Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Функциональная активность реконструированной мембранной монооксигеназной системы микросом печени

Диссертация: Функциональная активность реконструированной мембранной монооксигеназной системы микросом печени
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Среди различных направлений современной ксенобиохимии наибольший интерес представляют также исследования механизма моно-оксигеназных реакций, строения активного центра цитохрома Р-450, механизмов индукции монооксигеназ лекарственными веществами и канцерогенными полициклическими углеводородами, молекулярной организации ферментов монооксигеназ (15, 16, 18). Изучение этих вопросов направлено… Читать ещё >

Функциональная активность реконструированной мембранной монооксигеназной системы микросом печени (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
  • Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
  • Введение
    • 1. 1. Физико-химические и каталитические свойства цитохрома Р
    • 1. 2. физико-химические и каталитические свойства НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы
    • 1. 3. Топография, молекулярная организация и функциональные взаимодействия цитохрома
  • Р-450 и НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы
  • Глава 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
    • 2. 1. Материалы и методы исследований
    • 2. 2. Результаты исследований и их обсуждение
      • 2. 2. 1. Реконструкция мембранной монооксигеназной системы из белков и липидов микросом печени
      • 2. 2. 2. Встраивание изолированных ферментов в реконструированные микросомные мембраны
      • 2. 2. 3. Бензпиренгидроксилазная активность реконструированных микросомных мембран и ее зависимость от молярного соотношения цитохрома Р-450 и НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы

Важный процесс в жизнедеятельности организма составляет де-токсикация гидрофобных низкомолекулярных соединений эндогенного и экзогенного происхождения. Особый интерес представляет окислительная ферментативная система защиты от токсического действия гидрофобных соединений, находящаяся в эндоплазматических мембранах (микросомах) печени и ряда других органов и тканей человека и животных, содержащая в качестве терминальной оксидазы цитохром Р-450 (3). Роль этой ферментной системы, организованной в специализированную редокс-цепь, состоит в окислении гидрофобных молекул с помощью молекулярного кислорода, и функционирует она как монооксигеназа внешнего типа.

В настоящее время известно, что микросомная монооксигеназная система подвергает биотрансформации многочисленные, самые различные по своей химической природе и биологической активности чужеродные химические соединения (ксенобиотики) — лекарства, яды, канцерогены, химические факторы загрязнения окружающей среды и т. д. (3, 15, 18, 167). Ежегодно увеличивается поток ксенобиотиков, вызванный увеличением производства и потребления лекарств, нарастающим загрязнением биосферы химическими соединениями в результате увеличения производства новых химикатов, пищевых добавок, пестицидов и т. д. В связи с огромной практической важностью микросомной монооксигеназной системы в защите живых систем от токсического действия ксенобиотиков возрос интерес исследователей многих специальностей к вопросам ксенобиохимии.

В последние годы стало известно, что наряду с детоксикацией окисление некоторых соединений в микросомной монооксигеназной системе сопровождается токсификацией — образованием промежуточных электрофильных продуктов, имеющих токсический, мутагенный или канцерогенный эффект. Цитохром Р-450-зависимая активация предшествует канцерогенному и токсическому действию таких соединений, входящих в состав загрязнений окружающей среды, как полициклические ароматические углеводороды, нитрозамины (167).

Широкая субстратная специфичность микросомной монооксигеназ-ной системы, как стало ясно в последние годы, обусловлена существованием ключевого фермента — цитохрома Р-450, в виде множественных молекулярных форм (78, 137, 190). Проблема множественности форм цитохрома Р-450 представляется настоящее время одной из главных в ксенобиохимии. И хотя она еще далека от окончательного решения, уже сейчас очевидно, что именно множественные формы цитохрома Р-450 представляют собой главный фактор, определяющий фармакологические, токсилогические, мутагенные и канцерогенные свойства ксенобиотика в организме (167).

Среди различных направлений современной ксенобиохимии наибольший интерес представляют также исследования механизма моно-оксигеназных реакций, строения активного центра цитохрома Р-450, механизмов индукции монооксигеназ лекарственными веществами и канцерогенными полициклическими углеводородами, молекулярной организации ферментов монооксигеназ (15, 16, 18). Изучение этих вопросов направлено на формирование точных представлений о роли микросомной цитохром Р-450-содержащей монооксигеназной системы в метаболизме чужеродных соединений и, в конечном итоге, о возможности регуляции метаболических реакций окисления, осуществляемых ею.

Главные компоненты микросомной монооксигеназной системыцитохром Р-450 и НДЦФН-цитохром Р-450 редуктаза, являются мем-браносвязанными ферментами (3, 15, 59). Транспорт электронов между этими ферментами является ключевым этапом в монооксигеназ-ных реакциях. В микросомах цитохром Р-450 и НАДФН-цитохром Р-450 редуктаза представлены в таких количествах, что на одну молекулу редуктазы приходится 20−30 молекул цитохрома (58, 59). Вопрос об особенностях молекулярной организации ферментов монооксигеназной системы, решению которого посвящены многочисленные исследования последнего десятилетия, не решен окончательно.

Ряд исследований, выполненных с использованием реконструированной растворимой (немембранной системы), содержащей изолированные из микросом цитохром Р-450 редуктазу, свидетельствует о том, что, в такой системе цитохром окисляет субстраты с наивысшей скоростью при эквимолярном соотношении с редуктазой (62, 155). Принимая во внимание данные о соотношении этих двух участников моно-оксигеназных реакций в интегрированных микросомных мембранах, представляется важным провести подобное исследование в монооксигеназной системе, ферментные компоненты которой находятся в мем-браносвязанном состоянии. Изучение этого аспекта функционирования микросомной монооксигеназы связано с проблемой множественных форм цитохрома Р-450, так как цитохром Р-450 в микросомах представлен суммой форм (86, 171, 190, 207).

Изложенное выше определило цель и задачи исследования. Целью наотоящей работы было исследование зависимости эффективности монооксигеназной реакции, катализируемой определенной индивидуальной формой цитохрома Р-450, в микросомной мембране от молярного соотношения этой формы с ЕАДФН-цитохром Р-450 редуктазой. При решении этого вопроса представлялось обязательным выполнение нескольких условий: во-первых, необходимость методического подхода для получения микросомных мембран, в которых содержание исследуемой формы регулируется в широких пределахво-вторых, возможность определения количества исследуемой формы цитохрома Р-450 в мембранах микросомв-третьих, возможность определения в микросом-ных мембранах участия и вклада исследуемой формы цитохрома Р-450 в достаточно специфичную для нее моноонсигеназную реакцию, несмотря на возможное участие в этой реакции других форм цитохрома, присутствующих в микросомной мембране.

В соответствии с этим были поставлены следующие конкретные задачи:

1. Разработать метод реконструкции мембранной монооксигеназ-ной системы из микросомных белков и фосфолипидов, максимально приближенной по свойствам, в том числе по уровню метаболизма ксенобиотиков, к нативным микросомным мембранам.

2. Получить очищенную НАДФН-цитохром Р-450 редуктазу, активную в отношении природного акцептора — цитохрома Р-450, способную встраиваться в мембранные матрицы.

3. Встроить очищенные ферменты — формы цитохрома Р-450 и НАДФН-цитохром Р-450 редуктазу в реконструируемые микросомные мембраны и охарактеризовать ферментный состав мембран и их функциональную активность.

4. Определить содержание МХ-индуцируемой формы цитохрома Р-450 (Р-448) и охарактеризовать ее участие в реакции гидрокси-лирования бензпирена в микросомных мембранах с различным содержанием цитохрома Р-448 и НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы.

Научная новизна. Для реконструкции мембранной монооксигеназ-ной системы впервые применен сефадекс lh -20, обладающий выраженными липофильными свойствами. Реконструкция путем самосборки при гель-фильтрации солюбилизированных микросомных белков и фосфолипидов через сефадекс ьн-20 осуществляется с высокой эффективностью, и в результате формируются мембраны, подобные по структурным и функциональным характеристикам исходным микросомным мембранам.

Показана возможность направленного изменения содержания цитохрома Р-450 и НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы в реконструированных микросомных мембранах при встраивании очищенных ферментов в процессе самосборки мембранных структур.

В работе применен новый подход для определения эффективности катализа монооксигеназной реакции индивидуальной формой цитохрома Р-450 в мембраносвязанном состоянии в присутствии других форм, основанный на применении моноспецифичных антител против этой формы цитохрома Р-450 для оценки степени ее участия в метаболизме субстрата по данным ингибирущего влияния антител на скорость исследуемой реакции. Моноспецифичные антитела против исследуемой формы цитохрома были использованы также для ее количественного определения в микросомной мембране.

Получены данные о зависимости скорости гидроксшшрования бензпирена метилхолантрен-индуцируемой формой цитохрома Р-450 в мембранной монооксигеназной системе от молярного соотношения этой формы цитохрома и НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы, свидетель-ствувдие об оптимальном для наиболее эффективного гидроксилирования соотношения этих ферментов, значительно превышающим эквимо-лярное.

Практическая значимость. По своему содержанию работа представляет экспериментальное изучение функциональных взаимоотношений компонентов микросомной цитохром Р-450-зависимой монооксигеназной системы и носит преимущественно теоретический характер. Значение ее в рамках данной проблемы заключается в установлении новых фактов о функциональной активности мембраноорганизованной монооксигеназной системы с различным содержанием ее ферментных компонентов.

Показанная зависимость эффективности метаболизма субстрата индивидуальной формой цитохрома Р-450 в мембранной монооксигеназной системе от молярного соотношения этой формы цитохрома Р-450 и НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы, демонстрирует важность данного параметра в мембранных модельных системах, используемых для изучения активности монооксигеназной системы, эффективности метаболических процессов, осуществляемых ею.

Разработанный метод реконструкции мембранной монооксигеназной системы с помощью гель-фильтрации солюбилизированных белков и фосфолипидов макросом через сефадекс LH-20 в настоящее время используется в лабораториях СО АМН и СО АН СССР, изучающих системы метаболизма ксенобиотиков.

Работа выполнена в рамках Всесоюзной программы «Гидрокси-лаза» в соответствии с плановой темой, утвержденной Государственным комитетом СССР по науке и технике государственной регистрации 79 040 821).

Основные положения диссертации, которые выносятся на защиту.

I. Реконструкция мембраноорганизованной микросомной монооксигеназной системы путем самосборки из солюбилизированных микросомных белков и фосфолипидов, имеющей физико-химические характеристики, близкие к характеристикам исходных мембран макросом, возможна при удалении солюбилизируицего агента с помощью гель-фильтрации через сефадекс LH -20.

2. Использование очищенных ферментов. мшфосом (форм цитохрома Р-450 и НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы) позволяет получать реконструированные микросомные мембраны с дополнительно встроенными молекулами ферментов, и, таким образом, изменяемым количеством и соотношением этих ферментных компонентов.

3. Оптимальное соотношение метилзЕолантрен-индуцир^уемой формы цитохрома Р-450 (цитохрома Р-448) и НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы, при котором цитохром гидроксилирует бензпирен с максимальной скоростью в мембранной монооксигеназной системе, отличается от эквимолярного.

Самостоятельность выполненной работы. Основная часть представленных в работе данных получена лично автором. Эксперименты по изучению температурных фазовых переходов выполнены совместно с сотрудником лаборатории клеточных механизмов адаптпции Института клинической и экспериментальной медицины СО АМН СССР А.П. Ивлевым-Дунтау.

ЭПР-спектрометрические измерения и измерение размеров мик-росомных частиц методом рассеивания лазерных лучей выполнены сотрудником Института химической кинетики и горения СО АН СССР С. И. Еременко.

Препараты изолированных цитохромов Р-450 и антитела против МХ-цитохрома Р-450 получены сотрудниками лаборатории клеточных механизмов адаптации Института клинической и экспериментальной медицины СО АМН СССР Л. Ф. Гуляевой, Н. И. Гуткиной, С. И. Макаровой.

Автор выражает большую признательность старшему научному сотруднику В. М. Мишину за конструктивные предложения по содержанию работы и обсуждение полученных результатов.

Автор благодарит доктора биологических наук, профессора В. В. Ляховича за руководство работой.

вывода.

1. Показано, что микросомные мембраны могут быть реконструированы из солюбшшзированных белков и липидов микросом путем самосборки при освобождении от детергента гель-фильтрацией через сефадекс LH -20. Самосборка микросомных компонентов сопровождается образованием мембранных структур, сходных с нативными микросомами по важнейшим физико-химическим свойствам — размерам, состоянию фосфолипидной фазы, количеству и соотношению переносчиков электронов, уровню окисления ксенобиотиков.

2. Из микросом печени крыс получена высокоочшценная электро-форетически гомогенная НАДФН-цитохром Р-450 редуктаза, обладающая способностью поддерживать цитохром Р-450-зависимый метаболизм ксенобиотиков.

3. Показано, что при самосборке микросомных мембран в присутствии очищенных микросомных ферментов — НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы и цитохрома Р-450 (фенобарбитали метилхолантрен-индуцируемых форм), происходит встраивание этих ферментов в мембранные матрицы.

4. Встраивание НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы в мембраны, реконструируемые из неиндуцированных и МХ-индущрованных микросом, сопровождается увеличением их бензпиренгидроксилазной активности.

5. Дополнительно встроенный цитохром Р-448 увеличивает скорость гидроксилирования бензпирена в мембранах, реконструируемых из неиндуцированных микросом, и снижает скорость этой реакции в мембранах, реконструируемых из метилхолантрен-индуциро-ванных микросом.

6. Скорость гидфоксилирования бензпирена, осуществляемого цитохромом Р-448 в мембранной монооксигеназной системе зависит от молярного соотношения этой формы цитохрома Р-450 с НАДФН-цитохром Р-450 редуктазой. Соотношение цитохрома Р-448 и редуктазы в микросомных мембранах, при котором бензпирен гидроксили-руется с наибольшей скоростью, превышая 1:1, но ниже, чем 40:1.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

Разработанный метод получения мембранной монооксигеназной системы из солюбилизированных микросомных мембран при удалении детергента при гель-фильтрации через сефадекс lh-20 может быть использован для реконструкции липосом и протеолипосом из солюбилизированных фосфолипидов различного происхождения.

Для определения эффективности катализа монооксигеназной реакции индивидуальной формой цитохрома Р-450 в мембраносвязанном состоянии в присутствии других форм целесообразно использовать моноспецифичные антитела против данной формы цитохрома для оцре-дееения ее количества в микросомных мембранах и вклада в исследуемую монооксигеназную реакцию.

Установление зависимости эффективности гидроксилирования субстрата индивидуальной формой цитохрома Р-450 в микросомной мембранеой монооксигеназной системе от молярного соотношения цитохрома Р-450 и НАДФН-цитохром Р-450 редуктазы демонстрирует необходимость учитывать данный параметр в мембранных модельных системах, используемых для изучения активности ферментов метаболизма ксенобиотиков.

Показать весь текст

Список литературы

  1. М.А., Арчаков А. И., Девиченский В. М., Карякин А. В., Мирсалихова Н. М. Межмембранный перенос белков микросом и Яа+, К±АТФ-азы плазматической мембраны. — Биоорганическая химия, 1981, т. 7, с. 1357−1363.
  2. А.И. Микросомальное окисление. М.: Наука, 1975, -327 с.
  3. А.И. Оксигеназы биологических мембран. М.: Наука, 1983, -54 с.
  4. А.И., Бачманова Г. И., Боровягин Л. В., Галущенко И. В., Карузина И. И., Кузнецова Г.П, Самосборка микросомальных мембран. Докл. АН СССР, 1975, т. 222, с. 967−969.
  5. А.А., Усанов С. А., Дворников С. С., Метелица Д. Н. Кинетические и спектральные параметры гидроксилирования нафталина ин-тактными и индуцированными ферментными системами микросом печени. Докл. АН СССР, т. 223, с. 1014−1017.
  6. Т.Ю., Добрынина О. В., Корнева Е. Н., Лазаревич В. Г., Кузнецова Г. П., Карякин А. В., Бачманова Г. И., Арчаков А. И. Реконструкция монооксигеназной системы в растворе и в иммобилизованном слое фосфолипида. Биохимия, 1983, т. 48, с. 2002−2008.
  7. В.М., Альтерман М. А., Жихарева В. О., Мясоедова К. Н., Арчаков А. И., Галущенко И. В., Тараховский Ю. С., Образцов В.В.,
  8. В.Л. Доступность белков микросомальной мембраны для протеазы К. Биохимия, 1979, т. 44, с. 748−754.
  9. М. Техника липидологии. М.: Мир, 1975, — 322 с.
  10. В.П., Усанов С. А., Метелица Д. И. Иммунохимическое изучение каталитической активности цитохрома Р-450 LM2 из микросом печени кролика. Биохимия, 1982, т. 47, с. I43I-I436,.
  11. В.В., Цырлов И. Б. Структурные аспекты биохимии моно-оксигеназ. Новосибирск: Наука, 1978, -, 236 с.
  12. В.В., Цырлов И. Б. Индукция ферментов метаболизма ксенобиотиков. Новосибирск- Наука, 1981, — 340 с.
  13. В.В., Цырлов И. Б., Мишин В. М., Громова О. А. Влияние перекисного окисления микросомных липидов, на спектральную характеристику цитохрома Р-450. Биохимия, 1973, т. 38, с. 897−90Q
  14. Д.И. Активация кислорода ферментными системами. ГЛ.: Наука, 1982, — 255 с.
  15. В.М., Гришанова А. Ю., Ляхович В. В. Изменение соотношения микросомных переносчиков электронов в реконструированных микросомных мембранах. Биохимия, 1984, т. 49, с. 693г-698.
  16. В.М., Гришанова А. Ю., Полякова Н. Е., Соловьев В. Н., Ляхович В. В. Самосборка мембранной микросомной монооксигеназной системы при гель фильтрации через сефадекс LH-20 . Биохимия, 1983, т. 48, с. 75−82.
  17. И.Б. Индукдая ксенобиотиками и особенности функционирования мембраносвязанных монооксигеназ. Автореферат дисс. на соискание степени доктора биологических наук, Ленинград, 1982, — 44 с.
  18. И.Б., Мишин В. М., Ляхович В. В. Роль стабилизации цитохрома Р-450 многоатомными спиртами в процессе реконструкции высокоактивной монооксигеназы. Докл. АН СССР, 1976,. т. 231, б. 1259−1262.
  19. И.Б., Ляхович В. В. Использование ингибирования в п системе со взаимным истощением «для оценки активных центров различных арилгидрокарбонгидроксилаз. Биохимия, 1979, т. 44, с. II72-II83.
  20. Archacov A.I., Bachmanova G. I., Kanaeva I.P. Reconversion of cytochrome P-420 into P-450 and reactivation of hydroxylases inmicrosomal membranes reconstituted by self-assembly. Croatica Ghemica Acta, 1977, v. 49, p. 367−368.
  21. Archacov A.I., Borodin E.A., Davydov D.R., Karyakin A.I., Boro-rovyagin V.L. Random distribution of NADPH-specific flavopro-tein and cytochrome P-450 in liver microsomes. Biochem. Bio-phys. Res. Commun., 1982, v. 109, p. 832−840.
  22. Alvares A. P., Schilling G., Levin W., Kuntzman R. Studies on the induction of CO-binding pigments in liver microsomes. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1967, v. 29, p. 521−526.
  23. Backes W.L., Sligar S.G., Shenkman J.B.Kinetics of hepatic cytochrome P-450 reduction: correlation v/ith spin state of the ferric heme. Biochemistry, 1982, v. 21, p. 1324−1330.
  24. Baskin L.S., Yang C.S. Cross-linking studies of cytochrome P-450 and reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate. -Biochemistry, 1980, v. 19, p. 2260−2264.
  25. Baskin L.S., Yang C.S. Cross-linking studies of the protein topography of rat liver microsomes. Biochim. Biophys. Acta, 1982, v. 684, P. 263−271.
  26. Baskin L.S., Yang C.S. Identification of cross-linked cytochrome P-45o in rat liver microsomes by enzyme-immunoassay. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1982, v. 108, p. 700−707.
  27. Bio-Rad laboratories Cat. 1973, p. 38.
  28. Black S.D., Coon M.J. Structural features of liver microsomal EADPH-cytochrome P-450 reductase. Hydrophobic domain, hydrophylicdomain and connecting region. J. Biol. Chem., 1982, v. 10, p. 5929−5938.
  29. Bonfils C., Balny C., Maurel P. Direct evidence for electron transfer from ferrous cytochrome b^ to oxyferrous intermediate of liver microsomal cytochrome P-450LM2. J. Biol. Chem., 1981, v. 256, p. 9457−9465.
  30. Boobis A.R., Nebert D. V/., Pelton J.S. Comparison of-naphtofla-vone and 3-methylcholantrene as inducers of hepatic cytochrome (s) P-448 and aryl hydrocarbon hydroxylase activity. Mol. Pharmacol. 19?6, v. 13, p. 259−268.
  31. Chiang J. Y. L., Interaction of purified microsomal cytochrome P-450 with cytochrome b^. Arch. Biochem. Biophys., 1981, v.211, p. 662−673.
  32. Colleman R.A., Bell R.M., Enzyme assymmetry in hepatic microsomal vesicles. Criteria for localization of lumenal enzymes with proteases. Biochim. Biophys. Acta, 1980, v. 595, p. 184−188.
  33. Conney д. H. Pharmacological implications of microsomal enzyme induction. Pharmacol. Rev., 1967, v. 19, p. 317−366.
  34. Coon M.J., Haugen D.A., Guengerich F.P., Vermilion J.L., Dean
  35. W. L. Liver microsomal membranes: reconstitution of the hydroxy-lation system containing cytochrome P-450. In: The Structural
  36. Basis for Membrane Function (Hatefi Y., Djavadi-Ohaniance L., eds). N.Y.-San-Francisco London, 1976, p. 409−427.
  37. Cooper M., Craft J. A., Estall M.R., Rabin B.R. Asymmetric distribution of cytochrome P-450 and UADPH-cytochrome P-450 reductase in vesicles from smooth endoplasmic reticulum of rat liver. Biochem. J., 1980, v. 190, p. 737−746.
  38. Cooper M.B., Estall M.R., Rabin B.R. The use of proteinases to determine the topological location of cytochrome P-450 .in vesicles derived from smooth endoplasmic reticulum of rat liver. Biochem. J., 1981, v. 196, p. 585−589.
  39. Cooper D. Y., Levin S., Narasimhulu S., Rosenthal 0., Estabrook R. W. Photochemical action spectrum of the terminal oxidase system. Science N.Y., 1964, v. 147, p. 400−402.
  40. Cumps J., Razzouk 6., Roberfroid M.B. Michaelis-Menten kinetic analysis of the hepatic microsomal benzpyrene hydrohylase from control, phenobarbital- and 3-methylcholanthrene-treated rats. -Chem.-Biol. Interactions, 1977, v. 16, p. 23−38.
  41. Dailey H.A., Strittmatter P. Characterization of the interaction of amphipatic cytochrome b^ with stearge coenzyme A desaturase and UADPH-cytochrome P-450 reductase. J. Biol.
  42. Chem., 1980, v. 255, p. 5184−5189.
  43. Dean V7. L., Gray R. D. Relationship between state of aggregation and catalytic activity for cytochrome P-450 LM^ and NADPH-cytochrome P-450 reductase. J. Biol. Chem., 1982, v. 257, p. 14 679−14 685.
  44. Be Pierre J, W., Dalner G. Structural aspects of the endoplasmic reticulum. Biochim. Biophys. Acta, 1975, v. 415, p. 411— 472.
  45. Dignam J. D., Strobel H. W. Preparation of homogeneous 1ШЭРН-cytochrome P-450 reductase from rat liver. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1975, v. 63, p. 845−852.
  46. Dignam J. D., Strobel H.W. NADPH-cytochrome P-450 reductase from rat liver: purification by affinity chromatography and characterization. Biochemistry, 1977, v. 16, p. 1116−1123.
  47. Du Bois R.N., John M. E., Waterman M.R., West S.B., Lu A.H.Y. Induction of hepatic cytochrome P-450: study of the molecular events follovving phenobarbital administration to rats. In: Biochemistry, Biophysics and Regulation of Cytochrome P-450.о
  48. Ernster L., Orrenius S. Substrate-induced synthesis of the hydroxylating enzyme system of liver microsomes. Fedn Pros. Fedn Am.Soc. Exp. Biol., 1965, v. 24, p. 1190−1199.
  49. Estabrook R. W., Franklin M. R., Cohen В., Shigamatzu A., Hildenbrandt A. G. Influence of hepatic microsomal mixed function oxidative reactions on cellular metabolic control. Metabolism, 1971, v. 20, p. 187−199.
  50. Estabrook R. W., Werringloer J. The microsomal oxidative metabolism of many drugs. In: The Induction of Drug Metabolisms (Estabrook R. W., Lindenlaub E., eds). Stuttgart — N.Y., Shattauer, 1979, p. 187−199.
  51. Eytan G. D. Use of liposomes for reconstitution of biological function. Biochim. Biophys. Acta, 1982, v. 694, p. 185−202.
  52. Franklin M.R., Estabrook R. W. On the inhibitory action of mersalyl on microsomal drug oxydation: a rigid organization of the electron transport chain. Arch, Biochem. Biophys., 1971, v. 143, p. 318−329.
  53. French J.S., Guengerich F.P., Coon M.J. Interaction of cytochrome P-450, NADPH-cytochrome P-450 reductase, phospholipid and substrate in the reconstituted liver microsomal enzyme system. J. Biol. Chem., 1980, v. 255, p. 4112−4119.
  54. Gaylor J.L., Delwich C.V. Removal of nonionic detergents from protein by chromatography on Sephadex LH-20. Anal. Biochem., 1969, v. 28, p. 361−368.
  55. Gigon P.L., Gram Т.Е., Gillette J.R. Studies on the rate of hepatic microsomal cytochrome P-450 by reduced nicotinamideadeninedinucleotide phosphate: effect of drug substrates. -Mol. Pharmacol., 1969, v. 5, p. 109−122.
  56. Gillete J. R., Davis D. S., Sasme H. A Cytochrome P-450 and its role in drug metabolism. Ann. Rev. Pharmacol., 1972, v. 12, p. 57−84.
  57. Glazer R.I., Schenkman J.B., Sartorelli A.C. Immunochemical studies on the role of reduced nicotinamide adeninedinucleotide phosphate-cytochrome с (P-450) reductase in drug oxidation. -Mol. Pharmacol., 1971, v. 7, p. 693−696.
  58. Goldstein J. A., Linko P., Luster M.J., Sundheimer D. W. Purification and characterization of a second form of hepatic cytochrome P-448 from rats treated with a pure polychlorinated biphenyl isomer. J. Biol. Chem., 1982, v. 257, p. 2702−2707.
  59. Gonial A. G., Bardawill C.J., Dawid M.M. Determination of serum albumins by means of the Biuret reaction. J. Biol. Chem., 1949, v. 177, p. 751−766.
  60. Greinert R., Pinch S.A.E., Stier A. Cytochrome P-450 rotamers control mixed-function oxygenation in reconstituted membranes. Rotational Diffusion studied by delayed fluorescence depolarization. Xenobiotica, 1982, v. 12, p. 717−726.
  61. Greinert R., Pinch S.A.E., Stier A. Conformation and rotational diffusion of cytochrome P-450 changed by substrate binding. -Bioscience Report, 1982, v. 2, p. 991−994.
  62. Griffin B.W., Peterson J. A., Werringloer J., Estabrook R.W. Chemistry of soluble and membrane-bound cytochrome P-450. -Ann. H.Y. Acad. Sci., 1975, v. 244, p. 107−131.
  63. Guengerich P.P. Isolation and purification of cytochrome P-450 and existence of multiple forms. Pharmacol. Ther. A, 1976, v. 6, p. 99−121.
  64. Guengerich P.P. Separation and purification of multiple forms of microsomal cytochrome P-450: activities of different/forms of cytochrome P-450 towards several compounds of environmental interest. J. Biol. Chem., 1977, v. 252, p. 3970−3979.
  65. Guengerich P.P. Comparison of highly-purified microsomal cytochrome P-450 and NADPH-cytochrome P-450 reductases by peptide mapping. Biochem. Biophys. Res. Commun., 197S, v. 82, p. 820−827.
  66. Guengerich P.P., Barman G.A., Wright S. T., Martin M.V., Kaminsky L.S. Purification and characterization of microsomal cytochrome P-450s. Xenobiotica, 1982, v. 12, p. 701−706.
  67. Guengerich P.P., Martin M.V. Purification of cytochrome P-450
  68. NADPH-суtochrome P-450 reductase and epoxide hydratase from a single preparation of rat liver microsomes, Arch. Biochem. Biophys. — 1980, v. 205, p. 365−379.
  69. Guengerich P.P., Wang P. S., Mason P. S., Mitchell M.B. Immunological comparison of rats, rabbits and humans using immunochemical staining coupled with sodium dodecil sulphate-polyacril-amide gel electrophoresis. Biochemistry, 1982, v. 21, p. 1698−1706.
  70. Gum J.R., Strobel H. W. Purified NADPH-cytochrome P-450 reductase Interaction with hepatic microsomes and phospholipid vesicles. -J. Biol. Chem., 1979, v. 254, p. 4177−4185.
  71. Gum J.R., Strobel H. W. Isolation of membrane-binding peptide of UADPH-cytochrome P-450 reductase. Characterization of the peptide and its role in the interaction of reductase with cytochrome P-450. J.Biol. Chem., 1981, v. 256, p. 7478−7486.
  72. Harada N., Omura T. Selective induction of two different molecular species of cytochrome P-450 by phenobarbital and 3- methyl cholanthrene. J. Biochem., 1981 v. 89, p. 237−248.
  73. Hashimoto Y., Yamano Т., Mason H.S. An electron spin resonance study of microsomal electron transport. J. Biol. Chem., 1962, v. 237, p. PC3843-PC3844.
  74. Hashimoto-Yutsudo С., Imai Y., Sato R. Multiple forms of cytochrome P-450 purified from rat liver microsomes of phenobarbi-tal- and 3-methylcholanthrene-treated rabbits. J. Biol. Chem., 1980, v. 88, p. 505−516.
  75. Hildebrandt A., Estabrook R.W. Evidence for the participation of cytochrome b^ in hepatic microsomal mixed-function oxidation reactions. Arch. Biochem. Biophys., 1971, v. 143, p. 66−79.
  76. Horecker B. L. Triphosphopiridine nucleotide-cytochrome с reductase in liver. J. Biol. Chem., — 1950, v. 183, p. 593−605.
  77. M. Т., West S. B., Lu A. Y. H. Separation, purification and properties of multiple forms of cytochrome P-450 from the liver microsomes of phenobarbital-treated mice. J. Biol. Chem., 1976, v. 251, p. 4659−4665.
  78. Ichikawa Y., Yamano T. Reconversion of detergent and sulfhyd-ryl reagent-pretreated P-420 to P-450 by polyols and glutathi^ one. Biochim. Biophys. Acta, 1967, v. 131, p. 490−497.
  79. Imai Y. The use of 8-aminooctyl Sepharose for the separation of some components of the hepatic microsomal electron transfer system, J. Biol. Chem., 1976, v. 80, p. 267−276.
  80. Imai Y. Reconstitution 0-dealkylase system contaning various forms of liver microsomal cytochrome P-450. J. Biochem., 1979, v. 86, p. 1697−1707.
  81. Imai Y., Ito A., Sato R. Evidence for biochemically different type of vesicles in the hepatic microsomal fraction, J. Biochem., 1966, v. 60, p, 417−425.
  82. Imai Y,, Sato R. Substrate interaction with hydroxylase system in liver microsomes. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1966, v. 22, p. 620−626.
  83. Imai Y., Sato R. A gel electrophoretically homogeneous preparation of cytochrome P-450 from liver microsomes of phenobar-bital pretreated rabbits. Biochem. Biophys, Res. Commun., 1974, v. 60, p. 8−14.
  84. Imai Y., Sato R. The role of cytochrome b^in reconstituted N-demethylase system containing cytochrome P-450. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1977, v. 75, p. 420−426.
  85. Imai Y., Sato R., Iyanagy T. Rate-limiting step in the reconstituted microsomal drug hydroxylase system. J. Biochem., 1977, v. 82, p. 1237−1246.
  86. Imai Y., Siekevitz P. H. A comparison of some properties of microsomal cytochrome P-450 from normal, methylcholanthrene-and phenobarbital-trested rats. Arch. Biochem, Biophys., 1971, v. 144, P. 143−159.
  87. Ingelman-Sundberg M., Blanck J., Smettan G., Ruckpaul K. Reduction of cytochrome P-450 LM2 by ITADPH in reconstituted phospholipid vesicles is dependent on membrane charge. -Eur. J. Biochem., 1983, v. 134, p. 157−162.
  88. Ingelman-Sundberg M., Glaumann H. Reconstitution of the liver microsomal hydroxylase system into liposomes. FEBS Letters, 1977, v. 78, p. 72−76.
  89. Ingelman- Sundberg M., Haaparanta T., Rydstrom J. Membrane charge as effector of cytochrome P-450 LMg catalyzed reactions in reconstituted liposomes. Biochemistry, 1981, v.20, p. 4100−4106.
  90. Ingelman-Sundberg M., Johansson J. Cytochrome b, — as electron donor to rabbit liver cytochrome P-450 IM^ in reconstituted phospholipid vesicles. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1980, v. 97, p. 582−589.
  91. Ingelman-Sundberg M., Joansson J. Catalytic properties of purified forms of rabbit liver microsomal cytochrome P-450 in reconstituted phospholipid vesicles. Biochemistry, 1980, v. 19, p. 4004−4011.
  92. Ingelman-Sundberg M., Johansson J., Hansson Л. Catalytic properties of the liver microsomal hydroxylase system in reconstituted phospholipid vesicles. Acta biol. med. germ., 1979, v. 38, p. 379−388.
  93. Iyanagi Т., Mason H. S. Some properties of hepatic reduced nicotinamid adenine dinucleotide phosphate cytochrome с reductase. Biochemistry, 1973, v. 12, p. 2297−2308.
  94. Iyanagi Т., Makino N., Mason H. S. Redox properties of the reduced nicotinamid adenine dinucleotide phosphate-cytochrome P-450 and reduced nicotinamid adenine dinucleotide -cytochrome Ъ, — reductase. Biochemistry, 1974, v. 13, p. 17 011 710.
  95. Jefcoate C.R., Gaylor J. L., Calabrese R. L. Ligand interactions with cytochrome P-450. 1. Binding of primary amines. -Biochemistry, 1969, v. 8, p. 3455−3463.
  96. Ji Т.Н., Middaugh C.R. Does random collision cros3-linking occur? Biochim. Biophys. Acta, 1980, v. 603, p. 371−373.
  97. Johnson E.P. Multiple forms of cytochrome P-450: criteria and significance. Rev. Biochem. Toxicol., 1979, v. 1, p. 1−26.
  98. Johnson E.P., Levitt D.S., Muller-Eberhard U., Thorgeirsson S.S. Catalysis of divergent Pathways of 2-acetylaminofluorene metabolism by multiple forms of cytochrome P-450. -Cancer Res., 1980, v. 40, p. 4456−4459.
  99. Kawato S., Kinosita K. Time-dependent absorbtion anisotropy and rotational diffusion of proteins in membrane. Biophys. J., 1981, v. 36, p. 277−296.
  100. Kitada M., Kitagawa H., Kamataki T. Effect of incorporation into microsomes of purified HADPH-cytochrome с (P-450) reductase on drug oxidations. Biochem. Pharmacol., 1979, v. 28, p. 2670−2673.
  101. Kitchin К. T. Enhanced aryl hydrocarbon hydroxylase activity after interaction between solubilized cytochrome P-448 and microsomes low in endogenous cytochrome P-450. Biochem, Pharmacol., 1980, v. 29, p. 1261−1270.
  102. Knapp J. A., Dignam J. D., Sb-robel H. V/. NADPH-cytochrome P-450 reductase. Circular dichroism and physical studies. J. Biol. Chem., 1977, v. 252, p. 437−443.
  103. Kuriyama У., Omura Т., Siekevitz P., Palade G. E. Effectsof phenobarbital on the synthesis and degradation of the protein components of rat liver microsomal membranes. J. Biol.
  104. Chem., 1969, v. 244, p. 2017−2026.
  105. Kuwahara S.I., Omura T. Different requirement for cytochrome b^ in NADPH-supported O-deethylation of p-nitrophenetole catalyzed by two types of microsomal cytochrome P-450. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1980, v. 96, p. 1562−1568.
  106. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature, 1970, v. 227, p. 680−685.
  107. Lambeth J., Kamin H., Seybert D. W. Phosphatidylcholine vesicle reconstituted cytochrome P-450. Role of the membraneseein control of activity and spin state of the cytochrome. -J. Biol. Chem., 1980, v. 255, p. 8282−8288.
  108. Leibman К.C., Hildebrandt Л.G., Estabrook R. W. Spectrophotometry studies of interaction between various substrates in their binding to microsomal cytochrome P-450. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1969, v. 36, p. 789−794.
  109. Lowry 0. H., Rosebrough N. J., Parr A. L., Randall R.J. Protein measurement with the Polin phenol reagent. J. Biol. Chem., 1951, v. 193, p. 265−275.
  110. Lu A.Y.H., Coon M.J. Role of hemoprotein P-450 in fatty acid cO -hydroxylation in a soluble enzyme system from liver microsomes. J. Biol. Chem., 1968, v. 243, p. 1331−1332.
  111. Lu A. Y. H., Junk K. W., Coon M. J. Resolution of the cytochrome Р-450-containing oj-hydroxylation systen of liver microsomesinto three components. J. Biol. Chem., 1969, v. 244, p. 3714−3721.
  112. Lu A.Y.H., Levin W. The resolution and reconstitution of the liver microsomal hydrohylation system. Biochim. Biophys. Acta, 1974, v. 344, p. 205−240.
  113. Lu A. Y. H., Miwa G. T. Interaction of cytochrome P-450 and NADPH-cytochrome P-450 reductase in membrane system. In: Biochemistry, Biophysics and Regulation of Cytochrome P-450.о
  114. Lu A.Y. H., West S. B,"Reconstituted mammalian mixed-function oxidases: requirement, specificities and other properties. -Pharmacol. Ther. A, 1978, v. 2, p. 337−358.
  115. Lu A.Y.H., West S.B.Multiplicity of mammalian microsomal cytochromes P-450. Pharmacol. Rev., 1980, v. 31, p. 277−295.
  116. Lyakhovich V. V., Polyalcova N. E., Popova V. I., Eremenko S. I., Olkin S.E., Weiner L.M. Affinity modification of cytochrome P-45o by iodine-containing stable, .iminoxyl radical. FEBS Letters, 1980, v. 115, p. 31−34.
  117. Masters B.S.S., Kamin H., Gibson Q.H., Williams C.H., Williams C.H. Studies on the mechanism of microsomal triphosphopyridine nucleotide-cytochrome с reductase. J. Biol. Chem., 1965, v. 240, p. 921−931.
  118. Masters B.S.S., Kelson Б.В., Ziegler D.M., Baron J., Raj P.P., Isaacson E. Ь. Immunochemical studies utilizing antibody to NADPH-cytochrome с as a specific inhibitor of microsomal electron transport. Chem.-Biol. Interactions, 1971, v. 3, p. 296−299.
  119. Masters B.S.S., Okita R.T. The history, properties and function of HADPH-cytochrome P-450 reductase. Pharmac. Ther., 1979, v. 9, p. 227−244.
  120. Masters B.S.S., Prough R.A., Kamin H. Properties of the stable aerobic half-reduced states of NADPH-cytochrome с reductase. Biochemistry, 1975, v. 14, p. 607−613.
  121. Mason H.S., North J.C., Vannestl M. Microsomal mixed-function oxidation: the metabolism of xenobiotics. Fed. Proc., 1965, v. 24, p. 1172−1180.
  122. Masuda-Mikawa R., Fujii-Kuriyama Y., Negishi M., Tashiro Y. Purification and partial characterization of hepatic microsomal cytochrome P-450s from phenobarbital and 3-methylcholan-threne-treated rats. J. Biochem., 1979, v.86, p. 1383−1394.
  123. Matsubara Т., Baron J., Peterson L. L., Peterson J. A. HADPHcytochrome P-450 reductase. Arch. Biochem. Biophys., 1976, v. 172, p. 463−469.
  124. Matusuura S., Pujii-Kuriyama Y., Tashiro Y. J. Cell. Biol., 1978, v. 78, p. 503−519.
  125. Mcintosh P.R., Freedman R.B. Characterization of Cooper-dependent cross-linking reaction between two forms of cytochrome P-450 in rabbit liver microsomal membrane. Biochem, J., 1980, v. 187, p. 227−237.
  126. Mcintosh P.R., Kawato P.R., Freedman R.B., Cherry R.J. Evidence from cross-linking rotational diffusion studies that cytochrome P-450 can form molecular aggregates in rabbit liver microsomal membranes. FEBS Letters, 1980, v. 122, p. 5458.
  127. Miwa G. T., Cho A. K. Stimulation of microsomal N-demethylation by solubilized ITADPH-cytochrome с reductase. Life Sci., 1976, v. 18, p. 983−988.
  128. Miwa G. T., Lu A. Y. H. Studies of stimulation of cytochrome Р-450-dependent monooxygenase activity by dilauroilphosphatidylcholine. Arch. Biochem. Biophys., 1981, v. 211, p. 454 458.
  129. Miwa G. T., West S.B., Huang M.-T., Lu A.Y.H. Studies on the association of cytochrome P-45o and Uadph-cytochrome с reductase during catalysis in a reconstituted hydroxylating system. J. Biol. Chem., 1979, v. 254, p. 5695−5700.
  130. Uarasimhulu S. Thermotropic transitions in fluidity of bovine adrenocortical microsomal membrane and substrate cytochrome P-450 binding reaction. — Biochim. Biophys. Acta, 1977, v.487, p. 378−387.
  131. Uilsson O.S., Dalner G. Enzyme and phospholipid asymmetry in liver microsomal membranes. J. Cell. Biol., 1977, v. 72, p. 568−583.
  132. Nilsson 0.S., Dallner G. Distribution of constitutive enzymes and phospholipids in microsomal membranes of rat liver. -PEBS Letters, 1975, v. 58, p. 190−193.
  133. ITilsson O. D., DePierre J. W., Dalner G. Investigation of the transverse topology of the microsomal membrane using combinations of proteases and the non-penetrating reagent diazoben-zene sulfonate. Biochim. Biophys. Acta, 1978, v. 511, p. 93 104.
  134. IToshiro M., Omura T. Immunochemical study on the electron pathway from NADH to cytochrome P-450 of liver microsomes. -J. Biochem., 1978, v. 83, p. 61−77.
  135. Omura Т., Noshiro M., Harada N. In: Microsomes, Drug Oxidations and Chemical Carcinogenesis (Coon M.J., Conney A.H., Estabrook R. V7., Gelboin H.V., Gillete J.R., O’Brien P. J., eds). ELY., Academic Press, 1980, p. 445−453.
  136. Omura Т., Sato R. A new cytochrome in liver microsomes. J. Biol. Chem., 1962, v.237, p. 1375−1381.
  137. Omura Т., Sato R. The carbon monooxide-binding pigment of liver microsomes. J. Biol. Chem., 1964, v. 239, p. 23 702 385.
  138. Omura Т., Sato R., Cooper D.Y., Rosental 0., Estabrook R. W. Function of cytochrome of cytochrome P-450 of microsomes. -Fed. Proc., 1965, v. 24, p. 1181−1189.
  139. Ouchterlony 6. Gel-diffusion techniques.- In: Immunchemie, 15. Colloquium Ges. Physiol. Chem. Springer, Berlin -Heidelberg -N.Y., 1965, p. 13−35.
  140. Pelkonen 0., Nebert D. W. Metabolism of polycyclic aromatic hydrocarbons: etiologic role in carcinogenesis. Pharmac. Rev., 1982, v. 34, p. 189−222.
  141. Peterson J.A., Ebel R.E., O’Keeffe D. H., Matsubara Т., Estabrook R. W. Temperature dependence of cytochrome P-450 reduction. A Model for NADPH-cytochrome P-450 reductase cyto -chrome P-450 interaction. — J. Biol. Chem., 1976, v. 251, p. 4010−4016.
  142. Phillips A.H., Langdon R. G. Hepatic triphosphopyridine nucle-otide-cytochrome с reductase: isolation, characterization and kinetic studies. J. Biol. Chem., 1962, v. 237, p. 2652−2666.
  143. Pickett C.B., Jeter R. L., Morin J., Lu A. Y.H. Electroimmuno-chemical quantitation of cytochrome P-450, cytochrome P-448 and epoxide hydrolase in rat liver microsomes. J. Biol. Chem., 1981, v. 256, p. 8815−8820.
  144. Pokrowsky A., Mishin V., Rivkind N., Lyakhovich V. The binding of NADPH-cytochrome с reductase to rat liver microsomes. -Biochem. Biophys. Res. Commun., 1977, v. 77, p. 912−917.
  145. Poland A., Glover E., Comparison of 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin, a potential inducer of aryl hydrocarbon hydroxylasewith 3-methylcholanthrene, Mol. Pharmacol., 1974, v. 10, p. 349−359.
  146. Prough R.A., Burke M.D. The role of NADPH-cytochrome с reductase in microsomal hydroxylation reactions. Arch. Biochem. Biophys., 1975, v. 170, p. 160−168.
  147. Racker E., Violand В., O’Neal S. Reconstitution, a v/ay of biochemical research: some new approaches to membrane-bound enzymes. Arch. Biochem. Biophys., 1979, v. 198, p. 470−477.
  148. Razin S. Reconstitution of biological membrane. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1972, v. 265, p. 241−296.
  149. Remmer H. The role of liver in drug metabolism. Amer. J. Med., 1970, v. 49, p. 617−629.
  150. Rice S., Talcott R.E. Effect of isoniazid treatment on selected hepatic mixed-function oxydases. Drug Metab. Dispos., 1979, v. 7, p. 260−262.
  151. Rich P.R., Tiede D.M., Bonner W.D. Studies on the molecular organization of cytochrome P-450 and b^ in the microsomal membrane. Biochim. Biophys. Acta, 1979, v. 546, p. 307−315.
  152. Richter C., Winterhalter К. H., Cherry R.J. Rotation diffusion of cytochrome P-450 in rat microsomes. FEBS Letters, 1979,. v. 102, p. 151−154.
  153. Robie K.M., Cha Y.IT., Talkott R.E., Schenkmann J.B. Kinetic Studies of benzpyrene and hydroxybenzpyrene metabolism. -Chem. Biol. Interactions, 1976, v. 12, p. 285−297.
  154. Roger M. J., Strittmatter P. Lipid-protein interactions in the reconstitution of the microsomal reduced nicotinamide adenine dinucleotide-cytochrome b^ reductase system. J. Biol. Chem., 1973, v. 248, p. 800−806.
  155. Roger M. J., Strittmatter P. Evidence for random distribution and translational movement of cytochrome b^ in endoplasmic reticulum. J. Biol. Chem., 1974, v. 249, p. 895−900.
  156. Roger IvI. J., Strittmatter P. The binding of reduced nicotinamide adenine dinucleotide-cytochrome b^ reductase to hepatic microsomes. J. Biol. Chem., 1974, v. 249, p.895−901.
  157. Rottem S., Stein 0., Reassembly of Micoplasma membranes disaggregated by detergents. Arch. Biochem. Biophys., 1968, v. 125, p. 46−53.
  158. Ruckpaul K., Rein H., Blanck J., Ristau 0., Coon M.J. Molecular Mechanism of interactions between phospholipids and liver microsomal cytochrome P-450 LM2. In: Biochemistry, Biophysics and Regulation Of Cytochrome P-450 (Gustaffsonо
  159. J.-A., Carlstedt-Duke J., Mode A., Rafter J., eds). Amsterdam N. Y. — Oxford: Elsevier Biomedical Press, 1980, p. 539 549.
  160. Ryan D. E., Thomas P.E., Levin W. Hepatic microsomal cytochrome P-450 from rats treated with isosafrole. Purification and characterization of four enzymic forms. J. Biol. Chem., 1980, v. 255, P. 7941−7955.
  161. Ryan D. E., Thomas P. E., Levin W. Purification and characterization of minor form of hepatic microsomal cytochrome P-450 from rats treated wuth polychlorinated biphenils. Arch. Biochem. Biophys., .1982, v. 216, p. 272−288.
  162. Ryan D. E., Thomas P.E., Reik L.M., Levin W. Purification, characterization and regulation of five rat hepatic microsomal cytochrome P-450 isozymes. Xenobiotoca, 1982, v. 12, p. 727−744.
  163. Schenkman J.B., Remmer H., Estabrook R. W. Spectral studies of drug interactions with hepatic microsomal cytochrome. Mol. Pharmacol., 1967, v. 3, p. 113−123.
  164. Schwarz D., Pirrwitz J., Coon M.J., Ruckpaul K. Mobility and clusterlike organization of liposomal cytochrome P-450 LM2: Saturation Transfer EPR studies. Acta biol. med. germ., 1982, v. 41, p. 425−430.
  165. Sjovall J., Nystrom E., Hashti E. In: Adv. in Chromatography (Giddings J.C., Keller R.A., eds). Marcell Dekker Inc., N.Y., 1968, p. 119−170.
  166. Spatz L., Strittmatter P. A form of cytochrome b^ that contains an additional hydrophobic sequence of 40 amino acid residues. -Proc. Natl Acad. Sci. USA, 1971, v. 68, p. 1042−1046.
  167. Spatz L., Strittmatter P. A form of reduced nicotinamide adenine dinucleotide-cytochrome b^ reductase containing both the catalitic site and additional hydrophobic membrane-bound segment. J. Biol. Chem., 1973, v. 248, p. 793−799.
  168. Stier A., Pinch S.A.E., Bosterling B. Non-lamellar structure31in rabbit liver microsomal membranes: A P-NMR study. -FEBS Letters, 1978, v. 91, p. 109−113.
  169. Stier A., Pinch S.A.E., Greinert R., Holme M., Muller R. Membrane structure and function of the hepatic microsomal cytochrome P-450 system. Liver and Aging (Kitani K., ed.). Elsevier Biomedical Press, 1982, p. 3−14.
  170. Stier A., Sackmann E. Spin Labels as enzyme substrates. Heterogeneous lipid distribution in liver microsomal membranes. -Biochim. Biophys. Acta, 1973, v. 311, p. 400−408.
  171. Strobel H. V/., Dignam J. D. Purification and properties of NADPH-cytochrome P-450 reductase. Meth. Enzymol., 1978, v. 52, p, 89−96.
  172. Strobel H.W., Lu A.Y.H., Heidema J., Coon M.J. Phosphatidyl-cholin requirement in the enzymic reduction of hemoprotein P-450 and in fatty acid, hydrocarbon and drug hydroxylation. -J. Biol. Chem., 1970, v. 245, p. 4851−4857.
  173. Tanford C., Reynolds J. A. Characterization of membrane proteins in detergent solutions. -Biochim. Biophys. Acta, 1976, v. 457, p. 133−170.
  174. Tanigushi H., Imai Y., Iyanagi T., Sato R. Interaction between NADPH-cytochrome P-450 reductase and cytochrome P-450 in themembrane of phosphatidylcholine vesicles. biochim. Biophys. Acta, 1979, v.'550, p. 341−356.
  175. Thomas P. E., Lorreniowski D., Ryan D., Levin W. Preparation of monospecific antibodies against two forms of rat liver cytochrome P-450 and quantitation of these antigens in microsomes. Arch. Biochem. Biophys., 1979, v. 192, p. 524−532.
  176. Thomas P. E., Lu А. У. H., Ryan D., Levin W. Immunochemical evidence for six forms of rat liver cytochrome P-450 obtained using antibodies against purified rat liver cytochrome P-450 and P-448. Mol. Pharmacol., 1976, v. 12, p. 746−758.
  177. Thomas P. E., Lu A. Y. H., West S. B., Ryan D., Miwa G. T., Levin W. Accessibility of cytochrome P-450 in microsomal membrane- inhibition of metabolism by antybodies to cytochrome P-450. -Mol. Pharmacol., 1977, v. 13, p. 819−831.
  178. Thomas P.E., Reik L.M., Ryan D. E., Levin W. Regulation of three forms of cytochrome P-450 and epoxide hydrolase in rat liver microsomes. Effect of age, sex and induction. J, Biol. Chem., 1981, v. 256, p. 1044−1052.
  179. Trout G.E. The dissociation of flavin coenzymes from trypsin-solubilized WADPH-cytochrome с (P-450) reductase of pig liver microsomes. Eur. J. Biochem., 1977, v. 71, p. 533−537.
  180. I. В., Mishin V.M., Gromova 0. A., Zakharova N. E., Lyakhovich V. V. Preparation of high-active microsomal mono-oxygenase system reconstituted by means of self-assembly. -Biochem. Pharmacol., 1977, v. 26, p. 2061−2063.
  181. Van der Hoeven T.A., Coon M.J. Preparation and properties of partially purified cytochrome P-450 reductase from rabbit liver microsomes. J. Biol. Chem., 1974, v. 249, p. 6302−6310.
  182. Vatsis K. P., Oprian D.D., Coon M. J. Kinetic reduction of purified liver microsomal cytochrome P-450 in reconstitutedenzyme system studied by stopped flow spectrophotometry, -Acta Mol. med. Germ., 1979, v. 38, p. 459−467.
  183. Vermilion J.L., Ballon D. P., Massey V., Coon M.J. Separate roles for FMN and FAD in catalysis by liver microsomal UADPH-cytochrome P-450 reductase. J. Biol. Chem., 1981, v. 256, p. 266−277.
  184. Vermilion J.L., Coon M. J. Highly purified detergent-solubiliz-ed NADPH-cytochrome P-450 reductase from phenobarbital-indu-ced rat liver microsomes. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1974, v. 60, p. 1315−1322.
  185. Vermilion J.L., Coon M.J. Identification of the high and low potential flavins of liver microsomal NADPH-cytochrome P-450 reductase. J. Biol. Chem., 1978, v. 253, p. 8812−8819.
  186. Vermilion J.L., Coon M.J. Purified liver microsomal NADPH-cytochrome P-450 reductase: Spectral characterization of oxidation-reduced states. J. Biol. Chem., 1978, v. 253, p. 2694−2704.
  187. Warner M., Noims A.H. Multiple forms of ethoxyresorufin-O-deethylase and benzphetamine U-demethylase in solubilized and partially resolved rat liver cytochrome P-450. Drug Metab. Dispos., 1979, v. 7, p. 188−193.
  188. Waxman D.J., Walsh C. Phenobarbital-induced rat liver cytochrome P-450. Purification and characterization of two closely related isozymic forms. J. Biol. Chem., 1982, v. 257, p. 10 446−10 457.
  189. Ffelch R.M. Toxicological implications of drug metabolism. -Pharmacol. Rev., 1979, v. 30, p. 457−467.
  190. Welton A.F., Aust S.D. Multiplicity of cytochrome P-450 hemo-proteins in rat liver microsomes. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1974, v. 56, p. 898−906.
  191. Welton A.P., Aust S.D. Evidence against multiple forms of reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-cytochrome с reductase in rat liver microsomes. Biochem. Pharmacol., 1975, v. 24, p. 1641−1644.
  192. S.B., Huang M. -T., Miwa G. T,, Lu A.Y.H. A simple and rapid rapid procedure for the purification of phenobarbital induced cytochrome P-450 from rat liver microsomes. Arch. Biochem. Biophys., 1979, v. 193, p. 42−50.
  193. Williams С.H., Kamin H. Microsomal triphosphopyridine nucleotide-cytochrome с reductase of liver. J. Biol. Chem., 1962, v. 237, p. 587−595.
  194. T., Greim H., Huang M. -T., Miwa G. T., Lu A. Y. H. Aldrin epoxidation catalyzed by purified rat liver cytochrome P-450and P-448. High selectivity for cytochrome P-450. Eur. J. Biochem., 1980, v. 111, p. 545−551.
  195. Yang C. S. The association between cytochrome P-450 and NADPH-cytochrome P-450 reductase in microsomal membrane. PEBS Letters, 1975, v. 154, p. 61−64.
  196. Yang C.S. The organization and interaction of monooxygenase enzymes in the microsomal membrane. Life Sci., 1977, v. 21, p. 1047-Ю58.
  197. Yang C.S. Interaction between solubilized cytochrome P-450 and hepatic microsomes. J. Biol. Chem., 1977, v. 252, p. 293−298.
  198. Yang C.S., Strickhart P. S., Interaction between solubilized cytochrome P-450 and hepatic microsomes. J. Biol. Chem., 1975, v. 250, p. 7968−7972.
  199. Yang C.S., Strickhart P. S., Kicha L.P. The effect of temperature on monooxygenase reactions in the microsomal membrane. -Biochim. Biophys. Acta, 1977, v. 465, p. 362−370.
  200. Yang C.S., Strickhart P. S., Kicha L.P. Interaction between NADPH-cytochrome P-450 reductase and hepatic microsomes.
  201. Biochim. Biophys. Acta, 1978, v. 509, p. 326−337.
  202. Yang S.K., Roller P.P., Pu P., Harvey R. G., Gelboin H. V. Evidence for a 2,3-epoxide as an intermediate in the microsomal metabolism of benzo (a)pyrene to 3-hydroxybenzo (a)pyrene. -Biochem. Biophys. Res. .Commun., 1977, v. 77, p. 1176−1180.
  203. Yasukochi Y., Masters B.S.S. Some properties of a detergent-solubilized NADPH-cytochrome с (P-450) reductase purifiedby biospecific chromatography. J. Biol. Chem., 1976, v. 251, p. 5337−5344.
  204. Yasukochi Y., Peterson J. A., Masters B. S. S. NADPH-cytochrome с (P-450) reductase. Spectrophotoinetric and stopped flow kinetic studies on the formation of reduced flavoprotein intermediates. J. Biol, Chem., 1979, v. 254, p. 7097−7104.
  205. Yasunobu К. T., Armes L. G., Grabb J.W., Haniu M., Gunsalus J. C., Coon M. J. Comparison of the known chemical structure of some cytochrome P-450. In: Biochemistry, Biophysics andо
  206. Regulation of Cytochrome P-450 (Gustaffson J.-A., Carlstedt-Duke J., Mode A., Rafter J., eds). Amsterdam N.Y. — Oxford, Elsevier Biomedical Press, 1980, p. 49−56.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!