Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Использование новых подходов к оценке типовой принадлежности и функциональных особенностей мускариновых рецепторов различных отделов головного мозга

Диссертация: Использование новых подходов к оценке типовой принадлежности и функциональных особенностей мускариновых рецепторов различных отделов головного мозга
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

При изучении роли модуляции уровня вторичных посредников в секреции ацетилхолина было установлено, что изменения содержания ацетилхолина в ткани ствола головного мозга под действием хлорида лития не происходит. Таким образом, можно сделать вывод, что пресинаптические ауторецепторы ствола головного мозга крыс не связаны с фосфоинозитидной системой вторичных посредников. Напротив, повышение… Читать ещё >

Использование новых подходов к оценке типовой принадлежности и функциональных особенностей мускариновых рецепторов различных отделов головного мозга (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • 1. Обзор литературы
    • 1. 1. Некоторые особенности функционирования мускариновых холинорецепторов
    • 1. 2. Гетерогенность мускариновых рецепторов
    • 1. 3. Характеристика мускариновых рецепторов различных отделов головного мозга и методы их исследования
    • 1. 3. 1. Мускариновые рецепторы коры больших полушарий
    • 1. 3. 2. Мускариновые рецепторы ствола мозга
    • 1. 3. 3. Мускариновые рецепторы стриатума

Актуальность проблемы.

Парасимпатический отдел нервной системы принимает участие в регуляции функции различных органов и систем, оказывая модулирующее влияние на деятельность других нейромедиаторных образований организма (Eglen R. М. et. al., 1994). Деятельность указанного отдела нервной системы опосредована функцией мускариновых рецепторов, популяция которых в организме животных и человека не является гомогенной и представлена пятью генетически обусловленными подтипами (Kubo Т. et. al., 1986аBonner Т. I. et. al, 1987; Dorje F. et. al., 1991; Caulfield M. P., 1993). Отдельные подтипы мускариновых рецепторов различаются своим строением, локализацией, функциональным назначением, связью с различными вторичными мессенджерными системами, сродством к избирательным лигандам (Forray С., El-Fakahany Е. Е., 1989; Hosey М. М., 1992; Levine R. R., Birdsall N. J. М, 1997; Caulfield М. P., Birdsall N. J. M" 1998).

Нарушение функции холинергической регуляции нервной системы лежит в основе или сопутствует возникновению многих патологических состояний, к которым можно отнести отравления антихолинэстеразными ядами, болезнь Альцгеймера, паркинсонизм различной этиологии, некоторые нарушения сердечной деятельности, язвенную болезнь и другие (Mash D. С, Flynn D. D., Potter L. Т., 1985; Kasa F., 1986; Ehlert F. J., 1994; Kuhl D. E. et. al., 1994; Roeske M. R, Yamamura H. J., 1994). В связи с этим холинергические лиганды находят широкое применение в качестве лекарственных средств (Mutschier Е. et. al., 1990). Однако, их использование зачастую ограничивается побочными явлениями, которые возникают вследствие недостаточной избирательности действия.

Избирательное фармакологическое воздействие на функцию мускариновых рецепторов в терапевтических целях предполагает наличие информации об их типовой принадлежности, локализации, функциональных особенностях. Для мускариновых рецепторов центральной нервной системы млекопитающих эта информация ограничена, что связано с недостатком соответствующих методических подходов.

Цель исследования.

В связи с вышеизложенным целью настоящего исследования явилась разработка нового комплексного методического подхода in vitro и in vivo для определения типовой принадлежности, нейрональной локализации и некоторых особенностей функционирования мускариновых рецепторов различных отделов головного мозга млекопитающих. В соответствии с целью исследования были сформулированы основные задачи:

Задачи исследования.

1. Отобрать наиболее селективные Мг, М2- и М3-холиноблокаторы среди известных избирательных холинергических лигандов и определить в экспериментах in vitro константы их сродства к тест-тканям, содержащим цреимущественно М]-, М2- и М3-холинорецепторы для дальнейшего использования в определении типовой принадлежности неизвестных пре-и постсинаптических М-холинорецепторов.

2. Используя оригинальный подход и полученные значения констант связывания тест-лигандов, показать разрешающие возможности метода на примере определения типовой принадлежности преи постсинаптических М-холинорецепторов больших полушарий, стволового отдела и стриатума головного мозга крыс.

3. Провести изучение М-холиноблокирующей активности некоторых мускариновых антагонистов в ряде фармакологических тестов in vivo с целью выбора фармакологических моделей для оценки функции отдельных подтипов М-холинорецепторов в условиях целостного организма.

4. Изучить влияние М-холиноблокаторов на секрецию ацетилхолина in vivo с целью установления типовой принадлежности пресинаптических мускариновых аутохолинорецепторов различных отделов головного мозга крыс.

5. Провести оценку влияния модуляции функции вторичных посредников на секрецию ацетилхолина in vivo.

Научная новизна.

В исследовании разработан комплекс новых методических подходов in vitro и in vivo, предназначенных для оценки типовой принадлежности и функциональной значимости мускариновых рецепторов различных отделов головного мозга млекопитающих.

Методом радиолигандного анализа in vitro путем сравнения констант и количества мест связывания лиганда в гомогенате и синаптосомах соответствующего отдела мозга определена типовая принадлежность преи постсинаптических мускариновых рецепторов больших полушарий, ствола и стриатума головного мозга крыс. Метод радиолигандного анализа был разработан несколькими группами исследователей (Atkins G. L., 1973; Yamamura Н. I., Snyder Н. S., 1974; Birdsall N. J. M., Burgen A. S. V., Hulme E. C., 1978). Синаптосомальные препараты (Hebb С. O., Whittaker V. P., 1958) использовались Raiteri М. и соавт. (1984, 1990) для исследования эффектов агонистов и антагонистов на вызванное выделение ацетилхолина в коре и гиппокампе, а также Rama Sastry В. V. и соавт. (1995) — для изучения связи подтипов мускариновых рецепторов с обменом Са2+ в пресинаптической холинергической нервной терминали. Однако, широкий спектр рассмотренных литературных источников не обнаружил данных по определению типовой принадлежности преи постсинаптических мускариновых рецепторов с использованием синапто-сомальных фракций в различных отделах мозга млекопитающих. Наш подход достаточно прост и позволяет путем сравнительного анализа констант и количества мест связывания лигандов в гомогенатах и синаптосомах определять содержание и типовую принадлежность рецепторов в преи постсинаптических фракциях соответствующего отдела мозга.

В большинстве исследований, рассмотренных нами в литературном обзоре (James М. К., Cuppedu L. X., 1983; Raiten М. et. al., 1984, 1990; Dolezal V., Tucek S., 1993; Rama Sastry В. V. et. al., 1995; D’Agostino G. et. al., 1993,. 1997) анализ типовой принадлежности и функциональной роли пресинаптических М-холинорецепторов основывается на результатах, полученных в экспериментах in vitro. Эксперименты in vitro, главным образом, заключаются в изучении влияния избирательных мускариновых лигандов на уровень вызванной секреции медиатора в различных тканях, изолированных органах или тканевых фракциях. Наряду с достоинствами указанный подход обладает некоторыми недостатками: опыты ставятся на гомогенизированных тканях или полосках тканей, которые инкубируются в искусственных средах. Преимуществом настоящего исследования является сочетание методических подходов, основанных на экспериментах in vivo, позволяющих проводить оценку типовой принадлежности пресинаптических аутохолинорецепторов, регулирующих секрецию ацетилхолина в различных отделах головного мозга млекопитающих, в условиях целостного организма. В работе доказана правомерность принципиально нового использования известных фармакологических тестов in vivo: пилокарпинового тремора, ареколинового тремора и пилокарпиновой саливации, позволяющего в условиях целостного организма охарактеризовать преимущественно функции Мг, М2- и М3-подтипов рецепторов, соответственно. Фармакологическое воздействие холиномиметиков — ареколина и пилокарпина — на центральную нервную систему млекопитающих изучалось Голиковым С. Н. и.

Селивановой А. Т. (Голиков С. Н., 1956; Селиванова А. Т., Голиков С. Н., 1975). Затем в лаборатории биохимии Института токсикологии Космаче-вым А. Б. и соавт. (Космачев А. Б., Янхонтова М. Б., Космачева И. М., 1992; Космачев А. Б. и соавт., 1999) был разработан новый методический подход: фармакологические реакции, вызванные введением различных доз холиномиметиков: ареколина, пилокарпина и ДДВФ, были связаны с возбуждением определенных подтипов М-холинорецепторов. В нашей работе проведен выбор фармакологических моделей, позволяющих оценивать функции отдельных подтипов мускариновых рецепторов в условиях целостного организма. Этот выбор основывается на сопоставлении рецепторной селективности ряда мускариновых антагонистов с избирательностью их действия в фармакологических реакциях, возбуждающих определенные подтипы М-холинорецепторов в условиях целостного организма. Далее в нашем исследовании этот методический подход применен для определения типовой принадлежности пресинаптических аутохолинорецепторов, регулирующих секрецию ацетилхолина в больших полушариях и стволе мозга крыс.

Оригинальность следующего методического подхода заключается в использовании результатов собственных экспериментов, полученных описанными выше методами и литературных данных о том, что нечетные подтипы М-холинорецепторов сопряжены с фосфоинозитидной системой, а четные подтипы — с аденилатциклазной системой вторичных посредников (Боггау С., ЕГБакаЬапу Е. Е., 1989; Нозеу М. М., 1992; Сапс1ига 8. М. е! а1., 1995). С целью уточнения типовой принадлежности и функциональной роли пресинаптических аутохолинорецепторов в различных отделах мозга крыс изучено влияние модуляции функций вторичных мессенджеров на секрецию ацетилхолина. Подобный методический подход не описан в рассмотренной нами литературе.

В работе продемонстрирована высокая разрешающая способность предложенного методического подхода. Идентифицированы муска-риновые рецепторы, ответственные за регуляцию секреции ацетилхолина и получены косвенные данные относительно сопряженных с ними систем вторичных мессенджеров. Полученные результаты существенно дополняют представления о функциональной роли гетерогенных подтипов преи постсинаптических М-холинорецепторов центральной нервной системы млекопитающих.

Практическая значимость.

Работа посвящена разработке теоретических представлений, связанных с типовой принадлежностью, нейрональной локализацией и функциональными особенностями мускариновых рецепторов различных отделов головного мозга млекопитающих. Полученные в ходе исследования данные могут служить предпосылкой для выбора высокоизбирательных фармакологических средств, оказывающих влияние на уровень секреции ацетилхолина в больших полушариях и стволовом отделе головного мозга. Разработанные методические подходы можно рекомендовать для дальнейшего изучения типовой принадлежности, морфологической локализации, а также функциональной значимости мускариновых рецепторов различных морфо-функционалъных образований головного мозгя млекопитающих.

Положения, выносимые на защиту:

1. Предложенный комплекс методических подходов in vitro и in vivo позволяет проводить оценку типовой принадлежности, нейрональной локализации и функциональных особенностей мускариновых рецепторов головного мозга млекопитающих.

2. В популяции постсинаптических рецепторов больших полушарий головного мозга крыс преобладают М-холинорецепторы M? -подтипа и присутствуют холинорецепторы подтипа М2. В популяции пресинаптических рецепторов данного отдела мозга преобладает М3-подтип и присутствует М2-подтип холинорецепторов. Регуляция секреции ацетилхолина в больших полушариях мозга осуществляется при участии пресинаптических аутохолинорецепторов, сопряженных с аденилатциклазной системой вторичных мессенджеров и принадлежащих к подтипу М2.

3. В стволовом отделе головного мозга крыс в популяции постсинаптических рецепторов преобладает М2-подтип, присутствует Мг подтип холинорецепторов, а также рецепторы, не принадлежащие к Мг, М2- и Мз-подтипам. В популяции пресинаптических рецепторов обнаружен М] -подтип. Регуляция секреции ацетилхолина в этом отделе мозга осуществляется пресинаптическими аутохолинорецепторами, сопряженными с аденилатциклазной системой вторичных мессенджеров, и, вероятно, принадлежащими к подтипу М4.

4. В популяции постсинаптических рецепторов стриатума выявлены М]-подтип, а также рецепторы, не принадлежащие к Мг, М2- и Мз-подтипам. В популяции пресинаптических рецепторов также присутствуют М|- и Мз-холинорецепторы.

Апробация работы.

Результаты работы заслушивались на научном совещании лаборатории (1996 г., 1998 г.), на межлабораторном совещании Института токсикологии (2001 г.).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 6 печатных работ.

Объем и структура работы.

Диссертация изложена на 112 страницах машинописного текста, содержит 9 таблиц и 2 рисунка. Работа включает введение, обзор литературы, описание методов исследования, результаты и их обсуждение, заключение, выводы и список цитируемых литературных источников, из них 17 отечественных и 140 зарубежных авторов.

3. Выводы.

1. Для оценки содержания преи постсинаптических рецепторов различных отделов головного мозга in vitro использован методический подход, основанный на сопоставлении числа мест связывания селективных мускариновых антагонистов с гомогенатами и синаптосомами соответствующих отделов головного мозга крыс.

2. В отделах головного мозга крыс в экспериментах in vitro обнаружены следующие мускариновые рецепторы: в больших полушариях — преи постсинаптические Мг. М2- и Мгхоли-норецепторы, пресинаптические М-холинорецепторы, не относящиеся к подтипам Mi, М2 и М3- в стволовом отделе — постсинаптические М2-холинорецепторы, преи постсинаптические Мрхолинорецепторы, а также преи постсинаптические рецепторы, не принадлежащие к подтипам Мь М2 и М3- в стриатуме — пресинаптические М3-холинорецепторы, преи постсинаптические Мрхолинорецепторы, а также постсинаптические рецепторы, не принадлежащие к подтипам М,. М2 и М3.

3. Для оценки типовой принадлежности пресинаптических рецепторов отделов головного мозга в условиях целостного организма использован методический подход, основанный на сопоставлении степени блокады холинорецепторов определенной типовой принадлежности с обусловленным ею уровнем секреции ацетил-холина в синаптическую щель.

4.

Введение

различных М-холиноблокаторов в равноэффективных дозах по предупреждению ареколинового тремора, связанного с функцией М2-холинорецепторов. обеспечивает одинаковый уровень секреции медиатора в синапсах коры головного мозга, что свидетельствует о том, что пресинаптические рецепторы указанного отдела мозга принадлежат к подтипу М2.

5. Использование различных М-холиноблокаторов в равно-эффективных дозах по предупреждению ареколинового тремора, пилокарпинового тремора и пилокарпиновой саливации — фармакологических реакций, связанных с функцией Мг, М2- и М3-холино-рецепторов, соответственно, не обеспечивает одинакового уровня секреции ацетилхолина в синапсах ствола головного мозга крыс, что свидетельствует о том, что пресинаптические аутохолинорецепторы данного отдела мозга не принадлежат к указанным подтипам рецепторов.

6. Для оценки функциональных особенностей мускариновых рецепторов отделов головного мозга животных в условиях целостного организма использован методический подход, учитывающий существование различий в сопряжении рецепторов с различными системами вторичных посредников и основанный на изучении влияния модуляции функций вторичных мессенджерных систем путем введения кофеина и 1лС1 на уровень секреции ацетилхолина в синаптическую щель.

7. Повышение содержания цАМФ под действием кофеина увеличивает секрецию ацетилхолина в синаптическую щель в больших полушариях и стволовом отделе головного мозга крыс, что свидетельствует о сопряжении ауторецепторов указанных отделов мозга с аденилатциклазной системой вторичных посредников.

8. Накопление вторичных посредников, принадлежащих к фосфо-инозитидной системе, под влиянием Ьл+ увеличивает уровень секреции ацетилхолина в синаптическую щель в больших полушариях и не изменяет секрецию медиатора в стволовом отделе головного мозга крыс, что свидетельствует об участии в регуляции механизмов секреции ацетилхолина в этих отделах мозга разных систем вторичных мессенджеров.

2. 2. 4.

Заключение

.

Предложенный в исследовании комплекс методических подходов in vitro и in vivo позволил провести оценку типовой принадлежности, нейрональной локализации и некоторых функциональных особенностей мускариновых рецепторов в больших полушариях, стволовом отделе и стриатуме головного мозга крыс.

В экспериментах по оценке типовой принадлежности мускариновых рецепторов in vitro путем сравнения полученных методом радиолигандного анализа параметров связывания ряда селективных холиноблокаторов с гомогенатом и синаптосомальными фракциями различных отделов головного мозга крыс было установлено, что в больших полушариях головного мозга имеются преи постсинаптические Mr, Miи М3-холинорецепторы, а также пресинаптические мускариновые рецепторы, не принадлежащие ни к одному из указанных подтипов. В стволе головного мозга обнаружены постсинаптические Мг и М2-холинорецепторы, пресинаптические Мг, и, возможно, М2- и Мз-холино-рецепторы, а также преи постсинаптические М-холинорецепторы, не принадлежащие ни к одному из названных подтипов. В стриатуме головного мозга крыс обнаружены пресинаптические Мг и М3-холино-рецепторы и постсинаптические — Мг и М-холинорецепторы. не принадлежащие ни к одному из указанных подтипов.

В экспериментах in vivo при оценке изменения секреции ацетилхолина в холинергических синапсах на фоне модуляции активности вторичных мессенджерных систем было установлено, что в больших полушариях головного мозга крыс повышение уровня секреции медиатора опосредовано функцией мускариновых рецепторов, сопряженных с фосфоинозитидной системой вторичных посредников. Как известно, уровень секреции медиатора в синаптическую щель определяется активностью нейрона и регулируется рецепторами, которые имеют пости пресинаптическую локализацию. Согласно литературным данным стимуляция секреции ацетилхолина осуществляется путем возбуждения постсинаптических М-холинорецепторов на теле нейрона, что на внутриклеточном уровне может реализовываться посредством активации фосфоинозитидной или ингибирования аденилатциклазной систем вторичных мессенджеров или путем блокады пресинаптических аутохолинорецепторов по механизму отрицательной обратной связи. В наших экспериментах активация с помощью LiCl фосфоинозитидной системы рассматривается как внутриклеточный эквивалент возбуждения М-холинорецепторов, сопряженных с данной системой вторичных посредников, а стабилизация с помощью кофеина аденилатциклазной системы как эквивалент блокады М-холинорецепторов соответствующих подтипов. Поскольку наблюдается прямая связь между активацией фосфоинозитидной системы с помощью Li и увеличением секреции медиатора, можно предположить, что речь идет о постсинаптических холинорецепторах.

Учитывая вышеприведенные собственные данные о типовой принадлежности рецепторов больших полушарий, которые совпадают с данными литературы (Raiteri М. et. al. 1984: Mash D. С. et. al. 1985: Ehlert F. J. et. al. 1991). а также принимая во внимание сведения о том. что фосфоинозитидная система преимущественно является вторичным посредником нечетных подтипов рецепторов (Forray С. El-Fakahany Е. Е., 1989) можно предположить, что регуляция секреции ацетилхолина в больших полушариях головного мозга крыс, в частности, осуществляется с помощью постсинаптических Мгхолинорецепторов.

Однако, регуляция секреции ацетилхолина в больших полушариях не исчерпывается функцией постсинаптических Мгхолинорецепторов, о чем свидетельствует изучение этого процесса на фоне модуляции активности аденилатциклазной системы. Так, повышение содержания в ткани больших полушарий цАМФ при введении кофеина, который стабилизирует уровень указанного вторичного посредника, вызывает увеличение секреции медиатора, о чем свидетельствует снижение содержания «связанного» ацетилхолина. Этот результат позволяет говорить о том, что в указанном отделе головного мозга крыс регуляция секреции ацетилхолина находится под контролем рецепторов, сопряженных с аденилатциклазной системой вторичных мессенджеров. То обстоятельство, что повышение секреции медиатора происходит в ответ на увеличение уровня цАМФ может свидетельствовать о том, что регуляция высвобождения ацетилхолина в данном случае контролируется по механизму отрицательной обратной связи. Следовательно, речь идет о пресинаптических мускариновых рецепторах, сопряженных с аденилатциклазной системой вторичных посредников.

При использовании оригинального подхода к оценке типовой принадлежности пресинаптических аугорецепторов в условиях целостного организма, основанного на сопоставлении уровня секреции медиатора с блокадой различных подтипов М-холинорецепторов, было установлено, что пресинаптические ауторецепторы больших полушарий головного мозга крыс представлены подтипом М2. Этот вывод согласуется с данными литературы о том. что вторичной мессенджерной системой jYb-холино-рецепторов преимущественно является аденилатцнклазная (Ashkenazi А. et. al., 1987; Peralta Е. G. et. al. 1988). Кроме того, в литературе приводятся данные исследований секреции ацетилхолина in vitro, в которых типовая принадлежность пресинаптических мускариновых ауторецепторов в больших полушариях головного мозга крыс также оценивается как М2 на основании их низкой чувствительности к действию пирензепина (Яакеп М. е1. а!., 1984).

Таким образом, можно сделать вывод, что пресинаптические ауторецепторы больших полушарий головного мозга крыс относятся к подтипу М2.

Однако, в целом популяция пресинаптических рецепторов в больших полушариях, по-видимому, не исчерпывается мускариновыми рецепторами, принадлежащими к указанному подтипу. Так, выше указывалось, что в собственных экспериментах по оценке типовой принадлежности пресинаптических рецепторов больших полушарий мозга крыс т ntro путем сравнения полученных методом радиолигандного анализа параметров связывания ряда селективных холиноблокаторов с гомогенатом и синаптосомальными фракциями больших полушарий было установлено, что в синаптосомах по сравнению с гомогенатом наблюдается повышение процентного содержания М3-холинорецепторов. Поскольку синаптосомальная фракция по сравнению с гомогенатом рассматривается нами как объект, обогащенный пресинаптическими рецепторами, на основании полученных данных можно заключить, что в популяции пресинаптических рецепторов больших полушарий преобладает фракция М3-холинорецепторов. Этот вывод не вступает в противоречие с ранее сделанным заключением о принадлежности пресинаптических рецепторов к подтипу М2. так как методический подход, использованный в экспериментах /'// itro дает информацию о пресинаптических рецепторах, локализованных на терминалях как холинергнчеекнх. так и нехолинергических нейронов, то есть аутои гетерорецегтторах ацетилхолина. В то же время, в экспериментах на целостном организме оценивалась функция только ауторецепторов, что дает возможность заключить, что пресинаптические ауторецегггоры ацетилхолина относятся к подтипу fvb.

Рассматривая вопрос о функциональной значимости М3-холино-рецепторов в больших полушариях головного мозга следует учесть данные литературы о стимулирующем влиянии пилокарпина на секрецию ацетилхолина переживающими срезами коры теменной доли больших полушарий мозга крыс (Санковский А. А. и соавт., 1990). В связи с тем, что для пилокарпина характерен редуцированный ответ фосфоинозитидной сигнальной системы, сопряженной с Мг, М3- и М5-ре-цепторами (Подосиновикова Н. П., Долго-Сабуров В. Б., 1992), его холиноблокирующий эффект на уровне ауторецепторов этой зоны коры позволяет в принципе ставить вопрос об отнесении их к одному из данных подтипов, в частности к М3.

Совершенно очевидно. что при сопоставлении результатов, полученных in vitro и in vivo, необходимо учитывать особенности морфофункциональной организации области ЦНС, ответственной за реализацию конкретных функций холинореактивных систем и типовую принадлежность локализованных там мускариновых рецепторов, популяция которых может оказаться неоднородной. Так, в качестве примера можно привести данные о том, что популяция ауторецепторов гиппокампа крысы представлена в основном М4-подтипом с вероятным присутствием рецепторов подтипа М2 (McKinney М. et. al., 1993).

Таким образом, можно предположить, что обнаруженные нами в экспериментах in vitro пресинаптические М3-холинорецепторы. локализованные в больших полушариях головного мозга способны регулировать высвобождение ацетилхолина. В этом случае, с учетом данных литературы (Caridura S. М. et. al. 1995). следует сделать заключение, что указанные рецепторы сопряжены с фосфоинозитидной системой вторичных посредников. В экспериментах in vivo при оценке изменения секреции ацетилхолина в холинергических синапсах fia фоне модуляции вторичных мессенджерных систем было установлено, что в больших полушариях головного мозга крыс повышение уровня секреции медиатора опосредовано функцией мускариновых рецепторов, сопряженных с фосфоинозитидной системой вторичных посредников. В связи с тем, что наблюдается прямая связь между активацией фосфоинозитидной системы с помощью Lf и увеличением секреции медиатора было сделано предположение о том, что сопряженные с фосфоинозитидной системой рецепторы являются постсинаптическими. Вместе с тем, нельзя полностью исключить возможность того, что сопряженные с фосфоинозитидами рецепторы могут оказаться пресинаптическими. Однако, в этом случае надо признать, что они должны осуществлять свою функцию по механизму положительной обратной связи. Наконец, можно сделать предположение, что обнаруженные в больших полушариях пресинаптические Мз-холинорецепторы являются гетерорецепторами ацетилхолина и локализованы на окончаниях нехолинергических нервов.

При изучении роли модуляции уровня вторичных посредников в секреции ацетилхолина было установлено, что изменения содержания ацетилхолина в ткани ствола головного мозга под действием хлорида лития не происходит. Таким образом, можно сделать вывод, что пресинаптические ауторецепторы ствола головного мозга крыс не связаны с фосфоинозитидной системой вторичных посредников. Напротив, повышение содержания в тканях цАМФ при введении кофеина, который стабилизирует уровень цАМФ. вызывает увеличение секреции медиатора в стволовом отделе, о чем свидетельствует снижение содержания «связанного» ацетилхолина. Этот результат говорит о том. что в указанном отделе головного мозга крыс регуляция секреции ацетилхолина находится под контролем рецепторов, сопряженных с аденилатциклазной системой вторичных мессенджеров. Повышение секреции медиатора происходит в ответ на увеличение уровня цАМФ. То есть регуляция высвобождения ацетилхолина контролируется по механизму отрицательной обратной связи. Следовательно, этот процесс осуществляется пресинаптическими холинорецепторами, сопряженными с аденилатциклазной системой. Среди обнаруженных методом радиолигандного анализа пресинаптических рецепторов на роль ауторецепторов могут претендовать рецепторы, принадлежащие к подтипу М2, так как согласно литературным данным Мг и М3-холинорецепторы не сопряжены с аденилатциклазной системой (Forray С., El-Fakahany Е. Е. Л 989).

Для изучения типовой принадлежности пресинаптических ауторецепторов ацетилхолина, локализованных в стволовом отделе головного мозга крыс был использован, разработанный нами методический подход, основанный на сопоставлении активности мускариновых антагонистов в ряде стандартных тестов, характеризующих функцию определенных подтипов М-холинорецепторов п vivo и их способности усиливать пресинаптическую секрецию ацетилхолина. С помощью этого подхода было установлено, что мускариновые ауторецепторы, контролирующие секрецию медиатора в стволе мозга, не принадлежат к подтипам Mi, М2 и М3. Учитывая данные литературы о том, что цАМФ является вторичным посредником М4-, а не М5-холино-рецепторов (Pinkas-Kramarski R. et. al., 1990; Tietje К. M. et. al., 1990), можно предположить, что секреция ацетилхолина в стволовом отделе головного мозга крыс контролируется пресинаптическими ауторецепторами. принадлежащими к подтипу М4. Наконец, следует остановиться на вопросе о роли постсинаптических рецепторов в регуляции секреции ацетилхолина в холинергических синапсах, расположенных в стволовом отделе головного мозга. Рассматривая механизмы секреции медиатора, следует отметить, что роль пресинаптических рецепторов заключается в модуляции процесса высвобождения ацетилхолина, который является результатом нейрональной активности, определяемой функцией постсинаптических рецепторов, расположенных на теле или дендритах нервных клеток. В связи с этим возникает вопрос о физиологических характеристиках постсинаптических мускариновы* рецепторов, расположенных в стволовом отделе мозга крыс. При изучении секреции медиатора обращает на себя внимание, что изменения в содержании связанного ацетилхолина под действием кофеина в стволовом отделе выражены в меньшей степени, чем в больших полушариях. Одна из возможных причин этого явления может заключаться в различной направленности влияния стабилизации с помощью кофеина уровня цАМФ (то есть блокады М-холинорецепторов) на регуляцию выброса медиатора, осуществляемую пресинаптическими аутохолинорецепторами и пост-синаптическими М-холинорецепторами, расположенными на теле нейрона. Это предположение имеет под собой определенную основу в связи с тем. что согласно нашим данным, а также данным литературы мускариновые рецепторы в стволе представлены, главным образом, подтипом М2 (МсКтпеу М. е!:. а! 1989), который сопряжен с аденилатциклазной системой вторичных посредников. Таким образом, увеличение содержания цАМФ под влиянием кофеина должно приводить к снижению активности нейрона вследствие неспособности реализации возбуждения постсинаптического рецептора и таким образом снижать секрецию медиатора. Этот эффект противодействует увеличению выброса ацетилхолина в результате действия кофеина на трансдуцирующую систему пресинаптических мускариновых рецепторов.

Заканчивая обсуждение вопроса о регуляции выброса ацетилхолина в синапсах больших полушарий и стволового отдела головного мозга следует подчеркнуть, что окончательное заключение по этому поводу не может быть сделано без анализа возможного влияния на секрецию медиатора нехолинергических пресинаптических рецепторов, функция которых сопряжена с аденилатциклазной системой вторичных мессенджеров.

В заключение следует отметить, что возможность указанной в ряде случаев неодназначности трактовки полученных результатов на наш взгляд не противоречит перспективности использования предложенных методических подходов к оценке типовой принадлежности и функциональных особенностей М-холинорецепторов.

Показать весь текст

Список литературы

  1. А., Эйзен С. Статистический анализ. Подход с использованием ЭВМ. // М., 1982. — 322 с.
  2. С.Н. О сотношении центрального и периферического действия атропина в подавлении некоторых симптомов ареколи-новой интоксикации у мышей. // Фармакол. токсикол. — 1956. — N2,—С. 36−42.
  3. Долго-Сабуров В. Б., Шорохов Ю. А. Молекулярные механизмы функционирования мускариновых холинорецепторов // Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Фармакология. Химиотерапевт, средства. 1989, —Т. 19, —155 с.
  4. Э. В., Шелковников С. А. Мускариновые холинорецепторы /7 Л. «Наука»., 1989. — 288 с.
  5. А. Б., Янхонтова М. Б., Космачева И. М. Селективность и защитные свойства М-холинолитиков при отравлении дихлор-дивинилфосфатом // Эксперим. и клин, фармакол. — 1992. — Т. 5, N3,—С. 56−58.
  6. С. Г., Рамш С. М., Змывалова А. Г. Селективные лиганды подтипов мускариновых холинорецепторов// Итоги науки и техники.
  7. ВИНИТИ. Фармакология. Химиотерапевт, средства. — М., 1991. — Т. 25. — С. 84−209.
  8. Н. М., Кузнецов С. Г., Локтионов С. И., Голиков С. Н., Пашкевич Б. П., Зацепин Э. В. Аминоспирты ацетиленового ряда. XI. Синтез и холинолитические свойства 1-фенил-1-циклоапкиламино-2-бутин-1-ола//Химико-фармацевт. ж. — 1998. —N 12. — С. 21−25.
  9. М. Д. Лекарственные средства // М.: «Медицина», 1988, — 575 с.
  10. Н. П., Долго-Сабуров В. Б. Некоторые механизмы регуляции синтеза и секреции ацетилхолина в холинергических терминалях мозга // Нейрохимия. — 1992. — Т. 11, N 2. — С. 3−7.
  11. Н. П., Горобец Л. Ф., Долго-Сабуров В. Б. Типовая принадлежность пресинаптических М-холинорецепторов различных отделов мозга крыс // Бюлл. эксперим. биол. и мед. — 1996. — Т. 122, N7, —С. 75−77.
  12. В. Б., Прозоровская М. Л., Демченко В. Н. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и ее ошибки. // Фармакол. токсикол. — 1978. —N4. — С. 56−58.
  13. А. Т., Голиков С. Н. Холинергические механизмы высшей нервной деятельности. //Л.: «Медицина», 1975. — 184 с.
  14. В. И. Селянко А. А., Дергач В. А. Нейрональные холинорецепторы. /УМ.: Наука, 1986. — 343 с.
  15. Шел ко в ни ко в С. А. Новые данные о гетерогенности мускариновых холинорецепторов // Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Фармакология. Химиотерапевт, средства. — М., 1991. — Т. 25. — С. 1−83.
  16. Adem A., Bogdanovic N., islam A., Jolkkonen М., Winblad В., Karlsson Е. Distribution of М4 muscarinic cholinergic receptors in the rat brain detected by a selective mamba toxin (MT-3) // Life Sci. —- 1995. — Vol. 6, N 11/12, Abstr. 23,—P. 1013.
  17. H., Akin S. В., Goren Z., Ozdemir O., Oktay S. Distinct functional muscarinic receptor subtypes in rat atrium and guinea-pig gall bladder // Life Sci. 1995. — Vol. 6, N 11/12, Abstr. 75. — P. 1039.
  18. Ashkenazi A., Peralta E. G., Winslow J. W., Ramachandran J., Capon D. J. Functional diversity of muscarinic receptor subtypes in cellular signal transduction and growth // Trends Pharmacol. Sci. 1989. — Vol. 10. Suppl. — P. 16−21.
  19. Atkins G. L. A simple digital-computer program for estimating the parameters of the Hill equation. // Eur. J. Biochem. — 1973. — Vol. 33, No. 1, —P. 175−180.
  20. Baghdoyan H. A. Location and quantification of muscarinic receptor subtypes in rat pons implications for REM sleep generation // Am. J. Physiol. — 1997. — Vol. 273, N 3. — R896-R904.
  21. Baghdoyan H. A., Lydic R. Fleegal M. A. M: Muscarinic autoreceptors modulate acetylcholine release in the medial pontine reticular formation /У J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1998. — Vol. 286, N 3. — P. 1446−1452.
  22. Bartus R. A., Dean R. L. Ill, Beer B., Lippa A. S. The cholinergic hypothesis of geriatric memory dysfunctions //' Science. — 1982. — Vol. 217, N4557.— P. 408−417.
  23. Baumgold J., Paek R., Fiskum G. Calcium independence of phosphoinositide hydrolysis — induced increase in cyclic AMP accumulation in SK-N-SH human neuroblastoma cells // J. Neurochem.1992.—Vol. 8. — P. 1754−1759
  24. Birdsall N. J. M., Burgen A. S. V., Hulme E. C. The binding of agonists to brain muscarinic receptors /7 Mol. Pharmacol. — 1978. — Vol. 14, N. 51. P. 723−736.
  25. Birdsall N. J. M., Hulme E. C. Muscarinic receptor subclasses // Trends Pharmacol. Sci. — 1983. — Vol. 4, N 1 1. — P. 459−463.
  26. Birdsall N. J. ML, Hulme E. C. Stockton J. M. Muscarinic receptor subclasses: allosteric interactions /7 Mol. Neurobiol. — 1983. — Vol. 48.1. P. 53−56.
  27. Bolton T. B., Zholos A. V. Activation of M2 muscarinic receptors in guinea-pig ileum opens cationic channels modulated by M3 muscarinic receptors//Life Sci. — 1997.— Vol. 60, N 13/14. — P. 1121−1128.
  28. Bonner T. L, Buckley N. J., Young A. C. Brann M. R. Identification of a family of muscarinic acetylcholine receptor genes// Science. — 1987. — Vol. 237. N 4814. — P. 527−532.
  29. M. R., Buckley N. J. Bonner T. 1. The striatum and cerebral cortex express different muscarinic receptor mRNA’s / FEBS Letts. — 1988. — Vol. 230, —P. 90−94.
  30. Brown D. A., Forward A., Marsh S. Antagonist discrimination between ganglionic and ileal muscarinic receptors // Brit. J. Pharmacol. — 1980. — Vol. 71, N 2. — P. 362−364.
  31. Candura S. M., Tonini M., Baiardi P., Manzo L., Costa L. G. Heterogeneity of cholinergic muscarinic receptors coupled to phosphoinositide metabolism in immature rat brain// Development. Brain Res. — 1995. — Vol. 86. — P. 134−142.
  32. Cantalamessa F., Angeli P., Melchiorre C. Tripitramine: further pharmacological evaluation in pithed rat // Life Sci. — 1995. — Vol. 6, N 11/12, Abstr. 20. —P. 1012.
  33. Caulfield M. P. Muscarinic receptors: characterization, coupling and function // Pharmacol. Ther. — 1993. — Vol. 58. — P. 3 19−379
  34. Caulfield M. P., Birdsall N. J. M. Classification of muscarinic acetylcholine receptors /7 Pharmacol. Rev. — 1998. — Vol. 50, N 2. — P. 279−290.
  35. Christie M. J., North R. A. Control of ion conductance by muscarinic receptors // TIPS. — 1988. — Vol. 9. Suppl. — P. 30−34.
  36. Costa P., Traver D. J., Auger C. B., Costa L. G. Identification of in-, m4, ms subtypes of muscarinic receptor mRNA in human blood mononuclear cells//Life Sci. —Vol. 6, N 11/12, Abstr. 35. — P. 1019.
  37. Consolo S., Ladinsky H., Vinci R., Palazzi E., Wang J. X. An in vivo pharmacological study on muscarinic receptor subtypes regulating cholinergic neurotransmission in rat striatum /7 Biochem. Pharmacol. — 1987. — Vol. 36, N 18. — P. 3075−3077.
  38. Crossland J. Slater P. The effect of some drugs on the «free» and «bound» acetylcholine content of rat brain Brit. J. Pharmacol, and Chemother. 1968. — Vol. 33. — P. 42−47.
  39. D’Agostino G., Barbieri A., Grana E., Subissi A. Characterization of prejunctional muscarinic autoreceptors in the rat urinary bladder // Life Sci. — 1993, —Voi. 52. — ?. 80.
  40. D’Agostino G., Barbieri A., Chiossa E., Tonini M. M4 muscarinic autoreceptor-inediated inhibition of JH. acetylcholine release in the rat isolated urinary bladder // J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1997. — Vol. 283, N 2. — P. 750−756.
  41. Darroch S., Mitchelson F. Characterization of a novel muscarine receptor in avian smooth muscle /7 Life Sci. — 1995. — Vol. 6, N 11/12, Abstr. 78, —P. 1010
  42. Dolezal V., Tucek S. Role of depolarization and calcium ions in the inhibition of acetylcholine release by presynaptic muscarinic autoreceptors /7 Physiol. Res. — 1993. — Vol. 42, N. 4 — P. 140.
  43. Doods H., Entzeroth M., Ziegler H., Schiavi G., Engel VV., Mihm G., Rudolf K., Eberlein W. Characterization of BIBN 99: a lipophilic and selective muscarinic M: receptor antagonist. // Eur. J. Pharmacol. — 1993,—Vol. 242, N 1. — P. 23−30.
  44. Dorje F. Wess J., Lambrecht G. Tacke R., Mutschler E. Brann N4. R. Antagonist binding profiles of five cloned human muscarinic receptor subtypes // J. Pharmacol. Exp. Ther., — 1991. — Vol. 256, N 2. — P. 727−733.
  45. Eglen R. M" Reddy H., Watson N" Challiss R. A. J. Muscarinic acetylcholine receptors and control of smooth muscle tone // Trends Pharmacol. Sci. — 1994. — Vol. 15, N 11. — P. 407−408.
  46. Ehlert F. J., Roeske W. R., Yamamura H. J. Muscarinic receptors and novel strategies for the treatment of age-related brain disordes // Li fe Sci.1994, —Vol. 55, N 25/26, —P. 2135−2145.
  47. Ehlert F. J., Thomas E. A. Functional role of M2-muscarinic receptors in the guinea pig ileum // Life Sci. -1995. -Vol. 56, N 11/12. — P. 965−971.
  48. Ellis J., Huvler J. H., Kemp D. E., Weiss S. Muscarinic receptors and second-messenger responses of neurones in primary cultures // Brain Res.1990. — Vol. 511, N 2, —P. 234−240.
  49. Entzeroth M., Mayer N. Labelling of rat heart muscarinic receptors using the new M2 selective antagonist -H.AF-DX 384 /7 Biochem. Pharmacol.1990, — Vol. 40, N 1. — P. 1674−1676.
  50. Esqueda E. E., Gerstin E. H. J-, Griffin M. T., Ehlert F. J. Stimulation of cyclic IMP accumulation and phosphoinositide hydrolysis by M3-muscarinic receptors in the rat peripheral lung /7 Biochem. Pharmacol. — 1996. — Vol. 52. — P. 643−658.
  51. Evans T., Smith M. M., Tanner L. T., Harden T. K. Muscarinic cholinergic receptors of two cell lines that regulate cyclic AMP metabolism by different molecular mechanisms /7 Mol. Pharmacol. — 1984. — Vol. 26, N 3. — P. 395−404.
  52. Exposito I., Oakin S., Mora F. Decrease of extracellular aspartic acid concentration produced by a Vf muscarinic receptor agonist in the striatum of the concious rat. J. Physiol. Proc. — 1990. — N 493. — P. 1 S.
  53. Ferrari-Dileo G" Waelbroeck M. Mash D. C. Flynn D. D. Selective labeling and localization of the M4 (m4) muscarinic receptor subtype, 7 Mol. Pharmacol. — 1994. — Vol. 46. N 6. — P. 1028−1035.
  54. Forray C, El-Fakahany E. E. Mediation of phosphoinositide metabolism in rat cerebral cortex by M, and Mo muscarinic receptors // Trends Pharmacol. Sci. —1989. —Vol. 10, Suppl. — P. 111.
  55. Fukuda K., Kubo T., Maeda A., Akiba I., Bujo H., Nakai J., Mishina ML, Higashida H., Neher E., Marty A., Numa S. Selective effector coupling of muscarinic acetylcholine receptor subtypes // Trends Pharmacol. Sci. — 1989.—Vol. 10, Suppl. —P. 4−10.
  56. Giachetti A., Micheletti R., Montagna E. Cardioselective profile of AF-DX 116, a muscarinic M2-receptor antagonist // Life Sci. — 1986. — Vol. 38. N 18.—P. 1663−1672.
  57. Giraldo E., Micheletti R., Montagna E., Giachetti A., Vigano M. A., Ladinsky H., Melchiorre C. Binding and functional characterization of the cardioselective muscarinic antagonist methoctramine // J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1988, —N 3, —P. 1016−1020.
  58. Graybiel A. M., Ragsdale C. W. Biochemical anatomy of the striatum // Chemical Neuroanatomy (Emson P. C. ed.) — Raven Press, New York. — P. 427−504.
  59. Gross J., VVaelbroek M., Mutschler E., Lambrecht G. Functional characterization of neuronal muscarinic receptors in rabbit annococcygeus muscle// Life Sci. — 1995, — Vol. 56, N 11/12. Abstr. 73, —P. Iu38.
  60. Hammer R., Berrie C. P., Birdsall N. J. M" Burgen A. S. V., Hulme E. C. Pirenzepine distinguishes between different subclasses of muscarinic receptors // Nature. — 1980. — Vol. 183, N 5742. — P. 90−91.
  61. Hammer R., Giachetti A. Selective muscarinic receptor antagonists // Trends Pharmacol. Sci. — 1984. — Vol. 5. N 1. P. 18−20.
  62. Hammer R. Giraldo E., Schiavi G. B. Monfenni E. Ladinski H. Binding profile of a novel cardioselective muscarine receptor antagonist. AF-DX 1 16. to membranes of peripheral tissues and brain in the rat /, Life Sci.—1986. —Vol. 38, N 18, —P. 1653−1662.
  63. Hersch S. M., Levey A. I. Diverse pre- and post-synaptyc expression m,-m4 muscarinic receptor proteins in neurons and afferents in the rat neostriatum // Life Sci. — 1995. — Vol. 56, N 11/12. — P. 931−938.
  64. Hosey M. M. Diversity of structure, signaling and regulation within the family of muscarinic cholinergic receptors // FASEB J. — 1992. — Vol. 6. — P. 845−852.
  65. Hughes A. R., Martin M. W., Harden T. K. Pertusis toxin differentiates between two mechanisms of attenuation of cyclic AMP accumulation by muscarinic cholinergic receptor // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1984. — Vol. 81. N 18, —P. 5680−5684.
  66. Hebb C. O., Whittaker V. P. Intracellular distributions of acetylcholine and choline acetylase /7 J. Physiol.— 1958, — Vol. 142, —P. 187−196.
  67. Hulme E. C. Birdsall N. J. M. Burgen A. S. V. Mehta P. The binding of antagonists to brain muscarinic receptors Mol. Pharmacol. — 1978. — Vol. 14. N. 5 — P. 737−750.
  68. Imeri L., Bianchi S., Angeli P., Mancia M. Selective blockade of different brainstem muscarinic receptor subtypes effects — on the sleep-wake cycle // Brain Res. — 1994. — Vol. 636, N 1. — P. 68−72.
  69. Jalcobs K. H., Aktories K., Shultz G. GTP-dependent inhibition of cardiac adenylate cyclase by muscarinic cholinergic agonists // Naunyn-Schiedeberg's Arch. Pharmacol. — 1979. Vol. 310, N 2. — P. 113−119.
  70. James M. K., Cuppedu L. X. Frequency-dependent muscarinic receptor modulation of acetylcholine and dopamine release from rabbit striatum // J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1984. — Vol. 229, N 1. — P. 98
  71. Jerusalinsky D. Harvey A. L. Toxins from mamba venoms: small proteins with selectivities for different subtypes of muscarinic acetylcholine receptors // Trends Pharmacol. Sci. — 1994. — Vol. 15, N 11. — P. 424−430.
  72. Kasa P. The cholinergic system in brain and spinal cord /7 Prog. Neurobiol. — 1986. — Vol. 26. — P. 211−272.
  73. Kenakin T. P., Boselli C. Promiscuous or geterogeneous muscarinic receptors in rat atria? 1. Schild analysis with simple competitive antagonists /7 Eur. J. Pharmacol. — 1990. — Vol. 191, N 1. — P. 39−48.1. CT «
  74. Kerr P. M» Hiller K., Wallis R. M" Garland C. J. Pharmacological characterization of muscarinic receptors mediating contractility in human colon//Life Sci. — 1995, —Vol. 56, N 11/12, Abstr. 82, —P. 1042.
  75. Kilbinger H., Halim S., Lambrecht G" Weller W., Wessler G. Comparison of affinities of muscarinic antagonists to pre- and postjunctional receptor in the guinea-pig ileum // Eur. J. Pharmacol. — 1984. — Vol. 103. N ¾. — P. 313−320.
  76. Korc M., Ackennan M. S., Roeske W. R. A cholinergic antagonist identifies a subclass of muscarinic receptors in isolated rat pancreatic acini//J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1987.-Vol. 240, NL — P. 118−122.
  77. Lambrecht G. Feifel R. Forth B., Strohmann CA Tacke R. Mutschier E. p-Fluoro-hex.ahydro-sila-difenidol: the first M: rselectie muscarinic antagonist Eur. J. Pharmacol. — 1988.. 152. N 12. — P. 193−194.
  78. Lambrecht G., Gross J., Hackseil U., Hermani U. Hildebrandt C. Hou X. Moser U. Nilsson B. M" Pfaff 0., Waelbroeck M. Wehrle J. Mutschier
  79. E. The design and pharmacology of novel selective muscarinic agonists and antagonists // Life Sci. — 1995. — Vol. 56, N I 1/12. — P. 815−822.
  80. Lehman J., Langer S. Z. Muscarinic receptors on dopamine terminates in the cat caudate nucleus neuromodulation of 'H-dopamine release in vitro by endogeneous acetylcholine//Brain Res.— 1982. — Vol.248, N. P. 61.
  81. Levey A. I., Kitt C. A., Simonds W. F., Price D. L., Brann M. R. Identification and localization of muscarinic acetylcholine receptor proteins in brain with subtype-selective antibodies // J. Neurosci. — 1991. — Vol. 11. — P. 3218−3226.
  82. A. 1., Edmunds S. M., Hersch S. M., Wiley R. G., Heilman C. J. Light and electron microscopic study of in2 muscarinic acetylcholine receptor in the basal forebrain of rat // J. Comp. Neurol. — 1995. — Vol. 351, —P. 339−356.
  83. Levine R. R., Birdsall N. J. M. (eds) Subtypes of muscarinic receptors. Proceedings of the 7th international symposium on subtypes of muscarinic receptors // Life Sci. — 1997. — Vol. 60, N 13/14. — P. 963−1207.
  84. Li C. K., Mitchelson F. The selective antimuscarinic action of stercuronium // Brit. J. Pharmacol. — 1980, —Vol. 70, N 2. — P. 313−321.
  85. Logothetis D., Karachi Y., Galper J., Neer E. J., Clapham D. E. The subunits of GTP-binding proteins activate the muscarinic K -channel in heart // Nature. — 1987. — Vol. 325. N 6102. — P. 321−326.
  86. Longhurst P. A., Legget R. E., Briscoe J. A. K. Characterization of the functional muscarinic receptors in the rat urinary bladder // Brit. J. Pharmacol. — 1995, —Vol. 116, N. 4 — P. 2279−2285.
  87. O. H. Rosenbrough N. 1. Fan- A. L. Randall R. J. Prote in measurement with the Folin phenol reagent J. Biol. Chem. — 1951. ----Vol. 193. N 1. — P. 265−275.
  88. MacGeer P. L. Eceles J. C., MacGeer E. C. Molecular Neurobiology of the Mammalian Brain. — New York: Plenum Press— 1978.
  89. Maeda A., Kubo T., Mishina H., Nunia S. Tissue distribution of mRNA encoding muscarinic acetylcholine receptor subtypes // FEBS Lett., — 1988. — Vol. 239. — P. 339−342.
  90. Mash D. C., Flynn D. D., Potter L. T. Loss of M2 muscarinic receptors in the cerebral cortex in Alzheimer’s disease and experimental cholinergic denervation//Science. 1985. — Vol. 228, N 3. — P. 1115−1117.
  91. Max S. I., Liang J. S., Valentine H. H., Potter L. T. Use of m, toxin as a selective antagonist of m, muscarinic receptors // J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1993. — Vol. 267, N I. P. 450−485.
  92. Mallios V. J., Lydic R., Baghdoyan H. A. Muscarinic receptor subtypes are differentially distributed across brain stem respiratory nuclei /7 Am. J. Phisiol. — 1995. — Vol. 268, N6, —L941−949.
  93. McKinney M., Richelson E. Blockade of N1E-115 murine neuroblastoma muscarinic receptor function by agents that affect the metabolism of arachidonic acid /,' Biochein. Pharmacol. — 1986. — Vol. 35, N 14. — P. 2389−2397.
  94. McKinney M. Miller J. H. Aagaard P. J. Pharmacological characterization of the rat hippocampal muscarinic autoreceptor / J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1993. — Vol. 264, N 1. — P. 74.
  95. Miller J. H., Adgaard P. J., Gibson V. A., McKinney M. Binding and functional selectivity of himbacine for cloned and neuronal muscarinic receptors // J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1992. — Vol. 263, N 2. — P. 663−667.
  96. Miller R. J. Presynaptic receptors // Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. — 1998. — Vol. 38. — P. 204−227.
  97. Miyoshi R., ICito S., Shimoyanra M. Quantitative autoradiographic localization of the Mi and M2 subtypes of muscarinic acetylcholine receptors in the monkey brain // Jap. J. Pharmacol. — 1989. — Vol. 51, N2. — P. 247−256.
  98. Monsma F. J., Abood L. G., Hoss W. Inhibition of phosphoinositide turnover by selective muscarinic antagonist in the rat striatum. Correlation with receptor occupancy /7 Ibid. — 1988. — Vol. 37, N 12. — P. 24 372 444.
  99. Oiianas M. C, Onali P., Neff N. H., Costa E. Adelate cyclase activity of synaptic membranes from rat striatum. Inhibition by muscarinic receptor agonists // Mol. Pharmacol. — 1983. — Vol. 23, N 2. — P. 393−398.
  100. Onali P., Oiianas M. C., Schwartz J. P., Costa E. Involvement of high-affinity GTP-ase in the inhibitory coupling of striatal muscarinic receptors to adenylate cyclase /7 Mol. Pharmacol. — 1983. — Vol. 24, N 3. — P. 380−386.
  101. Peralta E. G., Winslow J. W" Peterson G. L., Smith D. H., Ashkenazi A., Ramachandran J., Schimerlik M. I., Capon D. J. Primary structure and biochemical properties of an M2-muscarinic receptor // Science. — 1987. — Vol. 236, N 4801. — P. 600−605.
  102. Peralta E. G. Ashkenazi A., Winslow J. W., Ramachandran J., Capon D. J. Differential regulation of PI hydrolysis and adenylyl cyclase by muscarinic receptor subtypes // Nature. — 1988. — Vol. 334. — P. 434 437.
  103. Purkerson S. L., Potter L. T. Use of antimuscarinic toxins to facilitate studies of striatal m4 muscarinic receptors // J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1998. — Vol. 284, N2. — P. 707−713.
  104. Potter L. T., Flynn D. D., Hanchett H. E., Kalinoski D. L., Luber-Narod J., Mash D. C. Independent M, and M2 receptors: ligands, autoradiography and functions // Trends Pharmacol. Sci. — 1984. — Vol. 5. Suppl. — P. 22−31.
  105. Preiksaitis H. G." Launer L. G. Pharmacological and molecular characterization of muscarinic receptors in cat esophageal smooth muscle //J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1998. — Vol. 285. N2. — P. 853−861.
  106. Quirion R., Richard J., Wilson A. Muscarinic and nicotinic modulation of cortical acetylcholine release monitored by in vivo microdialysis in freely moving adults rats 11 Synapse. — 1994. — Vol. 17, N 2. — P. 92−100.
  107. Raiteri M., Leardi R., Marchi M. Heterogeneity of presynaptic muscarinic receptors regulating neurotransmitter release in the rat brain // J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1984. — Vol. 228, N 1. — P. 209−214.
  108. Raiteri M., Marchi M., Paudice P., Pittaluga A. Muscarinic receptors mediating inhibition of y-aminobutyric acid release in rat corpus striatum and their pharmacological characterization II J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1990.—Vol. 254, N2.—P. 496−501.
  109. Raw Is S. M., McGinty J. F. Muscarinic receptors regulate extracellular glutamate levels in the rat striatum: an in vivo microdialysis study // J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1998. — Vol. 286. N 1. — P. 91−98.
  110. Ray A. P., Filmor M. L., Levey A. 1., Rye D. B. Species differences and cholinergic terminal/receptor mismatch in the pontine REM-induction area II Soc. Neurosci. — 1997. — Vol. 23, Abstr. — P. 213 1.
  111. Richards M. H. Relative potencies of agonists and differential sensitivity to N-ethylmaleimide on muscarinic autorereceptor sand postsynaptic receptors in rat hippocampus // J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1990. — Vol. 255, N 1. — P. 83−89.
  112. Riker W. F., Wescoe V. C. The pharmacology of flaxedil with observations on certain analogs. Ann. N. .Y. Acad. Sci. 1951. — Vol. 54. — P. 373−394.
  113. Role L. W. Kelly J. P. The brain stem: cranial nerve nuclei and the monoaminergic systems II Principles of neural science. — 3rd ed.
  114. Kandell E. R., Schwartz J. H., Jessel T. M. eds) — Elsevier, New York, NY. — P. 683−689.
  115. Roszkowski A. P. An unusual type of sympathetic ganglionic stimulant // J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1961, —Vol. 132, N 1. — P. 156−170.
  116. S. T., Thomas T. M., Levey A. 1. Muscarinic acetylcholine receptor subtype, lrb.'diverse functional inplications of differential synaptic localization//Life Sci. — 1997, —Vol. 60, N 13/14.— P. 1031-1038.
  117. Saxena P. R., Bonta 1. L. Mechanism of selective cardiac vagolytic action of pancuronium bromide. Specific blocade of cardiac muscarinic receptors // Eur. J. Pharmacol. — 1970. -Vol. 11. — P. 332−34L
  118. Scatchard G. The attraction of proteins for smoll molecules and ions // Ann. N.J. Acad. Sci. — 1949. — Vol. 51. — P. 660−692.
  119. Szerb J. C., Malik H. Hunter E. J. Relationship between acetylcholine content and release in the cat’s cerebral cortex /7 Canad. Physiol. Pharmacol. — 1970. — Vol. 8. — P. 780−790.
  120. Tacke R., Linoh H" Zilch H., Wess J., Moser U., Mutschler E., Lambrecht G. Synthesis and properties of the selective antimuscarinic agent cyclohexylphenyl (3-piperidinopropyl) si land /7 Lieb. Ann. Chem. — 1985,—N 11. — P. 2223−2228.
  121. Taylor C. W., Merrit J. E. Receptor coupling polyphosphoinositide turnover: a parallel with the adenylate cyclase system // Trends Pharmacol. Sci. — 1986. — Suppl. 1 1 — P. 238−242.
  122. Tietje K. M., Goldman P. S., Nathanson N. M. Cloning and functional analysis of a gene encoding a novel muscarinic acetylcholine receptor expressed in chick heart and brain 7 J. Biol. Chem. — 1990. — Vol. 265, N. 5 — P. 2828−2834.
  123. Velazquez-Moctezuma .). Gillin J. C7. Shiromani P. J. Effect of specific NT. M2 muscarinic receptor agonists on REM-sleep generation Brain Res. — 1989. — Vol. 503, N I. — P. 128−131.
  124. Vogt B. A. Localization of cortical muscarinic receptor subtypes // Ibid.1988. — Vol. 9, Suppl. — P. 49−53.
  125. Waelbroeck M., Tastenoy M., Camus J., Christophe J. Binding selective antagonists to four muscarinic receptors (M, to M4) in rat forebrain // Ibid.1990. — Vol. 38, N 2. — P. 267−273.
  126. Wallis R. M., Smith C. ML A comparison of the binding profile of antagonists at the human cloned muscarinic receptors itl. and m3 using 3H]-darifenacine and [3H]-NMS // Life Sci. — 1997. — Vol. 60, N 13/14, Abstr. 25. — P. 1 175.
  127. Wang S. Z., Zhu S. Z., El-Fakahany E. E. Efficient coupling of m5 muscarinic acetylcholine receptors to activation of nitric oxide synthase // J. Pharmacol. Exp. Ther. — 1994. — Vol. 268, N 2. — P. 52 557.
  128. Watanabe A. M., McConnaughey M. ML, Strawbridge R. A., Fleming J. WL, Jones L. R. Besch H. R. Muscarinic cholinergic receptor modulation of P-adrenergic receptor affinity for catecholamines // J. Biol. Chem. -1978. — Vol. 253, N 14. —P. 4833−4836.
  129. M., Yamamura H. 1., Roeske W. R. A unique regulatory profile and regional distribution of /Hjpirenzepine binding in the rat provide evidence for distinct Mi and M2 muscarinic receptor subtypes // Life Sci.1983,—Vol. 32, N26.— P. 3001-3011.
  130. Watson N. Reddy H. Eglen R. M. Pharmacological characterization of the muscarinic receptors mediating contraction of canine saphenous vein /7 J. Auton. Pharmacol. — 1995. — Vol. 15. — P. 37−441.
  131. Wei J., Walton E. A., Milici A., Buccafusco J. J. mrm5 Muscarinic receptor distribution in rat CNS by RT-PCR and HPLC // J. Neurochem.1994,—Vol. 63, N 3. — P. 815−821.
  132. Weiner D. M., Levey A. J., Brann M. R. Expression of muscarinic acetylcholine and dopamine receptor mRN As in rat basal ganglia // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. — 1990. — Vol. 87. — P. 7050−7054.
  133. Yamamura H. L, Snyder H. S. Muscarinic cholinergic binding in rat brain // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1974. — Vol. 71, N. 5 — P. 1725−1729.
  134. Yukihisa M., Kinzo M., Hiroyuki 0., Hiroshi W. Effects of oxotremorine and pilocarpine on striatal acetylcholine release as studieid by brain dialysis in anesthetized rats Gen. Pharmacol. — 1996. — Vol. 27. N. 51. P. 833−836.i 11
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!