Полный фармакопейный анализ лекарственного препарата Ортофен

ГОУ ВПО «СЕВЕРО-ОСЕТИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ имени К.Л. ХЕТАГУРОВА»

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ СОГУ

КУРСОВАЯ РАБОТА

на тему

ПОЛНЫЙ ФАРМАКОПЕЙНЫЙ АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННОГО ПРЕПАРАТА ОРТОФЕН

Выполнил: студент 4-го курса фармацевтического факультета Щербаков Станислав Андреевич Владикавказ

Введение

Глава I. Литературный обзор

1.1 Фармакологическое действие лекарственного препарата «Ортофен»

1.2 Синтез действующего вещества лекарственного препарата «Ортофен»

1.3 Взаимосвязь структура — фармакологическая активность

1.4 Методы анализа лекарственного препарата «Ортофен»

Глава II. Экспериментальная часть

Глава III. Собственные исследования

Выводы

Актуальность темы

. Более чем 30-летний опыт клинического применения «Ортофена» (диклофенака натрия) привело к тому, что он был признан эталоном, «золотым стандартом» эффективности среди НПВП. И то, что сегодня существует более 50 фирменных наименований — дженериков (воспроизводимых лекарственных форм) этого препарата, дополнительно подтверждает этот факт.

В качестве объекта наших исследований был выбран «Ортофен», один из наиболее широко применяемых нестероидных противовоспалительных препаратов. В настоящее время на территории РФ зарегистрировано 7 субстанций ортофена зарубежных производителей и одна субстанция российского производства. Количество зарегистрированных в РФ различных лекарственных форм, содержащих диклофенак натрия, к 2005 году составило более 400 наименований, около 70% которых — таблетированные лекарственные формы.

Цель и задачи работы. Целью данной работы был полный фармакопейный анализ лекарственного препарата «Ортофен». Для реализации поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

· ознакомится с различными методами качественного и количественного определения;

· разработать методики качественного определения действующего вещества в таблетируемой лекарственной форме «Ортофен»;

· разработать методику количественного определения данного лекарственного препарата.

Глава I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1 Фармакологическое действие лекарственного препарата

Ортофен (Ortophenum) — натриевая соль 2- [(2,6 — дихлорфенил)-амино] - фенилуксусной кислоты.

Синонимы: Диклофенак, Вольтарен, Диклофенак натрий, Реводин, Фелоран, Афламин, Батафил, Делимой, Дикложесик, Дикломакс, Диклонак, Диралон, Инфланак, Линобол, Профенатин, Софарин, Валетан, Вотаксил, Диктогезик, Диклореум, Реводина, Сорелмон, Верал, Вольтарол, Вонафек, Вотрекс, Мобилак, Наклофен, Скип, Ультрафен, Румафен, Эрлинт, Вурдон Дикло, Алмирал, Ало-Дикло, Биоран, Блезин, Вернакс, Дифисал, Ксенид, Дигнофенак.

Всасывание

После приема внутрь таблеток, покрытых кишечнорастворимой оболочкой, диклофенак полностью всасывается в кишечнике. Хотя всасывание происходит быстро, однако его начало может быть отсрочено из-за наличия у таблетки кишечнорастворимой оболочки. После однократного приема 50 мг препарата C max отмечается в среднем через 2 ч и составляет 1.5 мкг/мл (5 мкмоль/л). Степень абсорбции находится в прямой зависимости от величины дозы. В случае приема таблетки диклофенака во время или после еды, прохождение её через желудок замедляется (по сравнению с приемом натощак), но количество всасывающегося диклофенака не изменяется.

После приема таблетки ретард 100 мг Cmax диклофенака в плазме достигается в среднем через 4 ч, среднее значение её составляет 0.5 мкг/мл (1.6 мкмоль/л). Прием пищи не оказывает клинически значимого влияния на всасывание активного вещества из таблеток ретард и его системную биодоступность.

В течение 24 ч наблюдения после приема таблетки ретард 100 мг концентрация диклофенака в плазме составляет в среднем 13 нг/мл (40 нмоль/л). Степень абсорбции находится в прямой зависимости от величины дозы препарата.

Всасывание диклофенака из суппозиториев начинается быстро, хотя скорость его всасывания меньше по сравнению с аналогичным показателем при приеме внутрь таблеток, покрытых кишечнорастворимой оболочкой. После применения суппозитория ректального, содержащего 50 мг активного вещества, Cmax диклофенака в плазме достигается в среднем в пределах 1 ч, но величина Cmax, рассчитанная на единицу применяемой дозы, составляет примерно 2/3 от соответствующего показателя, регистрирующегося после приема внутрь кишечнорастворимой таблетки. Степень абсорбции находится в прямой зависимости от величины дозы препарата.

Распределение

Связывание с белками сыворотки крови — 99.7%, преимущественно с альбумином (99.4%). Диклофенак проникает в синовиальную жидкость, где его Cmax достигается на 2−4 ч позже, чем в плазме крови. Через 2 ч после достижения Cmax в плазме концентрация диклофенака в синовиальной жидкости выше, чем в плазме, и её значения остаются более высокими на протяжении периода времени до 12 ч.

Метаболизм

Метаболизм диклофенака осуществляется частично путем глюкуронизации неизмененной молекулы, но, преимущественно, посредством однократного и многократного гидроксилирования и метоксилирования, что приводит к образованию нескольких фенольных метаболитов (3'-гидрокси-, 4'-гидрокси-, 5'-гидрокси-, 4', 5-дигидроксии 3'-гидрокси-4'-метоксидиклофенака), большинство из которых превращается в глюкуронидные конъюгаты. Два фенольных метаболита биологически активны, но в значительно меньшей степени, чем диклофенак.

Выведение

Общий системный плазменный клиренс диклофенака составляет 263±56 мл/мин. Конечный T½ составляет 1−2 ч. T½ 4-х метаболитов, включая два фармакологически активных, также непродолжителен и составляет 1−3 ч. Один из метаболитов, 3'-гидрокси-4'-метокси-диклофенак, имеет более длительный T½, однако этот метаболит полностью неактивен.

Около 60% дозы препарата выводится с мочой в виде глюкуроновых конъюгатов неизмененного активного вещества, а также в виде метаболитов, большинство из которых тоже представляют собой глюкуроновые конъюгаты. В неизмененном виде выводится менее 1% диклофенака. Оставшаяся часть дозы препарата выводится в виде метаболитов с желчью.

Фармакологическое действие:

Нестероидный противовоспалительный препарат, оказывает противовоспалительное, анальгезирующее (обезболивающее) и жаропонижающее действие, обусловленное угнетением продукции простагландинов. (Простагландины — биологически активные вещества, вырабатываемые в организме. Их роль в организме крайне многогранна, в частности, они ответственны за появление болей и отеков в месте воспаления).

По силе противовоспалительного и анальгетического действия превосходит ацетил — салициловую кислоту, бутадион и ибупрофен. По эффективности при ревматизме и болезни Бехтерева не уступает прединизолону и индометацину.

Показание к применению:

Применяют Ортофен (Диклофенак — натрий) при остром ревматизме, ревматоидном артрите, болезни Бехтерева, артрозах, спондилоартрозах. Первичная дисменорея (расстройство менструального цикла), аднексит (воспаление придатков матки). Как вспомогательное средство при инфекционно-воспалительных заболеваниях ЛОР — органов (уха, горла, носа).

Побочные явления:

Препарат обычно хорошо переносится и редко вызывает побочные явления. Возможны однако (особенно в начале лечения), боли в эпигастральной области, отрыжка, рвота, понос, а также головные боли, повышение артериального давления и легкое головокружение. Эти явления обычно проходят самостоятельно. В отдельных случаях возможны кожные аллергические реакции.

Противопоказание:

Препарат противопоказан при язве желудка и двенадцати перстной кишки и в первые 3 месяца беременности. Осторожность необходима при назначении больным, страдающим желудочно-кишечными заболеваниями. Препарат не назначают детям до 6 лет.

При длительном применении препарата необходимо контролировать картину крови.

Лекарственное взаимодействие:

Диклофенак может повышать концентрацию лития и дигоксина в плазме при одновременном применении с этими препаратами. Диклофенак, как и другие НПВП, может уменьшать эффект диуретиков. Одновременное применение диклофенака с калийсберегающими диуретиками может привести к повышению уровня калия в крови (в случае такого сочетания лекарственных средств данный показатель следует часто контролировать).

Диклофенак может быть назначен совместно с пероральными гипогликемическими препаратами и при этом эффективность последних не изменяется. Следует проявлять осторожность при использовании НПВП менее чем за 24 ч до начала применения или после окончания терапии метотрексатом, так как его уровень в крови (и, следовательно, токсичность) может повышаться.

Влияние НПВП на активность простагландинов в почках может усиливать нефротоксичность циклоспорина.

Форма выпуска:

Таблетки, покрытые оболочкой оранжевого цвета, растворимые в кишечнике; содержат по 0,025 г (25 мг) препарата (в упаковке 30 таблеток); 2,5% раствор в ампулах по 5 мл. Таблетки по 0,05 г. Таблетки ретард по 0,025; 0,05 и 0,1 г. Раствор для инъекций в ампулах по 3 мл. Свечи ректальные по 0,05 и 0,1 г. Гель, крем, эмульгель (1 г — 0,01 г ортофена) в тубах.

Условия хранения:

Список Б. В сухом, прохладном, защищенном от света месте.

1.2 Синтез действующего вещества лекарственного препарата «Ортофен»

Синтезированный в 1971 году, ортофен относится к классическим НПВП. За более чем 30-летний опыт клинического применения он признан эталоном, «золотым стандартом» эффективности среди НПВП. И то, что сегодня существует более 50 фирменных наименований (дженериков) этого препарата, дополнительно подтверждает этот факт.

Синтез действующего вещества Ортофена осуществляют из 2,6 — дихлорацетанилида и бромбензола. Образующийся N — (2,6 — дихлорфенилиндолинона — 2 подвергают щелочному гидролизу.

1.3 Взаимосвязь зависимость «структура — фармакологическая активность»

В результате изучения зависимости взаимосвязи «структура анальгезирующая активность» была выявлена следующая закономерность:

1. Ароматический характер ядра способствует проявлению анальгезирующей активности.

2. Анальгезирующей активность обладают наряду с фенольными производными нафталиновые и некоторые гетероциклические аналоги.

3. Введения в ядро электронодонорных групп не изменяет анальгезирующей активности.

Введение

 же электроноакцепторной нитрогруппы резко снижает физиологическую активность.

4.

Введение

в ароматическую аминогруппу эфиров алкильных групп изо — строения приводить к понижению анальгезирующей активности.

Введение

 же нормальных предельных радикалов, наоборот, повышает активность. Примером тому служит создание дикаина, который в 8−10 раз активнее кокаина. Однако токсичность кокаина в 2−3 раза выше.

5. Соединения, имеющие асимметричные радикалы у азота, не проявляют требуемой анальгезирующей активности.

Вторичные амины также обладают физиологическим эффектом.

1.4 Методы анализа лекарственного препарата «Ортофен»

Ортофен по физическим свойствам белый или белый с кремоватым оттенком, светло — кремового цвета кристаллический порошок, без запаха.

Ортофен представляет собой натриевую соль, мало растворимую в воде, легко — в метаноле и этаноле, практически нерастворимую в хлороформе.

К ФС на Ортофен (натрия диклофенак) прилагается рисунки ИКспектров, полосы которых должны полностью соответствовать ИК — спектрам испытуемым лекарственным веществам в области 4000 — 400 см^-1 .

Сущность метода: Инфракрасная (ИК) спектроскопия характеризуется широкой информативностью, что создаёт возможность объективной оценки подлинности и количественного определения лекарственных веществ. ИК — спектр однозначно характеризует все структуру молекулы. Различия в химическом строении меняют характер ИК — спектра. Важные преимущества ИК — спектрофотомерии — специфичность, быстрота выполнения анализа, высокая чувствительность, объективность получаемых результатов, возможность анализа лекарственных веществ в кристаллическом состоянии.

ИК — спектры измеряют, использую обычно взвеси лекарственных веществ в вазелиновом масле, собственное поглощение которого не мешает идентификации анализируемого соединения. Для установления подлинности используют, как правило, расположенную в интервале частоту 650 до1800 см^-1 так называемую область «отпечатков пальцев» (650−1500 см^-1), а также валентные колебания химических связей. В ГФ ХI рекомендованы два способа установления подлинности лекарственных веществ ИК — спектров. Один из них основан на сравнении ИК — спектров испытуемого вещества и его стандартного образца. Спектры должны быть сняты в идентичных условиях, т. е. образцы должны быть в одинаковом агрегатном состоянии, в одной и той же концентрации, единой должна быть скорость регистрации и т. д. Второй способ заключается в сравнении ИК — спектра испытуемого вещества с его стандартным спектром. В этом случае необходимо строго соблюдать условия, предусмотренные для снятия стандартного спектра, приведенные в соответствующей НТД (ГФ, ВФС, ФС). Полное совпадение полос поглощения свидетельствует об идентичности вещества. Однако полиморфные модификации могут давать различные ИК — спектры. В таком случае для подтверждения идентичности необходимо перекристаллизовать испытуемые вещества из одного и того же растворителя и вновь снять спектры. Подлинность устанавливают так же с помощью УФ — спектров. Раствор ортофена в 0,1 м натрия гидроксиде, максимум поглощения при 276 нм и минимум при 249 нм. Метод ультрафиолетовой спектрофотомерии используют также для количественного определения ортофена.

Сущность метода: Ультрафиолетовая спектрофотомерия — наиболее простой и широко применяемый в фармации адсорбционный метод анализа. Его используют на всех этапах фармацевтического анализа лекарственных препаратов (испытания подлинности, чистоты, количественного определения). Разработано большое число способов качественного и количественного анализа лекарственных форм методом ультрафиолетовой спектрофотомерии. Для идентификации могут быть использованы атласы спектров лекарственных веществ, систематизирующие сведения о характере спектральных кривых и значениях удельных показателей поглощения.

Известны различные варианты использования метода УФ — спектрофотометрии для идентификации. При испытаниях на подлинность идентифицируют лекарственные вещества по положению максимума светопоглощения. Чаще в фармакопейных статьях приведены положения максимума (или минимума) и соответствующие им значения оптических плотностей. Иногда используют метод, основанный на вычислении отношения оптических плотностей при двух длинах волн (они обычно соответствуют двум максимумам или максимуму и минимуму светопоглощения). Идентифицируют целый ряд лекарственных веществ также по удельному показателю раствора. Количественный спектрофотометрический анализ целесообразно комбинировать с установлением подлинности по УФспектру. В этом случае раствор, приготовленный из одной навески, можно использовать для обоих этих испытаний. Чаще всего при спектрофотометрических определениях применяют способ, основанный на сравнении оптических плотностей анализируемого и стандартного растворов. Определенных условий анализа требуют лекарственные вещества, способные образовывать кислотно-основные формы в зависимости от рН среды. В таких случаях необходимо предварительно подбирать условия, в которых вещество в растворе полностью будет находиться в одной из таких форм.

В ГФ ХI расширена область применения УФ — спектрофотометрии. Метод рекомендован для анализа многокомпонентных систем, а также для анализа лекарственных веществ, которые сами не поглощают свет в ультрафиолетовом и видимом областях спектра, но могут быть превращены в поглощающие свет соединения с помощью различных химических реакций.

Для испытания на подлинность используют реакции солеобразования и комплексообразования. При добавлении к нейтральному раствору натрия диклофенака по 2 капли растворов солей тяжелых металлов: 2% нитрата серебра, 3% хлорида железа (III), 10% сульфата меди (II) выпадает соответственно белый, желто-коричневый, светло-зеленый осадок.

Под действием концентрированной серной кислоты кристаллы ортофена приобретают малиновое окрашивание (реакцию выполняют на часовом стекле). Окрашенные продукты окисления получаются при действии растворами дихромата калия, нитрата натрия, перманганата калия, йодата калия в той же кислоте. Реактив Марки образует зеленовато-белое кольцо при наслаивании на раствор ортофена в концентрированной серной кислоте.

Ортофен даёт характерную реакцию на ион натрия и на хлориды в фильтре (после прокаливания в тигле и растворении содержимого в воде).

При добавлении к водному раствору ортофена разведенной хлороводородной кислоты выпадает белый осадок 2- [2,6 -(дихлорфенил) — амино] - фенилуксусной кислоты, которая частично превращается в индолинон.

При испытании на чистоту ортофен устанавливают методом ВЭЖХ наличие примесей промежуточных продуктов синтеза: 2- [2,6 -(дихлорфенил) — амино] - фенил уксусной кислоты и N- (2,6- дихлорфенил) индолина — 2 используют подвижную фазу ментол — 0,1%- ный раствор ортофосфорной кислоты (6:4), детектор — спектрофотометрический (длина волны 256 нм).

Сущность метода: Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) — это метод колоночной хроматографии, в котором подвижной фазой (ПФ) служит жидкость, движущаяся через хроматографическую колонку, заполненную неподвижной фазой (сорбентом). Колонки для ВЭЖХ характеризуются высоким гидравлическим давлением на входе в колонку, поэтому ВЭЖХ иногда называют «жидкостной хроматографией высокого давления».

В зависимости от механизма разделения веществ различают следующие варианты ВЭЖХ: адсорбционную, распределительную, ионообменную, эксклюзионную, хиральную и др.

В адсорбционной хроматографии разделение веществ происходит за счет их различной способности адсорбироваться и десорбироваться с поверхности адсорбента с развитой поверхностью, например, силикагеля.

В распределительной ВЭЖХ разделение происходит за счет различия коэффициентов распределения разделяемых веществ между неподвижной (как правило, химически привитой к поверхности неподвижного носителя) и подвижной фазами.

По полярности ПФ и НФ ВЭЖХ разделяют на нормально-фазовую и обращенно-фазовую.

Нормально-фазовым называют вариант хроматографии, в котором используются полярный сорбент (например, силикагель или силикагель с привитыми NH₂— или CN-группами) и неполярная ПФ (например, гексан с различными добавками). В обращенно-фазовом варианте хроматографии используют неполярные химически модифицированные сорбенты (например, неполярный алкильный радикал C₁₈) и полярные подвижные фазы (например, метанол, ацетонитрил).

В ионообменной хроматографии молекулы веществ смеси, диссоциировавшие в растворе на катионы и анионы, разделяются при движении через сорбент (катионит или анионит) за счет их разной скорости обмена с ионными группами сорбента.

В эксклюзионной (ситовой, гель-проникающей, гель-фильтрационной) хроматографии молекулы веществ разделяются по размеру за счет их разной способности проникать в поры неподвижной фазы. При этом первыми из колонки выходят наиболее крупные молекулы (с наибольшей молекулярной массой), способные проникать в минимальное число пор неподвижной фазы, а последними выходят вещества с малыми размерами молекул.

часто разделение протекает не по одному, а по нескольким механизмам одновременно.

Метод ВЭЖХ может применяться для контроля качества любых негазообрразных анализируемых веществ. Для проведения анализа используют соответствующие приборы — жидкостные хроматографы.

Количественно ортофен определяют методом неводного титрования в среде ледяной уксусной кислоте, титруют 0,1 м раствором хлорной кислоты (индикатор — кристаллический фиолетовый). Точку эквивалентности устанавливают потенциометрически.

Сущность метода: Титрование в среде неводных растворителей (неводное титрование) позволяет количественно определить органические вещества, обладающие кислотными и основными свойствами, но трудно растворимые в воде. Можно осуществить выбор органического растворителя, который способен изменить силу кислотных или основных свойств анализируемого вещества. В качестве титрантов используются растворы сильных кислот или сильных оснований.

Недостатком неводного титрования является необходимость иметь герметизированную титровальную установку. Работа ведется с весьма токсичными летучими растворителями.

Метод неводного титрования широко используется в фармацевтической анализе, поскольку многие синтетические и природные органические лекарственные вещества проявляют слабые основные или слабые кислотные свойства.

Неводное титрование органических оснований (и их солей) выполняют, используя в качестве растворителя безводную уксусную кислоту или уксусный ангидрид. Сочетают также уксусную кислоту с уксусным ангидридом, который улучшает условия титрования. Титрантом служит раствор хлорной кислоты, а индикатор — кристаллический фиолетовый, тропеолина 00 или метилового оранжевого. Растворы титранта и индикатора готовят в безводной уксусной кислоте.

Хлорной кислотой в неводной среде титруют соли сильных оснований и слабых кислот (калия ацетат):

R-СООК + НClО₄ КClО₄ + R-СООН Слабое органическое основание (R₃N) при растворении в безводной уксусной кислоте становиться сильным сопряженной кислотой:

R₃N + СН₃СООН R₃N * Н⁺ + СН₃СОО^-

При растворении хлорной кислоты в уксусной последняя проявляет свойства сильного сопряженного основания, образуя перхлорат — и ацетат — ион:

СН₃СООН + НClО₄ ClО₄^- + СН₃СООН₂⁺

Последний нейтрализует ацетат — ионы:

СН₃СОО^- + СН₃СООН₂⁺ 2СН₃СООН, а перхлоратион взаимодействует с катионом основания:

R₃N*Н⁺ + ClО₄^- [R₃N*Н⁺]ClО₄^-

Суммарный процесс нейтрализации слабого органического основания хлорной кислоты выглядит следующим образом:

R₃N + НClО₄ [R₃N*Н⁺] ClО₄^-

Данный процесс происходит при титровании лекарственных веществ основного характера, относящихся к числу производных пиразолона, пиридина, алкалоидов, представляющих собой слабые основания. Химизм реакции при неводном титровании солей слабых органических оснований (R₃N * НА), включающий анион (А^-), можно в общем виде представить следующим образом:

R₃N * НА = R₃N * Н⁺ + А^-

А^- + СН₃СООН = НА + СН₃СОО^-

НClО₄ + СН₃СООН = ClО₄^- + СН₃СООН₂⁺

СН₃СОО^- + СН₃СООН₂⁺ = 2СН₃СООН Суммируя, получим общее уравнение:

R₃N * НА + НClО₄ [R₃N* Н] ⁺ ClО₄^-

Исключение составляют галогениды четвертичных аммониевых оснований и соли галогеноводородных кислот. Эту группу лекарственных веществ нельзя точно оттитровать в неводной среде, так как галоген — ионы проявляет кислотные свойства даже в среде безводной уксусной кислоте. Поэтому галогеноводороды (R₃N * НХ) титруют в присутствии ацетата ртути (II), который связывает галоген — ионы в малодиссоциированные соединения, не мешающие определению. Галоген — ионы (Х^-) замещаются эквивалентным количеством ацетат — иона. Полученные ацетат органического основания оттитровывают хлорной кислотой:

2R₃N * НХ + (СН₃СООН)₂Нg НgX₂+ 2[ R₃N * НХ ] ⁺ СН₃СОО^-

2 [R₃N * НХ] ⁺ СН₃СОО^- +2НClО₄ 2[ R₃NН] ⁺ ClО₄^- + 2СН₃СООН

По НТД таким путем определяют гидрохлориды органических оснований, в том числе производные фенотиазина, галогеноводороды алкалоидов и витаминов, соли четвертичных аммониевых оснований. Оттитровать в неводной среде соли галогеноводородных кислот органических оснований можно и без помощи ацетата ртути. Для этого в качестве растворителя используют смесь муравьиной кислоты и уксусного ангидрида в соотношении 1:20. Такое сочетание растворителя повышает основность растворов и позволяет выполнить титрование с использованием в качестве титранта хлорной кислоты (индикатор — кристаллический фиолетовый), например эфедрина гидрохлорида и дэфедрин. В других случаях к указанной смеси прибавляют бензол.

ГЛАВА II. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

1. Методика обнаружения карбоксильной группы:

1. К 0,01 г лекарственной формы прибавляют 3−6 капли воды и 2−3 капли 10% сульфата меди (II). Образуется светло — зеленной осадок.

1.1 К 0,01 г лекарственной формы прибавляют 3−5 капли воды и 2−3 капли 2% раствора нитрата серебра, выпадает осадок белого цвета.

1.2 Растворяют 0,01 г препарата в 10 мл воды. К полученному раствору прибавляют 1 каплю 3% раствора хлорида железа (III); появляется желто-коричневый осадок, исчезающий от прибавления нескольких капель разведенной соляной кислоты и неизменяющееся от прибавления нескольких капель разведённой уксусной кислоты.

1.3 Растворяют 0,1 г препарата в 10 мл воды. К полученном раствору добавляют 4−6 капель спирта этилового. Ощущается запах эфира.

1.4 К 0,05 г лекарственной формы прибавляют 4 — 5 капли разведённой соляной кислоты. Образуется осадок белого цвета.

2. Методика обнаружения вторичного атома азота:

2.1. Растворяют 0,02 г препарата в 10 мл воды. К полученному раствору добавляют 2 капли раствора п— сульфахлорбензола: появляется осадок белого цвета.

2.2. К 0,01 г лекарственной формы прибавляют 3 — 6 капли воды и 2−3 капли раствора хлорбензальдегида. Образуется белый осадок с желтоватым оттенком.

3. Методика обнаружения Ортофена, реактивом Марки:

3.1. К 0, 05 г лекарственной формы прибавляют 3−4 капли формальдегида в концентрированной серной кислоте (Реактива Марки) и слегка нагревают, появляется зеленовато — белое кольцо при наслаивании на ортофен в концентрированной серной кислоте.

4. Методика обнаружения иона натрия:

4.1 Отмеривают 1 мл раствора ортофена, подкисляют разведенной уксусной кислотой, если необходимо фильтруют, затем прибавляют 0,5 мл раствора цинкуранил — ацетата. Образуется желтый кристаллический осадок.

4.2 Графитовая палочка, смоченная лекарственной формой и внесенная в бесцветное пламя горелки, окрашивает пламя в желтый цвет.

5. Методика обнаружения органически связанного хлора:

5. 1. Небольшую петлю на конце медной проволоки прокаливают в пламени горелки до исчезновения зеленого окрашивания пламени. Поверхность проволоки покрывается при этом слоем окиси меди. После охлаждения на петлю наносят исследуемое вещество и вновь нагревают в бесцветном пламени горелки, которое окрашивается в зеленый цвет.

6. Методика количественного определения Ортофена:

6.1. 0,2 г (точная навеска) препарата растворяют в 30 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 м раствором хлорной кислоты до окраски раствора от фиолетовой к зелёной (индикатор — 0,06 мл — 0,01% раствора кристаллического фиолетового).

Параллельно проводят контрольный опыт: 0,1 мл хлорной кислоты соответствует 31,81 мл С₁₄Н₁₀Cl₂NNaO₂.

ГЛАВА III. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

В молекуле препарата присутствует карбоксильная группа в связи, с чем проводим на данную группу следующие реакции:

Реакции комплексообразования:

При добавлении к нейтральному раствору ортофена 3%-раствора хлорида железа (III), выпадает осадок желто — коричневого цвета:

При добавлении к нейтральному раствору ортофена 10% раствора сульфата меди (II), выпадает осадок светло — зеленного цвета:

При добавлении к нейтральному раствору ортофена 2%-раствора нитрата серебра, выпадает осадок белого цвета:

Реакция образование индолинона:

При добавлении к водному раствору ортофена разведенной хлороводородной кислоты выпадает белый осадок 2-[2,6-(дихлорфенил) — амино]-фенилуксусной кислоты, которая частично превращается в индолинон.

Реакция образования эфира:

При добавлении к водному раствору ортофена несколько капель спирта этилового, ощущается запах эфира:

В молекуле препарата присутствует вторичный атом азота в связи, с чем проводим на данную группу следующие реакции:

При взаимодействии раствора ортофена с раствором п— сульфахлорбензолом, образуется осадок белого цвета.

При взаимодействии раствора ортофена с хлорбензальдегидом в присутствии гидроксида калия, образуется осадок белого цвета с желтоватым оттенком:

Реакция с реактивом Марки:

При взаимодействии раствора ортофена с раствором формальдегида в концентрированной серной кислоте, образуется белое кольцо при наслаивании на раствор ортофена в концентрированной серной кислоте:

В молекуле препарата присутствует ион натрия в связи, с чем проводим на данный ион следующие реакции:

Реакция с цинк-уранилацетатом:

Na⁺ + Zn[(UO₂)₂(CH3COO)₈] + CH₃COOH > NaZn[(UO₂)₂(CH3COO^-)₉]v + H⁺

Эта реакция является самой чувствительной из всех известных осадочных реакций на ион натрия. Кроме того, она специфична для натрия. Присутствие 10−20-кратных количеств любых катионов не мешает определению натрия.

Реакция окрашивания пламени:

Летучие соли натрия, в особенности натрия хлорид, окрашивают пламя в ярко-желтый цвет. Эта проба весьма характерна. Нужно иметь в виду, что реакция окрашивания пламени летучими солями натрия очень чувствительна (открываемый минимум -0,1 мкг натрия в пробе). В таких дозах натрий присутствует практически везде — в пыли, воде (извлекается из стекла), поэтому о присутствии натрия в исследуемом препарате можно делать заключение лишь при наличии яркого и не исчезающего в течение нескольких секунд желтого окрашивания пламени.

В молекуле препарата присутствует органически связанный ион хлора, в связи с чем проводим на данный ион следующие реакции:

Проба Бельштейна:

Проводить для обнаружения органически связанного хлора. При наличие в исследуемом растворе хлорид ионов, пламя окрашивается в зеленый цвет. Поэтому о присутствии хлора в исследуемом препарате можно делать заключение лишь при наличии яркого и не исчезающего в течение нескольких секунд зеленого окрашивания пламени. Эта реакция основана на том, что галогенопроизводные при нагревании с медью дают летучие галогениды меди, окрашивающие пламя в зеленый цвет.

Количественное определения:

Ортофен определяют неводным титрованием с использованием протогенного растворителя — кислоты уксусной ледяной. Титруют раствором кислоты хлорной, индикатор — кристаллический фиолетовый:

V₁ = 21,3 мл; V₂ =13,82 мл;

Э = f * Mr

C₁₄H₁₆NNaCl₂O₂

Mr = 168 + 16 + 14 + 23 + 71 + 32 = 324 г/моль;

Э = 1 * 324 = 324 г/моль;

Т = N * Э: 1000;

Т = 0,1 * 324: 1000 = 0, 0324 г / мл;

g% = (V₁ — V₂) * K * T * 100: а;

g = (21,3 — 13,8) * 1 * 0, 0324 * 100: 0,25 = 97%

ВЫВОДЫ

1. Проведенный анализ литературных данных показал, что существующие методики количественного и качественного определения лекарственного препарата «Ортофен» являются трудоемкими, дорогостоящими.

2. Были предложены и разработаны методики для подтверждения подлинности и количественного содержания действующих веществ в данной лекарственной форме. Предложенные методики обладают рядом преимуществ по сравнению с методиками существующей фармакопейной статьи, в частности они нетрудоемкие, дешевые, не требующие специальных реагентов и оборудования.

3. Изучена взаимосвязь структура — фармакологическая активность действующего вещества лекарственного препарата «Ортофен».

Введение

той или иной группы в структуру вещества может снизить или полностью устранить фармакологическое действие лекарственного препарата.

1. Беликов В. Г. Фармацевтическая химия. В 2 ч. Ч. 1. Общая фармацевтическая химия: Учеб. для фармац. ин-тов. и фак. мед. ин-тов. — М.: Высш. шк., 1993. — 432 с.

2. Беликов В. Г. Фармацевтическая химия. В 2 ч. Ч. 2. Специальная фармацевтическая химия: Учеб. для вузов — Пятигорск, 1996. — 608 с.

3. Беликов В. Г. Фармацевтическая химия. В 2 ч: Учебн. Пособие / В. Г. Беликов — 4 изд. перераб. и доп. — М.: МЕДпрес-информ, 2007. — 624с.

4. Машковский М. Д. Лекарственные средства. В двух частях. Ч. 1. — 12-е изд, перераб. и доп. — М.: Медицина, 1998. — 736с.

5. Харкевич Д. А. Фармакология. М.: Гэотар-Мед, 2001. С.464−465.

6. Кадиева М. Г. Лекции по фармакологической химии. Часть 1: Учебное пособие / Под ред. канд. хим. наук. доц. В. Т. Абаева; Сев. — Осет. гос. ун-т: Владикавказа: Изд-во СОГУ, 2006. 218 с.

7. Государственная Фармакопея российской федерации № XII. Часть 1/ «Издательство: Москва — Научный центр экспертизы средств медицинского применения», 2008. — 704 с.

8. Государственная Фармакопея российской федерации № XII. Часть 2/ «Издательство: Москва — Научный центр экспертизы средств медицинского применения», 2010. -678с.

9. Фармацевтическая химия под ред. Арзамасцева А. П. Издательство: Гэотар-Мед. Год: 2004 г.

10. Фармацевтическая химия. Практикум. Под ред. акад. РАМН, проф. А. П. Арзамасцева.