Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Получение и иммунохимическое исследование полимерной фракции столбнячного анатоксина

Диссертация: Получение и иммунохимическое исследование полимерной фракции столбнячного анатоксина
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Особенно серьезную проблему представляет столбняк новорожденных. Несмотря на неполные данные, до настоящего времени эта форма болезни составляет 40−60% от общего числа заболевших столбняком, а умирает во всех развивающихся странах ежегодно более 1 миллиона детей и в Мали, по данным ВОЗ, имеется тенденция к увеличению числа умерших. В столице Мали Бамако 60% смертности детей до одного года… Читать ещё >

Получение и иммунохимическое исследование полимерной фракции столбнячного анатоксина (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Краткая историческая справка
    • 1. 2. Особенности эпидемиологии столбняка
      • 1. 2. 1. Состояние заболеваемости столбняком в странах Африки
    • 1. 3. Особенности профилактики столбняка
    • 1. 4. Столбнячный токсин
      • 1. 4. 1. Получение нейротоксина, его характеристика и структура
      • 1. 4. 2. Фрагментация ТС
      • 1. 4. 3. Взаимодействие ТС с рецепторами и физиологическая 28 роль фрагментов ТС
      • 1. 4. 4. Способ получения С А
    • 1. 5. Методы очистки С А
      • 1. 5. 1. Характеристика метода мембранной диафильтрации для 34 очистки СА
      • 1. 5. 2. Очистка С, А с помощью гель-фильтрации
  • Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
    • 2. 1. Материалы
      • 2. 1. 1. ТС и СА
      • 2. 1. 2. Сыворотки
      • 2. 1. 3. Диагностикумы
      • 2. 1. 4. Лабораторные животные
      • 2. 1. 5. Буферные растворы, реагенты, хроматографические 41 носители
      • 2. 1. 6. Оборудование
    • 2. 2. Методы
      • 2. 2. 1. Диафильтрация
      • 2. 2. 2. Спектрофотометрия
      • 2. 2. 3. Хроматография
      • 2. 2. 4. Определение бежа
      • 2. 2. 5. Иммунохимическая характеристика препаратов
      • 2. 2. 6. Определение удельной антигенной активности препаратов
      • 2. 2. 7. Определение иммунизирующей активности препаратов
      • 2. 2. 8. Определение ревакцинаторного эффекта препаратов
      • 2. 2. 9. Определение белкового азота
      • 2. 2. 10. Приготовление эритроцитарных диагностикумов
      • 2. 2. 11. Получение латексного диагностикума и контрольного ла- 50 текса
      • 2. 2. 12. Постановка реакции агглютинации латекса
      • 2. 2. 13. Статистическая обработка результатов
  • Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБ- 52 СУЖДЕНИЕ
    • 3. 1. Очистка СА с использованием ступенчатой диафильтра
      • 3. 1. 1. Одноступенчатая диафильтрация С А
      • 3. 1. 2. Двухступенчатая диафильтрация СА
      • 3. 1. 3. Использование технологии мембранной «рехроматогра- 62 фии"при производственной очистке СА
    • 3. 2. Исследование иммуногенной активности высокоочшцен- 64 ной полимерной фракции СА
    • 3. 3. Выделение и очистка полимерной фракции СА методами 67 колоночной гель-хроматографии
    • 3. 4. Изучение сенситивных свойств молекулярно-однородных 72 фракций препарата СА

Возбудитель столбняка — Clostridium tetani распространен повсеместно в почве и других объектах внешней среды на различных территориях Земного шара, в связи с чем проблема столбняка имеет глобальное значение. Но в развивающихся странах она стоит наиболее остро, так как процент заражения столбняком значимо выше, чем в развитых странах, где заболеваемость в мирное время носит спорадический характер.

В некоторых Европейских странах, в том числе в России, резкое снижение случаев болезни началось с плановой иммунизации населения. Так по данным В. Ф. Рудниченко и соавторов снижение заболеваемости столбняком в России произошло в 4,6 раза за десятилетие (1971;1980) [52], а смертность снизилась к концу 60-х годов в 2,6 раза [6]. На Европейском континенте в таких странах, как Португалия, Франция, Италия, Австрия, Румыния, Болгария самая высокая смертность от столбняка составляет от 1,0 до 3,3% на 100 тысяч населения, тогда как в других странах Европы она не превышает 1,0% [47].

Столбняк имеет преимущественно зональное распространение и чаще регистрируется в регионах с жарким и тропическим климатом [7, 8, 33, 34, 90, 141]. Развивающиеся страны, в разряд которых входит большинство государств африканского континента, отнесены в зону повышенной заболеваемости столбняком, где болезнь принимает эндемичный характер [8, 9, 33, 73, 138, 32]. Столбняк в странах Африки до настоящего времени является одной из десяти главных причин смертности населения, в том числе и детской. К этим странам относится и Мали. В чем причина? Проблема состоит в том, что в развивающихся странах, в частности, в Мали нет возможности прививать все население, 80% которого занимается сельским хозяйством и животноводством. Это животноводы и овощеводы, механизаторы и рабочие лесозаготовительной промышленности, строители и многие профгруппы сферы коммунального обслуживания, то есть люди, имеющие тесный контакт с почвой. Наряду с военнослужащими этот контингент можно отнести к так называемой ' группе риска по отношению к столбнячной инфекции.

Отсутствие плановой иммунизации населения связано с тем, что в стране нет местного производства профилактических препаратов и их приходится закупать за границей. Именно поэтому вакцинируют только детей, беременных женщин и солдат. Но даже среди этого контингента смертность от столбняка остается высокой, так как за качеством вакцинации этих людей наблюдений не ведется.

Особенно серьезную проблему представляет столбняк новорожденных. Несмотря на неполные данные, до настоящего времени эта форма болезни составляет 40−60% от общего числа заболевших столбняком, а умирает во всех развивающихся странах ежегодно более 1 миллиона детей [7, 148, 149] и в Мали, по данным ВОЗ [147], имеется тенденция к увеличению числа умерших. В столице Мали Бамако 60% смертности детей до одного года обусловлено пятью основными инфекционными заболеваниями, где наряду с корью, острыми кишечными инфекциями, малярией и пневмонией важную роль играет столбняк. Улучшение ситуации по столбняку возможно лишь путем создания активного напряженного иммунитета у населения через вакцинации, ревакцинации и путем последующего наблюдения за уровнем коллективного иммунитета, особенно среди контингента, составляющего группу риска.

В связи с вышеизложенным проблема столбняка для Мали является очень актуальной, а выбор диссертационной темы «Получение и иммунохимическое исследование полимерной фракции столбнячного анатоксина (СА)» не был случайным.

Цель настоящих исследований заключалась в разработке технологии получения высокоочшценной полимерной фракции СА методом ступенчатой диафильтрации и изучении ее иммунохимических свойств, антигенной и иммуногенной активности.

По ходу достижения цели последовательно решались следующие задачи:

Получение производственных серий высокоочшценной полимерной фракции СА методом ступенчатой диафильтрации на половолоконных ультрафильтрационных модулях (ВПУ) МВ-100 и мембранах ХМ-300.

2.Исследование фракционного состава производственных серий СА методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

3.Выделение и очистка полимерной фракции СА методами колоночной гель-хроматографии;

4.Изучение иммунохимических свойств полимерной фракции СА.

5.Оценка иммунизирующей активности сорбированной высокоочи-щенной полимерной фракции СА в опытах на мышах.

6.Изучение иммуногенности полимерной фракции СА в опытах ревакцинации на морских свинках.

7.Исследование возможности использования полимерной фракции СА как сенситина при изготовлении эритроцитарного и латексного диаг-ностикумов.

Научная новизна. Впервые в условиях производства разработана технология очистки некондиционных серий СА с использованием ступенчатой диафильтрации, позволяющая получить на основе полимерного компонента коммерческие серии с нагрузкой более 1000 единиц связывания (ЕС)/мг белкового азота, т. е. удовлетворяющие критериям Фармакопейной статьи РФ и Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ).

Практическая значимость. Разработанная технология использования ступенчатой мембранной диафильтрации для доочистки СА внедрена на предприятии АО «Биомед» им. И. И. Мечникова. Производственные серии препаратов, дополнительно очищенные по указанной технологии, прошли комиссионную проверку в Государственном институте стандартизации и контроля (ГИСК) им. Л. А. Тарасевича. Подтверждена их высокая удельная специфическая и протективная активность. ГИСК им. Л .А. Тарасевича согласовал дополнение к регламенту производства СА, предусматривающее возможность использования ступенчатой мембранной диафильтрации для доочистки препаратов.

ВЫВОДЫ.

1.Разработан метод ступенчатой диафильтрации для производственной очистки СА. Отработаны режимы и условия процесса диафильтра-ции: скорости потока, кратность мембранного диализа, состав буферных растворов.

2. Технология дополнительной очистки препарата С, А с использованием диафильтрации на мембранах МВ-100 и ХМ-300 позволяет вернуть производству формольный дериват олигомера с нагрузкой более 1000 ЕС/мг белкового азота, т. е. удовлетворяющей критериям Фармста-тьи РФ.

3. Полимерная фракция С, А может быть очищена до удельной специфической активности более 1000 ЕС/мг белкового азота, даже если в работу взят материал с исходными нагрузками в пределах 400−500 ЕС/мг белкового азота.

4. Иммунизирующая активность вакцинных препаратов (МИЕ на 1 ЕС), составленных преимущественно из полимерной фракции, оказалась не ниже протективной активности препаратов, приготовленных из СА, полученных традиционным способом.

5. В процессе диафильтрации С, А разработан полный цикл ступеней доочистки (мембранной «рехроматографии»), позволяющей сократить потери с 25−40% до 5%.

6. Полимерная фракция СА может быть использована в качестве сенситина при получении эритроцитарных и латексных диагностикумов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Профилактика столбняка сохраняет свою актуальность во всем мире. В ряде стран, в том числе в России, заболеваемость столбняком снизилась, благодаря плановой иммунизации населения, в то время как в развивающихся странах, куда относится большинство государств Африканского континента, вакцинация против столбняка проводится выборочно. Как известно, столбняк чаще всего регистрируется в регионах с жарким и тропическим климатом. В странах Африки до настоящего времени это заболевание является одной из главных причин смертности населения, в том числе и детского. Эпидемический процесс при этом характеризуется рядом особенностей. В тропиках среди многочисленных факторов, способствующих распространению столбняка, следует отметить прежде всего поч-венно-климатические и санитарно-гигиенические. Более разнообразными являются пути и факторы передачи возбудителя. Важно также и то, что 80% населения этих стран заняты сельским хозяйством и животноводством. Неблагоприятно сказываются на заболеваемости столбняком и низкий экономический уровень стран третьего мира, войны, разруха, слабо развитая сеть медицинских учреждений.

В связи с этим, только массовая активная иммунизация против столбняка может быть единственным целесообразным и надежным способом снижения уровня заболеваемости.

Изготовляемые в России и широко используемые в практике здравоохранения СА, в том числе являющиеся компонентом комбинированных АКДСи АДС-вакцин, обеспечивают высокую эффективность иммунизации.

Постоянная потребность в профилактических препаратах тем не менее не снижает требований к их качеству, которые регламентируются критериями ВФС и ВОЗ.

Действующие производственные регламенты не всегда позволяют получать СА, удовлетворяющие этим требованиям. Часть полученных с использованием традиционных технологий препаратов требуют дополнительной очистки, которая позволяет снять проблему, связанную с развитием аллергических реакций при вакцинациях, что, как известно, ассоциируется в массовом сознании с плохим качеством прививочных препаратов [125].

Выпускаемые в настоящее время СА существенно различаются по иммуногенным свойствам и степени очистки. При изучении их фракционного состава было показано, что они неоднороднывысокомолекулярные компоненты иммуногенны, а низкомолекулярные белки — неактивны [65].

Известно также и то, что в производственных условиях возможно формирование С, А в полимерной форме с молекулярной массой более 300 кД [107]. Такой препарат рассматривается как высокоиммуногенный и более эффективный для ревакцинации при использовании жидкой (неадсорбированной) лекарственной формы [75, 107].

Учитывая изложенное, настоящая работа, была посвящена разработке технологии получения высокоочшценной полимерной фракции СА методом ступенчатой диафильтрации и изучению ее антигенной и иммуно-генной активности.

В последние десятилетия метод диафильтрации зарекомендовал себя как надежный, эффективный и экономичный способ молекулярного разделения и очистки широкого спектра биополимеров. Разработка новых фильтрующих материалов с контролируемым размером пор и увеличение производительности рабочих модулей позволили использовать диафильтрацию (наряду с гельи ионнообменной хроматографией, переосаждением, градиентным сепарированием и т. д.), как один из универсальных методов получения высокоочищенных биопрепаратов в условиях производства.

В результате проведенных исследований впервые на базе предприятия АО «Биомед» им. И. И. Мечникова разработана технология очистки некондиционных серий препарата СА с использованием ступенчатой диа-фильтрации на мембранах МВ-100 и ХМ-300, позволяющая получить коммерческие серии с нагрузкой более 1000 ЕС/мг белкового азота, т. е. удовлетворяющие критериям Фармакопейной статьи РФ и ВОЗ.

Используя метод одноступенчатой мембранной диафильтрации для очистки препаратов СА, удалось в 6 сериях повысить нагрузку в концентратах МВ-100 и вернуть производству суммарно 41 млн. ЕС коммерческого препарата.

Последовательная диафильтрация с использованием половолоконно-го модуля МВ-100 и мембраны ХМ-300 позволила в 6 сериях препарата поднять удельную специфическую активность до значений, удовлетворяющих требованиям ВОЗ и получить в концентрате ХМ-300 (по данным хроматографического анализа) практически гомогенный препарат высокомолекулярного полимера СА.

В процессе диафильтрации СА разработан полный цикл ступенчатой доочистки (мембранной «рехроматографии»), позволяющий сократить потери антигенноактивного материала с 25−40% до 5%.

Результаты оценки иммуногенной активности препаратов (МИЕ на 1 ЕС), составленных преимущественно из полимерной фракции, показывают, что последняя не уступает по протективной активности стандартному препарату СА.

Многократная фильтрация концентрата МВ-100 препарата СА через колонки с гелями ТБК-ТОУОРЕАКЬ и БерЬаёех 0−200 позволила получить фракции I, II и III относительно однородные и имеющие молекулярные массы в 1200 кД, 300 кД и 150 кД соответственно. Фракции эти использованы нами в качестве сенситина при разработке диагностических препаратов.

Разработанная технология ступенчатой мембранной диафильтрации для доочистки СА внедрена на преприятии АО «Биомед» им. И. И. Мечникова. Производственные серии препаратов, дополнительно очищенные по указанной технологии, прошли комиссионную проверку в ГИСК им. Л. А. Тарасевича. Подтверждена их высокая удельная специфическая и про-тективная активность.

Полученные результаты позволяют считать, что наиболее технологичным и доступным для дополнительной очистки препаратов СА от неспецифических веществ является метод ступенчатой диафильтрации.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Э.М. Химические волокна. 1995. № 5. — С. 19−25.
  2. К.В., Мигалев В. А., Шульга O.E. и др. Теоретические и практические аспекты ликвидации столбняка на Украине. М., 1989.
  3. И.П., Воробьев A.A. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Медицина. 1962.
  4. О.В., Портер Д. Р. Международные и национальные аспекты современной эпидемиологии и микробиологии. М., 1975. — С. 123 131.
  5. В.Д., Соколова А. Ф. Активная иммунизация и профилактика поствакцинальных осложнений у детей. М., 1977. 191 с.
  6. П.Н., Румянцев С. Н. Эволюция клостридиозов. М., 1974. -38 с.
  7. .Д. Мировое распространение столбняка и его профилактика //Автореф. дис. докт. мед. наук -М., 1970. 44 с.
  8. .Д. Смертность от столбняка новорожденных в мире и ее приблизительная оценка //Современные проблемы специфической профилактики столбняка и дальнейшего снижения заболеваемости -М., Львов, 1975. С. 19−22.
  9. .Д. Столбняк. М&bdquo- 1982. С.6−33.
  10. И.В. Об иммунитете против столбняка у больных хроническими заболеваниями//Врач. дело. 1989. — № 5. -121 с.
  11. В.К. Гель-фильтрация и ионообменная хроматография в изучении и очистке бактериальных токсинов и анатоксинов //Автореф. Дис. докт. М. — 1974.
  12. Горфункель-Кошкина Д.М. и Воробьева Н. Д. Способ получения столбнячного анатоксина. //Микробиологии вакцин. Описание изобретения 03.09.76.
  13. В.К., Дюмаев K.M., Айзенштейн Э. М., Боршев А. П. Половоло-конные ультрафильтры как перспективные системы при разделении биологически активных веществ. //ВСБ. Медицинские технологии. Москва. -1994. С.48−53.
  14. М.В. Метод получения очищенного дифтерийного и столбнячного анатоксина //Автор.свидетельство № 22 924. НРБ. — 1975.
  15. М.В. с соавт. Новые половолоконные ультрафильтры в медицине. //Тез.докл. «Мембраны» 95.- М. Окт. 1995 г. -195 с.
  16. М.В. с соавт. Способ получения дифтерийного или столбнячного анатоксина//Авт. свидетельство № 915 856. 1976.
  17. М.В., Фиш Н.Г. Белковые токсины микробов //М., Медицина, 1980. 192 с.
  18. Ю.В. Патогенность как функция биомолекул //М., Медицина, 1985. 204 с.
  19. A.B. с соавт. Способ получения полимерной и олигомерной фракций столбнячного анатоксина //Авт. свидетельство № 2 065 765. -1996.
  20. Н.П. Фракционирование белков столбнячного анатоксина посредством фильтрации через гель сефадекс // Тез. докл. к итог, научн. конф. (Пермский НИИ вакцин и сывороток). Пермь. — 1967. -с.9−10.
  21. Н.П. Разработка и экспериментальное обоснование производства против анаэробных инфекций: Автореф. дис. д-ра мед. наук. -Пермь. -1971.
  22. М.С. Влияние вакцинации на мировое распротранение коклюша. // Актуальные вопросы эпидемиологии и иммунологии коклюша.-М., 1997.-С.5−16.
  23. А.И., Бабичев С. А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. //Санкт-Петербург, 1998. С.427−430.
  24. А.Л. Проблемы иммунизации.Сообщ.2. Международная практика иммунизации против дифтерии, коклюша и столбняка. //ЖМЭИ. -1968. № 4. — С.57−63.
  25. С.К., Лобанов A.B. Опыт расширенной программы ВОЗ по иммунизации против столбняка //Журн. Микробиол., эпидемиол. и иммун. 1985. -№ 11.-97 с.
  26. K.M. Лечение больных столбняком. М., Медицина. — 1965.
  27. В.К. Молекулярные механизмы действия ботулинового и столбнячного нейротоксинов //Успехи современной биологии. -1981. -Т. 91. Вып.1. — С.99−113.
  28. П.М., Сухорукова К. Л., Финкель М. И. Специфическая профилактика инфекции у детей. Л., 1986. — С.21−24.
  29. М.А., Черткова P.A., Чеботарева С. В. и др. Опыт применения малых доз при плановой иммунизации детей -11 лет //ЖМЭИ. 1975.-М 5.-С.26−31.
  30. К.И. Эпидемиология и профилактика столбняка. М., 1960. -338 с.
  31. К.И., Кашинцева H.A., Петрова П. И. и др. Эффективность пассивной и активно-пассивной профилактики столбняка //Столбняк. Кишинев., 1967. С.47−52.
  32. К.И., Сергеева Т. И. Эпидемиология столбняка в мирное время в СССР и зарубежных странах //ЖМЭИ, 1959. № 2. — С.134−142.
  33. К.И., Сергеева Т. И. Эпидемиология столбняка в мирное время в СССР и зарубежных странах //Тез. докл. межинститутск. научн. конф. по проблеме «Анаэробы». М., 1956. — С.23−44.
  34. Методическое руководство по лабораторной оценке качества бактерийных и вирусных препаратов ГКИ им. Тарасевича / Под ред. Дзагурова С. Г. М. — 1972. — 228 с.
  35. E.H., Перцовская М. И. Микроорганизмы и самоочищение почв. М.: АМН СССР, 1954. — С.3−18.
  36. Н.Д. Наблюдения и исследования о травматическом столбняке //Международ. Клиника. СПБ. 1885.
  37. И.И., Соколовская Г. Г. К вопросу об источнике инфекции при столбняке. //Столбняк. Кишинев. — 1967. — С. 105−108.
  38. И.Н., Соколовская Г. Г. Эпидемиологические особенности столбняка на Украине в условиях массовой иммунизации //Современные проблемы специфической профилактики столбняка и дальнейшего снижения заболеваемости, М., Львов, 1975. — С.9−12.
  39. В.М. Справочник серологических реакций. Кишинев. -1977. — 206 с.
  40. Николов 3. Тетанусьт в НРБ през периода 1963−1974 г. Специфичната профилактика и заболеваниата от тетанус //Современа мед. 1976. -т.27, № 11. — С.42−45.
  41. Н.В., Ивченко О. И., Лисицина Т. С. и др. Актуальные проблемы прикладной иммунологии, биотехнологии и производства бактерийных препаратов. 1988. — С.47−48.
  42. М.А. Очистка столбнячного токсина и анатоксина методом ионообменной хроматографии//ЖГЭМИ. -1974. 18(3). — С.342−346.
  43. О.И. Опыт организации массовой активной иммунизации против столбняка //ЖМЭИ. 1968. — № 3. — С.144−147.
  44. Л.А. Хроматография белков и нуклеиновых кислот. -М.:Наука. 1985. — 536 с.
  45. А.Л. Эпидемиологическое обоснование путей совершенствования профилактики столбняка в эндемичном по этой инфекции Краснодарском крае //Дис. канд. мед. наук. М., 1983. -С.5−35.
  46. Н.П. с соавт. Улучшение показателей качества столбнячного анатоксина с помощью мембранного разделения //ЖМЭИ. -1993. -№ 6. -С.78−79.
  47. Н.П., Плющ Л. И., Селезнева В. П. Актуальные проблемы прикладной иммунологии, биотехнологии и производства бактерийных препаратов //Тез. докл. научн. Конф. Пермского НИИ вакцин и сывороток. Пермь. — октябрь 1988. — С.42−43.
  48. Н.И. Начало общей военно-полевой хирургии. Дрезден., 1986.-№ 2.-337 с.
  49. .Я. Сравнительная характеристика КД, КДС и сорбированной КДС-вакцины при иммунизации детей //ЖМЭИ. -1963. № 12. -С. 13−15.
  50. В.Ф., Ярошенко М. Н., Пархоменко Т. О. и др. Связь между уровнем заболеваемости столбняком и свойствами почв //Ж. Врач. дело. 1982. — № 11. -108 с.
  51. Руководство по вакцинному и сывороточному делу. /Под ред. Бурга-соваП.Н.-М.- 1978.- 121 с.
  52. Руководство по вакцинному и сывороточному делу. /Под ред. Бурга-соваП.Н. М., 1978. 150 с.
  53. Руководство по вакцинному и сывороточному делу. /Под ред. Бурга-соваПЛ. М., 1978.- 129 с.
  54. Руководство по вакцинному и сывороточному делу. /Под ред. Бурга-соваПЛ. М., 1978. С.103−175.
  55. В.Ф., Резепов Ф. Ф., Каргина Т.М и др. Оценка качества столбнячных анатоксинов методом гель-фильтрации //Матер, научн. конф. «Актуальные вопросы медицинской биотехнологии». Часть 1. -Томск.-1991,-С.114−115.
  56. В.Ф., Каргина Т. М., Резепов Ф. Ф. и др. Оценка качества столбнячных анатоксинов методом гель-фильтрации //ЖМЭИ. 1992. — № 2. — С.38−40.
  57. И.И., Димова Н. В., Котрелева Н. В. и др. Сравнительное изучение реактогенности коклюшно-дифтерийной, коклюшно-дифте-рийно-столбнячной и адсорбированной коклюшно-дифтерийно-столбнячной вакцины //ЖМЭИ. -1966. -№ 2. С.22−26.
  58. В.П., Перелыгина О. В. Анатоксины столбнячный и дифтерийный //В сб. «Актуальны проблемы создания и применения иммунобиологических препаратов для диагностики и профилактики инфекционных болезней» 1993. Т. 1. Пермь. — 1993. — С. 142−157.
  59. В.И. Иммунохимическая характеристика столбнячных токсинов и анатоксинов, полученных от разных штаммов: Автореф. дис. канд. мед. наук. Ставрополь. — 1970.
  60. М.И. Почва театра военных действий -1941−44 гг. как хранилище патогенных микроорганизмов из рода клостридий //Труды
  61. Молд. НИИ ЭМГ «Патогенные клостридии». -Кишинев: Штиин-ца, 1961. № 5. — С.15−21.
  62. М.И., Волкова Д. А., Соболева К. П., Тимченко JI.A. Токсикоз почвы как один из факторов, определяющих распространение Cl.tetani в природе //Столбняк. Кишинев., 1967. — С. 113−116.
  63. Н.Т. Противокорьевый иммунитет и некоторые механизмы его формирования. //Автореф. дис. докт. М., 1981.
  64. И.М., Углева А. И., Рождественская В. О. О зонах флокуля-ции столбнячных антигенов //ЖМЭИ. 1970. — № 11. — С.86−88.
  65. .Л. Инфекционные и паразитарные болезни человека. -М.: Медицинская газета. 1994. — С.465−466.
  66. Л.А., Ковтунович Т. П. Столбняк. //Киев: Здоровье. 1968. -С.3−11.
  67. А.Т., Брагинская В. Л., Зыбина Т. М. и др. Применение АДС -анатоксина с уменьшенным содержанием антигенов для иммунизации детей, имеющих противопоказания к введению АКДС-вакцин. //ЖМЭИ. -1977. № 7. — С.126−131.
  68. С.А., Букова В. Е., Стовбун С. Ф. Столбняк (эпидемиология, вакцинация, профилактика, контроль иммунитета). Кишинев: Шти-инца. 1986. — 199 с.
  69. Э.Н. Практическая эпидемиология. Кишинев: Штиинца. -1981.-С.З-60.
  70. Э.Е., Триере И. И., Чередеев А. Н. и др. Оценка иммунного статуса у привитых против зоонозного кожного лейшманиоза //Ж. Микробиология. 1986. — № 6. -С. 104−105.
  71. A.A., Тымчаковская И. М. Методические рекомендации МЗ РСФСР по совершенствованию мероприятий при профилактике столбняка. М., 1981. — 27 с.
  72. Agonia A.O., Jaiycoba В.О., Tumwashe O.Z. Tetanus in lagos. A review of 228 adult Nigerian patiento //J. Trop. Med. Hyg. 1973. — V.76, № 7. -P.171−174.
  73. Barr M., Sachs A. Reporton the investigation in to the prevention of tetanus in the british army //The war office, London, S. W. 1955. — October. -364 p.
  74. Bezzini B. Structure, composition and principles of detoxification of Diphtheria and Tetanus toxin //В книге: Proceedings of an informal consultation on the WHO requirements of Diphtheria, Tetanus, Pertussis and combined vaccines. -1991. P.3−6.
  75. Bizzini B. Properties of the binding to gangliosides and synaptosomes of a fragment of the tetanus toxin molecule //Toxicon Suppl. 1978. — V.l. -P.961−969.
  76. Bizzini B. The chemistry of tetanus toxin. /Лп: Veronesi R, ed. Tetanus: Important New Concepts. Amsterdam: Excerpta Medica. 1981. — P.8−17.
  77. Bizzini B. The specifity and action of animal, bacterial plant toxins. Receptor and recognetion //Ser. B. V. l, № 9. — L: Chapman and Hall. -1976.- 177 p.
  78. Bizzini В., Blass J., Raynaud M. Etude sur le mecanisme de la detoxification des toxines proteiques par le formol. II. Fixation quantitative du formol l4C //Ann. Inst. Pasteur (Paris). 1969. — V. 116. — P.501−521.
  79. Bizzini B. Tetanus //In: Gennanier R. ed. Bacterial Vaccines. Orlando: Academic Press. 1984. — P.37−68.
  80. Bizzini B., Turpin A., Raynaud M. Pouvoir immunogene d’anatoxines tetaniques de divers degre de purete et de polymerisation //Ann. Inst. Pasteur (Paris). -1971. V.120. — P.791−799.
  81. Chin W., Rankert D., Cumming M.A., Robinson J.P. Characterization of crystalline filtrate tetanus toxin //J. Ultrastruct. Res. 1982. — V. 79., № 3. -P.285−293.
  82. Cole L.B. Tetanus immunization //Practconner. 1951. — V.157., № 8. -P.638−644.
  83. DiMari S.J., Cumming M.A., Hash J.H., Robinson J.P. Purification of tetanus toxin and its peptide components by preparative Polyacrylamide gel electrophoresis //Arch. Biochem. Biophys. 1982. — V.214, № 1. — P.342−353.
  84. DiMari S.J., Hash J.H., Robinson J.P. Characterization of tetanus toxin and toxin components by amino terminal analyses //Arch. Biochem. Biophys. 1982. — V.214, № 1. — P.354−365.
  85. Donikian R. An example of industrial purification of diphtheria and tetanus toxoids // In book: Proceedings of an informal consultation on the WHO requirements of Diphtheria, Tetanus, Pertussis and combined vaccines. -1991. -P.26−31.
  86. Edsall G. Immunological principles in active immunisation against tetanus //Principles on tetanus. Bern. — 1967. — P.225−236.
  87. Fariweather N.F., Lyness V.A., Pickard D.J., Allen G., Thomson R.O. Cloning, nucleoside sequencing and expression of tetanus toxin fragment C inEcherichiacoli //J. Bacteriol. 1986. — V.165, № i.. p.21−27.
  88. Forge F.M., Young L.S., Bennett J.V. Tetanus in the United states (19 651 966): Epidemiological and clinical features //N.Engl. J. Med. 1969. -Vol.280., № 11. — P.569−574.
  89. Furste W. Tetanus toxoid immunisation in Ohio //Ohio St. Med. J. 1974. -V. 60. -№l.-P.56−57.
  90. Gentilini M. Duflo B., Corlon C. Medicine Tropicale le Tetanos //Med.Trop.Paris 1972. — V.32. -P.241.
  91. Goretzki K., Habermann E. Enzymatic hydrolysis of tetanus toxin by intrinsic and extrinsic proteases. Characterization of the fragments by monoclonal antibodies //Med. Microbiol. Immunol. 1985. — V.174, № 3. -P.139−150.
  92. Gottlied S., Martin M., Mclaughlin F.X. et al. Long-term immunity to diphtheria and tetanus: a mathematical model //Principles on tetanus. -Bern, Stuttgart, 1967. P.307−315.
  93. Gwee A.L., Nadarazan I. A survey of tetanus in Singapore // Singapore Med. J. 1960. — V.I., № 4. — P.164−166.
  94. E., Dimpfel W., Neale J.H. 1251-Labelled tetanus toxin as a neuronal marker in tissue cultures derived from embrionic CNS //Naunyn Schmiedebergs Arch. Pharmacol. 1975. — V.290., № 2−3. — P.329−333.
  95. Habermann E., Goretzki K. Monoclonal antibodies against bacteria //L.: Acad. Press. 1985. — V. l -191 p.
  96. Habig W.H. Purification of diphtheria and tetanus toxoids //In book: Proceedings of an informal consultation on the WHO requirements of Diphtheria, Tetanus, Pertussis and combined vaccines. 1991. P. 21−25.
  97. Helting T.B., Habig W.H. Bacterial protein toxins //L.: Acad. Press. -1984.-413 p.
  98. T.B., Parschat S., Engelhardt H. //J. Biol. chem. 1979. — V.254, № 18.-P. 10 728.
  99. Helting T.B., Ronneberger H, Vollerthun R., Neubauer V. Toxicity of pa-pain-digested tetanus toxin. Pathological effect of fracment B in the absence of spastic paralysis // J. Biol. chem. 1978. — V.253, № 1. — P. 125 129.
  100. Helting T.B., Zwisler O. Structure of tetanus toxin. I. Breakdown of the toxin molecule and discrimination between polypeptide fragments // J. Biol. chem. 1977. — V.252, № 1. — P.194−198.
  101. Henderson R.H. The challenge of E.P.I. //World. Health. Feb. 1979. -March. — P.32−35.
  102. Heyningen S. Tetenus toxin //In: Pharmac. Ther., Gr. Br. 1980. V.ll. -P. 141−157.
  103. Kenimer J.G., Habig W.H., Hardegree M.C. Monoclonal antibodies as probes of tetanus toxin structure and function //Infect, and immunity. -1983. V.42, № 3. — P.942−948.
  104. C., Spero L., Schantz E. //Infect, and Immun. 1970. — V.l. -423 p.
  105. Lazarovici P., Tayot J.L., Yavin E. Affinity chromatographia purification and characterization of two iodinated tetanus toxin fractions exhibiting different binding properties //Toxicon. 1984. — V.22, № 3. — P.401−413.
  106. Lazarovici P., Yavin E. Tetanus toxin interaction with human erytrocytes. I. Properties of polysialoganglioside association with the cell surface. II.
  107. Kinetic properties of toxin association and evidence for a damglioside-toxin macromolecular complex formation //Biochim. Biophis. Acta. 1985. — V.812, № 2. — P.523−542.
  108. Lin C.S., Habig W.H., Hardegree M.C. Helting T.B., Zwister O. Antibodies against the light chain of tetanus toxin in human sera //Infect. Immun. -1985. V.49, № 1. -P.lll-115.
  109. Lowry O. at al. Protein measurement with the Folin phenol reagent. //J.Biol.Chem. -1951. V.193, № 1. -P.265−275.
  110. Mamtani R., Malhotra P., Gupta P. S., Jain B.K. A comparative study of urban and rural tetanus in adults //Int. J. Epid. 1978. — V.7., № 3. — P. 185 188.
  111. Masar J. Analyza vyskytu tetanu na slovensku (II cast: 1956−1964) //Csl. Epidem. 1966. — V.15, № 3. — P. 147−159.
  112. Matsuda M., Yoneda M. Reconstitution of tetanus neurotoxin from two antigenically active polypeptide fragments //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1976. — V.68, № 3. — P.668−674.
  113. Matsuda M., Yoneda M. Antigenic substructure of tetanus neurotoxin //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1977. — V.77, № 1. — P.268−274.
  114. Matsuda M., Yoneda M. Isolation and purification of two antigenically active, «complementary» polypeptide fragments of tetanus neurotoxin //Infect, and immunity. 1975. — V.12, № 5. — P. 1141−1153.
  115. Neubauer V., Helting T.B. Structure of tetanus toxin: The arrangement of papain digestion products within the hearry chain-light chain framework of extracellular toxin //Biochim. Biophys. Acta. 1981. — V.668, № 1. -P.141−148.
  116. Otzutsumi K., Srigimoto N., Matsuda M. Rapid, simplified method for production and purification of tetanus toxin //Appl. Environ. Microbiol. -1985. V.49, № 4. — P.939−943.
  117. Patel J.C., Menta B.C. Tetanus: study of 8697 cases //Compte rendus de la quatrieme conference internationale sur le tetanus. Dakar, Senegal, 6−12 april, 1975. Lyon: Fondation Mervieux, 1975. — V.l. — P.233−241.
  118. Peltola H., Heinonen O.P. Frequency of true adverse reactions to measles-mumps-rubella vaccine. A double-blind placebo-controlled trial in twins //Lancet. 1986. — V. l, № 8487. — P.939−942.
  119. Ramon G. La vaccination antidiphtherique et la vaccination antitetanique au moyen des anatoxines specifiques et les vaccinations dans la pratique //Rev.d'Immun. 1935. — V. l, № 1. — P.37−73.
  120. Ramon G. Sur la production desantitoxines. CTAcorf Sei. 1925.- V.181. -P.157−159.
  121. Rapini M., Amstutz Ph. Epidemiologie et prophylaxie du tetanus //Rev. Hyg. Med. Soc. 1963. — V. ll, № 1. -P.33−45.
  122. Relyveld E. H, Henocq E. Bizzini B. Studies on untoward reactions to diphtheria and tetanus toxoids //Dev Biol Stand. 1979. — V.43. — P.33−37.
  123. Relyveld E.H. A history of toxoids. «Vaccinia, vaccination, vaccinology», International meeting on the history of vaccinology. 1995. — Paris, France.- P. 95−105.
  124. Relyveld E.H. Current developments in production and testing of tetanus and diphtheria vaccines. In: Mizrahi A. Henman T. Klungberg MA. Kohn A. eds. New Developments with Human and Veterinary Vaccines. New York: Alan R Liss. 1980. — P.51−76.
  125. Roa M., Boquet P. Interaction of tetanus toxin with lipid vesicles at low pH. Protection of specific polypeptides against proteolysis //J. Biol. chem.- 1985. V.260, № 11. — P.6827−6835.
  126. J.P., Chem H., Hash J.H., Puett D. //Med. microbiol. and immunol- 1985.-V. 174, № 3.-139 p.
  127. Robinson J.P., Holladay L.A., Hash J.H., Puett D. Conformational and molecular weight studies of tetanus toxin and its major peptides //J. Biol, chem. 1982. — V.257, № 1. — P.407−411.
  128. Robinson J.P., Holladay L.A., Picklesimer J.B., Puett D. Tetanus toxin conformation //Mol. Cell. Biochem. 1974. — V.5, № 3. — P. 147−151.
  129. Robinson J.P., Picklesimer J.B., Puett D. Tetanus toxin. The effect of chemical modifications on toxicity, immunogenicity and conformation //J. Biol. chem. 1975. — V.250, № 18. — P.7435−7442.
  130. Rose E. Der Starrkrampf bein Menschen. Stuttgart, 1973. 24 s.
  131. Sato H., Ito A., Yamakawa Y., Murata R. Toxin-neutralizing effect of antibody against subtilisin-digested tetanus toxin //Infect. Immun. 1979. -V.24, № 3. -P.958−961.
  132. Scheibel I., Benzon M.W. Duration of immunity after tetanus immunization. -1967. P.245−251.
  133. Schmitt A., Dreyer F., John C. At least three sequential steps are involved in the tetanus toxin induced block of neuromuscular transmission //Naunyno-schmiedeberg Arch. Pharmacol. — 1981. — V.317, № 4. — P.326−330.
  134. Tasman A., Bangma P.J., Smith L. Immunological reactivity of tuberculosis patients // Antonie Van Leenwenhoek, 1961. V.27. — P.367−385.
  135. Tomaszunas S. Urgent problem of south-East Asia: Wideseale immunisation //Bui. World Health org. 1979. — V.33, № 10. — P.486−490.
  136. Urbanyi B., Mietke G., Gonzales J. Spillner G., Schlosser V. Tetanus bei chronisch arterieller Verschlusskrankheit und ischamischen ulzerationen //Med. Welt. 1982. — Bd.33, № 38. — S. 1295−1296.
  137. Van Heyningen S. Tetanus toxin //Pharmacol, and ther. 1980. — V. ll, № 1. — P.141−157.
  138. Veronesi R., Correia A., Alterio D. Single-dose immunization against tetanus. Promising results in human trials //Rev. Inst. Med. Trop. S.Paulo. -1975.-V.12.-P.46−54.
  139. Volk W.A., Bizzini B., Snayder R.M., Bernhard E., Wagner R.R. Neutralization of tetanus toxin by elistinct monoclonal antibodies binding to multiple epitopes on the toxin molecule //Infect. Immun. 1984. — V.45, № 3. -P.604−609.
  140. Ward W., Britton P., Van Heyningen S. The hydrophobicities of cholera toxin, tetanus toxin and their components //Biochem. J. 1981. — V.199, № 2. — 457 p.
  141. Wellhoner N.H. Tetanus neurotoxin //Rev. Physiol. Biochem. Pharmacol.1982. -V.93. P. 1−68.
  142. WHO. Manual for the production and control of vaccines: diphtheria toxoid. (BLG) UNDP (77.1 Rev 1).
  143. WHO. Manual for the production and control of vaccines: tetanus toxoid. (BLG/UND P/77.2 Rev 1).
  144. WHO. Neonatal tetanus control //Wkly. Epid. Rec. 1988. — № 3. — P. 1113.
  145. WHO. Neonatal tetanus mortality survey in Malasia //Wkly. Epid. Rec.1983. № 42. — P.326−327.
  146. WHO. Expanded program on immunization tetanus surveillance //Wkly. Epid. Rec. 1988. — № 34. — P.258−259.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!