Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Ферментативное получение низкомолекулярного хитозана и изучение его антибактериальных свойств

Диссертация: Ферментативное получение низкомолекулярного хитозана и изучение его антибактериальных свойств
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Результаты исследований с помощью атомно-силовой микроскопии показали, что в отличие от контрольных препаратов после обработки клеток В. subtilis хитозаном с Mv бкДа наблюдалось увеличение пространства между отдельно лежащими клетками, не просматривались пили, поверхность клеток становилась бугристой. Изменения в бактериях усиливались по мере увеличения времени инкубации, и в конечном итоге… Читать ещё >

Ферментативное получение низкомолекулярного хитозана и изучение его антибактериальных свойств (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Список используемых сокращений
  • 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
    • 1. 1. ХИТИН
    • 1. 2. ХИТОЗАН. И
      • 1. 2. 1. Низкомолекулярный хитозан
    • 1. 3. ПОЛУЧЕНИЕ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНОГО ХИТОЗАНА
      • 1. 3. 1. Химический способ
      • 1. 3. 2. Физический способ
      • 1. 3. 3. Ферментативный способ
        • 1. 3. 3. 1. Хитиназы
        • 1. 3. 3. 2. Хитозаназы
        • 1. 3. 3. 3. Неспецифическое действие ферментов
    • 1. 4. АНТИБАКТЕРИАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ХИТОЗАНА
      • 1. 4. 1. Механизм антибактериального действия хитозана
    • 1. 5. ПРИМЕНЕНИЕ ХИТОЗАНА

Хитин и хитозан, а также производные этих полисахаридов считаются перспективными биоматериалами будущего. По некоторым оценкам, предполагаемый объем производства изделий из этих биополимеров в 2005 году составит на сумму около 2 млрд. долларов, из которых 75% будет использовано в крупнейших отраслях промышленности, таких как — пищевая, медицинская, косметическая, сельское хозяйство, а также в биотехнологии. Уникальная структура хитозана обуславливает проявление целого ряда полезных свойств этого полисахарида, основными из которых являются — гипоаллергенность, биодеградируемость, биосовместимость, способность к пленкои волокнообразованию, а также широкие антимикробные свойства.

Актуальность темы

Исследование антибактериальных свойств биополимеров является актуальной задачей на сегодняшний день. По данным многих исследователей хитозан обладает достаточно выраженными антибактериальными свойствами, однако, в основном, исследования проводились с высокомолекулярными препаратами хитозана, растворимыми в слабокислых растворах, в то время как антибактериальные свойства низкомолекулярного хитозана практически не изучались. Исследование антибактериальных свойств ферментативно полученных водорастворимых препаратов с низкой молекулярной массой и сравнение их с действием высокомолекулярных на примере целой группы микроорганизмов, в том числе и патогенных, позволит провести сравнительный анализ и сделать некоторые обобщения практического характера, в том числе и о перспективности направления, связанного с ферментативным получением низкомолекулярного хитозана и его использованием в медицине, ветеринарии, сельском хозяйстве, косметической и пищевой промышленности.

Цель и задачи работы. Целью настоящей работы являлось получение низкомолекулярных водорастворимых препаратов хитозана путем ферментативного гидролиза и изучение их антибактериальных свойств. В соответствии с этим были поставлены следующие задачи:

1. получить культуральную жидкость Streptomyces kurssanovii с высокой хитиназной активностью.

2. получить препараты низкомолекулярного водорастворимого хитозана и исследовать их физико-химические свойства.

3. изучить антибактериальные свойства препаратов хитозана на примере грамположительных, грамотрицательных бактерий и грибах рода Candida.

4. изучить механизм действия хитозана на бактериальные клетки.

Научная новизна работы.

1. Показано, что основными факторами, влияющими на антибактериальные свойства хитозана, являются его степень дезацетилирования и молекулярная масса. Водорастворимый хитозан с низкой молекулярной массой обладает наибольшей активностью. С увеличением молекулярной массы антибактериальный эффект хитозана снижается.

2. Показано, что с увеличением степени дезацетилирования возрастает и антибактериальное действие препаратов хитозана.

3. Установлена прямая зависимость гибели бактериальных клеток от времени взаимодействия их с хитозаном.

4. Методами трансмиссионной электронной и атомно-силовой микроскопии были исследованы морфологические изменения бактериальных клеток, в том числе патогенных микроорганизмов, после их обработки хитозаном.

5. Предложены механизмы антибактериального действия низкомолекулярного водораствормого хитозана на грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы.

6. Показано, что взаимодействие хитозана с бактериальными клетками приводит к деструкции поверхностных структур бактерий, дезорганизации цитоплазматического матрикса и нуклеоида.

7. Показано, что после обработки клеток хитозаном в них происходит резкое снижение содержания внутриклеточного АТФ.

Практическая значимость. Установлено, что полученные ферментативным гидролизом препараты низкомолекулярного водорастворимого хитозана обладают выраженными антибактериальными свойствами, вызывая практически полную гибель всех исследуемых микроорганизмов.

Показано, что низкомолекулярный хитозан вызывает гибель клеток Agrobacterium tumefaciens. Данный результат может иметь практическое значение для борьбы с бактериальным раком винограда, плодовых, кустарников и других двудольных растений, которые поражаются А. tumefaciens, что наносит большой вред сельскому хозяйству.

Важный результат получен при действии хитозана на клинические штаммы микроорганизмов Candida albicans, Klebsiella pneumoniae и Staphylococcus aureus. Так, культура С albicans оказалась чувствительной ко всем изученным препаратам крабового и пчелиного хитозана. Следовательно, низкомолекулярный хитозан можно рекомендовать для борьбы с кандидозной инфекцией, которая на сегодняшний день является распространенным заболеванием. Кроме того, препараты низкомолекулярного хитозана вызывали гибель культур Kl. pneumoniae и S. aureus.

Таким образом, можно рекомендовать использование низкомолекулярных водорастворимых препаратов хитозана в качестве антибактериального средства в медицинской, пищевой, косметической промышленности, ветеринарии и сельском хозяйстве.

Апробация результатов. Основные результаты работы были представлены на 1-ом Международном конгрессе «Биотехнология состояние и перспективы развития» (Москва, 2002), VII-ой Международной конференции «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана» (Санкт-Петербург — Репино, 2003), 5-ой Международной конференции «Фитотерапия, биологически активные вещества естественного происхождения» (Черноголовка, 2004), 6-th Asia-Pacific Chitin and Chitosan Symposium (Singapore, 2004), 9-ой Международной Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология — наука XXI века» (Пущино, 2005), ХШ-ой Международной научной конференции «Ферменты микроорганизмов: структура, функции, применение» (Казань, 2005).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ, в том числе 4 статьи (3 статьи в печати).

Структура и объем работы. Диссертация включает введение, обзор литературы, экспериментальную часть, результаты и обсуждение, заключение, выводы и список литературы, включающий 202 ссылки, из которых 52 на русском языке. Работа изложена на 133 страницах машинописного текста и содержит 20 рисунков и 8 таблиц.

ВЫВОДЫ.

1. Получена культуральная жидкость S. kurssanovii с высокой хитиназной активностью.

2. Путем ферментативного гидролиза исходного высокомолекулярного хитозана (Mv ~800кДа) получены препараты низкомолекулярного водорастворимого хитозана краба с Mv 5, 6, 10, 12, 27кДа и СД 85% и препарат низкомолекулярного водорастворимого пчелиного хитозана с Mv 16кДа и СД 85%.

3. Установлено, что препараты низкомолекулярного водорастворимого хитозана краба с Mv от 5 до 27кДа и СД 85% и препарат низкомолекулярного водорастворимого пчелиного хитозана с Mv 16кДа и СД 85% проявляют антибактериальные свойства против изученных грамположительных, грамотрицательных микроорганизмов и грибов рода Candida, вызывая практически их полную гибель (99,9%).

4. Показано, что с увеличением Mv антибактериальный эффект хитозана снижается. Кроме того, показано, что с увеличением СД возрастает и антибактериальное действие препаратов хитозана. Установлено, что достаточно 10 минут взаимодействия бактериальных клеток с хитозаном, чтобы наблюдался антибактериальный эффект.

5. С помощью атомно-силовой микроскопии изучены механизмы антибактериального воздействия хитозана на клетки В. subtilis. Результаты показали, что после обработки клеток В. subtilis хитозаном поверхность клеток в отличие от контроля становится бугристой, происходит нарушение целостности поверхностных структур бактериальных клеток, содержимое клеток вытекает наружу и, в результате, бактерии погибают.

6. С помощью биолюминесцентного метода показано, что в течение первых 5 мин взаимодействия клеток В. subtilis с хитозаном происходит увеличение содержания АТФ в клетках. Однако далее наблюдается резкое снижение содержания внутриклеточного АТФ, что свидетельствует о гибели бактерий.

7. С помощью трансмиссионной электронной микроскопии изучены механизмы антибактериального воздействия хитозана на грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы. Результаты трансмиссионной электронной микроскопии показали, что взаимодействие хитозана с бактериальными клетками приводит к усилению проницаемости поверхностных структур микроорганизмов. Кроме того, происходит фрагментарное разрушение наружной мембраны КС, разрыхление внутреннего слоя КС и выход в этих участках цитоплазматического матрикса из клетки наружу.

Заключение

.

Методом рассева S. kurssanovii на бедные и богатые питательные среды, содержащие, либо не содержащие коллоидный хитин, были получены колонии микроорганизма, обладающие хитиназной активностью.

Был проведен подбор оптимального индуктора синтеза хитинолитических ферментов, обладающих высокой активностью. Для этого при выращивании S. kurssanovii использовали 8 видов хитинсодержащих субстратов, в результате чего были получены 8 КЖ. С целью определения наиболее активной КЖ был проведен ферментативный гидролиз исходного высокомолекулярного хитозана (Mv ~800кДа) полученными КЖ. Наилучший результат по гидролитической активности показали КЖ, полученные при выращивании S. kurssanovii на хитине краба, хитине пчел (с меланином) и ХГК. С помощью данных КЖ были получены три препарата низкомолекулярного водорастворимого хитозана — два препарата с Му-ми 8кДа и один с Mv 9кДа. У всех препаратов СД составила 85%.

Таким образом, путем ферментативного гидролиза высокомолекулярного хитозана КЖ, полученными при культивировании S. kurssanovii на среде с крабовым хитином, хитином пчел (с меланином) и ХГК были получены препараты низкомолекулярного водорастворимого хитозана. В дальнейшей работе для получения низкомолекулярного водорастворимого хитозана, в качестве субстрата для выращивания S. kurssanovii, был использован хитин краба, так как данный субстрат показал хорошие результаты и оказался наиболее доступным из 3-х изученных.

Путем ферментативного гидролиза высокомолекулярного хитозана КЖ, полученной при культивировании S. kurssanovii на хитине краба были получены препараты низкомолекулярного водорастворимого крабового хитозана с Mv 5, 6, 10, 12, 27кДа и СД 85% и препарат низкомолекулярного водорастворимого пчелиного хитозана с Mv 16кДа и СД 85%, антибактериальные свойства которых были изучены.

С целью подбора концентрации хитозана, оказывающей антибактериальное воздействие на микроорганизмы были проведены исследования антибактериальной активности хитозана с Mv бкДа в концентрациях 0,1- 0,25- 0,5- 1 и 2% против грамположительной В. subtilis и грамотрицательной Ent. agglomerans. Результаты эксперимента показали, что наилучшим антибактериальным эффектом обладал хитозан в концентрации 1 и 2%.

Был изучен процент гибели микроорганизмов, обработанных хитозаном с разными Mv. Оказалось, что препараты хитозана краба с Mv от 5 до 27кДа и пчелиный хитозан с Mv 16кДа эффективно действуют на все изученные бактерии, вызывая практически их полную гибель (99,9%). Кроме того, было показано, что низкомолекулярный хитозан вызывает гибель клеток A. tumefaciens. Данный результат может иметь практическое значение для борьбы с бактериальным раком винограда, плодовых, кустарников и других двудольных растений, которые поражаются A. tumefaciens, что наносит большой вред сельскому хозяйству.

Исследование зависимости процента гибели бактериальных клеток от времени взаимодействия их с хитозаном показало, что достаточно 10 мин взаимодействия хитозана с клетками, чтобы 80−99,9%) клеток потеряли жизнеспособность.

В опытах по определению прочности связывания хитозана с бактериальными клетками использовали трехкратную отмывку клеток бактерий смесью из 0,1 М ацетатнного буфера (рН 6,5) и 0,5 М NaCl. В результате колориметрических исследований было установлено, что количество хитозана в супернатанте было минимальным, то есть практически весь хитозан остался связанным с бактериями. Это же было подтверждено с помощью атомно-силовой микроскопии.

Было изучено влияние рН (5,3 и 6,5) на взаимодействие хитозана с бактериальными клетками. Результаты показали, что сдвиг рН до 5,3 не вызывал увеличения контакта хитозана с клетками и не оказывал заметного влияния на выживаемость клеток В. subtilis и Е. coli после их обработки хитозаном.

При изучении влияния СД на антибактериальную активность хитозана была выявлена четкая тенденция к увеличению процента гибели клеток с повышением СД хитозана, что связано с увеличением положительного заряда хитозана, вследствие чего он более прочно связывается с поверхностью КС микроорганизмов.

В экспериментах по определению МИК хитозана важный результат был получен при действии хитозана на клинические штаммы микроорганизмов С. albicans, Kl. pneumoniae и S. aureus. Культура С. albicans оказалась чувствительной ко всем изученным препаратам крабового и пчелиного хитозана. Следовательно, низкомолекулярный хитозан можно рекомендовать для борьбы с кандидозной инфекцией, которая на сегодняшний день является распространенным заболеванием. Кроме того, препараты низкомолекулярного хитозана вызывали гибель культур К1. pneumoniae и S. aureus. Таким образом, можно рекомендовать использование низкомолекулярных водорастворимых препаратов хитозана в качестве антибактериального средства в медицинской, пищевой промышленности и ветеринарии.

Была исследована антибактериальная активность препаратов хитозана с отрицательным зарядом. Результаты экспериментов показали, что ни у одного из исследованных препаратов хитозана антибактериальных свойств выявлено не было.

С помощью атомно-силовой и трансмиссионной электронной микроскопии были исследованы механизмы действия низкомолекулярного водорастворимого хитозана на грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы.

Результаты исследований с помощью атомно-силовой микроскопии показали, что в отличие от контрольных препаратов после обработки клеток В. subtilis хитозаном с Mv бкДа наблюдалось увеличение пространства между отдельно лежащими клетками, не просматривались пили, поверхность клеток становилась бугристой. Изменения в бактериях усиливались по мере увеличения времени инкубации, и в конечном итоге, лизированные клетки приобретали вид аморфных масс. Кроме того, с помощью биолюминесцентного метода было показано, что в течение первых 5 мин взаимодействия клеток В. subtilis с хитозаном происходит увеличение содержания АТФ в клетках. Однако далее наблюдается резкое снижение содержания внутриклеточного АТФ, что свидетельствует о гибели бактерий.

Результаты исследований с помощью трансмиссионной электронной микроскопии показали, что при воздействии на KL pneumoniae хитозана с Mv 6 и 27кДа структура капсулы не изменялась, но у части клеток происходило ее истончение, при этом плотность цитоплазмы и структура нуклеоида не менялась. Основным морфологическим признаком действия препаратов хитозана с Mv 6 и 27кДа на KL pneumoniae являлось фрагментарное разрушение наружной мембраны КС, разрыхление внутреннего слоя КС и выход в этих участках цитоплазматического матрикса из клетки наружу.

При воздействии хитозана с Mv бкДа на S. aureus были обнаружены изменения структуры, сопряженные с мембраностеночным комплексом. Нарушалась структура внутреннего электронно-плотного слоя КС и примыкающей к ней ЦПМ. При воздействии на S. aureus хитозана с Mv 27кДа были обнаружены протопласты (бактерии, полностью лишенные КС), у которых фрагментарно разрушался наружный слой ЦПМ.

Таким образом, в проведенном исследовании было показано, что влияние низкомолекулярного водорастворимого хитозана с Mv 6 и 27кДа на субмикроскопическую организацию бактерий разных систематических групп принципиально одинаково и связано с воздействием на поверхностные структуры клеток.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Ward H.D., Alroy J., Lev B.I., Keusch G.T., Pereira M.E.A. Identification of chitin as a srtuctural component of Giardia cysts II Infection and Immunity. 1985. V. 49. № 3. P. 629−634
  2. Muzzarelli R.A.A. Chitin. Oxford: Pergamon Press, 1977. 309p.
  3. Synowiecki J., Al-Khateeb N.A. Production, properties, and some new applications of chitin and its derivatives // Crit. Rev. Food. Sci. Nutr. 2003. V. 43. № 2. P. 145−171
  4. Е.П. Хитин грибов: распространение, биосинтез, физико-химические свойства и перспективы использования // Хитин и хитозан: Получение, свойства и применение / Под ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова. -М.: Наука. 2002. С. 100−111
  5. Shepherd R., Reader S., Falshaw A. Chitosan functional properties // Glycoconjugate J. 1997. V. 14. P. 535−542
  6. E.A., Нудьга Л. А. Хитин и его химические превращения // Успехи химии. 1984. Т. 46. № 8. С. 1470−1487.
  7. Zhang М., Haga A., Sekiguchi Н., Hirano S. Structure of insect chitin isolated from beetle larva cuticle and silkworm (Bombyx mor 'i) pupa exuvia // Int. J. Biological Macromolecules. 2000. V. 27. № 1. P. 99−105
  8. Е.П. Клеточная стенка грибов.-М.: Наука. 1983. 315с.
  9. Л.Ф., Косяков В. Н. Сорбционные свойства хитина и его производных // Хитин и хитозан: Получение, свойства и применение / Под ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова. -М.: Наука. 2002. С. 217−246
  10. Kollar R., Petracova Е., Ashwell G., Robbins P.W., Cabib Е. Architecture of the yeast cell wall //J.Biol.Chem. 1995. V.270. № 3 P. l 170−1178
  11. Н.А. Хитинолитические ферменты микрорганизмов // Успехи биологической химии. 1989. Т. 30. С. 199−219
  12. Sampson M.N., Gooday G.W. Involvement of chitinases of Bacillus thuringiensis during pathogenesis in insects // Microbiology. 1998. V. 144. P. 21 892 194
  13. Howard M.B., Ekborg N.A., Weiner R.M., Hutcheson S.W. Detection and characterization of chitinases and other chitin-modifying enzymes // J. Ind. Microbiol. Biotechnol. 2003. V. 30. P. 627−635
  14. Howling G.I., Dettmar P.W., Goddard P.A., Hampson F.C., Dornish M., Wood E.J. The effect of chitin and chitosan on the proliferation of human skin fibroblasts and keratinocytes in vitro // Biomaterials. 2001. V. 22. P. 2959−2966
  15. Kumar M.N.V.R. A review of chitin and chitosan applications (Review) II React. Functional Polymers. 2000. V. 46. P. 1−27
  16. Khor E., Lim L.Y. Implantable applications of chitin and chitosan // Biomaterials. 2003. V. 24. P. 2339−2349
  17. A.B., Ткачева Ю. В., Варламов В. П. Деполимеризация высокомолекулярного хитозана ферментным препаратом Целловиридин Г20Х // Прикладная биохимия и микробиология. 2002. Т. 38. № 2. С. 132−135
  18. Davis S.S., Ilium L. Chitosan for oral delivery of drugs // Chitosan per os from Dietary Supplement to Drug Carrier / Ed. R.A.A. Muzzarelli. Grottammare: Atec. 2000. P. 137−164.
  19. Lim S.-H., Hudson S.M. Application of a fiber-reactive chitosan derivative to cotton fabric as a zero-salt dyeing auxiliary // Color. Technol. 2004. V. 120. P. 108 113
  20. Lim S.-H., Hudson S.M. Application of a fiber-reactive chitosan derivative to cotton fabric as an antimicrobial textile finish // Carbohydr. Polym. 2004. V. 56. P. 227−234
  21. А. Биохимия. -M: Мир. 1974. 957c.
  22. Onsoyen E., Skaugrud O. Metal recovery using chitosan // J. Chem. Technol. Biotechnol. 1990. V. 49. № 4. P. 395−404
  23. З.М., Чирков С. Н. Влияние производных хитозана на репродукцию колифагов Т2 и Т7 // Микробиология. 2000. Т.69. № 2. С. 257−260
  24. Hsu S., Whu S.W., Tsai C-L., Wu Y.-H., Chen H.-W., Hsieh K.-H. Chitosan as scaffold materials: effects of molecular weight and degree of deacetylation // J. Polymer Research. 2004. V. 11. P. 141−147
  25. Huang M., Khor E., Lim L.-Y. Uptake and cytotoxicity of chitosan molecules and nanoparticles: effects of molecular weight and degree of deacetylation // Pharmaceutical Research. 2004. V. 21. № 2. P. 344−353
  26. Lim S.-H., Hudson S.M. Review of chitosan and its derivatives as antimicrobial agents and their uses as textile chemicals // J. Macromol. Sci. 2003. V. 43. № 2. P. 223−269
  27. Ceo С.-Б., Рю Ч.-С., Ким Х.-Б., Ан Г.-В., Джо Б.-К., Каджиучи Т. Получение многофункционального низкомолекулярного хитозана и его применение в косметике // Косметическая химия. 2003. № 1. С. 26−30
  28. Jia Z., Shen D., Xu W. Synthesis and antibacterial activities of quaternary ammonium salt of chitosan // Carbohydr. Res. 2001. V. 333. P. 1−6
  29. Liu X.F., Guan Y.L., Yang D.Z., Li Z., Yao K.D. Antibacterial action of chitosan and carboxymethylated chitosan // J. Appl. Polym. Sci. 2001. V. 79. P. 13 241 335
  30. Berger J., Reist M., Mayer J.M., Felt O., Gurny R. Structure and interactions in chitosan hydrogels formed by complexation or aggregation for biomedical applications // Eur. J. Pharm. Biopharm. 2004. V. 57. № 1. P. 35−52
  31. Chitin Handbook / Eds. Muzzarelli R.A.A., Peter M.G. Grottammare: Atec Edizioni. 1999. P. 534
  32. Singla A.K., Chawla M. Chitosan: some pharmaceutical and biological aspects-an update//J. Pharm Pharmocol. 2001. V. 53. № 8. P. 1047−1067
  33. Thongngam M., McClements D J. Characterization of interactions between chitosan and an anionic surfactant // J. Agric. Food Chem. 2004. V. 52. № 4. P. 987 991
  34. Xie W., Xu P., Wang W., Liu Q. Preparation of water-soluble chitosan derivatives and their antibacterial activity // J. Appl. Polym. Sci. 2002. V. 85. P. 13 571 361
  35. Smith J., Wood E., Dornish M. Effect of chitosan on epithelial cell tight junctions // Pharmaceutical Research. 2004. V. 21. № 1. P. 43−49
  36. Hejazi R., Amiji M. Chitosan based gastrointestinal delivery systems // J. Control Release. 2003. V. 89. № 2. P. 151−165
  37. Harding S.E. Mucoadhesive interactions // Biochem. Soc. Trans. 2003. V. 31. Pt. 5. P. 1036−1041
  38. Helander I.M., Nurmiaho-Lassila E.-L., Ahvenainen R., Rhoades J., Roller S. Chitosan disrupts the barrier properties of the outer membrane of Gram-negative bacteria // Int. J. Food Microbiology. 2001. V. 71. P. 235−244
  39. Cuero R.G. Antimicrobial action of exogenous chitosan // EXS. 1999. V. 87. P. 315−333
  40. Muzzarelli R., Tarsi R., Filippini O., Glovanetti E., Biagini G., Varaldo P.E. Antimicrobial properties of N-carboxybutyl chitosan // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1990. V. 34. № Ю. P. 2019−2023
  41. Tsai G.J., Wu Z.Y., Su W.H. Antibacterial activity of a chitooligosaccharide mixture prepared by cellulase digestion of shrimp chitosan and its application to milk preservation // J. Food Prot. 2000. V. 63. № 6. P. 747−752
  42. Felt O., Carrel A., Baehni P., Buri P., Gurny R. Chitosan as tear substitute: a wetting agent endowed with antimicrobial efficacy // J. Ocul. Pharmacol. Ther. 2000. V. 16. № 3. P. 261−270
  43. No H.K., Lee S.H., Park N.Y., Meyers S.P. Comparison of physicochemical, binding, and antibacterial properties of chitosans prepared without and with deproteinization process // J. Agric. Food Chem. 2003. V. 51. N° 26. P. 7659−7663
  44. Divakaran R., Pillai V.N. Flocculation of river silt using chitosan // Water Res. 2002. V. 36. № 9. P. 2414−2418
  45. Kumar A.B.V., Varadaraj M.C., Lalitha R.G., Tharanathan R.N. Low molecular weight chitosans: preparation with the aid of papain and characterization // Biochim. Biophys. Acta. 2004. V. 1670. P. 137−146
  46. Kumar A.B.V., Gowda L.R., Tharanathan R.N. Non-specific depolymerization of chitosan by pronase and characterization of the resultant products //Eur. J. Biochem. 2004. V. 271. P. 713−723
  47. A.B., Варламов В. П., Мелентьев А. И., Актуганов Г. Э. Деполимеризация хитозана хитинолитическим комплексом бактерии рода Bacillus sp. 739 II Прикладная биохимия и микробиология. 2001. Т. 37. № 2. С. 160−163.
  48. Brugnerotto J., Lizardi J., Goycoolea F.M., Argiielles-Monal W., Desbrieres J. An infrared investigation in relation with chitin and chitosan characterization //Polymer. 2001. V. 42. P. 3569−3580
  49. Патент № 2 073 016 РФ «Способ получения низкомолекулярного водорастворимого хитозана».
  50. Ilyina A.V., Tikhonov V.E., Albulov A.I., Varlamov V.P. Enzymic preparation of acid-free-water-soluble chitosan // Process Biochemistry. 2000. V. 35. № 6. P. 563−568
  51. Ilyina A.V., Tatarinova N.Yu., Varlamov V.P. The preparation of low-molecular-weight chitosan using chitinolytic complex from Streptomyces kurssanovii //Process Biochemistry. 1999. V. 34. № 9. P. 875−878
  52. Sabnis S., Block L.H. Chitosan as an enabling excipient for drug delivery systems. I. Molecular modifications // Int. J. Biol. Macromol. 2000. V. 27. № 3. P. 181−186
  53. Scheel О., Thiem J. Cleavage of chitin by means of aqueous hydrochloric acid and isolation of chito-oligosaccharides // Chitin Handbook / Ed. Muzzarelli R.A.A., Peter M.G. European Chitin Society. Atec Edizioni, Grottammare AP, Italy. 1997. P. 165−170
  54. Varum K.M., Holme H.K., Izume M., Stokke B.T., Smidsmd O. Determination of enzymatic hydrolysis specificity of partially N-acetylated chitosans //Biochim. Biophys. Acta. 1996. V. 1291. № 1. P. 5−15
  55. Rhoades J., Roller S. Antimicrobial actions of degraded and native chitosan against spoilage organisms in laboratory media and foods // Appl. Environ. Microbiol. 2000. V. 66. № l.P. 80−86
  56. Kittur F.S., Kumar A.B.V., Tharanathan R.N. Low molecular weight chitosans preparation by depolymerization with Aspergillus niger pectinase, and characterization // Carbohydr. Res. 2003. V. 338. P. 1283−1290
  57. Lim S.H., Hudson S.M. Synthesis and antimicrobial activity of a water-soluble chitosan derivative with a fiber-reactive group // Carbohydr. Res. 2004. V. 339. P. 313−319
  58. Tsai G.J., Zhang S.L., Shieh P.L. Antimicrobial activity of a low-molecular-weight chitosan obtained from cellulase digestion of chitosan // J. Food Prot. 2004. V. 67. № 2. P. 396−398
  59. Zhang М., Tan Т., Yuan Н., Rui С. Insecticidal and fungicidal activities of chitosan and oligo-chitosan // J. Bioact. Compat. Polym. 2003. V. 18. P. 391−400
  60. Pettersen H., Sannes A., Holme H.K., Kristensen A.H., Dornish M., Smidsrod O. Thermal depolymerization of chitosan salts // In: Advan. Chitin Sci. / Ed M.G. Peter, A. Domard, R.A.A. Muzzarelli. Potsdam. Germany. 1999. P. 422−428
  61. T0mmeraas K., Varum K.M., Christensen B.E., Smidsrad O. Preparation and characterization of oligosaccharides produced by nitrous acid depolymerization of chitosans // Carbohydr. Res. 2001. V. 333. P. 137−144
  62. Chen R.H., Chang J.R., Shyur J.S. Effects of ultrasonic conditions and storage in acidic solutions on changes in molecular weight and polydispersity of treated chitosan // Carbohydr. Res. 1997. V. 299. P. 287−294
  63. Г. В. Теория и практика получения хитина электрохимическим способом // Хитин и хитозан: Получение, свойства и применение / Под ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова. -М.: Наука. 2002. С. 24−43
  64. Е.Э., Водолажская С. В. Способы получения и активации хитина и хитозана // Хитин и хитозан: Получение, свойства и применение / Под ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова. -М.: Наука. 2002. С. 44−63
  65. С.З. Химическая модификация природных полисахаридов целлюлозы, хитина и хитозана в твердой фазе под действием сдвиговых деформаций: Дисс. Доктора хим. Наук. Москва. 2003. 163с.
  66. Zhang Н., Neay S.H. In vitro degradation of chitosan by a commertial enzyme preparation effect of molecular weight and degree of deacetilation // Biomaterials. 2001. V. 22. P. 1653−1658
  67. Reetarani S.P., Ghormade V., Deshpande M.V. Chitinolytic enzymes: an exploration (Review) // Enz. Microb. Technology. 2000. V. 26. P. 473−483
  68. O.B., Юсупова Д. В., Зоткина H.JI., Соколова Р. Б., Габдрахманова Л. А. Хитинолитический комплекс Serratia marcescens и особенности его биосинтеза//Микробиология. 1997. Т. 66. № 3. С. 347−353
  69. А.И., Актуганов Г. Э. Выделение, очистка и характеристика хитиназы Bacillus sp. 739 // Прикладная биохимия и микробиология. 1999. Т. 35. № 6. С. 624−628.
  70. Lim H.-S., Kim Y.-S., Kim S.-D. Pseudomonas stutzeri YPL-1 genetic transformation and antifungal mechanism against Fusarium solani, an agent of plant root rot//Appl. Environ. Microbiol. 1991. V.57. № 2. P.510−516
  71. Ohtakara A., Matsunaga H., Mitsutomi M. Action pattern of Streptomyces griseus chitinase on partially N-acetylated chitosan // Agric. Biol. Chem. 1990. V. 54. № 12. P. 3191−3199
  72. Brurberg М.В., Eijsink G.H., Haandrikman F.J. Chitinase В from S. marcescens BJL 200 is exported to the periplasm without processing // Microbiol. 1994. V.141. № 2. P.123−131.
  73. Harpster M.H., Dunsmuir P. Nucleotide seguence of the chitinase В gene of S. marcescens QMB 1466 //Nucl. Acids Research. 1989. V.17. № 13. P.5395−5402
  74. Okazaki K., Kato F., Watanabe N. Purification and properties of two chitinases from Streptomyces sp. J-13−3 // Biosci. Biotech. Biochem. 1995. V.59. № 8. P.1586−1587.
  75. И.А. Выделение, очистка хитиназ Str. kurssanovii и ферментативное расщепление хитина и хитозана. Диссертация к.х.н. Институт Биохимии. 1992. 169с.
  76. Stoyachenko I.A., Varlamov V.A., Davankov V.A. Chitinases of Streptomyces kurssanovii: purification and some properties // Carbohydr. Polym. 1994. V. 24. № 1. P. 47−54
  77. A.B., Татаринова Н. Ю., Тихонов B.E., Варламов В. П. Внеклеточные протеиназа и хитиназа, продуцируемые культурой Streptomyces kursanovii II Прикладная биохимия и микробиология. 2000. Т. 36. № 2. С. 173 177
  78. Д.А., Чигалейчик А. Г., Тиунова Н. А., Рылкин С. С. Физиолого-биохимические свойства Actinomyces kurssanovii активного продуцента хитиназы // Микробиология. 1977. Т. 46. № 4. С. 661−665
  79. Н.Т., Павлова Н. М., Шишкова Э. А., Ларина JI.H., Бравова Г. Б. Оптимизация биосинтеза литических ферментов термотолерантным актиномицетом Streptomyces griseinus II Биотехнология. 2002. № 1. С. 28−35
  80. Takayanagi Т., Ajisaka К., Takiguchi Y., Shimahara K. Isolation and characterization of thermostable chitinases from Bacillus licheniformis X-7u // Biochim. Biophys. Acta. 1991. V. 1078. P. 404−410
  81. Watanabe Т., Oyanagi W., Suzuki К., Tanaka H. Chitinase system of Bacillus circulans WL-12 and importance of chitinase AI in chitin degradation // J. Bacteriol. 1990. V. 172. № 7. P. 4017−4022
  82. Roberts W.K., Selitrennikoff C.P. Plant and bacterial chitinases differ in antifungal activity //J. Gen. Microbiol. 1988. V.134. P.164−176.
  83. Mitsutomi M., Ueda M., Arai M., Ando A., Watanabe T. Action patterns of microbial chitinases and chitosanases on partially N-acetylated chitosan // Chitin Enzymology / Ed. Muzzarelli R.A.A. Atec Edizioni, Grottammare, Italy. 1996. V. 2. P. 273−284
  84. Ohno Т., Armand S., Hata Т., Nikaidou N., Henrissat В., Mitsutomi M., Watanabe T. A modular family 19 chitinase found in the prokaryotic organism Streptomyces griseus HUT 6037 // J. Bacteriol. 1996. V. 178. № 17. P. 5065−5070
  85. El-Aassar S.A., Ghanem K.M., Sabry S.A., Ghanem N.B. Purification and characterization of chitinases produced by Bacillus amyloliquefaciens H Bioseparation. 1992. V. 3. P. 37−46
  86. Harish S., Manjula K., Podile A.R. Fusarium udum is resistant to the mycolytic activity of a biocontrol strain of Bacillus subtilis AF1 // Microbiol. Ecology. 1998. V.25. P.385−390.
  87. Gupta R., Saxena R., Chaturvedi P. Chitinase production by Streptomyces viridificans: its potential in fungal cell wall lysis // J. Appl. Bacterid. 1995. V.78. P.378−383
  88. Appel M., Riesde W., Hofmeyr J.-H. A method for the quatitative assessment of wound induced chitinase activity in potato tubers // J. Phytopathol. 1995. V.143. № 9. P.525−529
  89. Sahai A., Manocha M. Chitinases of fungi and plants: their involvement in morphogenesis and host parasite interaction // Microbiol. Rev. 1993. V. l 1. P.317−338
  90. Trachuk L.A., Revina L.P., Shemyakina T.M., Chestukhina G.G., Stepanov V.M. Chitinases of Bacillus licheniformis B-6839: isolation and properties // Can. J. Microbiol. 1996. V. 42. P. 307−315
  91. Jackson D.T., Saunders V.A., Gooday G.W., Humphereys A.M. Chitinase activities from yeast and hyphal calls of Candida albicans II Mycol. Res. 1996. V. 100. № 3. P. 321−327
  92. Tsujibo H., Minoura K., Miyamoto K., Endo H., Moriwaki M., Inamori Y. Purification and properties of a thermostable chitinase from Streptomyces thermoviolaceus OPC-520 // Appl. Environ. Microbiology. 1993. V. 59. № 2. P. 620 622
  93. Tanaka Т., Fukui Т., Imanaka T. Different cleavage specificities of the dual catalytic domains in chitinase from the hyperthermophilic archaeon Pyrococcus kodakaraensis KOD1 // J. Biol.Chem. 2001. V. 276. № 38. P. 35 629−35 635
  94. А.Ю., Дмитриева Е. Ю., Шелегедин B.H. Получение экзогенного препарата хитиназы высокой активности, продуцируемой Vibrio sp. X // Биотехнология. 1998. № з. с. 13−18
  95. Young М.Е., Bell R.L., Carfoad P.A. Kinetics of chitinase production. I Chitin hydrolysis. II Relation between bacteriol growth, chitin hydrolysis and enzyme synthesis // Biotechnol. Bioeng. 1985. V.27. № 6. P.769−780
  96. Н.А. Целлюлазы микроорганизмов. -М.: Наука. 1981. 158с.
  97. Pleban S., Chernin L., Chet I. Chitinolytic activity of an endophytic strain of Bacillus cereus II Appl. Microbiol. 1997. V.25. P.284−288.
  98. H.H., Тарчевский И. А., Юсупова Д. В., Гвоздева E.J1., Валуева, Т.А., Яковлева В. Г. Ферментативная активность афропротеинов // Биохимия. 1999. Т. 64. Вып. 7. С. 931−934
  99. Iseli В., Boiler Т., Neuhaus J.-M. Functional analysis of the domains of a plant PR-3 chitinase // In: Chitin Enzymology. R.A.A. Muzzarelli, Italy, ed. Atec Edizioni. 1996. V. 2. P. 135−142
  100. ., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология микробиологических систем. В кн.: Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. Пер. с англ. -М.: Мир. 2002. 589с.
  101. Henrissat В. A classification of glycosyl hydrolases based on amino acid sequence similarities //Biochem. J. 1991. V. 1. № 280. P. 309−316
  102. Г. Э., Широков A.B., Мелентьев А. И. Выделение и свойства хитозаназы штамма Bacillus sp. 739 // Прикладная биохимия и микробиология. 2003. Т. 39. № 5. С. 536−541
  103. Kurakake М., Yo-u S., Nakagawa К., Sugihara М., Komaki Т. Properties of chitosanase from Bacillus cereus SI // Current Microbiology. 2000. V. 40. P. 6−9
  104. Omumasaba C.A., Yoshida N., Sekiguchi Y., Kariya K., Ogawa K. Purification and some properties of a novel chitosanase from Bacillus subtilis KH1 // J. Gen. Appl. Microbiol. 2000. V. 46. № 1. P. 19−27
  105. Mitsutomi M., Isono M., Uchiyama A., Nikaidou N., Ikegami Т., Watanabe T. Chitosanase activity of the enzyme previously reported as beta-1,3−1,4-glucanase from bacillus circulans WL-12 // Biosci. Biotechnol. Biochem. 1998. V. 62. № 11. P. 2107−2114
  106. Zhu X.-F., Wu X.-Y., Dai Y. Fermentation conditions and properties of a chitosanase from Acinetobacter sp. C-17 // Biosci. Biotechnol. Biochem. 2003. V. 67. № 2. P. 284−290
  107. Fukamizo Т., Ohkawa Т., Ikeda Y., Goto S. Specificity of chitosanase from Bacilluspumilus/f Biochim. Biophys. Acta. 1994. V. 1205. № 2. P. 183−188
  108. Azarkan M., Amrani A., Nijs M., Vandermeers A., Zerhouni S., Smolders N., Looze Y. Carica papaya latex is a rich source of a class II chitinase // Phytochemistry. 1997. V. 46. № 8. P. 1319−1325
  109. Muzzarelli R.A.A., Muzzarelli C., Tarsi R., Miliani M., Gabbanelli F., Cartolari M. Fungistatic activity of modified chitosans against Saprolegnia parasitica //Biomacromolecules. 2001. V. 2. P. 165−169
  110. Gil G., del Monaco S., Cerrutti P., Galvagno M. Selective antimicrobial activity of chitosan on beer spoilage bacteria and brewing yeasts // Biotechnology Letters. 2004. V. 26. P. 569−574
  111. Roller S., Covill N. The antifungal properties of chitosan in laboratoiy media and apple juice//Int. J. Food. Microbiol. 1999. V. 47. № 1−2. P. 67−77
  112. Senel S., Ikinci G., Kas S., Yousefi-Rad A., Sargon M.F., Hincal A.A. Chitosan films and hydrogels of chlorhexidine gluconate for oral mucosal deliveiy // Int. J. Pharm. 2000. V. 193. № 2. P. 197−203
  113. Sosa M.A., Fazely F., Koch J.A., Vercellotti S.V., Ruprecht R.M. N-carboxymethylchitosan-N, O-sulfate as an anti-HIV-1 agent // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1991. V. 174. № 2. P. 489−496
  114. Kochanska В., Kedzia A. Susceptibility of Candida, Geotrichum and Rhodotorula to chitosan ascorbate // Chitosan in Pharmacy and Chemistry. Eds.: R.A.A. Muzzarelli, C. Muzzarelli. Atec. Italy. 2002. P. 165−170
  115. Rabea E.I., Badawy M. E.-T., Stevens C.V., Smagghe G., Steurbaut W. Chitosan as antimicrobial agent: applications and mode of action // Biomacromolecules. 2003. V. 4. № 6. P. 1457−1465
  116. Chung Y.C., Wang H.L., Chen Y.M., Li S.L. Effect of abiotic factors on the antibacterial activity of chitosan against waterborne pathogens // Bioresour Technol. 2003. V. 88. № 3. P. 179−184
  117. Tsai G.-J., Su W.-H., Chen H.-C., Pan C.-L. Antimicrobial activity of shrimp chitin and chitosan from different treatments and applications of fish preservation // Fisheries Science. 2002. V. 68. № 1. P. 170−177
  118. No H.K., Park N.Y., Lee S.H., Meyers S.P. Antibacterial activity of chitosans and chitosan oligomers with different molecular weights // Int. J. Food. Microbiol. 2002. V. 74. № 1−2. P. 65−72
  119. Alsarra I.A., Betigeri S.S., Zhang H., Evans B.A., Neau S.H. Molecular weight and degree of deacetylation effects on lipase-loaded chitosan bead characteristics // Biomaterials. 2002. V. 23. P. 3637−3644
  120. Sano H., Shibasaki K., Matsukubo Т., Takaesu Y. Effect of molecular mass and degree of deacetylation of chitosan on adsorption of Streptococcus sobrinus 6715 to saliva treated hydroxyapatite // Bull. Tokyo Dent. Coll. 2002. V. 43. № 2. P. 75−82
  121. Zheng L.-Y., Zhu J.-F. Study on antimicrobial activity of chitosan with different molecular weights // Carbohydr. Polym. 2003. V. 54. Issue 4. P. 527−530
  122. Taha S.M., Swailam H.M. Antibacterial activity of chitosan against Aeromonas hydrophila //Nahrung. 2002. V. 46. № 5. P. 337−340
  123. Meyer H., Butte W., Schlaak M. Influence of chitosan on bacterial growth // Chitosan in Pharmacy and Chemistry. Eds.: R.A.A. Muzzarelli, C. Muzzarelli. Atec. Italy. 2002. P. 157−163
  124. E.H., Емцев B.T. Микробиология. -М.: Колос. 1978. 351с.
  125. Feofllova Е.Р., Mar’in А.Р., Tereshina V.M., Nemsev D.M., Kozlov V.P. Role of components of cell walls in metal uptake by Aspergillus niger II Res. Environ. Biotech. 2000. V. 3. P. 61−69
  126. Chung Y.C., Su Y.P., Chen C.C., Jia G., Wang H.L., Wu J.C., Lin J.G. Relationship between antibacterial activity of chitosan and surface characteristics of cell wall // Acta. Pharmacol. Sin. 2004. V. 25. № 7. P. 932−936
  127. Sorlier P., Denuziere A., Viton C., Domard A. Relation between the degree of acetylation and electrostatic properties of chitin and chitosan // Biomacromolecules. 2001. V. 2. № 3. P. 765−772
  128. Tsai G.-J., Hwang S.-P. In vitro and in vivo antibacterial activity of shrimp chitosan against some intestinal bacteria // Fisheries Sci. 2004. V. 70. P. 675 681
  129. MacLaughlin F.C., Mumper R.J., Wang J., Tagliaferri J.M., Gill I., Hinchcliffe M., Rolland A.P. Chitosan and depolimerized chitosan oligomers as condensing carriers for in vivo plasmid delivery // J. Control. Release. 1998. V. 56. № 1−3. P. 259−272
  130. Г. Общая микробиология. -М: Мир. 1987. 477с.
  131. .А. Почему хитозан полезен человеку? // Материалы Шестой конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана». -М.: ВНИРО. 2001.С. 187−195
  132. Vaara M. Agents that increase the permeability of the outer membrane // Microbiol. Rev. 1992. V. 56. № 3. P. 395−411
  133. Tang Z.H., Hou C.L., Chen Q.Q. Experimental study on bacteriostasis of chitosan and sodium hyaluronate // Zhongguo. Xiu. Fu. Chong. Jian. Wai. Ke. Za. Zhi. 2002. V. 16. № 4. P. 259−261
  134. Roller S., Covill N. The antimicrobial properties of chitosan in mayonnaise and mayonnaise-based shrimp salads // J. Food. Prot. 2000. V. 63. № 2. P. 202−209
  135. Savard Т., Beaulieu С., Boucher I., Champagne С.Р. Antimicrobial action of hydrolyzed chitosan against spoilage yeasts and lactic acid bacteria of fermented vegetables // J. Food Prot. 2002. V. 65. № 5. p. 828−833
  136. С.Jl. Молекулярные механизмы действия хитозана в качестве средства, повышающего болезнеустойчивость растений // Материалы Седьмой Междунар. конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана». -М.: ВНИРО. 2003. С. 118−121
  137. Wang X., Du Y., Liu H. Preparation, characterization and antimicrobial activity of chitosan-Zn complex // Carbohydr. Polym. 2004. V. 56. P. 21−26
  138. И.Ф. Физико-химические свойства хитозана и возможности его практического использования // Матер. V Междунар. конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана». -М.: ВНИРО. 1999. С. 230−231
  139. З.М., Сургучева Н. А., Чирков С. Н. Инактивация колифагов производными хитозана // Микробиология. 2000. Т. 69. № 2. С. 261−265
  140. Tsai G.J., Su W.H. Antibacterial activity of shrimp chitosan against Escherichia coli И J. Food Prot. 1999. V. 62. № 3. P. 239−243
  141. Lin W.-C., Liu T.-Y., Yang M.-C. Hemocompatibility of polyacrylonitrile dialysis membrane immobilized with chitosan and heparin conjugate // Biomaterials. 2004. V. 25. P. 1947−1957
  142. Sudarshan N.R., Hoover D.G., Knorr D. Antibacterial action of chitosan // Food Biotechnol. 1992. V. 6. № 3. P. 257−272
  143. Ishii Т., Okahata Y., Sato T. Mechanism of cell transfection with plasmid/chitosan complexes //Biochim. Biophys. Acta. 2001. V. 1514. P. 51−64
  144. Yang F., Cui X., Yang X. Interaction of low-molecular-weight chitosan with mimic membrane studied by electrochemical methods and surface plasmon resonance // Biophys. Chem. 2002. V. 99. № 1. P. 99−106
  145. В. Д. Новое направление исследований по поиску радиозащитных препаратов // Бюллетень радиационной медицины. 1968. № 3. С. 3−11
  146. Davidova V.N., Yermak I.M., Gorbach V.I., Solovieva T.F. The effect of temperature on the interaction of Yersinia pseudotuberculosis lipopolysaccharide with chitosan // Membr. Cell. Biol. 1999. V. 13. № 1. P. 49−58
  147. Tobias P. S., Soldau K., Gegner J.A., Mintz D., Ulevitch R.J. Lipopoly saccharide binding protein-mediated complexation of lipopolysaccharide with soluble CD14 //J. Biological Chemistry 1995. V. 270. № 18. P. 10 482−10 488.
  148. Ohno N., Tanida N., Yadomae T. Characterization of complex formation between lipopolysaccharide and lysozyme // Carbohydr. Res. 1991. V. 214. № 1. P. 115−130.
  149. Кочкина 3.M., Поспешны Г., Чирков С. Н. Ингибирование хитозаном продуктивной инфекции бактериофагов Т-серии в культуре Escherichia coli II Микробиология. 1995. Т. 64. № 2. С. 211−215.
  150. З.М., Поспешны Г., Чирков С. Н. Ингибирование хитозаном фаголизиса культуры Bacillus thuringiensis // Прикладная биохимия и микробиология. 1996. Т. 32. № 2. С. 247−250
  151. Torrado S., Prada P., Torre P.M., Torrado S. Chitosan-poly (acrylic) acid polyionic complex: in vivo study to demonstrate prolonged gastric retention // Biomaterials. 2004. V. 25. P. 917−923
  152. Kato Y., Onishi H., Machida Y. Application of chitin and chitosan darivatives in the pharmaceutical field // Curr. Pharm. Biotechnol. 2003. V. 4. № 5. P. 303−309
  153. Peluso G., Petillo O., Ranieri M., Santin M., Ambrosio L., Calabro D., Avallone В., Balsamo G. Chitosan-mediated stimulation of macrophage function // Biomaterials. 1994. V. 15. № 15. P. 1215−1220
  154. Chatelet C., Damour O., Domard A. Influence of the degree of acetylation on some biological properties of chitosan films // Biomaterials. 2001. V. 22. P. 261 268
  155. Sionkowska A., Wisniewski M., Skopinska J., Kennedy C.J., Wess T.J. Molecular interactions in collagen and chitosan blends // Biomaterials. 2004. V. 25. P. 795−801
  156. Liu H., Mao J., Yao K., Yang G., Cui L., Cao Y. A study on a chitosan-gelatin-hyaluronic acid scaffold as artificial skin in vitro and its tissue engineering applications // J. Biomater. Sci. Polym. Ed. 2004. V. 15. № 1. P. 25−40
  157. Zarzycki R., Modrzejewska Z. Use of chitosan in medicine and biomedical engineering // Polim. Med. 2003. V. 33. № 1−2. P. 47−58
  158. Kuberka M., Heschel I., Glasmacher В., Rau G. Preparation of collagen scaffolds and their applications in tissue engineering // Biomed. Tech. 2002. V. 47. Suppl. l.Pt. 1. P. 485−487
  159. B.M., Червинец B.M., Воробьев A.A. Роль персистирующих условнопатогенных бактерий в патогенезе язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2003. № 4. С. 11−17
  160. В .И., Тувальбаев Б. Г. Фитотерапия предраковых гинекологических заболеваний // Материалы 5-й Международной научной конференции «Фитотерапия, биологически активные вещества естественного происхождения». Черноголовка. 2004. С. 150−158
  161. Ikinci G., Senel S., Akincibay H., Kas S., Ercis S., Wilson C.G., Hincal A.A. Effect of chitosan on a periodontal pathogen Porphyromonas gingivalis II Int. J. Pharm. 2002. V. 235. № 1−2. P. 121−127
  162. Г. И., Скорикова E.E., Зязин А. Б. Электрофорез хитозана при лечении заболеваний пародонта // Матер. VI Междунар. конф. «Новые достижения в исследовании хитина и хитозана». -М.: ВНИРО. 2001. С. 241−248
  163. Alonso M.J., Sanchez A. The potential of chitosan in ocular drug delivery //J. Pharm. Pharmocol. 2003. V. 55. № 11. P. 1451−1463
  164. Senel S., McClure S.J. Potential applications of chitosan in veterinary medicine //Adv. Drug. Deliv. Rev. 2004. V. 56. № 10. P. 1467−1480
  165. Ueno H., Mori Т., Fujinaga T. Topical formulations and wound healing applications of chitosan // Adv. Drug. Deliv. Rev. 2001. V. 52. № 2. P. 105−115
  166. Bacon A., Makin J., Sizer P.J., Jabbal-Gill I., Hinchcliffe M., Ilium L., Chatfield S., Roberts M. Carbohydrate biopolymers enhance antibody responses to mucosally delivered vaccine antigens // Infec. Immunity. 2000. V. 68. № 10. P. 57 645 770
  167. Guggi D., Kast C.E., Bernkop-Schnurch A. In vivo evaluation of an oral salmon calcitonin-deliveiy system based on a thiolated chitosan carrier matrix // Pharm. Res. 2003. V. 20. № 12. P. 1989−1994
  168. Kelly H.M., Deasy P.B., Ziaka E., Claffey N. Formulation and preliminary in vivo dog studies of a novel drug delivery system for the treatment of periodontitis // Int. J. Pharm. 2004. V. 274. № 1−2. P. 167−183
  169. С.Н. Противовирусная активность хитозана // Прикладная биохимия и микробиология. 2002. Т. 38. № 1. С. 5−13
  170. Д.Х., Львова Е. Б. Хитинсодержащая пищевая добавка из мицелиальной биомассы Aspergillus niger // Матер. VI Междунар. конф. «Новые достижения в исследовании хитина и хитозана». -М.: ВНИРО. 2001. С. 204−207
  171. В.П. Состояние и перспективы развития производства хитина, хитозана и продуктов на их основе из панциря ракообразных // Материалы Пятой конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана». -М.: ВНИРО. 1999. С. 15−17
  172. В.И., Родоман В. Е., Лунцевич В. Г. Фитоактивные хитиновые соединения (Обзор) // Прикладная биохимия и микробиология. 1997. Т. 33. № 4. С. 355−362
  173. Spector Т. Refinement of the Comassie Blue method of protein quantitation//Anal. Biochem. 1978. V. 86. P. 141−146
  174. Lim S., Hattori K., Hudson S.M. Preparation of a fiber-reactive chitosan derivative with enhanced antimicrobial activity / In: Advan. Chitin Sci. / Ed. M.G. Peter, A. Domard, R.A.A. Muzzarelli. Potsdam, Germany. 2000. V. 4.1. P. 454−459
  175. И.И. Конформация макромолекул (визкозиметрический метод оценки). -М.: Химия. 1981. 281с.
  176. W., Во S., Li S., Qin W. Determination of the Mark-Houwink equation for chitosans with different degree of deacetylation // Int. J. Biol. Macromol. 1991. V. 13. № 5. P. 281−285
  177. Патент № 2 164 241 РФ «Реагент для определения аденозин-5'-трифосфата»
  178. Л.М., Богаутдинов З. Ф., Опарин Ю. Г., Угарова Н. Н., Фрунджян В. Г. Биолюминесцентное определение жизнеспособных клеток в лиофилизованных вакцинах // Ветеринария. 2002. Т.9. С.22−27
  179. Н.А., Бровко Л. Ю., Угарова Н. Н. Сравнение методов экстракции внутриклеточного АТФ микроорганизмов различного типа длябиолюминесцентного определения клеток микроорганизмов // Прикладная биохимия микробиология. 1997. Т.ЗЗ. №.3. С.344−349
  180. Ito S., Karnovski М. Formaldehyde glutaraldehyde fixatives containing trinitro compounds // J. Cell. Biol. 1969. V. 39. P. 168−169
  181. Luft I.H. Improvements in epoxy resin embedding method // J. Biophys. Biochim. 1961. V. 9. P. 409−411
  182. Reynolds E.S. The use of lead citrate at high pH as an electrona paque stain in electron microscopy // J. Cell. Bioll. 1963. V. 17. P. 208−212
  183. P. Опухоли растений. -M.: Колос. 1981. 303с.
  184. Н.Н. Биоаналитические применения люциферазы светляков (Обзор) // Прикладная биохимия микробиология. 1993. Т.29. №.2. С.180−191
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!