Микробиологические методы исследования

Метод микроскопирования отпечатка

Метод основан на определении количества бактерий и степени распада мышечной ткани путем микроскопирования мазков-отпечатков. Исследование проводится по ГОСТ 23 392–78 «Методы химического и микроскопического анализа свежести». На экспертизу были представлены образцы гуляша говяжьего.

Поверхность исследуемых кусочков гуляша стерилизовали раскаленным шпателем, смоченным в спирте, вырезали стерильными ножницами кусочки размером 2,0×1,5×2,5 см, поверхностями срезов приложили к предметному стеклу (по три отпечатка на двух предметных стеклах). Препараты высушили на воздухе, зафиксировали, окрасили по Грамму и только затем микроскопировали.

Окраска по Грамму заключалась в том, что на фиксированный мазок нанесли генцианвиолет на 1−2 минуты. Краску смыли и нанесли раствор Люголя на 1 минуту. Раствор Люголя слили и на мазок нанесли спирт на 15 секунд. Спирт смыли водой. Мазок дополнительно окрасили фуксином (2−3 минуты). Краску смыли водой, препарат высушили Мясо считают свежим, если в мазках-отпечатках не обнаружена микрофлора или в поле зрения препарата видны единичные (до 10 клеток) кокки и палочковидные бактерии и нет следов распада мышечной ткани.

Мясо считают сомнительной свежести, если в поле зрения мазка-отпечатка обнаружено не более 30 кокков или палочек, а также следы распада мышечной ткани; ядра мышечных волокон в состоянии распада, исчерченность волокон слабо различима.

Мясо считают несвежим, если в поле зрения мазка-отпечатка обнаружено свыше 30 кокков или палочек, наблюдается значительный расход тканей: почти полное исчезновение ядер и полное исчезновение исчерченности мышечных волокон.