Курс ингаляций исследуемым препаратом снижал выброс первичных токсинов из патологического источника в кровь. Благодаря этому, транспортные системы крови могли справиться с поступающим объемом эндотоксинов и доставить их к местам детоксикации и выведения практически без повреждения сопутствующих структур (Анашкина и др., 2011).
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫВ качестве подопытных животных были выбраны 30 крыс (самки линии Wistar, весом 150 — 200 г). Все животные были подразделены на четыре группы: интактная группа (И-группа);контрольная группа (К-группа), которой вводили физиологический раствор в концентрации 0,1 мг/кг;опытная группа (АДР-группа), которой вводили адреналин в концентрации 0,1 мг/кг;опытная группа (АДР+АП-группа), которой вводили адреналин в концентрации 0,1 мг/кг, а затем проводили ингаляции Апингалином в течение 10 последующих дней. Все манипуляции соответствовали этическим нормами и правилам работы с лабораторными животными. Забор крови у крыс осуществляли из подъязычной вены в пробирки с антикоагулянтом (1 мл цитрата натрия). Выделение плазмы крови крыс проводили с помощью центрифугирования в течение 15 мин при скорости 3000 об/мин, сыворотки — 1500 об/мин.Определение показателей общего белка, альбумина, креатинина и мочевины в сыворотке крови проводили с помощью биохимического анализатораStat Fax 3300 (производство США) по прилагаемой производителем методике с использованием проточной кюветы. Использовались следующие расходные материалы: — UREA-B (Испания), — CREATANINE-J (Испания), — TOTALPROTEIN (Испания), — ALBUMINE (Испания).Определение фибриногена проводили на анализаторе показателей гемостаза АПГ4−01Минилаб-704 по запрограммированной методике определения концентрации фибриногена по методу Клаусса (в г/л) при оптическом режиме работы (определение по изменению коэффициента пропускания света содержимым кюветы) с использованием набора Тех-Фибриноген-тест (производитель ООО ФИРМА «ТЕХНОЛОГИЯ-СТАНДАРТ», Россия, Барнаул).Статистическую обработку данных проводили с использованием стандартных статистических методов. Проверку на нормальность распределения проводили с использованием критерия Шапиро-Уилка W. Практически все данные имели нормальное распределение. Сравнение средних арифметических проводили с помощью t-критерия Стьюдента. Различия считали статистически значимым при p <0,05. Для составления базы данных результатов исследования и проведения их статистической обработки применяли пакет программ Excel, STATISTICA 10, Past.
4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯВ табл. 2 приведена статистическая характеристика результатов эксперимента, проведенная на основании расчета средней арифметической указанных значений и статистической ошибки средней арифметической для каждой группы: интактной, контроля, группы с введением адреналина, группы с введением адреналина и с последующей ингаляцией Апингалином. Таблица 2Показатели белкового обмена крови крыс.
ГруппаОбщий белок, г/лКреатинин, мкмоль/лМочевина, ммоль/лФибриноген, г/лАльбумин г/дл, И-группа84,20±4,99 218,20±11,890,0130±0,240,24±0,1043,52±1,41К-группа72,82±2,36 249,72±30,780,0029±0,82,29±0,9141,82±2,25АДР-группа71,87±4,44 243,89±18,980,0054±0,40,18±0,0543,34±0,86АДР+АПгруппа72,18±1,39 290,07±19,360,0073±0,301,09±0,5744,15±1,46Статистически достоверные отличия (p< 0,05) установлены для показателей:
общего белка между И-группой и АДР+АП-группой (обращает на себя внимание снижение по сравнению с интактной группой в 1,2 раза уровня общего белка в группе крыс, которым вводился адреналин и с последующей ингаляцией Апингалина);
— креатинина между И-группой и АДР+АП-группой (доказано увеличение в 1,3 раза по сравнению с интактной группой показателя креатинина в сыворотке крови крыс, которым вводился адреналин и с последующей ингаляцией Апингалина);
— мочевины между И-группой и К-группой (наблюдалось снижение содержания мочевины в сыворотке крови крыс контрольной группы по сравнению с интактной группой в 4,5 раза);
между К-группой и АДР-группой (увеличивалось по сравнению с контрольной группой содержание мочевины в крови крыс опытной группы, которым вводился адреналин, в 1,9 раза);
между И-группой и АДР-группой (снизилось содержание мочевины в сыворотке крови крыс, которым вводился адреналин, по сравнению с интактом в 2,4 раза);
— фибриногена между И-группой и К-группой (повысился в 9,5 раза показатель содержания фибриногена в плазме крови крыс контрольной группы после введения физиологического раствора по сравнению с таковым же у интактной группы);
между К-группой и АДР-группой (показано, что в группе контроля показатель содержания фибриногена в плазме крови выше в 12,7 раза по сравнению с таковым же у крыс, которым вводился адреналин).Рис. 1. Динамика показателя общего белка.
Таким образом, было выявлено, что показатель общего белка (см. рис. 1) снижался в 1,2 раза во всех группах по сравнению с интактом, однако статистически достоверные отличия зафиксированы только для группы с введением адреналина и последующих ингаляций Апингалином (p< 0,05).Рис. 2. Изменение концентрации креатинина.
Рис. 3. Снижение концентрации мочевины по сравнению с интактной группой.
Концентрация креатинина (см. рис. 2) была повышена во всех группах воздействия по сравнению с интактными животными, однако статистически достоверные отличия зафиксированы только для группы с введением адреналина и последующих ингаляций Апингалина (p< 0,05).Концентрация мочевины (см. рис. 3) была снижена во всех группах воздействия по сравнению с интактными, однако статистически значимую разницу удалось выявить только для группы контрольных животных и группы с введением адреналина. Кроме того, было выявлено, что в группе крыс после введения адреналина концентрация мочевины была значимо выше, чем в группе контрольных животных после введения физиологического раствора.Рис. 4. Динамика содержания фибриногена.
Содержания фибриногена (см. рис. 4) в группе интактных животных и после введения адреналина практически не изменялось, но статистически значимо возрастало в группе контроля, где значимо превышало показатель группы крыс после введения адреналина. Содержание альбумина (см. рис. 5) практически не изменялось при воздействиях и соответствовало показателю в группе интактных крыс.Рис. 5. Содержание альбумина.
При сравнении групп с введением адреналина и проведением последующих ингаляций и без них, установлено, что содержание общего белка, альбумина и мочевины практически не изменялось на фоне применения продукта пчеловодства, а уровень креатинина и фибриногена повышался, но не достигал значений интактной группы, однако статистически значимой разницы выявить не удалось. Любые инъекции сопровождаются изменением содержания белков крови (кроме альбумина) по сравнению с интактом, однако статистически достоверные результаты получены только при сравнении значений мочевины после введения физиологического раствора или адреналина; креатинина и общего белка после применения Апингалина на фоне инъекции адреналина; фибриногена после введения физиологического раствора. При проведении ингаляций Апингалином статистически значимых отличий от группы моделирования отёка легких достичь не удалось, однако отмечена тенденция к увеличению фибриногена плазмы и креатинина сыворотки крови. ВЫВОДЫ1.
Введение
физиологического раствора вызывает изменение биохимических показателей белкового обмена крови. Выявлено статистически значимое (p<0,05) снижение мочевины и повышениефибриногена. 2.
Введение
адреналина вызывает угнетение белкового обмена крови, что выражается в снижении его показателей. Так, установлено достоверное (p<0,05) снижение концентрации мочевины в крови крыс. Однако, концентрация альбумина не изменяется.
3. Проведение ингаляций Апингалинана фоне введения адреналина приводит к снижению показателя общего белка в 1,2 раза (p<0,05) по сравнению с интактным уровнем, хотя тенденция к такому снижению отмечена и после введения адреналина (p >0,05), и после инъекции физиологического раствора (p >0,05). Концентрация альбумина не изменялась. Увеличивалось содержание фибриногена плазмы и креатинина сыворотки крови. Для мочевины также отмечено повышение концентрации.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1.Анашкина А. А. Влияние апингалина на уровень эндогенной интоксикации при отеке легких у крыс / А. А. Анашкина, С. В. Копылова, С. С. Сокольский. [Электронный ресурс]. Режим доступа:
http://apismf.ru/2-/763−2011;11−03−10−54−23.html2. Апингалин снижает степень эндогенной интоксикации при отеке легких у крыс / В. Н. Крылов, Е. И. Ерлыкина, С. В. Копылова, А. А. Анашкина // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. — 2015. — Вып.
58. — С.88 — 91.
3. Апитерапия[Электронный ресурс]. Режим доступа:
http://www.centremed.ru/index.php/apiterapiya4.Атраментова Л. А. Статистические методы в биологии / Л. А. Атраментова, О. М. Утевская. — Горловка, 2008. — 248 c.
5. Ахметова Л. Т. и др. Продукты пчеловодства как биологически активные средства и альтернативные продукты питания //Л.Т. Ахметова, С. Ю. Гармонов, Ж. Ж. Сибгатуллин и др. — Вестник Казанского технологического университета. — 2011. — №.
15. — С. 154 — 160.
6. Блохин А. В. Теория эксперимента [Электронный ресур]: Курс лекций в двух частях: Часть 1. — Электрон. текст. дан. (1,1 Мб). — Мн.: Научно-методический центр «Электронная книга БГУ», 2003. — Режим доступа:
http://anubis.bsu.by/publications/elresources/Chemistry/blohin1.pdf. — Электрон. версия печ. публикации, 2002.
— PDF формат, версия 1.4. — Систем. требования: AdobeAcrobat 5.0 и выше.
7.Блохин А. В. Теория эксперимента [Электронный ресур]: Курс лекций в двух частях: Часть 2. — Электрон. текст. дан. (1,0 Мб). — Мн.: Научно-методический центр «Электронная книга БГУ», 2003. — Режим доступа:
http://anubis.bsu.by/publications/elresources/Chemistry/blohin2.pdf. — Электрон. версия печ. публикации, 2002. — PDF формат, версия 1.4 .
— Систем. требования: AdobeAcrobat 5.0 и выше.
8.Данилова Л. А. Анализы крови и мочи. — 4-е изд., исправ. — СПб.: Салит-Медкнига, 2003. — 128 с.
9. Дубцова Е. А. Состав, биологические свойства меда, пыльцы и маточного молочка и возможность их применения в лечебном питании // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. — 2009. — № 3. — С. 36 — 41.
10.Клиническая биохимия: Учебное пособие для студентов медицинских вузов / А. Я. Цыганенко, В. И. Жуков, В. В. Мясоедов, И. В. Завгородний. — Москва: «Триада-Х», 2002. — 504 с.
11.Козинец Г. И. Интерпретация анализов крови и мочи и их клиническое значение / Г. И. Козинец. — Москва: «Триада — Х», 1998. — 104 с.
12.Копылова С. В. Влияние препарата «Апингалин» на некоторые показатели эндогенной интоксикации крови крыс при отеке легких / С. В. Копылова, А. А. Пашкина, Ю. А. Старателева // Вестник Нижегородского университета им. Н. И. Лобачевского. — 2010. — № 2 (2). — С.
532 — 535.
13.Копылова С. В. Исследование показателей системы гемостаза крови крыс при ингаляционном введении препарата «Апингалин» в условиях моделирования отека легких / С. В. Копылова, Ю. А. Старателева // Международный научно-исследовательский журнал. — 2013. — №. 1−1 (8). — С. 78 — 80.
14. Крылов В. Н. Теоретическая и экспериментальная апитерапия. [Электронный ресурс]. Режим доступа:
http://www.apiworld.ru/1 353 486 823.html15. Крылов В. Н., Сокольский С. С. Применение биологически активных добавок на основе пчелопродуктов / Фундаментальные исследования. — 2006. — № 10 — С. 47 — 49.
16. Омаров Ш. М. Апитерапия: продукты пчеловодства в мире медицины. Ростов-на-Дону: Феникс, 2009. 351 с.
17. Омаров Ш. М. Апитерапия: продукты пчеловодства в мире медицины // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2012. № 9. С. 36.
18.Определение показателей гемостаза на программируемом оптико-механическом коагулометре Минилаб 704 [Электронный ресурс]. Режим доступа:
http://www.coagulometers.ru/minilab704.htm19. STATFAX® 3300.
Биохимический анализатор. Руководство пользователя. AWARENESSTechnologyInc. [Электронный ресурс]. Режим доступа:
http://www.awareness.ru/support/show/1184ПРИЛОЖЕНИЕТаблица 1Результаты анализа белкового обмена крыс.
Группа№п/пОбщий белок, г/лКреатинин, мкмоль/лМочевина, ммоль/лФибриноген, г/лАльбумин г/дл, И-группа1 103 175,20,2 190,644,1274,7230,70,1 360,140,3380,3209,90,990,0546,7 478 238,80,0090,340,2 585 236,40,1 070,1346,3К-группа174,2327,10,531,7446,6277,3195,80,4 244,3373,8183,90,272,0643,4463,7221,80,120,5241,3575,13 200,00134,8233,5АДР-группа156,4251,60,270,5147,2258,8218,30,670,1340,3365,1220,50,640,1342,8475,7398,50,4 246,2567257,50,510,1247,2682,6220,90,620,1841,5777,6217,70,441,4897,5174,70,560,1140953,8216,80,670,1242,91 084,2262,40,660,1243,9АДР-АП-группа163,9400,30,15,8745,3271,7212,70,320,1240,6 370 316,60,3 320,946,8470,9349,10,760,1249,2574,6281,10,170,2244,9680,6339,40,632,2847,2775,9282,40,280,2136,9869,32 390,00740,1946,1971,9215,30,380,748,21 073 264,80,710,2636,3.
