Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Регуляция каталитической активности алкогольдегидрогеназы фармакологическими препаратами Пирацетам, Зорекс и Унитиол

Диссертация: Регуляция каталитической активности алкогольдегидрогеназы фармакологическими препаратами Пирацетам, Зорекс и Унитиол
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Одна из наиболее актуальных в физико-химическом аспекте проблем биохимии алкоголизма — регуляция активности алкогольдегидрогеназы (АДГ). Действующее начало в любом алкогольном напитке — этанол. Достаточно полно изучен физиологический аспект действия этанола на организм человека, а также исследован ферментативный механизм утилизации этанола в организме человека при участии фермента… Читать ещё >

Регуляция каталитической активности алкогольдегидрогеназы фармакологическими препаратами Пирацетам, Зорекс и Унитиол (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • 1. ВВЕДЕНИЕ
  • 2. Обзор литературы
    • 2. 1. Физико-химические особенности строения алкогольдегидрогеназ
    • 2. 2. Катализируемые реакции и субстратная специфичность различных классов алкогольдегидрогеназ
    • 2. 3. Выделение и очистка алкогольдегидрогеназ из различных источников
    • 2. 4. Кинетика ферментативных реакций, катализируемых алкогольдегидрогеназами
    • 2. 5. Изучение влияния типов ингибиторования на каталитическую активность биокатализаторов
    • 2. 6. Эффекторы алкогольдегидрогеназ различной химической природы
  • 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТ
    • 3. 1. Используемые в работе вещества
    • 3. 2. Посуда, приборы и оборудование
    • 3. 3. Методы исследования
      • 3. 3. 1. Метод Г. А. Кочетова для выделения и очистки алкогольдегидолгеназ
      • 3. 3. 2. Определение концентрации белка по методу биуретовой 60 реакции
      • 3. 3. 3. Метод определения ферментативной кинетической 61 активности алкогольдегидрогеназы
      • 3. 3. 4. Метод Лайнуивера — Берка для обработки данных 62 ферментативной кинетики
      • 3. 3. 5. Метод векторных диаграммных построений
      • 3. 3. 6. Программное обеспечение Microlab Origin
  • 4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
    • 4. 1. Выделение, очистка и определение субстратной специфичности 70 алкогольдегидрогеназы
    • 4. 2. Определение молекулярно-кинетических параметров каталитической активности алкогольдегидрогеназы печени лошади в 81 системе контроля (ферментативная система-1)
    • 4. 3. Изучение влияния Пирацетама на каталитические параметры алкогольдегидрогеназы печени лошади (ферментативная система-2)
    • 4. 4. Выяснение действия НАД на ферментативные параметры алкогольдегидрогеназы печени лошади (ферментативная система-3)
    • 4. 5. Исследование влияния препарата Зорекс на ферментативные параметров АДГ печени лошади (ферментативной системы-4)
    • 4. 6. Выяснение влияния Унитиола на каталитическую активность алкогольдегидрогеназы печени лошади (ферментативная система-5)
  • 5. Анализ данных ферментативной кинетики с использованием трехмерной Км’У' - системы координат
  • ВЫВОДЫ

Актуальность исследования.

Одна из наиболее актуальных в физико-химическом аспекте проблем биохимии алкоголизма — регуляция активности алкогольдегидрогеназы (АДГ). Действующее начало в любом алкогольном напитке — этанол [68- 71- 174]. Достаточно полно изучен физиологический аспект действия этанола на организм человека [18], а также исследован ферментативный механизм утилизации этанола в организме человека [27- 41- 47] при участии фермента алкогольдегидрогеназы. Однако вопросы регуляции ферментативной активности алкогольдегидрогеназы изучены недостаточно.

Алкогольдегидрогеназа — фермент класса оксидоредуктаз (1.1.1.1), катализирующий процессы окисления никотинамидадениндинуклеотидом (НАД) первичных алифатических спиртов в соответствующие альдегиды [31]. Алкогольдегидрогеназы найдены в тканях животных (печени лошади) [92- 177], растениях (томатах и картофеле), грибах, дрожжах, бактериях [1] и др. Наиболее изученными ферментами являются алкогольдегидрогеназы, выделенные из дрожжей, а также печени лошади [60- 82- 87].

Алкогольдегидрогеназы являются недостаточно исследованными биокатализаторами с точки зрения использования различных фармпрепаратов, применяемых для лечения больных хроническим алкоголизмом [19- 44- 78]. До настоящего времени актуальным является поиск специфических эффекторов фермента АДГ, окисляющих этанол, с целью регулирования концентрации этанола и ацетальдегида в организме, что важно в изучении молекулярных основ биохимии алкоголизма [91- 127].

Вопросы изучения и установления молекулярных механизмов такого рода эффекторов (активаторов или ингибиторов фермента) относятся к перспективным направлениям современной энзимологии и обсуждались на Symposium of A.I. Oparin: «Biochemistry of the twenty-first century: problems and frontiers 1994, а также в научных работах [14- 182]. Поиск решения поставленной задачи и определяет актуальность данной работы.

В практической медицине довольно широко используются фапмпрепараты Пирацетам и Зорекс [2- 84- 106- 108- 176]. Физиологические основы действия данных регуляторов известны: Пирацетам, являясь ноотропным фармпрепаратом, изменяет метаболические и биоэнергетических процессы в нервной клетке, улучшает функции головного мозга, усиливая кровоток [81- 106]- Унитиол, i в свою очередь, в составе Зорекса способствует восстановлению обмена веществ в нервных клетках выведению продуктов распада этанола из органов и тканей [149- 159]. Эффективное использование этих фармпрепаратов базируется на информации о молекулярно-кинетическом характере их действия на фермент АДГ, который в полной мере не изучен.

Цель диссертационной работы: исследование молекулярно-кинетического аспекта действия фармакологических препаратов Пирацетама, Зорекса и Унитиола (составной части Зорекса) на каталитическую активность алкогольдегидрогеназы в условиях in vitro. Задачи исследования:

1. Выделить и очистить алкогольдегидрогеназу из пекарских дрожжей по методу Г. А. Кочетова. Изучить субстратную специфичность фермента в группе этанол-бутанол-изопропанол и рассчитать его основные ферментативные параметры и выявить оптимальную концентрацию специфичного субстрата. Сравнить ферментативные показателей алкогольдегидрогеназы пекарских дрожжей и алкогольдегидрогеназы печени лошади.

2. Разработать многоэтапный научно-методический подход по изучению каталитической активности алкогольдегидрогеназы печени лошади в присутствии регуляторов и оптимизировать его: рассчитать значения важнейших ферментативных параметров каталитической активности алкогольдегидрогеназы печени лошади для системы контроля;

— выявить влияние Пирацетама и никотинамидадениндинуклеотида на каталитическую активность алкогольдегидрогеназы. Найти их оптимальные концентрации;

— определить действие Зорекса и Унитиола на активность биокатализатора.

3. Установить тип регулирования алкогольдегидрогеназы в присутствии Пирацетама, Зорекса и Унитиола.

4. Для изученных ферментативных систем построить геометрический «портрет» в трехмерной Км' V' — системе координат и на этой основе рассчитать дополнительный интегративный ферментативный параметр длину р1ат -, р1а{2) р1а{%) — векторов.

Научная новизна результатов исследования.

Разработан многоэтапный научно-методический подход по изучению влияния фармакологических препаратов Пирацетам, Зорекс и Унитиол на каталитическую активность АДГ.

Впервые выявлены типы активации АДГ при действии на фермент фармпрепаратов Пирацетама, Зорекса и Унитиола и установлена эффективность функционирования биокатализатора на основе векторных построений данных ферментативной кинетики в трехмерной Км’Усистеме координат, позволивших впервые получить визуализацию хода ферментативного процесса с участием АДГ в присутствии Пирацетама, Зорекса и Унитиола и рассчитать новый ферментативный параметрдлину вектора, характеризующего интенсивность активации фермента и отражающего суммарную эффективность функционирования биокатализатора.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Работа носит фундаментальный характер и направлена на изучение молекулярно-кинетического поведения алкогольдегидрогеназы.

Полученные данные в рамках разработанного в данной работе многоэтапного научно-методического подхода расширяют и развивают теоретические представления об эффективности регулирования биокатализа в присутствии различных добавок.

Разработанная схема изучения типа регулирования (активации или ингибирования) АДГ для фармакологических препаратов (Пирацетама, Зорекса и Унитиола), направленная на поиск оптимальных условий течения ферментативной реакции, может служить моделью для изучения других фармпрепаратов, действующих на фермент утилизации этанолаалкогольдегидрогеназу — с целью устранения последствий интоксикации. организма.

Часть полученных данных и сделанные выводы использованы при выполнении проекта № 2.1.1/1897 «Исследование взаимосвязи структурно-динамических свойств ферментов с их функциональной активностью и разработка новых биокатализаторов на основе иммобилизованных окислительно-восстановительных ферментов для биомедицинской и пищевой промышленности», выполняемого по аналитической ведомственной целевой программе «Развитие научного потенциала высшей школы (2009;2011 годы)». (Заказчик проекта — Министерство образования и науки Российской федерации, Федеральное агентство по образованию).

Научные результаты, выносимые на защиту.

1. Максимальная субстратная специфичность выделенной и очищенной из пекарских дрожжей алкогольдегидрогеназы среди спиртов различного строения наблюдается к этиловому спирту. Рассчитаны значения важнейших ферментативных параметров биокатализатора (Кш, Ушах и.

Ккат). Выявлена оптимальная концентрация специфичного субстратаэтанола, равная 1,5−10″ ~М.

2. Разработанный многоэтапный научно-методический подход по изучению каталитической активности алкогольдегидрогеназы позволил установить, что фармпрепарат Пирацетам как активатор алкогольдегидрогеназы обладает большей эффективностью в сравнении с Зорексом и Унитиолом.

3. Пирацетам, Зорекс и Унитиол по разному активируют алкогольдегидрогеназу, а именно в случае Пирацетама — двухпараметрически рассогласованный тип активации (lí-a-тип, Крупянко В. И., 1994), для Зорекса и Унитиола — двухпараметрически согласованный тип активации (la-тип, Крупянко В. И., 1994) фермента.

4. Расчет дополнительного ферментативного параметра — значения • длины вектора на основе векторного построения геометрического «портрета» алкогольдегидрогеназной реакции подтвердил наибольшую эффективность фармпрепарата Пирацетама в сравнении с Зорексом и Унитиолом.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности.

Полученные результаты соответствуют пункту 4 паспорта специальности 03.01.04 «Биохимия (биологические науки)».

Апробация и реализация результатов диссертации.

Основные положения и выводы диссертации апробированы в выступлениях на научных конференциях. Материалы диссертации докладывались и обсуждались на V и VII научных конференциях аспирантов и студентов химического факультета (Тверской государственный университет, Тверь, 2006 и 2008) — на XVI и XVII Региональных Каргинских чтениях «Физика, химия и новые технологии» (Тверской государственный университет, Тверь, 2009 и 2010) — на Международной конференции «Состояние воды в биологических и модельных системах» (Тверская государственная медицинская академия,.

Тверь, 2007) — Всероссийской научной школе для молодежи «Приборное и научно-методическое обеспечение исследований и разработок в области каталитического превращения бифункциональных органических соединений» (Тверская государственная сельскохозяйственная академия, Тверь, 2010), а также на научных семинарах кафедры физико-химической экспертизы биоорганических соединений ТвГУ и при выполнении дипломных работ, в которых соискатель был научным руководителем дипломников.

Полученные результаты по выявлению особенностей ферментативного поведения алкогольдегидрогеназы печени лошади и оптимизации метода выделения фермента из пекарских дрожжей используются в исследовательской работе и в учебном процессе на кафедре физико-химической экспертизы биоорганической экспертизы ТвГУ: в курсе лекций, при подготовке курсовых и дипломных работ студентов.

Публикации.

Результаты исследования отражены в 9 публикациях, 3 из которых в рецензируемых научных журналах, включенных в перечень ВАК.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 130 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, методов исследований, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов и списка цитируемой литературы, включающего 182 источника, из которых 80 иностранных. Работа иллюстрирована 17 таблицами и 68 рисунками.

ВЫВОДЫ.

1. Выделена и очищена алкогольдегидрогеназа из пекарских дрожжей. Рассчитано содержание фермента, изучена субстратная специфичность и исследованы важнейшие ферментативные параметры биокатализатора. Выявлена максимальная субстратная специфичность алкогольдегидрогеназы дрожжевой к этанолу.

2. Разработан многоэтапный научно-методический подход по изучению каталитической активности алкогольдегидрогеназы в модельной ферментативной системе в присутствии регуляторов ферментативной активности:

• для системы контроля определены значения важнейших ферментативных параметров каталитической активности алкогольдегидрогеназы печени лошади: Km = (2,51 ± 0,17) -10″ 5 моль/лVmax = (3,51 ± 0,17) -10″ 5 опт.ед. /сКкат = (1,45 ± 0,17) -10″ ' с1. Найдено удовлетворител ьное соответствие ферментативных показателей алкогольдегидрогеназы печени лошади и алкогольдегидрогеназы пекарских дрожжей;

• введение Пирацетама ухудшает связывание фермента с субстратом (значения Km больше на 71%, чем в системе контроля), но улучшает течение каталитической реакции (в 5,7 раз возрастает значение Vmax) при использовании 1-го и 2-го способов оценки активности биокатализатора. Наибольшее влияние на алкогольдегидрогеназу найдено для концентрации Пирацетама, составляющей 1,5−10″ 2 М;

• наиболее эффективное течение ферментативного процесса наблюдается для концентрации никотинамидадениндинуклеотида равной 1,5Т0~2М;

• каталитическая активность алкогольдегидрогеназы возрастает в 2 раза при добавлении Зорекса в модельную систему, а в случае с Унитиолом найдено двукратное возрастание активности биокатализатора.

Введение

в ферментативную систему Зорекса и Унитиола на 16 — 20% улучшает взаимодействие фермента (алкогольдегидрогеназы печени лошади) и субстрата (С2Н5ОН) в сравнении с системой контроля.

3. При введении в модельную ферментативную систему Пирацетама установлен тип активации — Па-тип (двухпараметрически рассогласованная активация). При использовании Зорекса и Унитиола алкогольдегидрогеназа активируется по 1а-типу (двухпараметрически согласованная активация).

4. Построена и проанализирована пространственная кривая течения кинетической реакции для алкогольдегидрогеназы, её геометрический «портрет», при добавлении в ферментативную систему Пирацетама, Зорекса и Унитиола. Установлено, что введение изученных фармпрепаратов в модельную систему с алкогольдегидрогеназой меняет не только интенсивность, но и тип и механизм изученной ферментативной реакции. Рассчитан дополнительный интегральный ферментативный параметр — длина вектора, показавший, что наиболее эффективным для активации алкогольдегидрогеназы является фармпрепарат Пирацетам.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Т.В., Егорова O.A., Новикова Т. В. Условия биосинтеза, выделение и свойства NAD-зависимой алкогольдегирогеназы // Биохимия. 2001. — Т.51, Вып. 10. — С. 1673−1681.
  2. Г. Я., Нисс А. И. Фармакология ноотропов. — М.: Медицина, 2001.-С. 112−118.
  3. В.К. Химия протеализа. М.: Наука. — 1999. — 321 с.
  4. А.И., Такунова И. В., Малеванный В. А. Справочное руководство по химии. М.: Высшая школа, 2003. — 367 с.
  5. И.П. Алкогольдегидрогеназа млекопитающих объект молекулярной медицины.-М.: Медицина, 2003. — С. 145−178.
  6. П., Катализ и ингибирование химических реакций: пер. с англ. -М.: Наука, 1966−320 с.
  7. JI. Р., Сатановская В. И., Пронько П. С. Системы обмена этанола и ацетальдегида печени коротко и долго спящих крыс //Пробл. соврем, наркологии: Респ. сб. науч. тр. / РСФСР. 2-й Моск. гос. мед. ин-т. -М., 1991.-С. 105−107.
  8. И.В., Варфоломеев С. Д. Биокинетика. М.: Химия, 1979. -392 с.
  9. И.В., Клесов А.А Практический курс химической и ферментативной кинетики. М.: Мир, 1998. — 320 с.
  10. Ю.Березин И. В., Мартинек К. Основы физической химии ферментативного катализа. М.: Высшая школа, 1977. — 432 с.
  11. П.Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. — 3-е изд. — М.: Медицина, 1998.-398 с.
  12. С. Структура и функция ферментов. — М.: Мир, 2003. 379 с.
  13. Биохимическая термодинамика / под ред. М. Р. Джоунса. М.: Мир, 2001.-456 с.
  14. М.Бонитенко Е. Ю., Бабаханян Р. В., Есаян A.M. Влияние ингибиторов алкогольдегидрогеназы на биохимические и гистологические изменения при экспериментальных отравлениях // Нефрология. 2003. — Т.7, № 3. -С. 60−66.
  15. Е.Ю., Бонитенко Ю. Ю. Влияние совместного применения этанола и ингибитора алкогольдегидрогеназы на токсичность этиленгликоля // Мед.-биол. и соц.-психол. пробл. безопасности в чрезв. ситуациях. 2009. — № 4. — С. 42−47.
  16. С. Е. Ерусалимский Б.Л. Физика и химия макромолекул. М.: Наука, 2000. — С. 58−94.
  17. Э.Э. Прикладная биохимия: пер. с нем. М.: Высшая школа, 1981.-С. 152−291.
  18. Ю. В. Иванова H.H. Последствия интоксикации организма алкоголем. — М.: Медицина, 2008. С. 325.
  19. Ю.В., Ведерникова H.H. Нейрохимия и фармакология алкоголизма. М.: Медицина, 1995. — 237 с.
  20. Ю. В., Меткалова С. Е., Давыдова JI. Е. Поиск новых лекарственных средств для выведения из острой алкогольной интоксикации //Вопр. наркологии. 1994. — № 4. — С. 50−56.
  21. С.Д., Гуревич К. Г. Биокинетика: Практический курс.
  22. М.: ФАИР ПРЕСС, 2007. — С. 13−27.
  23. С.Д., Зайцев C.B. Кинетические методы в биохимических исследованиях. — М.: Химия, 1982. 219 с.
  24. М.Г. Кинетика мембранных транспортных ферментов. М.: Мир, 2004.-106 с.
  25. М.В. Физика ферментов. — М.: Наука, 2003. — 616 с.
  26. Т.П. Физико-химические свойства алкогольдегидрогеназы // Биохимия. Якутск. — 2004. — Т.2. — С. 14−19.
  27. О.Г., Алексеева А. Е., Потапкина Т. А. и др. // Биохимия. -1994.-Т 59.-С. 509−515.
  28. К. H., Высокогорский В. Е., Купор В. Г. Ферменты окисления этанола и его метаболитов при острой алкогольной интоксикации и иммобилизационном стрессе // Вопр. наркологии. 2001. — № 4. — С. 2−9.
  29. В.М. Влияние алкогольной интоксикации на активность ферментов окисления этанола и аргиназы печени крыс // Вопросы медицинской химии. 2008. — Т. 9, № 4. — С. 51−55.
  30. Р. Введение в биофизику. М.: Мир, 2002. — 205 с.
  31. . Катализ в химии и энзимологии. М.: Высшая школа, 1972. -459 с.
  32. М., Уэбб Э. Ферменты. М.: Мир. — 2005. — Т.З. — С. 167−189.
  33. М. Элиот Д. Справочник биохимика. М.: Мир, 1991. — 543 с.
  34. А.Н., Метелица Д. И. Регуляция каталитической активности пероксидазы в смешанных мицеллах ПАВ // Биохимия. 2001. — Т.50. № 7.-С. 102−108.
  35. Е.В., Бычков П. В., Шеховцева Т. Н. Ферментативный метод определения неорганических и органических ингибиторов алкольдегидрогеназы // Журнал аналитической химии. — 2006. Т. 55, № 8. — С. 869−878.
  36. Н.В. Воздействие Пирацетама на каталитическую активность алкогольдегидрогеназы печени лошади // Тез. докл. XVI Региональные Каргинские чтения «Физика, химия и новые технологии». Тверь: Твер. гос. ун-т, 2009. — С.40.
  37. О.П., Тарасевич Ю. Ю., Юзюк Ю. И. Обработка и визуализация данных физических экспериментов с помощью пакета Origin. М: Книжный дом «ЛИБКОМ», 2009. — С. 136.
  38. Т. Основы ферментативной кинетики. — М.: Мир, 1990. — 342 с.
  39. .М., Рогожин В. В. Влияние межсубъединичного взаимодействия в алкогольдегидрогеназе из печени лошади на кинетику окисления этанола // Биохимия. 1998. — Т. 44, № 4. — С. 656—671.
  40. . М., Серкина Е. В. Некоторые методические подходы к изучению метаболизма этанола // Лабор. дело. — 1998. — № 2. С. 126.
  41. A.A., Березин И. В. Ферментативный катализ. — М.: Изд-во МГУ, 2002. 264 с.
  42. Кож Ф. Регуляция ферментативной активности. М.: Мир, 2004. -244 с.
  43. Л.А., Зеленин К. Н., Бонитенко Ю. Ю. и др. Ингибиторы алкогольдегидрогеназы и их влияние на основные ферментативные системы // Вопросы мед. химии. 2003. — Т.36, Вып. 3. — С.61−79.
  44. В.П., Шведова В. Н. Биохимия. М.: Дрофа, 2004. — 456 с.
  45. А. И. Биохимия животных. 3 изд., перераб. и доп.— М.: Колос, 1992.-526 с.
  46. К. Л., Мышенко Т. П., Запашун Т. Е. Ферменты обмена этанола печени крыс с различной алкогольной мотивацией при острой алкоголизации //Укр. биох. ж. 1993. — Т. 65, № 4. — С. 33−39.
  47. Корниш-Боуден Э. Основы ферментативной кинетики. — М.: Химия, 1982.-234 с.
  48. Г. А. Практическое руководство по энзимологии. М.: Высшая школа, 1998.-267 с.
  49. В. Л. Введение в энзимологию. М.: Мир, 1997 — 391 с.
  50. В.И. Векторный метод представления ферментативных реакций. М.: Наука, 1999. — 154 с.
  51. .И. Коферментная и регуляторная функции никотинамидадениндинуклеотидов, кинетический аспект // Коферменты. М.: Медицина, 2003. — С. 83−112.
  52. .И. Физико-химические механизмы регуляции активности ферментов. М.: Мир, 2008. — 412 с.
  53. A.C., Кузнецов Д. А., и др. Картирование активного центра алкогольдегидрогеназы низкомолекулярными лигандами // Биоорганическая химия. 2000. — Т.23, № 3. — С. 17−183.
  54. Н.Е. Биохимия. Киев: Высшая школа, 1988. — 297 с.
  55. Г. П., Золотарева Н. В. Анализ данных ферментативной кинетикис использованием трехмерной kmv системы координат // Вестник ТвГУ. Сер. «Биология и экология». — 2010. — Вып. 17, №.16 — С.71−76.
  56. Г. П., Золотарева Н. В. Пирацетам регулятор каталитической активности алкогольдегидрогеназы печени лошади // Вестник ТвГУ. Сер. Биология и экология. — 2009. — Вып. 11, № 2. — С.56−62.
  57. Г. П., Сметанникова Н. В. Регуляция активности алкогольдегидрогеназы печени лошади Пирацетамом // Тез. докл. I Международной конференции «Состояние воды в биологических имодельных системах», Тверская гос. мед. академия. — Тверь, 2007. — С.173−174.
  58. Г. П. Элементы кинетики ферментативных реакций. — Тверь: Твер. гос. ун-т, 1998 64 с.
  59. А. Основы биохимии. М.: Мир, 1985. — 260 с.
  60. Ю. Ю. Справочник по аналитической химии — 6-е изд., перераб. и доп. М.: Химия, 1989. — 448 с.
  61. Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека: в 2 Т. -М.: Мир, 1993. Т. 1. — 384 с.
  62. Д. Биохимия. М.: Высшая школа, 1997. — Т.2. — С. 136−214.
  63. И.Н., Узиенко А. Б., Ясников A.A., Михайловский C.B., Стрелко В. В. Алкогольдегидрогеназная реакция на углях // Украинский биохимический журнал. 2003. — Т.61, № 5. — С. 99−109.
  64. П. А. Охотин В.Е. Еременко П. С. и др. Локализация алкоголь- и альдегиддегидрогеназы в спинном и головном мозге человека // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 2004. — Т. 94, № 11. -С. 32−38.
  65. Ю.М., Сатановская В. И., Садовник М. Н. Биологический компонент в генезисе алкоголизма. Минск: Наука и техника, 1986. — С. 293.
  66. В. Д. Фармакология ноотропов. М., 1989. — С. 20−25.
  67. С.М., Чухрай Е. С. Физико-химические основы ферментативного катализа. М.: Высшая школа, 1971. — 234 с.
  68. Е.П., Старцев O.A. Аналитические исследования в медицине, биологии и энзимологии. М.: Высшая школа, 2007. — 279 с.
  69. Практикум по биохимии / под ред. С. Е. Северина, Г. А. Соловьевой. -М.: Моск. гос. ун-т, 2007. 288 с.
  70. П.Л. Энергетика структуры белковых молекул // Биофизика. -2003. Т.32, № 3. — С. 98−113.
  71. П. С., Кузьмич А. Б., Зиматкин С. М. Концентрация ацетальдегида в крови у интактных крыс при алкогольной интоксикации и действии ингибиторов альдегиддегидрогеназы // Вопр. наркологии. -1993. -№ 3.- С. 40−54.
  72. Л.М. Практикум по биохимии. Ростов н/Д: Феникс, 1999. -167 с.
  73. В.В., Говорова Т. П. Очистка и некоторые свойства алкогольдегидрогеназы растений // Этанол и его метаболизм в высших организмах. Якутск, 1995.-С. 14−19.
  74. Г. М. Клинические значения ноотропных препаратов. Симпозиум. -М.: Медицина, 1996. С. 71−78.
  75. Г. П., Лозитнова А. Б. Активность алкогольдегидрогеназ субклеточных фракций дрожжей, выращенных на глюкозе и гексадекане // Микробиология. 2004. — Т.47, № 4. — С. 682−688.
  76. Е.С. Биохимия. 2-е изд., испр. — М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. -784 с.
  77. Р. Методы очистки белка. М.: Мир, 1985. — 213 с.
  78. А.З. Таблицы буферных растворов // Заводск. лаб. 1997. Т. 35, № 9.-С. 1146−1148.
  79. Современные проблемы биокинетики / под ред. С. Д. Варфоломеева. -М.: Химия, 1987.-319 с.
  80. В. М. Структура и функции белков. М.: Высшая школа, 1996.-321 с.
  81. В.Е. Исследование активности алкогольдегидрогеназы из цитоплазмы клеток некоторых дрожжей // Прикл. биохимия и микробиол. 1995. — Т.27, № 1. — С.61−67.
  82. Л. Ингибиторы ферментов и метаболизма. М.: Мир, 1998. -356 с.
  83. С. Структура и механизм действия ферментов. М.: Мир, 2002. -389 с.
  84. Ю. Б. Основы биохимии. М.: Дрофа, 2003. — 432 с.
  85. Д. Физическая биохимия. М.: Мир, 1980 — 453 с.
  86. Н. 3., Аскарова А. Н., Тюрикова Р. П. Биохимия животных с основами физколлоидной химии. М.: Мир, 2010.-371 с.
  87. Химическая энциклопедия. М.: Наука, 1995. — Т. 5 — 589 с.
  88. Шеховцова Т. Н Ферменты: их использование в химическом анализе // Соросовский образовательный журнал. 2000. — Т. 6, № 1. — С.44−48.
  89. О. В. Методы исследования биополимеров с помощью аналитической ультрацентрифуги // Современные методы в биохимии. -М.: Химия, 1994. С 203−224.
  90. Е.С., Либинзон Р. Е. Биохимические аспекты алкоголизма // Химико-фармацевтический журнал. 1978. — № 7. — С. 3—13.
  91. В., Элиот Д. Биохимия и молекулярная биология. М.: МАИК «Наука/Интерериодика», 2005.-445 с.
  92. Янг И., Жоу X. Влияние ионов цинка на конформационную стабильность дрожжевой АДГ // Биохимия. — 2001. Вып. 1. — С. 61−70.
  93. К.Б. Кинетические методы анализа. — 2-е изд. М.: Химия, 2005. — 200 с.
  94. Agarwal D. P., Harada S., Goedde Н. W. Role of alcohol dehydrogenase and aldehyde dehydrogenase isozymes //Alcohol.: Clin, and Exp. Res. — 1981. -Vol. 5,№ l.-P. 12−16.
  95. Andersson P., Kvassman J., Oldn B. Synergism coenyme and alcohol binding to liver alcohol dehydrogenase // Eur. J. biochem. 1994. — Vol. 12. -P.-482.
  96. I.P., Danilova R.A., Obukhova M.F., Moskvitina T.A., Prosorovsky V.N. // FEBS Lett. 2003. — Vol. 486. — P. 49−51.
  97. Ashmarin I.P., Pshezhetsky A.V., Fedorova 1.М., Benzi G., Pastoris O., Villa R. F., et al. // Biochem. Pharmacol. 2004. — Vol. 34, № 9. — P. 14 771 483.
  98. Bergmeyer H. U. Methoden der enzymatische analyse in enzymology and related areas of molecular biology. 1989. — Vol. 1 — P. 45.
  99. Billardon M. et al. // J. Intern. Medecine. 1997. — Vol. 257, Suppl. P. 115−118.
  100. Bonnichsen R. K., Wassen A.M. Crystalline alcohol dehydrogenase from horse liver. // Arch. Biochem. Biophys. 1984. — Vol. 18. — P. 361.
  101. Boyer P., Lardy H. Myrback K. The Ensymes. New-York-London: Akademie Press. — 1983. — Vol. 11. — P.103.
  102. Buhler R., Hess M., Wartburg Y.P. Immunohistochemical localization of human liver alcohol degydrogenase in liver tissue cultured fibroplasts and Hela cells. // Amer. J. Path. 2003. — Vol. 108. — P. 89−99.
  103. Cheng Li-Yao FEBS Lett. 2004. — Vol. 300. — P. 251−253.
  104. Cheung C., Smith C.K., Hoog J.-O., Hotchkiss S.A.M. et. al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1999. — Vol. 261. — P. 100−107.
  105. Coleman P.L., Weiner H. Simultaneous binding of competive ligands to horse liver alcohol dehydrogenase // Biochem. 1989. — Vol. 12. — P. 1705— 1709.
  106. Coles B., Beale D., Miller D., Lay J., Kadlubar F., Aitken A., Ketterer B. et. al. // Chemico-Biological Interactions. 1998. — Vol. 64. — P. 181−192.
  107. Consalvi V., MDrdh G., Vallee B.L. // Biochem. biophys. res. commun. -2002.-Vol. 139.-P. 1009−1016.
  108. Creigliton D. J., Flajdu J., Mooser G., Sigman D. S. Model dehydrogenase reactions // J. Amer. Chem. 2004. — Vol. 95 — P. 6855−6867.
  109. Dawidek-Pietryka K., Szozepaniak S., Dudka J., Mazur M. // Arch. Toxicol. 1998. — Vol. 72. — P. 604−607.
  110. Drdh G., Vallee B. Biochemistry, 1996. Vol. 25. — P. 7279−7282.
  111. Dworschack R.T., Plapp B.V. Kinetics of native and activated isozymes of horse liver alcohol dehydrogenase // Biochemistry. 1997. — Vol. 17 — P. 111 116.
  112. Eklund H., Branden C.I. Biological macromolecules and assemblies. New York, 1987.-P. 73−143.
  113. Eklund H., Branden C. Structural differences between apo- and holoenzyme of horse liver alcohol dehydrogenase // J. Biol. Chem. 1998. -Vol. 254.-P. 3458.
  114. Evans S.A., Shore J.D. The role of zinc-bound water in liver alcohol dehydrogenase // J.Biol. Chem. 1980. -Vol. 255. — P. 1509.
  115. Farres J., Moreno A., Crosas B., Peralba J.M., Allali-Hassani A., Hjelmqvist L., Jornvall H., Pares X. Structure of enzymes // Eur. J. Biochem.1994. Vol. 224(2). — P. 549−557.
  116. Forsht A. Enzyme structure and mechanism. — London: Academic Press, 1995.-P. 27−47.
  117. Frey W.A., Vallee B.L. Human liver alcohol dehydrogenase an enzyme essential to the metabolism of digitalis // Biochemical and biphysical research communications. — 1979. — Vol. 91(4). — P. 1543−1548.
  118. Goldberg L., Rudberg U. Inhibition of ethanol metabolism in vivo by administrator of pyrasole // Biochem. Pharmacol. — 2004. Vol.18. -P. 1749−1762.
  119. Goldstein B.M., Li H., Jones J.P., Bell J.E., Zeidler J., Pankiewiez K.W., Watanabe K.A. et. al. // J. Med. Chem. Vol. 37. — P. 392−399.129:Gough W.H., VanOoteghem S., Sint T., Kedishvili N. // J. Biol. Chem. -2001. Vol. 273.-P. 1978−1985.
  120. Greens R. W., MeKay R. H. Behavior of horse liver alcohol dehydrogenase in guanidine hydrochloride solution // J. Biol. Chem. 1969. Vol. 244. — P. 5034−5043.
  121. Haselbeck R., Duester G. Developmental dynamics alcohol degydrogenase.- 1998. Vol. 213. — P. 114−120.
  122. Hayes J., Velick S. Yeast alcohol degydrogenase. Molecular weight, coenzyme binding and reaction equilibrium. // J. Biol. Chem. 1994. — V. 207.-P. 225−244.
  123. T.D., Bosron W.F., Stone C.L. //J. Mol. Biol. 1994. — Vol. 239(3). -P. 415−429.
  124. Irwin A. J., Jones J. B. Regiospecific and enantioselective horse liver alcohol dehydrogenase catalyzed oxidations of some hydroxycyclopentanes // J. Amer. Chem. Soc, 1999. Vol. 98. — P. 1625−1630.
  125. Irwin A. J., Jones J. B. Stereoselective horse liver alcohol dehydrogenase catalyzed oxidoreductions. // J. Amer. Chem. Soc. 1998. — Vol. 98. — P. 8476—8482.
  126. Jomvall H. Horse liver alcohol dehudrogenase. On the primary structure of the isozymes // Eur. J. biochem. 1998. -Vol. 16. — P.25−32.
  127. Jornvall H., Hempel J., Bahr-Lindstrom H., Hoog J.O., Vallee B.L. // Alcohol Alcohol. 1987. — Suppl.l. — P. 13−23.
  128. Jornvall H., Hoog J.O., Persson B., Pares X. Pharmacogenetics of the alcohol dehydrogenase system // Pharmacology. 2000. — Vol. 61, № 3 — P. 91−184.
  129. Kedishvili N., Gough W.H., Davis W., Parsons S., Li T.-K., Bosron W.F. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1998. — Vol. 249. — P. 191−196.
  130. R.A., Elfarra A.A., Myers S.R. // Drug Metab. Dispos. 2001. -Vol. 26.-P. 849−914.
  131. W.M. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2003. — Vol. 174. — P. 701−707.
  132. Krebs H. A., Perkins J. R. The physiological role of liver alcohol dehydrogenase // biochem. J. 1970. -Vol. 118. — P. 630−644.
  133. Langeland B.T., McKinley-McKee J.S. // Archiv. Biochem. Biophys. -1997. Vol. 308. — P. 367−373.
  134. J. // Biochem. 1997. — Bd.272. — P. 95.
  135. Li T.-K., Bosron W.F. et. al. // Annals New York Academy Sci. 1998. -Vol. 492.-P. 3−15.
  136. Lowe J. N., Ingraham L. L. An introduction to biochemical reactions mechanisms. New Jersey, 1974. — P. 345−386.
  137. Mezey E., Potter J. J. Rat liver alcohol dehydrogenase activity // Endocrinolol. 1979. — Vol. 104. — P. 1667−1673.
  138. K., Okuda H., Ogura K., Watabe T. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001. — Vol. 142. — P. 993−998.
  139. R. U., Hoffmann W., Molodawkin G. M. // Dr. Pharmazie. -1993.-Vol. 38.-P. 251−253.
  140. R.A., Kitson K.E., Hardman M.J. // Biochem. 1991. — Vol. 278. — P. 659−665.
  141. Park D.H., Plapp B.V. Interconversion of E and S Isoenzymes of horse liver alcohol dehydrogenase // J. Biol. Chem. 1992. — Vol. 11. — P. 55 275 533.
  142. Plane R.A., Theorell H. et. al. // Acta Chem. Scand. 2001. — Vol. 1 5. — p^ 1866−1871.
  143. Plapp B.V., Green D.W., Sun H.W., Park D.H. Substrate sheciflcity o^alcohol dehydrogenases // Adv. Exp. Med. Biol. 1993. -Vol. 328. — P.391.400.
  144. Potapov A. S. Synthesis of mixed-ligand copper (II) complexes containin.<^-bis (pyrazol-l-yl)methane ligands / A. S. Potapov, A. I. Khlebnikov /y Polyhedron. 2006. — Vol. 25, Is. 14. — P. 2683−2690.
  145. Potter J. J., MacDougald O. A., Mezey E. Regulation of rat alcohox dehydrogenase // Arch, biochem. biophys. 1995. — Vol. 321, № 2. — p.335.
  146. Rasherd N., Rabin B. Inhibition of yeast alcohol dehydrogenase alkylating agents // Eur. J. Biochem. 1995. — Vol. 50. — P. 475−481.
  147. Raskin N.H. Alcogol dehydrogenase in brain a toxicologic role // Ajtltx N.Y. Acad. Sci. 2005. — Vol. 215. — P. 49−53.
  148. Reid M. F., Fewson C.A. Molecular characterization of microbial alcotiQ>j dehydrogenases // Crit. Rev. Microbiol. 1994. — Vol. 20. — P. 13−56.
  149. M. // Med. Biol. Inf. 2001. — Vol. 3. — P. 15−17.
  150. Sachan D. S., Cha Y. S. Acetylcarnitine inhibits alcohol dehydrogenase // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1994. — Vol. 203, № 3. — P. 1496−1501 .
  151. Satre M.A., Zgombic-Knight M., Duester G. The Complete structure human class IV alcohol dehydrogenase (retinol dehydrogenase) determined from the ADH gene // J. Biol. Chem. 1994. — Vol. 269, № 22. — p. 1560g 15 612.
  152. J.F., Berst K.B., Plapp B.V. // Med. Chem. 1998. — Vol. 41 ^ P. 1696−1700.
  153. Scopes R. K. An iron-activated alcohol dehydrogenase // FEBS Letters 1983. Vol. 156. — P. 303−306.
  154. M. // Biochem. soc. transactions. 1999. — Vol. 16. — P. 227−230.
  155. Spirm A.S. On macromolecular structure of native high-polyme^ribonucleic acid in solution // Journal of Molecular Biology. 1960. — Vol. 2.1. P. 431−446.
  156. Svensson S., Lundsjo A., Cronholm T., Hoog J.-O. // FEBS Letters. 199 <5* -Vol. 394.-P. 217−220.
  157. Sytkowski A.I. Coenzyme Binding, and Zinc and Cobalt Exchange highly purified yeast alcohol dehydrogenaze // Arch. Biochem. Biophys. 2006.-Vol. 184, No. 17.-P. 505−510.
  158. Theorell H., McKinley McKee J. S. // Acta chem scand. 1961. — Vol. 1 -P. 1811−1833.
  159. J.D., Higgins D.G., Gibson T.J. // Nucl. Acids Res. 1994. -V^ 22. -P. 4673−4680.
  160. Vallee B. L. Zinc in horse liver alcohol dehudrogenase // J. Biol. Cher^-^ 1957. Vol. 226. — P. 185−195.
  161. B.L., Sellin S., Holmquist B., Mannervik B. // Biochemistry. --Vol. 30.-P. 2514−2518.
  162. K., Summ H.D. // Klin, wochshr. 1987. — Bd. 35. — P. 849.
  163. . K., Sund H. // Biochem. 2004. — Bd. 329. — P.48.
  164. White, A.M. Alcohol, memory blackouts, and the brain // Alcohol Researx^j^ & Health. 1999. — Vol. 27(2) — P. 186−196.
  165. A. //Acta Chem. Scand. 1990. — Vol. 14. — P. 1717−1725.
  166. WyHie M. G., Paciorec P. M., Waterfall J. F. // Biochem. Pharmacol^ 1981.-Vol. 30.-P. 1605−1612.
  167. Xie P., Parsons S. H, Speckhard D.C., Bosron W.F., Hurley T.D. et. al. // Biol. Chem. USA. 2004. — Vol. 272, No. 30. — P. 18 558−18 563.
  168. Yasunami M., Chen C.-S., Yoshida A. // Biochem. Genetics. 1990. — voj 28.-P. 591−599.
  169. Yin S.J., Bosron W.F., Magnes L.J., Li T.K. Human liver dehydrogenase: Purification and kinetic characterization // Biochemistry 1984. Vol. 23, № 24. — P. 5847−5853.
  170. Zgombic-Knight M., Ang H.L., Foglio M.H., Duester G. // J. Biol. Cherry USA. 1995. — Vol.270,No. 18.-P. 10 868−10 877.
  171. Zhmaeva E.V., Bychkov P.V., Shekhovtsova T.N. Enzymatic determination of inorganic and organic inhibitors of alcohol dehydrogenases // Abstracts of vith international Symposium «Kinetics in analytical chemistry» -Romania. Bucharest, 2001. P. 145.
  172. E., Kreter M. L. // Arch. Biochem. Biophys, 2004. P. 161. Jpi
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!