Иммунотерапия в борьбе с опухолями

Министерство здравоохранения Украины Винницкий национальный медицинский университет им. Н. И. Пирогова Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии Реферат на тему:

Иммунотерапия больных со злокачественными опухолями Работу выполнила аспирант І года обучения Кириченко О.В.

Винница, 2010

Биотерапия

В соответствии с современным определением (Rosenberg SA, 1997), биотерапия (Бт) включает в себя лечение пациентов с онкологическими заболеваниями путем активизации защитных систем организма или при помощи введения естественных полимерных молекул. Под определение средств Бт попадает широкий спектр разнообразных факторов, включающих наряду с противоопухолевыми вакцинами (ПВ) продукты современных биотехнологий с использованием моноклональных антител (МкАТ), цитокинов (Цк), клеточных факторов, а также средств, регулирующих активность генома, и другие молекулярные процессы жизнедеятельности клетки. Методы Бт вовлекают в противоопухолевую защиту иммунную систему, а также воздействуют на факторы и механизмы, контролирующие процессы ангиогенеза и апоптоза [1, 2].

Перспективы Бт — это не только создание современных препаратов, число которых и далее будет пополняться, но и формирование целостного взгляда на природу новообразований на основе понимания молекулярно-клеточных механизмов этой патологии на уровне целостного организма и, соответственно, целенаправленное конструирование индивидуализированных методов воздействия на них. Использование методов Бт возвращает нас к системному взгляду на болезнь, который определяет состояние антиканцерогенеза «как систему комплексного воздействия, направленного как на саму опухоль, так и на организм в целом» (Р.Е. Кавецкий). Возвращение к Бт в первую очередь связано с методами иммунотерапии, предоставляющей возможность включения в систему иммунологического распознавания и ответа отдельных соединений с прогнозируемым эффектом. В отличие от химиотерапии, оказывающей прямое цитотоксическое действие на опухолевую клетку, при Бт такое воздействие происходит опосредованно. Возможна биохимиотерапия, когда применение биопрепаратов и цитостатиков способствует достижению синергизма их действия [3, 4]. Современные биотерапевтические подходы к системному и регионарному лечению при онколгических заболеваниях также предполагают реализацию «адресной» доставки лекарств и биологических молекул за счет привлечения наноразмерных носителей — полимерных и металлических наночастиц, липосом, микрокапсул, липопротеинов и различных наносборок [5, 6].

Вакцинотерапия

Вакцины в онкологии — это биологические препараты для активной иммунопрофилактики и иммунотерапии при злокачественных новообразованиях, содержащие опухолевые антигены. На их введение система иммунитета отвечает каскадом реакций, которые в конечном итоге приводят к целенаправленному лизису опухолевых клеток. В настоящее время вакцинотерапия (Вт) является признанным методом лечения многих видов злокачественных опухолей. ПВ способны индуцировать иммунный ответ как против первичной опухоли, так и против метастазов [7−9].

Профилактические ПВ предназначены для людей, принадлежащих к так называемым группам риска. Их действие направлено на индукцию специфического иммунного ответа, предупреждающего развитие опухолей, индуцированных онкогенными вирусами. К профилактическим можно отнести вакцины против вирусов гепатита В и С (гепатокарцинома) [10, 11] и против вирусов папилломы человека (рак шейки матки) [12, 13]. Терапевтические ПВ создаются на основе опухолевых клеток (ОК) или конструируются с использованием идентифицированных опухолеассоциированных антигенов (ОАА). Профилактическое применение вакцин этой группы невозможно из-за многочисленности различных видов опухолей и непредсказуемости их появления, потому такие ПВ используются для лечения больных с уже развившимися злокачественными новообразованиями [7, 9].

ПВ, предназначенные для клинического применения, должны быть безопасными, эффективными против широкого спектра опухолей одного гистологического типа, а также давать воспроизводимые результаты и сохранять стабильность свойств при длительном хранении [8, 14]. Важным фактором, определяющим эффективность ПВ, является размер опухоли, поэтому Вт целесообразно проводить для профилактики рецидивов и метастазов после максимального уменьшения опухолевой массы (хирургического лечения) [7, 9]. Основную стратегию конструирования ПВ можно рассматривать как выявление мишеней иммунного ответа (ОАА), создание иммуногенных форм и условий для распознавания таких антигенов, а также индукцию пролиферации и повышение активности сенсибилизированных иммунокомпетентных клеток [10, 14]. Поэтому наиболее ответственным этапом создания ПВ является выбор антигенов, обладающих способностью стимулировать эффективные противоопухолевые иммунные реакции. Несмотря на существенный прогресс в области идентификации ОАА, их использование для конструирования ПВ сопряжено с некоторыми трудностями, главной из которых является то, что значительная часть ОАА выявляется на определенных стадиях дифференцировки нормальных клеток в антенатальном и постнатальном периодах, поэтому к большинству этих антигенов организм толерантен [8, 9]. Трудности также вызывают способы индукции специфической реакции иммунной системы на ОК, особенно с учетом вариабельности биологических свойств опухоли (наличие клонов с различным потенциалом роста и степенью дифференцировки), что часто сопровождается изменением экспрессии ОАА на каждом этапе развития опухолевого процесса [14, 15].

Достижения молекулярной биологии делают процесс создания ПВ комплексным и разнообразным, однако не существует универсальной технологии, которая давала бы возможность получать наиболее эффективные ПВ. Вместе с тем выработаны категории параметров, по которым каждая вакцина может быть достаточно точно охарактеризована и воспроизведена. Первая категория характеризует используемый биоматериал как источник ОАА. Определяющими параметрами являются антигенная основа вакцины (цельные ОК, вирусный онколизат, нативные или рекомбинантные пептиды, ганглиозиды и так далее), валентность по антигенам (моновалентная/поливалентная) и антигенная гистосовместимость (аутологичная/аллогенная/ксеногенная) [7, 9, 14].

Вторая категория характеризует использование методов и технологий для усиления иммуногенности выбранного антигена. Она включает применение адъювантов, вирусных векторов, дендритных клеток (ДК), генных технологий [1, 14].

В настоящее время разработано огромное количество разнообразных ПВ, которые можно разделить на две основные группы [8, 14, 17]. Первую группу составляют вакцины из целых или лизированных аутологичных (клетки от больного, для которого готовится вакцина) или аллогенных (от разных пациентов или из нескольких клеточных линий) ОК: модифицированных физическими факторами (облучение, замораживание — оттаивание и др.) [17, 18]; модифицированных с помощью адъювантов различной природы — химических (денитрофенил, формалин) [19, 20], бактериальных (БЦЖ, продукты синтеза Bacillus subtilis) [1, 12], вирусных (вирусы коровьей оспы, болезни Ньюкасла) [19]; модифицированных генами (ИЛ-2, ФНО, интерферонов, ГМ-КСФ, костимулирующих молекул, TAG7) [23−26].

Присутствующий широкий спектр ОАА определяет возможность использования таких ПВ при соответствующей опухоли без оценки экспрессии отдельных антигенных детерминант. Вакцины этой группы поливалентны и изначально более иммуногенны, о чем свидетельствуют случаи утраты активности вакцин по мере их очистки. В последние годы интерес к «цельноклеточным» вакцинам снова возрос, так как благодаря методам генной инженерии в ОК можно ввести новые гены антигенов или гены Цк, повышающие их иммуногенность.

Вторая группа ПВ базируется на генетически идентифицированных ОАА и включает: очищенные естественные или рекомбинантные ОАА [14, 27]; синтетические пептиды [18, 19]; ДНК [7, 13]; рекомбинантные вирусы (аденовирусы, вирус оспы (vaccinia, avipox)) [10, 11] и бактерии (BCG и Lysteria) [9, 12]; белки теплового шока [13]; антиидиотипические вакцины (на основе идиотипических детерминант иммуноглобулинов) и т. п. Каждый вариант вышеперечисленных ПВ может использоваться для смешивания, трансфекции или трансдукции антиген-презентирующих клеток или же применяться с разнообразными адъювантами или Цк [7, 9, 13].

Некоторые группы исследователей в качестве альтернативы цельноклеточным и моновалентным антигенным вакцинам применяют клеточные экстракты или полуочищенные протеины. Например, при меланоме используются секретированные белки или фрагменты клеточной мембраны (большие поливалентные иммуногены) [9, 17]. В качестве альтернативной вакцины также широко применяются шапероны, несущие наборы пептидов, включая опухоль-специфические белки, выделенные из аутологичных опухолей [7, 14]. Особенно перспективными кандидатами для вакцинотерапии пациентов с распространенными формами злокачественных опухолей, в том числе и резистентными к стандартному лечению, являются активированные ДК, которые представляют лимфоцитам пептидные фрагменты ОАА в ассоциации с молекулами комплекса гистосовместимости (HLA). Преимуществом таких вакцин является возможность индукции ответа против всех антигенов, меющихся в опухоли, без необходимости их идентификации. Для нагрузки ДК ОАА разработаны различные методы, включая нагрузку синтетическими пептидами, опухолевыми лизатами, опухолевой РНК. Эффективность дендритно-клеточных ПВ широко продемонстрирована в экспериментальных и клинических исследованиях [7, 9, 17, 18].

Одним из многообещающих направлений представляется разработка ПВ на основе дендритом, которые получают с помощью гибридомной технологии при слиянии ОК и незрелых ДК. ДК в составе противоопухолевых вакцин используют совместно с опухолевыми АГ в качестве мощного эндогенного адъюванта, который вызывает индукцию специфического иммунного ответа, опосредованного ЦТЛ, в организме реципиента. ДК-вакцинотерапия относится к методам специфической активной ИТ, на которую в настоящее время возлагают большие надежды. Стандартная процедура получения вакцины включает генерацию незрелых аутологичных ДК путем инкубации их предшественников (CD34±клеток, моноцитов) с цитокинами в различных комбинациях. Наиболее часто используют: ГМ-КСФ + ИЛ-4 и ГМ-КСФ + ФНО-б. Проходят испытания такие факторы как лиганд Flt3, лиганд c-kit, TGF-в1 и CD40L. Затем незрелые ДК нагружают опухолевыми АГ, инкубируют с факторами, индуцирующими их созревание (ЛПС, цитокины ИЛ-1, ГМ-КСФ и ФНО-б и др.), затем функционально полноценные клетки реинфузируют пациенту [7, 8].

К основным свойствам ДК относятся:

1) уникальная способность собирать Т-клетки на своей поверхности за счет наиболее высокой экспрессии собственных молекул главного комплекса гистосовместимости II класса (HLA-DR, -DP иDQ) и молекул I класса;

2) способность при созревании экспрессировать молекулы CD80, CD86 и CD40, которые активируют соответствующие лиганды на Т-клетках — CD28, CTLA-4 и CD40L;

3) способность продуцировать ряд цитокинов, включая интерлейкин-12, который увеличивает иммунологический ответ за счет «направления» Т-клеток по пути дифференцировки их в Т-хелперы 1-ого типа;

4) способность захватывать растворимые антигены с помощью эндоцитоза;5) наличие эффективных механизмов для обработки (процессинга) сложных белков до иммуногенных пептидов;

6) способность выполнять высокодифференцированную роль в тимусе: индуцируют толерантность к собственным тканевым антигенам с помощью удаления развивающихся аутореактивных Т-клеточных клонов и др. Как показали исследования, количество ДК в организме больных злокачественными опухолями снижено, а сами они функционально неполноценны. ДК, выделенные из периферических лимфоидных и нелимфоидных тканей и периферической крови как экспериментальных животных с опухолями, так и онкологических больных не способны стимулировать специфический ответ цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) и слабо стимулируют Т-хелперы (Bernard J. et al., 1997; Gabrilovich D. et al., 1996; Zitvogel L. et al., 1996). Кроме того, на их поверхности было выявлено снижение экспрессии адгезивных и костимулирующих молекул, а также критическое снижение экспрессии HLA-молекул, особенно I класса.

Предполагается, что уменьшение количества ДК и потеря ими ряда функций может быть одной из главных причин отсутствия полноценного иммунного ответа на развивающуюся опухоль. ДК принадлежат к уникальным АПК, которые поглощают АГ, процессируют их и представляют в комплексе с молекулами МНС І или ІІ во вторичных лимфоидных органах для «ознакомления» (прайминга) «наивных» Т-клеток или активации Т-клеток со свойствами натуральных киллеров (НКТ) и НК-клеток.

ДК — очень важное связующее звено между естественным и адоптивным иммунитетом, способным активировать первичный и вторичный иммунный ответ, индуцировать развитие иммунологической памяти 9−12]. В отличие от других АПК, ДК обладают несколькими дополнительными механизмами, позволяющими им представлять АГ в комплексе не только с молекулами МНС II класса, но и МНС I класса, что является ключевым моментом для мощной генерации ЦТЛ, способных инактивировать опухолевые клетки. Это так называемое перекрестное представление, когда АГ, обычно представляемые молекулами МНС II класса, могут быть представлены также и молекулами I класса [13, 14]. Одновременно запускается цитокиновый каскад и включается второй активационный сигнал, опосредованный молекулами костимуляции В7, которые экспрессируются в большом количестве на поверхности зрелых ДК.

Два сигнала существуют для того, чтобы избежать ответа на свои АГ. В случае злокачественных новообразований именно отсутствие второго сигнала зачастую делает невозможным формирование противоопухолевого ответа клетками иммунной системы. Исходя из вышеизложенного, можно предположить, что возможными механизмами реализации эффекта ДК-вакцинотерапии может быть обеспечение достаточной иммуногенности опухолевых АГ; создание условий для их эффективной презентации; преодоление местной или системной иммуносупрессии [15, 16].

Существуют разные методы получения ДК-вакцин[17, 18, 19]: нагрузка ДК пептидами АГ опухолей; рецепторопосредованное поглощение макромолекулярного АГ; трансфекция ДК РНК опухоли, кодирующее АГ, плазмидной ДНК, вирусными векторами; обеспечение взаимодействия с некротизованными опухолевыми клетками или их отдельными фракциями, с апоптотическими опухолевыми клетками; образование химер ДК с опухолевыми клетками; использование экзосом.

Все еще не прекращаются попытки получения универсальной ДК-вакцины против широкого спектра опухолей. Для этих целей необходимо осуществить выбор подходящего опухолевого АГ для «нагрузки» ДК. Интерес исследователей в этом плане привлек опухолеассоциированный АГ MUC-1, экспрессирующийся на клетках многих эпителиальных опухолей (рак поджелудочной, молочной железы, рак почки и др.) и антигены, кодируемые такими генами, как MAGE, BAGE и GAGE, экспрессируемые клетками опухолей различных гистологических типов, но отсутствующие в клетках нормальных тканей; полипептидный компонент теломеразы — ее каталитическая субъединица — обратная транскриптаза (TERT), так как теломераза не активна в нормальных тканях, но реактивируется более чем в 85% типов опухолей. ДК уже достаточно широко используют для индукции и получения большого количества антигенспецифических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) не только in vivo, но и in vitro [10, 11, 12]. При этом сообщается о довольно высокой частоте стабилизации или регрессии опухоли или метастатических узлов, повышении продолжительности жизни больных онкологического профиля после их введения.

Первые попытки экспериментальной вакцинации ДК животных с опухолями были проведены в конце 1980 г. Успешно проведенные исследования способствовали дальнейшему развитию технологии вакцинотерапии ДК и ее использованию в клинике. Первые результаты клинических попыток использования ДК, нагруженных опухолевым АГ, для терапии больных злокачественными новообразованиями были описаны в 1996 г. у пациентов с неходжкинской В-клеточной лимфомой. У всех больных отмечали усиление специфического противоопухолевого иммунного ответа.

Из четырех исследованных случаев у одного пациента определяли полную регрессию опухоли, у другого — частичную. В этом же году вакцинацию ДК получили больные метастатическим раком простаты, а в 1998 г. — меланомой. В настоящее время клиническая эффективность противоопухолевых вакцин на основе ДК уже показана на большой группе больных, в частности с неходжкинской В-клеточной лимфомой, при локализованной и метастатической меланоме, при раке различной локализации, в том числе при раке яичника и миеломной болезни [13, 14, 15]. При этом использовались ДК различного происхождения (аутологичные и аллогенные), полученные из мононуклеаров периферической крови или костного мозга, различные способы нагрузки АГ. Для достижения эффекта вводилось от 2,6 до 37,6 млн зрелых ДК одноразово или за несколько раз (от 3 до 15) с различными временными интервалами (от 3 нед до нескольких месяцев). ДК, нагруженные АГ, вводили в метастатические лимфоузлы, перитуморально, внутривенно, внутрикожно или подкожно. Показано, что способ введения ДК существенно влияет на их распределение в лимфоидной ткани, и это необходимо учитывать в каждой конкретной клинической ситуации. В большинстве случаев ДК-вакцинотерапия не сопровождается развитием серьезных побочных эффектов, однако в единичных случаях у больных меланомой все же имело место развитие аутоиммунной патологии.

Еще одной достаточно серьезной проблемой ДК-вакцинотерапии является возможность индукции толерантности к опухоли в случае использования ДК с толерогенными свойствами, особенно велик риск при использовании клеток недостаточной степени зрелости. Остается также много нерешенных проблем, связанных с методами изготовления ДК-вакцин, выбором опухолевого АГ, конструированием наиболее эффективных протоколов их применения с учетом режимов и способов введения, качества и количества используемых клеток.

Остается актуальным поиск методов мониторинга, в частности иммуномониторинга проводимой ДК-вакцинотерапии, что позволило бы подходить к данному методу биотерапии опухолей на объективной основе и прогнозировать успех или неудачу планируемого вида лечения. Как показывает накопленный клинический опыт, для достижения эффективности ДК-вакцинотерапии необходимы максимальное уменьшение размеров опухоли (циторедуктивные операции, химио-, лучевая терапия), достаточная иммунокомпетентность организма-опухоленосителя и одновременная активная неспецифическая иммунотерапия: введение FLT-3L, ГМ-КСФ, низких доз ИЛ-1,2,7,12, интерферона-г, антител к CTLA-4, что позволит усилить противоопухолевый иммунитет и предотвратить реци-див либо отдалить его. Между тем следует отметить, что в процессе клинических испытаний противоопухолевые вакцины применяли больным лишь на запущенной стадии заболевания и зачастую при отсутствии успеха от стандартной терапии, то есть фактически в клинике эти вакцины до сих пор полноценно не апробировались. Многие испытания пока прошли лишь первую фазу и не включали контрольные группы. Можно предположить, что применение противоопухолевых ДК-вакцин будет более эффективно у больных со злокачественными новообразованиями на ранних стадиях процесса после проведения циторедуктивного лечения и адекватных иммунокорригирующих мероприятий.

Они сохраняют мощный антиген-презентирующий аппарат ДК и способны стимулировать цитотоксические лимфоциты с развитием полноценного противоопухолевого ответа. Важно, что презентация антигена Т-лимфоцитам происходит в сочетании со всем широким спектром костимулирующих молекул, секретируемых ДК. Такая стратегия позволяет создавать ПВ на основе аутологичных ДК и аллогенных ОК, охарактеризованных по антигенному составу, поэтому нет необходимости типировать больных и ОК по HLA. Результаты экспериментальных исследований позволили перейти к клиническому испытанию дендритомных вакцин, получены результаты I-II фазы исследований [16,18].

В Институте экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р. Е. Кавецкого НАН Украины проведены масштабные исследования по конструированию и изучению эффективности ПВ, приготовленных из аутологичных ОК с помощью продуктов синтеза B. subtilis В-7025 [11, 18]. Провеены доклинические и три фазы клинических исследований ПВ — доказана эффективность применения ПВ в комплексной терапии больных колоректальным раком [18], раком легкого [11], желудка [18, 19], молочной железы, яичника, злокачественными опухолями головного мозга. В экспериментальных и клинических исследованиях изучено влияние ПВ на характеристики специфического и неспецифического звеньев иммунной системы. Совокупность полученных результатов обосновывает применение разработанной ПВ в комплексной терапии больных онкологического профиля.

онкология биотерапия вакцина генотпрапия

Моноклональные антитела

МкАТ — это белки (иммуноглобулины), вырабатываемые В-лимфоцитами в ответ, а чужеродные вещества, селективно направленные против того или иного антигена, что является их существенным преимуществом по сравнению с классическими цитостатиками. За последние десятилетия созданы и изучены в предклинических исследованиях сотни МкАТ к различным антигенам, десятки из них дошли до стадии клинических испытаний, отдельные МкАТ получили разрешение на применение в качестве лекарственных средств. Максимален успех препаратов МкАТ, направленных либо против антигенов В-лимфоцитов (лечение пациентов с гемобластозами), либо против рецептора эпидермального фактора роста EGFR (лечение пациентов с солидными опухолями) [12, 14].

Ритуксимаб был первым противоопухолевым МкАТ, выпущенным швейцарской фирмой «Ф. Хоффман-Ля Рош Лтд» еще в 1997 г. Это химерные антитела против CD20, который экспрессируется более чем на 95% клеток В-клеточных неходжкинских лимфом (НХЛ); эффективен в комбинированном лечении при НХЛ высокой и низкой степени злокачественности, есть данные о способности МкАТ повышать чувствительность клеток лимфомы к действию химиопрепаратов [53, 54].

Офатумумаб — человеческие рекомбинантные МкАТ против CD20 («Glaxo SmithKline», Великобритания), проходит III фазу клинических испытаний для лечения хронического резистентного В-клеточного лимфоцитарного лейкоза. Алемтузумаб («Schering AG», Германия) — гуманизированные МкАТ против CD52, который экспрессируется на нормальных и малигнизированных Ти В-лимфоцитах, моноцитах, тимоцитах и макрофагах. Связывание МкАТ с CD52 приводит к лизису клеток вследствие активации комплемента, развития антитело-зависимой клеточной цитотоксичности, а также индукции апоптоза. Препарат выпущен на рынок в 2001 г. и применяется для лечения при В-клеточном хроническом лимфолейкозе (ХЛЛ) [13, 18].

Трастузумаб («Ф. Хоффман-Ля Рош Лтд», Швейцария) — гуманизированные МкАТ против антигена Her2/neu — члена семейства рецепторов (рецепторов тирозинкиназ) EGFR. Антиген гиперэкспрессирован на эпителиальных ОК протоков молочной и поджелудочной железы, яичников и пр. Гиперэкспрессия Her2/neu у 25−30% больных раком молочной железы коррелирует с плохим прогнозом течения заболевания и резистентностью опухоли к химиотерапии. Применение трастузумаба повышает частоту и длительность терапевтического эффекта.

Цетуксимаб («Boehringer Ingelheim Pharma», Германия) — химерные МкАТ против EGFR, экспрессия которых усилена, как отмечено выше, в клетках опухолей эпителиального происхождения (рак легкого, молочной железы, толстого кишечника) и сопровождается плохим прогнозом. Цетуксимаб ингибирует функции EGFR, сенсибилизирует цитотоксические эффекторные клетки в отношении экспрессирующих EGFR ОК, а также усиливает процессы апоптоза и способствует преодолению резистентности к лучевой и химиотерапии [14, 15].

Панитумумаб («Amgen», Швейцария) — рекомбинантные человеческие МкАТ против EGFR, разрешен для лечения колоректального рака [15, 16]. Синтезированы также препараты, блокирующие пролиферативный сигнал тирозинкиназы EGFR, — Эрлотиниб и Гефитиниб, которые проходят клинические испытания при немелкоклеточном раке легкого, раке молочной и поджелудочной железы.

В тех случаях, когда связывание МкАТ с соответствующим антигеном не приводит к гибели клеток, они могут использоваться как средства направленной доставки токсических агентов в опухоль. К таким препаратам относится иммунотоксин Гемтузумаб озогамицин («Wyeth», США) — конъюгированные с токсином озогамицином МкАТ к антигену миелоидных клеток CD33, который экспрессирован на бластных клетках миелоидного ряда в 80% случаев острого миелоидного лейкоза. После связывания МкАТ с антигеном комплекс попадает в клетку, где токсин освобождается и расщепляет ДНК.

При злокачественных лимфомах применяется также дени-лейкиндифитокс — мышиные МкАТ (анти-CD25)+дифтерийный токсин.

Существенный клинический эффект у больных НХЛ получен при применении радиоиммуно-конъюгатов: 90Y-ибритумомаб тиуксетан («Cell

Therapeutics", США) и 131I-тозитумомаб («Corina», Швейцария), — которые представляют собой мышиные МкАТ против CD20 В-лимфоцитов человека, конъюгированные с бета-излучателями 90Y и 131I. Важнейшим направлением целенаправленной (таргетной) противоопухолевой терапии является создание препаратов, блокирующих опухолевый ангиогенез путем воздействия через фактор роста эндотелия сосудов VEGF [10, 11]. К ним относятся гуманизированные МкАТ против VEGF — бевацизумаб («Ф. Хоффман-Ля Рош Лтд», Швейцария). Предотвращение взаимодействия VEGF с его рецепторами препятствует ангиогенезу, может разрушить уже сформировавшиеся сосуды и приводит к угнетению роста опухоли. Препарат эффективен у больных с опухолями почки и толстой кишки [12, 13, 14].

В России разрабатывается препарат на основе МкАТ ICO-25 к муциноподобному антигену мембран жировых глобул женского молока [68]; предклинические исследования показали возможность использования этих МкАТ для торможения роста опухолей эпителиального генеза, однако препарат обладает аллергизирующими свойствами. Разрабоана (НПЦ «Медбиоспектр», Россия) лекарственная форма нативных МкАТ против СD3-антигена Т-лимфоцитов человека, который экспрессируется на поверхности зрелых Т-лимфоцитов и тимоцитов, поэтому может быть использован для селективного подавления клеточного иммунитета.

В настоящее время проводятся исследования других возможных мишеней для воздействия с помощью МкАТ. К таким антигенам относятся фибронектин, EpCAM, интегрин, CD30, CD89, опухолеспецифичный антиген клеток рака почки, простат-специфичный мембранный антиген, раково-эмбриональный антиген и другие. МкАТ против этих антигенов показали многообещающие предклинические результаты. Перспективным представляется и разрабатываемое комбинированное применение МкАТ и фото динамической терапии.

Цитокины

Цк — биологически активные вещества пептидной природы, регулирующие широкий спектр процессов, протекающих в организме. Они вырабатываются преимущественно клетками иммунной системы, являясь одновременно и ее регуляторами; продуцентами Цк могут быть и эпителиоциты, а также эндотелиальные клетки. Цк участвуют в регуляции процессов эмбриогенеза, гемопоэза, иммунного ответа, мукозального гомеостаза, ангиогенеза, апоптоза, хемотаксиса. Поскольку продукция Цк определяет развитие ряда заболеваний, ведется по-иск возможностей их применения (или применения их антагонистов) в терапевтических целях. Использование Цк с целью модуляции иммунного ответа является методом лечения при многих опухолях. За последние десятилетия накоплен огромный экспериментальный и клинический материал применения отдельных Цк в терапии злокачественных новообразований как важного дополняющего звена комплексного воздействия. Перспективным представляется сочетание Цк с другими средствами Бт (ПВ, МкАТ), химиопрепаратами [12−14].

Цк применяются в комплексных схемах, включающих адоптивную клеточную терапию или Вт [1, 14, 15], используются для конструирования генномо-дифицированных [13−15] и ДК ПВ [7, 9, 18]. Для противо опухолевой терапии наибольший интерес представляют интерлейкины (ИЛ) -1б, -2, -4, -12 [72, 74, 76]; интерфероны — (ИФ-б, ИФ-г и их индукторы) [77, 78]; фактор некроза опухоли (ФНО-б) [79]; ГМ-КСФ. Показания к применению цитокинотерапии при различных формах новообразований существенно отличаются.

Генотерапия

Современные подходы к генной терапии при опухолях основаны, во-первых, на нормализации работы мутировавшего гена (онкогена или гена-супрессора) и, во-вторых, на обучении иммунной системы организма распознавать ОАА и активировать противоопухолевый иммунный ответ. Прогресс в генной биотехнологии позволил конструировать генные ПВ и другие биологически активные вещества. Вводя рекомбинантный ген или вирусный вектор в делящиеся клетки, можно восстановить утраченный генетический материал, исправить дефектные гены или усилить активность нужного гена.

Так, современные методы биотехнологии позволяют активировать гены-супрессоры злокачественного роста клеток, ускорить их апоптоз, повысить иммуногенность ОАА, увеличить способность эффекторных клеток распознавать ОК, изменять их обменные процессы [12, 13]. В целях снижения риска побочных эффектов, для внутриклеточной доставки генетического материала взамен вирусных векторов предлагаются наночастицы, например гидроксиапатита, хорошо адсорбирующие биомолекулы. Они могут применяться для увеличения специфичности терапии суицидными генами. Таким образом, можно отметить, что Бт как направление клинической онкологии длительное время оставалась на уровне научных разработок, но за последние десятилетия смогла преодолеть порог, разделяющий экспериментальные исследования и клиническую практику. Вместе с тем ее развитие затрагивает и другое бурно развивающееся направление — молекулярную биологию и внедрение в онкологию средств, созданных с помощью методологии этой науки. Наряду с адаптивной клеточной терапией и Вт, активно разрабатываемыми в последние десятилетия, в настоящее время внимание исследователей все больше привлекает применение МкАТ, генотерапии, вирусных векторов. Обобщая доступные в настоящее время данные можно с уверенностью сказать, что комплексное использование современных методов Бт открывает принципиально новые возможности в онкологии.

1. Ялкут СИ, Потебня ГП. Биотерапия опухолей. Киев: Книга-Плюс, 2010. 472 с.

2. Барышников АЮ. Биотерапия опухолей: неудачи и перспективы. Маммология 2007; 1: 13−6.

3. Gonzalez AB, Jimenez RB, Delgado PJR, et al. Biochemotherapy in the treatment of metastatic melanoma in selected patients. Clin Transl Oncol 2009; 11 (6): 382−6.

4. Cohen DJ, Hochster HS. Rationale for combining biotherapy in the treatment of advanced colon cancer. Gastrointest Cancer Res 2008; 2 (3): 145−51.

5. Torchilin VP. Targeted pharmaceutical nanocarriers for cancer therapy and imaging. AAPS J 2007; 9 (2): 15.

6. Саквина ОИ, Барышников АЮ. Липосомы в направленной доставке противоопухолевых препаратов. Рос биотер журн 2008; 7 (4): 80−5.

7. Kochenderfer JN, Gress RE. A comparison and critical analysis of preclinical anticancer vaccination strategies. Exp Biol Med 2007; 232: 1130−41.

8. Schlom J, Gulley JL, Arlen PM. Paradigm shifts in cancer vaccine therapy. Exp Biol Med 2008; 233: 522−34. 9. Itoh K, Yamada A, Mine T, Noguchi M. Recent advances in cancer vaccines: an overview. Jpn J Clin Oncol 2009; 39 (2): 73−80.

9.Chang MH, Chen TH, Hsu HM, et al. Prevention of hepatocellular carcinoma by universal vaccination against hepatitis B virus: the effect and problems. Clin Cancer Res 2005; 11: 7953−7.

10. Кlade CS, Wedemeyer H, Berg T, et al. Therapeutic vaccination of chronic hepatitis C nonresponder patients with he peptide vaccine IC41. Gastroenterol 2008; 134: 1385−95.

11. Kahn JA, Burk RD. Papillomavirus vaccines in perspective. Lancet 2007; 369: 2135−7.

12. Scarinci IC, Garcia FA, Kobetz E, et al. Cervical cancer prevention: new tools and old barriers. Cancer 2010; 116 (11): 2531−42.

13. Rosenberg S. Progress in human tumour immunology and іmmunotherapy. Nature 2001; 411 (6835): 380−4.

15. Mosca PJ, Hobeika AC, Clay TM, et al. Direct detection of cellular immune responses to cancer vaccines. Surgery 2001; 129 (3): 248−54.

16. Palena C, Schlom J. Vaccines against human carcinomas: strategies to improve antitumor immune responses. J Biomed Biotechnol 2010; 2010: 3806−97.

17. Потебня ГП, Лисовенко ГС, Чехун ВФ. Использование в клинической онкологии противоопухолевых вакцин на основе опухолевых клеток или их лизатов. Пробл клин мед 2006; 3 (7): 32−45.

18. Моисеенко ВМ, Данилов АО, Балдуева ИА и др.

I-II фаза клинической оценки эффективности генотерапии на основе аутологичных опухолевых клеток, модифицированных геном TAG7 у больных с диссеминированными солидными опухолями. Вопр онкол 2004; 50 (3): 293−303. 25.

19. Храновська НМ. Стратегія створення та результати терапевтичного застосування протипухлинних аутовакцин нового покоління на основі дендритних клітин. Онкол 2010; 12 (1): 134−9.