Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Получение, строение и свойства низкомолекулярных сульфатированных аминополисахаридов

Диссертация: Получение, строение и свойства низкомолекулярных сульфатированных аминополисахаридов
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Впервые показана возможность получения низкомолекулярных препаратов сульфата хитозана двумя способами: ферментативным гидролизом высокомолекулярного полисахарида и сульфатированием низкомолекулярного хитозана. Определены параметры гидролиза (рН и температурный оптиму-мы) наиболее эффективным ферментным комплексом из S. kurssanovii, в том числе в иммобилизованном состоянии, позволяющие в 4−5 раза… Читать ещё >

Получение, строение и свойства низкомолекулярных сульфатированных аминополисахаридов (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • 1. Литературный обзор
    • 1. 1. Химическое строение и биологические свойства полисахаридов и их производных
      • 1. 1. 1. Химическое строение и биологические свойства гепарина
      • 1. 1. 2. Способы получения и биологические свойства гепариноидов
      • 1. 1. 3. Способы получения и биологическая активность производных полисахаридов хитина и хитозана
    • 1. 2. Ферментативный гидролиз полисахаридов
  • 2. Разработка условий получения низкомолекулярных сульфатиро-ванных аминополисахаридов и исследование их строения и свойств
    • 2. 1. Ферментативный гидролиз сульфата хитозана и гепарина
      • 2. 1. 1. Характеристика исходных полисахаридов, ферментных препаратов и методов оценки протекания ферментативного гидролиза
      • 2. 1. 2. Результаты скрининговых исследований ферментативного гидролиза сульфата хитозана
      • 2. 1. 3. Ферментативный гидролиз сульфата хитозана ферментным комплексом из Streptomyces kurssanovi
      • 2. 1. 4. Ферментативный гидролиз гепарина ферментным комплексом из Streptomyces kurssanovi
      • 2. 1. 5. Ферментативный гидролиз полисахаридов с использованием ферментного комплекса из Streptomyces kurssanovi
    • 2. 2. Сульфатирование низкомолекулярных образцов хитозана
    • 2. 3. Исследование антикоагулянтной активности препаратов сульфата хитозана и гепарина
  • 3. Методический раздел
    • 3. 1. Исходные материалы и химические реагенты
    • 3. 2. Методы синтеза
    • 3. 3. Методы анализа
  • Выводы

Биополимеры — хитин, хитозан, а также некоторые их эфиры и соли широко применяются в медицинской, фармацевтической, косметической, пищевой отраслях промышленности. Это связано с биологической активностью данных полимеров, их биосовместимостью и биоразрушаемостъю, иммуномо-дулирующим, противомикробным, фунгистатическим, противоопухолевым, радиозащитным, гемостатическим действием и низкой токсичностью. Особый интерес представляют сульфатированные производные хитозана (СХ) как наиболее близкие структурные аналоги природного антикоагулянта крови гепарина (Г), дефицит и высокая стоимость которого стимулирует поиск и синтез его заменителей.

В последнее время большое внимание уделяется исследованию и созданию лекарственных форм на основе низкомолекулярных гепаринов (молекулярная масса 3−6 кД) и других мукополисахаридов, поскольку такие препараты обладают лучшими фармакокинетическими свойствами и меньшей токсичностью.

Ферментативный гидролиз — это мягкий и эффективный способ снижения молекулярной массы полимеров. Для гидролиза гепарина обычно используют гепариназы, но высокая стоимость и отсутствие гепариназ на отечественном рынке обусловливают необходимость поиска других более доступных ферментов, пригодных для получения низкомолекулярных гепарина и гепари-ноидов. Такими ферментами могут быть папаин и лизоцим, а также ферментные препараты целловиридин и Streptomyces kurssanovii, которые с успехом используются для снижения молекулярной массы хитина и хитозана. Принципиальная возможность ферментативного гидролиза сульфата хитозана и гепарина указанными ферментами обусловлена отсутствием у них узкой субстратной специфичности.

В разработке проблемы создания низкомолекулярных форм гепарина ведущее положение занимают американские (R. Linhardt, U. Desai), итальянские (В. Casu, G. Torn), французские (A. Frydman) и японские (S. Hirano) ученые. Российскими учеными В. Макаровым (ГНЦ РАМН), А. Гамзазаде (ИНЭ-ОС РАН) внесен существенный вклад в исследования, направленные на создание эффективных заменителей гепарина. Данная диссертация является продолжением проведенных ранее на кафедре ТХВ МГТУ совместно с ГНЦ исследований и первой из работ, посвященной получению низкомолекулярных форм сульфата хитозана.

Работа выполнена в соответствии с основными направлениями научных исследований кафедры технологии химических волокон МГТУ и лаборатории Центра «Биоинженерия» РАН при финансовой поддержке РФФИ (код проекта 02−04−49 850), ФЦНТП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники гражданского назначения» и грантом молодых ученых МГТУ.

Целью работы являлось исследование возможности получения низкомолекулярных сульфатированных аминополисахаридов — сульфата хитозана и гепарина, а также изучение строения и биологических свойств полученных препаратов. Для достижения поставленной цели было необходимо:

— изучить возможность получения низкомолекулярных сульфатов хитозана и гепарина с использованием метода ферментативного гидролиза неспецифическими доступными ферментами и ферментными препаратами;

— осуществить выбор наиболее эффективного ферментного препарата и оптимальных условий его действия в нативном и иммобилизованном состоянии;

— провести сульфатирование низкомолекулярных хитозанов, полученных разными способами;

— охарактеризовать биологическую активность низкомолекулярных образцов сульфата хитозана и гепарина, полученных различными методами. Научная новизна работы.

Установлены закономерности ферментативного гидролиза сульфатированных аминополисахаридов — сульфата хитозана и гепарина неспецифическим ферментным комплексом (ФК) из Streptomyces kurssanovii, в том числе в иммобилизованном состоянии, главными из которых являются следующие:

— ферментативный гидролиз полисахаридов наиболее эффективным ферментным комплексом из Streptomyces kurssanovii протекает преимущественно по эндомеханизму;

— сульфат хитозана как более специфический субстрат, содержащий ио-ногенные группы основного и кислотного типа, гидролизуется с большей скоростью, чем гепарин, содержащий лишь кислотные группы;

— иммобилизованный ферментный комплекс по эффективности не уступает нативному, что может быть связано с фиксацией на носителе в предложенных условиях наиболее активных компонентов ферментного комплекса и минимальным изменением конформации активного центра.

При исследовании сульфатирования низкомолекулярных хитозанов показано, что низкомолекулярный хитозан, полученный ферментативным гидролизом, протекающим, главным образом, в аморфных областях, обладает наиболее упорядоченной надмолекулярной структурой и наименьшей реакционной способностью.

Впервые показана общая для гепарина и сульфата хитозана закономерность преимущественного проявления анти Ха активности с понижением молекулярной массы препаратов.

Практическая значимость работы.

Предложены условия и разработан лабораторный регламент получения низкомолекулярных препаратов гепарина с молекулярной массой 3−6 кД с использованием доступного и дешевого ферментного комплекса из Streptomyces kurssanovii. Полученные препараты проявляют выраженную анти Ха активность, и имеют соотношение анти Ха и антитром биновой активности на уровне коммерческих образцов низкомолекулярного гепарина. Наработаны образцы низкомолекулярного гепарина и сульфата хитозана, необходимые для проведения исследований в тестах in vivo, в том числе в композициях и в виде микрокапсулированных форм.

Объем и структура диссертации.

Диссертация состоит из введения, литературного обзора, раздела с обсуждением экспериментальных результатов, методической части, выводов, списка литературы и приложения. Работа изложена на 130 страницах машинописного текста, содержит 20 таблиц и 22 рисунка, библиографию из 145 наименований.

выводы.

С целью разработки способа получения низкомолекулярных препаратов гепарина и сульфата хитозана, потенциально обладающих улучшенными фар-макокинетическими характеристиками, проведено исследование закономерностей ферментативного гидролиза полисахаридов доступными неспецифическими ферментными препаратами, а также закономерностей сульфатирования низкомолекулярных хитозанов, полученных разными способами.

1. Впервые показана возможность получения низкомолекулярных препаратов сульфата хитозана двумя способами: ферментативным гидролизом высокомолекулярного полисахарида и сульфатированием низкомолекулярного хитозана. Определены параметры гидролиза (рН и температурный оптиму-мы) наиболее эффективным ферментным комплексом из S. kurssanovii, в том числе в иммобилизованном состоянии, позволяющие в 4−5 раза снизить молекулярную массу и получить препараты с ММ 5−17 кД. Для получения сульфата хитозана с такой же ММ сульфатированием низкомолекулярного хитозана необходимым является использование аморфизованного исходного хитозана с ММ не более 10 кД.

2. Установлено, что гепарин в меньшей степени подвергается ферментативному гидролизу, однако даже 2-х кратное снижение его молекулярной массы обеспечивает получение с хорошим выходом образцов с ММ 3−6 кД, что находится на уровне коммерческих препаратов низкомолекулярного гепарина,.

3. Показано, что иммобилизация ферментного комплекса из S. kurssanovii приводит к повышению его устойчивости к температурным воздействиям и смещению температурного оптимума действия с 37 до 40−45°С. Иммобилизованный ферментный комплекс практически не уступает нативному в эффективности действия при гидролизе полисахаридов в оптимальных условиях.

4. Исследование строения полученных ферментативным гидролизом низкомолекулярных препаратов гепарина и СХ методами ИК и 13С ЯМР-спектроскопии показало идентичность химического строения гидролизованных и исходных полисахаридов, однако по данным элементного анализа при гидролизе протекает побочный процесс десульфатирования, более выраженный в случае СХ.

5. Исследование антикоагулянтной активности образцов гепарина показало, что с понижением молекулярной массы происходит закономерное увеличение их аХа активности и снижение антитромбиновой активности, и для образцов с ММ меньше 5 кД соотношение аХа: alia, равное 2−4, находится на уровне лучших коммерческих препаратов низкомолекулярного гепарина. Для сульфата хитозана подобная закономерность наблюдается при молекулярной массе ниже 10 кД,.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Е.П. Биологические функции и практическое использование хитина // Прикладная биохимия и микробиология.-1984.-Т.20, вып.2.-С.147−160.
  2. М., Баркер С. Углеводы живых тканей. Пер. с англ.- М: Мир. 1965.324 с.
  3. Химия биологически активных природных соединений (углевод-белковые комплексы, хромопротеиды, липиды, липопротеиды, обмен веществ) / Под ред. Преображенского Н. А., Евстигнеевой Р.П.-М: Химия. 1976.424 с.
  4. К.Н., Schwartz D.E. 214. Les substatuants des groupes amino de heparine // Helv.Chem.Acta.-1950.-V.33.-P.1651−1662.
  5. Lindahl U., Hook M., Backtrom G. Structure and biosynthsis of heparin-like polysaccharides // Fed. Proc.-1977.-V.36.-P.19−23.
  6. Исследование системы крови в клинической практике / Под ред. Козин-ца Г. И, Макарова В. А. М.: Триада-Х. 1997.480 с.
  7. В.А., Дрозд Н. Н., Малыхина JI.C. Роль полисульфата хитозана в развитии антикоагулянтной терапии // Мат. пятой конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана».-М.-Щёлково:ВНИРО.-1999,-С.160−162.
  8. И.В., Волковинская Л. П., Соколова Л. В., Норейка P.M. Способы получения гепарина // Обзорная информация ЦБНТИ Минмед-пром. сер. Химико-фармацевтическая промышленность.-1977.-№ 11.-С.28.
  9. Cifonelli Y.A. Heparin structure, function and clinical implications. New York — London: Plenum Press, 1975.
  10. A.B., Штильман М. И. Полимеры в процессах иммобилизации и модификации природных соединений. М.: Наука. 1984.260 с.
  11. Foster А.В., Haggard A.I. The chemistry of heparin // Adv. in Carbohydr. Chem.-1955.-V.10.-P.335−368.
  12. Cifonelli J.A. The relationship of molecular weight and sulfate content and distribution to anticoagulant activity of heparin preparation // Carbohydr.Res.-1985.-V.37.-N.1.-P.145−154.
  13. Graham D.T., Pomeroy A.R. Relative activites of heparin fractions obtained by gel chromatography // Thromb. and Haemost.-1980.-V.42.-P. 1598−1603.
  14. C.M. Новые данные о гепарине // Вопросы мед. химии.-1981.-№ 2.-С.725−735.
  15. А.Н., Неклюдов А. Д. Получение гепарина из животной ткани методом ультрафильтрации // Мясная индустрия.-2000.-№ 7.-С.29−31.
  16. А.Н., Неклюдов А. Д. Получение гепарина и хондроитинсуль-фата из животной ткани ионообменным методом // Прикладная биохимия и микробиология.-1998.-Т.34.-№ 6.-С.692−697.
  17. .А., Аммосова Я. М., Ляпина J1.A., Осипова Н. Н. Гепарин из таволги вязколистной, его свойства // Изв. АН СССР. Серия биологиче-ская.-1991.-№ 6.-С.939−943.
  18. В.А., Кондратьева Т. Б. Применение гепаринов в клинической практике // Русский медицинский журнал.-1998, — Т.6.-№ 3.-С. 1−4.
  19. Kelton J.G. Heparin-induced thrombocytopenia // Haemostasis. -1986,-V.16.-P.173−186.
  20. Matzsch Т., Bergqvist D., Hender U., Nilsson В., Ostergaard P. Heparin-induced osteoporosis in rats // Thrombosis and Haemostasis.-1986.-V.56.-N.3.-P.293−294.
  21. Frydman A. Low-molecular-weight heparins: an overview of their pharmacodynamics, pharmacokinetics and metabolism in humans // Haemostasis.-1996.-V.26.-N.2.-P.24−38.
  22. Linhardt R.J., Gunay N.S. Production and chemical processing of low molecular weight heparins// Semin. Thromb. Hemost.-1999.-V.25.-N.3.-P.5−16.
  23. Jeske W., Fareed J. In vitro studies on the biochemistry and pharmacology of low molecular heparins // Semin. Thromb. Hemost.-1999.-V.25.-N.3.-P.27−33.
  24. Fareed J., Hoppensteadt D., Jeske W., Clarizio R., Walenga J.M. Low molecular weight heparins: are they different? // Can. J. Cardiology.-1998.-V.14.-N.2.-P.28−34.
  25. Choo J., Kereiakes D. Low molecular weight heparin therapy for percutaneous coronary intervention: a practice in evolution // J.Thromb.Thrombolysis.-2001.-V.ll.-N.3.-P.235−246.
  26. Verhaeghe R. The use of low-molecular-weight heparins in cardiovascular disease // Acta Cardiol.-1998.-V.53.-P. 15−21.
  27. Nunnelee J.D. Low-molecular-weight heparin // J. Vase. Nurs.- 1997.-V.15,-P.94−96.
  28. Hirsh J. Heparin and low-molecular weight heparins // Coron Artery Dis.-1992.-N.3.-P.990−1002.
  29. Wang Q.L., Shang X.Y., Zhang S.L., Ji J.В., Cheng Y.N., Meng Y.J. Effect of inhaled low molecular weight heparin on airway allergic inflammation in aerosol-ovalbumin-sensitized guinea pigs // Jpn. J. Pharmacol.-2000.-V.82.-N.4.-P.326−330.
  30. Linhardt R.J., Loganathan D., A1-Hakim A., Wang H-M., Walenga J.M., Hoppensteadt D., Fareed J. Oligosaccharide mapping of low molecular weight heparins: structure and activity differences // J. Med. Chem.-1990.-V.33.-N.6.-P. 1639−1645.
  31. Volpi N. Characterization of heparins with different relative molecular masses by various analytical techniques // J. Chromatogr.-1993.-V.622.-N.l,-P.13−20.
  32. Nagasawa K., Uchiyama H., Sato N., Hatano A. Chemical change involved in the oxidative-reductive depolymerization of heparin // Carbohydr. Res.-1992-V.236.-N.15.-P. 165−180.
  33. Lahiri В., Lai P. S., Pousada M., Stanton D., Danishefsky I. Depolymerization of heparin by complexed ferrous ions // Arch. Biochem. Bio-phys.-1992.-V.293.-N.14.-P.54−60.
  34. К.Р., Содюпрей Ф., Дебиофарм С. А. Антитромботиче-ские негеморрагические композиции на основе гепарина, способ их получения и терапевтические дозы. Пат.№ 97 104 917/14.Россия.27.06.2000г.
  35. Jeske W., Iqbal О., Gonella S., Boveri G., Torn G., De Ambrosi L., Fareed J. Pharmacologic profile of low-molecular-weight heparin depolymerized by gamma-irradiation//Semin. Tromb. Hemost.-1995.-V.21.-N.2.-P.201−211.
  36. Bisio A., Ambrosi L., Gonella S., Gonella M., Guglieri S., Maggi G., Torn G. Preserving the original heparin structure of a novel low-molecular-weight heparin by gamma-irradiation // Arzneimittelforschung.-2001.-V.51.-N.10.-P.806−813.
  37. С.А. Очищенная гепариновая фракция, способ ее получения и содержащая ее фармацевтическая композиция. Пат.№ 2 133 253.Россия. 1999 г.
  38. A., Torri G., Casu В. «Supersulfated» heparin fragments, a new type of low-molecular weight heparin // Biochemical Pharmocological.-1987.-V.36.-N 12.-P.1895−1900.
  39. Hoppensteadt D., Walenga J.M., Fareed J. Low molecular weight heparins. An objective overview // Drugs Aging.-1992.-V.2.-N.5.-P.406−422.
  40. Nightingale S.L. From the Food and Drug Administration. // JAMA.-1993.-V.270.-N.22.-P. 1672−1674.
  41. White R.H., Ginsberg J.S. Low-molecular-weight herarins: are they all the same? // British J. Haematology.-2003.-V.121.-P.12−20.
  42. Morris T.A., Marsc J.J., Konopka R., Pedersen C.A., Chiles P.G. Antithrombotic efficacies of Enoxaparin, Dalteparin, and Unfractionated Heparin in venous thrombo-embolism // Thromb. Res.-2000.-V.100.-P.185−194.
  43. Ostergaard P.B., Nilsson В., Bergqvist D., Hedner U., Pedersen P.C. The effect of low molecular weight heparin on experimental thrombosis and
  44. Casu В., Torn G. Structural characterization of low-molecular weight heparins. // Semin. Thromb. Hemost.-1999.-V.25.-N.3.-P.17−25.
  45. Rasine E. Differentiation of low-molecular weight heparins // Pharmacother-apy.-2001.-V.21.-P.62−70.
  46. Daud A.N., Ahsan A, Iqbal O., Walenga J.M., Silver P.J., Ahmad S., Fareed J. Synthetic heparin pentasaccharide depolymerization by heparinase 1 molecular and biological implications // Clin. Appl. Thromb. Hemost.-2001.-V.7.-N.1.-P.58−64.
  47. Mattsson C., Palm M., Soderberg K., Holmer E. Antitrombotic effects of heparin oligosaccharides // Ann.N.Y.Acad.Sci.-1989.-V.556.-P.323−332.
  48. Petitou M., Herault J.P., Bernat A., Driguez P.A., Duchaussoy P. Synthesis of thrombin-inhibiting heparin mimetics without side effects // Nature.-1999.-Y.398.-P.417−422.
  49. Buchanan M.R., Blister S.J., Ofosu F. Prevention and treatment of thrombosis: novel strategies arising from our understanding the healthy endothelium // Wien. Klin. Wochenschr.-1993.-V.105.-N.l 1 .-P.309−313.
  50. Buchanan M. R., Liao P., Smith L. J., Ofusu F. A. Prevention of thrombus formation and growth by antithrombin III and heparin cofactor II-dependent thrombin inhibitors: importance of heparin cofactor II // Thromb. Res.-1994.-V.74.-N.5.-P.463−475.
  51. И.В., Шевченко H.M., Ковалев Б. М., Хотимченко Ю. С. Имму-номоделирующие свойства полисахаридов из красных водорослей: влияние на систему комплемента // Биология моря.-1998.-Т.24.-№ 1.-С.50−53.
  52. А.И., Смирнова Г. П., Билан М. И., Шашков А. С. Полисахариды водорослей. Бурая водоросль Laminaria saccharina как источник фукоидана // Биоорган, химия.-1998.-Т.24.-С.437−445.
  53. Nishino Т., Nagumo Т. The sulfate-content dependence of the anticoagulant activity of a fucan sulfate from the brown seaweed Ecklonia kurome // Carbohydr. Res.-1991.-V.214.-P. 193−197.
  54. А., Торри Д. Полусинтетические сульфаминогепаросансульфа-ты, имеющие высокую антиметастатическую активность и пониженный геморрагический риск. Патент № 2 176 915 Россия.
  55. Casu В., Grazioli G., Razi N., Guerrini M., Naggi A. Heparin-like compounds prepared by chemical modification of capsular polysaccharide from Escherichia coli K5 // Carbohydr. Res.-1994.-V.263.-N.2.-P.271−284.
  56. Razi N., Feyzi E., Bjork I., Naggi A., Casu В., Lindahl U. Structural and functional properties of heparin analogues obtained by chemical sulphation of Escherichia coli K5 capsular polysaccharide // Biochem. J.-1995.-V.15.-P.465−472.
  57. Geresh Sh., Mamontov A., Weinstein J. Sulfation of extracellular polysaccharides of red microalgae: preparation, characterization and properties //J. Biochem. Biophys. Methods.-2002.-V.50.-P.179−187.
  58. E.A., Нудьга JI.А. Хитин и его химические превращения // Успехи химии, — 1984.-Т.46, № 8.-С. 1470−1487.
  59. А.П., Феофилова Е. П., Генин Я. В. Влияние кристалличности на сорбционные и термические свойства хитина и хитозана // Высокомолекулярные соединения. Сер.Б.-1982, — Т.24.-№ 9.-С.658−662.
  60. Е.П. Биологические функции и практическое использование хитина // Прикладная биохимия и микробиология.-1984.-Т.20, вып.2.-С.147−160.
  61. С.Н. О пластифицирующем действии воды при получении хитозана из хитина непрерывным способом в двухшнековом экструдере // Пластические массы.-1998.-№ 1 .-С.29−33.
  62. Ю.Ф., Мамонтова В. А., Рассказов В. А. Средство наружного применения препаратов «Полимед», «Автохит», «Гидрохит» // Мат. шестой Международной конф. «Новые достижения в исследовании хитина и хитозана».-М.-Щёлково:ВНИРО.-2001 .-С. 150−152.
  63. В.М., Кривошеина Л. Н. Хитин, хитозан биополимеры XXI века // Пища, вкус, аромат.-2000.-№ 1 .-С.4−7.
  64. А.А., Цыган В. Н., Жоголев К. Д., Никитин В. Ю. Применение препаратов на основе хитина и хитозана в медицине // Проблемы окружающей среды и природных ресурсов.-М:ВИНИТИ.-2000.-№ 8.-С.90−106.
  65. A.M., Добротворская А. Е. Применение хитина и его производных в медицине // Хим-фарм. журнал.-1989.-Т.23.-№ 5.-С.623−628.
  66. Kweon D.-K., Song S.-B., Park Y.-Y. Preparation of water-soluble chito-san/heparin complex and its application as wound healing accelerator // Bioma-terials.-2003.-V.24.-P. 1595 -1601.
  67. E.A. Хитозан и его производные в биоинкапсулировании приведено в «Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение» / Под редакцией К. Г. Скрябиа, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова.-М: Наука, 2002.-365 с.
  68. В.М., Комаров Б. А. Способ лечения хронического гастрита, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. Пат.№ 2 145 975. Россия. 2000 г.
  69. Niscimura К., Niscimura S., Nisei N. Immunological activity of chitin and its derivaties // Vaccine.-1984.-V.2.-N.l.-P.93−99.
  70. C.B., Ильина A.B., Шинкарев C.M., Албулов А. И., Варламов В. П. Получение низкомолекулярного водорастворимого хитозана // Био-технология.-2001.- № 6.-С. 37−42.
  71. И.И., Калугин Н. Ф., Догаленко В. Н., Стрелков Е. В. Нарцисс-альтернативахимическим протравителям // Мат. шестой Международной конф. «Новые достижения в исследовании хитина и хитозана».-М.-Щёлково:ВНИРО.-2001 .-С.16−11.
  72. Н.И., Чаленко Г. И., Герасимова Н. Г. и др. Производные хитина и хитозана как элиситоры фитофторустойчивости картофеля // Прикладная биохимия и микробиология.-2000.-Т.36.-№ 4.-С.433−438.
  73. А.Р. Состояние минерального обмена в организме коров на фоне применения хитозана // Мат. шестой Международной конф. «Новые
  74. В.Н., Яковлев Н. Г., Велешко И. Е. Хитин-хитосодержащие материалы для дезактивации жидких радиоактивных отходов // Мат. 6-ей Международной конф. «Новые достижения в исследовании хитина и хито-зана».-М.-Щёлково:ВНИРО.-2001.-С.287−290.
  75. И.Н. Разработка способа получения водорастворимых сульфатов хитина и хитозана и исследование их свойств Дис.к.х.н.-М.: Текстильный Институт .-1990.С.236.
  76. Hirano S., Nanako Y., Tobetto К. Effect of sulfated derivatives of chitosan on some blood // Carbohydr. Res.-1985.-V.137.-P.205−215.
  77. P.M., Колодзейскис B.C., Дуденас Г. Э. Исследования фракционного состава сульфата хитозана // Тез. докл.конф. «Актуальные вопросы разработки, изучения и производства лекарственных средств» Каунас,-1985.-С.113−116.
  78. С.Н. Противовирусная активность хитозана // Прикладная биохимия и микробиология.-2002 -Т.38.-№ 1.-С.5−13.
  79. Г. В., Макарова Т. В., Гамзазаде А. И., Скляр A.M. Сульфа-тированные производные как ингибиторы ВИЧ-инфекции // Иммуноло-гия.-1995.-№ 5.-С. 13−16.
  80. Nishimura S., Kai Н., Yoshida Т. Regiocelective syntheses of sulfated polysaccharides: specific anti-HIV-1 activity of novel chitin sulfates // Carbohydr. Res.-1998.-V.306.-N.3.-P.427−433.
  81. M.A., Горбачева И. Н., Вихорева Г. А., Гальбрайх JI.C., Ры-женков В.Е. Влияние сульфата хитозана на активность липопротеинлипазы // Вопросы медицинской химии.-1994.-Т.40.-№ 2.-С.37−39.
  82. Gamzazade A.I., Nasibov S.M., Rogozhin S.V. Study of lipoprotein sorption by some sulfoderivatives of chitosan // Carbohydr. Polymer.-1997.-V.31.-P.l-4.
  83. Chen C.S., Liau W.Y., Tsai G.J. Antibacterial effects of N-sulfonated and N-sulfobenzoyl chitosan and application to oyster preservation // J. Food Prot.-1998.-V.69.-N.9.-P.1124−1128.
  84. Wolfrom M.L. Sulfated aminopolysasccharides. Patent N. 283 2766. USA 1958.
  85. Jl.С., Ениколопов Н. С., Горбачева И. Н., Вихорева Г. А., Зе-ленецкий С.Н. Способ получения биологически активного сернокислого эфира хитозана // Авторское свидетельство № 2 034 851.
  86. И.Н., Скорикова Е. Е., Вихорева Г. А., Гальбрайх Л. С., Баби-евский К.К. Строение и свойства сульфата хитозана // Высокомолекулярные соединения. Сер. А.-1998.-Т, 33.-№ 9.-С.1899−1903.
  87. Vongchan P., Sajomsang W., Subyen D., Kongtawelert P. Anticoagulant activity of sulfated chitosan // Carbohydr. Res.-2002.-V.337.-P. 1233−1236.
  88. А.И., Скляр A.M. Способ получения сульфатированного хитозана. Пат.№ 2 048 474. Россия. 1995 г.
  89. Lin C.W., Lin J.C. Surface characterization and platelet compatibilityevalua-tion of surfase-sulfonated chitosan membrane // J. Biomater. Sci. Polym. Ed.-2001.-V.12.-N.5.-P.543−557.
  90. Holme K. R, Perlin A.S. Chitosan N-sulfate. A water-soluble polyelectro-lyte // Carbohydr. Res.-1997.-V.302.-P.7−12.
  91. К.Э. Изучение взаимосвязи строения и свойств производных хитозана с иногенными группами различных типов: Дис.к.х.н.-М.: МГТУ. -2000.-С. 147.
  92. Baumann Н. The role of regioselectively sulfated and polysaccharide of biomaterials for reducing platelet and plasma protein adhesion // Semin. Thromb. Hemost -2001 .-V.27.-N.5.-P.445−463.
  93. И.М., Кривова А. Ю. Технология ферментных препаратов. -М: Элевар.2000.335 с.
  94. Koga D., Mitsutomi М., Kono М., Matsumiya М. Biochemistry of chitinases // Exs.-1999.-V.87.-P.l 11−123.
  95. Yoon H.G., Kim H.Y., Kim H.K., Hong B.S., Shin D.H., Cho H.Y. Thermostable chitosanase from Bacillus sp. strain CK4: its purification, characterization, and reaction patterns // Biosci. Biotechnol. Biochem.-2001.-V.65. -P.802−809.
  96. Stoyachenko I.A., Varlamov V.P., Davankov V.A. Chitinases of Streptomyces kurssanovi purification and some properties // Carbohydr. Poly-mer.-1994.-V.24.-P.47−54.
  97. И.А. Выделение, очистка хитиназ Streptomyces Kurssanovii и ферментативное расщепление хитина и хитозана. Дисс.к.х.н.-М.: Институт биохимии.-1992.-С.169.
  98. А.В., Татаринова Н. Ю., Тихонов В. Е., Варламов В. П. Внеклеточные протеаза и хитиназа, продуцируемые культурой Streptomyces kurssanovii // Прикладная биохимия и микробиология.-2000.-Т.36.-№ 2.-С.184−188.
  99. Tikhonov V.E., Yamskov 1.А., Varlamov V.P., Ilyina A.V., Davankov V.A. Chitinolytic digestibility of cross-linked chitosan gels by an enzyme complex from Streptomyces Kurssanovii // Biotechnol. Appl. Biochem-1993.-V.17.-P.251−256.
  100. Ilyina A.V., Tikhonov V.E., Albulov A.I. Enzymic preparation of asid-free-water-soluble chitosan // Process Biochemistry .-2000.-V.35.-P.563−568.
  101. Muzzarelli RAA Depolymerization of chitins and chitosans with hemicellulase, lysosyme, papain and lipases. In Chitin Handbook / R.A.A. Muzzarelli and M.G. Peter. European Chitin Society, Atec, Grottammare, Italy. 1997. P.153−163.
  102. Aiba S. Lysozymic hydrolysis of partially N-acetylated chitosans // Int. J. Biol. Macromol.-1992.-V.14.-P.225−228.
  103. Muzzarelli R.A.A. Depolymerization of methilpyrrolidinonechitosan by lysozym // Carbohydrate Polymers.-1992.-V.l9.-N.l .-P.29−34.
  104. A.B., Ткачева Ю. В., Варламов В. П. Деполимеризация высокомолекулярного хитозана ферментным препаратом целловиридин Г20Х // Прикладная биохимия и микробиология.-2002.-Т.38.-№ 2.-С.132−135.
  105. Lusta К.A., Chung I.K., Sul I.W., Park H.S., Scin D.L. Immobilization of fungus Aspergillus sp. by a novel cryogel technique for production of extracellular hydrolytic enzymes // Proc. Biochem.-2002.-V.35.-P.l 177−1182.
  106. Sutherland I.W. Polysaccharide lyases // FEMS Microbiology Reviews.-1995.-V.16.-P.323−347.
  107. Jandik K.A., Gu K., Linhardt R.J. Action pattern of polysaccharide lyases on glycosaminoglycans // Glycobiology.-1994.-V.4.-N.3.-P.289−296.
  108. Matzsch Т., Berggvist D., Hedner U., Ostergaard P. Effects of an enzymatically depolymerized heparin as compared with conventional heparin in healthy volunteers // Tromb. Haemost.-1987.- V. 57.-P.97−101.
  109. Linhardt R.J., Grant A., Cooney C.L., Langer R. Differential anticoagulant activity of heparin fragments prepared using microbial heparinase // J. Biol, Chem. 1982.-V.257.-P.7310−7313.
  110. Godavarti R., Sasisekharan R. A Comparative Analysis of the Primary Sequences and Characteristics of Heparinases I, II, and III from Flavobacterium heparinium II Biochemical and biophysical research communications.-1996,-V.229.-P.770−777.
  111. Rhomberg A.J., Shriver Z., Biemann K., Sasisekharan R. Mass spectrometry evidence for the enzymatic mechanism of the depolymerization of heparino-like glycosaminoglycans by heparinase II // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1998.-V.95.-P. 12 232−12 237.
  112. Toida Т., Hileman R., Smith A., Vlahova P., Linhardt R. Enzymatic preparation of heparin oligosaccharides containing antithrombin III binding sites // J. Biological chemistry.-1996.-V.271 .-N.50.-P.32 040−32 047.
  113. Rice K.G., Linhardt R.J. Study of structurally defined oligosaccharide substrates of heparin and heparan monosulfate lyases // Carbohydr. Res.-1989,-V.190.-P.219−233.
  114. Perlin A., Gallo C., Jandik K.A., Han X.J., Linhardt R.J. Preparation and structural characterization of large heparin-derived oligosaccharides // Glycobi-ology.-1995.-V.5.-N.l.-P.83−95.
  115. Zimmermann J., Lewis N., Heft R. Metod for the enzymatic neutralization of heparin. Pat. № 5 262 325. USA. 1993.
  116. Lasker S.E., Stivala S.S. Physicochemical studies of fractionated bovine heparin // Archives of biochemistry and biophysics.-1966.-V.l 15.-P.360−372.
  117. Farndale R.W., Buttle D.J., Barrett A.J. Improved quantitation and discrimination of sulphated glucosaminoglycans by use of dimethylmethylene blue //Biochim. Biophis. Acta.-1986.-V.883.-N.2.-P.173−177.11
  118. Desai U.R., Linhardt R.J. Molecular weight of heparin using С Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy // Reprinted from J. of Pharmaceutical Sci-ences.-1995.-V.84.-N.2.-P.212−215.
  119. Т.А. Химические превращения хитина и хитозана в твердом состоянии при механическом воздействии. Дис.к.х.н. М.: МГТУ.-2001 120 С.
  120. Thurnberg L., Backstrom G., Lindahl L.J. Further characterization of the antithrombin-binding sequence of heparin // Carbohydr. Res.-1982.-V. 100.-P. 393−410.
  121. Walenga J.M., Petitou M., Lormeau J.C., Samama M., Fareed J. Antithrombotic activity of a synthetic heparin pentasaccharide in a rabbit stasis thrombosis model using different thrombogenic challengers // Thromb. Res.-1987.-V.46.-P. 187−198.
  122. Thomas D.P., Merton R.E., Gray E., Barrowdiffe T.W. The relative antithrombotic effectiveness of heparin, a low molecular weight heparin, and a pentasaccharide fragment in an animal model // Thrombosis and Haemostasis.-1981.-V.61.-P.204−207.
  123. С.П. Физико-химические основы переработки полимеров.-М.: Химия. 1971.372 с.
  124. Miller G.L. Use of dinitrosalicylis asid reagent for determination of reducing sugar // Anal. Chem.-1959.-V.31 .-P.426−428.
  125. Spector T. Refinement of the Comassie Blue method of protein quantitation //Anal. Biochem.-1978.-V.86.-P. 141−146.
  126. Plelcher C.H., Cunningham M., Nelsestuen G.L. Kinetic analysis of various fractions and heparin substitutes in the thrombin inhibition reaction // Bio-chimica et Biophysica Acta.-1985.-V.838.P.106-l 13.
  127. Баркаган 3.C., Момот А. П. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. М: Ньюдиамед. 2001. 296 с.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!