Вирусологические методы. 
Диагностика африканской чумы

Вначале проводим выделение вирусов на чувствительной модели — это может быть культура клеток костного мозга свиньи (ККС). Также при помощи КК проводим постановку реакции гемадсорбции, которая позволит судить об отсутствии возбудителя КЧС.

Мы приготовим культуру клеток костного мозга свиньи (Методическое пособие В. Н. Сюрин; В.А. Бурлаков):

• 1) Берем трубчатые кости плеча, бедра, предплечья или голени; кости очищаем;
• 2) Диафизы обертываем марлей, хрящевые части эпифизов срезаем, обрабатываем спиртом и прижигаем; выскребаем ткань костного мозга в стерильные колбы с магнитом и добавляем 8−10 частей питательной среды 199;
• 3) В течение 8−10 минут на электромагнитной мешалке клетки вымываем в среду;
• 4) Полученную суспензию разводим питательной средой до посевной концентрации, которая выражается в количестве 4−6 млн клеток в 1 мл.
• 5) Разливаем по культуральным сосудам и культивируем при 37 — 38 С.

Для исключения токсического действия материала на культуру клеток суспензию готовим в последовательных 10-кратных разведениях.

Для заражения КК отбираем 2 — 4-суточные культуры лейкоцитов без признаков дегенерации, просматривая их под микроскопом (Ч80 — 100).

• 6) Вносим исследуемый материал в виде суспензии из селезенки, легких, лимфатических узлов по 1мл в чашки Карреля и по 0,2 мл в пробирки (на каждое разведение готовим 4 пробирки культуры лейкоцитов).
• 7) Зараженные культуры инкубируем при 37 — 38С, пока не наступит гемадсорбция. Ежедневно просматриваем под микроскопом.

Наши пробы дали положительную реакцию, так как в культурах лейкоцитов, зараженных исследуемым материалом на 3-и сутки при микроскопировании отмечается отчетливая гемадсорбция в виде принятия зараженной клеткой формы шара ярко-красного цвета, расположенных в несколько слоев в виде ягод малины.

Окончательное подтверждение необходимо дать при проведении прямого метода МФА. Он позволяет избежать возможных ошибок связанных с неспецифической агглютинацией эритроцитов, так как некоторые штаммы вирусов могут утратить свои гемадсорбирующие свойства, а РИФ же способна обнаружить их.