Валидационная оценка методики анализа кислоты аскорбиновой в растворе йодатометрическим методом по показателю «Прецизионность»

Приготовили модельный раствор кислоты аскорбиновой № 2.

Определение № 1.

Провели 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 0,5 мл ЛП.

Определение № 2.

Провели 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 1,0 мл ЛП.

Определение № 3.

Провели 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 1,5 мл ЛП.

Расчет содержания кислоты аскорбиновой (г) провели по формуле приведенной при определении правильности.

Результаты занесли в таблицу № 5 и рассчитали стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).

Таблица 5 Результаты определения прецизионности кислоты аскорбиновой методом йодатометрии.

Навеска для анализа, г.	Объем титранта, мл.	Найдено, г/мл.	Метрологические характеристики.
0,025.	3,1.	0,0509.	0,0001.	0,1.	=0.051. SD=0.01. RSD=1.68.
0,025.	3,2.	0,051.
0,025.	3,0.	0,049.	0,002.	0,4.
0,05.	6,0.	0,0486.	0,0024.	0,57.
0,05.	6,3.	0,051.
0,05.	6,0.	0,048.	0,003.	0,9.
0,075.	9,1.	0,049.	0,002.	0,4.
0,075.	9.3.	0,0504.	0,0006.	0,3.
0,075.	9.7.	0,0511.	0,0001.	0,1.

В результате проведенных исследований установлено, что RSD соответствует по показателю прецизионность.

МЕТОДИКА КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ К 1,0 мл препарата прибавляют 5 мл воды и титруют 0,05 М раствором йода до слабо-желтого окрашивания, не исчезающего в течение 30 сек.

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 0,8 824 г кислоты аскорбиновой.

Построение градуировочного графика Точную навеску кислоты аскорбиновой (5 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде, доводят водой до метки и перемешивают (раствор А).

На титрование отмеривают последовательно 0,50 мл; 1,0 мл; 1,5 мл; 2,0 мл; 2,5 мл раствора, А (0,075 г; 0,010 г; 0,125 г; 0,150 г; 0,175 г.) и проводят определение по методике описанной для количественного определения кислоты аскорбиновой.

Данные занесли в таблицу 6.

Таблица 6 Результаты титриметрического определения кислоты аскорбиновой йодиметрическим методом.

Построили градуировочный график зависимости концентраций от объема титранта, рассчитали уравнение градуировочного графика и коэффициент корреляции.

Градуировочный график зависимости объема титранта от концентрации кислоты аскорбиновой.

При математической обработке рассчитали величину коэффициента корреляции r. Коэффициент корреляции составил: r= 0,9966.

Полученные результаты показали, что существует линейная зависимость между навеской кислоты аскорбиновой и объемом титранта — 0,05 М раствором йода.

Приготовили три модельных раствора кислоты аскорбиновой (табл. 7).

Таблица 7 Приготовление модельных растворов кислоты аскорбиновой.

Раствор А₁ (модельная смесь 1) Точные навески кислоты аскорбиновой (4,0.

г), трилона Б (0,02г), натрия гидрокарбоната (1,908г) и натрия сульфита (0,16 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде при нагревании на водяной бане и доводят водой до метки.

Раствор А₂ (модельная смесь 2) Точные навески кислоты аскорбиновой (5,0 г), трилона Б (0,025 г), натрия гидрокарбоната (2,385 г) и натрия сульфита (0,200 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде при нагревании на водяной бане и доводят водой до метки.

Раствор А₃ (модельная смесь 3) Точные навески кислоты аскорбиновой (6,0 г), трилона Б (0,03 г), натрия гидрокарбоната (2,862г) и натрия сульфита (0,24 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде при нагревании на водяной бане и доводят водой до метки.

Проводили 3 параллельных титрования на трех уровнях концентраций (9 определений).

К 1,0 мл каждой из модельных смесей (А_1, А_2, А₃) прибавляют 5 мл воды и титруют 0,05 М раствором йода до слабо-желтого окрашивания, не исчезающего в течение 30 сек.

• 1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 0,8 824 г кислоты аскорбиновой.
• 1 мл 0,0167 М раствора калия йодата соответствует 0,8 824 г кислоты аскорбиновой.

Расчет содержания кислоты аскорбиновой (г/мл) проводят по формуле:

где: Vобъем титранта, мл;

Кпоправочный коэффициент;

Ттитр йода по определяемому веществу, г/мл;

а — навеска модельной смеси, взятая на анализ, мл.

Р- 1 мл Результаты занесли в таблицу № 8 и рассчитали открываемость, стандартное отклонение, относительное стандартное отклонение и коэффициент Стьюдента.

Таблица 8 Результаты определения правильности методом йодиметрии.

№ п/п.	Уров.	Взято модельной смеси, (г или мл).	Взято лекарственного вещества, г.	Объем титранта мл.	Найдено лекарств. вещества, г.	Открыв.	Метрологические характеристики.
		1,0 мл.	0,04.	4,86.	0,0395.	98,75.	=100,24. SD=1,94. RSD=1,20. t=0.6.
		1,0 мл.	0,04.	4,50.	0,0398.	99,7.
		1,0 мл.	0,04.	4,53.	0,0408.	100,25.

Т.о. должно находиться в пределах от 98 до 102, следовательно, данная методика соответствует валидационной характеристике «правильность».

Поскольку t =0,6 << (95%, f) =2,31, что позволяет считать результаты выборки результатов свободными от систематической ошибки.

Валидационная оценка методики анализа кислоты аскорбиновой в растворе йодиметрическим методом по показателю «Прецизионность».

Приготовили модельный раствор кислоты аскорбиновой № 2.

Определение № 1. Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 0,5 мл ЛП. Определение № 2. Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 1,0 мл ЛП. Определение № 3. Провели 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 1,5 мл ЛП.

Рассчитали содержание кислоты аскорбиновой (г/мл), стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).

Таблица 8 Результаты определения прецизионности кислоты аскорбиновой методом йодиметрии.

Навеска для анализа, г.	Объем титранта, мл.	Найдено, г/мл.	Метрологические характеристики.
0,025.	3,1.	0,0499.	0,0001.	0,1.	=0.0496. SD=0.0007. RSD=1,41.
0,025.	3,2.	0,0501.
0,025.	3,0.	0,0493.	0,002.	0,4.
0,05.	6,0.	0,0486.	0,0024.	0,57.

В результате проведенных исследований установлено, что RSD соответствует по показателю прецизионность.