Анализ и стандартизация нового антиаритмического препарата "кардиоциклид

Актуальность темы

Лечение аритмий является сложной проблемой, зачастую не имеющей однозначного решения. Существующие антиаритмические препараты часто обладают ограниченной эффективностью и серьезными побочными эффектами, включая проаритмическое действие, представляющее особую опасность для пациентов с имеющейся сердечной патологией. Многочисленные проведенные исследования показали, что наиболее безопасными препаратами вне зависимости от того, страдает ли пациент сердечным заболеванием или нет, являются антиаритмические препараты III класса. Однако существующие препараты этого класса имеют ряд отрицательных побочных эффектов экстракардиального характера, осложняющих выбор рациональной терапии аритмии сердца. Основной механизм действия этих препаратов таков, что при брадикардиях возможно проявление их аритмогенного действия. Кроме того, действие некоторых антиаритмических препаратов III класса в большей степени выражено при низкой частоте сердечных сокращений, чем при высокой, что приводит к недостаточной эффективности терапии при тахиаритмиях. Поэтому поиск и изучение новых препаратов, принадлежащих к ПГ классу антиаритмических средств, действие которых в этих условиях не снижается, в настоящее время особенно актуален.

В ГУ НИИ Фармакологии РАМН был проведен скрининг новых соединений из группы производных амидов аминокарбоновых кислот, в результате которого было отобрано наиболее активное вещество, проявляющее свойства антиаритмических препаратов III класса — кардиоциклид [151]. В ходе дальнейших исследований была изучена фармакологическая активность нового препарата [151]. Установлено, что кардиоциклид удлиняет реполяризацию желудочков, увеличивает эффективный рефрактерный период предсердий и желудочков независимо от частоты навязанного ритма, не оказывает влияния на проводящую систему сердца, обладает выраженным антиаритмическим и противофибрилляторным действием.

Для внедрения препарата в медицинскую практику, наряду с фармакологическими испытаниями, необходимо разработать методы контроля его качества и стандартизации, и на их основе — нормативную документацию на субстанцию и лекарственную форму.

Цель исследований. Целью настоящей работы являлось, изучение свойств, разработка методик фармацевтического анализа, стандартизация показателей и норм качества, а также создание нормативно-технической документации на субстанцию и лекарственную форму кардиоциклида.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

— изучить физические, химические и физико-химические свойства кардиоциклида, разработать методики анализа и установить нормы качества;

— изучить спектральные характеристики кардиоциклида методами УФ-, ИК-, ЯМР’Н-спектроскопии и оценить возможность их использования для подтверждения структуры препарата и для их идентификации;

— изучить хроматографическое поведение кардиоциклида и промежуточных продуктов его синтеза, разработать методики хроматографического анализа препарата;

— разработать методики количественного определения кардиоциклида в субстанции и лекарственной форме;

— изучить стабильность субстанции и лекарственной формы препарата в процессе хранения в естественных условиях и методом «ускоренного старения», а также под действием различных внешних факторов. Научная новизна:

Впервые проведено комплексное изучение физических, химических и физико-химических свойств нового фармакологически активного соединения, проявляющего свойства антиаритмических препаратов III класса.

— кардиоциклида оксалата. Определены растворимость и спектральные характеристики препарата с использованием методов УФ-, ИК-, ЯМР 'Н-спектроскопии. Установлено, растворимость различных образцов кардиоциклида оксалата различается в несколько раз. С помощью метода ЯМР 'Н-спектроскопии было показано, что в растворе кардиоциклид существует в транси цисизомерных формах.

Изучено хроматографическое поведение кардиоциклида и его возможных примесных соединений.

Проведено изучение кислотно-основных и окислительно-восстановительных свойств кардиоциклида оксалата. Разработаны качественные реакции на препарат. Предложены методики количественного определения кардиоциклида оксалата по катиону, методом неводного титрования, и по аниону, методом перманганатометрии. Показано, что в субстанции кардиоциклида оксалата наряду с кислой солью, присутствует средняя соль основания кардиоциклида и щавелевой кислоты.

Изучено влияние различных факторов на субстанцию кардиоциклида. Показано, что препарат устойчив к воздействию влаги воздуха, повышенной температуры, но быстро разлагается под действием солнечного света.

Проведено изучение стабильности кардиоциклида оксалата в водных растворах. Установлено, что получение 1% водных растворов препарата возможно только при нагревании. В процессе хранения в виде водных растворов кардиоциклида оксалат подвергается гидролизу с образованием пара-нитробензойной кислоты, а также выпадает в осадок в виде кристаллов.

Проведено комплексное изучение физических, химических и физико-химических свойств кардиоциклида гидрохлорида. Установлена возможность использования для идентификации препарата его спектральных характеристик.

Показано, что для создания инъекционной лекарственной формы можно использовать 5% водный раствор кардиоциклида гидрохлорида. Изучены кислотно-основные свойства хлористоводородной соли препарата и стабильность субстанции и лекарственной формы под действием внешних факторов.

Проведенные комплексные исследования позволили сформулировать закономерности создания стабильной лекарственной формы нового антиаритмического препарата III класса — кардиоциклида.

Практическая значимость работы. Впервые были разработаны методики аналитического контроля субстанций кардиоциклида оксалата и кардиоциклида гидрохлорида, установлены показатели и нормы качества. Разработаны методики аналитического контроля инъекционных лекарственных форм препаратов. Показана неоднородность субстанции кардиоциклида оксалата и нестабильность его 1% инъекционного раствора.

Оформлены проекты ФСП на субстанцию кардиоциклида оксалата, кардиоциклида гидрохлорида и 5% раствор кардиоциклида гидрохлорида для инъекций.

Внедрение в практику. Методики анализа и стандартизации кардиоциклида гидрохлорида и кардиоциклида оксалата внедрены в ГУ НИИ фармакологии им. В. В. Закусова РАМН для контроля качества субстанций и лекарственных форм препаратов, которые использовались для проведения фармакологических, токсикологических и фармакокинетических исследований на стадии доклинического изучения.

Апробация работы. Основные результаты работы были доложены на межлабораторных конференциях ГУ НИИ фармакологии РАМН и на заседании кафедры фармацевтической химии фармацевтического факультета ММА им. И. М. Сеченова.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом НИР ГОУ ВПО ММА им. И. М. Сеченова, а также научными задачами ГУ НИИ фармакологии РАМН. Базой проведения исследований являлась, аналитическая группа опытно-технологического отдела ГУ НИИ фармакологии РАМН.

Публикация результатов исследования. По теме диссертации опубликованы 4 работы.

На защиту выносятся:

— результаты комплексного изучения физических, физико-химических и химических свойств новых фармакологически активных соединений, обладающих свойствами антиаритмических препаратов Ш класса — кардиоциклида оксалата и кардиоциклида гидрохлорида, полученные с использованием химических, спектральных, термических, хроматографических методов анализа;

— разработанные методики анализа субстанции и лекарственной формы кардиоциклида оксалата;

— разработанные методики анализа субстанции и лекарственной формы кардиоциклида гидрохлорида;

— результаты по изучению стабильности и влиянию различных факторов на качество субстанции и лекарственной формы кардиоциклида оксалата;

— результаты по изучению стабильности и влиянию различных факторов на качество субстанции и лекарственной формы кардиоциклида гидрохлорида.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ:

1. Впервые изучены физические, физико-химические и химические свойства новых фармакологически активных веществ, проявляющих свойства антиаритмических препаратов III класса — кардиоциклида оксалата и кардиоциклида гидрохлорида.

2. Изучены спектральные характеристики кардиоциклида гидрохлорида и кардиоциклида оксалата методами УФ-, ИК-спектроскопии, ЯМР 1Н. Проведена интерпретация спектров, определены их характеристические параметры, на основании которых подтверждена химическая структура препаратов.

3. Разработаны методики идентификации препаратов и определения содержания посторонних примесей методом тонкослойной хроматографии в субстанциях кардиоциклида оксалата и кардиоциклида гидрохлорида.

4. Разработаны методики качественных реакций на субстанции кардиоциклида оксалата и кардиоциклида гидрохлорида по различным функциональным группам.

5. Разработаны методики количественного определения субстанций препаратов методом неводного титрования. Разработана методика количественного определения кардиоциклида оксалата методом перманганатометрии.

6. Изучена стабильность кардиоциклида оксалата и кардиоциклида гидрохлорида в процессе хранения и под влиянием внешних факторов. Изучена устойчивость кардиоциклида оксалата под действием кислот ищелочей. Установлено, что препараты не устойчивы под действием солнечного света. На основании результатов изучения стабильности субстанций методом «ускоренного старения» установлены предварительные сроки хранения субстанций.

7. Изучены свойства и определены показатели качества водных растворов кардиоциклида оксалата и кардиоциклида гидрохлорида. Разработаны методики качественных реакций и хроматографического анализа растворов. Разработаны методики количественного определения препаратов в водных растворах с помощью УФ-спектрофотометрии и ВЭЖХ. Изучена стабильность водных растворов. Показано, что растворы кардиоциклида оксалата при хранении подвергаются гидролизу, а также в них происходит выпадение в осадок кристаллов действующего вещества.

8. В результате сравнительного изучения двух солей основания кардиоциклида, оксалата и гидрохлорида, была отобрана однородная субстанция — субстанция кардиоциклида гидрохлорида и создана стабильная лекарственная форма в виде 5% водного раствора кардиоциклида гидрохлорида для инъекций.

9. На основании проведенных исследований разработаны и оформлены проекты фармакопейных статей предприятия на субстанцию кардиоциклида оксалата, субстанцию кардиоциклида гидрохлорида и 5% водный раствор кардиоциклида гидрохлорида для инъекций.