Методы выделения и идентификации полисахаридов

Методы выделения полисахаридов

Полисахариды извлекают водой при комнатной или повышенной температуре. Разная растворимость в воде полисахаридов позволяет проводить их фракционное извлечение, разделять их в процессе экстракции.

Качественный анализ

Качественный анализ сырья, содержащего полисахариды, проводят при помощи микрохимических и химических реакций.

Определение наличия той или иной группы полисахаридов возможно с использованием специфических реакций: с йодом (крахмал), хлор-цинк-йодом (клетчатка), осаждением спиртом (глыбки инулина) и др.

В нормативной документации на ЛРС часто используется реакция осаждения полисахаридов спиртом из водного извлечения (например, подорожник).

При проведении некоторых качественных реакций (например, на восстанавливающие сахара) полисахариды подвергают гидролизу минеральными кислотами (например, 2−5% соляной кислотой при настаивании на кипящей водяной бане в течение 1−2ч.). Затем используют классические реакции на сахара, например, с реактивом Феллинга.

Для доказательства компонентного моносахаридного состава исследуемые полисахариды также подвергают кислотному гидролизу, а затем анализируют с помощью бумажной хроматографии в системе растворителей БУВ (4: 1: 2). Для проявления моносахаридов используют анилинфталатный реактив (с последующим нагреванием). При этом гексозы проявляются в виде пятен коричневого цвета, а пентозы окрашиваются в красноватый цвет.

С целью более глубоких исследований, в частности, для установления места присоединения сахаров, применяют ГЖХ с предварительным метаболизированием полисахарида и последующим кислотным гидролизом.