Бактериологические посевы

ХАНТЫ-МАНСИЙСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ СРЕДНЕЕ — ПРОФЕССИОНАЛЬНОЕ ОБРАЗОВАНИЕ СПЕЦИАЛЬНОСТЬ 60 110−0407 «Лабораторная диагностика»

Дневник Преддипломной практики Студента 3-го курса, группа 304−1

Каирбекова Мавлета Алихановича Место прохождения практики:

Бактериологическая лаборатория города Ханты-Мансийска Срок практики с «19"апреля по «8"мая 2010 г.

Руководители практики:

Общий: Мезенова Н. И. главная мед сестра ОКБ

Отчёт:

Я, Каирбеков Мавлет Алиханович, студент 3 курса, 304/1 группы. Отделения «Лабораторная диагностика». Проходил практику по профилю специальности с 19.04.10 по 8.05.10 года в Бактериологической лаборатории под руководством Гималовой Натальи Алексеевны.

За время практики я овладел следующими навыками:

Посев мазков из зева и носа на дифтерию (капельная группа);

Пересев мазков из зева и носа (капельная группа);

Посев содержимого женских половых органов на генитальные тест системы (капельная группа);

Посев первичного кала (кишечная группа);

Покраска мазков по грамму;

Посев содержимого женских половых органов на микрофлоре;

Посев мочи на микрофлоре;

Посев мазков из зева на микрофлоре;

Отвивка на Рессель;

Постановка короткого пёстрого биохимического ряда;

Постановка дисков на антибиотикочувствительность;

Постановка пробы на плазмокоагуляцию;

Реакция аглютинации на стекле;

Приготовление сред;

Разлив сред в чашки и пробирки;

Микроскопирование.

Забор смывов с операционных палат.

Забор воздуха.

бактериологический посев моча смыв

1 день практики-19.04.10

МИКРОФЛОРА

1. Посев мочи

2. Посев мокроты Описание манипуляций :

1. Мочу собирают в стерильную баночку и доставляют в лабораторию. Берут среднюю порцию утренней мочи после тщательного туалета наружных мочеполовых органов. Моча поступает в регистратуру. Лаборант присваивает анализу номер и передаёт мочу на посев. Берём 2 мл. мочи, переносим в пробирку с 0.5 мл среды ТТХ и убираем в термостат. Через 2 часа вытаскиваем из термостата и смотрим на цвет, если цвет изменился на красный, появилась муть, следовательно, в моче имеются микроорганизмы. Для дальнейшего исследования ставим мочу на аппарат ROBOBAKT. На следующий день при появлении роста на питательных средах врач-бактериолог учитывает результаты.

2.Мокрота доставляется в темной баночке с мелкими стеклами на дне для удобного эмульгирования. Вся работа ведется в маске, в перчатках и над пламенем горелки. Готовим чашки со средами:2-е кровяные, шоколадный агар, ЖСА, САБУРО (подписываем дату).Также готовим 5 пробирок с 2% пептоной водой для разведений. Из 1-й пробирки выливаем пепт. воду во флакон с мокротой, смешиваем. Затем из 1-го разведения 0.5 мл. переносим во 2-ю пробирку и т. д. до 5 го разведения. После этого из 5 го разведения переносим 0.1мл. на кровяной и шоколадный агар (втираем шпателем, на шоколадном агаре делаем кольцо со St. aureus). Из 3-го разведения по 0.1 мл. на кровяной агар (ставим антибиотик), ЖСА, Сабуро (подписываем дату). Шоколадный агар и кровяной агар с антибиотиком ставим в CO2 термостат, а остальные в простой термостат все на 24 часа.

Роспись руководителя:___________________

2 день практики-20.04.10

1. — Посев мазков из зева и носа.

2. — Посев содержимого женских половых органов.

Описание манипуляций :

1. Материал для исследования забираем сухим стерильным тампоном. Берётся чашка с кровяным агаром, на ней ставится число и номер. Прикасаемся тампоном со всех сторон по середине чашки, затем берем петлю, обжигаем над пламенем спиртовки, остужаем и рисуем перпендикулярные штрихи по всей чашке (тампон-петля). Убираем в термостат на сутки.

2. Посев содержимого женских половых органов:

Содержимое женских половых органов забирают тампоном в стерильные пробирки и доставляем в лабораторию. Подписываем на чашке номер, присвоенный в регистратуре. Сеется на кровяной агар по методу Голда. Берём тампон и проводим всеми сторонами несколько раз по середине чашки Петри, тампон ставим обратно в пробирку. Над пламенем спиртовки обжигаем петлю и начинаем растирать нанесённый материал, не отрываясь, рисуем 40 штрихов вверх, обжигаем петлю и наносим 4 штриха поперёк предыдущего сектора. Петлю обжигаем, остужаем и наносим 4 штриха не касаясь большого сектора, поперёк первых 4 — х штрихов. Петлю обжигаем, остужаем и поперёк вторых 4 — х штрихов наносим ещё 4 штриха не доходя до сектора А.

Роспись руководителя:___________________

3 день практики-21.04.10

1. — Посев желчи.

2. — Посев раны.

Описание манипуляций :

1 Взятие исследуемого материала:

Желчь собирают при зондировании в процедурном кабинете, отдельно по порциям А, В, С в три стерильные пробирки, либо во время операции с помощью шприца в одну пробирку, соблюдая правила асептики. Полученные порции желчи доставляют в лабораторию не позднее 1−2 часов от момента взятия, следя за тем, чтобы пробирка находилась в строго вертикальном положении.

Посев исследуемого материала: По 0,1 мл каждой порции желчи высевают на чашку с кровяным агаром; по 0,5 мл на чашку со средой Эндо; в соотношении 1:9 в среду накопления. Для обеспечения роста анаэробов посев производят на среду для контроля стерильности. Посевы и исходный материал помещают в термостат при 37°. На второй день учитывают результаты первичных посевов. В случае бактериального роста на кровяном агаре, подсчитывают количество колоний каждого вида, пересчитывают на 1 мл исследуемого материала и после микроскопии окрашенных по Граму мазков, проводят дальнейшую идентификацию культур и определяют чувствительность к антибиотикам. При подозрении на рост анаэробных культур посевы инкубируют в анаэростате. С целью выделения сальмонелл, в последующие 3 дня делают высевы на элективные среды (Висмут-сульфит агар) как со среды накопления, так и с нативной желчи, которая в течение 3 дней выдерживается в термостате.

2. Посев раны:

Если забранный материал доставлен в лабораторию сухим тампоном в пробирке, то сеем на Кровяной агар по Голду и заливаем 5 мл сахарного бульона для обогащения. Чашку ставим в термостат на сутки. Если забранный материал доставлен в лабораторию в пробирке залитый сахарным бульоном, то сеем на кровяной агар штрихами (если есть подпись на «анаэробы», то добавляем среду Шадлера, сеем методом штриха). Кровяной агар ставим в термостат, а среду Шадлера в эксикатор с газпаком.

Роспись руководителя:___________________

4 день практики-22.04.10

1- Пересев желчи.

2- покраска мазков по Граму Описание манипуляций :

1.Пересев производится на Висмут-сульфит агар петлей (методом штриха). Чашку карандашом по стеклу делим пополам. В верхней части чашки пишем №, число и букву Н — нативная желчь. В нижней части букву О — среда обогащения.

2. Покраска мазков по Граму:

Мазок фиксируем 3 кратным движением над огнем спиртовки.

На стекло накладываем бумажку, пропитанную Генциан Виалет, заливаем водой на 2 мин.

Снимаем бумагу и заливаем раствором Люголя на 2 мин.

Обесцвечивать спиртом в течение 30 сек.

Смываем водой и накладываем бумагу пропитанную фуксином. Заливаем водой на 2 мин. Смываем водой и высушиваем.

Гр + (синий), Гр — (красный).

Роспись руководителя:___________________

5день практики-23.04.10

Капельная группа:

1. — Посев мазков из зева и носа (на дифтерию).

2- Посев содержимого женских половых органов на генитальные тест системы.

Описание манипуляций :

1. Материал для исследования забираем сухим, стерильным тампоном. Отдельно из зева и из носа. Берётся чашка Клауберга, на ней ставится число и номер. Прикасаемся тампоном со всех сторон, делая площадку, отрываемся и делаем штрихи до середины чашки (нос), затем с другой стороны точно также засеваем зев. Ставим на 24−48 часов в термостат при tє 37є С.

2.Посев содержимого женских половых органов на генитальные тест системы:

Мазок берётся стерильным тампоном, в стерильную пробирку. В лаборатории пробирка с мазком заливается физ. раствором и стоит 5 минут, затем эмульгируется (т.е. перемешивается). Затем закапываем по 0,2 мл на пластинку в каждую луночку специальное масло, кроме 6. Закрываем крышкой и помещаем в термостат на 24 — 48 часов при tє 37єС.

Этот тест определяет уреаплазму, микоплазму, грибы, трихомонады и т. д. (18 луночный планшет), а 24 луночный планшет определяет уреаплазму, микоплазму, грибы, трихомонады, нейссерии, стафилококк, стрептококк и т. д.

Роспись руководителя:___________________

6 день практики-24.04.10

1. — Исследование на коклюш.

2. — Пересев мазков из зева и носа (на дифтерию).

Описание манипуляций :

1. Забор материала проводят из носоглотки (с задней стенки глотки), сухим стерильным тампоном, загнутым под тупым углом, язык фиксируют шпателем.

Засевается последовательно на две чашки КУА (казеиново-угольный агар) методом штриха, несколько секторов. В центре чашки тампоном производим «сброс» основной массы микроорганизмов, для получения изолированных колоний.

В агар добавляется пенициллин для подавления сопутствующей флоры.

После засева чашки помещаем в термостат с большим количеством влаги. Просмотр чашек проводят через 48- 72 часа с помощью стереомикроскопа. При отсутствии роста через 72 часа, чашки ставим в термостат ещё на 48 часов. При отсутствии роста через 5 суток выдаём окончательный результат (отрицательный).

При наличии роста колонии коклюша имеют видвыпуклые, гладкие, ровные, блестящие края, серого цвета в виде капелек ртути.

При обнаружении коклюша делают мазок на микроскопию (красим по Граму) и ставим реакцию агглютинации с коклюшной сывороткой.

Если материал доставили в лабораторию в среде АМИЕС сеем на две чашки (с антибиотиком и без).

Сухой тампон сразу после Влажный тампон забора высевают на чашку с антибиотиком. (для перемещения)

высевают 0,1 мл. втирая

шпателем в среду с пенициллином.

Манипуляция (см. 5 день) Роспись руководителя:__________________

7 день практики-26.04.10

1. Исследование на коклюш.

2. — Микроскопия мазков на трихомонады.

Описание манипуляций :

1. Манипуляция (см. 6 день)

2. Микроскопия мазков на трихомонады:

Для проведения исследования берут чистое, обезжиренное стекло, обжигаем над пламенем горелки. С помощью петли берём каплю исследуемого материала и наносим её на стекло, добавляем специальное масло и смотрим под стереомикроскопом. Отмечаем только живые, подвижные, не повреждённые трихомонады.

Роспись руководителя:___________________

8день практики-27.04.10

1.Посев ликвора, крови, носоглоточной слизи (на менингококк).

2. Посев, носоглоточной слизи (на менингококк).

Описание манипуляций :

1. Посев ликвора (на менингококк):

Посев осуществляют в ламинарном боксе. Ликвор сеют на среды: кровяной агар, шоколадный, сывороточный агар по 0,1мл, втирают шпателем (каждый раз новым) и оставляют на 24 часа в СО2-инкубаторе. Также делаем нативный мазок ликвора и окрашиваем методом Лёффлера и по Граму. Остатки ликвора засеваем в среду обогащения (0,1% полужидкий агар, в соотношении 4 мл. полужидкого агара + 1 мл. ликвора) Если ликвора мало в 4 мл. 0,1% полужидкого агара вносим 1 мл. сыворотки крупного рогатого скота + 0,2−0,5 мл. ликвора.

2.Посев, носоглоточной слизи (на менингококк):

Сеется на чашку сывороточного агара у постели больного, если поступает в лабораторию в среде АМИЕС, то посев проводим в лаборатории. В лабораторию чашка с посевом доставляют в грелках, сразу помещают в СО2-термостат при температуре 37 градусов.

Предварительно на чашку наносят по 2 диска с ристомецином (чтобы убить сопутствующую флору), инкубируем 24 часа, если нет роста оставляем ещё на сутки. Если есть рост, проводим микроскопию, биохимический ряд, выдают результат.

Роспись руководителя:___________________

9 день практики-28.04.10

Кишечная группа

1.Посев желчи.

2. Пересев желчи.

Описание манипуляций :

1.Посев желчи:

Взятие исследуемого материала:

Желчь собирают при зондировании в процедурном кабинете, отдельно по порциям А, В, С в три стерильные пробирки, либо во время операции с помощью шприца в одну пробирку, соблюдая правила асептики. Полученные порции желчи доставляют в лабораторию не позднее 1−2 часов от момента взятия, следя за тем, чтобы пробирка находилась в строго вертикальном положении.

Посев исследуемого материала:

По 0,1 мл каждой порции желчи высевают на чашку с кровяным агаром; по 0,5 мл на чашку со средой Эндо; в соотношении 1:9 в среду накопления. Для обеспечения роста анаэробов посев производят на среду для контроля стерильности. Посевы и исходный материал помещают в термостат при 37 градусах. На второй день учитывают результаты первичных посевов. В случае бактериального роста на кровяном агаре, подсчитывают количество колоний каждого вида, пересчитывают на 1 мл исследуемого материала и после микроскопии окрашенных по Грамму мазков, проводят дальнейшую идентификацию культур и определяют чувствительность к антибиотикам. При подозрении на рост анаэробных культур посевы инкубируют в анаэростате. С целью выделения сальмонелл, в последующие 3 дня делают высевы на элективные среды (Висмут-сульфит агар) как со среды накопления, так и с нативной желчи, которая в течение 3 дней выдерживается в термостате.

2. Пересев желчи:

Высев производится на Висмут-сульфит агар петлей (методом штриха). Чашку карандашом по стеклу делим пополам. В верхней части чашки пишем №, число и букву Н — нативная желчь. В нижней части букву О — среда обогащения.

Роспись руководителя:___________________

11 день практики-30.04.10

1. Первичный посев кала.

2. Посев мочи Описание манипуляций :

1. Первичный посев кала (на бакпосев):

Посев осуществляем на 2-е плотные питательные среды: Плоскирева и Левина, а для детских посевов добавляем чашку со средой Эндо, для дальнейшего исследования на энтеропатогенные кишечные палочки. Нанесение материала начинают со среды Плоскирева, Левина, Эндо. После нанесения материала начинаем его втирать в среду шпателем. Сначала делаем площадку 1−2 см и далее не касаясь этой площадки штрихами распределяем нанесённый материал. Распределив материал по поверхности агара на одной чашке, переносим шпатель, не обжигая его, на вторую, а затем на третью чашку. Втирание шпателем начинаем со среды Эндо, Левина, Плоскирева.

При таком посеве получается рост изолированных колоний. Полученные изолированные колонии служат для пересева и получения чистой культуры изучаемого микроба. При высокой степени обсеменённости легко выявить патогенные микроорганизмы с прямого посева. После прямого посева испражнения заливаем средой обогащения (селенитовый бульон) в соотношении 1:5. Все посевы помещаем в термостат при температуре 37 градусов на 24 часа. Через сутки со среды обогащения делаем высев на дифференциально-диагностическую среду Висмут-сульфит агар (для выделения сальмонелл).

2.Посев мочи:

Мочу собирают в стерильную баночку и доставляют в лабораторию. Берут среднюю порцию утренней мочи после тщательного туалета наружных мочеполовых органов: мытьё кипячёной водой с мылом. 20−30 мл надосадочная часть с грушей над спиртовкой сливается в хлорамин. Осадок перемешивается и 0,5 мл переносится в пробирку, заливается селенитовой средой обогащения 4,5 мл, двойной концентрации 1:1 и прямой посев мочи на среду Эндо петлей. Ставим в термостат на сутки. На второй день пересев на среду ВСА петлей.

Роспись руководителя:___________________

12 день практики-03.04.10

1.Посев кала (на псевдотуберкулез).

2.Приготовление мазков на микроскопию со среды Блаурокка для определения бифидобактерий и окраска по Граму.

Описание манипуляций :

1. Посев кала (на псевдотуберкулез):

Кал берется в сухую стерильную пробирку предварительно взвешенную (на пробирке указан вес) — в количестве 1 гр. с помощью алюминиевой петли. Доставляют в лабораторию не позднее 2 часов. Пробирки с испражнениями больных помещают в морозильную камеру бытового холодильника (t-10−15 градусов) на 18−24 часа. После этого пробирки переносят в холодильник при t-+6−12 градусов на 4 часа. Через 18−24 часа производят первый высев на среду Эндо. Перед посевом пробирки не взбалтывают. Посев производят бактериологической петлей штрихами. Пересевы с первичной среды накопления, если не выделилась культура, повторяют на 3, 5 и 7 день. Чашки с посевами инкубируют в термостате: со средой Эндо — при t-22−25 градусов. Посевы просматривают через 24−36 часов.

2. Приготовление мазков на микроскопию со среды Блаурокка для определения бифидобактерий:

Предметное стекло обжигаем над пламенем горелки. Со дна пробирки пипеткой набираем 0,1 мл среды, наносим на предметное стекло, при этом растирая, высушиваем на воздухе. Фиксируем 3-х кратным проведением над пламенем горелки. Красим по Грамму.

Роспись руководителя:___________________

13день практики-04.05.10

1. — Посев кала на стафилококк количественным методом.

2. — Отвивка на среду Ресселя.(см. день 14)

Описание манипуляций :

1. Посев кала количественным методом:

Кал берётся в сухую стерильную пробирку, предварительно взвешенную (на пробирке будет указан вес) — в количестве 1 гр. с помощью алюминиевой петли после естественной дефекации и доставляют в лабораторию не позднее 1 часа. Взвешиваем пробирку с калом и заливаем забуференным раствором для дизбактериоза (см. по таблице). Например: если 0,3 гр. кала, то 0,1 мл забуференного раствора. Делаем основное разведение 1:10. Из основного разведения 10−1 переносим пипеткой (каждый раз меняя пипетку) 0,1 мл материала во 2-ю пробирку, затем тщательно перемешивая из 2-й в 3-ю переносим 0,5 мл материала, из 3-й в 4-ю — 0,5 мл материала, из 4-й в 5-ю — 0,5 мл. Приготовили следующие разведения 10−3, 10−4, 10−5, 10−6. Из основного разведения 10−1 проводим посев на среды Плоскирева, Левина.

Из 10−4 — на среду желточно-солевого агара.

Из 10−5 — на среду Эндо и кровяной агар.

Из 10−6 — на среду Эндо.

Разведения сбрасываем в емкость с 3% хлорамином. Чашки и основное разведение ставим в термостат на сутки. На второй день пересев с основного разведения на среду Висмут-сульфит агар.

Роспись руководителя:___________________

14 день практики-05.05.10

1. — Отвивка на среду Ресселя.

2. — Постановка короткого пестрого биохимического ряда.

Описание манипуляций :

1.Отвивка на Рессель: Отвивка проводится для первичной идентификации энтеробактерий. Отвивка колоний, которые отмечены врачом. Прокаливаем петлю докрасна, остужаем, берём изолированную колонию и наносим её на Рессель методом «косяка». Сначала делаем посев на «косяк», затем прокалываем до дна. Ставим в термостат на сутки.

2. Постановка короткого пёстрого биохимического ряда:

С плотной питательной среды берём отмеченную врачом культуру (колонию) и вносим в 1 пробирку, делаем посев сначала на косяке снизу вверх, затем проколом до дна, затем пробу на индол. Во 2 и 3 пробирку делаем посев проколом до дна. Добавляем 4 пробирку с мочевиной, если лактоза негативная или лактоза позитивная (по просьбе врача). В 4 маслёну (мочевину) эмульгируем.

Рессель Гинчев 0,4% МПА Мочевина Роспись руководителя:___________________

15 день практики-06.05.10

Средоварка

1. Приготовление сред.

2. Разлив сред в чашки.

3. Разлив питательных сред в пробирки.

Описание манипуляций :

Приготовление кровяного агара: В качестве основы используют сухой питательный агар, 2% агар, рН 7,4 — 7,6. К расплавленному и охлаждённому до 45єС агару добавляют 5% (5 мл крови на 100 мл питательной среды) дефибринированной бараньей, лошадиной или кроличьей крови, цитратной или дефибринированной крови человека без антибактериальных препаратов. Смесь тщательно перемешивают, чтобы не образовалось пены и разливают в стерильные чашки Петри, слоем 3 — 4 мм. Слой агара должен быть равномерно окрашен в красный цвет. Хранят не более 2 — х недель при tє 4 — 6є С.

Приготовление желточно — солевого агара: В качестве основы используют элективный солевой агар для стафилококков. По прописи, указанной на этикетке, готовят 1,8 — 2% агар, рН 7,2 — 7,4. К расплавленному и охлаждённому до 45є - 50є С агару, соблюдая правило асептики, добавляют 20% желточной взвеси. Тщательно смешивают агар с желточной взвесью, разливают по 20 мл в чашки Петри. Хранят в холодильнике в течении двух недель.

Агар с гретой кровью (шоколадный агар):

Принцип: Прогревание крови способствует освобождению из эритроцитов факторов роста Х и V необходимых для культивирования гемофилов.

Приготовление: 1) К 100 мл расплавленного и охлаждённого до 80єС питательного агара, рН 7,4, добавляют 10 мл дефибринированной крови лошади или человека (без консервантов), тщательно перемешивают, после чего помещают в водяную баню и постоянно встряхивая держат при t 70є - 80єС до тех пор пока цвет агара не станет шоколадным (25 — 30 мин).2)5 мл дефибринированной крови кролика и 100 мл питательного агара тщательно взбалтывают и ставят на 2 — 3 мин в водяную баню при 80єС. Затем добавляют ещё 5 мл крови и вновь ставят в водяную баню на 2 — 3 мин. Шоколадный агар должен иметь светло — коричневую окраску. Среду разливают в чашки Петри. Хранят не более 2 — х недель при t 4 — 6єС.

Роспись руководителя:___________________

16 день практики-07.05.10

Санитарная группа

1. Смывы в операционном блоке.

2. Исследование воздуха.

Описание манипуляций :

1. Смывы в операционном блоке:

Смыв делают стерильным тампоном который находится в пробирки залитый 1% пептонной водой с гипосульфатом — 0,5% (для нейтрализации дез. р-ров) 4 — 5 мл.

Порядок взятия смывов:

Смывы берутся с любой поверхности площадью 10 см. После чего тампон опускают в пробирку, стараясь не задеть края пробирки. Взятая проба регистрируется и отправляется в лабораторию для дальнейших исследований.

В лаборатории смывы сеют на среду Эндо с помощью петли. С этих забранных смывов берут 0,2 мл 1% пептонной воды и вносят в среду обогащения и солевой бульон 5 мл, затем ставят в термостат на 18−24 часа при температуре 37 градусов. Через сутки делают повторный высев: с 1% пептонной воды на среду Эндо, а с солевого бульона на ЖСА (пробирки сбрасываем), чашки ставим в термостат на 18−24 часа.

Если есть рост колоний, то с материалом работает врач. Если нет колоний, то Эндо в убивку, а ЖСА ещё на 24 часа в термостат.

2.Воздух в помещениях

— седиментационный метод — основан на механическом оседании микроорганизмов.

— аспирационный метод — основан на активном просасывании воздуха — принудительном осаждение микроорганизмов из воздуха. (Является основным методом).ОМЧ (общее микробное число)-количество единиц колоний в 1 м³ воздуха, отбирается на мясопептонный агар (ставим в термостат на 37 градусов на 24 часа вторые сутки при комнатной температуре)-смотрим присутствие St. aureus в воздухе. Также по 250 л. воздуха отбираем на среды ЖСА (Гр+ кокки) — ставим в термостат на 37 градусов на 24 часа вторые сутки при комнатной температуре, и набираем 250 л. Воздуха на среду Сабуро (в термостат на 28 градусов на 3−5 суток).

Роспись руководителя:___________________

17 день практики-08.05.10

1. Исследование воды (В санитарной группе).

2 Прием биоматериала на бак. исследования.(регистратура)

3 Выдача в отделения ОКБ стерильной посуды для забора проб.(регистратура)

4 Ведение учета выдачи, возврата лабораторной посуды (регистратура).

5 Ведение маркировки рабочих журналов, регистрация поступающих анализов.(регистратура)

6 Сортировка биоматериала по производственным группам. регистратура) Описание манипуляций :

1.Санитарно-бактериологическое исследование воды:

Для исследования вода забирается из следующих источников:

центральное водоснабжение;

колодцы различного типа;

открытые водоёмы (реки, озёра, моря);

плавательные бассейны;

сточные воды.

Посев водопроводной воды:

Спиртовкой обжигаем кран, из которого будем проводить забор воды, чтобы в бутыль не попали микробы, находящиеся на поверхности крана. Затем пускаем воду, чтобы немного стекла. После чего набираем в специальный бутыль 333 мл воды. Производим посев: 1 мл воды в МПА, в чашку Петри (2 чашки).

10 мл воды в ГНС концентрированный 3 пробирки.

100 мл воды в ГНС концентрированный 3 бутылки. 1 мл воды в ГНС неконцентрированный. Ставим в термостат при температуре 37 градусов.

Роспись руководителя:___________________

18 день практики-29.04.10

1. Посев кала на дизбактериоз.

Описание манипуляций :

1. Посев кала на дизбактериоз:

Кал забирают в сухую стерильную пробирку, предварительно взвешенную (на пробирке указан вес) — в количестве 1 грамма, с помощью алюминиевой петли после естественной дефекации и доставляют в лабораторию не позднее 1 часа.

Взвешиваем пробирку с калом, заливаем забуференным раствором (по таблице). Во 2-ю пробирку наливаем 9,9 мл заб. р-ра; в 3-ю, 4-ю, 5-ю, 6-ю — по 4,5 мл; в 7-ю — 9,9 заб. р-ра.

Также берём 6 пробирок со средой Блаурокка. В 1 ряд пробирок наливаем по 9,0 мл, а во 2 ряд — по 9,9 мл среды Блаурокка. Подписываем разведения на пробирках: 1 ряд 5, 7, 9 разведение; 2 ряд 6, 8, 10 разведение.

Из 10−1 разведения делаем ряд последующих разведений в этом же агаризированном буфере, каждый раз меняя пипетки. Делаем 10-кратное разведение. 0,1 мл из 10−1 разведения переносим в 10−3, 10−4, 10−5, 10−6, 10−7 — по 0,5 мл; из 10−7 в 10−9 — 0,1 мл.

Из 10−3 разведения сеем на чашки: Лактобациллы, Сабуро по 0,1 мл втираем шпателем досуха возле спиртовки.

Из 10−4 — ЖСА Из 10−5 — Эндо, кровяной агар, Калинэ, Лактобациллы.

Из 10−6 — Эндо, кровяной агар.

Для выявления анаэробной микрофлоры делаем высев в среду Блаурокка (на дно) из разведений 10−5, 10−7, 10−9 в 2-е пробирки. В 5,7,9 по 1мл, а в 6,8,10 по 0,1 мл.

Разведения сбрасываем в емкость с 3% хлорамином. Чашки со средами, основным разведением (10−1) и пробирки со средой Блаурокка помещаем в термостат на 24 часа, при температуре 37 градусов. Чашки со средой Лактобациллы — в эксикатор.

Роспись руководителя:___________________