Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Чувствительность эпидемических штаммов вирусов гриппа А и В к химиопрепаратам

Диссертация: Чувствительность эпидемических штаммов вирусов гриппа А и В к химиопрепаратам
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

В сезоне 2003;2004 гг. в ряде стран мира (Китай, Таиланд, США и др.) отмечено 30-кратное увеличение числа естественно циркулирующих штаммов, резистентных к ремантадину. По последним сообщениям американских коллег, проводивших изучение чувствительности вирусов гриппа А, изолированных в период октября 2005 г. -середины января 2006 г., число резистентных штаммов составило 91,0%, что стало причиной… Читать ещё >

Чувствительность эпидемических штаммов вирусов гриппа А и В к химиопрепаратам (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
  • РАЗДЕЛ 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
  • ГЛАВА 1. КЛАССИФИКАЦИЯ И СТРУКТУРА ВИРУСОВ ГРИППА
    • 1. 1. Геном вируса гриппа
    • 1. 2. Структура и свойства поверхностных и внутренних вирионных белков
      • 1. 2. 1. Белки полимеразного комплекса (РВ2, PB 1, РА)
      • 1. 2. 2. Гемагглютинин
      • 1. 2. 3. Нуклеопротеин
      • 1. 2. 4. Нейраминидаза
      • 1. 2. 5. Матриксный белок М1, мембранный белок М
      • 1. 2. 6. Неструктурные белки NS1 и NS
    • 1. 3. Исторические этапы изучения эпидемиологии и этиологии гриппа
    • 1. 4. Гипотезы о происхождении пандемических штаммов вирусов гриппа
  • ГЛАВА 2. ПРОТИВОВИРУСНЫЕ ХИМИОПРЕПАРАТЫ
    • 2. 1. Амантадин и ремантадин
    • 2. 2. Арбидол
    • 2. 3. Комбинированное применение арбидола и других противогриппозных химиопрепаратов
    • 2. 4. Занамивир и озельтамивир
    • 2. 5. Противовирусная активность препаратов в отношении вирусов гриппа птиц
    • 2. 6. Резистентность вирусов гриппа к химиопрепаратам
  • РАЗДЕЛ 2. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И
  • НАБЛЮДЕНИЙ
  • Глава 1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
    • 1. 1. Методы изучения антигенных свойств эпидемических штаммов
      • 1. 1. 1. Изоляция эпидемических штаммов вирусов гриппа из носоглоточных смывов
      • 1. 1. 2. Идентификация гемагтлютинирующих изолятов
    • 1. 2. Химиопрепараты и соединения
      • 1. 2. 1. Противовирусный препарат ремантадин
      • 1. 2. 2. Противовирусный препарат арбидол
      • 1. 2. 3. Производные индола
      • 1. 2. 4. Производные селена
    • 1. 3. Методы определения противовирусной активности препаратов
      • 1. 3. 1. Определение цитотоксического действия соединений
      • 1. 3. 2. Изучение чувствительности эпидемических штаммов вирусов гриппа к препаратам методом ингибирования цитопатического действия вирусов и в реакции гемагглютинации (РГА)
      • 1. 3. 3. Изучение чувствительности эпидемических штаммов вирусов гриппа к препаратам методом иммуноферментного анализа (ИФА)
      • 1. 3. 4. Изучение комбинированного действия противогриппозных препаратов методом ИФА
    • 1. 4. Метод секвенирования М2 белка вирусов гриппа
    • 1. 5. Методы статистической обработки результатов
  • ГЛАВА 2. ИЗУЧЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ЭПИДЕМИЧЕСКИХ ШТАММОВ ВИРУСОВ ГРИППА, А и В СЕЗОНОВ 2002—2005 гг. к РЕМАНТАДИНУ и АРБ ИДО Л У в
  • КЛЕТКАХ КУЛЬТУРЫ ТКАНИ МОСК
    • 2. 1. Антигенная характеристика эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В, циркулировавших в России в период 2002—2005 гг.
    • 2. 2. Изучение чувствительности к ремантадину вирусов гриппа А, циркулировавших в эпидемических сезонах 2002−2004 гг., в РГА
    • 2. 3. Оценка чувствительности методов изучения противовирусной активности арбидола в отношении эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В в клетках культуры ткани МОСК
      • 2. 3. 1. Изучение действия арбидола на инфекционный титр эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В в реакции гемагглютинации (РГА)
      • 2. 3. 2. Изучение действия арбидола на репродукцию эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В в клетках культуры МБСК с использованием метода ИФА
    • 2. 4. Изучение чувствительности эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В сезона 2004−2005 гг. к ремантадину и арбидолу в клетках культуры ткани МБСК методом ИФА
    • 2. 5. Оценка комбинированного применения ремантадина и арбидола в отношении эпидемических штаммов вирусов гриппа, А в клетках культуры ткани МБСК методом ИФА
    • 2. 6. Оценка вероятности частоты возникновения вирусов, резистентных к арбидолу, на фоне приема препарата у больных гриппом
  • ГЛАВА 3. ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТИ ПРОИЗВОДНЫХ ИНДОЛА в
  • ОТНОШЕНИИ ШТАММОВ ВИРУСОВ ГРИППА, А и В в
  • КЛЕТКАХ КУЛЬТУРЫ ТКАНИ MDCK МЕТОДОМ ИФА
    • 3. 1. Изучение цитотоксического действия соединений
    • 3. 2. Влияние аналогов арбидола на репродукцию эталонного штамма вирусов гриппа А/Калифорния/7/04 (H3N2) и эпидемического штамма В/Хабаровск/57/05 в клетках культуры ткани MDCK
    • 3. 3. Изучение противовирусной активности соединения 925 в отношении современных эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В в клетках культуры ткани MDCK
    • 3. 4. Изучение противовирусной активности соединения 937 в отношении современных эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В в клетках культуры MDCK
    • 3. 5. Изучение противовирусной активности соединения 938 в отношении современных эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В в клетках культуры MDCK
  • ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ АКТИВНОСТИ ПРОИЗВОДНЫХ СЕЛЕНА в
  • ОТНОШЕНИИ ЭТАЛОННЫХ и
  • ЭПИДЕМИЧЕСКИХ ШТАММОВ ВИРУСОВ ГРИППА, А и В в
  • КЛЕТКАХ КУЛЬТУРЫ ТКАНИ MDCK
    • 4. 1. Изучение цитотоксического действия соединений
    • 4. 2. Вирулицидное действие соединений селекартен, селенит и селекартеин в отношении эталонных вирусов гриппа, А и В в клетках культуры MDCK
    • 4. 3. Изучение активности селенпроизводных (селекартен, селенит, селекартеин) в отношении эталонного штамма вируса гриппа АЛСалифорния/7/04(НЗШ) в клетках культуры MDCK методом ИФА

    4.4. Изучение активности селенпроизводных (селекартен, селенит, селекартеин) в отношении эталонного вируса гриппа В/Гонконг/330/01 и современных эпидемических штаммов вирусов гриппа В в клетках культуры MDCK методом ИФА.

    ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

В настоящее время грипп остается глобальной проблемой. Во время обычных ежегодных эпидемий гриппом заболевает от 5 до 15% населения Земли, а во время пандемий гриппа это число может возрастать в 4−6 раз. Практически все эпидемии гриппа сопровождаются увеличением смертности. По данным экспертов ВОЗ, ежегодно в мире только тяжелыми формами гриппа заболевает от 3 до 5 млн. человек, а погибает от 250 000 до 500 000 человек [36,94]. Эпидемии гриппа наносят также огромный экономический ущерб, как отдельным лицам, так и обществу в целом. По данным Роспотребнадзора Минздравсоцразвития, в России в 2002 году экономический ущерб от гриппа и ОРВИ превышал 51 млрд. рублей, а в 2004 году уже составлял 82,6 млрд. рублей [15]. В США в последние годы экономический ущерб от эпидемий гриппа составлял от 71 до 167 млрд. долларов ежегодно [94].

Современный эпидемический процесс, обусловленный циркуляцией вирусов гриппа А (НЗШ), А (Н1Ш) и В, во многом определяется степенью изменчивости их поверхностных белков — гемагтлютининов (НА) и нейраминидаз (ИА). С одной стороны, поверхностные белки — НА и ЫА подвергаются постоянным изменениям, приводящим к постепенному вытеснению ранее циркулировавших среди людей штаммов вирусов гриппа. С другой стороны, сегментированная структура генома способствует формированию реассортантов между вирусами гриппа, А человека, млекопитающих и птиц, что, в свою очередь, может привести к возникновению нового пандемического варианта [6,18,27,50,123]. Участившиеся в последние годы случаи инфицирования людей и животных вирусами гриппа птиц А (Н5Ш), А (Н7М7), А (НЖЗ) и А (НШ2) в странах Южной и Юго-Восточной Азии, а в последнее время и в странах Европы, сопровождающиеся высокой смертностью, могут привести к возникновению пандемического варианта вирусов гриппа, А [89 104,134,141,145,154].

Наряду с вакцинами, являющимися в настоящее время ведущим средством профилактики гриппозной инфекции, важное значение, особенно в последнее время, имеют химиопрепараты со специфической активностью в отношении вирусов гриппа, А и В. К преимуществам химиопрепаратов можно отнести их значительно меньшую, чем у вакцин, зависимость от постоянной изменчивости вирусов гриппа, что увеличивает их роль в борьбе с гриппом в случае формирования и распространения нового пандемического варианта.

В России спектр препаратов, обладающих выраженной противогриппозной активностью, представлен блокаторами М2-белка вирусов гриппа, А (ремантадин и альгирем), ингибитором слияния липидной оболочки вирусов гриппа, А и В с мембранами эндосом арбидол) и ингибитором нейраминидаз вирусов гриппа, А и В (озельтамивир или Тамифлю&trade-) [ 11−13,25,78,82,85,106Д42,147,162,169,170].

Одним из препаратов, широко используемых на протяжении многих лет для лечения и профилактики гриппа А, как в России, так и за рубежом, является ремантадин. Однако, быстрое формирование резистентных к нему штаммов вирусов гриппа, А (особенно на фоне проводимого лечения) снижает эффективность его применения [54,70,76,80,85,125].

Результаты исследований, проведенных в период 1982;1995 гг. в разных странах мира, подтвердили факт циркуляции в естественных условиях резистентных к ремантадину штаммов вирусов гриппа А, число которых составляло менее 1,0%. [177].

В сезоне 2003;2004 гг. в ряде стран мира (Китай, Таиланд, США и др.) отмечено 30-кратное увеличение числа естественно циркулирующих штаммов, резистентных к ремантадину [58,59,130]. По последним сообщениям американских коллег, проводивших изучение чувствительности вирусов гриппа А, изолированных в период октября 2005 г. -середины января 2006 г., число резистентных штаммов составило 91,0%, что стало причиной запрета применения амантадина для лечения и профилактики гриппа в США в эпидемическом сезоне 2005;2006 гг. [59]. При этом в нашей стране в течение длительного периода времени такие исследования не проводили и данных в литературе не представлено. Необходимо также отметить, что с 2003 г. большинство штаммов вируса гриппа птиц A (H5N1), выделенных от диких и домашних птиц, а также людей, инфицированных этим подтипом вируса, были резистентны к ремантадину/амантадину [63,84].

Другим препаратом, обладающим прямым противовирусным действием, является отечественный химиопрепарат арбидол. Опыт 15-летнего использования арбидола в медицинской практике подтвердил эффективность и безвредность этого препарата. Высокая профилактическая и терапевтическая эффективность арбидола обусловлена его вирусспецифической активностью в отношении вирусов гриппа и ряда возбудителей ОРВИ, а также иммуномодулирующим, интерферониндуцирующим и антиоксидантным действием [2,4,8,9,11,21,39,40,45,48,74]. В опытах in vitro и in vivo показана его ингибирующая активность по отношению к ранее циркулировавшим вирусам гриппа, А и В. Определенный интерес представляло изучение спектра активности арбидола в отношении новых антигенных вариантов вирусов гриппа, А и В. Данные по риску формирования резистентности к арбидолу вирусов гриппа, А и В, а также факторам ее определяющим, в литературе описаны очень ограничено. Штаммы, резистентные к арбидолу, получены только в лабораторных условиях при проведении опытов in vitro после 15 и более пассажей вирусов в присутствии увеличивающихся концентраций арбидола в клетках культуры MDCK [124]. В связи с этим, большой интерес представляло изучение возможности формирования резистентных к арбидолу штаммов вирусов гриппа, А и В на фоне проводимой терапии.

В настоящее время актуальным представляется дальнейший поиск новых химических соединений, обладающих специфической активностью в отношении обоих типов вирусов гриппа — А и В. В этом плане, определенный интерес могут представлять соединения, производные индола (аналоги арбидола), синтез которых в настоящее время проводится в ряде институтов нашей страны (НИИ медицинской радиологии РАМН, г. Обнинск, ЦХЛС-ВНИХФИ, г. Москва). Кроме того, недавно были синтезированы препараты, содержащие селен производства Российского фонда «Содействие развитию наномолекулярных и биоселеновых технологий им. Алексея и Николая Новицких», изучение спектра противовирусной активности которых, в т. ч. и к вирусам гриппа, также имеет научно-практический интерес.

Все вышеизложенное послужило основанием для проведения исследований, представленных в настоящей работе.

Цель исследования.

Цель настоящего исследования заключалась в определении чувствительности современных эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В, циркулировавших в период 2002;2005 гг., к противовирусным препаратам с различным механизмом действия для обоснования целесообразности их применения или дальнейшего изучения.

Задачи исследования.

1. Выбрать оптимальные методы и отработать условия их постановки для оценки чувствительности эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В к химиопрепаратам со специфической противовирусной активностью.

2. Определить частоту возникновения естественно циркулирующих резистентных к ремантадину вирусов гриппа, А среди современных эпидемических штаммов сезонов 2002;2005 гг.

3. Изучить спектр чувствительности эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В к арбидолу.

4. Оценить эффективность комбинированного применения ремантадина и арбидолахимиопрепаратов с различным механизмом действия в отношении эпидемических штаммов вирусов гриппа, А в клетках культуры ткани МОСК.

5. Изучить возможность формирования резистентных к арбидолу штаммов вирусов гриппа на фоне приема препарата пациентами в период заболевания.

6. Определить чувствительность эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В к новым химическим соединениям — производным индола.

7, Изучить активность производных селена в отношении эталонных и эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В.

Научная новизна исследования.

1. Впервые в нашей стране установлен факт роста числа естественно циркулирующих резистентных к ремантадину вирусов гриппа, А среди современных эпидемических штаммов сезонов 2002;2005 гг. (с 9,5% до 17,0%), по сравнению с ранними исследованиями (1990;е годы), выявившими низкий показатель ремантадинрезистентных штаммов (менее 1,0%).

2. Показано наличие высокой активности арбидола в отношении эпидемических вирусов гриппа, А и В, в том числе штаммов вируса гриппа А, резистентных к ремантадину.

3. Впервые изучено комбинированное действие арбидола с ремантадином в отношении современных эпидемических штаммов вирусов гриппа А. Установлено, что комбинированное применение низких концентраций арбидола и ремантадина увеличивает ингибирующий эффект препаратов на вирусную репродукцию по сравнению с эффектом, оказываемым каждым из этих препаратов в отдельности.

4. Впервые проведено изучение возможности формирования резистентных к арбидолу штаммов вирусов гриппа, А и В при приеме его пациентами в течение 5 дней в период заболевания. В клиническом наблюдении не выявлено формирования резистентных к арбидолу штаммов на фоне рекомендуемого курса лечения.

5. Изучено 14 новых соединений — аналогов арбидола. Из них выявлено 3 соединения, обладающих специфической активностью в отношении вирусов гриппа, А и В, сравнимой с активностью арбидола.

6. Впервые изучено 3 новых соединения — производных селена. Установлено, что эти соединения обладали активностью в отношении эталонных и эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В.

Практическая значимость исследования.

Отработан и усовершенствован для практического применения в лаборатории метод иммуноферментного анализа (ИФА), позволивший проводить исследования чувствительности к химиопрепаратам эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В на 96-луночных панелях с клетками культуры ткани МОСК.

Факт роста показателя ремантадинрезистентных вирусов гриппа, А научно обосновывает необходимость дальнейшего проведения мониторинга по изучению чувствительности эпидемических штаммов вирусов гриппа, А к ремантадину и целесообразность его применения для лечения и профилактики в РФ.

Высокая активность арбидола в отношении современных эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В, включая ремантадинрезистентные штаммы вирусов гриппа А, и отсутствие случаев формирования резистентных к арбидолу вирусов гриппа, А и В на фоне проводимого курса лечения подтвердили существующие рекомендации для его применения в качестве профилактического и лечебного средства при гриппе в настоящее время.

Данные об увеличении противовирусной активности в клетках культуры МОСК препаратов ремантадина и арбидола при одновременном использовании открывают перспективу для клинического изучения этих препаратов при комбинированной терапии гриппа в целях более рационального и, вместе с тем, эффективного их применения и снижения риска формирования резистентных мутантов.

Выявление среди аналогов арбидола соединений с противовирусной активностью в отношении современных эпидемических штаммов вирусов гриппа, сравнимой с активностью арбидола, открывает новые возможности в расширении ассортимента средств химиопрофилактики и химиотерапии гриппа.

Результаты, полученные при исследовании противовирусной активности новых соединений производных селена, показавшие их ингибирующий эффект в отношении эталонных и эпидемических штаммов вирусов гриппа, открывают перспективы дальнейшего поиска и экспериментального изучения противовирусных препаратов среди селенпроизводных.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Иммуноферментный анализ (ИФА) является чувствительным методом для изучения спектра активности широко применяемых на практике специфических химиопрепаратов — ремантадина и арбидола в отношении циркулирующих штаммов вирусов гриппа.

2. Среди современных эпидемических штаммов установлена тенденция возрастания в России числа резистентных к ремантадину естественно циркулирующих вирусов гриппа А.

3. Арбидол обладает высокой активностью в отношении эпидемических штаммов вирусов гриппа А, в том числе, ремантадинрезистентных штаммов. Для штаммов вирусов гриппа В отмечена гетерогенность в их чувствительности к препарату.

4. Комбинированное применение ремантадина и арбидола в низких концентрациях в клетках культуры ткани MDCK в отношении современных эпидемических штаммов вирусов гриппа, А увеличивает ингибирующий эффект препаратов на вирусную репродукцию по сравнению с эффектом, оказываемым каждым из этих препаратов в отдельности.

5. В клиническом наблюдении, проведенном среди пациентов в период заболевания, не выявлено формирования резистентных к арбидолу штаммов вирусов гриппа, А и В на фоне приема препарата.

6. Химические соединения — аналоги арбидола и производные селена являются перспективными для дальнейшего изучения и поиска новых препаратов, обладающих активностью в отношении штаммов вирусов гриппа, А и В.

Апробация результатов исследования.

Результаты работ были представлены на международных симпозиумах и конференциях: Международном симпозиуме «Повышение готовности к пандемии гриппа на основе военно-гражданского сотрудничества», Санкт-Петербург, 9−11 мая 2003; Symposium materials «Strengthening influenza pandemic preparedness through civil military cooperation», Saint-Petersburg, may 9−11, 2003; Int. Conf. «Options for the Control of Influenza V», Nago City, Okinawa, Japan, October 7−11, 2003; Российской научно-практической конференции «Узловые вопросы борьбы с инфекцией», Санкт-Петербург, 1−2 декабря 2004; Международной конференции «Актуальные вирусные инфекции — теоретические и практические аспекты», Санкт-Петербург, 2−5 ноября 2004; The First International Conference on Influenza Vaccines for the World, Lisbon, Portugal, 24−26 May 2004; International Conference on Options for the Control of Influenza V, Elsevier, 2004; 5th Louis Pasteur Conference on Infectious Diseases, Institute Pasteur, Paris, France, 17−20 November 2004; IV Конгрессе детских инфекционистов России.

Актуальные вопросы инфекционной патологии и вакцинопрофилактики у детей", 14−16 декабря 2005 г.- International Conference «Bird Flu: The first pandemic of the 21st centure: a central role for antivirale», London, 19−20 January 2006,.

Публикации.

Основные результаты диссертации опубликованы в 16 научных трудах, в том числе 4 — в реферируемых журналах, материалах докладов на Международных и Всероссийских конгрессах, симпозиумах и конференциях, а также в отчетах НИР ГУ НИИ вирусологии им. Д. И. Ивановского РАМН.

Соавторами научных трудов являются: А. Н. Слепушкин, Е. И. Бурцева, В. Т. Иванова, А. Л. Беляев, Т. А. Оскерко, Л. Н. Меркулова, Р. З. Гатич (ГУ НИИ вирусологии им. Д. И. Ивановского РАМН) — И. А. Ленева (ЦХЛС-ВНИХФИ, г. Москва) — А. Л. Заплатников (Российская медицинская академия последипломного образования МЗ РФ, г. Москва). Автор глубоко благодарен и признателен всем своим соавторам.

Автор выражает искреннюю благодарность и глубокую признательность своим научным руководителям Заслуженному деятелю науки РФ, доктору медицинских наук, профессору А. Н. Слепушкину и доктору медицинских наук Е. И. Бурцевой за научное руководство, а также коллективу лаборатории этиологии и эпидемиологии гриппа ГУ НИИ вирусологии им. Д. И. Ивановского РАМН за ценные рекомендации, высказанные в ходе обсуждения результатов диссертации.

Структура и объем диссертации

.

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов, заключения, выводов, списка литературы, состоящего из 50 работ отечественных и 127 зарубежных авторов. Диссертация изложена на 120 страницах машинописного текста и включает 22 таблицы и 15 рисунков.

выводы.

1. Показано преимущество иммуноферментного анализа (ИФА) в модификации на панелях с клетками культуры ткани МОСК. для определения чувствительности эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В к противовирусным препаратам.

2. Впервые установлен факт возрастания в России числа естественно циркулирующих резистентных к ремантадину вирусов гриппа, А среди современных эпидемических штаммов сезонов 2002;2005 гг.: в эпидсезоне 2002;2003 гг. показатель составил 9,0% А (НШ1) и 10,0% А (НЗШ) — в эпидсезоне 2003;2004 гг. — 14,0% А (НЗШ) и 18,0% штаммов А (НЗЫ2) сезона 2004;2005 гг.

3. Результатами молекулярно-генетического анализа подтверждена характерная замена аминокислоты серина на аспарагин в 31 положении М2 белка эпидемических штаммов вирусов гриппа А (НЗ№), выявленных в ИФА как резистентные к ремантадину.

4. Впервые выявлена высокая активность арбидола в отношении эпидемических вирусов гриппа А, в том числе штаммов, резистентных к ремантадину. Подтверждена противовирусная активность арбидола в отношении эпидемических штаммов вирусов гриппа В, при этом отмечена гетерогенность в их чувствительности к препарату.

5. Показано увеличение эффекта подавления вирусной репродукции в клетках культуры МОСК при комбинированном использовании ремантадина и арбидола в отношении современных эпидемических штаммов вирусов гриппа А, по сравнению с эффектом, оказываемым этими же концентрациями препаратов в отдельности. Наиболее выраженное усиление активности получено при использовании низких концентраций ремантадина (0,001−0,005 мкг/мл) и арбидола (2,5−5,0 мкг/мл).

6. Впервые в клиническом наблюдении, проведенном среди пациентов, перенесших гриппозную инфекцию, вызванную вирусами гриппа А (НЗК2) или В, не выявлено формирования резистентных к арбидолу штаммов на фоне рекомендуемого курса лечения.

7. Показано, что химический ряд производных индола является перспективным для дальнейшего поиска новых соединений, обладающих активностью в отношении вирусов гриппа, А и В. Из 14 изученных новых соединений, 3 — обладали специфической активностью в отношении современных вирусов гриппа, А и В, сравнимой с активностью арбидола.

8. Установлено, что новые соединения — производные селена обладали активностью в отношении эталонных и эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В, что делает перспективным их дальнейшее изучение, с целью разработки противовирусных препаратов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

В настоящее время грипп остается серьезным заболеванием для населения всего мира, приводящим к огромным экономическим потерям и высокой смертности. Поверхностные белки вирусов гриппа — НА и ЯА подвергаются постоянным изменениям, приводящим к постепенному вытеснению ранее циркулировавших среди людей штаммов вирусов гриппа. Реассортация между штаммами вирусов гриппа, А человека, млекопитающих и птиц способствует возникновению нового пандемического варианта вируса гриппа А. Участившиеся в последние годы случаи инфицирования людей вирусами гриппа птиц А (Н5К1), А (НЖ7), А (Н7Ш) и А (Н9Ш) в странах Южной, Юго-Восточной Азии и Африки, сопровождающиеся высокой смертностью, могут стать причиной возникновения пандемического варианта.

Всемирной Организацией Здравоохранения в настоящее время помимо вакцинации как основного средства борьбы против гриппа рекомендовано применение препаратов этиотропного действия, то есть препаратов, направленных на определенную вирусспецифическую мишень в цикле вирусной репродукции. Значение химиопрофилактики возможно будет более ощутимым в случае появления нового пандемического варианта вируса гриппа А, быстрое распространение которого затруднит своевременное проведение массовой вакцинации населения в необходимом объеме. В России спектр таких препаратов представлен блокатором М2-белка вирусов гриппа, А — ремантадин и ингибитором слияния липидной оболочки вирусов, А и В с мембранами эндосом — арбидол.

Исследования по изучению чувствительности современных эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В в период с 2002 по 2005 гг. к этим противовирусным препаратам, проведенные в ГУ НИИ вирусологии им. Д. И. Ивановского РАМН, показали, что ремантадин обладал высокой противовирусной активностью (50,0−100%) в отношении большинства эпидемических вирусов гриппа, А в клетках культуры ткани МОСК. Однако в ходе эксперимента бьши выявлены вирусы гриппа А (НЗШ), резистентные к ремантадину, циркулирующие в естественных условиях, показатель которых в эпидемическом сезоне 2004;2005 гг. составил 18,0% и оказался выше по сравнению с результатами предыдущих сезонов 2002;2003 гг. (10,0%) и 2003;2004 гг. (14,0%).

Арбидол обладал выраженной противовирусной активностью (50,0−100%) в отношении всех изученных эпидемических штаммов вирусов гриппа А, в том числе, ремантадинрезистентных штаммов. Действие арбидола в отношении эпидемических штаммов вирусов гриппа В оказалось различным: 48,0% штаммов ингибировались арбидолом менее чем на 50,0%, в отношении остальных вирусов гриппа В активность арбидола составила 51,0−100%. Не было получено естественно циркулирующих резистентных к арбидолу штаммов вирусов гриппа. Проведенные дальнейшие исследования по изучению возможности возникновения резистентных к арбидолу вирусов гриппа, А и В в клинических условиях не выявили формирования арбидолрезистентных штаммов при приеме препарата пациентами в течение 5 дней лечения. Таким образом, в этом плане, лечение арбидолом обладает определенным преимуществом над ремантадином, к тому же, он эффективен при лечении гриппа В.

Одним из подходов к увеличению эффективности химиопрепарата против гриппозной инфекции является его использование в комбинации с другим препаратом, имеющим отличный от него механизм действия. Проведенное изучение эффективности сочетанного применения ремантадина и арбидола в отношении эпидемических штаммов вирусов гриппа, А показало, что их комбинация увеличивает ингибирующий эффект препаратов на вирусную репродукцию по сравнению с эффектом, оказываемым каждым из этих препаратов в отдельности при использовании их низких концентраций. Полученные данные подтвердили выраженное усиление взаимодействия арбидола и ремантадина, что может способствовать снижению лечебных дозировок, а значит токсичности, частоты побочных эффектов (особенно для ремантадина) и риска формирования резистентных мутантов.

Исследования с целью поиска соединений среди производных уже известных и широко применяемых в клинике химиопрепаратов могут привести к выявлению новых препаратов, обладающих высокой активностью в отношении вирусов гриппа. В исследовании была изучена активность новых соединений — аналогов арбидола и производных селена в отношении эталонных и эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В. Метод ИФА был успешно применен для первичного скрининга активных соединений среди аналогов арбидола и производных селена в отношении вирусов гриппа в клетках культуры МОСК. Использование этого метода позволяет оценивать противовирусную активность соединений быстро, количественно и объективно. Выявление с использованием метода ИФА среди производных индола и селена соединений с высокой ингибирующей активностью в отношении эпидемических штаммов вирусов гриппа открывает перспективы дальнейшего поиска новых химических соединений с противовирусной активностью.

Подводя итог полученным результатам, необходимо отметить следующее. Проведенное исследование подтверждает специфическую эффективность арбидола в отношении современных эпидемических штаммов вирусов гриппа, А и В, в том числе, ремантадинрезистентных штаммов гриппа А. Одновременно оно показывает преимущество арбидола по сравнению с ремантадином, как препарата более широкого спектра действия в настоящее время и не вызывающего формирования резистентности при применении по рекомендуемой схеме лечения. Факт роста показателя ремантадинрезистентных вирусов гриппа, А обосновывает необходимость дальнейшего проведения исследований по изучению чувствительности эпидемических штаммов вирусов гриппа, А к ремантадину и целесообразность его применения для лечения и профилактики. Данные об увеличении противовирусной активности препаратов ремантадина и арбидола при сочетанием использовании открывают перспективу для клинического изучения этих препаратов при комбинированной терапии гриппа.

Полученные результаты еще раз подчеркивают необходимость постоянного мониторинга определения чувствительности вирусов гриппа к химиопрепаратам и, в случае необходимости, замены их на новые и более активные препараты.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Т.А. Рекомендации ВОЗ и международных форумов по тактике борьбы с гриппом в связи с возможной пандемией.// Бюллетень «Вакцинация». -2003.-№ 3(27).-С.1−5.
  2. Беляев A. JL, Бурцева Е. И., Слепушкин А. Н. и др. Арбидол новое средство для профилактики гриппа и и острых респираторных вирусных инфекций у детей.// Вестник РАМН.-1996.-№ 3.-С.34−37.
  3. В.М., Игнатьева Г. С., Синицкая JI.B. и др. Новый химиопрепарат арбидол: профилактическая эффективность во время эпидемий гриппа.// ЖМЭИ.-1993.-№ 5.-С.40−43.
  4. С .Я. Классификация вирусов.// В кн.: Общая и частная вирусология. М: Медицина.-1982.-С.26−60.
  5. Ю.З. Пандемия гриппа: можно ли с ней бороться?// Вопросы вирусологии.-1995.-№ 2.-С.8−12.
  6. Ю.З. Вирусные мукозальные вакцины.// Вопр. вирусол.-1999.-№ 3.-С. 1000−105.
  7. Р.Г., Гуськова Т. А., Голиков П. П., Давыдов Б. В., Клычникова Е. В. Изучение антиокислительных свойств арбидола.// Химико-фармацевтический журнал.-1996.-№ 1(30).-С.3−5.
  8. Р.Г., Гуськова Т. А., Крылова Л. Ю., Николаева И. С. Механизмы иммуномодулирующего действия арбидола. //Вестник РАМН.-1999.-№ 3.-С.36−40.
  9. В.Е. Теория вероятностей и математическая статистика. // Москва: Высшая школа.-2002.-479с.
  10. Т.А. и Глушков Р.Г. Арбидол иммуномодулятор, индуктор интерферона, антиоксидант.// Москва.-1999.-93с.
  11. В.П., Осидак Л. В., Нацина В. К. и др. Химиопрепараты в терапии гриппа и других респираторных вирусных инфекций.// Антибиотики и химиотерапия.-1998,-№ 9.-С.29−34.
  12. Ф.И. Антивирусные препараты. — М: Медицина.-Москва.-1998, 192 с.
  13. Н.А. Антигенная структура гемагглютинина вируса гриппа, А подтипов Н5 и Н9 и фенотипические свойства его антигенных вариантов. // Дисс. на соиск.уч. степ, к. б. н. -М.-2003.
  14. Информационное письмо Минздрава России от 01.09.2003. N2510/9821−03−32 «Об итогах эпидсезона по гриппу и прогнозе на 2003−2004 годы».
  15. Информационное письмо Минздрава России от 01.09.2004. N1 «Об усилении мероприятий по профилактике гриппа и острых респираторных вирусных инфекций».
  16. Информационное письмо Минздрава России от 30.06.2005. N0100/4961−05−32 «Об итогах эпидсезона по гриппу и ОРВИ 2004−2005 гг. и прогнозе на эпидсезон 2005−2006 гг.».
  17. Н.В., Смирнов Ю. А. Межвидовая передача вируса гриппа, А и пандемии гриппа. //Вопросы вирусологии.-2003.-№ 3.-С.4−10.
  18. Г. И. Грипп: Руководство для врачей.// СПб.: Гиппократ.-2001.-360 с.
  19. К.Н., Каршнов В. А., Киселев О. И., Мишин В. П., Гринбаум Е. Б., Бурмистрова В. В. Происхождение резистентности к химиопрепаратам у природных изолятов вирусов гриппа. // Вестник РАМН.-1995.-№ 9.-С.36−41.
  20. С.А., Палатная Л. А., Литус В. И. Опыт применения арбидола при лечении и профилактике гриппа и ОРВИ у детей на Украине.// Русский медицинский журнал.-2003.-№ 21.-С. 1050−1051.
  21. О.И. Тез. докл. конференции, посвященной Актовому дню Санкт-Петербургского Института им. Пастера.-С.~Петербург.-1993.-С.9−11.
  22. О.И., Степанова Л. А., Сафонова Л. С., Розаева Н. Р. Клиническая аппликация иммуномодулирующих свойств арбидола при ОРВИ.-Тез. докл. IV Российского Национального Конгресса «Человек и лекарство».-Москва.-1997.-С.269.
  23. И.А., Глушков Р. Г., Гуськова Т. А. Лекарственные средства для химиотерапии и химиопрофилактики гриппа: особенности механизма действия, эффективность и безопасность (обзор).//Химико-фармацевтический журнал.-2004.-Т.38.-№ 11.-С.8−14.
  24. Д.К., Ямникова С. С., Забережный А. Д., Гребенникова Т. В. Межпопуляционные взаимодействия в системе вирусы гриппа А-животные-человек. // Вопросы вирусологии.-2005.-№ 4.-С.4−11.
  25. Методические указания к работе опорных баз Всесоюзного центра по гриппу и ОРЗ. Л.-986.-С.40−42.
  26. Методы определения показателей качества иммунобиологических препаратов для профилактики и диагностики гриппа.// Методические указания МУ 3.3.2.1758−03.-М., 2005.
  27. Обросова-Серова Н.П., Бурцева Е. И., Невский И. М. и др.// Вопросы вирусол.-1991,-№ 5.-С.380−381.
  28. Патент РФ № 2 008 004, Бюл. изобрет.-№ 4.-1994.
  29. Патент РФ № 2 033 156, Бюл. изобрет.-№ 11.-1995.
  30. Е.П. «Оптимизация системы профилактических и лечебных мероприятий при гриппе и ОРВИ в условиях мегаполиса»: Дис.докг. мед. наук: 14.00.30.//Москва.-РМАПО. -2002.-203с.
  31. АН. Грипп и другие ОРВИ.// под ред. В. И. Покровского, Г. Г. Онищенко, Б. П. Черкасского Эволюция инфекционных болезней в России в XX веке.-М.: «Медицина». -2003.-С. 184−214.
  32. А.А. Принципы поиска, изучения новых противовирусных химиопрепаратов и место химиопрофилактики гриппа в системе противогриппозных мероприятий// Химиопрофилактика и химиотерапия гриппа.-Л.-1972.-С.11−18.
  33. .П., Руднева И. А. Изучение изменчивости белков вируса гриппа А. // Вопр. вирусол.-1981.-№ 4.-С.471−477.
  34. .П., Карпова НА., Кумин Ю. С. Иммуномодулирующие свойства арбидола.// Хим. фарм. журн.-1995.-№ 3.-С. 14−15.
  35. В.Ф., Харламова С. Г., Чешик С. Г. Применение арбидола и амиксина в качестве этиотропной терапии гриппа и ОРВИ у детей.// Педиатрия.-2004.-№ 5.-С.73−77.
  36. И.Т., Ямникова С. С., Галегов Г. А., Львов Д. К. Действие противовирусных препаратов на репродукцию вируса гриппа птиц А/Н5, изолированного в России.//Вопр. вирусол.-2005.-№ 5.-С.35−37.
  37. И.Т., Ленева И. А., Ямникова С. С., Львов Д. К., Глушков Р. Г., Шустер A.M. Чувствительность вирусов гриппа А/Н5, изолированных от диких птиц на территории России, к арбидолу в культуре клетокMDCK. //Вопр. вирусол.-2005.-№ 6.-С.32−35.
  38. Л.В., Шебекова В. М., Слепушкин А. Н. и др. Новые лекарственные препараты.-1995.-№ 3.-С.19−22.
  39. Г. Г. Особенности эпиднадзора при гриппе и его усовершенствование. // Автореф. K.M.H.-1992.-C.1−3.
  40. С.Г., Вартанян Р. В. Эффективность терапии арбидолом при острых респираторных вирусных инфекциях у детей раннего возраста.// Новые лекарственные препараты. -2004. -№ 11. -С.37−44.
  41. В.В., Ермаченков И. А., Голованова И. В. Фармакокинетика арбидола у крыс. // Химико-фармацевтический журнал.-1993.-№ 9.-С.11−14.
  42. И. Грипп и острые респираторные заболевания приоритетная социально-экономическая проблема здравоохранения.// В сб. Вакцинопрофилактика гриппа.-М.: 1998.-С.10−16.
  43. В.И., Шустер А. М., Лобастов С. П., Шевцов В. А., Медников Б. Л., Пиявский С. А., Литус В. И. Эффективность арбидола при профилактике и лечении острых респираторных инфекций.//Военно-медицинский журнал.-2002.-Т.9.-С.51−53.
  44. М. Антигенные варианты нейраминидазы вируса гриппа и роль антинейраминидазных антител.// В кн.: «Профилактика и лечение гриппа». -Ленинград.-1976.-С. 17−38.
  45. С.С., Ковтун Т. О., Дмитриев Г. А., Аристова В. А., Русанов Г. М., Конечный А. Г., Львов Д. К. Циркуляция вируса гриппа, А серотипа Н13 среди чайковых птиц Северного Каспия (1979−1985 гг.). //Вопросы вирусологии.-1989.-Т.4.-С.426−430.
  46. Air G.M., Gibbs A. J., Laver W.G., Webster R.G. Evolutionary changes in influenza В are not primary governed by antibody selection.//Proc.Natl.Acad.Sei., USA.-1990.V87.-P.3884−3888.
  47. Aoki F.Y., Macleod M.D., Paggiaro P. et al. Early administration of oral oseltamivir maximizes the benefits of influenzatreatment.// J.Antim.Agents Chem.-2003.-V.51(l).-P. 123−129.
  48. Baltimor D. Expression of animal virus genomes.// Bacterial Rev.-1971.-V.35-P.235−241.
  49. Belshe R. B, Burk В., Newman F., Cerruti R.L., Sim I.S. Resistance of influenza A virus to amantadine and rimantadine: results of one decade of surveillance.// J.Inf. Dis.-1989.-V.159.- P.430−435.
  50. Belshe R.B., Hay A.J. Drug resistance and mechanisms of action on influenza A viruses // J. Respir. Dis.-1989.-V. 10.-P.952−961.
  51. Berton H.T., Webster R.G. The antigenic structure of the influenza В virus haemagglutinin: operation and topological mapping with monoclonal antibodies. // Virology.-1985.-V.143.-P.583−594.
  52. Bizebard Т., Gigant В., Rigolet P. et al. Structure of influenza virus hemagglutinin complexed with a neutralizing antibody.// Nature.-1995.-V.376 (6).-P.92−94.
  53. Bright R.A., Medina M., Xu X. et al. Incidence of adamantane resistance among influenza A (H3N2) viruses isolated worldwide from 1994 to 2005: a cause to concern.//Published online.-September 22, 2005.-D01:10.1016/S0140−6736(05).-67 340−0.
  54. Bright R.A., Shay D.K., Shu Bo, Cox N.J., Klimov A.I. Adamantane resistance among influenza A viruses isolated early during the 2005−2006 influenza season in the United StatesV/JAMA, Published online.-February 2, 2006.-D01: 10.1001/jama.295.8.joc60020.
  55. Brooks M. Studies with the antiviral drug Arbidol. Диссертация. Australia, Melburn.-2003.-140 p.
  56. Calfee D., Preng A., Hussey E. et aIII Antivir. Ther.-1999.-V.4(3).-P. 143−149.
  57. CDC/WHO Avian influenza Response Team. Outbreaks of avian influenza A (H5N1) in Asia and interim recommendations for evaluation and reporting of suspected cases — United States.// MMWR Morb.Mort.Wkly.Rep.-2004.-V.53.-P.97−100.
  58. Choppin P.W., Compans R.W., Scheild A. J. Mesharry and S. Zazarowitz Structure and assembly of viral membrane.-1972.-P. 163−179.
  59. Choppin P.W., Schild A. The role of viral glycoproteine in adsorption, penetration and pathogenicity of viruses.// Rev.Infect.Diseases.-1980.-V.2.-N 1.-P.40−61.
  60. Cooper N.J., Sutton A.J., Abrams K.R. et al. Effectiveness of neuraminidase inhibitors in treatment and prevention of influenza A and B: systematic review and meta-analyses of randomized controlled trials.//Br. Med. J.-2003.-V.326(7401).-P.1235.
  61. Daniels R.S., Downie J.C., Hay A.J., Knossow M., Skehel JJ., Wang M.L., Wiley D.C. Fusion mutants of the influenza virus HA glycoprotein. // Cell.-1985.-V.40.-P.431−439.
  62. Davies W.L., Grunert R.R., Haff R., et al. Antiviral activity of 1-adamantanamine (amantadine).// Science.-1964.-V. 144.-P.862−863.
  63. Davies H.W., Appleyard G., Cunnighan P. and Pereira M.S. The use of continuous cell line for the isolation of influenza virus.// Bull. WHO.-1978.-V.56.-P. 1991−1993.
  64. Englund J.A. and others Common emergence of amantadine and rimantadine resistant influenza A viruses in symptomatic immunocompromised adults. // Clin.Infect.Dis.-1998.-V.26.-P.1418−1424.
  65. Foucher R.A.M., Munster V., Wallenste A. et al. Characterization of a novel influenza A virus haemagglutinin subtype (HI6) obtained from black-headed gulls. // J. of Virology. -2005.-V.79.-N5.-P.2814−2822.
  66. Francis T. Jr. A new type of virus from epidemic influenza.// Science.-1940.-V.92.-P.405−406.
  67. Galegov G.A., Pushkarskaya N.L., Obrosova-Serova N.P. et al. Combined action of ribavirine and rimantadine in experimental myxovirus infection //Experientia.-1977.-V.33,-N 7.-P.906−908.
  68. Glushkov R.G. Arbidol. Antiviral, Immunostimulant, Interferon inducer.// Drug of the Future.-1992.-N. 17.-P. 1079−1081.
  69. Gubareva L.V., Matrosovich M.N., Brenner M.K. et al. Evidence for zanamivir resistance in a immunocompromised child infected with influenza B virus.// J.Infect.Dis.-1998.-V.178.-P. 1257−1262.
  70. Hay AJ. Amantadine and rimantadine mechanisms.// In book: Antiviral Drug Resistance, Richman D. (ed), Willey J. and Sons Ltd, Chichester, UK.-1996.- P.43−58.
  71. Hayden F.G. Combination of antiviral agents for treatment of influenza virus infection //J.Antimirob.Chemother.-1986.-V.18.-Suppl B.-P.77−83.
  72. Hayden F.G., Monto A.S. Oral rimantadine hydrochloride therapy of influenza A virus H3N2 subtype infection in adults. // Antimicrob. Agents and Chemother.-1986.-V.29.-N2.-P.339−341.
  73. Hayden F.G., Belshe R.B., Clover R.D. et al. Emergence and apparent transmission of rimantadine-resistant influenza A in families.//N. Eng. J. Med.-1989.-V.281.-P.579−584.
  74. Hayden F.G., Belshe R.B., Clover R.D. et al. Emergence and apparent transmission of rimantadine-resistant influenza A virus in families.// N.Eng.J.Med.-1989.-V.321.-P.1696−1702.
  75. Hayden F.G., Aoki F.Y. Amantadine, rimantadine and related agents. // In Antimicrobial therapy and vaccines, ed. V.L.Yu, T.C.Merigan, S.L.Barriere, Baltimore: Williams and Wilkins.-1999.-P. 1344−1365.
  76. Hayden F.G., Atmar R.L., Schilling M. Use of the selective oral neuraminidase inhibitor oseltamivir to prevent influenza // N Engl J Med.-1999.-V.341.-P. 1336−1346.
  77. Hayden F.C., Gubareva L.V., Monto A.S. et al. Inhaled zanamivir for prevention of influenza in families. Zanamivir Family Study Group.// N.Eng.J.Med.-2000.-V.343.-P. 12 821 289.
  78. Hayden F.G. Perspectives on antiviral use during pandemic influenza.// Phil.Trans.R. Soc.Lond.B.-2001 .-V.356.-P. 1877−1884.
  79. Hayden F. WHO Guidelines on the Use of Vaccines and Antivirals during Influenza. // Annex 5-Considerations for the Use of Antivirals during an Influenza pandemic.-Geneva.-2−4 October, 2002.
  80. M.R. Коментарий о гриппе A(H1N1) 1977−78 годов. Молекулярная биология вируса гриппа, 1979.// Сборник Инст. вирусологии АМН СССР, Москва.-1979.-Р.6−7.
  81. Hogue B.G., Nayak D.P. Synthesis and processing of the Influenza virus neuraminidase a type П transmembrane glycoprotein.// Virology.-1992.-V. 188.-P.510−517.
  82. Horadam V.M., Sharp J.G., Smilack J.D. Pharmacokinetics of amantadine hydrochloride in subjects with normal and impaired renal functions. // Annals of Internal Medicine 94.-1981,-P.454−458.
  83. Influenza.//Weekly Epidemiol. Rec.-2002.-N.28.-V.77.~P.230−240.
  84. Influenza.// Weekly Epidemiol. Rec.-2002.-N.46.-V.77.-P.381−384.
  85. Influenza.//Weekly Epidemiol. Rec.-2003.-N.8.-V.78.-P.49−50.
  86. Influenza.// Weekly Epidemiol. Rec.-2003.-N.9.-V.78.-P.88−92.
  87. Influenza.//Weekly Epidemiol. Rec.-2003.-N.10.-V.78.-P.65−66.
  88. Influenza.//Weekly Epidemiol. Rec.-2003.-N.ll.-V.78.-P.73−78.
  89. Influenza.//Weekly Epidemiol. Rec.-2003.-N.13.-V.78.-P.94−96.
  90. Influenza.//Weekly Epidemiol. Rec.-2003.-N.16.-V.78.-P.136.
  91. Influenza.//Weekly Epidemiol. Rec.-2003.-N.43.-V.78.-P.378−380.
  92. Influenza.//Weekly Epidemiol. Rec.-2004.-N.3.-V.79.-P. 13−14.
  93. Influenza.//Weekly Epidemiol. Rec.-2004.-N.4.-V.79.-P.41−42.lOO.Influenza.// Weekly Epidemiol. Rec.-2004.-N.6.-V.79.-P.53−54.
  94. Influenza.//Weekly Epidemiol. Rec.-2004.-N.7.-V.79.-P.65−70.
  95. Influenza.//Weekly Epidemiol. Rec.-2004.-N.9.-V.79.-P.88−92.
  96. Influenza.// Weekly Epidemiol. Rec.-2004.-N.29.-V.79.-P.265−266.
  97. Influenza.// Weekly Epidemiol. Rec.-2004.-N.32.-V.79.-P.291−292.
  98. Ito Toshihiro, Goto Hideo, Yamamoto Eiji et al. Generation of a highly pathogenic avian influenza A virus from an avirulent field isolate by passaging in chickens // J.Virol.-2001.-V.75.-N9.-P.4439−4443.
  99. Jefferson T. D, Demicheli V., Deeks JJ et al. Amantadine and rimantadine for preventing and treating influenza A in adults.// The Cochraine Library, Issue 1, Willey J. and Sons Ltd, Chichester, UK.-2004.
  100. Kaiser L., Henry D., Flack N.P. et al. Short-term treatment with zanamivir to prevent influenza: results of placebo-controlled study.//Clin.Infect.Dis.-2000.-V.30.-P.587−589.
  101. Kantarovich-Prokudina E.N., Semyonova N.P., Yamnikova S.S., Berezina O.N., Zhdanov V.M. DNA Sequences in influenza virions.// J. Gen. Virol.-1978.-V.41.-P.405−409.
  102. Kawaoka Y., Krauss S., Webster R.G. Avian to human transmission of the PB1 gene of influenza A virus in the 1957 and 1968 pandemics.// J.Virol.-1989.-V.63.-P.4603−4608.
  103. Kawaoka Y., Yamnikova S., Chambers T.M., Lvov D.K., Webster R.G. Molecular characterization of a new haemagglutinin, subtype H14 of influenza A virus. // Virology.-1990.-V. 179.-P.759−767.
  104. Kinchington D., Kangro H., Jeffries D. Design and testing of antiviral compounds. // In Medical Virology: Oxford University Press.-1997.-P. 147−160.
  105. Kiso M., Mitamura K., Sakai-Tagawa Y. et al. Resistant influenza A viruses in children treated with oseltamivir: descriptive study.// Lancet.-2004.-V.264.-P.759−765.
  106. Kung H.C., Jen K.F., Yuan W.C. et al. Influenza in China in 1977: recurrence of Influenza virus A subtype (H1N1).//Bull. Wld Hlth Org.-1978.-V.56.-P.913−918.
  107. Lamb R.A., Lai C.J., Choppin P.W. Sequences of mRNAs derived from genome RNA segment 7 of influenza virus: collinear and interrupted mRNAs code for overlapping proteins.//Proc. Natl. Acad. SciUSA.-1981.-V.78(7).-P.4170−4174.
  108. Lamb R. A The Influenza virus RNA segments and their encoded proteins.// In book: Genetic of Influenza viruses. Edds. Palese P., Kingsburg D.W. Springer-Verlay, Wien. New York>1983.-P.21−70.
  109. Lamb R.A., Zebedee L.S., Richardson C.D. Influenza vims protein in an integral membrane protein expressed on the infected cell surface.// Cell.-1985.-V.40.-P.627−633.
  110. Lamb R. A. Genes and proteins of the influenza viruses in the Influenza viruses.// Edited by R.M.Krug, New York -London: Plenum Press.-1989.-P.l-87.
  111. Laver W.G., Bischofberger N., Webster R.G. Disarming Flu Viruses.// Scientific American.-1999.-V.280.-P.78−87.
  112. Lazarowitz S.G., Compans R.W., Choppin P.W. Influenza virus structural and nonstructural proteins in infected cells and their plasma membranes.// Virology.-1971.-V.46.-P.830−843.
  113. Leneva I.A., Roberts N., Webster R.G. Efficacy of oseltamivir on H5N1 and H9N2 influenza viruses // II International Symposium on Influenza and other Respiratory Viruses.-Grand Cayman, 1999.-Abstr.
  114. Leneva I. and Hay A. The mechanism of action of arbidol against influenza virus-selection and characterization of arbidol-resistant mutants // 12th International Congress of Virology.-Paris.-2002.-Abs. 1077.
  115. Magill T.P. A virus from cases of influenza-like upper respiratory infections.// Proc. Soc.exp. Biol.med.-1940.-V.45.-N.l.-P.162.
  116. Marra F., Marra C.A., Stiver H.G. A case for rimantadine to be marketed in Canada for prophylaxis of influenza A virus infection. // Can.RespJ.-2003.-V.10.-P.381−388.
  117. Masuda H., Suzuki H., Oshitani H., et al. Incidence of amantadine-resistant influenza A viruses in sentinel surveillance sites and nursing homes in Niigata, Japan.// MicrobiolJmmunol.-2000.-V.44.-P.833−839.
  118. McKimm-Breshkin J., Trivedi T., Hampson A. et al. Neuraminidase sequence analysis and susceptibilities of influenza virus clinical isolates to zanamivir and oseltamivir. //
  119. Antimicrob. Agents Chemotherapy.- 2003.- V. 47.-P. 2264−2272.
  120. MMWR.-V.55(02).-2006.-P.44−46.
  121. Monto A., Arden N. Implications of viral resistance to amantadine in control of influenza A.// Clin.Infect.Dis. -1992. -V. 15. -P.362−367.
  122. Monto A.S., Fleming D.M., Henry D. Efficacy and safety of neuraminidase inhibitor zanamivir in the treatment of influenza A and B infections.// J. Infect. Dis.-1999.-V. 180(2).-P.254−261.
  123. Monto A.S., Robinson D.P., Herlocher L. et al. Zanamivir in the prevention of influenza among healthy adults.// J.Am.Med.Assoc.-1999.-V.282.-P.31−36.
  124. Mounts A.W., Kwong H., Izurieta H.C. et al. Case-control study of risk factors for avian influenza A (H5N1) disease, Hong Kong, 1997.//J.Infect.Dis.-1997.-V.180.-P.505−508.
  125. Mungall B.A., Xu X., Klimov A. Surveillance of influenza isolates for susceptibility to neuraminidase inhibitors during the 2000−2001 influenza seasons.// Virus research. An Intern. J.Mol.Cell. Virol.-2004.-V.103.-P. 195−197.
  126. Murphy K., Eivindson A., Paukens K. et al. Efficacy and safety of inhaled zanamivir for the treatment of influenza in patients with asthma or chronic obstructive pulmonary disease.// Clin. Drug Invest.-2000.-V.20.-P.337−349.
  127. Nakamura K., Compans R.W. Glycopeptide components of influenza viral glycoproteins.// Virology.-1978.-V.96.-P.432−442.
  128. Palese P., Shulman J.L. Mapping of the influenza virus genome: identification of the hemagglutinin and the neuraminidase genes.//PNAS USA.-1976.-V.73.-P.2142−2146.
  129. Palese P. and Shulman J. in: Chemoprophylaxis and virus infections of the respiratory tract. J.S. Oxford (ed).// CRC Press, Cleveland.-1977.-V.l.-P.189−205.
  130. Peiris M., Yam W.C., Chan K.H. et al. Influenza A (H9N2): aspects of laboratory diagnosis.// J.Clin.Microbiol.-1999.-V.37.-P.3426−3427.
  131. Peters P.H., Gravenstein S., Norwood P. et al. Long term use of oseltamivir for the prophylaxis of influenza in a vaccinated frail elderly population.// J.Am.Geritr.Soc.-V.49.-P.1025−1031.
  132. Pinto L.H., Holsinger L.J., Lamb R.A. Influenza virus M2 protein has ion channel activity.// Cell.-1992.-V.69.-P.517−528.
  133. Porter A.G., Smith J.C., Emtage J.S. The sequence of influenza virus RNA segment 8 indicates that the coding regions for the NS1 and NS2 protein overlap.// PNAS USA.-1980.-V.77.-P. 5074−5078.
  134. Potter Ch.W. Chronicle of Influenza Pandemics.// Chapter 1. Textbook of Influenza. Blackwell Science Ltd, London.-1998.-P.3−18.
  135. Prosch S.H., Heider H., Schroder C., Kruger D.H. Mutations in the hemagglutinin gene associated with influenza virus resistance to norakin. // Arch.Virol.-1988.-V.102.-P.125−129.
  136. Recommendations and Reports. Prevention and control of influenza. April 12, 2002.-V.51.-No.RR-3.-P. 16.
  137. Richardson J.C.W., Scolera V. et Simmonds N.L. Identification of two strains of MDCK cells which resemble separate nephron tubule segments.// Biophys. Acta.-1981.-V.673.-P.26−36.
  138. Rohm C., Zhou N., Suss J., Mackenzie J., Webster R. Characterizationof novel influenza hemagglutinin HI 5, criteria for determination of influenza A subtypes.// Virology.- 1996,-V.217.-P.508−516.
  139. Shibata S., Yamamoto F.-Goshima, Maemo K. at al. Characterization of temperature-sensitive influenza B virus mutantdefective in neuraminidase.// J. Virol.-1993.- V.67.-N 6.-P.3264−3273.
  140. Smorodintsev A.A., Zlydnikov D.M., Kiseleva A.M. et al. Evaluation of amantadine in artificially induced A2 and B influenza.// J. Am. Med. Ass.-1970.-V.213(9).-P. 1448−1454.
  141. Steinhauer D.A., Sauter N.K., Skehel J.J., Wiley D.C. Receptor binding and cell entry by influenza viruses. // Semin.Virol.-1992.-V.3.-P.91−100.
  142. Suarez D.L., Perdue M.L., Cox N.J. et al. Comparisons of highly virulent H5N1 influenza A viruses isolated from humans and chickens from Hong Kong.// J.Virol.-1998.-V.72.-P.6678−6688.
  143. Subbaro K., Klimov A., Katz J. et al. Characterization of an avian influenza A (H5N1) virus isolated from a child with a fatal respiratory illness //Science.-1998.-V.279.-P.393−396.
  144. Surgue R.J., Hay A.J. Srructural characteristics of the M2 protein of influenza A viruses: evidence that it forms a tetrameric channel. // Virology.-1991.-V.180.-P.617−624.
  145. Taubenberger J.K., Reid A.H., Kraft A.E., Bijward K.E. Fanning T.G. Initial genetic characterization of the 1918 «Spanish influenza virus».// Science.-1997.-V.275.-P.1793−1796.
  146. The MIST Study Group, Lancet.-1998.-V.352.-P.1877−1881.
  147. Tisdale M. Monitoring of viral susceptibility: new challenges with the development of influenza NA inhibitors.// Rev.Med.Virol.-2000.-V.10.-P.45−55.
  148. Tominack R.L., Hayden F.G. Rimantadine hydrochloride and amantadine hydrochloride use in influenza A virus infections. // Infect.Dis.Clin.of North America, Philadelphia.-1987.-P.459−478.
  149. Tominack RL., Willis R.G., Gustavson L.E., Hayden F.G. Multiple-dose pharmacokinetics of rimantadine in elderly adults. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy.-1988.-V.32,-P.1813−1819.
  150. Tsuchiya E., Sugawara K., Hongo S., Matsuzaki Y., Muraki Y., Li Z.N., Nakamura K. Antigenic structure of the haemagglutinin of human influenza A (H2N2) virus. // J. Gen. Virol.-2001.-V.82.-P.2475−2484.
  151. Tsunoda A., Maasab H.F., Cochran K.W. et al. Antiviral activity of a-methil-l-adamantane-methylamine hydrochloride // Antimicrob. agents chemother.-1965.-V.5.-P. 553−556.
  152. Turner D., Wailoo A., Nicholson K. et al. Systematic review and economic decision modeling for the prevention and treatment of influenza A and B.// http://www. nice, org. uk/pdf7influenzaassrep. pdf,
  153. Valette M., Allard J.P., Aymard M., Millet V. Susceptibilities to rimantadine of influenza A/H1N1 and A/H3N2 viruses isolated during the epidemics of 1988 to 1989 and 1989 to 1990.// Antimicrob. Agents Chemother.-1993.-V.37.-P.2239−2240.
  154. Webster KG., Bean W.J., Corman O.T., Chambers T.H., Kawaoka Y. Evolution and ecology of influenza A viruses.// Microbiol.Rev.-1992.-V.56.-P. 152−179.
  155. Webster KG., Kavaoka Y. Influenza an emerging and re-emerging disease.// Seminar in Virology. -1994.-V. 5 .-P. 103−111.
  156. Welliver R., Monto S., Carewicz O. et al. Effectiveness of oseltamivir in treatment of acute influenza: a randomized trial.// Lancet.-2000.-V.355.-P.1845−1850.
  157. Whiley R.J., Hayden F.G., Reisinger K. et al. Oral oseltamivir treatment of influenza in children.//Pediatr.Infect.Dis.-2001.-V.20.-P. 127−133.
  158. Wiley D.S., Wilson I.A., Skehel J.J. Structural identification of the antibody binding sites of Hong Kong influenza haemagglutinin and twir involvement in antigenic variation.// Nature.-1981.-V.289.-P.373−378.
  159. Wiley D.C., Skehel J J. The structure and function of the hemagglutinin membrane glycoprotein of influenza virus.// Annual Revier of Biochemistry.-1987.-V.56.-P.365−394.
  160. Wilson I. A., Skehel J J., Wiley D.C. Structure of haemagglutinin membrain glycoprotein of influenza virus at 3 A resolution.// Nature (London).-1981.-V.289.-P.365−373.
  161. Woodhead M., Lavanchy D., Johnston S. et al. Neuraminidase inhibitors: progress in the management of influenza. // InterJ.Clin.Pract.-2000.-V.54.-P.604−610.
  162. Yasuda J., Nakada S., Kato A., Toyoda T., Ishihama A. Molecular assem by of Influenza virus association of the NS2 protein with virion matrix.// J. Virol.-1993.-V. 196.-P.249−255.
  163. Ye Z., Baylor N.W., Wagner R.R. Transcription inhibition and RNA binding domains of influenza A virus matrix protein mapped with anti-idio typic antibodies and synthetic peptides.//J. Virol.-1989.-V.63.-P.3586−3594.
  164. Ziegler T., Hemphill M.L., Ziegler M.L. et al. Low incidence of rimantadine resistance in field isolates of influenza A viruses. // The Journal of infectious diseases.-1999.-V. 180(4).-P.935−939.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!