Дифференциальный диагноз. 
Хронические эндометриты у животных

При дифференциальной диагностике эндометрита следует учитывать, что нередко хронические эндометриты могут наблюдаться при ряде инфекционных и инвазионных заболеваний (бруцеллез, лепто-спироз и др.). Поэтому если имеются подозрения на наличие только что упомянутых, или других заболеваний, необходимо проводин бактериологические, серологические и аллергические исследования.

При диагностировании хронических эндометритов (особенно пио-, гидро-, миксометры) необходимо исключить беременность, так как последующее введение лекарственных средств беременному животному может вызвать аборт. Следует отметить, что высокая профессиинальная квалификация ветеринарного специалиста, тщательный сбор анамнестических сведений и последовательность в исследовании животного, применение в необходимых случаях специальных методов диагностики позволяют достаточно точно диагностировать форму хронического эндометрита и, следовательно, назначить научно обоснованное лечение.

В настоящее время для диагностики внутриматочной патологии широко используется гистероскопия. Наиболее частыми признаками воспалительного процесса в эндометрии, по нашим данным, являются: неравномерная толщина эндометрия — 31% случаев, полиповидные нарастания — 31,2%, неравномерная окраска и гиперемия слизистой оболочки — 22 и 12,8%, точечные кровоизлияния — 8%, очаговая гипертрофия слизистой оболочки — 8%. Трудности гистероскопической интерпретации данных связаны с отсутствием типичных макроскопических признаков хронического эндометрита, с очаговым характером воспалительного процесса и стертыми формами заболевания. Гистероскопия по макроскопическим признакам позволяет точно идентифицировать хронический эндометрит только в 16−35% случаев. При подозрении на хронический эндометрит гистероскопия важна для исключения всего спектра внутриматочной патологии, но для верификации диагноза во всех случаях необходимо проведение морфологического исследования эндометрия.

«Золотым стандартом» диагностики хронического эндометрита является морфологическое исследование эндометрия, которое должно быть обязательным звеном алгоритма обследования. Диагностическое выскабливание слизистой оболочки матки производят в среднюю и позднюю фазу пролиферации. В последние годы общепринятыми критериями морфологической диагностики хронического эндометрита являются:

• 1. Воспалительные инфильтраты, состоящие преимущественно из лимфоидных элементов и расположенные чаще вокруг желез и кровеносных сосудов, реже диффузно. Очаговые инфильтраты имеют вид «лимфоидных фолликулов» и располагаются не только в базальном, но и во всех отделах функционального слоя, в состав их входят также лейкоциты и гистиоциты.
• 2. Наличие плазматических клеток.
• 3. Очаговый фиброз стромы, возникающий при длительном течении хронического воспаления, иногда захватывающий обширные участки.
• 4. Склеротические изменения стенок спиральных артерий эндометрия, появляющиеся при наиболее длительном и упорном течении заболевания и выраженной клинической симптоматике.

Различия в трактовке гистологических особенностей хронического эндометрита обусловлены наличием вариантов, которые определяются особенностями общей и тканевой реактивности, этиологическим фактором, продолжительностью заболевания, наличием обострений и степенью их выраженности.

Алгоритм лечения хронического эндометрита должен учитывать все звенья патогенеза заболевания. В условиях постоянного присутствия повреждающего агента в ткани не происходит завершения заключительной фазы воспаления — регенерации, нарушается тканевый гомеостаз и формируется целый каскад вторичных повреждений. Нарушение микроциркуляции в эндометрии приводит к ишемии и гипоксии ткани, активированные макрофаги в очаге воспаления являются источником активных форм кислорода и перекиси водорода и запускают процесс перекисного окисления липидов и повреждение клеточных мембран. Постоянная антигенная стимуляция иммунокомпетентной системы вызывает ее функциональную перегрузку и развитие аутоиммунных реакций.

При дифференциальной диагностике пиометры, как и во всех других случаях, диагноз должен ставится комплексно. С помощью вагиноскопического обследования можно установить наличие или отсутствие выделения гнойного секрета из шейки матки. Если матка имеет толстые стенки и наполнена гнойным секретом, ее можно легко прощупать. Однако при пальпации ожиревших пациентов, крупных собак, в случае если стенки матки тонкие и жидкостного содержимого в ней мало этот метод становится не информативным. Надежная диагностика в этих случаях возможна только путем фронтальной рентгенографии. В каудо-вентральной части брюшной полости видны вздутые петли, по плотности похожие на мягкие ткани, тянущиеся в каудальном направлении между толстой и тонкой кишкой и мочевым пузырем. Очень информативна в таком случае и ультразвуковая диагностика.

Анализ содержания лейкоцитов показывает изменения, типичные для хронической инфекции, т. е. лейкоцитоз средней или высокой степени с нейтрофилией и моноцитиозом. Анализ содержания эритроцитов не показывает никаких изменений. Биохимические показатели в большинстве случаев в норме. Иногда повышен уровень мочевины.

В отдельных случаях пиометра приводит к тяжелой токсемии с угнетением костного мозга, что может выражаться в анемии и лейкопении периферической крови. Кроме того, токсины могут вызывать симптомы шока и приводить к преренальному повышению уровня мочевины. У таких пациентов наблюдаются тяжелые нарушения общего состояния.

Хронический скрытый эндометрит диагностируют по обнаружению во время охоты патологических выделений из матки. Они бывают не прозрачными, как в норме, а мутными с примесью хлопьев гноя и более обильными. Через 1—3 дня после охоты патологические выделения из матки прекращаются и вновь не отмечаются до наступления очередной течки и охоты. Более точно диагностировать хронический скрытый эндометрит, можно только используя один из приведенных ниже лабораторных методов.

Врач-гинеколог может организовать в условиях фермы, пункта искусственного осеменения или ветаптеки проведение лабораторного исследования цервикальной слизи для уточнения диагноза и характера воспалительного процесса у бесплодных животных. Для получения лохий или слизи сначала проводят туалет наружных половых органов, затем руку в полиэтиленовой перчатке вводят во влагалище, берут содержимое около шейки матки и помещают в баночку или пробирку, пишут номер или кличку коровы. Исследование материала проводят сразу, но можно и через 2−3 часа, если хранить в прохладном месте. При необходимости для уточнения причины бесплодия проводят микроскопию мазка шеечно-влагалищной слизи, биопсию эндометрия.

По И. С Нагорному. В лабораторную пробирку помещают 2 мл лохий и добавляют 2 мл 1%-ного раствора уксусной кислоты или 0,1%-ного раствора этакридина лактата. Если лохии получены от коровы с нормальным течением послеродового периода, то в пробирке образуется сгусток муцина, не разбивающийся при встряхивании; осаждающаяся жидкость остается прозрачной. В случае эндометрита образуется осадок, при легком встряхивании пробирки жидкость мутнеет.

Проба по В. С. Дюденко. Основана на выявлении в течковой слизи при наличии воспалительного процесса токсических веществ ароматического ряда (индол, скатол и др.). В пробирку берут 2 мл лохий или слизи и добавляют 2 мл 20% раствора трихлоруксуной кислоты. Смесь фильтруют через бумажный фильтр и к 2 мл безбелкового фильтрата добавляют 0,5 мл азотной кислоты. Содержимое кипятят одну минуту. После охлаждения к смеси добавляют 1,5 мл 33%-ного раствора едкого натрия.

При положительной реакции раствор желтеет. Желто-зеленый цвет указывает на умеренное катаральное воспаление эндометрия, оранжевый на гнойно-катаральное воспаление слизистой оболочки матки.

Проба по Г. М. Калиновскому. Основана на выявлении в слизи серо-содержащих аминокислот, которые отмечаются при воспалении. В пробирку вносят 4 мл 0,5%-ного раствора свинца уксуснокислого, к которому по каплям добавляют 20%-ный раствор едкого натрия до образования осадка (гидрата окиси свинца). Через 15−20 сек. снова добавляют раствор едкого натрия до исчезновения осадка. Затем в пробирку вносят 1,5 — 2,0 мл слизи, взятой у коровы перед осеменением. Содержимое пробирки легко встряхивают и нагревают, не доводя до кипения. При наличии скрытого эндометрита в результате образования сернистого свинца смесь приобретает цвет крепко заваренного чая.

Проба по В. Г. Гавришу. Основана на выявлении при воспалительных процессах гистамина, продуцируемого тучными клетками эндометрия. В пробирку вносят 2 мл мочи животного и добавляют 1 мл 5%-ного водного раствора ляписа. Кипятят в течение 2 мин. Образование черного осадка указывает на воспаление эндометрия, а коричневого или светлого на нормальное состояние.

Проба по Л. Л. Смирновой. Основана на адсорбции гнойного содержимого и позволяет проводить диагностику скрытого эндометрита не дожидаясь течки животного. Ватно-марлевый тампон с ниткой пропитывают ивасдэком (смесь, состоящая из вазелина — 72 части, ихтиола — 20 частей, АСД 3 8 частей), и с помощью корнцанга вводят во влагалище до шейки матки. Через сутки за нитку извлекают. При наличии эндометрита на тампоне будет белое пятно в виде капли гноя.

Использование: ветеринария, способы диагностики дисфункции яичников у коров. Сущность изобретения: способ предусматривает внутрикожное введение в области шеи антигена из тканей желтого тела яичников в дозе 0,2 мл. Диагностический препарат получают по общепринятой методике органных антигенов. Проверку реакции на антиген приводят через 12, 24 и 48 ч после введения. При наличии ограниченной папулы диаметром более 10 мм делают вывод о дисфункции яичников. Использование способа повышает точность диагностики персистентного желтого тела у коров, выявленность патологии, связанной с нарушением половой цикличности, составляет свыше 90% 1 табл.

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к способам диагностики дисфункции яичников у коров.

Известен способ диагностики персистентного желтого тела у коров, основанный на результатах двукратной (с 3−4 недельным интервалом) ректальной пальпации яичников. Наличие желтого тела в том же яичнике и прежних размеров дает основание поставить диагноз на персистентное желтое тело (В.П. Гончаров и В. А. Карпов. Профилактика и лечение гинекологических заболеваний коров. М. Росагропромиздат, 1991, с. 151).

Недостатком этого способа является продолжительность, после первого исследования необходимо записать местоположение, величину, форму, консистенцию желтого тела и вести повседневное наблюдение за животным. Способ трудоемок, необходимо проводить ректальное исследование.

Известен способ диагностики персистентного желтого тела, включающий применение подкожных и внутривымянных введений питуитрина [1] При наличии в крови гормона желтого тела матка слабо или совершенно не реагирует на массаж. После подкожной инъекции 4 мл питуитрина матка на пальпацию через прямую кишку отвечает сокращениями. После инъекции в сосок вымени 2 мл питуитрина молоко выделяется через катетер струей, а при наличии желтого тела каплями.

Недостатком этого способа является необходимость проведения ректального исследования, что обуславливает трудоемкость, негигиеничность метода. Этот способ требует высокой квалификации специалиста.

Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому способу является метод, используемый в медицинской гинекологической практике для диагностики дисфункции желтого тела, при котором применяется кожно-аллергический тест [2] Диагноз основан на введении 2,5%-ного масляного раствора прогестерона. Покраснение и увеличение папулы в период предполагаемого максимального функционального состояния желтого тела является положительной реакцией.

Недостатком этого способа является недостаточная точность данного диагностического теста и выявляемость патологического состояния, связанного с задержкой функционирования желтого тела.

Цель изобретения повышение точности диагностики. Животным вводят внутрикожно в область шеи 0,2 мл антигена из тканей желтого тела яичников и проводят проверку реакции через 12,24 и 48 ч после введения. При наличии ограниченной папулы диаметром более 10 мм делают вывод о дисфункции яичников, ставят диагноз персистентное желтое тело.

Для внутрикожного введения испытаны дозы антигена 0,1; 0,15; 0,20; 0,25; 0,30 мл. Положительная аллергическая реакция антигена при введении 0,2 мл; 0,25 мл; 0,30 мл; оптимальной дозой является 0,2 мл.

Наблюдение за проявлением реакции на месте внутрикожного введения аллергена показало, что изменения в виде образования папулы диаметром 10−15 мм происходит в срок от 24 до 48 ч. После указанного времени происходит рассасывание новообразования.

Способ диагностики апробирован на 103 коровах черно-пестрой породы (возраст 3−7 лет).

П р и м е р. Животные были разбиты на три группы по принципу аналогов. В первой группе 45 коровам с задержкой течки и половой охоты свыше 30 дней после отела ввели внутрикожно в область шеи 0,2 мл тканевого антигена. Во второй группе 58 коровам с предварительно установленным клиническим методом диагнозом персистентное желтое тело также ввели внутрикожно 0,2 мл тканевого препарата. В третьей группе 36 коровам с предварительно установленным диагнозом на персистентное желтое тело внутрикожно ввели 0,2 мл 2,5%-ного масляного раствора прогестерона. Третья группа была контрольной.

Проверку реакции на препараты производили через 12, 24 и 48 ч после введения. Положительной считали реакцию при наличии ограниченной папулы на месте инъекции диаметром более 10 мм, отрицательной реакцией отсутствие изменений после введения диагностического препарата.

Результаты диагностических исследований приведены в таблице.

В первой группе положительная реакция на введение антигена из тканей желтого тела яичника была отмечена у 16 коров (35,5%). При клиническом исследовании (ректальной пальпацией) яичников наличие персистентного желтого тела подтвердилось. У 29 коров (64,5%) персистентное желтое тело отсутствовало и нарушение половой цикличности было установлено другими причинами.

Во второй группе с заранее установленным наличием желтого тела на введение антигена реагировало положительно 55 (94,8%) из 58 коров. Отрицательная реакция была у 3 (5,2%) животных. В третьей группе на внутрикожное введение прогестерона реагировали положительно 10 (27,7%) коров. У 26 (72,3%) животных отмечена отрицательная реакция.

Таким образом, применение предложенного способа позволяет повысить точность диагностики персистентного желтого тела у коров. Выявляемость патологии, обусловленной функционированием желтого тела и нарушением функции яичников, с использованием антигена из тканей желтого тела яичников составляет 94,8% Это на 67,1% выше, чем при использовании кожно-аллергического теста, включающего введение 2,5% масляного раствора прогестерона.

Персистентным называется желтое тело, задержавшееся в яичнике небеременного животного свыше 25−30 дней. Оно может образовываться из желтого тела беременности, полового цикла или возникать путем лютеинязации фолликула без овуляции, т. е. как следствие ановуляторного полового цикла. В настоящее время не существует единого мнения о роли желтого тела в этиологии бесплодия и в частоте его распространения. Некоторые авторы считают, что персистентное желтое тело имеет место у 30−60%, другие oTWi?-i;a.oT его наличие даже у 80−90% бесплодных коров. В то же время имеются сведения о наличии пер-систентных желтых тел только у 5,2−7,4% бесплодных коров. Такое различие мнений, очевидно, связано с диагностическими неточностями. В течение года мы диагностировали персистентные желтые тела в яичниках 18% бесплодных коров, однако во второй половине зимнего стойлового содержания эта патология встречается чаще (К. Д. Валюшкин). Этиология. Причины задержания желтых тел в яичниках животных могут быть самыми разнообразными. Чаще всего персистентное желтое тело образуется в результате несбалансированного кормления, обусловливающего истощение, гиповитаминозы, минеральную недостаточность или ожирение. Персистенция желтых тел может быть обусловлена высококонцент-ратным типом кормления жвачных животных, односторонним силосным кормлением, отсутствием моциона, плохими условиями содержания. Зарегистрировано массовое задержание желтых тел у коров-кормилиц при подсосном методе выращивания телят. Частой причиной персистенции желтых тел являются патологические изменения в матке (воспаления, дистрофические процессы), а также другие заболевания животных, возникшие при нарушении обмена веществ, интоксикации и расстройства координирующего влияния центральной нервной системы на функции гипоталамуса, гипофиза и половых органов. Имеются сообщения о предрасположенности к персистенции желтых тел высокопродуктивных коров. В действительности причиной задержания желтых тел у таких коров является не высокая молочная продуктивность, а несбалансированность рационов под более высокий уровень продуктивности. Патогенез. Персистентное желтое тело выделяет в кровь гормон прогестерон, который задерживает развитие и созревание новых фолликулов, так как снижается секреция фолликулостимулирующего гормона передней доли гипофиза. Сократительная функция матки угнетается, чувст вительность к окситоцину резко падает, что приводит к прекращению секреции лютеолитического фактора. Так наступает персистенция желтых тел при неполноцен В яичниках задТрживается рост и созревание фолликулов. Живот-; ые не проявляют половой цикличности в течение 3 меси более после родов. Считают, что причиной персистениии желтых тел могут быть эндометриты, так как приэтом в гипоталамус постоянно поступают импульсы при раздражении матки микробами и токсинами Клинические признаки. Характерным признаком персистенции желтого тела является длительное отсутствие течки и охоты у животных после родов илм предыдущего полового цикла. При ректальн. олт исследовании находят низкую сократительную фуы-;и:-:;о матки. Иногда матка становится атоничной, дряблой, не реагирует на массаж и свисает в брюшную no;;oi" iL. У. молодых коров не всегда можно обнаружит!, изменения функции матки. В одном из яичников (чаще в правом) обнаруживают жалтое тело, выступающее над поверхностью в виде гржювидного возвышения с небольшим углублением в центре. Иногда в этом же или другом яичнике нахо-ЛИ несколько Фолликулов различной велиЛечение. Нередко после устранения основной причины персистенции желтого тела эта железа перестает функционировать сама по себе и половая цикличность у животных восстанавливается. При наличии сопутствующих заболеваний матки нужно принимать меры по их устранению. Все терапевтические приемы при персистентных желтых телах можно подразделить на симптоматические и оперативные. Для ускорения рассасывания персиетентного желтого тела (рис. 145) прежде всего следует нормализовать условия жизни животного, применять массаж яичников через стенку прямой кишки с интервалом 2−3 дня на протяжении 2−3 недель; корове каждые 2−3 дня инъецировать подкожно по 2000;2500 ЕД фол-'" сулина. Рекомендуется использовать 0,5%-ный ра-< твор прозерина в дозе 2,0−2,5 мл путем подкожных инъекции, а через 1−5 дней 2−3 мл 1%-ного масляного !);" ' «» Ра синестрола. Можно применять СЖК или КЖК (6 МЕ/кг массы животного), а также их сочетание с нейро-тропными препаратами. Достаточный терапевтический эффект получают от применения 2 мл простагландинов, которые обеспечивают рассасывание желтого тела и рост фолликулов. Основным оперативным приемом при удалении желтого тела является энуклеация его через прямую кишку. Для выполнения этой операции руку вводят в прямую кишку и освобождают ее от каловых масс. В краниальной части прямой кишки захватывают яичник так, чтобы яичниковая связка оказалась между указательным и средним пальцами. Большим пальцем создают необходимое давление на ткани между паренхимой яичника и основанием желтого тела и отторгают желтое тело.

Изучали ультраструктурную характеристику желтых тел коров на восьмые — двенадцатые сутки полового цикла. Установили, что крупные лютеоциты содержат ядро с большим количеством хроматина. Последний расположен не только по периферии, но ив других частях ядра в виде глыбок. Ядро обычно несколько вытянутое. При этом ярко выражена инвагинации оболочки ядра, по сравнению с желтыми телами стельных коров. Ядрышко небольшое, расположено в центре ядра, с хорошо выраженными фибриллярной и гранулярной зонами.

В цитоплазме число митохондрий снижено, но они более крупные. Встречаются гипертрофированные митохондрии с аномальной внутренней структурой, содержащей крупные вакуоли и электронноплотные включения. Преобладают митохондрии округлой формы, реже — овальной или вытянутой. Внутренняя структура митохондрий несколько меняется. Появляется значительное число органелл с трубчатыми кристами с расширенными профилями и прозрачным содержимым.

Гладкий эндоплазматический ретикулум образован мелкими округлыми пузырьками или небольшими овальными мешочками, наружная мембрана которых не содержит рибосом. Характерно, что эти структуры очень хорошо развиты в инвагинациях ядра. Между пузырьками эндоплазматического ретикулу-ма и митохондриями располагаются группы свободных рибосом, образующих розетки. Этих структур относительно много. Гранулярный эн’доплазматический ретикулум умеренно развит и представлен короткими профилями, расположенными в перинуклеарной зоне клетки.

Комплекс Гольджи крупных лютеоцитов хорошо развит и расположен вблизи ядра. Он представлен параллельно ориентированными плотно расположенными ламеллами с узкими профилями.

Число плотных телец, имеющих различную форму и отграниченных четко выраженной однослойной мембраной, значительное. Во всех клетках, но в разной степени распространенности встречаются липосомы и аутофагосомы.

Четкой дифференциации между крупными лютеоцитами с разной синтетической активностью нет. Различия выражены между функционирующими клетками и гибнущими, структура которых описана ниже.

Тека-лютеиновые клетки желтого тела полового цикла содержат ядро вытянутой формы с хроматином, расположенным по периферии. В других зонах клетки он менее конденсирован и лежит в виде мелких гранул или пылевидной зернистости. Ядрышко хорошо выражено, располагается эксцентрично. Ядерная оболочка с хорошо выраженным трехслойным строением и многочисленными ядерными порами.

Цитоплазма бедна митохондриями, которые собраны группами у одного из полюсов ядра. Но как и в случае с крупными лютеиновыми клетками они очень крупные, с трубчатыми кристами. Внутренняя часть крист светлая, а межкристное пространство темное, содержит пылевидную массу. В отдельных митохондриях обнаруживаются внутримитохондриальные электронноплотные гранулы.

Между митохондриями и ядром располагаются профили гранулярного эндоплазматического ретикулума. Комплекс Гольджи обнаруживается в виде расположенных в узкой части цитоплазмы диктиосом. Это удлиненные, плотно расположенные мембранные структуры, практически не имеющие прослойки гиалоплазмы. Гладкая эндоплазматическая сеть умеренно развита и представлена округлыми, чаще вытянутыми структурами. Свободных рибосом не много. Встречаются единичные лизосомы, электронноплотные телеца, липосомы.

Наружная плазматическая мембрана имеет неглубокие впячивания и выросты, направленные в расширенное межклеточное пространство.

Строма желтого тела полового цикла богата фибробластами, фиброцитами, малодифференцированными макрофагами. Последние содержат части гибнущих клеток и липиды.

В желтом теле полового цикла межклеточные контакты между крупными лютеоцитами имеют вид простого контакта с широкими пространствами. Это характерно и для взаимодействий лютеоцитов не только между собой, но и с другими клетками. В межклеточных пространствах содержатся межклеточное вещество, вакуоли и отростки, редко контактирующие между собой.

Между гибнущими клетками эти пространства еще более широкие и менее электронноплотные. В них наряду с клеточными отростками можно обнаружить миелиноподобные тельца, капли липидов, коллагеновые волокна, фрагменты мембран и ультраструктур.

Строма желтого тела полового цикла представлена более грубыми колла-геновыми волокнами, расположенными в виде плотных пучков, по ходу которых расположены фибробласты, фиброциты и малодифференцированные макрофаги.

Сосуды желтого тела полового цикла развиты. Но капилляры находятся в разном морфофункциональном состоянии. Одни из них сильно расширены, кровенаполнены, в некоторых участках разрушены. Фенестры выражены плохо. Ядра эндотелиальных клеток пикнотизированы, гиперхромные. Цитоплазма также темная. Органеллы малочисленны и представлены единичными митохондриями с темным матриксом, лизосомами и темными профилями эндоплаз-матической сети. Вокруг таких сосудов отмечается выраженный периваскуляр-ный отек.

Часть капилляров, напротив сужены до исчезновения внутреннего просвета. Рисунок микроворсинок сглажен и цитоплазма эндотелия практически не содержит пиноцитозных пузырьков. Выросты и на базальной поверхности эн-дотелиоцита отсутствуют, и межклеточный компонент базального слоя частично разрушен. В некоторых случаях, наряду с периваскулярным отеком, наблюдается контакты с макрофагами. Последние, вероятно, участвуют в разрушении базальной мембраны и стенки капилляра.

Можно описать механизмы лютеолизиса. Прежде всего, это упрошение межклеточных контактов с развитием широких пространств. Таким образом клетки изолируются друг от друга и не способны кооперироваться для выполнения своей функции. Не последнюю роль играет соединительная ткань, которая фиброзно изменяется, становится грубоволокнистой и приводит к атрофии паренхимы железы.

Несомненна роль в лютеолизисе нарушений циркуляции крови в регионе микроциркуляторного русла. Расширение или сужение сосудов, дистрофия, разрушение их стенок и базальной мембраны с последующим фагоцитозом, пе-риваскулярные отеки и нарушения реологических свойств крови, очевидно, является пусковым механизмом последующих атрофических, дистрофических процессов в паренхиме и фиброзных изменений стромы железы.

По нашим данным ранними признаками начавшейся гибели клетки являются: расширения цистерн эндоплазматической сети, отделение рибосом от мембран шероховатой эндоплазматической сети и диссоциация полисом в моносомы. В дальнейшем на поверхности клеток образуются выпячивания, содержащие только цитозоль, происходит потеря микроворсинок.

В цитоплазме клеток и вне их появляются миелиновые фигуры, формирующиеся из вещества цитоплазмы клеток и мембран органелл, наблюдается набухание митохондрий. Все эти описанные изменения обратимы. Необратимые изменения морфологически ассоциируются с выраженной вакуолизацией митохондрий и их крист, повреждением плазматических мембран и набуханием лизосом. Эти картины, наблюдающиеся преимущественно в крупных лютсино-вых клетках, описаны нами выше.

Наряду с этими изменениями, связанными с нарушениями микроцирку-ляторного русла, вызванного гормональными изменениями (простагландины и т. п.), мы наблюдали гибель клеток путем апоптоза.

При этом наиболее характерными признаками являются конденсация и фрагментация ядерного хроматина, а также сморщивание клетки с сохранением целостности органелл. В дальнейшем клетка распадается на апоптозные тельца, представляющие собой мембранные структуры с заключенными внутри органеллами и частицами ядра. Затем апоптозные тельца фагоцитируются и разрушаются при помощи лизосом окружающими клетками-макрофагами.

Ультраструктурная характеристика персистентных желтых тел Крупные лютеиновые клетки персистентных желтых тел характеризуются небольшим ядром с глубокими и широкими инвагинациями, что придает ему своеобразное крупнолопастное строение. Хроматин расположен по периферии в виде крупных глыбок или заполняет почти всю кариоплазму. Ядрышки обнаруживаются редко и представлены преимущественно гранулярным компонентом. Поры в оболочке ядра обнаруживаются с трудом.

Цитоплазма содержит много жировых капель, представляющих собой нейтральные жиры. Митохондрии гиперплазированные, содержат вакуолизиро-ванные или разрушенные кристы, темные включения, иногда занимающие почти всю органеллу. Гладкий эндоплазматический ретикулум представлен расширенными профилями. Шероховатый эндоплазматический ретикулум не обнаруживается, а рибосомы в небольшом количестве располагаются в цитоплазме в виде небольших скоплений полисом.

Тека-лютеиновые клетки характеризуются вытянутой формой и эксцентрично расположенным ядром. Ядро неправильной формы, с небольшими инвагинациями, глыбками хроматина, расположенного по периферии, и мелкозернистой структурой в центральных зонах кариоплазмы. Ядрышко темное, представлено фибриллярным компонентом.

Цитоплазма содержит капли липидов темного цвета и более светлые лю-теосомы. Митохондрий немного, они располагаются по одной две в участках цитоплазмы, не содержащей липиды. Митохондрии небольшого размера с трубчатыми или разрушенными кристами. Рядом с митохондриями располагаются единичные, короткие профили шероховатого эндоплазматического рети-кулума. В других участках цитоплазмы встречаются небольшие скопления полисом. Гладкий эндоплазматический ретикулум встречается в виде единичных округлых структур. Клеточная мембрана неровная, клетки располагаются на значительном расстоянии друг от друга.

Тека-лютеиновые клетки почти сплющенной формы, содержат вытянутое ядро с глубокими инвагинациями, узким ободком цитоплазмы бедной органел-лами и содержащей капли липидов.

Для персистентных желтых тел характерно обилие клеток соединительной ткани: фибробластов, фиброцитов, макрофагов различной степени дифференцировки. Между клетками формируются своеобразные взаимоотношения. С одной стороны, характерны широкие межклеточные пространства между крупными лютеоцитами. Тека-лютеиновые клетки имеют тенденцию близко располагаться к крупным лютеоцитам и образовывать с ними или другими текалю-теиновыми клетками в небольших участках цитоплазмы простые межклеточные контакты.

В персистентных желтых телах мы обнаружили ярко выраженную активность макрофагов. Макрофаги внедряются в разрушающуюся по типу липофа-нероза крупную лютеиновую клетку. У макрофага клеточная мембрана сохраняется, то у лютеиновой клетки она видна только в отдельных участках межклеточного взаимодействия.

Необходимо подчеркнуть, что гибель клеток в персистентных желтых телах развивается по типу дистрофии, а затем некроза. В начале отмечаются обратимые изменения органелл, в дальнейшем разрушение клеточных мембран, прежде всего у митохондрий, появление крупных капель нейтральных жиров. В дальнейшем развивается фокальный некроз цитоплазмы лютеоцитов, который заканчивается гибелью клетки с последующим фагоцитозом ее остатков макрофагами.

Строма персистентного желтого тела хорошо развита, рост соединительной ткани прогрессирует, в связи с чем ею заполняются пространства атрофирующих и гибнущих клеток. Она представлена активно синтезирующими фиброцитами и фибробластами, грубыми коллагеновыми волокнами и межклеточным веществом.

Ультраструктура микроциркуляторного русла свидетельствует о том, что кровоснабжение железы недостаточное. Капилляры спавшиеся, пустые или содержат единичные клетки крови. Ядра эндотелиоцитов темные, цитоплазма бедна органеллами и почти не содержит пиноцитозных пузырьков. Внутренняя поверхность сосуда без выраженных микроворсинок. Базальная мембрана в отдельных участках разрушена, вокруг капилляра отсутствуют клеточные элементы и развивается отек.

Экспериментальное изучение лютеолитических процессов Ко вторым суткам после введения препарата в дозе 250 мкг в яичниках отмечаются процессы инволюции желтого тела, проявляющиеся появлением уплотненных пикнозных ядер лютеоцитов, в их цитоплазме образуется большое количество разнообразных по форме и объему вакуолей, которые при окраске суданами содержат фосфолипиды и нейтральные жиры. К четвертым суткам после введения препарата лизис лютеиновых клеток усиливается и у одного животного наступила инволюция функционирующих желтых тел, лютеини-зация и облитерационная атрезия крупных и средних фолликулов. В это же время активируется рост и созревание других фолликулов, в результате чего проявляется половая охота.

Препарат в дозе 500 мкг у коров вызывают более интенсивные процессы инволюции желтого тела, пикноз и лизис ядер, вакуолизацию цитоплазмы лютеиновых клгток. У всех животных желтые тела к четырех дневному сроку после введения препарата подвергаются лизису.

У коров указанный препарат в дозе 1000 мкг уже через двое суток после введения препарата вызывают глубокие литические процессы. В лютеиновых клетках, в теке и гранулезе третичных фолликулов, яйцеклетках и в интерсти-циальной ткани яичника наблюдается распад ядер и цитоплазмы. Это явление сопровождается выраженной сосудистой реакцией, гемостазом, инфильтрацией форменных элементов крови в окружающую ткань яичника, фолликулы. Вследствие этого лизис клеток желтых тел к этому времени завершается, стадия возбуждения полового цикла, сопровождающаяся лютеинизацией, геморрагической и кистозной атрезией крупных фолликулов.

Таким образом, большие дозы препарата (1000 мкг) наряду с чрезмерной активацией литических процессов в желтом теле вызывают и лизис текалютеи-новых клеток в сформированных фолликулах, что приводит к образованию кист, в связи с чем препарат в этих дозах не может быть рекомендован для вызывания инволюции желтых тел полового цикла.

Полученные данные указывают на то, что отечественный препарат эсту-фалан обладает лютеолитическим воздействием на лютеиновые структуры и ткани яичника у животных. Исходя из полученных данных, наиболее оптимальными дозами эстуфалана для коров являются 500 мкг.

Электронномикроскопически установили, что при использовании оптимальной дозы препарата (500 мкг) лютеолитические процессы в тканях желтого тела напоминают таковые желтых телах полового цикла, но с более выраженными дистрофическими процессами в лютеиновых клетках, активацией макрофагов, уничтожающих погибающие клетки. Это происходит вследствие развития анемии и ишемии сосудов железы. В тоже время фиброзные процессы в желтом теле выражены слабо, что приводит к быстрому рассасыванию желтого тела без его персистенции и образования лютеиновых рубцов.

• 1. Масса яичника, содержащего желтое тело беременности, увеличивается к двухмесячному сроку стельности, достигая в среднем 14,6±0,8 гр., снижается к трем месяцам стельности до 10,6±0,7 гр. и в дальнейшем этот показатель остается относительно стабильным. К двухмесячному сроку стельности диаметр желтого тела беременности увеличивается и достигает в среднем 28,4±3,1 мм (стадия расцвета), а к трем месяцам стельности этот показатель снижается до 23,1 ±1,2 мм (стадия уменьшения) и в дальнейшем, несколько уменьшаясь, остается относительно одинаковым (стадия стабилизации). В яичниках стельных коров на протяжении первых шести месяцев беременности обнаруживаются единичные полостные фолликулы диаметром более 1 см. Число полостных фолликулов диаметром до 1 см снижается к двухмесячному сроку беременности, в дальнейшем повышается, достигая своего максимума к четырем месяцам стельности, после чего снижается, достигая двухмесячного уровня. Число красных лютеиновых телец в обоих яичниках достоверно не изменяется на протяжении беременности. Число белых атретических телец увеличивается к двум месяцам стельности, когда количество полостных фолликулов снижается. К трем месяцам беременности этот показатель повышается, а к четырем месяцам достоверно увеличивается и, снизившись к пяти месяцам, остается стабильным.
• 2. На протяжении полового цикла происходят закономерные изменения макроскопических характеристик желтого тела. В первые десять суток полового цикла желтое тело увеличивается в размерах, формируются его строма и паренхима, васкуляризация (стадия формирования). На десятые-двенадцатые сутки полового цикла желтое тело достигает наибольшего развития (стадия максимально