Характеристика культивированных клеток кожи

В Институте Клеточных культур ГНЦ ВБ «Вектор» выполняются исследования по культивированию клеточных культур в том числе кератиноцитов и фибробластов (Колокольцова Т.Д., 1998).

Появление в последние годы большого числа научных работ в области культивирования клеток кожи человека и успешные попытки использования этих клеток в медицинской практике показывают высокую перспективу их применения в терапии ожоговых и других ран. Р. В. Меdewаг (1941) впервые доказал возможность поддержания in vitro жизнеспособных кератиноцитов, а позднее Н. Gгееn (1979) подобрал условия выращивания эпидермальных клеток кожи человека in vitro с использованием облученных мышиных фибробластов в качестве фидерного слоя. Дальнейшее совершенствование метода было направлено на подбор адекватной питательной среды и сознание клеточно-дермального эквивалента (Harriger M.D., 1995). Для этой цели использовали различные субстраты, пригодные как для роста клеток, так и для их трансплантации на рану. В настоящее время выявлено, что для восстановления кожного покрова ожоговой раны можно использовать не только ауто-, но и аллогенные кератиноциты (Boice S.T., 1995). В то же время российскими исследователями Д. С. Саркисовым и соавт. (1994) разработан новый метод лечения ожогов, путем трансплантации на раневую поверхность культивированных аллофибробластов. Несмотря на высокую эффективность метода, лечения глубоких ожогов с помощью фибробластов, ограничено. Во-первых, уникальностью первичного материала и, во-вторых, сложностью его переработки (Смирнов и др., 1994). Поскольку фибробласты отличаются от кератиноцитов более высокой пролиферативной активностью, простотой состава питательных сред, необходимых для их роста и поддержания in vitro, то целесообразным, на наш взгляд, представляется создание банка аттестованных культур клеток фибробластов человека, пригодных для широкого применения в медицине. Создание банка культур клеток позволит обеспечивать медицинские исследования стандартным по биологическим и генетическим свойствам клеточным материалом. Кроме того, поскольку опыт работы крупнейших коллекций мира показывает высокую вероятность контаминации культур клеток, то необходимость аттестации клеток, используемых в медицинской практике, на наличие посторонней микрофлоры подчеркивает актуальность проблемы.

Целью настоящей лабораторной работы являлось получение и аттестация новых и имеюшихся в коллекции штаммов диплоидных фибробластов человека и изучение возможности использования их в качестве аллотрансплантатов при лечении ран различной этиологии.

Материалом для исследования служили кусочки кожи, полученные от ожоговых больных, от больных при ампутации конечностей, кожа крайней плоти детей взятая во время операции, эмбриональный материал 6 — 12 недельного плода, полученный при медицинских абортах.