Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Фосфопротеинфосфатаза ядер селезенки быка: физико-химические свойства и механизм действия

Диссертация: Фосфопротеинфосфатаза ядер селезенки быка: физико-химические свойства и механизм действия
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

ФПФазы в настоящее время изучены значительно менее подробно, чем протеинкиназы. Интенсивное исследование ФПФаз началось сравнительно недавно: в последние 5−10 лет. К настоящему моменту накоплено достаточно много сведений о специфичности, структуре, регуляции цитоплазматических ФПФаз, показано участие этих ферментов в регуляции мышечного сокращения, метаболизма гликогена, липидов, белка (85−88… Читать ещё >

Фосфопротеинфосфатаза ядер селезенки быка: физико-химические свойства и механизм действия (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • 1. ВВЕДЕНИЕ
  • 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. II
    • 2. 1. Локализация ФПФаз. II
    • 2. 2. Субстратная специфичность ФПФаз. .. II
    • 2. 3. Множественные формы ФПФаз
    • 2. 4. Субъединичная структура ФПФаз
    • 2. 5. Углеводеодержащие кислые ФПФазы
    • 2. 6. ФПФазы клеточных ядер
    • 2. 7. Классификация ФПФаз
    • 2. 8. Термостабильные регуляторные белки ФПФаз
    • 2. 9. Роль пирофосфатсодержащих соединений, фторида и ионов двухвалентных металлов в регуляции активности ФПФаз
    • 2. 10. Влияние гормонов на уровень ФПФазной активности
    • 2. 11. Регуляция ФПФаз глутатионом и полиаминами
    • 2. 12. Механизм действия фосфатаз
  • 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
    • 3. 1. Выделение клеточных ядер из селезенки быка
    • 3. 2. Экстракция из ядер и очистка ФПФазы
    • 3. 3. Определение активности и Кщ ФПФазы
    • 3. 4. Электрофоретическое разделение белков
    • 3. 5. Идентификация ядерной ФПФазы методом двойных флуоресцирующих антител
    • 3. 6. Определение молекулярной массы ФПФазы
      • 3. 6. 1. Определение молекулярной массы ФПФазы методом гель-хроматографии на сефадек-се (г
      • 3. 6. 2. Определение молекулярной массы ФПФазы электрофорезом в ПААГ в нативных условиях
    • 3. 7. Определение аминокислотного состава ФПФазы
    • 3. 8. Количественное определение свободных сульфгид-рильных групп и дисульфидных мостиков
    • 3. 9. Изучение спектра поглощения ФПФазы в видимой области
    • 3. 10. Иммобилизация ФПФазы
    • 3. 11. Изучение влияния температуры и pH на активность растворимой и иммобилизованной ФПФазы
    • 3. 12. Влияние ингибиторов на активность ФПФазы
    • 3. 13. Влияние модификаторов аминокислот на активность ФПФазы
  • 3. I3.I. Влияние модификаторов сульфгидрильных групп на активность ФПФазы
    • 3. 13. 2. Влияние ТНБС на активность ФПФазы
    • 3. 13. 3. Влияние ДЭПК на активность ФПФазы
    • 3. 14. Изучение трансфосфорилирования в присутствии ФПФазы
    • 3. 15. *®-0-обмен в системе с ФПФазой
    • 3. 15. 1. Постановка опытов хо0-обмена
    • 3. 15. 2. Выделение и очистка Ф&bdquo- и НФ для анализа на содержание хо
    • 3. 15. 3. Подготовка образцов Фн и НФ к масс-спектрометрическому анализу
    • 3. 15. 4. Анализ изотопного состава кислорода в С
    • 3. 15. 5. Расчеты содержания хо0 в образцах
    • 3. 16. Выделение комплекса 55Р-ФПФаза
    • 3. 17. Определение концентрации белка
    • 3. 18. Определение содержания углеводов в составе
  • ФПФазы
    • 3. 19. Статистическая обработка экспериментальных данных
  • РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
    • 4. 1. Выделение и очистка ФПФазы из клеточных ядер селезенки быка
    • 4. 2. Субстратная специфичность и Ещ ФПФазы из клеточных ядер селезенки быка
    • 4. 3. Молекулярная масса ФПФазы из клеточных ядер селезенки быка
    • 4. 4. Химический состав и спектр поглощения ФПФазы из клеточных ядер селезенки быка
    • 4. 5. Иммобилизация ФПФазы из ядер селезенки быка и сравнительная характеристика иммобилизованной и растворимой форм фермента
    • 4. 6. Ингибиторы ФПФазы ядер селезенки быка
    • 4. 7. Влияние модификаторов аминокислотных остатков на активность ФПФазы из клеточных ядер селезенки быка
    • 4. 8. Механизм действия ФПФазы из клеточных ядер селезенки быка
    • 4. 8. 1. 180-обмен в ходе гидролиза АДФ и пНФФ ФПФазой из ядер селезенки быка.. ЮЗ
    • 4. 8. 2. Трансфосфорилирование в присутствии ядерной ФПФазы из селезенки быка
    • 4. 8. 3. Выделение фосфорилированного фермента после преинкубации ядерной ФПФазы с
  • -33Р]АТФ. Юб меченым субстратом
    • 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ. НО
  • 6. ВЫВОДЫ

Специфическое обратимое фосфорилирование остатков серина, треонина, тирозина в молекуле белка играет существенную роль в регуляции активности многих белков.

Реакциями фосфорилирования — дефосфорилирования белков регулируются различные биологические процессы, а именно: метаболизм нуклеиновых кислот, аминокислот, углеводов, липидов, функции синаптических мембран, сократительного аппарата, фотосинтез, секреция, передача нервного импульса, образование и разрушение цитоскелета (68,. 170).

В настоящее время установлено, что более двадцати различных ферментов регулируются обратимым фосфорилированием (ПО).

Существенный успех достигнут в изучении влияния фосфорилирования гистонов и негистоновых белков на функциональную активность клеточного ядра (10, 69).

Процессы, зависимые от фосфорилирования белков, находятся под контролем двух типов ферментов: протеинкиназ (К.Ф. 2.7.1.37) и ФПФаз (К.Ф. 3.1.3.16). Протеинкиназы катализируют фосфорилирование, а ФПФазы — дефосфорилирование белков.

ФПФазы в настоящее время изучены значительно менее подробно, чем протеинкиназы. Интенсивное исследование ФПФаз началось сравнительно недавно: в последние 5−10 лет. К настоящему моменту накоплено достаточно много сведений о специфичности, структуре, регуляции цитоплазматических ФПФаз, показано участие этих ферментов в регуляции мышечного сокращения, метаболизма гликогена, липидов, белка (85−88, 132, 151). Что касается ФПФаз из клеточных ядер, то эти ферменты изучены в значительно меньшей степени, чем цитоплазматические.

Зависимость функций клеточного ядра от фосфорилирования различных ядерных белков и обратимость фосфорилирования этих протеинов указывают на важную роль ФПФаз в регуляции процессов, протекающих в ядрах клеток. Несмотря на это, в литературе чрезвычайно мало сведений о ядерных ФПФазах, поэтому изучение этих ферментов является актуальным.

Целью данного исследования являлись: выделение и изучение свойств ФПФазы из клеточных ядер селезенки быка. При его выполнениистояли следующие задачи:

1. Разработка метода получения высокоочищенного препарата ФПФазы из клеточных ядер селезенки быка.

2. Изучение физико-химических свойств ФПФазы из ядер селезенки быка.

3. Получение иммобилизованной формы ФПФазы и сравнительная характеристика растворимой и иммобилизованной форм фермента.

Изучение ингибиторов ядерной ФПФазы.

5. Выявление аминокислотных остатков, существенных для проявления каталитических свойств ФПФазы.

6. Изучение механизма гидролиза фосфоэфирной связи, катализируемого ФПФазой.

Б данной работе впервые предложен метод получения высоко-очищенного препарата ФПФазы (Мг 33 000 Д) из клеточных ядер селезенки быка, который включает в себя следующие стадии: выделение ядерэкстракция ФПФазы из ядер 0,4 М буфером Аионообменная хроматография на фосфоцеллюлозегель-хроматография на сефадексе 0−75- аффинная хроматография на конканавалин-Асефарозе. Этот метод выделения ФПФазы является простым и по/ зволяет получать значительные количества фермента.

Исследование субстратной специфичности ядерной ФПФазы селезенки быка показало, что фермент катализирует дефосфорилиро-вание казеина, АТФ, АДФ, пНФФ и практически не дефосфорилирует АМФ и 2-глицерофосфат.

В настоящей работе проведено исследование химического состава ядерной ФПФазы селезенки быка. Установлено, что ФПФаза является гликопротеином, который обладает дополнительным максимумом поглощения в области 555 нм. В составе фермента преобладают остатки кислых аминокислот над основными, содержатся два дисульфидных мостика и две сульфгидрильные группы.

С помощью глютарового альдегида получена иммобилизованная на БСА форма ядерной ФАФазы. Сравнительное исследование иммобилизованной и растворимой ФПФазы показало, что обе формы фермента имеют сходные рНи температурный оптимумы, термостабильность, при использовании в качестве субстрата пНФФ.:

Исследовано влияние ингибиторов (молибдата аммония, фторида натрия, ШСФ, ДНК) на активность ядерной ФПФазы селезенки быка. Ингибирование активности фермента молибдатом является конкурентным, а фторидом — неконкурентным. Активность ФПФазы, обработанной фторидом, молибдатом и ®-1СФ, полностью восстанавливается после удаления этих ингибиторов диализом.

В данной работе с помощью различных модификаторов аминокислотных остатков установлено, что остатки лизина, гистидина и сульфгидрильные группы являются существенными для проявления ферментативной активности ФПФазы.

РезультатыО-включения из Н¿-0 в Фн в системе с этим. ферментом указывают на то, что в процессе гидролиза фосфорных эфиров ФПФазой происходит отщепление фосфорильного остатка. С помощью [?(-^^ АТФ показано формирование в процессе гидролиза в качестве промежуточного соединения — фосфоршшрован/ ного фермента. Полученные результаты позволили предложить схему механизма действия ядерной ФПФазы селезенки быка.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1. Локализация ФПФаз.

ФПФазы широко распространены в различных тканях животных. Они выявлены в печени, почке, селезенке, жировой ткани, эритроцитах (105), нервной ткани (15, 175), сердце (94), коре надпочечников (120), скелетной (24) и гладкой (129) мышце, матке (140), ретикулоцитах (124) и в других тканях млекопитающих, в икре лягушек (72), в спермиях морского ежа (155), в дрожжах (174), в гепатоме Новикова (127), TCRC-2 клетках.

156). Кроме того, ФПФазная активность обнаружена в различных клеточных структурах: цитозоле (105), плазматической (109) и ядерной (149) мембранах, митохондриях (42), ядре (121, 122), ядрышке (127), хроматине (48). Таким образом, ФПФазы присутствуют во многих, если не во всех, тканях животных. Это обстоятельство свидетельствует о важной роли ФПФаз в регуляции фосфорилирования белков, а в конечном итоге — в регуляции многих биологических процессов.

6. ВЫВОДЫ.

I, Разработан метод получения высокоочищенного препарата ФПФазы из клеточных ядер селезенки быка, включающий в себя экстракцию 0,4 М натрий-ацетатным буфером, рН 5,8 и последующую очистку фермента методами ионообменной хроматографии на фосфоцеллюлозе, гель-хроматографии на сефадексе g-75 и аффинной хроматографии на конканавалин-А-сефарозе.

2,1 ФПФаза из ядер селезенки быка обладает широкой субстратной специфичностью, катализирует дефосфорилирование фос-фоказеина, АТФ, АДФ, пНФФ. Отношение ФПФазной: АТФазной: АДФазной: пНФФазной скоростей реакции постоянно и равно 0,07: I: I: I. к^ для ФПФазы при использовании в качестве субстратов пНфФ, АТФ, дДФ соответственно равны 1,25+0,14, 0,44+0,12, 0,45+0,11 мМ.

3. Молекулярная масса ФПФазы из селезенки быка, определенная электрофорезом в нативных условиях при концентрации ПААГ 5−12% и гель-хроматографией на. сефадексе G-75, составляет около 33 000 Д.

4. ФПФаза из ядер селезенки быка является гликопротеином, имеющим дополнительный максимум поглощения при длине волны около 555 ни*.

5. Определен аминокислотный состав ФПФазы из ядер селезенки быка. В составе фермента преобладают кислые аминокислоты (аспарагиновая, глутаминовая) над основными (лизин, аргинин, гистидин). и молекуле ФПФазы содержатся два дисульфидных мостика и две сульфгидрильные группы.

6. Получена иммобилизованная (нерастворимая) форма ФПФазы из ядер селезенки быка на БСА с помощью глютарового альде.

— 126 гида. После иммобилизации ФПФазы происходит снижение активности фермента по отношению к субстратам: фосфоказеину, АТФ, пНФФ.

7. Сравнительная характеристика иммобилизованной и растворимой форм ФПФазы из ядер селезенки быка показала, что обе формы фермента имеют одинаковые рН-оптимум (около 5,8) и температурный оптимум (55−60°) и сходную термостабильность, обе формы ФПФазы устойчивы к действию температуры до 50°, при более высокой температуре активность фермента постепенно падает.

8. Молибдат аммония, фторид натрия, ШСФ ингибируют активность ФПФазы из ядер селезенки быка. Молибдат аммония является конкурентным ингибитором с к^ -= 0,37+0,06 мкМ, а фторид натрия — неконкурентным ингибитором с = 1,3+0,1 мМ. После удаления молибдата аммония, фторида натрия, <�ШСФ диализом активность ФПФазы полностью восстанавливается.

9. Взаимодействие ФПФазы из ядер селезенки быка с модификаторами БН-групп (пЖБ, ЭМ, (лЗБСг), ш2-групп (ТНБС), ги * стидина (ДЭПК) приводит к инактивации фермента, бн-, ш2-группы ФПФазы являются труднодоступными для модификаторов, ги-стидин взаимодействует с ДЭПК быстро. Активность ФПФазы с мо*-дифицированными БН-группами восстанавливается после обработки фермента ДТТ.

10- В ходе гидролиза пНФФ ФПФазой из ядер селезенки быка в тяжелокислородной воде происходит включение одного атома ¦^0 в состав Фн и не происходит включения тяжелого изотопа кислорода в состав НФ, т. е. в процессе гидролиза фосфорных эфиров, катализируемого ФПФазой, расщепляется связь Р-0.

II. Включение в процесс гидролиза [?(-33р]атФ в состав ФПФазы из ядер селезенки быка указывают на то, что в ходе.

— 127 этой реакции происходит формирование в качестве интермедиата — фосфофермента в результате фосфорилирования аминокислоты, входящем в активный центр фермента.

Показать весь текст

Список литературы

  1. B.C. Новые методы биохимической фотометрии^ М., 1965, с. 145−146.
  2. А.И. Химия изотопов. М., 1957, 594 с.
  3. .С. (ВНР), Чихрай Е.С., Зубов В. П., Полторак О. М. Изменение активности растворимой и иммобилизованной кислот фосфатазы в водноэтанольных растворах. Вестн.Моск.ун-та, 1978, т.19, № I, с. 20−24.
  4. Л.А. Гуанидинхлоридный метод превращения кислорода воды и ' ортофосфата в двуокись углерода для масспектрометрическоготоанализа на содержание 0. Вестн.Ленингр.ун-та, 1966, № 3, с. 85−91.
  5. А.И. Фосфопротеины ядер мозговой ткани. В кн.: I Всесоюзн.биохим.съезд. Тез.докл., т.2, М., 1964, с. 44−45.
  6. А.И., Леонова Л. Е., Морозов В. И., Резяпкин В. И. Фосфо-протеинфосфатаза ядер: физико-химические и иммунохимические характеристики. В кн.: УШ Всесоюзн.симп. «Структура и функции клеточного ядра». Тез.докл. Пущино, 1984, с. 129−130.
  7. А.И., Машанский В. Ф., Рогозкин В. А. Использование фос-фопротеинфосфатазы для выявления фосфопротеинов на ультраструктурах клеточных органоидов. Цитология, 1965, т.7, № 5,с.679−681
  8. А.И., Николаева М. А. Свойства свободной и иммобилизованной ядерной фосфопротеинфосфатазы. В кн.: 1У Всесоюзн. биохим.съезд.Тез.научн.сообщ., т.2, М., 1979, с. 39−40.
  9. Г. А. Практическое руководство по энзимологии. М., 1980, с. 36−38.
  10. Н.Е., Цудзевич Б. А., Блюм Я. Б., Бабенюк Ю. Д. Биохимическая модель регуляции активности хроматина. Киев, 1983, с.98−119.
  11. Г. Диск-электрофорез. М., 1971, с. 57−67.18
  12. Н.С. Миозин (0-обмен и фосфорилирование). Л., 1975. 200 с.18
  13. Н.С. Сравнительный анализ 0-обменных реакций, катализируемых АТФазами мышечного и немышечного происхождения.- Вестн.Ленингр.ун-та, 1978, № 3, с. 92−102.18
  14. Н.С., Скворцевич Е. Г. Применение 0 для изучения свойств транспортных АТФаз. В сб.: Транспортные аденозинтри-фосфатазы. 1977, М., с. I0I-II4.
  15. Г. К., Бунятян Г. К. О свойствах отдельных молекулярных форм фосфопротеинфосфатазы мозга крыс и их белковых регуляторов. Докл. АН СССР, 1981, т.257, № 5, с. I258-I26I.
  16. H.A. Биометрия. М., 1970, с.9−39, 227−229.
  17. Е.Г., Пантелеева Н. С., Писарева Л. Н. Реакции изотопного обмена кислорода в системе Nat-,-зависимой АТФазы. Докл. АН СССР, 1972, т.206, № I, с. 240−242.
  18. И.Н., Скворцевич Е. Г., Болдырев A.A., Пантелеева Н.С.то0.обмен в ходе гидролиза АТФ и п-нитрофенилфосфата Na, К — АТФазой из мозга быка. Биохимия, 1977, т.42, № II, с. 2035−2038.
  19. Ю., Мацуда Т. Перевод фосфатазы в нерастворимое состояние. Японск. заявка, кл. 36(2) С 05, С 07,& 07/02. № 53−32I9I, заявл. 7.09.76, № 51−107 606, опубл. 27.08.78.
  20. Ю.Н. Сера в белках. М., 1977, с. 26−58.
  21. Aitken A., Bilham Т., Cohen P. Complete primaiy structure of protein phosphatase inhibitor-1 from rabbit skeletal muscle. -Eur. J.Biochem., 1982, v. 126, No. 2, p. 235−246.
  22. Aitken A., Cohen P. Isolation and characterization of active fragments of protein phosphatase inhibitor-1 from rabbit skeletal muscle. FEBS Lett., 1982, v.147, No.1, p. 5458.
  23. Ames B.N., Dub in D.T. The role of polyamines in the neutralization of bacteriophage deoxyribonucleic acid. J.Biol.Ghem., 1960, v. 235, No .3″ p. 769−774.
  24. Boer P., Stein-Parve E.P. Further studies on the mechanism of an acid phosphatase from Baker’s yeast (Sacharomyces cerevisi-al). Biochim.Biophys.Acta, 1970, v.206, No.2, p. 281−288.
  25. Boer P.D., Graves D. J., Shelter C.H., Dempsey M.E. Simple procedure for conversion of oxygen of ortophosphate or water to carbon dioxide for oxygen-18 determination. Anal. Chem., 1961, v. 33, No.13, p. 1906−190 9.
  26. Brandt H., Copulong Z.L., Lee E.Y.C. Purification and properties of rabbit liver phosphoiylase phosphatase. J.Biol.Chem., 1975, v. 250, No. 20, p. 8038−8044.
  27. Brautigan D.L., Ballou L.M., Piaher E.H. Activation of skeletal muscle phosphorylase phosphatase. Effects of proteolysis and divalent cations. BiochemLstiy, 19Q2, v. 21, No.9,p. 1977−1982.
  28. Brautigan D.L., Picton C., Pischer E.H., Diltz C. Phosphorylase phosphatase complex from skeletal muscle. Activation of two catalytic subunits by manganese ions. Biochemistiy, 1980, v. 19, Ho.25, p. 5787−5794.
  29. Bunton C.A., Silver B.L., Verron C.A. The hydrolysis of organic phosphates by prostatic acid phosphatase. Pros. Chem.Soc., 1957, p. 348−349.
  30. Burchell A., Cohen P. Is phosphorylase phosphatase a manganese metalloenzyme? Biochem. Soc. Trans., 1978, v. 6, No. 1, p. 220−222.
  31. Campbell H.D., Dionysius D.A., Keough D. T., Wilson B.E., J. de Jersey, Zerner B. Iron-containing acid phosphatases: comparison of the enzymes from beef splin and pig allontoic fluid. Biochem .Bio phys. Res.Commun., 1978, v.82, No. 2, p. 615−620.
  32. Campbell H.D., Zerner B. A low-molecular-weight acid phosphatase which contains iron. Biochem.Biophys.Res.Commun., 1973, v. 54, No. 4, p. 1498−1503.
  33. Caswel M., Caplow M. Correlation of thermodynamic and kinetic properties of the phosphoryl enzyme foimed with alkaline phosphatase. — Biochemistry, 1980, v.19, No. 13, p. 2907−2911.
  34. Chauveau J., Moule V., Roiller C. Isolation of pure and unaltered liver nuclei. Morphology arid biochemical composition. Extl.Cell.Res., 1956, v. 11, No.2, p.317−325.
  35. Choen L.A. Group-specific reagents in protein chemistry. -Ann. Rev. Biochem., 1968, v. 37, p. 693−726.
  36. Chou C.-K., Alfano J., Rosen O.M. Purification of phospho-protein phosphatase from bovine cardiac muscle that catalyzes dephosphorylation of cyclic AMP binding protein component of protein kinase. — J.Biol.Chem., 1977, v.252, Ho.9, p.285 5−2859.
  37. Chou M.W., Tan E.L., Yang C.S. Comparative studies on nuclear and cytosol phospho-hi stone phosphatases of calf liver. -Int. J.Biochem., 1978, v.9, Ho. 1, p. 27−32.
  38. Chou M.W., Tan E.L., Yang C.S. Nuclear phosphoprotein phosphatase from calf liver. Biochita.Biophys.Acta., 1979, v. 56, No.1, p. 49−61.
  39. Debruyne I. Transphosphorylation mechanism of hen’s yolk alkaline phosphatase. Iht.Biochem., 1982, v. 14"Ho.6, p.529−534*
  40. Defreyn G., Goris J., Merlevede W. A deinhibitor protein neutralizing the effect of the protein inhibitors on dog liver phosphorylase phosphatase. PEBS Lett., 1977, v.79, No.1, p. 125−128.
  41. Dopere P., Yanstapel P., Stalmans W. Glicog en-synthase phosphatase activity in rat liver. Two protein components and their requirement for the activation of differ types of substrate. Eur. J.Biochem., 1980, v. 104, No. 1, p. 137−146.
  42. Fiske C.H., Subbarow Y. The colorimetric deteimination of phosphorus. J.Biol.Chem., 1925, v. 66, Ho.2, p. 375−400.
  43. Foulkes J. G., Cohen P. The hoimonal control of glycogen metabolism. Phosphorylation of protein phosphatase inhibitojrrL -1 in vivo in response to adrenaline. Eur. J.Biochem., 1979, v.97, No.1, p. 251−256.
  44. Foulkes J. G., Howard R.F., Ziemiecki A. Detection of a novel manmalian protein phosphatase with activity for phosphotyrosi-ne. FEBS Lett., 1981, v. 130, No. 2, p. 197−200.
  45. Foulkes J. G., Jefferson L. S., Cohen P. The hoimonal control of glycogen metabolism: dephosphorylation of protein phosphatase inhibitor-1 in vivo in response to insulin. FEBS Lett., 1980, v. 112, No. 1, p. 21−24.
  46. Foulkes J. G., Strada S.J., Henderson P.J.F., Cohen P.
  47. A kinetic analysis of the effects of irihibitor-1 and inhibitor -2 on the activity of protein phosphatase-1. Eur. J.Biochem., 1983, v. 132, No. 2, p. 309−313.
  48. Glazer A.N. Specific chemical modification of proteins. -Ann.Rev.of Biochem., 1970, v.39, p. 101−130.
  49. Glomset J. The further purification and properties of a phosphatase from spleen able to hydrolyse completely the phosphorus of fl^-casein. Biochim. Biophys. Acta, 1959, v. 32, Ho.2, p. 349−357.
  50. Glomset J., I&rath J. Some properties of a phosphatase from bovine spleen. Biochim.Biophys.Acta, 1960, v.39, No. 1, p. 1 -8.'
  51. Gold A.M., Fahrney D.E. The mechanism of reactivation of phenylmethansulfonys o (-chymotiypfein. Biochem.Biophys.Res Comnun., 1963, v.10, No. 1, p. 55−59.
  52. Goris J., Defreyn G., Merlevede W. Resolution of the ATP-Mg -dependent phosphorylase phosphatase from liver into a two proteins compnent system. FEBS Lett., 1979, v.99, No.2, p. 279−282.
  53. Goris J., Defreyn G., Vandenheede J.R., Merlevede W. Protein inhibitors of dog-liver phosphorylase phosphatase dependent and independent on protein kinase. Eur.J.Biochem., 1978, v. 91, No.2, p. 457−464.
  54. Goris J., Dope re F., Vandenheede J.R., Merlevede W. Regulation of lier phosphorylase phosphatase. ATP-Mg-media ted activation of the partially purified dog-liver enzyme. FEBS. Lett., 1980, v.117, No.1, p. 117−121.
  55. Goris J., Merlevede W. On the mechanism of activation of the %-ATP-cfependent phosphorylase phosphatase Isolated from dog liver. Bio ch em.Soc.Trans., 1980, v.8, No.1, p.48.
  56. Greeriberg H., Nachmansohn D. Studies of acid phosphomonoeste-rases and their inhibition by diisopropyl phosphofluoridate.- J. Biol .Chem., 1965, v.240, N0.4, p. 1639−1646.
  57. Greengard P. Phosphorylat ed proteins as physiological effectors. Science, 1978, v. 199, No. 4325, p. 146−152.
  58. Gurley L.R., Tobey R.A., Walters R.A., Mildebrand C.E., Hbhmann P. G., D’Asna J.A., Bar ham S. S., Deaven L.L. His tone phosphorylation and chromatin structure in synchronized mammalia cells. In: Cell. Qy cl.Regul., 1978, N.Y., p. 37−60.
  59. Habeeb A.F.S.A. Reaction of protein sulfhydiyl groups vdth Ellman’s reagent. Methods Enzymol., 1972, v. 25, p.457−464.
  60. Hara A., Sawada H., Kato Т., Nakayama Т., Yamamoto H., Mat sumo to Y. Purification and characterization of a purple acid phosphatase from rat spleen. J.Biochem., 1984, v.95, No.1, p. 67−74.
  61. Henmings B.A., Resink T. J., Cohen P. Re constitution of-ATP-dependent protein phosphatase and its activation through a phosphorylation mechanism. FEBS Lett., 1982, v. 150, No.2, p. 319 -324.
  62. Hemmings S.B.A., Yellowlees D., Kernohan J.C., Cohen. Purification of glycogen syntase kinase 3 from rabbit skeletal muscle. Co purification with the activating factor (F^) 0f the
  63. Mg-ATP)-dependent protein phosphatase. Eur. J.Biochem., 1981, v. 119, No.3″ p. 443−451.
  64. Hiraga A., Kikuchi K., Tamura S., Tsuiki S. Purification and2+characterization of Idg -dependent glycogen synthase phosphatase (phosp ho protein phosphatase A) from rat liver. Eur. J. Biochem., 1981, v. 119, No.3., p. 503−510.
  65. Hiskey M.E., Van Etten R.L. Stoichiometric trapping of a co-valent phosphoiyl-enzyme intermediate occurring in reactions catalyzed by an acid phosphatase. Arch.Biochem.Biophys., 1972, v. 152, No. 1, p. 423−425.
  66. Hsiao K.-J., Sandberg A.R., Id. H.-C. The role of ATP and divalent cations in the regulation of a cardiac phosphorylase phosphatase (pho sp ho protein phosphatase) of Mr = 35.000. -J.Biol.Chem., 1978, v. 253, No. 19, p. 6901−6907.
  67. Huang F.L., Gllnsmann W.H. Separation and characterization of two phosphoiylase phosphatase inhibitors from rabbit skeletal muscle. Eur. J.Biochem., 1976, v.70, No.2, p.419−426.
  68. Huang F.L., Tao S., Glinsnam W.H. Multiple foims of protein phosphatases inhibitors in mammalian tissues. Biochem. Bio-phys .Res.Comtmin., 1977, v.78, No.2, p. 615−623.
  69. Igarashi M., Takahashi H., Tsuyama N. Acid phosphatase from rat liver. Studies on the active center. Biochim.Biophys. Acta, 1970, v. 220, No. 1, p. 82−9 2.
  70. Imaoka T., Imam M., Usui H., ELnohara IT., Takeda M. Isolation of an inactive component from pig heart phosphoprotein phosphatase and its reassociation with an active component. -Biochim.Biophy s. Acta, 1980, v. 612, No. 1, p. 73−84.
  71. Imaoka T., Imazu M., Usui H., Kino ha ra M., Takeda M. Resolution and reassociation of three distinct components fiom pig heart phosphoprotein phosphatase. J.Biol.Chem., 1983, v. 258, No .3, p. 1526−1535.
  72. M., 3maokaT., Usui H., Kino ha ra N., Takeda M. Reconstitution of urea-dissociated subunits of a pig heart phosphoprotein phosphatase. J.Biochem., 1981, v.90, No.3, p. 851−862.
  73. Ingebritsen T.S., Blair J., Guy P., Witters L., Hardie D.G. The protein phosphatase involved in cellular regulation.
  74. Patty acid synthesis, cholesterol synthesis and glycolysis^ glue oneo gene sis. Eur .J.Biochem., 1983, v.132, No. 2, p.275−281.
  75. Ingebritsen T.S., Cohen P. The protein phosphatases involved In cellular regulation. 1. Classification and substrate specificities. Eur. J.Biochem., 1983, v. 132, No. 2, p.255−261 .
  76. Ingebritsen T.S., Foulkes J.C., Cohen P. The protein phosphatases involved In cellular regulation. 2. Glycogen metabolism.- Eur. J.Biochem., 1983, v.132, No.2, p. 263−274.
  77. Japundzic I., Jozanov 0., Japundzic M. Co bait-stimulated cytosal casein phosphatase from reticulocytes of rats. Biochem. Soc.Trans., 1981, v.9, Bo.2, p. 242.
  78. Jett M.-F., Hers H.-G. latent phosphorylase phosphatase from rat liver: relationship with the heat-stable inhibitory protein. Eur. J. Biochem., 1981, v. 118, Ho.2, p.283−288-
  79. Kato K., Kobayashi E., Sato S. Inactivation and reactivation of phosphoprotein phosphatase of rabbit skeletal muscle. Role0: ATP and divalent metal ions. J.Biochem., 1975, v.77, Ho.4,p. 811−815.
  80. Kato K., Sato S. Multiple molecular forms of phosphoprotein phosphatase from rabbit skeletal muscle. Biochim.Biophys. Acta, 1974, v.358, Ho. 2, p. 299−307.
  81. Khandelval R.L. The regulation of liver phosphoprotein phosphatase by inorganic pyrophosphate and cobalt. Arch.Biochem. Biophys., 1978, v. 191, Ho. 2, p. 764−773.
  82. Khandelwal R.L., Zinman S.M. The present of heat-stable activator of phosphoprotein phosphatase for the dephosphorylation of phosphoiylated histone in rabbit liver. BLochem. Biophys.Res.Conmun., 1978, v.82, Ho.4, p. 1340−1345.
  83. Khandelval R.L., Zinman S.M. Purification and properties of a heat-stable protein Inhibitor of phosphoprotein phosphatase from rabbit liver. J.Biol.Chem., 1978, v.253, No.2,p.560 -565.
  84. Khandelwal R.L., Zinman S.M., Ng Thomas T.S. Dissociation of rat liver high molecular weight phosphorylase by salt. -Bio chim. Biophys .Acta, 1980, v.626, No.2, p. 486−493*
  85. Khatra B.S., Soderling T.R. Reversible inhibition of skeletal muscle phosphoprotein phosphatase by" phosphate and fluoride. B io chem .Bio phys .Res .Commun., 1978, v.85, No.2, p. 647−654.
  86. Killilea S.D., .Aylward J.H., Mellgren R.L., Lee E.Y.C. Purification and properties of bovine mi oc or dial phosphorylase phosphatase (protein phosphatase C). Arch.Biochem.Biophys., 1978, v.191, No.2, p. 638−646.
  87. Killilea S.D., Mellgren R.L., Aylward J.H., Lee E.Y.C.1.hibition of phosphorylase phosphatase by poly amines. -Bio chem .Bio phys .Res .Commun., 1978, v.8, n0.3″ p.1040−1046.
  88. Klee C.B., Crouch T.H., Krins M.H. Calcineurin: A calcium-and calmodulin-binding protein of the nervous system. Proc. Natl.Acad.Sci.USA, 1979, v.76, No. 12, p. 6270−6273.
  89. Erebs E.G., Beavo J.A. Phosphorylation dephosphoiylation of enzymes. — Ann .Rev.Bio ch em., 1979, v.48, p. 923−929.
  90. Laenmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage- T.4. Nature, 1970, v.227, Ho.5229, p.680−685.
  91. La Forte D. C., Koshland J.D.E. A protein with kinase and phosphatase activities involved in regulation of tricarboxylic acid cycle. Nature, 1982, v.300, No. 5891, p. 458−460.
  92. McClure J.A., Korn E.D. Purification of a protein phosphatase from Acanthomoeba that dephosphoiylates and activates miosin H. J. Biol .Chem., 1983, v. 258, No. 23, p. 14 570−14 575.
  93. McTique J.J., Van Etten R.L. An essential active site histidine residue in human prostatic acid phosphatase. Ethoxyf or Delation by diethyl pyrocarbonate. -Biochim.Biophy s. Acta, 1978, v. 523, No. 2, p. 407−421.
  94. McTique J.J., Van Etten R.L. An essential arginine residue in human prostatic acid phosphatase. Biochim.Biophys.Acta, 1978, v.523, No.2, p. 422−429.
  95. Mellgren R.L., fylward J.H., Kill ilea S.D., Lee E.Y.C. Theactivation and dissociation of a native high molecular weight
  96. Ca2±dependant proteases. J.Biol.Chem., 1979, v.254,No.3"p. 648−652.
  97. Merlevede W., Riley G.A. The activation and inactivation of phosphoiylase phosphatase from bovine adrenal cortex. J. Bio 1.Chem., 1966, v.241, No.15, p. 3517−3524.
  98. Miki K. Studies on protein phosphatase in rat submandibular gland nuclei. J. Osaka Univ.Dental.Soc., 1978, No.2,p.213−231.
  99. Mitic-Oka J., Japundzic I., Levi E. Developmental characterization of an acidic phosp ho protein phosphatase from rat spleenic cell nuclei. Biochem.Soc.Trans., 1981, v.9, No.2, p. 242.
  100. Nimmo G.A., Cohen P. The regulation of glycogen metabolism. Phosphorylation of inhibitor-1 from rabbit skeletal muscle and its interaction with protein phosphatases-I II and II. -Eur.J.Biochem., 1978, v.87, No.2, p. 353−364.
  101. Nimmo 6.A., Cohen P. The regulation of glycogen metabolism. Purification and characterization of protein phosphatase inhibit or-1 from rabbit skeletal muscle. Eur. J. Biochem., 1978, v.87, No.2, p. 341−351.
  102. Olson M.O.J., Guetzow K.A. Nuclear phosphoprotein phosphatase from Novikoff hepatoma and rat liver: characterization and partial purification. Biochim. Biophys .Acta, 1978, v.526, No.1, p. 174−185.
  103. Oetrowski W., Bar hard E.A. Evidence for a phosphoryl-enzyme intermediate in the catalytic reaction of prostatic acid phosphatase. Biochemistry, 197 3, v. 12, No.20, p.389>3898.
  104. Paitta E., Sands H. Phosphoproteiriphosphatase in bovine tracheal smooth muscle. Multiple fractions and multiple substrates. Biochim.Biophys.Acta, 1978, v.523, No. 1, p.121−132.
  105. Pal en E., Gyankowski N., Gasioy E. Phosp ho protein phosphatase from yeast and its ribosomal substrate. Acta Biochim. Pol., 1983, v.30, No. 2, p. 165−173.
  106. Pato M.D., Ad el stein R.S. Dephosphorylation of the 20.000-dalton light chain of myosin by two different phosphatases from smooth muscle. J.Biol. Chem., 1980, v.255, No.14, p. 6535−6538.
  107. Pato M.D., Adelstein R.S., Crouch D., Safer B., Ingebiitsen T.S., Cohen P. The protein phosphatases involved in cellular regulation. Eur.J.Biochem., 1983, v. 132, No.2, p.289−295″
  108. Picton C. Activation of a phosphoprotein phosphatase in mouse 3T3 cells ty insulin. Mo 1. Cell.Biochem., 1981, v.42, No.2, p. 125−127.
  109. Resink T. J., Henmingp B.A., Tung M.Y.L., Cohen P. Characterization of a reconstituted Mg-ATP dependent protein phosphatase. Eur. J. Biochem., 1983, v. 133, No.2, p.455−461.
  110. Reyl P.J., Lewin M.J.M. Intracellular receptor for somatostatin in gastril mucosal cells: deco Deposit ion and reconstitution of somastatin-stimulated phosphoprotein phosphatases.- Proc. Natl .Acad. Sci. USA, 1982, v.79, Ho.4, p. 978−982.
  111. Roberts R.M., Bazer F.W. Phospho protein phosphatase activity of the proges teron induced purple glycoprotein of the porcine uterus. — Biochem. Biophys .Res .Commun., 1976, v. 68, Ho. 2, p. 450−45 5.
  112. Robinson D.B., Glew R.H. A tartrate-resist ant acid phosphatase from Gaucher spleen. J.Biol.Chem., 1980, v.255, Ho.12, p. 5864−5870.
  113. Shacter-Noiman E., Chock P.B. Properties of a Mr=38.000phospho protein phosphatase. Modulation by divalent cations,
  114. ATP, and fluoride. J.Biol.Chem., 1983, v.258,Ho.7,p.4214−4219.
  115. Shahed A.R., Mehta P.P., Harper E.T. Stimulation of rat liver phosphoiylase activity by insulin. Biochem.Soc. Trans., 1981, v.9, No.2, p. 236.
  116. Shimazu T. Liver phosphorylase phosphatase. Mol. and Cell. Biochem., 1982, v.49, No. 1, p. >15.
  117. Shimazu T., Tokutake S., Usami M. In activation of phosphorylase phosphotase by a factor from rabbit liver and its chemical characterization as glutathione disulfide. J.Biol. Chem., 1978, v.253, No.20, p. 7376−7382.
  118. Spackman D.H., Stein W.H., Moore S. Automatic recording apparatus for use in the chromatography of aminoacids. Analyt. Chem., 1958, v. 30, No .7, p. 1190−1206.
  119. Steer R.C., Wilson M.J., Ahmed K. Riosphoprotein phosphate! ase activity of rat liver nuclear membrane. Biochem.Biopihys. Res.Commun., 1979, v.89, No.4, p. 1082−1087.
  120. Stewart A.A., Hemmings B.A., Cohen P. Mg-ATP-dependent protein phosphatase and protein phosphatase I have identical substrate specifities. Eur .J .Bio chem., 1981, v.115, No.1,p. 197- 205.
  121. Stewart A.A., Ingebritsen T.S., Manalan A., Klee C.B., Cohen2+
  122. SundararajanT., Sarme P. Purification and properties of phosphoprotein phosphatase from ox spleen. Biochem. J., 1954, v.56, No. 1, p. 125−131.
  123. Swarup G., Garbers D.L. Biosphoprotein phosphatase activity of sea urchin spermatozoa. Biol.Reprood., 1982, v.26, No.5, p. 953−960.
  124. Swarup G., Speeg K.V., Cohen S., Garbers D.L. Hiosphotyrosil -protein phosphatase of TGRC-2 cells. J.Biol. Chen., 1982, v.257, No. 13, p. 7298−7301.
  125. Szeszak P., Pinna L.A. Protein phosphatase from rat liver nuclei. Biol, and Cell.Biochem., 1980, v.32, No.1, p. 13−20.
  126. Purification and subunit structure of high molecular-weight photphopro tein phosphatase (phosphatase II) from rat liver. Eur .J.Biochem., 1980, v.104, No.2, p. 347−355.
  127. Tamura S., Tsuiki S. Purification and subunit structure of rat liver phosphoprotein phosphatase, whose molecular weight is 260 000 by gel filtration (phosphatase 1B). Eur.J.Biochem., 1980, v. 111, No.1, p. 217−224.
  128. Thomas J.O., Ko in berg R.D. An oc tamer of histones in chromatin and free in solution. Proc .Natl.Acad .Sci.USA, 1975, v. 72, No.7, p. 2626−2630.
  129. Titanji V.P.K., Humble R.U., Orjan E.Z. Hiosphopeptide substrates of a phosphoprotein phosphatase from rat liver. J. Biol. Ghem., 1980, v.255, No.23, p. 11 239−1143.
  130. Vandenheede J.R., Yan S.-D., Merlevede W. Identity of rabbit skeletal muscle phosphory lase and synthase phosphatase. -Biochem., Soc., Trans., 1981, v.9, No.2, p. 234.
  131. Van Etten R.L., Hickey M. Hiosphohistidine as a stoichiometric intermediate in reactions catalyzed by isoenzymes of wheat germ acid phosphatase. Arch .Bio chem.Biophys., 1977, v.183, No.1, p. 250−259.
  132. Van Etten R.L., Risley J.M. Phosphate (oxygen)-water exchange reaction catalyzed by human prostatic acid phosphatase.
  133. Proc.Natl .Acad. Sci. USA, 1978, v.75, No. 10, p. 4784−4787.
  134. Von Will H. Zur rolle von proteinphosphoiy Herungen in der zellregulation. 1983, B38, H.6, s. 201−205.
  135. W as y lew ska E., Czubak J., Ostrowski W. Phospho protein phosphatase activity of human prostatic acid phosphatase. -Acta Biochim.Pol., 1983, v.30, No.2, p. 175−184.
  136. Yan S.C.B., Graves D.J. Inactivation and reactivation of phospho protein phosphatase. Mol. and Cell. Biochem., 1982, v. 42, No. 1, p. 21−29.
  137. Yang S.-D., Tallant E.A., Cheung W.Y. Calcineurin is a calmodulin-dependent protein phosphatase. Biochem.Biophys. Res. Conmun., 1982, v. 106, n0.4, p. 1419−1425″
  138. Yang S.-D., Vandenheede J.R., Goris J., Merlevede W. ATP-Mg -dependent phosphorylase phosphatase in maimialian tissues.- PEBS Lett., 1980, v.111, No.1, p. 201−204.
  139. Yang S.-D., Vandenheede J.R., Merlevede W. A simplified procedure for the purification of the protein phosphatase modulator (inhibitor-2) from rabbit sMetal muscle. -PEBS Lett., 1981, v.132, No.2, p.293−295.
  140. Zieraiecki A., Howard R.P., Prus R.R. Studies on phospho-tyrosine specific phosphatase. J. Cancer .Res. and Clin. Oncol., 1983, v. 105, No. 2, A15.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!