ΠŸΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ Π² написании студСнчСских Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚
АнтистрСссовый сСрвис

РСгистрируСмыС ΠΏΠ°Ρ€Π°ΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Ρ‹. 
ΠŸΡ€ΠΎΡ‚ΠΎΡ‡Π½Π°Ρ цитомСтрия

Π Π΅Ρ„Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΠŸΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ Π² Π½Π°ΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΈΠΈΠ£Π·Π½Π°Ρ‚ΡŒ ΡΡ‚ΠΎΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒΠΌΠΎΠ΅ΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹

Π”Π΅Ρ‚Π΅ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ прямого свСторассСяния располагаСтся ΠΏΠΎ Ρ…ΠΎΠ΄Ρƒ Π»Π°Π·Π΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π»ΡƒΡ‡Π° Π·Π° ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ячСйкой ΠΈ Ρ€Π΅Π³ΠΈΡΡ‚Ρ€ΠΈΡ€ΡƒΠ΅Ρ‚ ΠΈΠ·Π»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π»Π°Π·Π΅Ρ€Π°, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ΅ рассСиваСтся ΠΏΠΎΠ΄ ΡƒΠ³Π»Π°ΠΌΠΈ 2βˆ’19 градусов. Π˜Π½Ρ‚Π΅Π½ΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ рассСянного ΠΏΠΎΠ΄ ΠΌΠ°Π»Ρ‹ΠΌ ΡƒΠ³Π»ΠΎΠΌ свСта ΠΏΡ€ΠΎΠΏΠΎΡ€Ρ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½Π° Ρ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Ρƒ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ. Π‘ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΊΡ€ΡƒΠΏΠ½Ρ‹Π΅ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Ρ€Π°ΡΡΠ΅ΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‚ свСт сильнСС ΠΌΠ΅Π»ΠΊΠΈΡ…. ΠŸΡ€ΡΠΌΠΎΠ΅ (ΠΌΠ°Π»ΠΎΡƒΠ³Π»ΠΎΠ²ΠΎΠ΅) свСторассСяниС. РСгистрация флуорСсцСнции. Π‘ΠΎΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΅ свСторассСяниС… Π§ΠΈΡ‚Π°Ρ‚ΡŒ Π΅Ρ‰Ρ‘ >

РСгистрируСмыС ΠΏΠ°Ρ€Π°ΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Ρ‹. ΠŸΡ€ΠΎΡ‚ΠΎΡ‡Π½Π°Ρ цитомСтрия (Ρ€Π΅Ρ„Π΅Ρ€Π°Ρ‚, курсовая, Π΄ΠΈΠΏΠ»ΠΎΠΌ, ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒΠ½Π°Ρ)

1. ΠŸΡ€ΡΠΌΠΎΠ΅ (ΠΌΠ°Π»ΠΎΡƒΠ³Π»ΠΎΠ²ΠΎΠ΅) свСторассСяниС.

Π”Π΅Ρ‚Π΅ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ прямого свСторассСяния располагаСтся ΠΏΠΎ Ρ…ΠΎΠ΄Ρƒ Π»Π°Π·Π΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π»ΡƒΡ‡Π° Π·Π° ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ ячСйкой ΠΈ Ρ€Π΅Π³ΠΈΡΡ‚Ρ€ΠΈΡ€ΡƒΠ΅Ρ‚ ΠΈΠ·Π»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π»Π°Π·Π΅Ρ€Π°, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ΅ рассСиваСтся ΠΏΠΎΠ΄ ΡƒΠ³Π»Π°ΠΌΠΈ 2−19 градусов. Π˜Π½Ρ‚Π΅Π½ΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ рассСянного ΠΏΠΎΠ΄ ΠΌΠ°Π»Ρ‹ΠΌ ΡƒΠ³Π»ΠΎΠΌ свСта ΠΏΡ€ΠΎΠΏΠΎΡ€Ρ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½Π° Ρ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Ρƒ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ. Π‘ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΊΡ€ΡƒΠΏΠ½Ρ‹Π΅ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Ρ€Π°ΡΡΠ΅ΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‚ свСт сильнСС ΠΌΠ΅Π»ΠΊΠΈΡ….

2. Π‘ΠΎΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΅ свСторассСяниС.

Π’Π½ΡƒΡ‚Ρ€Π΅Π½Π½Π΅Π΅ содСрТимоС ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ оптичСски Π½Π΅ΠΎΠ΄Π½ΠΎΡ€ΠΎΠ΄Π½ΠΎ. Π›ΡƒΡ‡ Π»Π°Π·Π΅Ρ€Π°, проходя сквозь ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΡƒ, ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎΠΊΡ€Π°Ρ‚Π½ΠΎ прСломляСтся ΠΈ Ρ€Π°ΡΡΠ΅ΠΈΠ²Π°Π΅Ρ‚ся Π²ΠΎ Π²ΡΠ΅ стороны. РСгистрация этого излучСния позволяСт ΡΡƒΠ΄ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΎ ΡΠ»ΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ Π²Π½ΡƒΡ‚Ρ€Π΅Π½Π½Π΅Π³ΠΎ строСния ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ (ΡΠΎΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ядро-Ρ†ΠΈΡ‚ΠΎΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠ°, Π½Π°Π»ΠΈΡ‡ΠΈΠ΅ Π³Ρ€Π°Π½ΡƒΠ», Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΡ… Π²Π½ΡƒΡ‚Ρ€ΠΈΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Ρ… Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΠΉ). ΠšΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΡ Π±ΠΎΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈ ΠΏΡ€ΡΠΌΠΎΠ³ΠΎ свСторассСяния позволяСт ΡΡƒΠ΄ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΎ ΠΌΠΎΡ€Ρ„ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Π² Ρ†Π΅Π»ΠΎΠΌ, Π²Ρ‹Π΄Π΅Π»ΡΡ‚ΡŒ Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Π΅ популяции ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ (Π»ΠΈΠΌΡ„ΠΎΡ†ΠΈΡ‚Ρ‹, ΠΌΠΎΠ½ΠΎΡ†ΠΈΡ‚Ρ‹, Π³Ρ€Π°Π½ΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚Ρ‹) для дальнСйшСго Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π°.

3. РСгистрация флуорСсцСнции.

БистСма для рСгистрации свСчСния Ρ„Π»ΡŽΠΎΡ€Π΅ΡΡ†Π΅Π½Ρ‚Π½Ρ‹Ρ… ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠΊ состоит ΠΈΠ· ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΊΡΠ° ΡΠ²Π΅Ρ‚ΠΎΡ„ΠΈΠ»ΡŒΡ‚Ρ€ΠΎΠ² ΠΈ Ρ„ΠΎΡ‚ΠΎΡƒΠΌΠ½ΠΎΠΆΠΈΡ‚Π΅Π»Π΅ΠΉ, ΠΊΠ°ΠΆΠ΄Ρ‹ΠΉ ΠΈΠ· ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Ρ… рСгистрируСт ΠΈΠ·Π»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π² Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½Π΅ Π΄Π»ΠΈΠ½ Π²ΠΎΠ»Π½, ΡΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… Ρ„Π»ΡŽΠΎΡ€ΠΎΡ…Ρ€ΠΎΠΌΡƒ. Π’Ρ‹Π±ΠΎΡ€ Ρ‚ΠΈΠΏΠ° ΠΈ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡ‡Π΅ΡΡ‚Π²Π° флуорСсцСнтных краситСлСй опрСдСляСтся поставлСнной Π·Π°Π΄Π°Ρ‡Π΅ΠΉ для Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ исслСдования. ΠžΡΠ½ΠΎΠ²Π½Ρ‹ΠΌΠΈ Ρ‚ΠΈΠΏΠ°ΠΌΠΈ Ρ‚Π°ΠΊΠΈΡ… краситСлСй ΡΠ²Π»ΡΡŽΡ‚ΡΡ ΠΌΠΎΠ½ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π°, ΠΊΠΎΠ½ΡŒΡŽΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ с Ρ„Π»ΡŽΠΎΡ€Π΅ΡΡ†Π΅Π½Ρ‚Π½ΠΎΠΉ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΊΠΎΠΉ (FITC, PE, APC, PerCP ΠΈ Π΄Ρ€.) для опрСдСлСния ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΈ Ρ†ΠΈΡ‚оплазматичСских Π°Π½Ρ‚ΠΈΠ³Π΅Π½ΠΎΠ² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ, краситСли, ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΆΠΈΠ·Π½Π΅ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ (7AAD, PI) Ρ„Π»ΡƒΠΎΡ€ΠΎΡ„ΠΎΡ€Ρ‹, ΡΠ²ΡΠ·Ρ‹Π²Π°ΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ΡΡ с Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΈΠ½ΠΎΠ²Ρ‹ΠΌΠΈ кислотами (DAPI, Hoechst), pH-Ρ‡ΡƒΠ²ΡΡ‚Π²ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ Ρ„Π»ΡƒΠΎΡ€ΠΎΡ„ΠΎΡ€Ρ‹ (Fluo-3), ΠΈΠΎΠ½-зависимыС Ρ„Π»ΡƒΠΎΡ€ΠΎΡ„ΠΎΡ€Ρ‹ (Indo-1).

4. Π‘ΠΎΡ€Ρ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²ΠΊΠ° ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ.

Π’ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΌ Ρ†ΠΈΡ‚ΠΎΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Π΅, ΠΎΠ±ΠΎΡ€ΡƒΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΌ систСмой для сортировкС ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ, проточная ячСйка Π·Π°ΠΊΡ€Π΅ΠΏΠ»Π΅Π½Π° Π½Π° ΠΏΡŒΠ΅Π·ΠΎΠΊΡ€ΠΈΡΡ‚Π°Π»Π»Π΅. ΠŸΡ€ΠΈ ΠΏΠΎΠ΄Π°Ρ‡Π΅ Π½Π° Π½Π΅Π³ΠΎ напряТСния кристалл вмСстС с ΡΡ‡Π΅ΠΉΠΊΠΎΠΉ ΡΠΎΠ²Π΅Ρ€ΡˆΠ°Π΅Ρ‚ колСбания с Π·Π°Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠΉ частотой, Π² Ρ€Π΅Π·ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ‚Π΅ Ρ‡Π΅Π³ΠΎ струя Тидкости с ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠ°ΠΌΠΈ разбиваСтся Π½Π° ΠΎΡ‚Π΄Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ ΠΊΠ°ΠΏΠ»ΠΈ. ΠŸΡ€ΠΎΡ…ΠΎΠ΄Ρ сквозь Π·Π°Ρ€ΡΠΆΠ°ΡŽΡ‰Π΅Π΅ ΠΊΠΎΠ»ΡŒΡ†ΠΎ, капля ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ ΠΏΡ€ΠΈΠΎΠ±Ρ€Π΅Ρ‚Π°Ρ‚ΡŒ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΡ‚Ρ€ΠΈΡ†Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ заряд Π² Π·Π°Π²ΠΈΡΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΠΈ ΠΎΡ‚ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, какая ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠ° содСрТится Π²Π½ΡƒΡ‚Ρ€ΠΈ ΠΊΠ°ΠΏΠ»ΠΈ. ΠŸΡ€ΠΎΠ»Π΅Ρ‚Π°Ρ ΠΌΠΈΠΌΠΎ ΠΎΡ‚ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΡΡŽΡ‰ΠΈΡ… пластин капля с ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΎΠΉ притягиваСтся ΠΊ Π½ΠΈΠΌ, Π²Ρ‹Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ ΠΈΠ· ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠΎΡ‚ΠΎΠΊΠ° ΠΈ ΠΏΠΎΠΏΠ°Π΄Π°Π΅Ρ‚ Π² ΠΏΡ€ΠΎΠ±ΠΈΡ€ΠΊΡƒ.

ΠŸΠΎΠΊΠ°Π·Π°Ρ‚ΡŒ вСсь тСкст
Π—Π°ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡ‚ΡŒ Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΡƒ Ρ‚Π΅ΠΊΡƒΡ‰Π΅ΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΎΠΉ