Возбудители листериоза и рожи свиней

Характеристика возбудителей рожи свиней и листериоза

1. Возбудитель листериоза

2. Возбудитель рожи свиней

1. Возбудитель листериоза

Листериоз — распространенное зоонозное заболевание. Оно зарегистрировано в 44 странах. Вызывается листериоз Listeria monocytogenes (род Listeria).

Морфология и тинкториальные свойства. L. monocytogenes подвижная бактерия с одним очень длинным полярным жгутиком. Имеет вид небольших палочек (0,5X1 >0—2,0 мкм), с закругленными краями, на некоторых средах — слабо изогнутые. Располагаются поодиночно, в виде римской пятерки, параллельно друг другу, парами и короткими цепочками. Спор и капсул не образуют. Листерии хорошо окрашиваются всеми анилиновыми красками. Грамположительны. После 2—5-дневного культивирования становятся лабильными к окраске по Граму, с каждым днем появляется все больше грамнегативных клеток. На средах, содержащих глюкозу, обусловливает более стабильную грампозитивность.

Культивирование. Листерии — факультативные аэробы, неприхотливы, размножаются при температуре 37 °C на обычных средах при рН 7,0—7,2, культуры вязкой консистенции, издают неприятный резкий, кислый запах. На МПБ вызывают небольшое помутнение среды с образованием слизистого осадка. На МПА образуются мелкие, росинчатые или беловатые с перламутровым оттенком плоские, гладкие, блестящие колонии. На печеночном агаре колонии слизистые. На кровяном агаре вокруг колоний образуется узкая зона гемолиза. Характерный рост наблюдают при посеве на плотную питательную среду (печеночный бульон + 8% желатина + 0,25% агара + 1% глюкозы), при посеве в столбик этой среды листерии по ходу укола растут в виде сероватого «шнура», от которого под прямым углом отходят в глубь питательной среды как бы сливающиеся облачка.

Биохимические свойства. Листерии ферментируют с образованием кислоты без газа глюкозу, левулёзу, рамнозу и салицин, медленнее — сахарозу, декстрин, растворимый крахмал и глицерин; некоторые культуры разлагают лактозу и мальтозу. Не ферментируют арабинозу, дульцит, инулин, сорбит. Расщепление салицина дифференцирует листерий от рожистой бактерии. Листерии не образуют индола и сероводорода, не разжижают желатину, не восстанавливают нитраты в нитриты, выделяют бета-гемолизин. Разлагают перекись водорода с выделением пузырьков кислорода. Дают положительную пробу на каталазу.

Устойчивость. В бульонных культурах листерии погибают при 100 °C через 10—15 мин, при 70 °C — через 30 мин; в агаровых культурах, смытых водой, при 60—70°С — через 5—10 мин, при 55 °C — через 1 ч; 2,5%-ный фенол (карболовая кислота) убивает листерии через 5 мин, 2,5%-ный едкий натр, 2,5%-ный формалин — через 20 мин, 70%-ный спирт, 2,5%-ный марганцовокислый калий и раствор сулемы 1:1000 — через 5 мин. В крови, консервированной 0,25%-ным фенолом, микробы сохраняются не менее года, а в высушенном состоянии — 7 лет.

Длительное время листерии живут во внешней среде, могут размножаться в мертвых тканях при низкой температуре. Жизнеспособность сохраняется в отрубях и овсе до 105 дней, в сене и мясо-костной муке до 134 дней, погибают в солонине при низкой температуре. В прудовой воде при 35—37°С остаются жизнеспособными до 346 дней, при температуре 15—20°С — до 299 дней, в холодильнике (2—8°С) и во льду — 790—928 дней. В навозе животноводческих помещений листерии выживают весной до 48 дней, летом — 25, а осенью— 130 дней, в трупах, зарытых в земле, — от 45 дней до четырех месяцев.

Патогенность. В естественных условиях листериозом заболевают овцы, козы, КРС, свиньи, лошади, кролики, куры, гуси, утки, индюки, различные виды грызунов, зайцы, суслики, песчанки, крысы, мыши, морские свинки, водяные крысы, лисы, еноты, соболи, белки, косули, дикие свиньи, козы, кошки, собаки, обезьяны; из диких птиц — глухари, тетерева, куропатки, фазаны, канарейки. Для экспериментального изучения инфекции наиболее подходящими являются кролики и мыши, которые погибают после внутривенного или интраперитонеального, а мыши и после подкожного заражения вирулентными листериями. Инъекция от 0,1 до 0,2 мл суточной культуры на сахарном бульоне приводит к гибели этих животных через 1—5 (иногда 10—14) дней. Для воспроизведения листериозной инфекции у морских свинок требуются большие дозы.

Листерии продуцируют нейротоксин, гемотоксин и ряд факторов распространения.

Патогенез. Патогенез листериоза еще недостаточно изучен. Допускают возможность заражения лабораторных животных алиментарным путем с последующей локализацией возбудителя в органах центральной нервной системы, что подтверждается выделением листерий только из мозга. Развитие энцефаломиелита у кроликов и мышей после введения им убитых культур объясняют наличием у листерий нейротропного токсина. Когда же листерии локализуются в лимфатических узлах и паренхиматозных органах, заболевание протекает в форме инфекционного мононуклеоза с клинической картиной ангины.

Антигенная структура. Листерии имеют два антигена: соматический и жгутиковый. Установлено четыре основных серотипа листерий (1, 2, 3, 4), при этом четвертый серотип делят на пять подтипов (а, Ь, с, d, е). Тип антигенов определяют с помощью реакции агглютинации.

Иммунитет изучен недостаточно. В процессе переболевания листериозом в крови животных накапливаются агглютинины и комплементсвязывающие вещества.

Диагностика. Бактериологический диагноз. В ранних стадиях септической листериозной инфекции материалом исследования служит кровь для выделения гемокультур, а после смерти животного — печень, селезенка, лимфоузлы, надпочечники, сердце, мозг, мозжечок, легкие. От абортированных плодов крупного рогатого скота и овец берут сычуг; от беременных животных — матку, яичники; молочную железу. До исследования материал рекомендуется сохранять при низкой температуре или в замороженном виде.

В редких случаях при подозрении на листериоз применяют бактериоскопический диагноз. Листерии обнаруживают в мазках, из материала, свободного в нормальном состоянии от микробов (меконий новорожденного), окрашенных по Граму, В мазках находят грамположительныее, короткие палочки, располагающиеся экстраи интрацеллюлярно вместе с лейкоцитами и с мононуклеарными элементами.

При наличии листерий в материале выращивание их на питательных средах не представляет особых трудностей. Они хорошо размножаются на агаре с глюкозой, на кровяном или сывороточном агаре, в мясном бульоне и мясо-пептонном бульоне Тароцци. Учет высевов на кровяном и триптозном агаре производится на 2, 4, 7 и 12-й день. Выращивание не всегда удается.

Некоторые авторы рекомендуют прибегать к биопробе на восприимчивых животных, а затем выделять возбудителя из органов этих животных.

Для диагностики листериоза применяют и конъюнктивальную пробу на морских свинках. У них возникает кератоконъюнктивит.

Иммунофлуоресцентную диагностику применяют для обнаружения возбудителя листериоза в патологическом материале, идентификации выделенных чистых культур и в смешанных культурах. Для исследования готовят мазки-отпечатки из патологического материала.

Серологический диагноз. Антигеном для РА является взвесь листерий в физиологическом растворе, консервированная 0,7%ным фенолом. При изготовлении антигена необходимо иметь в виду, что некоторые штаммы листерий склонны к самоагглютинации. Комплементсвязывающие вещества появляются лишь на короткий период времени. Положительной РА считается с разведением 1: 100 для свиней, овец и коз, сомнительной 1:50, положительной для крупного рогатого скота 1:200 и сомнительной 1:100.

Оценку результатов РА, РСК проводят с большой осторожностью.

Биопрепараты. Рекомендована для широкого производственного применения вакцина АУФ. Наиболее эффективны при листериозе антибиотики тетрациклинового ряда (биомицин, террамицин, тетрациклин).

свинья листериоз рожа антропозооносный

2. Возбудитель рожи свиней

Рожа свиней — септическое антропозоонозное инфекционное заболевание, характеризующееся геморрагическим гастроэнтеритом, нефритом, кровоизлияниями на серозных и слизистых оболочках, увеличением селезенки. При несвоевременной запоздалой диагностике и принятии мер многие животные погибают.

Возбудитель рожи свиней — Erysipelothrix rhusiopathiae, открыт Пастером в 1882 г. Его обнаруживают у свиней, мышей, ягнят, телят, индеек, уток, рыб, а также человека. Поэтому правильнее называть эту группу заболеваний не рожей свиней, а эрисипелоидом.

Морфология и тинкториальные свойства. Е. rhusiopathiae — полиморфная, короткая палочка размером 0,2—0,3×0,5—1,5 мкм, располагается одиночно и цепочками. Неподвижна. Спор и капсул не образует. Бактерии размножаются перешнуровыванием с образованием гетероморфных клеток. В старых культурах, а также в мазках из разращений эндокарда, из мозговых оболочек Е. rhusiopathiae образует длинные, извилистые нити или клубки. В мазках из почек, печени, селезенки бактерии располагаются одиночно, парно или небольшими гнездами. Обнаруживают также и фагоцитированные бактерии.

Микроб хорошо окрашивается обычными анилиновыми красками, грамположительный.

Культивирование. Е. rhusiopathiae — микроаэрофил. Неприхотлив к питательным средам. Культивируется на ПМБ, МПА, МПЖ, молоке, полужидком агаре (МПБ с 0,05—0,15% агара), кровяной сыворотке, средах с углеводами, элективной среде Сент-Иваньи (агаровая среда, содержащая 0,1% кристаллвиолета и 1% азида натрия). Рост на питательных средах с рН 7,2—7,6 наблюдается при оптимальной температуре 37 °C уже через сутки в аэробных и микроаэрофильных условиях. На бульоне появляется слабое помутнение, незначительный сероватый осадок, на агаре колонии мелкие, нежные, прозрачные в виде капелек росы; на желатине при посеве уколом через 6—10 дней от сероватобелого стержня отходят горизонтальные, нежные, бахромчатые отростки, напоминающие собой форму ламповой щетки. Желатина не разжижается.

Биохимические свойства. Микроб образует H₂S; ферментирует с образованием кислоты лактозу, глюкозу, левулёзу, галактозу, в слабой степени ксилозу, а иногда арабинозу, мальтозу и рамнозу.

Устойчивость. Несмотря на то, что Е. rhusiopathiae не образует спор, она весьма устойчива к внешним воздействиям. Жизнеспособность ее в жидких средах в запаянных ампулах сохраняется до 17—35 лет, в загнившем трупном материале — месяцами, в речной воде — до 73 дней, моче — до 203, фекалиях — до 94, в почвенной взвеси — до 108 дней. Высушивание выдерживает до трех недель.

Однако нагревание убивает рожистую бактерию уже при 50 °C через 15 мин, а при 70 °C — через 5 мин. Но при варке толстых кусков мяса бактерия гибнет лишь через 2,5 ч. Переживает в течение зимы. Жарение и тушение не стерилизуют мясо от рожистой бактерии. Бактерию находили в копченой свинине через 90, а в солонине — через 170 дней после изготовления. Обычные дезинфицирующие растворы эффективны. Чувствительна к УФ-лучам.

Патогенность. Рожистая бактерия широко распространена в животном мире. В естественных условиях патогенна для свиней, ягнят, индеек, кур, уток, голубей. Ее встречают у ворон, воробьев, дроф, фламинго и других птиц, у тюленей, дельфинов, а также у иксодовых клещей и млекопитающих зоопарка — белок, пятнистых оленей. Для речных и морских рыб рожистая бактерия является сапрофитом. К рожистой бактерии восприимчив и человек, у которого наблюдается эрисипелоид в форме местного (чаще на ладонях, кистях рук, суставах запястья) серозного воспаления кожи с расширением лимфатических ходов без некроза. К экспериментальному подкожному заражению восприимчивы особенно белые мыши и голуби, которые гибнут спустя 2—5 дней, менее чувствительны кролики, которые после внутривенного заражения гибнут через 3—6 дней.

Инкубационный период рожи свиней от 1 до 8 дней. У клинически здоровых свиней широко распространено бактерионосительство рожистой бактерии. Ее обнаруживали у 30—50% здоровых свиней в миндалинах и кишечнике в неблагополучных хозяйствах. В таких хозяйствах широко распространено бактерионосительство крыс и мышей до 20,3% (Тилга).

Различные формы рожи свиней: молниеносные, острые, подострые, хронические и бессимптомное бактерионосительство, определяются изменчивостью рожистой бактерии и различной реактивностью свиней.

Патогенез. Возбудитель рожи проникает в организм животного различными путями. При пероральном заражении бактерии первоначально оседают в миндалинах и солитарных фолликулах кишечника, а при заражении через кожные царапины — в лимфатических щелях пораженного участка, вокруг которого возникает местный воспалительный процесс. Через несколько дней микробы преодолевают защитные барьеры, проникают в кровь, размножаются в ней и распространяются по организму. Септический процесс вызывает лихорадочную реакцию, нарушение тканевого обмена, дистрофические и некротические изменения в паренхиматозных органах и сердечно-сосудистой системе, что ведет к образованию тромбов, отеков и к летальному исходу. При хорошо выраженной реактивности животного организм организует действенную защиту против возбудителя, который своими агрессинами тормозит в начале заболевания противодействие лейкоцитов и макрофагов РЭС, и, хотя они фагоцитируют микробов, лизиса последних не наступает (незавершенный фагоцитоз). С появлением агглютининов, преципитинов и комплементсвязывающих веществ, антиагрессинов сочетанное действие фагоцитоза с антителами приводит к ликвидации возбудителя.

Антигенная структура. Рожистая бактерия содержит два антигена: термолабильный групповой и термостабильный видовой. На основании серологических исследований (реакции преципитации, агглютинации, гемагглютинации) установлено два серовара. Серовар, А для свиней более вирулентен, а серовар В менее вирулентен. Серовар, А выделяется в культурах от больных рожей свиней наиболее часто (до 95%). Общим видовым является антиген N.

Иммунитет. Свиньи, переболевшие рожей, приобретают стойкий иммунитет. Он определяется повышением активности макрои микрофагов, усилением опсонизирующих свойств крови, образованием специфических агглютининов, преципитинов, антиагрессинов, комплементсвязывающих веществ, развитием аллергического состояния.

Диагностика. Бактериологический диагноз включает бактериоскопию, выделение культур и биопробу. В лабораторию направляют кусочки селезенки, печени, почку, трубчатую кость, кусочки кожи (при крапивнице), сердце (при эндокардите), невскрытые суставы (при артритах). Патологический материал консервируют 30—40%-ным глицерином или насыщенным раствором NaCl. Трубчатую кость, очищенную от мышц и сухожилий, обертывают марлей, смоченной 2%-ным раствором карболовой кислоты.

Из свежего патматериала готовят мазки, окрашивают их по Граму и микроскопируют. В мазках обнаруживают грамположительные бактерии, расположенные одиночно и группами, внутри и вне лейкоцитов, а в мазках-отпечатках с поверхности сердечных клапанов при эндокардите — сплетения микробных нитей. Загнивший материал непригоден для бактериоскопии.

Культуры рожистой бактерии выделяют из селезенки, почки, а если материал несвежий, то из мозга трубчатых костей, лимфоузлов, а также из пораженных участков кожи.

Материалом для заражения лабораторных животных (биопроба), которые гибнут через 3—5 дней, служит эмульсия из паренхиматозных органов на стерильном физрастворе. Из загнившего трупа берут кусочки кожи или мозг из трубчатых костей. Заражают в основном голубей, так как в загнившем материале может быть В. murisepticus, патогенный для белых мышей.

Серологическая диагностика. Для выявления хронических и латентных форм рожи используют реакцию агглютинации в двух модификациях: пластинчатый (ускоренный) с сывороткой или цельной кровью исследуемого животного и, пробирочный способ с исследуемой сывороткой.-¹

Для постановки РА необходимо два компонента: антиген и исследуемая сыворотка или кровь. Срок годности антигена — шесть месяцев, при хранении в темном сухом помещении при температуре от 8° до 15 °C.

Пластинчатую реакцию ставят на обезжиренном и досуха протертом стекле. Из полученной пробы берут каплю крови (величиной 0,004—0,006 мл) или сыворотки (0,002—0,003 мл), наносят ее на предметное стекло в каплю антигена и перемешивают. Затем стекло с нанесенными каплями (антиген + кровь или сыворотка) держат над спиртовкой, слегка подогревая, кругообразно покачивают. Реакцию учитывают над темным фоном. Положительной реакцией считается образование в течение 1—2 мин от периферии к центру капли макроскопически хорошо заметных мелких или крупных серовато-белого цвета хлопьев или крупинок. При неполном выпадении реакцию считают сомнительной.

В пробирке реакцию ставят с разведением сыворотки 1:50 и 1:100.

Следует учитывать, что агглютинины у свиней появляются на 2—5-й день болезни и сохраняются в крови выздоровевших животных 2—3 недели. После вакцинации свиней РА с диагностической целью можно ставить не ранее чем через 2 месяца, а после прививки противорожистой сыворотки — через 1 месяц.

Для обнаружения рожистых бактерий в патологическом материале, а также для идентификации чистых выделенных культур можно применять метод флуоресцирующих антител.

Биопрепараты. Профилактика рожи свиней осуществляется путем создания активного (вакцинного) или пассивного (сывороточного) иммунитета. В настоящее время используют несколько вакцин. Депонированная вакцина представляет собой живую культуру матрикса II Конева, адсорбированную на фосфатно-буферном растворе гидрата окиси алюминия. Вакцина имеет беловато-мутный цвет; при длительном хранении на дне флакона образуется беловатый осадок с прозрачной надосадочной жидкостью. При встряхивании флакона осадок легко разбивается с образованием равномерной взвеси. Вакцину можно применять при установлении: 1) типичного роста на питательных средах при высевах из флаконов и чистой культуры при бактериоскопии мазков; 2) авирулентности для голубей, которые остаются живыми в течение 10 суток после внутримышечного заражения в дозе 0,5 мл и при гибели мышей через 5—12 суток после подкожного заражения их в дозе ОД мл.

Живая вакцина из слабовирулентного штамма VR2. Вакцинный штамм VR2 был выделен из трупа свиньи в 1931 г. румынским исследователем В. Виноградником. В процессе многократных пересевов на искусственных питательных средах штамм постепенно ослабил свои первоначальные вирулентные свойства, стал авирулентным для свиней и кроликов и слабовирулентным для белых мышей и голубей.

Вакцина VR2 культивируется на полужидкой питательной среде бульона Мартена, бульона Хоттингера или МПБ. Она представляет собой слегка опалесцирующую вязкую жидкость желтовато-соломенного цвета с незначительным осадком на дне флакона, который при встряхивании легко разбивается, образуя равномерную взвесь.

Вакцина признается пригодной при установлении: 1) чистого типичного роста культуры рожистой бактерии с соответствующей морфологией клеток, грампозитивностью в мазках; 2) безвредности для 20 белых мышей в течение 10—12 дней наблюдения после заражения вакциной в дозе 0,2 мл; 3) иммунитета у них и выживаемости против заражения при гибели через 3—5 дней контрольных трех белых мышей, зараженных 10 минимальными смертельными дозами.

Вакцину считают также активной при выживаемости не менее 75% вакцинированных белых мышей. Срок годности вакцины 6 месяцев со дня изготовления при хранении в сухом темном помещении при температуре 2—10°С. Вакцину применяют с профилактической целью, прививая все поголовье свиней с 2,5-месячного возраста. С вынужденной целью в неблагополучных хозяйствах вакцинируют с 2-месячного возраста. Свиноматок прививают не позднее 15—20 дней до случки. Иммунитет при вакцинации VR2 наступает через 8—10 дней и сохраняется 4—6 месяцев.

Сухая вакцина ССВР является слабовирулентной культурой вакцинного штамма рожистой бактерии VR2, концентрированная буферной взвесью гидрата окиси алюминия и высушенная с защитной сахарозожелатиноагаровой средой. Она представляет собой аморфную или мелкозернистую массу беловатого или светло-желтого цвета. При разведении вакцины растворителем образуется опалесцирующая жидкость желтого цвета, содержащая равномерную взвесь рожистых бактерий.

Вакцина признается пригодной к практическому применению при установлении:

1) морфологической чистоты в мазках из типичной культуры, высеянной из вакцины, с грампозитивной окраской клеток;

2) безвредности, выживаемости 20 белых мышей, привитых разведенной 1:10в бульоне или физрастворе вакциной в дозе 0,2 мл, при наблюдении в течение 10—12 дней;

3) иммуногенности и выживаемости 20 белых мышей, вакцинированных после заражения их 10 минимальными смертельными дозами вирулентного штамма рожи свиней и при гибели трех контрольных белых мышей в течение 3—5 суток.

Вакцина признается активной и при выживаемости 75% вакцинированных белых мышей. Срок годности ее 12 месяцев при условиях хранения в сухом месте (температура не выше 10°С). Иммунитет наступает на 8— 10-й день и сохраняется до 6—8 месяцев.

Применение вакцины осуществляется соответствии с действующей инструкцией по борьбе с рожей свиней и наставлений по применению противорожистых вакцин.

Концентрированная гидроокисьалюминиевая формолвакцина представляет собой адсорбированную на гидрате окиси алюминия и инактивированную формалином культуру возбудителя рожи свиней. Это вязкая желтоватого цвета жидкость с осадком на дне, который при встряхивании разбивается в равномерную муть. Вакцина пригодна к применению при установлении:

1) стерильности высевов на питательных средах;

2) безвредности при проверке на белых мышах;

3) иммуногенности при испытании на голубях.

Годность вакцины один год при условии хранения в темном сухом помещении (температура 4—10 °С). Используют ее для предохранительных и вынужденных прививок свиней против заболевания рожей. Вакцинируют только здоровых животных. При наличии в хозяйствах других заразных заболеваний (чума, ящур, болезнь Ауески, инфлюэнца и др.) вакцину прививать нельзя; в этом случае применяют противорожистую сыворотку.

Иммунную противорожистую сыворотку получают путем гипериммунизации свиней, лошадей, волов или овец культурой возбудителя рожи. Ее проверяют на стерильность, безвредность и активность.

Стерильность проверяется высевами из не менее пяти флаконов на мясо-пептонный бульон, агар и мясо-пептонный печеночный бульон под вазелиновым маслом. Сыворотку признают годной, если посевы, выдержанные при температуре 37 °C в течение 10 дней, остаются стерильными.

Безвредность контролируют введением испытуемой сыворотки подкожно в дозе 0,5 мл двум белым мышам (масса 15—18 г) и одной морской свинке (масса не менее 400 г) в дозе 10 мл. В течение 10 дней привитые сывороткой животные должны остаться живыми.

Активность противорожистой сыворотки проверяют титрованием на здоровых белых мышах (масса 15—18 г) в дозах 0,01; 0,02; 0,03 мл (по три белых мыши на дозу). Сыворотку разводят физраствором до указанных концентраций и вводят белым мышам интраперитонеально. Через 1 —1,5 ч всем привитым мышам и трем непривитым контрольным инъецируют подкожно вирулентную суточную культуру рожи свиней. Культуру титруют заранее и вводят в дозе 0,001—0,002 мл. Эта доза вызывает гибель контрольных мышей на 3—4-е сутки. Сыворотка считается активной при условии выживания всех девяти мышей, привитых сывороткой в указанных дозах после заражения их вирулентной культурой рожи свиней, или если погибают белые мыши, привитые сывороткой в дозе 0,01 мл.

Противорожистая сыворотка контролируется также и на девяти голубях. Шести голубям прививают сыворотку в грудную мышцу, а спустя полчаса им вводят вытитрованную вирулентную культуру возбудителя. Три контрольных голубя только заражаются культурой рожистой бактерии. Сыворотку вводят в дозах 0,1; 0,3; 0,5 мл по два голубя на каждую дозу. Сыворотка считается активной, если остаются живыми:

1) все голуби привитые ею;

2) голуби, привитые в дозе 0,3 и 0,5 мл;

3) три голубя из числа привитых сывороткой в дозе 0,3 и 0,5 мл при условии гибели всех контрольных голубей.

Сыворотка, консервированная фенолом или хинозолом, пригодна 4 года. Противорожистую сыворотку применяют с профилактической и лечебной целью. Иммунитет у животных сохраняется от 14 дней до месяца.

Антибиотики, особенно пенициллин, являются эффективным средством лечения рожи свиней. Вначале его лучше применять одновременно с противорожистой сывороткой, а затем вводят 3—4 раза через каждые 8−12 ч в дозе 2−3 тыс ЕД/кг. Используют также экмоновоциллин в дозах 5−10 тыс ЕД/кг 2−3 раза с интервалом 24 ч.

Лечебное действие других антибиотиков изучено недостаточно.

1. Ветеринарная микробиология / П. А. Емельяненко, Г. В. Дунаев, Д. Г. Кудлай и др.; - 304 с., ил. — (Учебники и учеб. пособия для высш. с.-х. учеб. завед.)

.u