Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Характеристика линий клеток, упаковывающих рекомбинантные ретровирусные векторы, в переносе экзогенной ДНК в клетки млекопитающих

Диссертация: Характеристика линий клеток, упаковывающих рекомбинантные ретровирусные векторы, в переносе экзогенной ДНК в клетки млекопитающих
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Поэтому, большое значение приобретает способ доставки рекомбинант-ных конструкций й организм животных. В связи с этим во всем мире ведутся интенсивные исследования, направленные на разработку новых, эффективных методов переноса. Особенно амуальными на сегодняшний день являются исследования, проводимые на основе клеточной инженерии. Здесь возможно несколько методических подходов. Один из них… Читать ещё >

Характеристика линий клеток, упаковывающих рекомбинантные ретровирусные векторы, в переносе экзогенной ДНК в клетки млекопитающих (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Список сокращений
  • Х.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Методы генетической трансформации клеток
    • 1. 2. Жизненный цикл и строение ретровирусов
    • 1. 3. Ретровирусные векторы
      • 1. 3. 1. Векторы для одиночных генов
      • 1. 3. 2. Векторы для спаренных генов
      • 1. 3. 3. Самоинактивирующиеся векторы
    • 1. 4. Клетки, упаковывающие рекомбинантный ретровирусный вектор
    • 1. 5. Методы получения трансгенных животных
    • 1. 6. Использование ретровирусных векторов в получении трансгенных животных

Интешивность развития живсюшШдствй на современной этапе во многом зависит от разработки новых биотехнологических приемов направленных Ж реконструирование шнома сельскохозяйственных животных. Работы по реконструированию организма животных ведутся в различных направлениях, одним из которых является получение животных со стабильной интеграцией и экспрессией экзогенной ДЩС в геноме (транегенные животные) [45]. Обусловленные переносом ненов такие специфические изменения генома млекопитающих шшшт бошпое зшшш в фавнитш&ной змбршший, биологии |шви-тия, медицине й биотехнологии. Трансгенные животные могут использоваться как модели для изучения болезней человека и животных, в генной терапии, для улучшения физиологических свойств и признаков продукта Шости дОШНШих животных. Коммерческий интерес такие животные гфедставдйют в качШвс источников ценнейших фармакологических (эритропоэтин, ШШ^ерзН, альбумин, факторы свертывания крови и др.) и технических (хиШЗйн) бшйеов. Важным является создание животных, у которых в результате проведения геномных манипуляций организм приобретает устойчивость к инфекциям. В этой связи особенно актуальным считается применение рекомбинангных конструкций, содержащих аншемьхеловые РЙК вирусных генов.

Введение

таких реком-бинантных последовательностей в организм сельскохозяйственных животных С после^тощей ИХ инте1|ШЦШй нозвояило бы блокировать экспрессию вирусных генов на уровне транскрипции.

Известно, что в некоторых случаях, интеграция оекомбинантной ДНК отзывает негативное воздействие на организм животного. Например, трансгенные животные, полученные инъекцией в пронуклеус рекомбинангных IH1 ДНК Ш эритропоэтина, представляющего собой ценное фармакологическое средство, оказываются нежизнеспособными. Но направленная продукция такого белка в молоко сельскохозяйственных животных могла бы иметь огромный коммерческий интерес. Поэтому возникает необходимость в создании не всего трансгенного организма, а только какой-то его части, ткани или органа, например. Молочной железы. Таких жийотййых называю! «фенотйпическими трансгенами».

Перенос генов в клетки животных возможен на различных стадиях эмбрионального й постнатальнога роста организма. Анализ литературных данных показал, что в создании трансгенных животных широкое применение нашли несколько методических приемов: ретровирусная трансфекция эмбрионов, мшфоинъекция ДНК в пронуклеус, использование трансгенной спермы, в качестве вектора, и получение эмбриональных химер с помощью эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) [34], Всё эш Методы гюка эффективны на лабораторных животных. Следует заметить, что наиболее часто используемым методом для получения трансгеннмх сельсшхозмйс! шенных животных, до сих пор была микройнъскция рекомбинантной ДШС й пронуклеус яйцеклетки. Однако данный метод далек от совершенства й имеет ряд недостатков: трудоемкий, дорогостоящий и, самое главное, неэффективный [51]. Более того, не встроившиеся й геном peufffiftcHia молекулы рекомбинантных ДНК (а при инъекции используются, как правило, их линейные формы) подвергаются разрушению.

Поэтому, большое значение приобретает способ доставки рекомбинант-ных конструкций й организм животных. В связи с этим во всем мире ведутся интенсивные исследования, направленные на разработку новых, эффективных методов переноса. Особенно амуальными на сегодняшний день являются исследования, проводимые на основе клеточной инженерии. Здесь возможно несколько методических подходов. Один из них предполагает использование линий клеток, ретровирусные векторы. Использование рстроййрусов й качестве векторных молекул за последние годы обрели статус наиболее перспективного и универсального метода введения клонированных генов в эукариотическйе клетки й йх экспрессии [115]. Это обусловлено несколькими причинами, одной щ ШШрЬШ яшмется высокая эффективность Шфицирования пермиссивных клеток, В сочетании с упаковывающими клетками, В которых происходит полная сборка вируса и отпочковывание, можно получить ПОЧТИ 100%-ное заражение клеток-миШёШй в ЩШЩДШ [121]. Ретро-вирусы позволяют вводить экзогенную ДНК в клетки зародышевого пути посредством предьшштатационного инфицирования Эмбрионов или спермы, что может рассматриваться, как перспективный материал для геномных манипуляций у животных. Можно предрЗлШКить, что преимущество использования клеток. упаковывающих рекомбййайтйых ретровируеный вектор состоит в следующем: предшрю&тьноблокированные митомицином С и введенные шд оболочку эмбриона, в орган или ткань животного, они способны жить в течение 5−10 сут и являться «мини-фабрикой», производящей десятки тысяч биологически активных инфекционных вирионов, содержащих рекомбинантные последовательности интересующих исследователя генов. Этот аспект, безусловно, является важным для решения спещалш1фованнь1Х задач современной медицины и ветеринарии. Однако перед введением в организм животных существует необходимость тестирования вектора Щ vitpft.

С учетом аюгуалшюеш выше излс^шюго, цель вашей работы заключалась в том, чтобы охаракшршовшь линии клеток, упаковывающих рекомбинантные ретровирусные йекторъ!, в переносе экзогенной ДНК в клетки млекопитающих, имеющие различное видовое и тканевое происхождение. Для достижения намеченной цели были поставлены следующие задачи:

• изучить и охарактеризовать Морфофизйолошческие особенности линий клеток, упаковываюизйх рекомбинантные ретровирусные векторыввести экзогенную ДНК в геном клеток-мишеней in vitro посредством.

1) инфицирования с помощью вирусных препаратов;

2) инфицирования путем совместного культивирования с клетаами-«упаковщицами»;

9 изучить потенции линий клсток-«упаковшиц» в переносе экзогенной ДНК в клетКИ-мйшени, имеющие различную видовую и тканевую принадлежность;

• провести сравнительный анализ эффективности использования линий клеток-«упаковщиц» рекомбинантных векторов для получения стабильных генетически трансформированных клонов клеток млекопитающих;

• разработать новый метод получения трансгенных животных, основанный на использовании линий клеток, упаковывающих рекомбинантные ретро-вирусные векторы.

Научная новизна. Впервые в культуре клеток сельскохозяйственных животных (свиньи и крупного рогатого скота) протестированы и охарактеризованы 4 рекомбинантных ретровирусных вектора: pLU, pLR, pLNa и pLNCX2, продуцируемые двумя линиями упаковывающих клеток: AMI 2 и РТ67.

Впервые продемонстрировано, что сконструированные рекомбинантные гены (эритропоэтин и интерферон человека, антисмысловая РНК вируса лейкоза крупного рогатого скота), входящие в состав ретровирусных векторов, способны экспрессироваться в культуре генетически трансформированных клеток сельскохозяйственных животных (свиньи и крупного рогатого скота).

Практическая ценность работы. Показана необходимость тестирования линий клеток, упаковывающих рекомбинантные ретровирусные векторы, в культуре клеток сельскохозяйственных животных перед введением их в организм.

Разработан способ получения «фенотипических» трансгенных животных, основанный на введении клеток-«упаковщиц» рекомбинантных ретровирусных векторов в семенники быков.

Основные положения, выносимые на защиту: — зависимость эффективности использования рекомбинантных ретровирусных векторов в переносе экзогенной ДНК от видовой и тканевой принадлежности клеток-мишеней;

— зависимость частоты генетической трансформации клеток-мишеней с помощью рекомбинантных ретровирусных векторов от метода трансфекциии.

— влияние способа введения в семенники быков клеток, упаковывающих рекомбинантные ретровирусные векторы, на получение генетически трансформированных сперматозоидов.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены: на научно-практической конференции по проблеме «Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения», РАМЖ, п. Быково, июнь 2000 г.- на 49-ой научно-методической конференции «Достижения молодых ученых в области животноводства», ВНИИЖ, п. Дубровицы, июль 2000 г.- на научной конференции «Селекционно-генетические методы повышения продуктивности сельскохозяйственных животных», ВНИИРГЖ, г. Санкт-Петербург, октябрь 2000 г.

Публикации. По материалам диссертации опубликованы 3 научные работы.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 101 стр., содержит 1 схему, И табл., 16 рис. (в т.ч. 9 фотографий, 2 диаграммы), состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты, обсуждение, выводы, список литературы.

Список литературы

включает 169 библиографических источников, в т. ч. 123 на иностранном языке.

5. ВЫВОДЫ.

Исходя из результатов проведенных нами исследований, можно сделать следующие выводы:

1. Установлено, что клетки-«упаковщицы», продуцирующие рекомбинантные ретровирусные векторы, позволяют получить генетически трансформированные клетки сельскохозяйственных животных с максимальной частотой генетической трансформации от 2−10' до 5−10″ .

2. Впервые в культуре клеток сельскохозяйственных животных протестированы и охарактеризованы 4 рекомбинантных ретро виру сны х вектора:

1) вектор pLNa — наиболее эффективен генетически трансформировать клетки крупного рогатого скота с частотой трансформации 2 -1 (Г3;

2) векторы pLU, pLR и pLNCX2 — способны генетически трансформировать клетки свиньи с частотой трансформации 2-Ю3, 4−10 3 и 5−1 (Г3, соответственно.

3. Сравнительный анализ эффективности методов переноса (метод трансфекции с помощью вирусного препарата и метод совместного культивирования с клетками, упаковывающими рекомбинантный рет-ровирусный вектор) выявил преимущество метода совместного культивирования клеток-мишеней с упаковывающими клетками в 300−1000 раз.

4. Показано, что из изученных в культуре клеток рекомбинантных ретро-вирусных векторов, вектор pLNa оказался эффективным (25%) в переносе экзогенной ДНК в организм животных (быков).

Показать весь текст

Список литературы

  1. Н.Б. Тестирование генных конструкций в культурах клеток почки эмбриона свиньи (СПЭВ) и трахеи эмбриона крупного рогатого скота (FBT). Автореф. дне.канд. биол. наук. — Дубровицы, 1994. -20 с.
  2. ., Брей Д., Льюис Дж. Молекулярная биология клетки. М.: Мир. -1986.-В 3-х тт.
  3. А. Д. Вирусные инфекции и генетическая инженерия // Биотехнология. 1987. — Т. 3. — № 3. — С. 276−282.
  4. А.Д. Семейство Papovaviridae. -В кн.: Общая и частная вирусология. Т. 2. // Под ред. В. М. Жданова. С. Я. Гайдамович. — М.: Медицина. -1982. С. 463−477.
  5. B.C., Гапала И., Грияч П. // Цитология и генетика. 1990. — Т. 24. -№>3. — С. 3−7.
  6. Г., Зиновьева Н. А., Эрнст Л. К. «Генные фермы» новый путь производства биологически активных протеинов трансгенными животными // Сельскохозяйственная биология. — 1993. — № 6. — С. 3−27.
  7. К.Г., Тарантул В. З. Экспериментальный перенос генов в соматических клетках млекопитающих// Успехи современной биологии. -1981. Т.92. — № 2. — С. 163−179.
  8. К.Г., Шахбазян А. К., Незнанов Н. С. // Доклады АН СССР.1981. Т. 258. — № 5. — С. 1224−1227.
  9. О.К. Генетическая трансформация соматических клеток. Л.: Наука. 1989. — 351 с.
  10. O.K., Абрамян Д. С., Смирнова Т. М. Генетическая трансформация соматических клеток. 5. Наследуемость скорости потери и стабилизации трансформантного фенотипа // Цитология. 1985. — Т. 27. -№ 6. — С. 670−677.
  11. Д. Клонирование ДНК. Методы. М.: Мир. -1988. — 538 с.
  12. Д. Новое в клонировании ДНК. Методы. М.: Мир. -1989. -367 с.
  13. П.А. Совершенствование биотехнологических приемов получения трансгенных сельскохозяйственных животных // Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1992. — 20 с.
  14. А.В. Культивирование in vitro зигот крупного рогатого скота и кролика, микроинъецированных генами бета 1- интерферона человека и асРНК к вирусу лейкоза крупного рогатого скота // Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1993. — 22 с.
  15. А.П. Трансгенные млекопитающие в биологии развития // Онтогенез. 1989. — Т.20. — № 6. — С. 577−592.
  16. А.П., Городецкий С. И. Генетическая трансформация млекопитающих // Молекулярные механизмы генетических процессов. М. -1985. — С. 84−93.
  17. А.П., Городецкий С. И. Интродукция в геном млекопитающих чужеродных генов: пути и перспективы. В кн.: Молекулярные и клеточные аспекты биотехнологии. JL: Наука. — 1986. — С. 82−97.
  18. А.П., Городецкий С. И. Молекулярные и клеточные аспекты биотехнологии. Л.: Наука. — 1985. — С. 84−93.
  19. Jl.П. Гибридные и генетически трансформированные культуры клеток в биотехнологии и ветеринарной медицине // С.-х. биол. -1994.-С. 26−33.
  20. Л.П. Новые клеточные системы: гибридные и генетически трансформированные культуры клеток сельскохозяйственных животных / Тезисы докладов Международной конференции, посвященной памяти академика А. А. Баева. М. — Май 1996. — С. 48.
  21. Животная клетка в культуре (Методы и применение в биотехнологии) / Под ред. проф. Дьяконова Л. П., проф. Ситькова В. И. М.: Компания Спутника. — 2000. — 400 с.
  22. А.В. Трансгенные животные. Приемы конструирования // Биотехнология. 1995. — № 3−4. — С. 3−6.
  23. С., Дарнелл Дж., Балтимор Д., Кэмпбелл Э. Общая вирусология. -М:Мир. -1984. -680 с.
  24. Т., Фрич Э. Молекулярное клонирование. — М.: Мир. 1985. — 489 с,
  25. С.В., Винецкий Ю. П., Кетлинский С. А. // Биотехнология. -1992. N"5. -С.10−17.
  26. М.И., Макаревич А. В., Эрнст Л. К. Культура клеток из ткани легкого трансгенного кролика продуцент гормона роста крупного рогатого скота // Доклады ВАСХНИЛ. — 1991. — № 1. — С. 28−32.
  27. И.А. Получение, генетическая трансформация и использование эмбриональных стволовых клеточных линий // Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1993. — 25 с.
  28. И.П. Генетическая трансформация клеток почки эмбриона свиньи (СПЭВ ТК") геном поверхностного антигена вируса гепатита В // Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1992. — 20 с.
  29. И.П. Создание модельных систем культур клеток млекопитающих для решения проблем биологии и биотехнологии // Дис. д-ра биол. наук. Дубровицы, 1997. — 279 с.
  30. И.П. Эмбриональные стволовые клетки в биологии: настоящее и будущее. Дубровицы. — 1999. — 95 с.
  31. И.П., Тугизов Ш. М. Анализ компетентности клеток млекопитающих к поглощению и экепресии трансфецируемых генов // Тезисы докладов. Теоретические и прикладные аспекты молекулярной биологии. М. — 1991. — С. 169.
  32. О.Л. Перенос генов в соматические и половые клетки. — Новосибирск. 1985. — 120 с.
  33. .В., Гиндилис В. Н. Исследование полиморфизма в пределах кластера генов рРНК человека // Генетика. 1989. — Т. 25. — № 7. — С. 1302−1305.
  34. Д., Уилки Н. Экспрессия экзогенной ДНК в клетках млекопитающих. В кн.: Транскрипция и трансляция. Методы. — М.: Мир. -1987.-С. 11−64.
  35. А.В., Зеленин А. В. Новые методы трансфекции клеток млекопитающих // Мол. биология. 1988. — Т. 22. — № 6. — С. 1445−1450.
  36. Н.В. Новые системы генетической трансформации соматических клеток млекопитающих // Биотехнология. 1987. — Т. 3. — № 3. -С. 343−351.
  37. Дж. Рекомбинантные ДНК. М.: Мир. -1986. — 287 с.
  38. С.Н. Конструирование гибридных молекул ДНК. Новосибирск: Наука. — Сибирское отделение. — 1987. — 220 с.
  39. Эмбриональные стволовые клетки, их генетическое изменение путем гомологичной рекомбинации и использование в получении трансгенных животных / Савченкова И. П., Зиновьева Н. А., Булла Й., Брэм Г. // Успехи современной биологии. 1996. — № 116. — С. 78−92.
  40. JI.K. Животноводство XXI век / Информационный бюллетень. Новое в животноводстве. — 1998. — № 1. — С. 6−7.
  41. JI.K., Гольдман И. Л., Кадулин С. Г. Генная инженерия в животноводстве: трансгенные сельскохозяйственные животные, кормовые растения, микроорганизмы рубца // Биотехнология. 1993. — № 5. — С. 2−14.
  42. Amtmann Б., Sauer G. Bovine papillomavirus transcription: Polyade-nylated RNA species and assessment of the direction of transcription // J. Virology. 1982. — V. 43. — P. 59.
  43. Bachiller D., Schellander K., Peli J. Liposome-mediated DNA uptake by sperm cells // Mol. Reprod. Dev. 1991. — V. 30. — № 3. — P. 194−200.
  44. Bond V.C., Wold B. Poly-L-ornitin mediated transformation of mammalian cells // Mol. Cell. Biol. — 1987. — V.7. — № 6. — P. 2286−2293.
  45. Bowen R.A. Efficient Production of Transgenetic Cattle by Retroviral Infection of Early Embryos// Moleculare Reproduction and Development. -1995. V.40. — P. 386−390.
  46. Bowerman В., Brown P.O., Bishop J.M. A nucler protein complex mediates the integration of retroviral DNA // Genes Dev. -1989. -V.3. P. 469 478.
  47. Braskett B.G., Gilmore J., Johnson M. Uptake of heterologous genome by mammalian spermatozoa and its transfer to ova through fertilization / Proc. Natl. Acad. Sci. 1971. — № 68. — P. 353−357.
  48. Brem G., Wanke R., Wolf E. Multiple consequences of human growth hormone expression in transgenic mice If Mol. Biol. Med. 1986. — V.6. -P. 531−547.
  49. Brinster R.L., Zimmerman J.W. Spermatogenesis following male germ-cell transplantation / Proc. Natl. Acad. Sci. 1994. — V. 91. — № 24. — P. 11 298−11 302.
  50. Brown B. W., Ward K.A. Evaluation of transgenic sheep containing a modified growth hormone transgene / Abstracts of 14th International Congress on Animal Reproduction. Stockholm, 2−6 July. 2000. — P. 250.
  51. Bushman F.D., Craigie R. Sequence requirements for integration of Moloney murine leukemia virus DNA in vitro // J. Virology. -1990. V.64. — P. 5645−5648.
  52. Capecchi M.R. High efficiency transformation by direct microijection DNA into cultured mammalian cells // Cell. 1980. — V.22. — P. 479−488.
  53. Chao M.V., Mellon P., Charnay P. Expression of cloned genes in prokary-otic and eukaryotic cells // Gene amplification and analysis. New York. -1983.-V. 3.-P. 215−231.
  54. Chen C., Okayama H. ffigh-efficiensy transformation of mammalian cells by plasmid DNA // Mol. Ceil. Biol. 1987. — V. 8. — № 8. — P. 2745−2752.
  55. Chisholm O., Symonds G. Transfection of myeloid cell lines using poly-brene/DMSO //Nucleic Acids Res. 1987. — V.15. — P.1311.
  56. С lough D.W., Lepinske H.M., Davidson RX. Drosofila P element-enhanced transfection in mammalian cells // Mol. Cell. Biol. 1985. — V.5. — № 4. — P. 898−901.
  57. Coffin J., Weiss R., Teich N. RNA Tumor Viruses Varmus H. Cold Spring Harbor Laboratory. New York. — 1984. — V. 2. — P. 36.
  58. Colbere-Garapin Florence, Ryhiner M.L., Garapin A.C. DNA transfection into mammalian cells, selective markers and gene cointegration / Continuous cell lines substates Biol. Proc. Symp., Arlington. VA. May 26−29. -1988. Baset etc. 1989. — P. 85−89.
  59. Cone R.D., Mulligan R.C. High-efficiency gene transfer into mammalian cells: generation of helper free recombinant retrovirus with broad mammalian host range // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1984. — V. 81. — P. 63 496 353.
  60. Correct integration of retroviral DNA in vitro / Brown P.O., Bowerman В., Varmus H E., Bishop J.M./ Cell. -1987. V. 49. — P. 347−356.
  61. Cosset F. L., Girod F., Flamant A. Use of helper cells with two host ranges to generate high-titer retroviral vectors // Virology. 1993. — V. 193. — P. 385−395.
  62. Cosset F.L., Takeuehi Y., Battini J.L. High-titer packaging cells producing recombinant retroviruses resistant to human serum // J. of Virology. -1995. V.69. — P. 7430−7436.
  63. Danos О., Mulligan R.C. Safe and efficient generation of recombinant retrovirus with amphotropic and ecotropic host ranges // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1988. V.85. — P. 6460−6464.
  64. Dominic’F. Monisano, Oliver Hankinston. Transfection by genomic DNA of cytochrome Pj-450 enzymatic activity and indibility // Mol. Cell. Biol. -1985. V. 5. — № 4. — P. 698−704.
  65. Donahue R.E., Kessler S.W., Bodine D. Helper virus induced T-cell lymphoma in nonhuman primates after retroviral mediated gene transfer / J. Exp. Med. 1987.-V.176. -P. 1125−1135.
  66. Donehower L.A., Huang A.L., Hager G.L. Regulatory and coding potential of the mouse mammary tumor virus long terminal redundancy // J. Virology. -1981. -V.37. P. 226−238.
  67. Dougherty J.P., Temin H.M. A promotorless retroviral vector indicates that there are sequences in U3 required for 3'RNA processing // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1987. -V. 84. P. 1197−1201.
  68. Dusty Miller A., Guy J. Rosman. Improved Retroviral Vectors for Gene Transfer and Expression // BioTechniques. 1989. — V.7. — № 9. — P. 980 990.
  69. Efficient insertion of genes into the mouse germ line via retroviral vectors / Van der Putten H., Botteri F.M., Miller A.D., Rosenfeld M.G./ Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1985. -V.82. -P. 6148−6152.
  70. Ercolan L., Stow J., Boyie J. Stable expression of heavy metal inducible G protein a.2 and a.3 subunit genes in LLC-PKj cells // J. Gen. Physiol. -1989. V. 94. — № 6. — P. 27.
  71. Expression of retroviral vectors in transgenic mice obtained by embryo infection / Stewart T.A., Schuetze S., Vanek M., Wagner E. EMBO J. -1987. -V.6.-P. 383−388.
  72. Fallon A.M. Factors affecting polybrene-mediated transfection of cultured Aedes albopictus (Mosquito) cells // Exp. Cell. Res. 1986. — V.166. — № 2. — P. 535−542.
  73. Farber F.E., Mebrick J.L., Butel J.S. Optimal conditions for uptake of exogenous DNA by Chinese hamster lung cells deficient in hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase // Biochim. Biophys. Acta. 1975. -V.390. — P. 298−311.
  74. Fecheimer M., Boylan J.F., Parker S. Transfections of mammalian cells with plasmid DNA by scrape loading and sonication loading // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1987. — V. 84. — P. 8463−8471.
  75. Fraley R.T., Papahadjopoulos D. Liposomes: the development of a new carrier system for introducing nucleic acids into plant and animal cells // Curt. Top. Microbiol. Immunol. 1982. — V.96. — P. 171−191.
  76. Fujiwara Т., Craigie R. Integration of mini retroviral DNA a cell free reaction for biochemical analysis of retroviral integration // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1989. — V. 86. — P. 3065−3069.
  77. Fujiwara Т., Mizuuchi K. Retroviral DNA integration: structure of an integration intermediate If Cell. -1988. V.54. — P. 497−504.
  78. Girod F., Cosset F.L., Verdiner G. Analysis of ALV-based packaging cell lines for production of contaminant defective viruses // Virology. -1995. -V. 209.-P. 671−675.
  79. Golbere-Garapin F., Horodniceanu F., Kourilsky P. A new dominant hybrid selective marker higher eukaryotic cells (G 418) // J. Mol. Biol. -1981.-V. 150. P. 1−4.
  80. Gordon J.W., Ruddie F.H. Gene DNA-mediated genetic transformation of mouse embryos and marrow. Review. 1985. — V. 33. — № 2. — P. 121−136.
  81. Gorman C., Howard В., Reeves R. Transformation of mammalian cells // Nucleic Acid Res. 1983. — V. l 1. — P. 7631−7648.
  82. Graham F.L., Bacchetti S., Mckinnan R. Transformation of mammalian cells with DNA using the calcium technigue.- In: Introduction of macro-molecules into viable mammalian cells // Ed. by Baserga R. et al. New York. — 1980. — P. 3−25.
  83. Graham F.L., van der Eb AJ. A new technique for the assay of infectivity of human adenovirus 5 DNA. // Virology. 1973. — V. 54. — P. 536−539.
  84. Grandgenett D.P., Mumm S.R. Unraveling retrovirus integration // Cell. -1990.-V.60.-P.3−4.
  85. Gridley Т., Soriano P., Jaenisch R. Insertional mutagenesis in mice // Trends Genet. -1987. V.3. — P.162−167.
  86. Grove R., Ozer Rifkin D. Experiments with normal and transformed cells. A laboratory mammal for working with cells in culture // Spring Harbor. New York. Gold Spring Harbor Lab. 1978. — P. 175.
  87. Hasnain S.E., Ganesan K., Upadhyaya K.C. Mechanism of enchancement of DNA-uptake by polyeations: Effect of polycations on DNA, DNAase and plasma membrane // Indian J. Exp. Biol. 1980. — V.18. — P. 1230−1232.
  88. Insertion of bacterial gene into the mouse germ line using an infections retrovirus vectors / Huszar D., Balling R., Kothary R., Magli М.С./ Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1985. -V, 82. P. 8587−8591.
  89. Israel N. Transfert et expression de les cellules animals // Techn. et biol. -1989.-V. 15.-№ 87.-P. 52−59.
  90. Itani Т., Ariga H. Yamaguchi N. A simple and efficient liposome method for transfection of DNA into mammalian cells grown in suspension // Gene. 1987. — V.56. — P. 267.
  91. Jaenisch R. Infection of mouse blastocysts with SV40 DNA: Normal development of infected embryos and persistance SV40 specific DNA sequences in the adult animals // Cold Spring Harbor Symp. -1974. — V.39. ~ P. 375−380.
  92. Jaenisch R., Mintz B. Simian virus 40 DNA sequences in DNA of healthy adult mice derived from preimplantation blastocysts injected with viral DNA// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1974. — Y.71. — P. 1250−1254.
  93. Jaenisch R. Germ line integration and Mendelian transmission of the exogenous Moloney leukemia virus // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1976. -V.73.-P. 1260.
  94. Masaaki J., Satoshiet O. An improved method of electroporation for introducing biologically active foreign genes into cultured mammalian cells 11 Exp. Cell Res. 1988. — V. 178. — № 1. — P. 154−162.
  95. Jegou, Bernard. The anti-viral defense system within the mammalian testis // Rend. Accad. sci. fis. mat. -1995. V. 62. — P. 289.
  96. Jin D.I., Petters R.M., Johnson B.H. Survival of early preimlantation porcine embryos after co-culture with cells producing an avian retrovirus If Theriogenology. 1991. — V. 35 (3). — P. 521−526.
  97. Joyner A.L., Bersnstein A. Retrovirus transduction: Generation of infectious retroviruses expressing dominant and selectable genes is associated with in vivo recombination and deletion events // Moll. Cell. Biol. 1983. -V. 3.-P. 2180−2190.
  98. Kawai S., Nishizawa M. New procedure for DNA transfection with polycation and dimethylsulfoxide if Mol. Cell. Biol. 1984. — V.4. — P. 1172.
  99. Kim J.H., Jung-Ha H.S., Lee H.T. Development of a positive method for male stem cell-mediated gene transfer in mouse and pig // Mol. Reprod. Dev. 1997. — V. 46 (4). — P. 515−526.
  100. Kim J.W., Cunningham J.M. The mouse eeotropic retrovirus receptor is a transporter of cationic amino acids // RNA Tumor Virus Meeting. -1991. -V.5.-P.5.
  101. Kopchick J., Francoise P., Frederich C. Leung. Expression of the bovine growth hormone gene in cultured rodent cells // Genetic engineering of animals. Plenum Press. New York. London. 1986. — P. 19−37.
  102. Lai C.J., Nathans D. Mapping temperature-sensitive mutants of simian virus 40: rescue of mutants by fragments of viral DNA // Virology. 1974.- V. 60. P. 466−475.
  103. Lauria A., Gandolfi F. Recent advances in sperm cell mediated gene transfer // Mol. Reprod. Dev. 1993. — V. 36. — P. 255−257.
  104. Lee H.T., Yoon J.Y., Uhm S .J. Production of transgenic bovine embryo by microinjection of retroviral vector into perivitelline space / Abstracts of 14th International Congress on Animal Reproduction. Stockholm, 2−6 July.- 2000. P. 246.
  105. Loyter A., Scangos G.A., Ruddle F.H. Mechanism of DNA uptake by mammalian cells: fate of exogenously added DNA monitored by the use of fluorescent dyes // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1982. — V. 79. — P. 422 426.
  106. Loyter A., Scangos G.A., Yuriced D. Mechanism of DNA entry into mammalian cells // Exp. Cell Res. 1989. — V. 139. — P. 422−426.
  107. Majors I.E., Varmus H.E. Nucleotide sequences at host proviral junctions for mouse mammary tumor virus // Nature. 1981. — V. 289. — P. 253−258.
  108. Markowitz D., Goff S. Construction and Use of a Safe and Efficient Am-fotropic Packaging Cell Line // Virology. 1988. — V.167. — P. 400−406.
  109. McBride O.W., Ozer H.L. Transfer of genetic information by purified metaphase chromosomes // Proc. Natl. Acad. Sci. 1973. — V. 70. — P. 1258−1262,
  110. McCutchan J.H., Pagano J.S. Enhancement of the infectivity of simian virus 40 DNA with diethylaminoethyl-dextran // J. Nat. Cancer Inst. -1968.-V. 41.-P. 351−357.
  111. Michel F., Martine C.-P., Nadine G.K. Liposome-mediated transfection of rat liver epithelial cell lines by plasmids carrying genes coding for het-erospecific proteins // Eur. J. Cell. Biol. Suppl. 1986. — V. 42. — № 15. — P. 31.
  112. Miller A.D., Buttimore C. Redesign of retrovirus packaging cell lines to avoid recombination leading to helper virus production // Mol. Cell. Biol. -1986. V. 6. — P. 2895−2902.
  113. Miller D.A., Adam M.A., Miller A.D. Gene trasfer by retrovirus vector occurs only in cells that are actively replicating at the time of infection // Mol. Cell. Biol. 1990. -V. 10. — P. 4139−4142.
  114. Milter D.A., Garcia J.V., N. von Suhr. Construction and properties of retrovirus packaging cells based on gibbon ape leukemia virus // J. Virol. -1991. V. 65. — P. 2220−2224.
  115. Minhas B.S., Voelkel S.A. Transgenic animals // Biotechnology. 1989. — Chpt. 8b. — P. 357.
  116. Mizuuchi K., Craigie R. Stereochemical course of the HIV DNA strand transfer reaction: evidence for a one step transesterification mechanism // RNA Tumor Virus Meeting. -1991. V.23. — P. 23.
  117. Morgenstern G.P., Land H. Advanced mammalian gene transfer: high titer retroviral vectors with multiple drug selection markers and complementary helper-free packaging cell line // Nucl. Acids. Res. 1990. — V. 18. — P. 3587−3596.
  118. Nancarrow C.D., Marshall J.T.A., Clarkson J.L. Expression and physiology of performance regulating genes in transgenic sheep // J. Reprod. Fertile 1991.-V. 43. P. 277.
  119. Nusse R. The activation of cellular oncogenes by retroviral insertion // Trends Genet. -1986. V. 2. — P. 244−248.
  120. Pavirani A., Skern Т., Le Meur M. Recombinant proteins of therapeutic interest expressed by lymphoid cell lines derived from transgenic mice // Biotech. 1989. — V. 7. — P. 1049−1054.
  121. Peters G., Brookers S., Smith R. Tumorigenesis by mouse mammari tumor virus: evidence for a common region for provirus integration in mammary tumors // Cell. -1983. V. 33. — P. 369−377.
  122. Petters R.M., Johnson B.H. Gene transfer to swine embryos using an avian retrovirus // Proc. UCLA Symposium, Taos, New Mexico, New York: Wiley-Liss.-l989.
  123. Pursel V.G., Hammer R.E., Bolt D J. Genetic engineering of swine: integration, expression and germline transmission of growth-related genes // J. Reprod. Fertil. 1990. (Suppl.) — V. 41. — P. 77.
  124. Rassoulzadegan M., Binetruy В., Gusin F. High frequency of gene transfer after fusion between bacteria and euearyotic cells // Nature. 1982. — V. 295. — P. 257−259.
  125. Richard L., Davidson P.B., Charles R. Ashcan DNA base sequence changes and sequence specificity of bromodexyuridine-induced mutations in mammalian cells // Proc. Nat Acad. Sci. USA. 1988. — V. 85. — P. 4406−4410.
  126. Ruben L.R., Herminia G.M. Isolation and characterization of mammalian cell lines carrying suppressible mutations // Mol. Gen. Genet. 1988. -V. 213.-№ 3.-P. 105−111.
  127. Rubinstein J.L., Nicolas J.-F., Jacob F. Introduction of genes into pre-imlantation mouse embryos by use a defective recombinant retrovirus // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986. — V. 83. — P. 366−368.
  128. Scahill S.J., Devos R., van der Heyden // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. -1983. V. 80. — P. 4654−4658.
  129. Scarpa M., Cournoyer D., Muzny D.M. Characterization of recombinant helper retroviruses from Moloney-based vectors in ecotropic and ampho-tropic packaging cell lines // Virology. 1991. — V. l 80. — P. 849−852.
  130. Schwartzberg P., Colicelli J., Gordon M. Mutations in the gag gene of Moloney murine leukemia virus: effects on production of virions and reverse transcriptase // J. Virol. 1984. — V. 49. — P. 918−924.
  131. Shimotohno K., Temin H.M. Evolution of retroviruses from cellular movable genetic elements // Quant Biol. 1981. — V. 45. — P. 719−732.
  132. Sims, First. Production of fetuses from totipotent cultured bovine inner cells mass cells // Theriogenology. 1993. — V. 39. — P. 313.
  133. Sleigh M. J. A non-chloramphenicol acetyltransferase gene in eukaryotic cells // Anal. Biochem. 1986. — V. 156. — № 1. — P. 251−256.
  134. Small J., Seangos G. Expression of cotransferred genes in mouse cells // Gene analisis techniques. 1984. — V. 1. — № 1. — P. 13−17.
  135. Sorge J., Wright D., Erdman V.D. Amphotropic retrovirus vector system for human cell gene transfer // Moll. Cell. Biol. 1984. — V. 4. — P. 17 301 737.
  136. Soriano P., Cone R.D., Jaenisch R. Tissue-specific and ectopic expression of genes introduced into transgenic mice by retroviruses // Science. -1986. V. 234. — P. 1409−1413.
  137. L.M., Morgan E.H., Yeoh G. // In vitro Cell & Develop. Biol. -1989. V.25. — № 1. — P. 113−116.
  138. P.J., Berg P. // Eukaryotic viral vectors. Gold Spring Harbor (New York). 1982. — P. 41−45.
  139. Straubinger R.M., Papahadjopoulos D. Liposomes as carriers for intracellular delivery of nucleic acids // Methods Enzymol. 1983. — V. 101. — P .513−539.
  140. Strelchenko N., Niemann. Effect of T3-cell line conditioned medium on the formation of embryonic stem cells (ES) like cells in domestic animals // Theriogenology. 1993. — V. 39. — P. 319.
  141. Strelchenko N.S. Die Osnabrucker Schwarzbuntzucht. 1997. — V. 3. -P. 42.
  142. Structure of cloned retroviral circular DNAs: implications for virus integration / Shoemaker C., Goff S., Gilboa E., Paskind M. / Quant. Biol. -1981.-V. 45.-P. 711−717.
  143. Szybalska E.H., Szybalsky E. Genetics of human cell lines IV. DNA-mediated heritable transformation of a biochemical trait // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1962. — V. 48. — P. 2026−2034.
  144. Tabin С .J., Hoffmann J.W., Goff S.P. Adaptation of a retrovirus as a eukaryotic vector transmitting the herpes simplex virus thymidine kinase gene // Moll. Cell. Biol. 1982. — V. 2. — P. 426−436.
  145. Tabin С .J., Hoffmann J.W., Shin C.H. The utilization of a retrovirus as an eukaryotic vector for transmitting cloned DNA sequences. In: Eukaryotic Viral Vectors / Ed. Y. Gluzman. N.Y.: Gold Spring Harbor. — 1982. -P. 123−126.
  146. Takai. Т., Ohmori H. DNA transfection of mouse lymphoid cells by the combination of DEAE-dextran-mediated DNA uptake and osmotic shock procedure // Bioch. Bioph. Acta. 1990. — V.1048. — P. 105−109.
  147. Tetsuo Y., Toshitaka A. Stable expression of the hepatitis В virus sur-faceantigen containing Pre-S2 protein in mouse cells using a bovine papillomavirus vector // J. Gen. Virol. 1988. — V. 69. — P. 1931−1939.
  148. Tooze J. DNA tumor viruses. In: Molecular Biology of Tumor Viruses. Part 2. DNA tumor viruses. 2nd ED. Cold Spring Harbor Laboratory. Cold Spring Harbor. New York. — P. 61−121 >
  149. Totzke F." Marme D., Hug H. Inducible expression of human phospholi-pase C-v2 and its activation by platelet-derived growth factor A-chain ho-modimer in transfected NTH 3T3 fibroblasts if Eur. J. Biochem. 1992. V.203. P.633−639.
  150. Uckert W., Walther W. Retrovirus-mediated genes transfer in cancer therapy if Pharmac. Ther. 1994. — V. 63. — P. 323−347.
  151. Varmus H.E. Using retroviruses as insertional mutagens to identify cellular oncogenes if Prog. Clin. Biol. Res. -1983. V. 119. — P. 23−35.
  152. Wei C.M., Gibson M., Spear P.G., Construction and isolation of a transmissible retrovirus containing the src gene ofHarvey murine sarcoma virus and the thymidine kinase gene of herpes simplex virus type 1 // J. Virol. 1981. — V. 39. — P. 935−944.
  153. Wigler M., Pellieer A., Silverstein S. DNA-mediated transfer of the adenine phosphoribosyl transferase locus into mammalian cells If Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979. — V. 76. — P. 1373−1376.101
  154. Wigler M.> Silverstein S., Lee L.S. Transfer of purified herpes virus thymidine kinase gene to cultured mouse cells // Cell. 1977. — V. l 1. — P.223.232,
  155. Wilson T" Papahadjopoulos D., Tabor R. The introduction of polivirus RNA into cells via lipid vesicles (liposomes) // Cell. 1979. — V. 17. — P. 77.
  156. Yamamoto F., Furusawa M., Furusawa I. The pricking method. A new efficient technique for mechanically introducing foreign DNA into the nuclei of culture cells // Exp. Cell. Res. 1982. — V. 142. — P. 79−84.
  157. Yamamoto F., Furusawa M., Takamatsu K. Intracellular introduction of a fixed quantity of substances by pricking cells using a modified microscope // Exp. Cell. Res. -1981. V.135. — P. 341−345.
  158. Yamazaki Y., Fujimoto H., Ando H. In vivo gene transfer to mouse spematogenic cells by deoxyribonucleic acid injection into seminiferous tubules and subsequent electroporation // Biol. Reprod. 1998. — V. 59 (6).- P. 1439−1444.
  159. Zimmermann U., Riemann F., Pilwat G. Enzyme loading of electrically homogeneous hunian red blood cell ghosts prepared by dielectric breakdown // Biochim. Biophys, Acta. 1976. — V. 436. — P. 460−474.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!