
  45. D., Takeuchi Т. // Кукан кагаку сосэцу. 1990. N9. С. 98,219.
  46. J., Herne P. // J.Pharm.Biomed.Anal. 1984. V.2. P.241.
  47. E. // J.Chromatogr. 1987. V.407. P.49.
  48. DenkertM., Hackzell L., Schill G., Sjogren E.//J.Chromatogr. 1981. V.218. P.31.
  49. L., Rydberg Т., Schill G. //J.Chromatogr. 1983. V.282. P.179.
  50. Dona A.-M., Verchere J.-F. // J.Chromatogr., A. 1995. V.689. P. 13.
  51. Gnanasambandan Т., FreiserH. //Anal.Chem. 1982. V.54. P.2379.
  52. J. //J.Pharm.Biomed.Anal. 1983. V.l. P.549.
  53. Massaccesi M.// Farmaco. 1992. V.47(5, Suppl.). P.753.
  54. Da S.// Fenxi Huaxue. 1989. V.17. N4. P.372.
  55. Hayakawa KM Yakugaku Kenkyu no Shinpo. 1994. V. l 1. P. 127.
  56. Hayakawa K., Yamamoto A.// Bunseki Kagaku. 1995. V.44. N6. P.417.
  57. Малый практикум по физиологии растений / Под ред. Мокроносова А. Т. М.:МГУ, 1994. 183с.58.0ловянишникова Г. Д. Дис. .канд.хим.наук. М.: МИТХТ, 1979. 59. Ломова Т. Н., Андрианова Л. Г., Березин Б. Д. // Коорд. химия. 1988. Т. 14. № 4. С. 453.
  58. InoueH., FuruyaK., Watanabe Т. et al. //Anal. Sei. 1988. V.4. № 6. P.599.
  59. Т., Hongu A., Hondo К., Nakazato M., Konno M., Saitoh S. // Anal. Chem. 1984. V. 56. P.251.
  60. Порфирины: структура, свойства, синтез / Под ред. Аскарова К. А., Березина Б. Д., Евстигнеевой Р. П. и др. М.: Наука, 1985. С. 192.
  61. .Д., Койфман О. И. // Успехи химии. 1980. Т.49. № 12. С. 2389.
  62. Е.А., Ициксон Л. Б., Брауде Е. В. Практическая высокоэффективная жидкостная хроматография. М.: Химия, 1986. С. 97.
  63. Экспериментальные методы в адсорбции и молекулярной хроматографии / Под ред. Киселева A.B., ДревингаВ.П. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1973. С. 353.
  64. Л.Е., Брыкина Г. Д., Шпигун O.A. // Журн. аналит. химии. 1995. Т. 50. № 9. С. 902.
  65. Л.И. // Успехи химии. 1991. Т. 60. № 9. С. 1969.
  66. Хроматография. Практическое приложение метода. Т.1. / Под ред. Хефтмана Э. М.: Мир, 1986. 336с.
  67. К., Inoue Н., Shirai Т. // Anal. Sei. 1987. V.3. № 4. P. 353.
  68. Li S" Inoue H. // Chromatographia. 1992. V.33. № 11−12. P. 567.
  69. FuruyaK., Ohki N., Inoue H., Shirai T. // Chromatographia. 1988. V.25. № 4. P.319.
  70. H., Imai M., Naemura Т., Furuya K., Shizuri Y. // J.Chromatogr. 1993. V.645. № 2. P.259.
  71. .Д. //Журн. неорган, химии. 1992. Т.37. № 6. С. 1260.
  72. Т.Н., Мамлеева H.A., Некрасов Л. И. // Журн. физ. химии. 1984. Т.58. № 3. С. 692.
  73. H.A., Некрасов Л. И. //Журн. физ. химии. 1989. Т.63. № 3. С. 735.
  74. Т. Электроны и химическая связь. М.: Мир, 1967. С. 87.
  75. А.Р., Петрухин О. М. Жидкостная адсорбционная хроматография хелатов. М.: Наука, 1989. 288 с.
  76. Saitoh К., Kobayashi М&bdquo- Suzuki N. // J.Chromatogr. 1982. V.243. N2. Р.291.
  77. К., Suzuki N. //Anal.Chim.Acta. 1985. V.178. N2. P. 169.
  78. L. // Bunseki kagaku. 1986. V.35. N11. P.895.
  79. N., Takeda Т., Saiton K. // Chromatographia. 1986. V.22. N1. P.43.
  80. T.A., Березин Б. Д., Березин М. Б. Успехи химии порфиринов. СПб: Изд-во НИИ Химии СПбГУ, 1997. 384с.
  81. К. //J.Liquid Chromatogr. 1990. V.13. N11. Р.2193.
  82. Т.М., Гуревич К. Б., Давыдов В. Я., Мандругин A.A. // Вести, моек, унта. Сер. 2. Химия. 1996. Т.37. № 1. С. 42.
  83. У., Шарте К. Органическая химия фтора. М.: Мир, 1972. 480с.
  84. Растворы неэлектролитов в жидкостях / Под ред. Никифорова М. Ю., Альпера Г. А., Дурова В .А. и др. М.: Наука, 1989. 263 с.
  85. L.R., Poppe Н. //J.Chromatogr. 1980. V.184. Р.363.
  86. С.Н., Никитин Ю. С. //Журн.аналит.химии. 1991. Т.46 № 8. С. 1493.
  87. Р., Эллиот Д., Эллиот У., Джоне К. Справочник биохимика. М.: Мир, 1991. С. 178.
  88. М. Краун-соединения. Свойства и применение. М.: Мир, 1986. 363 с.
  89. ВЭЖХ в биохимии / Под ред. Хеншена А. М.: Мир, 1989. С.582−593.
  90. С.Н., Никитин Ю. С., Сыроватская Е. В. // Журн.физ.химии. 1993. Т.67. № 8. С. 1658.
  91. В.Д., Садовникова H.A., Оловянишникова Г. Д., Столовицкий Ю. М. // Журн.физ.химии. 1995. Т.69. № 2. С. 326.
  92. С.Н., Ланина H.A., Никитин Ю. С. // Журн.физ.химии. 1995. Т.69. № 11. С. 2045.95.0тавин С.Г., Болдескул И. Е. // Биофизика. 1979. Т.25. С. 359.
  93. С.Д., Гуринович Г. П. // Оптика и спектроскопия. 1974. Т.36. С. 687.
  94. В.Д., Маслов В. Г., Садовникова H.A. // Журн.физ.химии. 1981. Т.55. С. 977.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!