Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Сравнительные исследования структуры иммуноглобулинов класса G животных различных видов (свиньи, мыши, кролика) методами микрокалориметрии и дифференциальной спектрофотометрии

Диссертация: Сравнительные исследования структуры иммуноглобулинов класса G животных различных видов (свиньи, мыши, кролика) методами микрокалориметрии и дифференциальной спектрофотометрии
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

В процессе развития иммунного ответа происходит переключение синтеза иммуноглобулинов с одного клаоса на друтой. Первыми после иммунизации синтезируются антитела класса, затем антитела класса б. причем на смену низкоаффинным антителам рбразуются антитела высокоаффинные. Для системы свиных антидинитрофенильных антител отмечен особый процесс — смена одного типа"вероятно, подкласса иммуноглобулинов… Читать ещё >

Сравнительные исследования структуры иммуноглобулинов класса G животных различных видов (свиньи, мыши, кролика) методами микрокалориметрии и дифференциальной спектрофотометрии (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • ШТОЖ
  • ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ Структурные основы биологических функций иммуноглобулинов
  • -1.1. Структура иммуноглобулинов
    • 1. 2. Механизмы активации эффекторных функций антител
    • 1. 3. Сегментальная гибкость иммуноглобулинов
    • 1. 4. Влияние шарнирного участка на свойства молекул иммуноглобулинов
    • 1. 5. Влияние антигенов на пространственную структуру иммуноглобулинов
    • 1. 6. Система кроличьих анти-полисахаридных да антител .23−2?
    • 1. 7. Антитела как аллостерические белки
    • 1. 8. Конформационные изменения антител в результате связывания антигенов
    • 1. 9. Механизмы активации системы комплемента. 33−36 1.10.Заключение и общая постановка задачи исследования
  • ГЛАВА. М. ЭКСПЕРИГЯЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТ
    • 2. 1. Материалы и методы исследования
    • 2. 2. Результаты исследований
      • 2. 2. 1. Температурно-пертурбационная дифференциальная спектрофотометрия свиных анти-ДНФ да антител
      • 2. 2. 2. Сольвентно-пертурбационная дифференциальная спектрофотометрия свиных анти-ДНФ да антител
      • 2. 2. 3. Исследование конформации свиных анти-ДНФ igG антител методом дифференциальной сканирующей микрокалориметрии
      • 2. 2. 4. Дифференциальная сканирующая микрокалориметрия анти- Lac IgG антител кролика
      • 2. 2. 5. Температурно-пертурбационная дифференциальная спектрофотометрия мышиных моноклональных анти-ДНФ igGi антител
  • ГЛАВА 3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
    • 3. 1. s Структура ранних (преципитирующих) и поздних (непрещшитирующих) свиных анти-ДНФ IgG антител
    • 3. 2. Изменение конформации антител при взаимодействии с антигеном (, гаптеном)
    • 3. 3. Структура мышиных моноклональных анти-ДШ? антител
    • 3. 4. Использование иммуноглобулинов G свиней в аффинных сорбентах
  • ВЫВОДЯ

Актуальность проблемы" Выяснение молекулярных: механизмов реакций иммунного взаимодействия имеет большое теоретическое и практическое значение. Закономерности структуры и функционирования иммуноглобулинов, центральных молекул гуморального иммунитета, представляют интерес не только для молекулярной иммунологии, но и для медицины. Знание конформационных свойств иммуноглобулинов необходимо и для решения конкретных практических задач, стоящих перед микробиологической промышленностыо, в чаотности, для разработки регламента на получение белка, А стафилококков с помощью аффинной хроматографии на иммуноглобулиновых сорбентах.

В настоящее время достигнут значительный прогресс в изучении конформадии иммуноглобулинов, в понимании молекулярных механизмов реакции взаимодействия антител с чужеродными для данного организма веществами — антигенами. В результате взаимодействия антител с антигенами запускается целый ряд эффекторных функций антител, направленных на элиминацию антигена (реакция связывания и активации белков системы комплемента, фиксация на макрофагах и др.).Однако до сих пор неясно, что происходит с молекулами антител в результате связывания антигенов, каков механизм передачи сигнала с антигенсвязывающего центра на эффекторные центры о антител, расстояние мезкду которыми составляет 80 — 100 А. Этот вопрос привлекает внимание многих исследователей, применяющих различные физико-химические и биологические методы. При этом получены самые противоречивые результаты.

В процессе развития иммунного ответа происходит переключение синтеза иммуноглобулинов с одного клаоса на друтой. Первыми после иммунизации синтезируются антитела класса, затем антитела класса б. причем на смену низкоаффинным антителам рбразуются антитела высокоаффинные. Для системы свиных антидинитрофенильных антител отмечен особый процесс — смена одного типа"вероятно, подкласса иммуноглобулинов в другим. Антитела, выделенные на ранних стадиях иммунного ответа, являются типичными преципитинами. Антитела, образующиеся на более поздних стадиях иммунного ответа, несмотря на высокую константу ассоциации, образуют растворимые комплексы с мультивалентными антигенами. Кроме того? ранние и поздние антитела обладают различной устойчивостью к протеолизу. Структурная основа различных функциональных свойств ранних прецшштирующих и поздних непреципитирующих свиных анти-динитрофенильных антител до настоящего времени не была известна. В то же время феномен переключения типов (подклассов) иммуноглобулинов о может играть важную роль в адекватности иммунного ответа.

В связи с этим нами поставлены следующие цель и задачи исследования.

Цельработы: изучение конформационных изменений, индуцированных связыванием антигенов ¿-в молекулах антител, имеющих: различную структуру и выделенных из животныхразных видов.

Задачи исследования :

1. Выявить конформационные различия между ранними преципитирую-щими и поздними непреципитирующими антителами свиньи к данитрофенильным грушам.

2. Изучить изменение конформации свиных анти-динитрофенильных п^ антител и кроличьих анти-фениллактозидных ^ антител при взаимодействии с антигенами (гаптенами).

3. Выявить конформационные различия моноклональных мышиных: анти-динитрофенильных антител, продуцируемых двумя различными гибридомами и принадлежащих к I подклассу иммуноглобулинов й .

4. На основании цроведенных исследований структуры иммуноглобулинов, а свиньи дать рекомендации по их использованию для синтеза аффинного сорбента, применяемого для выделения белка, А стафилококков.

Научная новизна. Получены данные, свидетельствующие о томчто конформационные изменения, индуцированные связыванием антигена, не ограничиваются антигенсвязывающими центрами, а захватывают всю молекулу антител. Впервые показано ¿-'что конформационные изменения, обусловленные связыванием антигена, зависят от типа (подкласса) иммуноглобулинов и структуры вариабельных доменов.

Получены данные о различной структуре двух типов свиных ан-ти-динитрофенильных антител, ранних преципитирующих и поздних не-преципитирующих, подтверждающие предположение о том, что эти антитела являются подклассами свиных иммуноглобулинов, а. Ранние антитела характеризуются большей стабильностью взаимодействия между Сн2 и Сн3 доменами ¿-чем поздние антитела, что объясняет. различную устойчивость к протеолизу этих антител при определенных значениях рН. В то же время ранние антитела имеют меньшую жесткость структуры других частей молекулы по отношению к температурной пертурбации. Конформационные изменения/индуцированные галтеном, больше для ранних преципитирующих антител.

Показано, что структура вариабельных доменов легкой и тяжелой цепей в мышиных моноклональныханти-динитрофенильных антителах, принадлежащих к одному подклассу дда и имеющих & тип легкой цепи, существенно влияет на конформащонную лабильность молекулы антитела по отношению к температурной пертурбации и связыванию антигена.

Практическая ценность. Данные о конформационных свойствах иммуноглобулинов й свиньи использованы при создании имму-носорбента, обладающего повышенной устойчивостью к действию про-теаз при кислых значениях рН. Кроме того, этот сорбент более экономичный по сравнению с иммуносорбентом на основе да человека. На основе иммунооорбента*содержащего в качестве иммобилизованного белка свиньи, разработан лабораторный регламент получения белка, А стафилококков и налажено производство опытных партий белка, А на базе НИКТИ биологически-активных веществ (г.Новосибирск), что позволило в течение 1982 — 1983 гг. сэкономить около 600 тысяч инвалютных рублей.

ВЫВОДЫ.

1. В работе показано, что два типа свиных анти-динитрофенильных антител с разными функциональными свойствами имеют различную структуру: а) ранние преципитирующие антитела обладают более лабильной структурой по отношению к температурной пертурбации, чем поздниа непреципитирующие антитела — б) ранние и поздние антитела отличаются не только структурой РаЪ субъединиц, но и Рс субъединиц — это подтверждает предположение о том, что антитела являются подклассами иммуноглобулинов й свиньи — в) поздние непреципитирующие антитела характеризуются менее стабильной структурой Рс субъединиц, по-видимому, области контактов между Сн2 и Сн3 доменами — г) конформационные изменения, индуцированные связыванием гапте-на, больше для ранних преципитирующих антител, имеющих более лабильную структуру.

2. Методом сканирующей микрокалориметрии показано, что при взаимодействии свиных анти-динитрофенильных и кроличьих анти-фе-ниллактозидных антител с соответствующими антигенами происходят конформационные изменения молекул антител, в том числе.

Рс субъединиц.

3. На основании проведенных исследований показано, что два типа мышиных: моноклональных анти-динитрофенильных антител, принадлежащих: к иммуноглобулинам подкласса и имеющих ж. тип легкой цепи, отличаются по конформационной лабильнооти молекул по отношению к температурной пертурбации и связыванию гаптена.

4. Впервые показано, что конформационные изменения, обусловленные связыванием антигена (гаптена), зависят от типа (подкласса) иммуноглобулинов и строения вариабельных доменов легкой и тяжелой цепей.

5. Научно-практические рекомендации.

Использование иммуноглобулинов, а свиней в качестве иммобилизованных белков в иммуносорбенте, применяемом для выделения белка, А стафилококков, позволит удлинить срок эксплуатации аффинного сорбента. Свиные характеризуются, по данным сканирующей микрокалориметрии, сильными нековалентными взаимодействиями между РаЪ и Рс субъединицами и обладают, в силу этого, повышенной устойчивостью к протеолизу при низких значениях рН по сравнению с других видов животных.

Иммуносорбенты на основе свиных ад более экономичны и не уступают по своим рабочим характеристикам сорбентамсодержащим ад человека. Перечисленные выше качества особенно важны при использовании иммуносорбентов на основе ад свиньи для выделения белка, А стафилококков в опытно-промышленном производстве.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ ДИССЕРТАЦИИ ОПУБЛИКОВАНЫ В СЛЕДУЮЩИХ РАБОТАХ :

1. Конформационные изменения антител при взаимодействии с антигеном. 4-й Всесоюзный биохимический съезд (Ленинград «сентябрь 1979 г Л: Тезисы научных сообщений. — М.: Наука, 1979, т.1, с. 10. (соавторы: Завьялов В. П., 1£оицкий Г. В., Тэтин С. Ю., Франек Ф.).

2. Конформационные свойства преципитирующих и непреципитирующих антител свиньи к динитрофенильным производным. 5-й Всесоюзный симпозиум по химии и физике белков и пептидов (Баку, 28−31 октября 1980 г.): Тезисы докладов. — ГЛ.: Институт биоорганической химии им. М. М. Шемякина АН СССР, 1980, с. 94 (соавторы: Тшценко В. М., Абрамов В. М., Завьялов В. П., Франек Ф.).

3. Structure studies of immunoglobulins G in solution. Ill symposium USSR-PRG on chemistry of peptides and proteins.(Makhachkala, 2−6 october, 1980 y.): Abstracts. — M., Nauka, 198о, р.31 coauthors Zav’ylov V.P., Abramov V.M., Tishchenko V.M., Dudich E.I., Dudich I.V., Franek P., Medgyesi G.).

4. Correspondence between structure and function of immunoglobulin G subclasses. — Haematologia, 1981, v.14, N 1, p.85−94 (coauthors Zav’yalov V.P., Abramov V.M., Ivannikov A.I., Dudich'.

E.I., Dudich I.V.Tischenko V.M."Khechinashvili N.F., Pranek P., Medgyesi G., Zavodszky P., Jaton J-C.).

5. The structure of immunoglobulins G (IgG)in solution and thB mechanism of activation of their effector functions (EP). Biochemical Society Transaction, 1981, v.9,К 2, p. Pri-S34−11. (coauthors Zav’ylov V.P., Abramov V.M., Tischehko V.M., Dudich I.V., Dudich E. I., Ivannikov A. I.4. Pranek P.).

6. Conformational changes induced by hapten in pig antibodies to the dinitrophenyl group. Analysis by temperature-perturbation and solvent-perturbation spectroscopy. European Journal of Biocnemistry, 1982, v.121, p.631−635. (coauthors Abramov V. M, Zav'yalov V.P., Troitsky G.V., 01sovska Z., Pranek P.).

7. Investigations of immunoglobulin structure in solution. Chemistry of Peptides and Proteins, 1982, v.1, p.473−478. coauthors Zav’yalov V.P., Abramov V., Tischenko V., Dudich E., Dudich I., Franek P., Medgyesi G.);

Настоящая работа выполнена в лаборатории 2 Института иммунологии Главного Управления микробиологической промышленности при Совете Министров СССР.

Приношу свою искреннюю благодарность Завьялову Владимиру Петровичу за неоценимую помощь и постоянный интерес к работе. Я благодарю Сухомудренко Анатолия Георгиевича за ценные советы и замечания при обсуждении результатов диссертации. Глубоко признательна Абрамову Вячеславу Михайловичу за проявленное внимание к работе, Тшценко Владимиру Михайловичу за помощь и совместное проведение ряда экспериментов.

Показать весь текст

Список литературы

  1. А.П. Температурные эффекты в электронных спектрах поглощения и структура белков.- Молекул. биология, Киев, 1978, вып.21,с.3−15.
  2. А.П. Ультрафиолетовая спектрофотометрня и структура белков. Киев: Наукова думка, 1981.-208 с.
  3. А.П., Зима В. Л. Тешературно-пертурбацпонная спектрофотометрпя тирозина п триптофана.-Укр.бпохшя.журнал, 1974, т.46, 2, с.345−350.
  4. А.И. «Тищенко В.И., Абрамов -В, Ы."Завьялов В. П. Теоретические и экспериментальные исследования конформавдп „шарнирных“ участков в подклассах иммуноглобулинов g человека.-Ыол.биология, 1983, т.17, вып.6, с.1262−1271.
  5. Т., Гергей Я. Аминокислоты, пептиды, белки. ГЛ.: ГЛпр, 1976. — 363 с.
  6. В.П. Изучение конформавдонных переходов иммуноглобулинов в области антигенсвязывающего центра, энергии взаимодействий между доменаш и путей самоорганизации их пространственной структуры.' Диссертация докт.биол.наук. — М., 1978. -180 с.
  7. Ишуноглобулшш / Под ред. Лишена Г. и 1Уда Р. М.: Мир, 1981. — 495 с.
  8. Кяйвяряынен А.И., Незлпн P.C., Лихтенштейн Г. И., Мишарин А. Ю.,. Волькенштейн ГЛ.В. Конформационные изменения спин-мёченныхантител и антигенов при образовании специфических комплексов. Мол. биология, 1973, т.7, вып.5, с.760−768.
  9. А.И., Незлин P.C., Волькенштейн М. В., Расстояние между пмешокспльныш радцпсапами, локализовшшшди в активном центре антител, п относительная свобода вращения субъедшшц.- Мол. биология, 1974, т.8, вып.6, с.816−823.
  10. В.В., Туманова И.А., Сыкулев I0.IC., 0стрейко К. К. Измерение гадродпнамического радиуса протпвогаптеновых антител до и после взаимодействия с гаптеном методом спектроскопии корреляции фотонов. Иммунология, IS8I, J35, с.20−21.
  11. B.ii. Пршленение спектрофотометрип в ультрафиолете для исследования белков. Згспехи биол. химии, 1971, т. 12, JS I, с.28−61.
  12. Структура п функции антител / Под ред. Глшша I. и Стыоарда М.- M.: i/inp, 1983. 200 с.
  13. Тумермаи Л.Л., 3агянский 10.Л., Незлпн P.C. Экспериментальное доказательство гибкости молекул иммуноглобулинов G. -Нол.биология, 1972, т.6, вып.1, с.135−147.
  14. Abramov V.M., Arkhangelskya g.A., Zav’yalov V.P. Conformational properties of human immunoglobulin G subclasses. Analysis by temperature-perturbation and solvent-perturbation spectroscopy.- Biochim.Biophys.Act a, 1983, v.742, N 2, p.295−302.
  15. Amzel zl.m., Poljak R.J., Saul P., Varga J.M., Richards P.P. Three-dimensional structure of a combining region ligandоcomplex of Ig Hew at 3,5 A resolution. Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1974, v.71, H 4, p.1427−1430.
  16. Amzel L.m., Poljak R.J. THree-dimensional structure of immunoglobulins. Ann. Rev. Biochim. Palo Alto, Calif., 1979, v.48, p.961−997.
  17. Borsos T., Rapp H.J. Hemolysin titration based on fixation of the activated first component of complement. J.Immunol., 1965, v.95, N 3, p.559−566.
  18. Borsos T., Rapp H.J. Complement fixation on cell surfases by 19S and 7S antibodies. Science, 1965, v. 1.50, N 3695, p.505−506.
  19. Borsos T., Gircolo A. Binding and activation of C1 by cell bound IgG: activation depends on cell surface hapten density. Mol.Immunol., 1983, v.20, N 4, p.433−438.
  20. Brown J.C., Koshland M.E. Activation of antibody Pc function by antigen-induced conformational changes. Proc. Natl, Acad. Sci. USA, 1975, v.72, N 12, p.5111−5115.
  21. Brown J.C., Koshland M.E. Evidence for a long-range conformational change induced by antigen binding to IgM antibody.-Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1977, v.74, N 12, p.5682−5686.
  22. Burton D.R., Forsen S., Pranek P., Novotny J. Proton relaxation enhancement to probe the effects of antigen binding on pig antibody structure. PEBS Lett., 1979, v.102, N 2, p. 249−252.
  23. Burton D.R., Boyd J., Brampton A.D., Easterbrook-Smith S.B., Emanual E.J., Novotny J., van Schravendijk M.R., Rademacher T., Sterberg M.J.E., Dwek R.A. C1q binding site on IgG. -Nature, T980, v.288, p.338−344.
  24. Burton D.R., Dwek R.A. The C1q binding site on IgG. Hoppe-Seyler's Z.Physiol.Chem., 1981, v.362, N 1, p.23.
  25. Butler J.E., Kennedy N. The differential enzyme susceptibility by bovine immunoglobulin G1 and G2 to pepsin and papain.-Biochim.Biophys.Acta, 1978, v.535, N 1, p.125−137.
  26. Calvanico N.J., Tomasi T.B. Effector sites on antibodies. -Immunochemistry of proteins, 1979, v.3, p.1−75.
  27. Chan L.M., Cathou R.E. The role of the inter-heavy chain disulfide bond in modulating the flexibility of immunoglobulin G antibody. J.Mol.Biol., 1977, v. 112, N 4, p.653−656.
  28. Chiang H.-Ch., Koshland M.E. Antigen-induced conformational changes in IgM antibody.1.The role of the antigenic determinant. J.Biol.Chem., 1979, v.254, N 8, p.2736−2741.
  29. Chiang H.-CH., Koshland M.E. Antigen-induced conformational changes in IgM antibody.11.The role of the carrier. J.Biol. Chem., 1979, v.254, N8, p.2742−2747.
  30. Circolo A., Borsos T. Lysis of hapten-labeled cells by anti-hapten IgG and complement: effect of cell surface hapten density. J.Immunol., 1982, v.128, N 3, p.1118−1121.
  31. Cser L., Franek P., Gladkikh J.A., Nezlyn R.S., Novotny J., Ostanevich Yu.M. Neutron small-angle scattering study of two different precipitin types of pig anti-DNF antibodies. -FEBS Lett., 1977, v.80, N 2, p.329−331.
  32. Cser L., Franek F., Gladkikh I.A., Kunchenko A.B., Ostanevich Yu.M. General shape and hapten induced conformational changes of pig antibody against dinitrophenyl. A small-angle scattering stflidy. — Eur.J.Biochem., 1981, v.116, N 1, p.109−116.
  33. Cuatrecasas P., Wilchek M., Anfinsen C.B. Selective enzyme purification by affinity chromatography. Proc.Natl.Acad. Sci. USA, 1968, v.61, N 2, p.636−643.
  34. Curd Y., Cooper N.R. C1 binding to complexes consisting of cross-linked Fc molecules from human immunoglobulin G. -J.Immunol., 1978, v.120, N 5, p.1769.
  35. Deisenhofer J. Crystallographic refinement and atomic models of a human Fc fragment and its complexes with fragment В ofоprotein A from Staphylococcus aureus at 2,9- and 2,8-A resolution. Biochemistry, 1981, v.20, H 9, p.2361−2370.
  36. Demchenko A.P., Zyma V.L. Thermal perturbation spectroscopy of proteins. 1. Medium polarity effects. Studia biophysica, 1975, v.52, N 3, p.209−213.
  37. Demchenko A.P., Zyma V.L. Thermal perturbation spectroscopy of proteins. 11. Origin of the model chromophore spectra. -Studia biophysica, 1977, 64, N 2, p.143−15o.
  38. Demchenko A.P. On the effect of temperature on the ultraviolet spectra of protein chromophores. Biophys.Chem., 1979, v.20, N 4, p.393−396
  39. Dorrington K.J. The structural basis for the functional versatility of immunoglobulin G. Can.J.Biochem., 1978, v.56, N 12, p.1087−1101.
  40. Dorrington K.J., Klein M. Effects of altering the quaternary relationships between the Pab and Pc regions on the expression of effector functional properties by IgG. Hoppe-Seyler's Z.Physiol.Chem., 1981, v.362, N 1, p.21.
  41. Dower S.K., Dwek R.A., McLaughlin A.C., Mole L.M., Press E., Sunderland C.A. The binding of lantanides to non-immune rabbit IgG and its fragments. Biochem.J., 1975, v.149, N 1, p.73−82.
  42. Dudich E.I., Nezlin R.S., Pranek P. Fluorescence polarisation analysis of various immunoglobulins. Dependense of rotational time on protein concentration and on ability toprecipitate with antigen. FEBS Lett., 1978, v.89, N 1, p.89−92.
  43. East er brook-Smith S.B., Zavodszky p., WillanK.J., Gettins P., Dwek R. Structural basis of recognition in the immune response. Biochem.Soc.Trans., 1978, v.6, N 6, 1126−1131.
  44. Edelhoch H. Spectroscopic determination of tryptophan and tyrosine in proteins. Biochemistry, 1967, v.6, IT 7, p.1948−1954.
  45. Edelman G.M. The covalent structure of a human-immunoglobulin. XI. Functional implications. Biochemistry, 1970, v.9, N 16, p.3197−3205.
  46. Epp 0., Colman P., Fehlhammer H., Bode W., Schiffer Ш., Huber R. Crystal and molecular structure of a dimer composed of the variable portions of the Bence-Jones protein Rei. -Eur.J.Biochem., 1974, v.45, N 2, p.513−524.
  47. Peinstein A., Munn E.A. Conformation of the free and antigen bound IgM antibody molecules. Nature, 1969, v.224, N 5226, p.1307−1309.
  48. Peinstein A., Munn E.A., Richardson N.E. The three-dimensional conformation of M and A globulin molecules. Ann.N.Y. Acad.Sei., 1971, v.190, IT 1, p.104−121.
  49. Piebig H., Ambrosius H. Strukturelle und immunchemische Untersuchungen am Immunoglobulin des Karpfens (Cyprinus Carpio L.) III. Valenz und Affinitat von Anti-Dinitrophenyl-Anti-korpern.-Acta biol.med.german., 1975, v.34, N 10, p.1681−1695.
  50. Pirca J.R., Ely K.P., Kremser P., Westholm P.A., Dorrington K., Edmundson A.B. Interconversion of conformational isomers of light chains in the Meg immunoglobulins. Biochemistry, 1978, v.17, N 1, p.148−158.
  51. Porsgren A., Sjoquist J. Protein A from St.aureus. I. Psedo-im-mune reaction with human-globulin. J.Immunol., 1966, v.99, p.822−827.
  52. Porster H.K., Sela M. Conformational changes induced in anti-poly (L-prolyl) antibodies by oligoproline haptens of different sizes. Mol.Immunol., 1979, v.16, N 9, p.651−656.
  53. Pranek P., Simek L., Kotynek 0. Antidinitrophenyl antibodies in pigs and bulls. Polia Microbiol., Prague, 1965, v. 10,11 4, p.335−340.
  54. Pranek P., Doskocil J., Simek L. Different types of precipitating antibodies in early and late porcine anti-dinitrophenyl sera. Immunochemistry, 1974, v.11, N 12, p.803−809.
  55. Pranek P., Olsovska Z., Simek L. Nonprecipitating pig anti-dinitrophenyl antibody: factors influencing the conversion into precipitating antibody. Eur.J.Immunol., 1979, v.9, N 6, p.696−701.
  56. Fust G., Medgyesi G.A., Franek F. Complement consumption by immune complexes containing various pig anti-DNP antibodies and DNP-serum albumin. Immunochemistry, 1976, v.14, N 4, p.259−262.
  57. Goding J.M. Antibody production by hybridomas. J.Immunol. Methods, 1980, v.39, p.285−3o8.
  58. Goers J.W., Schumaker V.N., Glovsky M.M., Rebek J., MullerEberhard H.J. Complement activation by a univalent hapten -antibody complex. J.Biol.Chem., 1975, v.250, N 13, p.4918−4925.
  59. Hanson D.C., Yguerabide J., Schumaker V.N. Segmental flexibility of immunoglobulin G antibody, molecules in solution: a new interpretation. Biochemistry, 1981, v.20, N 24, p. 6842−6852.
  60. Hanson D.C., Yguerabide J., Schumaker V.N. Segmental flexibility of antibody and C1q. Hoppe-Seyler's Z.Physiol.Chem., 1981, v.362, N 1, p.22.
  61. Herskovits T.T. Difference spectroscopy. In: Methods in En-zymology. London, New York, Acad. press, 1967, v.11, p.748−755.
  62. Herskovits T.T., Sorensen Sr.M. Studies of the location of tyrosyl and tryptophyl residues in protens. 1. Solvent perturbation data of model compounds. Biochemistry, 1968, v.7,1. N 7, p.2523−2533.
  63. Hoffmann L.G. Antibodies as allosteric proteins. I A hypothesis. Immunochemistry, 1976, v.9, N9, p.725−730.
  64. Hoffmann L.G. Antibodies as allosteric proteins. II. Comparison with experiment. Immunochemistry, 1976, v.13, N 9» p.731−736.
  65. Hsia S., Putman F.W. The cleavage of human ?'-globulin by papain. J.Biol.Chem., 1961, v.236, N 1, p.122−135.
  66. Huber R. Antibody structure. Trends Biochem.Sci., 1976, v.1, N 8, p.174−178.
  67. Huber R. Sratial structure of immunoglobulin molecules. -Klin.Wochenschr., 1980, v.58, p.1217−1231.
  68. Jaton J-C., Huser H., Blatt J., Pecht I. Circular dichroism and fluorescence studies of homogeneus antibodies to type III pneumococcal polysaccharide. Biochemistry, 1975, v. 14, H 24, p.5308−5311.
  69. Jaton J-C., Huser H., Broun D.G., Givol D., Pecht I., Schle-ssinger J. Conformational changes induced in a homogeneousanti-type III pneumococcal antibody by oligosaccharides of increasing size. Biochemistry, 1975, v.14, N 24, p.5312−5315.
  70. Jaton J-C., Huser H., Reisen W.F., Schlessinger J., Givol D. The binding of complement by complexes formed between a rabbit antibody and oligosaccharides of increasing size.
  71. J.Immunol., 1976, v.116, N 5, p.1363−1366.
  72. Jefferis R., Stanworth D.R. The relationship between the papain sensitivity of human G globulin and their heavy chain subclass. FEBS Symp., 1969, v.15, p.213−219.
  73. Klein M., Haeffner-Cavaillon N., Isenman D.E., Rivat C., Navia M.A., Davies D.R., Dorrington K.J. Expression of biological effector functions by immunoglobulin G molecules lacking the hinge region. Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1981, v.78, N 1, p.524−528.
  74. Koltun W.L. Physicochemical properties of p-carboxyphenyl-azoinsulins. J.Amer.Chem.Soc., 1957, v.79, N 21, p.5681−5686.
  75. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T 4. Nature, 1970, v.227, p.680−685.
  76. Lancet D., Pecht I. Kinetic evidece for hapten-induced conformational transition in immunoglobulin MOPC 460. Proc. Natl.Acad.Sci. USA, 1976, V.73, N 10, p.3549−3553.
  77. Lancet D., Licht A., Schechter I., Pecht L. Hapten-induced allosteric transition in the light chain dimer of an immunoglobulin. Nature, 1977, v.269, N 5631, p.827−829.
  78. Langone J.J. Protein A of Staphylococcus aureus and related immunoglobulin receptors produced by Streptococci and Pneu-monococci. Adv.Immunol., 1982, v, 32, p.158−252.
  79. Lerner E.A. How to make a hybrydoma. Jale J. Biol, and Med. 1981, v.54, p.387−402.
  80. Lovejoy C., Holowka D.A., Cathou R.E. Nanosecond fluorescence spectroscopy of pyrene butyrate antipyrene antibody complexes. — Biochemistry, 1977, v.16, p.3668−3672.
  81. Matsushima M., Marquart M., Jones T.A., Colman P.M."Bartels K., Huber R. Crystall structure of the human Pab fragment Koland its comparison with the intact Kol molecule. J.Mol.Biol., 1978, v.121, N 4, p.441−459.
  82. Metzger H. Effect of antigen binding on the properties of antibody. Adv.Immunol., 1974, v.18, p.169−207.
  83. Metzger H. The effect of antigen on antibody: recent studies. Cont.Top.Mol.Immunol., 1978, v.7, p.119−152.
  84. Metzger J-J., Fougereau M. Heavy chain heterogeneity of G immunoglobulin in the pig. FEBS Symp., 1969, v, 15, p.187−191.
  85. Milstein C., Clark M.R., Galfre G., Cuello A.C. Monoclonal antibodies from hybrid myelomas. In: Immunology 80 / Eds Fougereau M., Dansset J., Acad. Press, New York, 1980, v.1,. p.17−33.
  86. Natvig J.B., Turner M.W. Localization of Gm markers to different molecular regions of the Fc fragment. Clin.exp.Immunol., 1971, v.8, p.685−69o.
  87. Nezlin R.S., Krilov M.Yu., Rokhlin O.V. Different susceptibility of subclasses of rat IgG2 to tryptic digestion. -Immunochemistry, 1973, v.10, N 9, p.651−652.
  88. Nikola N.A., Leach S.J. Interpretation and applications of thermal difference spectra of proteins. Int.J.Pept.Prot. Res., 1976, v.8, N 4, p.393−415.
  89. Nishioka K., Constantopoulos A., Saton P.O., Mitchell W.M., Najjar V.A. Characteristics and isolation of the phagocytosis-stimulating peptide, tuftsin. Biochim.Biophys.Acta, 1973, v.310, N 1, p.217−229.
  90. Noelken M.E., Nelson C.A., Buckley C.E., Tanford C. Cross conformation of rabbit 7S-immunoglobulin and its papain-cleaved fragments. J.Biol.Chem., 1965, v.24o, N 2, p.218−224.
  91. Novotny J., Vitek A., Franek F. Analysis of interspecies variability of immunoglobulin lambda chains reveals differencesin domain tertiary structures. J.Hoi.Biol., 1977, v.113, N 4, p.711−718.
  92. Itfovotny J., Pranek P., Michael M., Haber E. Aminoacid seqen-ce of normal (microheterogenous) porcine immunoglobulin chains. Biochemistry, 1977, v.16, H 17, p.3765−3772.
  93. Olsovska Z., Pranek P. Peptic fragmentation of pig antibodies. Haematologia, 1981, v.14, N 1, p.107.
  94. Olsovska Z., Pranek P., Matusek V. Limited enzymatic cleavage of pig immunoglobulin G and of specific antibodies. I. Different resistance of various antibody types to cleavage bypepsin. Polia biologica, Prague, 1982, v.28, IT 2, p.87−97.
  95. Padlan E.A., Segal D.M., Spande T.P., Davies D.R., Rudikoffo
  96. S., Potter M. Structure at 4,5 A resolution of a phosphoryl-choline binding Pab. Nature, London, 1973, v.245, p.165−167.
  97. Pecht I., Ehrenberg B., Galef E., Arnon R. Conformational changes and complement activation induced upon antigen binding to antibodies. Biochem.Biophys.Res.Commun., 1977, v.74, N 4, p.1302−1309.
  98. Pecht I. The common mechanism of hapten binding to immunoglobulins and its reletion to domain interaction. Hoppe-Sey-ler's Z.Physiol.Chem., 1981, v.362, N 1, p.2o.
  99. Phillips J.H., Babcock G.P., Nisnioka K. Tuftsin: a naturally occurring immunopotentiating factors. I. In vitro enhancement of murine natural cell-mediated cytotoxicity. J.Immunol., 1981, v.126, N 3, p.915−921.
  100. Pilz I., Kraky 0., Licht A., Sela M. Shape and volume of anti-poly (D-alanyl) antibodies in the presence and absence of tetra-D-alanine as followed by small-angle X-ray scattering. Biochemistry, 1973, v. f2, N 24, p.4998−5005.
  101. Pilz J., Kraifcky 0., Karush P. Changes of the conformation of rabbit IgG antibodies caused by the specific binding of a hapten. Eur.J.Biochem., 1974, v.41, N 1, p.91−96.
  102. Poljak R.J., Amzel L.M., Chen B.L., Phizackerley R.P., Saul P. The three-dimensional structure of the Pab1 fragment of a human myeloma immunoglobulin at 2,0-A resolution. Proc. Natl.Acad.Sci. USA, 1974, v.71, N 9, p.3440−3444.
  103. Poljak R.J. Three-dimensional structure, function and genetic control of immunoglobulins. Nature, 1975, v.256,1. N 5516, p.373−376.
  104. Poljak R.J., Amzel L.M., Chen B.L., Chiu Y.Y., Phizaeker-ley R.P., Saul P., Ysern X. Three-dimensional structure and diversity of immunoglobulins. Cold Spring Harbor Symp.Quantit.Biol., 1977, v.41, part 2, p.639−645.
  105. Porter R.R., Reid K.B.M. Activation of the complement system by antibody-antigen complexes: the classical pathway. Adv.Prot.Chem., 1979, v.33, p.1−71.
  106. Privalov P.L., Khechinashvili N.N. A thermodynamic approach to the problem of stabilization of globular protein structure. A calorimetric study. J.Mol.Biol., 1974, v.86, N 3, p.665−684.
  107. Privalov P.L., Scanning microcalorimeters for studing maccromolecules. Pure and Appl.Chem., 1980, v.52, N 2, p.479−497.
  108. Privalov P.L. Stability of proteins. Proteins which do not present a single cooperative system. Adv.Prot.Chem., 1982, v.35, p.1−104.
  109. Rajan S.S., Ely K.R., Abola E.E., Wood M.K., Colman P.M., Athay R.J., Edmundson A.B. Three-dimensional structure of th? Meg IgG1 immunoglobulin. Mol.Immunol., 1983, v.20, N 7, p.787−799.
  110. Reid K.B.M., Porter R.R. Subunit composition and structure of subcomponent C1q of the first component of human complement. Biochem, J., 1976, v.155, N 1, p.19−23.
  111. Saul F.A., Amzel L.M., Poljak R. Preliminary refinement and structural analysis of the Fab fragment from humaneimmunoglobulin New at 2,0 A resolution. J.Biol.Chem., 1978, v.253, N 2, p.585−597.
  112. Schiffer M., Girling R.L., Ely K.R., Edmundson A.B. Structure of a jl-«fcype Bence) jones proteins at 3,5-A resolution. Biochemistry, 1973, v.12, N 23, p.4620−4631.
  113. Schlessinger J., Steinberg I.Z., Givol D., Hochman J., Pecht J. Antigen-induced conformational changes in antibodies and their Fab fragments studies by circular polarization of fluorescence. Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1975, v.72, N 7, p.2775−2779.
  114. Silverton E.A., Navia M.A., Davies D.R. Three-dimensional structure of an intact human immunoglobulin. Proc.Natl. Acad.Sci. USA, 1977, v.74, N 11, p.5140−5144.
  115. Stewart G.A., Stanworth D.R. Effect of acid treatment upon the susceptibility of rabbit IgG to proteolytic cleavage with enzymes. Immunochemistry, 1975, v.12, N 8, p.713−721.
  116. Tabachnik M., Sobotka H. Azoproteins. I. Spectrophotometric study of amino acid azo derivatives. J.Biol.Chem., 1959, v.234, N 7, p.1726−1730.
  117. Tabachnik M., Sobotka H. Azoproteins. II. A spectrophotometric study of the coupling of diazotized arsanilic acid with proteins. J.Biol.Chem., 1960, v.235, N 4, p.1051−1054.
  118. Timofeev V.P., Dudich I.V., Sykulev Yu.K., Nezlin R.S. Rotatonal correlation times of IgG and its fragments spinlabeled at carbohydrate or protein moeties. Spatially fixed position of the Fc carbohydrate. PEBS Lett., 1978, v.89, Iff 2, p.191−195.
  119. Timofeev V.P., Dudich I, V., Sykulev Yu.K., Nezlin R.S., Pranek P. Slow conformational changes in anti-dansyl antibody as a consequence of hapten binding. Demonstration by ESP spectra. PEBS Lett., 1979, v.102, Iff 1, p.103−106.
  120. Tischenko V.M., Zav’yalov V.P., Medgyesi G.A., Potekhin S., Privalov P.L. A thermodynamic study of cooperative structures in rabbit immunoglobulin G. Eur.J.Biochem., 1982, v.126,p.517 521.
  121. Tumerman L.A., Nezlin R.S., Zagyansky Y.A. Increase of the rotational relaxation time of antibody molecule after complex formation with dansyl-hapten. PEBS Lett., 1972, v.19, N 4, p.290−292.
  122. Turner M.W., Bennich H.H., Natwig J.B. Simple method of subtyping human G-myeloma proteins based on sensitivity to pepsin digestion. Nature, 1970, v.225, p.853−860.
  123. Valentine R.C., Green N.M. Electronmicroscopy of an anti-body-hapten complex. J.Mol.Biol., 1967, v.27, Iff 3, p.615 617.
  124. Veretennikova N.J., Chipens G.I., Iffikiforovich G.V., Be-tinsh Ya.R. Rigin, another phagocytosis-stimulating tetrapeptide isolated from human IgG. Int.J.Pept.Prot.Res., 1981, v.17, N 4, p.430−435.
  125. Vuk-Pavlovic S., Blatt Y., Claudemans C.P.J., lancet D., Pecht I. Hapten-linked conformational equilibria in immunoglobulins XRPC-24 and J-539 observed by chemical relaxation. Biophys.J., 1978, v.24, N 1, p.161−170.
  126. Vuk-Pavlovic S., Isenman D.E., Elgavish G.A., Gafni A., Licht A., Pecht I. Hapten-induced structural changes in rabbit immunoglobulin G with specifically mercuriated inter-heavy chain disulfide. Biochemistry, 1979, v.18, N 7, p.1125−1129.
  127. Weininger R.B., Richards P.P. Combining regions of pntibodies, Immunochemistry of proteins, 1979, v.3, p.123−166.
  128. Willan K.J., Waallace K.H., Jaton J-C., Dwek R.A. The use of gadolinium as a probe in the Pc region of a homogenous anti-(type III Pneumococcal polysaccharide) antibody. -Biochem.J., 1977, v.161, N2, p.205−211.
  129. Wright J.K., Rngel J., Brandt D.Ch., Jaton J-C. Independence of the binding of domain-specific ligands to Pab and Pc suggests that antigen-induced effects in IgG antibodies are not allosteric. PEBS Lett., 1978, v.90, N 1, p.79−83.
  130. Wright J.K., Engal J., Jaton J-C. Selective reduction and proteolysis in the hinge region ofljlganded and unliganded antibody. Identical kinetics suggest lack of major conformational change in the hinge region. Eur.J.Immunol., 1978, v.8, p.309−314.
  131. Wright J.K., Tschopp J., Jaton J-C., Engel J. Dimeric, tri-meric and tetrameric complex of immunoglobulin G fix complement.- Biochem.J., 1980, v.187, N 3, p.775−780.
  132. Yguerabide J., Epstein H.F., Stryer L. Segmental flexibility in an antibody molecule. J.Mol.Biol., 1970, v.51, N 3, p.537−590.
  133. Zavodszky P., Jaton J-C., Venyaminov S.Yu., Medgyesi G.A. Increase of conformational stability of homogeneous rabbit immunoglobulin G after hapten binding. Mol.Immunol., 1981, v.18, N 1, p.39−46.
  134. Zavodszky P., Jaton J-C., Medgyesi G.A. Domain-domain interactions in homogenous rabbit immunoglobulin G. Hoppe-Seyler's Z.Physiol.Ghem., 1981, v.362, N 1, p.20.
  135. Zav’yalov V.P., Abramov V.M., Skvortzov V.G., Troitsky G.W. Conformational transitions of antibodies induced by hapten binding. Biochim.Biophys.Acta, 1977, v.493, p.359−366.
  136. Zav’yalov V.P. Physico-chemical investigations of immunoglobulin structure in solution. Haematologia, 1981, v. 14,1. К 1, p.73−78.
  137. Zidovetski R., Licht A., Pecht I. Effect of interchain disulfide bond on hapten binding properties of light chain dimer of protein 315. Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1979, v.76, N 11, p.5848−5852.
  138. Zikan J. Interaction of pig Pab ^ fragments with protein A from Staphylococcus aureus. Polia microbiol., Prague, 1980, v.25, N 3, p.246−253.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!