Иммуногематологическое обследование доноров и реципиентов

Иммуногематологическое обследование доноров и реципиентов

Иммуногематологическое обследование доноров и реципиентов осуществляется в специализированной клинической и резусной лаборатории ГБУЗ г. Севастополя «Центр крови».

Согласно приказу МЗ РФ № 183н от 2.04.2013 «Об утверждении правил клинического использования донорской крови и (или) её компонентов», и постановлению Правительства Российской Федерации № 1230 от 31.12.2010 «Правила и методы исследований и правила отбора образцов донорской крови, необходимые для применения и исполнения технического регламента о требованиях безопасности крови, ее продуктов, кровезамещающих растворов и технических средств, используемых в трансфузионно-инфузионной терапии», обследование крови доноров и реципиентов осуществляется методом гемагглютинации, основанный на способности эритроцитов с адсорбированными антигенами или антителами агглютинироваться в присутствии гомологичных сывороток или соответствующих антигенов с образованием гемагглютинатов, — используется для определения группы крови по системе АВ0, резус-принадлежности, фенотипа антигенов эритроцитов по системам Резус и Келл, скрининга антиэритроцитарных антител, исследование проводится на плоскости с помощью моноклональных антител (далее — МКА), эритроцитарно-желатиновым методом, а также с применением лабораторного оборудования (внесение реагентов и образцов крови в колонки на стеклянных микросферах).

Определение группы крови по системе АВ0 у доноров:

Группа крови по системе АВ0 определяется перед каждым взятием у донора крови или ее компонентов (далее — донация) с использованием МКА специфичности анти-А, анти-В одной серии реактивов. Повторное определение группы крови по системе АВ0 проводится из образца донорской крови, взятого во время донации перекрестным способом со стандартными эритроцитами А, В. Допускается определение группы крови по системе АВ0 в образцах крови доноров плазмы без использования стандартных эритроцитов, если ранее группа крови по системе АВ0 определена дважды на образцах крови каждого донора от разных донаций с использованием перекрестного способа исследования со стандартными эритроцитами. В каждую серию исследований включаются «положительный» и «отрицательный» контрольные образцы (эритроциты А, В, 0 и плазма с антителами специфичности анти-А, анти-В).

В случае расхождения результатов прямого и обратного определения (выявление экстраагглютинина анти-А₁), а также при ослаблении силы реакции агглютинации при выявлении антигена, А для диагностики подгруппы антигена, А используют реактив анти-А1. Выявление экстраагглютинина анти-А₁ является основанием запрета использования компонентов крови для лечебных целей.

Определение группы крови по системе Резус у доноров:

Резус-принадлежность определяется наличием или отсутствием антигена D, выявляемого при исследовании образца донорской крови, взятого во время донации. Резус-принадлежность устанавливается как положительная при наличии антигена D и как отрицательная при отсутствии антигена D. Определение слабых вариантов антигена D (D^u) является обязательным (доноры, имеющие слабый или частичный антиген D (D^u) считаются Резус (D)-положительными).

Типирование антигенов эритроцитов С, с, Е, е системы Резус является обязательным и производится дважды на образцах крови каждого донора от разных донаций различными сериями типирующих реагентов или различными методами. При совпадении результатов фенотип донора считается установленным и при последующих донациях не определяется. В каждую серию исследований включаются «положительный» и «отрицательный» контроли (эритроциты Dи D+, Си С+, Еи Е+, е+ и е-, с+ и с-). кровь донор безопасность скрининг Определения антигена эритроцитов К системы Келл:

Исследуется у каждого донора двукратно во время разных донаций различными сериями типирующих реагентов или различными методами. При совпадении результатов К-принадлежность считается установленной и при последующих донациях не определяется. В каждую серию исследований включаются «положительный» и «отрицательный» контроли (эритроциты Ки К+).

Скрининг антиэритроцитарных антител донорской крови:

Скрининг антиэритроцитарных антител донорской крови проводится у мужчин и женщин при каждой донации независимо от группы крови системы АВ0 и Резус (D)-принадлежности. При скрининге антител выявляют клинически значимые антитела с использованием панели стандартных эритроцитов, состоящей не менее чем из 3 видов клеток, типированных по всем клинически значимым антигенам. Не допускается применение смеси (пула) образцов эритроцитов для скрининга антиэритроцитарных антител. Специфичность антител к антигенам эритроцитов устанавливается с идентификационной панелью, состоящей не менее чем из 10 образцов фенотипированных эритроцитов. В каждую серию исследований включаются «положительный» и «отрицательный» контроли (образцы сывороток, содержащие и не содержащие антитела).

Выявление антиэритроцитарных антител является основанием для запрета использования крови и ее компонентов в лечебных целях.

Транспортировка крови доноров для проведения иммуногематологических исследований:

Отбор образцов донорской крови для определения групп крови осуществляется во время донации непосредственно из специального контейнера-спутника для проб в вакуумсодержащие одноразовые пробирки, содержащие антикоагулянт этилендиаминтетрауксусная дикалиевая или трикалиевая соль. Не допускается открытие пробирок с образцами донорской крови до момента доставки их на исследование в клиническую лабораторию.

Транспортировка в лабораторию пробирок с образцами крови осуществляется в специальных контейнерах при температуре от +17єС до +24єС при условии недопущения прямого воздействия света и встряхивания.

Определение группы крови по системе АВ0, резус-принадлежности, фенотипа антигенов эритроцитов по системам Резус и Келл, скрининга антиэритроцитарных антител у реципиентов:

В резусной лаборатории ГБУЗ г. Севастополя «Центр крови» проводится подтверждающее определение группы крови по системе ABO и резус-принадлежности, а также фенотипирование по антигенам C, c, E, e, K и определение антиэритроцитарных антител.

Подтверждающее определение группы крови по системе ABO осуществляется перекрестным способом с использованием МКА анти-A, анти-B и стандартных эритроцитов O (I), A (II), B (III). В каждую серию исследований включаются «положительный» и «отрицательный» контрольные образцы (эритроциты А, В, 0 и плазма с антителами специфичности анти-А, анти-В).

Резус-принадлежность определяется наличием или отсутствием антигена D, выявляемого при исследовании образца крови реципиентов, доставленной в резусную лабораторию с ЛПУ. Резус-принадлежность устанавливается как положительная при наличии антигена D и как отрицательная при отсутствии антигена D. Определение слабых вариантов антигена D (D^u) является обязательным (реципиенты, имеющие слабый или частичный антиген D (D^u) считаются Резус (D)-отрицательными).

При предстоящей плановой трансфузии у детей до 18 лет, женщин детородного возраста и беременных, реиципиентов с отягощенным трансфузионным анамнезом, имеющих антитела к антигенам эритроцитов, реципиентов, нуждающихся в многократных (в том числе повторных) трансфузиях донорской крови и (или) ее компонентов (кардиохирургия, трансплантология, ортопедия, онкология, онкогематология, травматология, гематология определение антигенов эритроцитов C, c, E, e, K проводится с использованием МКА анти-С, анти-с, анти-Е, анти-е, анти-К. В каждую серию исследований включаются «положительный» и «отрицательный» контроли (эритроциты Dи D+, Си С+, Еи Е+, е+ и е-, с+ и с-, К+ и К-).

Скрининг антиэритроцитарных антител осуществляется с использованием не менее трех образцов эритроцитов, которые в совокупности содержат антигены C, c, E, e, С^w, K, k, Fy^a, Fy^b, Lu^a, Lu^b, Jk^a и Jk^b. При выявлении у реципиента антиэритроцитарных антител осуществляется типирование эритроцитов по антигенам систем резус, Келл и других систем с помощью антител соответствующей специфичности, идентификация антиэритроцитарных антител с панелью типированных эритроцитов содержащей не менее 10 образцов клеток. В каждую серию исследований включаются «положительный» и «отрицательный» контроли (образцы сывороток, содержащие и не содержащие антитела).

Реципиентам, имеющим в анамнезе посттрансфузионные осложнения, беременность, рождение детей с гемолитической болезнью новорожденного, а также реципиентам, имеющим аллоиммунные антитела, производят индивидуальный подбор компонентов крови в специализированной клинической лаборатории ГБУЗ г. Севастополя «Центр крови» (согласно приказа МЗ РФ № 363 от 25. 11. 2002 «Об утверждении Инструкции по применению компонентов крови») см. приложение № 1.