Анализ проб на проточном цитометре

Принципы проточной цитометрии весьма просты. Клетки или ядра поодиночке пересекают сфокусированный световой пучок, обычно лазерный. Свет определенной длины возбуждает молекулы флуоресцирующих красителей, связанных с различными клеточными компонентами, при этом при этом может происходить одновременное возбуждение нескольких разных красителей, что позволяет оценить сразу несколько клеточных параметров. Свет, испускаемый красителями, собирают с помощью системы линз и зеркал и разлагают на компоненты. Световые сигналы детектируют, преобразуют в электрические импульсы и далее в форму, удобную для компьютерной обработки и хранения информации.

Анализ проб проводят с учетом правил проточной цитометрии.

Первая гистограмма (FSxSS) предназначена для выделения области лимфоцитов. Оно проводится по соотношению размера клеток (FS) и ее гранулярности (SS).

Вторая гистограмма (Main) необходима для исключения дебриса (мусора).

На третьей гистограмме выделяют область клеток, окрашенных ДНК-тропным красителем PI и красителем FITS, конъюгированным с антителами против белка Ki-67. Все клетки, попадающие в эту область, считаются как Ki-67-положительные.