Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Исследование вирулицидной активности производных пиридина и гемина и создание на их основе композиций с антисептическим действием

Диссертация: Исследование вирулицидной активности производных пиридина и гемина и создание на их основе композиций с антисептическим действием
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Несомненны успехи медицинской науки и практики в ликвидации и снижении в десятки и сотни раз заболеваемости от многих инфекций. Однако инфекционные болезни не отошли на второй план и являются актуальной проблемой здравоохранения. По данным Всемирной организации здравоохранения, из 50 млн. человек, ежегодно умирающих в мире, у более чем 16 млн. причиной смерти являются инфекционные заболевания… Читать ещё >

Исследование вирулицидной активности производных пиридина и гемина и создание на их основе композиций с антисептическим действием (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Использованные сокращения
  • Часть I. Обзор литературных данных
    • 1. 1. Вирулицидное действие дезинфицирующих средств и антисептиков
    • 1. 2. Антисептики, обладающие вирулицидными свойствами
    • 1. 3. Механизмы антимикробного действия ПАВ
    • 1. 4. Искусственные нуклеазы как основа создания вирулицидных препаратов
    • 1. 5. Методология испытаний дезинфицирующих средств и антисептиков
    • 1. 6. Цели и задачи работы
  • Часть II. Собственные данные
  • Глава 1. Материалы и методы
    • 1. 1. Тест-вирусы
    • 1. 2. Клеточные культуры
    • 1. 3. ДВ, композиции и коммерческие препараты
    • 1. 4. Тест-объекты
    • 1. 5. Методика исследования нуклеолитической активности производных гемина по отношению к плазмидной ДНК
    • 1. 6. Определение целостности ДНК методом ПЦР
    • 1. 7. Структура вирусологического исследования
    • 1. 8. Методы изучения и оценки токсичности и статистическая обработка данных
  • Глава 2. Изучение вирулицидной активности производных пиридина и композиций на их основе
    • 2. 1. Краткое введение
    • 2. 2. Получение производных пиридина
    • 2. 3. Свойства соединения ДОПД
    • 2. 4. Изучение вирулицидных свойств пиридинсодержащего соединения ДОПД гидрохлорида
    • 2. 5. Создание композиций на основе производного пиридина
    • 2. 6. Краткое обсуждение
  • Глава 3. Изучение вирулицидной активности производных гемина
    • 3. 1. Краткое введение
    • 3. 2. Схемы получения производных гемина
    • 3. 3. Пути целенаправленного молекулярного дизайна производных гемина
    • 3. 4. Свойства соединений
    • 3. 5. Изучение вирулицидных свойств производных гемина
    • 3. 6. Исследование нуклеолитической активности производных гемина
    • 3. 7. Описание взаимосвязи между структурой и функцией, выбор наиболее активного соединения
    • 3. 8. Рекомендации по дальнейшему развитию исследованных соединений и созданию композиций на их основе
    • 3. 9. Краткое обсуждение
  • Часть III.
  • Обсуждение результатов
    • 1. 1. возможные механизмы вирулицидного действия производного пиридина ДОПД и композиции на его основе
    • 1. 2. механизмы вирулицидного действия производных гемина
    • 1. 3. взаимосвязь между структурой и активностью в ряду исследованных производных гемина
  • Выводы

Несомненны успехи медицинской науки и практики в ликвидации и снижении в десятки и сотни раз заболеваемости от многих инфекций. Однако инфекционные болезни не отошли на второй план и являются актуальной проблемой здравоохранения. По данным Всемирной организации здравоохранения, из 50 млн. человек, ежегодно умирающих в мире, у более чем 16 млн. причиной смерти являются инфекционные заболевания.

Инфекционные заболевания находятся на первом месте в структуре общей заболеваемости нашей планеты, так как примерно 70% регистрируемых заболеваний имеют инфекционные признаки.

Доказано, что отдельные раковые, сердечно-сосудистые заболевания, а также заболевания органов пищеварения имеют инфекционное происхождение.

Человечеству в 20 веке удалось ликвидировать только одну инфекцию — натуральную оспу и получить тридцать шесть новых инфекционных болезней. В силу многих причин, в мире количество населения, страдающего от инфекционных заболевании увеличивается, а не уменьшается.

Огромное число микроорганизмов, населяющих наш организм, находится с ним в различных отношениях — от взаимовыгодных до антагонистических. Около трех с половиной тысяч видов микробов при попадании в организм могут вызывать патологический процесс, который проявляется в виде инфекционной болезнипри этом не все микроорганизмы изучены.

Возбудителями до 90% инфекционных заболеваний, часто носящих эпидемический и даже пандемический характер, являются именно вирусы. Трудность разработки этиологических средств лечения и ограниченность выбора эффективных противовирусных препаратов заставляет обратить особое внимание на разработку средств, обладающих способностью уничтожать или инактивировать вирусы в окружающей среде, препятствуя распространению инфекций. Поэтому разработка эффективных дезинфицирующих и антисептических препаратов, обладающих вирулицидными свойствами, является важным и необходимым элементом в борьбе с вирусными инфекциями [1].

При выборе дезинфекционных технологий существенным является то, что разные объекты характеризуются различными уровнями вирусной контаминации, и при этом микроорганизмы различных групп и видов обладают различающейся устойчивостью к тем или иным дезинфектантам и антисептикам.

Главной задачей дезинфекционных технологий является предотвращение попадания или инактивация патогенного микроорганизма на этапе его проникновения в организм человека, а именно антисептическая обработка, т. е. система мер быстрого подавления микроорганизмов на коже и слизистых оболочках человека. Основным ее методом является обработка щадящими дезинфицирующими веществами с учетом спектра их антимикробной активности и чувствительности конкретных возбудителей.

Быстрая и эффективная дезинфекция инвазивных и операционных поверхностей на теле пациентов, обработка рук хирургов, слизистых полостей рта и гениталий была и остается одной из первостепенных задач в этой области.

В связи с появлением сложных и дорогих влагои хемо-чувствительных многокомпонентных устройств, предназначенных для введения внутрь организма, асептика и антисептика разнообразных медицинских устройств также является одной из самых острых проблем современной дезинфектологии.

Актуальна также проблема обработки ран в условиях ЧС, для решения которой необходим подбор высокоэффективных ДВ и приемлемой формы применения для экстремальных условий (салфетки, распылители и др.).

В настоящее время в нашей стране разрешено к применению около 450 дезинфицирующих средств — химических препаратов, многие из которых обладают лишь слабой, недостаточной вирулицидной активностью или вовсе вирулицидами не являются [2]. При этом более 35% дезинфицирующих средств относится к группе ПАВ-ЧАС. Обладая целым рядом ценных качеств (малая токсичность и экологическая безопасность, наличие моющих свойств, достаточная бактерицидность и др.), такие дезинфицирующие средства характеризуются недостаточной вирулицидной активностью, что ограничивает сферу их применения в современных условиях эпидемиологического неблагополучия и существующей угрозы биотерроризма.

В связи с дополнительными специфическими требованиями, предъявляемыми к антисептикам с вирулицидным действием[1], их выбор еще более ограничен, а так как потребность в них очень велика, то разработке вирулицидных антисептиков уделяется особое внимание.

Целью настоящей работы явился поиск новых соединенийпотенциальных ДВ, обладающих высокой вирулицидной активностью, и создание на их основе новых низкотоксичных и высокоэффективных композиций дезинфектантов и кожных антисептиков.

Часть I. Обзор литературных данных.

95 Выводы.

1. Изучены свойства и показана вирулицидная активность производного пиридина «ДОПД».

2. Создана новая композиция антисептического средства на основе «ДОПД», обладающая широким спектром вирулицидной активности при низкой концентрации ДВ (0,01%).

3. С применением целенаправленного молекулярного дизайна получена группа синтетических производных гемина, обладающих высокой вирулицидной активностью.

4. Изучены и отобраны производные гемина, обладающие оптимальными для дезинфектанта свойствами: вирулицидностью, водорастворимостью, устойчивостью, прогнозируемой низкой токсичностью, биосовместимостью и биодеградируемостыо.

5. Установлена способность исследованных производных гемина расщеплять вирусную ДНК.

6. Предложены механизмы вирулицидного действия исследованных производных гемина, заключающиеся в способности катализировать окисление ПНЖК мембран и деструктировать НК вируса.

7. На основе выявленной взаимосвязи между структурой, физикохимическими свойствами и вирулицидной активностью предложены основы рационального конструирования более совершенных вирулицидных агентов данного ряда.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Н.Н., Носик Д. Н. / Вирусные инфекции и дезинфекция// РЭТ-инфо, 2006, № 3, с.13−17.
  2. М.Г. Шандала /Оценка вирулицидной активности дезинфицирующих средств и проблемы ее тестирования// Дезинфекционное дело, 2004, № 3, с. 41−43.
  3. А.П., Справочник по антисептике, Минск, изд-во «Высшая школа», 1995.4. «Handbuch der Antiseptic», 1987, т. II, часть 3.
  4. Л.Б. Борисов //Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. /М., «Медицинское информационное агенство», 2005.
  5. М.Д. Машковский. //Лекарственные средства. Пособие для врачей. / М., «Новая Волна», 2005.
  6. J.J. /Quaternary ammonium antimicrobial compounds// Jn: Desinfection, sterilization and preservation. Block S.S., editor. Philadelphia: Lea and Febirger- 1991, p. 225−55.
  7. Л.А., Голубко М. Н. и др. / Глутаровый альдегид.//, М., НИИТЭХИМ, 1983.
  8. М.Г. «Дезинфекционные средства», ч.1 М., 2001−12. «Химическая энциклопедия.» М., «Советская энциклопедия», 1988, т.1, с. 528.
  9. В. Halliwell, J. М.С. Gutteridge / Free radicals in biology and medicine.// Third edition, Oxford, Univ. Press, 1999.
  10. C.E. Thomas, S.D. Aust / Reductive release of iron from ferritin by Cation Free Radicals of Paraquat and other Bypiridils // J.Biol. Chem., v.261, № 28, p. 13 064−13 070,1986.
  11. K.C. Bhuyan, D.C. Bhuyan, S.M. Podios. /Free radical enchancer xenobiotic is an inducer of cataract in rabbit.// Free Rad. Res. Commun., 1991, v.12−13, p.609−620.
  12. D.S., Vlasov V.V., Zarytova F.V., Lebedev A.V., Fedorova A.S. / Design and targeted reactions of oligonucleotide derivatives.// Boca Ration: CRC Press, FL, 1994.
  13. Han H, Schepartz A, Pellegrini M, Dervan PB. /Mapping RNA regions in eukaryotic ribosomes that are accessible to methidiumpropyl-EDTA.Fe (II) and EDTA. Fe (II).// Biochemistry. 1994 v. 33, № 33, pp. 9831−9844.
  14. Smith J, Ariga K, Anslyn E V. /Enhanced imidazole-catalyzed RNA cleavage induced by a bis-alkylguanidium receptor. // J. Am. Chem. Soc., 1993, 115, pp.362−364.
  15. M.A., Vlassov V.V., Giege R. / Synthetic RNA-cleaving molecules mimicking ribonuclease A active center. Desing and cleavage of tRNA transcripts.//Nucleic Acids Res., 1993, V. 21, pp. 5950−5956.
  16. V.V., Zuber G., Felden B., Behr J.P., Giese R. / Cleavage of tRNA with imidazole and spermine imidazole constructs: a new approach for probing RNA structure.// Nucleic-Acids Res., 1995 August 25, 23(16), pp. 3161−3167.
  17. Koike T, Kimura E. / Roles of zinc (II) ion in phosphatases. A. model study with zinc (II)-macrocyclic polyamine complexes.// J. Am. Chem. Soc., 1991, 113, pp. 8935−8941
  18. B., Brack A. / Basic polypeptides accelerate the hydrolysis of ribonucleic acids. // J. Am. Chem. Soc., 1988, vol. 110, no20, pp. 68 806 882.
  19. M. / Molecular design of artificial materials for selective cleavage of nucleic acids.// Yuki gosei kagaku kyokaishi, 1991, v. 49, № 8, pp. 762−769.
  20. Michalowski D, Wrzesinski J, Krzyzosiak W. / Cleavages induced by different metal ions in yeast tRNA (Phe) U59C60 mutants.// Biochemistry, 1996, v. 35, № 33, pp.10 727−10 734.
  21. N., Lipsomb W. N., Klablunder T., Krebs B. / Two-metal ion catalysis in enzymatic acyl- and phosphoryl-transfer reactions.// Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1995, v. 35, pp. 2024−2055.
  22. Taira K- Uebayasi M- Maeda H- Furukawa K. / nergetics of rna cleavage implications for the mechanism of action of ribozymes. // protein engineering, 1990, v. 3 № 8, pp. 691−701.
  23. M., Goodman M.F., Petruska J., Warshel A. / Structure-Energy Analysis of the Role of Metal Ions in Phosphodiester Bond Hydrolysis by DNA Polymerase I. // J Am Chem Soc. 1995, v. 117, pp. 11 619−11 627.
  24. Stern M.K., Bashkin, J.K., Sall, E.D. / Hydrolysis of RNA by transition metal complexes.// J. Am. Chem. Soc., 1990,112, pp. 5357−5359.
  25. Morio Yashiro, Akira Ishikubo, Makoto Komiyama./ Dinuclear Lanthanum (III) Complex for Efficient Hydrolysis of RNA.// J Biochem (Tokyo) 1996, v. 120, pp. 1067−1069
  26. Morrow J.R., Buttrey, L.A., Shelton, V.M., Berback, K.A. Efficient catalytic cleavage of RNA by lanthanide (III) macrocyclic complexes: toward synthetic nucleases for in vivo applications. J. Am. Chem. Soc., 1992 v.114, pp. 1903−1905.
  27. Weiner D.P., Wiemann T., Wolfe M.M., Wentworth P., Janda K.D./ A Pentacoordinate oxorhenium (v) metallochelate elicits antibody catalysts for phosphodiester cleavage. // Journal of the American Chemical Society, 1997, v. 119, № 17, pp. 4088−4089.
  28. Bashkin J.K., Frolova E.I., Sampath U./ Sequence-specific cleavage of HIV mRNA by a ribozyme mimic. //J. Am. Chem. Soc., 1994, v. l 16, pp. 5981−5982.
  29. Matsumura K., Endo, M., Komiyama, M. / Lanthanide complex-oligoDNA hybrid for sequence-selective hydrolysis of RNA.// J. Chem. Soc. Chem. Commun., 1994, pp. 2019−2020.
  30. M. / Sequence-Specific and Hydrolytic Scission of DNA and RNA by Lanthanide Complex-OligoDNA Hybrids. // J Biochem (Tokyo), 1995, v. 118, pp. 665−670.
  31. Hall J., Husken, D., Pieles, U., Moser, H.E., Haener, R./ Efficient sequence-specific cleavage of RNA using novel europium complexes conjugated to oligonucleotides.// Chem. Biol., 1994, v. l, pp. 185−190.
  32. Magda D., Miller, R.A., Sessler, J.L., Iverson, B.L./ Site-specific hydrolysis of RNA by europium (III) texaphyrin conjugated to a synthetic oligodeoxyribonucleotide.//J. Am. Chem. Soc., 1994, v. 116, pp. 74 397 440.
  33. Gobel M.W., Bats J.W., Durner G./ En route to synthetic phosphodiesterases: supramolecular phosphoryl-transfer mediated by amidinium-phosphate contact ion-pairs.// Angew. Chem., Int. Ed. Engl., 1992, v. 31, № 2, pp. 207−209.
  34. Shinozuka K., Shimuzu K., Nakashima Y., Sawai H./ Synthesis and rna cleaving activities of polyamine derived novel artificial ribonuclease.// Bioorganic & medicinal chemistry letters. 1994, v. 4, № 16, pp. 19 791 982.
  35. Breslow R., Labelle M./ Sequential general base acid catalysis in the hydrolysis of rna by imidazole.// J. Am. Chem. Soc., 1986, v. 108, № 10, pp. 2655−2659.
  36. Breslow R., Doherry J.B., Guillot G., Lipsey C./ Beta-cyclodextrinylbisimidazole, a model for ribonuclease.// J. Am. Chem. Soc., 1978, v. 100, № 10, pp. 3227−3229.
  37. Usher D.A., Erenrich Evelyn S., Eckstein F./ Geometry of the First Step in the Action of Ribonuclease-A.// Proc Natl Acad Sci USA. 1972 v. 69, № 1, pp. 115−118.
  38. Usher DA, Richardson DI Jr, Eckstein F./ Absolute stereochemistry of the second step of ribonuclease action.// Nature. 1970 Nov 14, v. 228, № 5272, pp. 663−665.
  39. Lorente A., Espinosa J.F., Fernandez-Saiz M., Lehn J.-M., Wilson W.D., Zhohg Y.Y./ Synthesis of Imidazole-Acridine Conjugates as Ribonuclease A Mimics.// Tetrahedron Letters, 1996, 37, pp. 4417−4420.
  40. Tung C.-H., Wei Z., Leibowitz M.J., Stein S./ Design of Peptide-Acridine Mimics of Ribonuclease Activity.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1992, v. 89, pp. 7114−7118.
  41. Pace, C.N., Heinemann U., Hahn U., Saenger W./ Ribonuclease Tl: Structure, Function, and Stability.// Angewandte Cheni, International Edition, 1991, v.30, pp. 343−360.
  42. Endo M., Hirata K., Ihara T., Sueda S., Takagi M., Komiyata M./ RNA hydrolysis by. the cooperation of carboxilate ion and ammonium.// J. Am. Chem. Soc., 1996, v. 118, pp. 5478−5479.
  43. Muche M.-S., Gobel M.W./ Bis (guanidinium) alcohols as models of staphylococcal nuclease: substratebinding through ion pair complexes and fast phosphoryl transfer reactions.// Angew. Chem., Int. ed. Engl., 1996, v. 35, № 18, pp. 2126−2129.
  44. Bashkin J.K., McBeath R.J., Modak A.S., Sample K.R., Wise W.B./ Synthesis and characterization of oligonucleotide peptides.// Journal of organic chemistry, 1991, v. 56, № 9, pp.3168−3176.
  45. Kierzek R./ Nonenzymatic hydrolysis of oligoribonucleotides.// Nucleic Acids Res. 1992 Oct 11,20(19), pp.5079−5084.
  46. Zimmer Ch./ Effects of the antibiotics netropsin and distamycin A on the structure and function of nucleic acids.// PNAMB. 1980.
  47. Thrum H., Haupt I., Bradler G., Zimmer Ch./ Antimicrobial and antineoplastic chemotherapy.//Czech. Med. Press, Prague. 1972. v. I, pp.819−826.
  48. Arcamone F., Bizioli F., Canevazzi G., Grein A. German Patent 1,027,667,1958.
  49. DiMarco A., Soldati M., Fioretty A./ Influence of netropsin and distamycin A on the secondary structure and template activity of DNAV//Acta Unio Int. Contra Cancram, 1964 v.20, p.423
  50. Shuhmarm E., Haupt I., Thrum H., Taubeneck U., Allg Z. I Effect of distamycin A and netropsin on normal cells and wall-less cells of Escherichia coli W 1655 F+J.//Mikrobiol. 1974, v.14, pp. 321−327.
  51. Ratuld Y., Werner G.H./ Progress in antimicrobal and anticancer chemotherapy.// Univ. Tokyo Press, Tokio, 1970, v.2, p. 14.
  52. F.E. // Antibiotics./ Springer-Verlag, Berlin and New York, 1974, v.3
  53. F.E. // Antibiotics./ Springer-Verlag, Berlin and New York, 1974, v.3
  54. Puschendorf В., Peterson E., Wolf H., Werchau H., Granicke H./ Antimicrobial and antineoplastic chemotherapy.// Czech. Med. Press, Prague, 1972, v. l, p.823.
  55. Reinert K.-E. / Physico-chemical properties of nucleic acid.// Academic Press, 1973, New York, v.2, chapter 16, p.319.
  56. M.J. / Molecular Basis of Antibiotic Action.// Wiley, New York, 1972, p.173.
  57. М.Д. Машковский. «Лекарственные средства». TOO «Медицина», 1992.
  58. Makarov A.A. Ilinskaya O.N./ Cytotoxic ribonucleases: molecular weapons and their targets (review).// FEBS Lett., 2003, v. 540, pp. 15−20.
  59. Burakova E.A., Silnikov V.N./ Molecular Design of Artificial Ribonucleases Using Electrostatic Interaction.// Nucleosides, Nucleotides & Nucleic Acids. 2004, v. 23(6/7), pp. 915−920
  60. Методические рекомендации «По определению вирулицидной активности препаратов». МЗ СССР № 1119−73 От 06.09.73 г.
  61. Maniatis Т., Fritish Е., Sambrook J./ Molecular Cloning (A Laboratory Manual) Cold Spring Harbor// N.-Y.: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1982.
  62. Б. Глик, Дж. Пастернак / Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. Перевод с английского Н. К. Янковского. // М., «Мир», 2002, с. 589.
  63. Г. А., Евстигнеева Р. П., Лубсандоржиева JI.К., Лукашова Е. А., Соловьева А. Б. / Каталитическая активность геминпептидов в реакции гидроксилирования холестерина. //Журн.физ.химии, 1995, т.69, № 11, с. 1972−1974.
  64. Р.П., Лубсандоржиева Л. К., Желтухина Г. А. и др. / Синтез моно-С-аминоацильных производных протогемина IX твердофазным методом .//Биоорганическая химия, 1993, т. 19, № 6, с.664−669.
  65. Свидетельство о государственной регистрации № 77.99.36.2.У.5242.7.07 от 11.07.2007 г. Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучию человека.
  66. С.А., Ляхова Е. А., Литвинова Л. А., Андронати С. А. и др. / Синтез и свойства нового типа лигандов ДНК-комбилексина и бисинтерлексинов на основе амиксина// Химико-фармацевтический журнал, 2003, т. 37, № 9, с. 36−41.
  67. Ю.А. «Биоорганическая химия», М., 1987, «Просвещение».
  68. .Ф., Коробов В. Н., Гончар М. В. и др. / Сравнительный анализ пероксидазной активности миоглобинов у млекопитающих.// Журнал эволюционной биохимии и физиологии, 1987, т. XXIII, № 1, с. 37−42.
  69. И.А. Василенко, И. П. Ушакова, Е. И. Феллипович, Г. А. Серебренникова, Р. П. Евстигнеева /Обратимая оксигенация ферропорфиринов в бислойной фосфолипидной мембране// ДАН, 1978, т. 241, № 4, с.963−965.
  70. Р.П., Желтухина Г.А, Рожкова Е. А. /Модели пероксидаз./ Кинетика и катализ, Т. 40, № 2,1999, с. 256−260.
  71. Н.С., Соловьева А. Б. /Катализ металлопорфиринами реакций нецепного окисления олефинов.// Журн.физ.хим., 1988, т.62, № 9, с. 2289−2307.
  72. M. Glei, S. Klenow, J. Sauer, U. Wegewitz, K. Richer, B.L. Pool-Zober / Hemoglobin and hemin induce DNA damage in human colon tumor cell clone 19A and in primary human colonocytes// Mutation Research, 2006, v. 594, p. 162−171.
  73. Е.Б. Морошкина, Н. Г. Юдина, M.A. Кравцова, E.M. Глибин / Взаимодействие ДНК с амфолитами на основе актиномицина.// Молекулярная биология, 1998, т. 32, с. 652−656.
  74. В.А., Горбунов Ю. А., Синяков А. Н. / Сиквенсинальные конъюгаты малобороздочного лиганда с инозин-содержащими олигодезоксирибонуклеотидами// Биоорган, химия, 1997, т. 23, с. 539−543.
  75. Suiyama Н., Kilkuskie R., Hetch S., Van der Marel G., Van Boom J. /An efficient site-specific DNA target for bleomycin.// J. Am. Chem. Soc., 1985, v. 107, p. 7765−7767.
  76. Евстигнеева Р. П, Огрель C.A., Желтухина Г. А, Небольсин В. Е. /Синтез псевдопептидов на основе биогенных аминов.// ДАН, 1995, т. 340, № 2, с. 260−262.
  77. Настоящая работа выполнена в лаборатории онтогенеза вирусов ГУ НИИ вирусологии им. Д. И. Ивановского РАМН.
  78. Искренне благодарен д.м.н., профессору Носику Николаю Николаевичу за ценные советы и неослабное внимание к данной работе на всех этапах ее проведения.
  79. Весьма признателен профессору Носику Дмитрию Николаевичу и Калниной Людмиле Борисовне за помощь в проведении исследований с вирусом ВИЧ.
  80. Благодарю весь коллектив лаборатории онтогенеза вирусов и особенно в.н.с. Кондрашину Нину Геннадиевну, Черткову Тамару Дмитриевну, Жигулина Алексея Олеговича за практическую помощь в выполнении работы.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!