Реакции идентификации ДВ

Качественные реакции для определения дубильных веществ можно разделить на две группы: реакции осаждения и цветные реакции. Для проведения качественных реакций из исследуемого растительного сырья готовят водное излечение.

Реакции осаждения

• 1. К 2−3мл извлечения (отвара, танин) добавляют по каплям 1% раствор желатины. Появляется муть исчезающая при добавлении избытка реактива.
• 2. К 2 — 3 мл извлечения (китайский танин или пирогаллол) прибавляют несколько капель 1% раствора хинина хлорида. Появляется аморфный осадок.
• 3. К 10 мл извлечения (пираголлола) прибавляют 5 мл смеси, состоящей из 2 мл HCl (1:1) и 3 мл 40% раствора формальдегида. Полученную смесь кипятят 30 минут в колбе, снабженной обратным холодильником. При наличии конденсированных дубильных веществ, они выпадают в осадок (конденсированные дубильные вещества). Осадок отфильтровывают.
• 4. К 1 мл извлечения (танин) добавляется 2 мл 10% CH₃COOH и 1 мл 10% Pb (CH₃COO)₂ — гидролизуемые дубильные вещества образуют осадок.
• 5. К 2−3 мл извлечения (пирогаллола) прибавляется по каплям бромную воду (5 г брома в 1 л воды) до того момента, когда в жидкости станет ощущаться запах брома. При наличии конденсированных дубильных веществ сразу образуется осадок.
• 6. Реакция с солями алкалоидов. Образуется аморфный осадок за счет образования водородных связей с гидроксильными группами дубильных веществ и атомами азота алкалоида.

Цветные реакции

• 1. При добавлении к 2−3 мл извлечения 4 — 5 капель раствора железоаммониевых квасцов в случае гидролизуемых дубильных веществ появляется черно-синее окрашивание или осадок, а конденсированных — черно-зеленое окрашивание или осадок.
• 2. Катехины дают красное окрашивание с ванилином (в присутствии конц. HCl или 70%-ной H₂SO₄ развивается яркая красная окраска).
• 3. К 2 мл фильтрата добавляют10 капель 1% железоамманиевых квасцов и около 0,2 мл кристаллического ацетата свинца, раствор перемешивают. В случае наличия гидролизуемых дубильных веществ появляется синее или фиолетовое окрашивание (в нейтральной среде).
• 4. К 10% водному извлечению прибавляют нитрозометилуретан и кипятят. При этом конденсированные таниды осаждаются полностью; присутствие гидролизуемых танидов можно обнаружить, как было описано выше (фиолетовое окрашивание).
• 5. К извлечению добавляют 1% раствор ванилина в конц. HCl. При наличии катехинов жидкость окрашивается в красный цвет (на конденсированные дубильные вещества).

Хроматографическое определение катехинов

Спиртовое извлечение из сырья хроматографируют в тонких слоях сорбента на пластинках «Silufol» в системе растворителей ВУВ (40:12:28) в течение 1,5ч. По окончании хроматографирования (пробег 10−12см) пластинку высушивают на воздухе, после чего обрабатывают 1% раствором ванилина в растворе HCl (с= 1,19 г/мл). Катехины проявляются в виде красно-оранжевых пятен [3].