Влияние анаприлина на активность ферментов обмена регуляторных пептидов в нервной ткани крыс

ВЛИЯНИЕ АНАПРИЛИНА НА АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ ОБМЕНА РЕГУЛЯТОРНЫХ ПЕПТИДОВ В НЕРВНОЙ ТКАНИ КРЫС биологический фермент гипоталамус крыса Сметанин В. А., Бардинова Ж. С., Даркина Ю. Ф., Венедиктов А. А., Генгин М.Т.

Важное место в современной фармацевтической практике занимают препараты, воздействующие на адренергическую систему, в частности в-адреноблокаторы, к числу которых относится анаприлин. За счет блокады в₁-адренорецепторов он оказывает выраженное угнетающее влияние на деятельность сердца, а за счет блокады в₂-адренорецепторов повышает тонус бронхов и периферических сосудов, но при длительном постоянном применении анаприлина повышение тонуса сосудов сменяется его снижением. Общепризнано, что первичная фармакологическая реакция анаприлина связана с блокированием специфических рецепторов. Однако все многообразие фармакологических эффектов (в частности, способность вызывать сонливость, депрессию и т. д.) трудно объяснить только с этой позиции.

В последнее время установлено, что при введении адреномиметиков и адреноблокаторов наблюдаются изменения в уровне целого ряда нейропептидов: ангиотензина II, вазопрессина, вещества Р, в-эндорфина. Многие из которых играют важную роль в этиологии и патогенезе алкоголизма, наркомании, шизофрении, депрессивно-маниакального синдрома — заболеваний, в развитии которых участвует и адренергическая система.

Возможно, что через пептидергическую систему опосредуется значительная доля физиологических эффектов, вызванных изменениями в функционировании адренергической системы. Активная форма регуляторных пептидов образуется в результате протеолитического процессинга пропептидов, в конечной стадии которого принимают участие основные карбоксипептидазы — экзопептидазы, отщепляющие «лишние» остатки аргинина и лизина с С-конца пропептидов. К основным карбоксипептидазам относятся карбоксипептидаза Н (КПН) и фенилметилсульфонилфторид-ингибируемая карбоксипептидаза (ФМСФ-КП), исследование их активности при введении в-адреноблокатора анаприлина может способствовать уточнению биологической роли этих ферментов в механизмах взаимодействия адренергической и пептидергической систем.

Объектом исследования служили гипофиз, гипоталамус, стриатум, гиппокамп, большие полушария и четверохолмие самцов крыс массой 350−400 г. В работе использовали две группы крыс: контрольную и опытную. Животные опытной группы получали в течение двух недель в качестве единственного источника жидкости водный раствора анаприлина, содержащий 5% раствор сахарозы, при этом средняя доза препарата составляла 150 мкг/кг/сут; животные контрольной группы — 5% раствор сахарозы.

Активность ферментов определяли флюорометрическим методом: КПН с использованием в качестве ингибитора гуанидиноэтилмеркаптоянтарной кислоты и дансил-фен-ала-арг в качестве субстрата при рН 5,6 [4]; ФМСФ-КП — с использованием ингибитора ФМСФ и субстрата дансил-фен-лей-арг. Концентрацию белка в пробах определяли по методу Lowry. Достоверность отличий между средними определяли с использованием t-критерия Стьюдента.

Результаты исследований показали (таблица 1), что активность ФМСФ-КП в группе животных, потреблявших анаприлин в гипофизе, гиппокампе и четверохолмии была выше в 1,9, 5,3 и 1,7 соответственно по сравнению с контролем. Активность КПН также увеличивалась в опытной группе по сравнению с контрольной: в гипоталамусе в 2,4 раза, в стриатуме в 3 раза и в четверохолмии в 2 раза.

Таблица 1. Влияние потребления анаприлина на активность ФМСФ-КП и КПН (нмоль продукта, образовавшегося за 1 мин. инкубации на 1 мг белка, М±m, n = 4−5).

Примечание: достоверность отличий: * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001 относительно контроля Таким образом, получение животными анаприлина приводит к существенному увеличению активности ферментов обмена регуляторных пептидов в ряде отделов мозга. Это свидетельствует о том, что активность КПН и ФМСФ-КП регулируется состоянием адренергической системы. Изменение активности исследуемых карбоксипептидаз через адренергическую систему может влиять на уровень регуляторных пептидов в мозге и плазме крови, а через пептиды — на функционирование других систем организма, и, соответственно, на состояние сердечно-сосудистой системы, а также на эмоциональный статус, поведение и другие функции высшей нервной деятельности.

1. Преображенский Д. В., Сидоренко Б. А., Романова Н. Е., Шатунова И. М. Клиническая фармакология основных классов антигипертензивных препаратов // Consilium Medicum. — 2000. — Т. 2, № 3. — С. 99−127.

2. Лебедев А. А. Система ренин-ангиотензин // Соровский образовательный журнал. — 1998, № 3. — С. 35−40.

3. Нейрохимия // Под ред. Ашмарина И. П., Стукалова П. В. — М.: Изд-во Института биомед. химии РАМН, 1996. — 470 с.

4. Fricker L.D., Snyder S.H. Purification and characterization of enkephalin convertase, an enkephaline-synthesizing carboxypeptidase // J. Biol. Chem. — 1983. — 258, № 18. — P. 10 950−10 955.

5. Вернигора А. Н., Никишин Н. Н., Генгин М. Т. Частичная характеристика основной фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы из головного мозга кошки // Биохимия.- 1995. 60, № 11. С. 1860−1866.

6. Lowry O.H., Rosebrought N.J., Farr A.G., Randall R.J. Protein measurement with Folin phenol reagent // J. Biol. Chem. — 1951. — 193, № 1. — P. 265−275.