Дозозависимый эффект воздействия мет-энкефалина на секрецию бокаловидных гландулоцитов тонкой кишки

ДОЗОЗАВИСИМЫЙ ЭФФЕКТ ВОЗДЕЙСТВИЯ МЕТ-ЭНКЕФАЛИНА НА СЕКРЕЦИЮ БОКАЛОВИДНЫХ ГЛАНДУЛОЦИТОВ ТОНКОЙ КИШКИ

Могильная Г. М., Пейливаньян Э. Г., Евглевский А. А., Дудецкий В.И.

Известно, что природные опиоидные пептиды могут выступать в качестве факторов роста. Для желудочно-кишечного тракта нейропептидом упомянутого действия является мет-энкефалин, который может прямо влиять на генеративный пул или же инициировать каскад реакций, оказывающих влияние на клеточный рост. Данное исследование посвящено изучению влияния мет-энкефалина на пролиферативную и секреторную активность бокаловидных гландулоцитов тонкой кишки в зависимости от дозы вводимого нейропептида и времени его введения.

Материал и методы. Исследование проведено на мышах, которым вводили мет-энкефалин каждые 12 часов в дозах 40, 200 мкг/кг, а также 1 мг/ кг Введение нейропептида происходило в следующие сроки: 1 час, 1 сут, 3 и 7 суток. Для изучения секреторных гландулоцитов использовали комплекс гистохимических методов, включающий выявление нейтральных и кислых муцинов. Проведена полуколичественная оценка уровня содержания муцинов в секрете бокаловидных гландулоцитов (БГ) с вычислением среднего цитохимического коэффициента (СЦК) по формуле Астальди и Берга (1967). Для установления общей муцинпродуцирующей активности (МПА) использовали СЦК и среднее число (Х) бокаловидных гландулоцитов, рассчитанное на ворсинку или крипту соответственно. В работе использована специальная программа, разработанная на машине «ЛВМ РС/АТ».

Результаты и обсуждение. В 1-ый час введения опиоидного пептида в дозе 40 мкг/кг в зоне ворсинки существенных изменений не наблюдается. С увеличением концентрации вводимого препарата выявляется тенденция к увеличению темпа синтеза муцина, она проявляется в первый час при дозе 200 мкг/кг. При этом с учетом не изменяемого для БГ в этот период СЦК, увеличение МПА происходит за счет нарастания числа секреторных БГ в зоне ворсинок.

В крипте в этот период так же отмечается увеличение МПА (44,07 + 2, 3 вместо 36,94 + 1,2 — в контроле). Для клеток крипт это увеличение МПА регистрируется при дозе 1 мг/кг и связано оно прежде всего с увеличением числа секреторных БГ. Описанные изменения характерны для БГ, обнаруживающих наличие нейтральных муцинов, то есть клеток в окраске по методу ШИК.

Изучение распределения бокаловидных глаандулоцитов, содержащих кислые муцины показало, что в течение первого часа введения мет-энкефалина статистически достоверное (р< 0,01) увеличение числа секреторных БГ в зоне ворсинок и крипт происходит при дозе нейропептида 200 мкг/кг. В то же время темп синтеза кислых муцинов, при дозе нейропептида 40 мкг/кг даже снижается, что логически приводит к уменьшению и общей МПА. При этом это снижение регистрируется для БГ ворсинок, в зоне крипт темп синтеза кислых муцинов не меняется.

Пролонгирование действия нейропептида до 1 суток существенно не влияет на число ШИК-реактивных БГ и их количество в общем соответствует уровню, зарегистрированному на 1-ый час введения нейропептида, при чем как в зоне ворсинки, так и в зоне крипты. Темп синтеза нейтральных муцинов и уровень их содержания в БГ в течение 1-ых суток введения нейропептида не меняется, ни в зоне ворсинок, ни в зоне крипт. Число БГ, синтезирующих кислые муцины, определяемое в окраске альциановым синим при рН 2,7 в течении 1-ых суток, так же как в случае ШИК-реактивных БГ — не меняется. Лишь в зоне крипт происходит нарастание их числа с увеличением дозы вводимого препарата. Так, при дозе мет-энкефалина 1 мг/кг выявляется увеличение числа БГ в зоне крипт и это увеличение статистически значимо (р< 0,05). При изучении распределения кислых муцинов оказалось, что в БГ ворсинок при дозе 40 мкг/кг нарастает темп синтеза этих веществ, что находит отражение в изменении их СЦК. При дозе 200 мкг/кг, напротив, имеет место снижение уровня содержания в БГ ворсинок кислых муцинов, и установление исходного темпа синтеза происходит при дозе мет-энкефалина 1 мкг/кг БГ крипт не меняют темпа синтеза кислых муцинов с изменением дозы вводимого препарата, и их СЦК соответствует исходному. В то же время число секреторных БГ при дозе мет-энкефалина в 1 мг/кг увеличивается, что приводит к нарастанию продукции кислых муцинов бокаловидными гландулоцитами крипт.

Однотипные изменения имеют место и при увеличении срока введения нейропептида до 3-х суток. Однако пролонгирование введения нейропептида до 7-ми суток приводит к значительному увеличению числа БГ, синтезирующих нейтральные муцины, при чем уже при дозе мет-энкефалина 40 мкг /кг. Увеличение дозы нейропептида до 200 мкг/кг не влияет на число БГ, а при дозе 1 мг/кг имеет место даже снижение их числа. Описанные изменения наблюдаются как в зоне ворсинок, так и в зоне крипт. На фоне сохранившегося темпа синтеза нейтральных муцинов и, следовательно, почти не изменившегося СЦК для бокаловидных гландулоцитов ворсинок и крипт, регистрируется значительное увеличение МПА. При этом при дозе мет-энкефалина 40 мкг/кг имеет место резкое увеличение общей муцинпродуцирующей активности, а при дозе 1 мг/кг — выраженное ее падение. Изучение распределения БГ, синтезирующих кислые муцины, показало, что на 7-ые сутки введения нейропептида число этих клеток в зоне ворсинок и крипт не меняется и в общих чертах соответствует исходному уровню. Средний цитохимический коэффициент возрастает при дозе мет-энкефалина 40 мкг/кг и это увеличение статистически значимо (р< 0,001), что впоследствии и приводит к увеличению общей муцинпродуцирующей активности БГ ворсинок.

Итак, проведенное нами исследование свидетельствует о влиянии мет-энкефалина на секреторные эпителиоциты тонкой кишки.

При этом эффект нейропептида прежде всего проявляется в виде активации пролиферативного пула БГ, синтезирующих нейтральные муцины. Во временном аспекте эта функция нейропептида прослеживается на 7-ые сут введения препарата.

В этот срок отчетливо виден и дозозависимый эффект, наибольшая активность мет-энкефалина связана с дозой 40 мкг/ кг и отсутствует при увеличении дозы до 200 мкг/ кг, а при дозе-1мг/кг, напротив, проявляется ингибирующий эффект нейропептида. Бокаловидные гландулоциты, синтезирующие кислые муцины, под действием нейропептида обычно не увеличивают пролиферативную функцию и число БГ как в зоне крипт, так и ворсинок не меняется, соответствуя исходному уровню.