Влияние церебролизина на окислительный метаболизм

В первых экспериментальных работах было установлено, что i.p.

введение

ЦР в течение нескольких дней пятикратно увеличивало устойчивость крыс к аноксии. Эффект коррелировал с пропорцией аминокислот, олигопептидов и нуклеотидов, содержавшихся в препарате ЦР (Trojanova et al. 1976). Было также обнаружено, что плоды беременных крыс оказывались более резистентными к аноксии, если матери предварительно получали инъекции ЦР. Препарат увеличивал устойчивость к высотной гипоксии (пребывание в горах на высоте более 3300 метров) у морских свинок, кроликов, саламандр и значительно быстрее восстанавливал функциональное состояние кроликов после асфиксии в сравнении с терапией витаминами, прокаином и др.

S.Hoyer исследовал в 1972;74 гг. влияние ЦР на кровоток и окислительный обмен в мозге. Препарат оказывал положительное действие на крыс, отравленных флорицином (тест по восстановлению ЭЭГ) и увеличивал транспорт глюкозы через гематоэнцефалический барьер.

В последующих работах при введении ЦР крысам в течение 3−14 дней было обнаружено снижение уровня молочной кислоты и, наоборот, градуальное увеличение респираторной активности in vitro в гомогенатах мозга. Эксперименты, проделанные на животных различных возрастных групп, выявили максимальное действие ЦР на гомогенатах мозга постнатальных (до 2- х недель) крыс и возрастных животных 12−18- месяцев (Windisch, Piswanger, 1985а; 1985b).

Антиоксидантный системный эффект ЦР был продемонстрирован на крысах с повреждением передней бахромки гиппокампа. ЦР снижал активность каталазы и супероксиддисмутазы после 7- дневного введения препарата оперированным животным (Gonzales et al. 1998). При исследовании группы глютатион-зависимых ферментов (глютатион-S-трансфераза, глютатион-редуктаза и глютатион-пероксидаза) в мозге крыс с септо-гиппокампальным повреждением выявилось существенное снижение активности этих энзимов в гиппокампе; при этом ЦР тормозил активность глютатион-S-трансферазы у здоровых животных, но не влиял на активность ферментов в пораженном мозге (Cruz et al. 1998).

При исследовании образования гидроксилрадикалов в постишемический и реперфузионный периоды окклюзионной ишемии мозга обнаружено нивелирующее действие ЦР. Препарат играл важную роль в предупреждении апоптоза (Sugita et al. 1993).

Еще один механизм нейропротективной активности ЦР связан с изучением специфического гена транспортера глюкозы (BBB-GLUT-1) через гематоэнцефалический барьер (Blood-Brain Barrier). Активность этого транспортера меняется в различных патофизиологических состояниях, включая болезнь Альцгеймера. Поскольку ишемическая патология мозга напрямую зависит от уровня снабжения клеток глюкозой, фактору GLUT-1 придается большое значение. Экспрессия гена BBB-GLUT-1 включается в различных патологических ситуациях и может модулироваться нейротрофическими факторами. Изначальные исследования в этом направлении показали, что величина транскрипции GLUT-1 в культуре эндотелия капилляров мозга возрастает под действием Некротического фактора опухоли (TNF-alpha) и гомогената бычьего мозга. В культуре эндотелия капилляров мозга ЦР увеличивал содержание GLUT-1 в первые 1−2 часа после аппликации препарата. ЦР также препятствовал снижению уровня GLUT-1 после действия ингибитора актиномицина D (Boado, 1995). Дальнейшие исследования показали, что эффект ЦР сопряжен с экспрессией гена GLUT-1 в культуре эндотелиальных клеток за счет механизма, не зависимого от протеинкиназы С (Boado, 1996;1998).

Активность транспортера глюкозы через гематоэнцефалический барьер исследовалась при перфузии сонной артерии с использованием [3H]-диазепама в качестве маркера церебрального кровотока. Однократное и хроническое введение ЦР значительно увеличивало зону проницаемости головного мозга для меченой глюкозы по сравнению с контролем. В лобной доле концентрация [3H]-диазепама возрастала в 1,6−1,9 раза. Увеличение активности транспортера глюкозы через гематоэнцефалический барьер коррелировало с повышенным содержанием белка GLUT-1. Следует полагать, что комплекс нейротрофических факторов, входящих в состав церебролизина, позитивно влияет на транспорт глюкозы к тканям мозга путем увеличения экспрессии гена BBBGLUT-1 (Boado, Wu, Windisch, 1999).

Влияние ЦР и пептидной фракции ЕО21 на GLUT-1 было исследовано на крысах различных возрастных групп. Установлено, что плотность иммунореактивных меток GLUT-1 была более высокой у животных 2-месячной группы; у «возрастных» 2-х летних крыс ЕО21 не оказывал такого действия. Повышение уровня GLUT-1 и улучшенное обеспечение мозга глюкозой, наблюдаемые под влиянием ЦР, служат объяснением более высоких показателей памяти и навыков поведения, установленные в экспериментах (Gschanes et al. 2000).