Новые подходы к лабораторной диагностике болезней печени у высокопродуктивного молочного скота

Новые подходы к лабораторной диагностике болезней печени у высокопродуктивного молочного скота

Ранняя и точная диагностика заболеваний печени является важным критерием оценки диагностики функционального состояния этого органа у животных. Однако, исследование животных с предполагаемым гепато-билиарным заболеванием является достаточно сложным, поскольку ни один из существующих в настоящее время диагностических тестов не обладает должной чувствительностью и специфичностью. Задача осложняется тем, что печень играет многоплановую роль в обменных процессах, промежуточном метаболизме, биосинтезе и распаде огромного количества веществ, в результате чего симптомы заболевания печени не позволяют поставить точный диагноз, обусловленный гепатопатией [4, 6].

Значительные успехи в этом направлении достигнуты в медицине, где для исследования функционального состояния печени предложен и апробирован большой арсенал диагностических методов, разработана синдроматика болезней. В ветеринарии же такой принцип пока не нашел применения и, по существу, он не разработан.

В крови животных постоянно циркулирует целый комплекс химических веществ: ферментов, белков, углеводов, жиров, пигментов, низкомолекулярных азотистых оснований, гормонов, электролитов. Содержание перечисленных веществ характеризуется определенным постоянством и его изменение может иметь информационное значение при постановке диагноза заболевания и мониторинге эффективности проводимого лечения. В сочетании с другими лабораторными исследованиями биохимические показатели крови в последнее время, являются неотъемлемой частью клинической практики современных ветеринарных врачей [5].

Однако, не всегда целесообразно проводить животным полный анализ биохимических параметров. Логичнее выбирать наиболее информативные показатели, необходимые для диагностики конкретной болезни при том или ином синдроме, которые группируются в так называемые профили, или программы биохимического исследования.

Печень — орган с большим функциональным резервом. Необходимо поражение большой части паренхимы печени, чтобы появились нарушения ее функции. Кроме того, печеночная паренхима отличается большой регенерационной способностью, при которой заболевшая ткань быстро образует новые здоровые клетки, которые начинают функционировать и маскируют функциональную недостаточность паренхимы печени. Возникающие под воздействием различных факторов патологические процессы в печени становятся заметными и проявляются клинически только в прогрессирующих стадиях болезни. Поэтому, большинство болезней печени протекают длительное время скрыто, бессимптомно, что затрудняет их своевременную диагностику и разработку эффективных средств коррекции. Не привлекая к себе внимания, они прогрессируют, приводя к нарушению функции различных органов и систем, что обусловливает потерю продуктивных качеств, высокую смертность молодняка, выбраковку животных [1, 2, 3].

Целью наших исследований стала разработка параметров прижизненной диагностики болезней печени крупного рогатого скота на основе изменений биохимического профиля крови животных.

Исследования проводились на стельных сухостойных коровах и нетелях 7−9-го месяцев стельности, а также на лактирующих коровах в разные фазы лактационного периода в осеннее-зимне-ве-сенний периоды, то есть в периоды наибольшего напряжения гомеос-татических систем организма.

Комплексом клинических исследований были выявлены животные с признаками нарушений обмена и патологии печени, у которых наблюдалась снижение аппетита, редкая и вялая жвачка, гипотония преджелудков, увеличение перкуторных границ печени, некоторая болезненность при пальпации, ожирение (в некоторых случаях исхудание), признаки деминерализации костной ткани, что сопровождалось размягчением последних хвостовых позвонков и поперечных отростков поясничных позвонков. У ряда животных отмечалась тусклость и ломкость шерстного покрова.

После этого, у животных осуществлялся забор крови для биохимических исследований с учетом гепатологического профиля, включающего в себя определение 15 биохимических параметров: общего белка, белковых фракций, мочевины, глюкозы, ферментовАлАт, AсАт, ГГТП, ЩФ, холлестерина, триглицеридов, билирубина общего, тимоловой пробы.

Полученные данные биохимического освидетельствования животных выявили существенные изменения ряда показателей. Так, у 70% коров и практически у всех нетелей в показателях белкового обмена отмечались нарушения, проявляющиеся, как снижением, так и увеличением уровня общего белка. На этом фоне, в белковом спектре сыворотки крови регистрировались определенные сдвиги, которые, в зависимости от концентрации общего белка, циркулирующего в крови, можно было разделить на два основных типа протеинограмм. В первом случае, при гипопротеинемии было снижено количество альбуминов. Уровень у-глобулинов при этом оставался в пределах физиологических границ. Относительно би в-глобулинов у некоторых животных отмечались определенные колебания в сторону увеличения этих фракций.

Обнаруженные отклонения в белковом спектре сыворотки крови являются характерными для функциональной слабости печени. Повреждение паренхиматозных структур, как правило, приводит к снижению белково-синтетической функции печени, что и сопровождается, прежде всего, падением уровня альбуминов и, реже — бета-глобулинов.

Снижение функциональной активности гепатоцитов печени привело к ослаблению в них и других синтезобразующих процессов. Анализ показателей крови таких животных выявил уменьшение уровня глюкозы, триглицеридов (энергообеспечивающая функция) и мочевины (мочевинообразовательная функция). При этом, активность исследуемых ферментов — трансаминаз, гаммаглутамилтранспепти-дазы и щелочной фосфатазы находились в пределах нижних значений видовой нормы, что может служить косвенным подтверждением наличия деструктивных изменений со стороны гепатоцитов, в результате которых и произошло ослабление ферментообразующей функции печени.

Во втором случае, у исследуемых животных в белковом обмене регистрировалось гипергамма-глобулемия (от умеренной до высокой) на фоне повышенных значений в концентрации общего белка, что сопровождалось гиперферментемией за счет повышения активности сывороточных трансаминаз, относящихся к группе индикаторных энзимов и, поэтому, имеющих важное диагностическое значение при гепатопатиях.

У животных с подобными сдвигами гомеостаза уровень аспартатаминот-рарсферазы был повышен, в среднем, на 28−63% от верхних пределов нормы, аланинаминотрансферазы — на 33−87%. Что касается у-глутамил транспептидазы, то ее повышение было умеренным и отмечалось не во всех случаях.

Раздражение ретикулоэндотелия и, в частности, системы мононуклеарных фагоцитов (СМФ), а также сопутствующий мезенхи-мальновоспалительный синдром, приводящий к повышенному синтезу гамма-глобулиновой фракции (относящейся к грубодисперсным фракциям), обусловливает снижение коллоидной стойкости белков. В этом случае, применение проб коллоидоустойчивости позволяет выявлять изменения сдвигов белкового спектра сыворотки крови. Поэтому, наиболее информативным показателем у животных с данным биохимическим профилем была установленная в 100% случаев положительная тимоловая проба — тест, позволивший нам диагностировать «синдром воспаления печеночной паренхимы» .

Остальные биохимические показатели находились либо в пределах нормальных значений (глюкоза, мочевина, холестерин — не всегда), либо имели умеренные отклонения в сторону понижения (триглицериды и щелочная фосфатаза).

В 10% случаев при исследовании ряда показателей у обследованных животных был установлен холестатический синдром. При этом основные биохимические сдвиги наблюдались по следующим показателям:

• · белковый обмен — умеренная гипергаммаглобулинемия (количество у-глобулинов превышало верхние пределы нормы на 13,7−17,8%);
• · липидный обмен — выраженная гиперхолистеримия (уровень холестерина повышен в 1,52−1,84 раза);
• · пигментный обмен — гипербилирубинемия, характеризующаяся высоким уровнем билирубина, в 2−2,8 раза превышающим верхненормальные значения;
• · ферментный обмен — значительное повышение у-глутамилтранс-пептидазы и щелочной фосфатазы при спокойном уровне трансами-наз — АсАт и МАт. Подобная картина в биохимических показателях указывает на то, что в процессе внутрипеченочного холестаза (нарушения секреции и оттока желчи из гепатоцитов) происходит сдавливание и разрушение эпителиальных клеток желчных протоков (следует учитывать, что ГГТП содержится в эпителиальных клетках, выстилающих желчные пути и печеночные канальцы, а ЩФ — в паренхиме и стенках желчных протоков печени, и именно поэтому, являются наиболее чувствительными лабораторными показателями при заболеваниях гепатобилиарной системы, так называемыми, маркерами холестаза).

В некоторых случаях может происходить умеренное возрастание сывороточных аминотртансфераз, обусловленное повышением проницаемости плазматических мембран гепатоцитов, однако, вне стадии обострения, подобная гиперферментемия не носит четко выраженной манифестации.

И, наконец, в некоторых пробах сыворотки крови от обследованных животных нами было установлено повышение активности ряда индикаторных ферментов печени (АсАт, AлАт) и билирубина (в 1,58−2,75 раза) без воспалительного процесса со стороны у-глобулиновой фракции белкового спектра и тимоловой пробы. Подобная картина возникает вследствие нарушения структуры клеток и целостности мембран гепатоцитов, обусловленных экзогенным или эндогенным токсическим поражением печени (микотоксины, некачественные и испорченные корма, нитрататы, нитриты, мочевина, а также недоокисленные продукты межуточного обмена — протеиногенные амины, производные гуанидина, кетоновые тела, ацетон, ацетоуксусная, S-оксимасляная кислоты).

Проведенные нами исследования показали, что гепатопа-тологические состояния, возникающие у высокопродуктивного молочного скота, условно можно разделить на четыре биохимических профиля, характеризующихся следующей синдроматикой:

• 1) синдром печеночно-клеточной недостаточности — нарушение синтетической функции печени с понижением уровня ряда показателей — альбуминов, глюкозы, мочевины, холестерина, тригли-церидов;
• 2) воспалительный синдром — повышение у-глобулинов, тимоловой пробы, уровней АсАТ и АлАТ;
• 3) синдром холестаза (экскреторно-билиарный) — повышение ЩФ, у — ГТП, билирубина, холестерина;
• 4) синдром нарушения целостности гепатоцитов (цитолиз, нарушение проницаемости мембран гепатоцитов) — повышение показателей АлАТ, АсАТ, билирубина.

Заключение

Таким образом, отслеживая динамику перечисленных биохимических профилей, можно более полно судить о характере процессов, протекающих в печени при острых или хронических расстройствах ее функции без учета возможной клинической картины патологического состояния. Это, в свою очередь, позволит проводить своевременную диагностику функциональных расстройств печени у крупного рогатого скота с целью ранней диагностики ге-па-топатий, контроля эффективности терапевтических мероприятий и прогнозирования исхода большинства заболеваний гепатобилиарной системы.

• 1. Антипов, В. А. Повышение сохранности и продуктивного здоровья импортного молочного скота /В.А. Антипов, М. П. Семененко, Н. Ю. Басова, А. Н. Турченко и др.// Методические рекомендации.-Краснодар.- 2009. 62 с.
• 2. Байматов, В. Н. Этиология и патогенез заболеваний печени /В.Н. Байматов // Уральские Нивы.-1986.-N°9.-С. 50.
• 3. Кондрахин И. П. Болезни печени и желчных путей // Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных.- М.: Агропромиздат, 1991 С. 252−274.
• 4. Кузьминова, Е. В. Диагностическое значение биохимических показателей крови при гепатопатологиях /Е.В. Кузьминова, М. П. Семененко, Е. А. Старикова, Т. В. Михалева // Ветеринария Кубани.- N° 5/2013.-С. 11−13.
• 5. Кузьминова, Е. В. Современные подходы к лечению гепатопатий крупного рогатого скота /Е.В. Кузьминова, М. П. Семененко, Т.А. Шах-Меликьян // Вестник ветеринарии, 2011, Т.59, N° 4. С 135−137.
• 6. Kursa J., Klein Z., Kucerova J. Hepatopatie u dojnic — aktualni problem velko-chovu. Veterinarstvi, 1988; Т. 38. N 4. — s. 153−155

печень скот молочный гепатопатия.

Резюме

Печень — главнейший орган в поддержании гомеостаза, она, сохраняя динамическое постоянство внутренней среды организма животного принимает и самое активное участие в ликвидации последствий болезни. Физиологическая роль печени важна и многогранна. При этом, любые изменения в ее функциональной активности, находят отражение в системе гомеостаза животного. Поэтому, ранняя и точная диагностика заболеваний печени является важным критерием оценки диагностики функционального состояния этого органа у животных, а грамотная интерпретация результатов лабораторного анализа крови является одним из важнейших условий формирования целесообразной стратегии диагностических и лечебно-профилактических мероприятий.

Учитывая связь печени и системы крови, большой интерес для ветеринарной науки представляет уточнение особенностей гематологических нарушений при функциональных расстройствах печени продуктивного скота. При этом, наиболее показательно изменение не всех биохимических показателей, а наиболее информативных, таких как общий белок, белковые фракции, мочевина, глюкоза, ферменты — АлАт, AсАт, ГГТП, ЩФ, холлестерин, триглицериды, билирубин, тимоловая проба.

В представленном материале показаны основные изменения в биохимических показателях крови высокопродуктивного молочного скота с учетом особенностей течения различного рода гепатопатий, разделенных на четыре биохимических профиля, характеризующихся следующей синдромати-кой: синдром печеночно-клеточной недостаточности, воспалительный синдром, синдром холестаза (экскреторно-билиарный), синдром нарушения целостности гепатоцитов.

Отслеживая динамику изменения ряда биохимических показателей с учетом гепатологического профиля, можно более полно судить о характере процессов, протекающих в печени при острых или хронических расстройствах ее функции.

Ключевые слова: печень, болезни печени, гепатопатии, крупный рогатый скот, молочная продуктивность, лабораторная диагностика, гепатоциты, сыворотка крови, биохимические показатели крови, ферменты.