Клинические признаки заболевания и его лабораторная диагностика

При бабезиозе инкубационный период составляет от 8 до 18 дней. Больные животные угнетены, отказываются от корма, у некоторых замечена мышечная дрожь. Дыхание поверхностное, учащенное, пульс ускорен. Появляется лихорадка постоянного типа, температура тела достигает +42 ⁰С. При тяжелом течении болезни животное лежит или передвигается с трудом. У больных наблюдается сильная жажда. Цвет слизистых оболочек бледный, с желтушным оттенком. У животных наблюдается чередование поноса и запора. Моча имеет красный цвет (гемоглобинурия) [ 42,8].

Количество эритроцитов в крови снижается до 4−5 млн. в 1 мм³, гемоглобина — на 20−30% вследствие быстрого разрушения эритроцитов из-за размножения в них паразитов. Переболевание овец длится 4−9 дней. При благоприятном исходе больные овцы выздоравливают медленно [10]. Бабезиоз также ведет к изменению количества белка и соотношения белковых фракций в сыворотке крови [6].

У больных животных при бабезиозе отмечают кратковременное снижение в крови содержания Ти В-лимфоцитов [3].

У собак при бабезиозе наблюдали полное изменение форм эритроцитовпойкилоцитоз. Основными формами эритроцитов являлись акантоциты, стоматоциты, шизоциты и их периферическая вакуолизация [14].

При анаплазмозе инкубационный период колеблется от 8 до 40 дней. Температура держится в пределах +40 — +41⁰С в течение от одного до пяти — восьми дней, затем наступает ремиссия до пяти дней. В последующем температура вновь повышается, что совпадает с появлением в крови небольшого количества паразитов. Болезнь длится 15−40 дней. Гибель чаще наступает на 3−8 день [10, 2, 43].

При тяжелом течении заболевания быстро наступает общее угнетение, слабость, вялость мышц. Животные, несмотря на наличие аппетита, худеют, подолгу лежат. Основным патогномоничным симптомом при анаплазмозе является выраженная анемия. Цвет слизистых оболочек бледный, во время повышения температуры появляется желтушность, затем она исчезает, а сильная бледность («фарфоровые слизистые») остается еще длительное время (1−1,5 месяца).У животных сильно увеличиваются и твердеют лимфоузлы (в 2−3 раза). Восстановление лимфатических узлов до нормы происходит через 2−4 месяца после переболевания [16 ].

Во время болезни наблюдается учащенное сердцебиение, аритмия, тахипноэ. Желудочно-кишечный тракт находится в состоянии атонии. В начале болезни наблюдаются запоры, которые сменяются поносами. У больных животных сильная жажда. Цвет мочи светло-желтый или почти бесцветный. Кровь водянистая, количество эритроцитов снижается до 1−3 млн. в 1 мм³, лейкоцитов до 3−4 тыс. в 1 мм³, в крови преобладают большие и малые лимфоциты при общем угнетении кроветворения. На протяжении 18 месяцев носительства анаплазмы сохраняют свою патогенность [10].

Диагноз на кровепаразитарные заболевания овец и других животных ставят на основании эпизоотологических наблюдений, клинических и патананатомических исследований, а также обязательного микроскопического исследования мазков крови и мазков-отпечатков из паренхиматозных органов павших животных [10, 4, 16].

Кровь для исследований берут из краевой вены уха. Для мазка стараются использовать первую каплю крови, так как в ней содержится максимальное количество паразитов. Мазки окрашивают методом Романовского-Гимза.

За последние годы сотрудниками Крымской опытной станции для диагностики кровепаразитарных заболеваний овец был апробирован и применен метод люминесцентной микроскопии. Наличие высококачественных люминесцентных микроскопов, синтез и изготовление высококачественных флюорохромов сделало возможным применение люминесцентного анализа для разработки более эффективных приемов диагностики. Накопленный опыт применения люминесцентной микроскопии как медицинскими, так и ветеринарными специалистами, указывает на значительные преимущества этого метода, которые складываются из контрастности изображения, быстроты и несложности выполнения, высокой чувствительности, цветности изображения и специфичности [10 ].

Морфологически в окрашенных по Романовскому-Гимза препаратах не всегда можно с достоверностью определить видовую принадлежность паразита. Особую трудность в микроскопической диагностике представляют анаплазмы, которые часто необходимо отличать от телец Жоли и базофильной зернистости эритроцитов.

При использовании люминесцентного метода мазки из крови готовят общепринятыми методами. Фиксацию производят метиловым спиртом, но допускается использование ацетона, 1−5%-ного нейтрального формалина. Окрашивают мазки акридиновым оранжевым в разведении 1:1000 на 0,1н HCl, время экспозиции 1−3 минуты. Просмотр препаратов проводят на люминесцентном микроскопе.

Anaplasma ovis в препаратах из крови больных животных после окраски акридиновым оранжевым светится ярким золотисто-зеленым цветом, не наблюдается каких-либо выступов или «хвостов», однако паразиты крупнее, чем в препаратах окрашенных по Романовскому.

У Babesia ovis при окрашивании акридиновым оранжевым цвет свечения меняется в зависимости от времени экспозиции. При окрашивании в течение 10−30 секунд ядро приобретает зеленоватый цвет, а протоплазма — оранжевый. При экспозиции 1−5 минут весь паразит светится ярким золотисто-оранжевым цветом [ 10].

Таким образом метод люминесцентной микроскопии для исследовательских и диагностических целей при кровепаразитарных заболеваниях овец является наиболее точным и эффективным.

Для более полного определения эпизоотической ситуации по кровепаразитарным заболеваниям используют также исследование клещей на зараженность пироплазмидами.

Шабанов А.М. использовал цитохимический метод (НСТ тест), который использовался как рутинный гематологический тест для определения резистентности организма. С развитием патологического процесса от момента заражения происходит активация внутриклеточных ферментных систем. У больных животных уменьшается содержание в крови эозинофилов, лимфоцитов (максимально к 5-м суткам) и увеличивается полиморфомоноцитоз, полинуклеароз. Отмечается выраженная реакция на патологический процесс со стороны моноцитарной системы как по морфологическим, так и по цитохимическим показателям [39].

При постановке диагноза у людей используют реакцию непрямой иммунофлюоресценции. Диагностический титр при однократном исследовании не менее 1:256. Применяют также реакцию связывания комплемента.

При невысокой паразитемии иногда используют биологический метод, при котором кровь больного вводят спленэктомированным животным. Спустя 2−4 недели у животных развивается заболевание и бабезии легко выявляются в мазке крови [3].