Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Генетические детерминанты токсинообразования в семействе Enterobacteriaceae

Диссертация: Генетические детерминанты токсинообразования в семействе Enterobacteriaceae
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Объектом исследования являлась коллекция штаммов энтеробактерий, выделенная из патологического материала, полученного от пушных зверей. Была выделена плазмидная ДНК, проведен анализ плазмидных профилей, установлены пггаммы, содержащие tox-плазмиды, получены рестрикционные карты, определена устойчивость к антибиотикам, определена молекулярная масса и копийность, определено наличие в геноме… Читать ещё >

Генетические детерминанты токсинообразования в семействе Enterobacteriaceae (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Список сокращений
  • 1. Введение
  • 2. Обзор литературы
    • 2. 1. Бактериальные токсины и их классификация
      • 2. 1. 1. Энтеротоксины семейства Еп1егоЬас1епасеае в свете современной классификации
      • 2. 1. 2. Распространение в природе
      • 2. 1. 3. ЬТ-энтеротоксины
      • 2. 1. 4. 8Т-энтеротоксины
      • 2. 1. 5. Шига-токсины
    • 2. 2. Строение генов токсинообразования
      • 2. 2. 1. Строение генов ЬТ
      • 2. 2. 2. Строение генов БТ. ч 2.2.3. Регуляция синтеза токсинов на генном уровне
    • 2. 3. Факторы адгезии
    • 2. 4. Локализация генов токсинообразования в геноме бактерий
      • 2. 4. 1. Хромосомная локализация генов токсинообразования
      • 2. 4. 2. Внехромосомная локализация генов токсинообразования
        • 2. 4. 2. 1. Плазмиды
        • 2. 4. 2. 2. Транспозоны
        • 2. 4. 2. 3. Бактериофаги
    • 2. 5. Генетический обмен
      • 2. 5. 1. Роль внехромосомных элементов в формировании токсического фенотипа и распространении токсикоинфекций
      • 2. 5. 2. Трансформация
      • 2. 5. 3. Конъюгация
      • 2. 5. 4. Трансдукция
  • 3. Материалы и методы
    • 3. 1. Штаммы бактерий и бактериофагов
    • 3. 2. Используемые реактивы и среды
    • 3. 3. Буферные растворы и среды
    • 3. 4. Выделение плазмид с помощью щелочного лизиса
    • 3. 5. Выделение высокомолекулярной плазмидной ДНК
    • 3. 6. Выделение ДНК модифицированным методом Экхарда
    • 3. 7. Проведение расщепления ДНК рестриктазами
    • 3. 8. Электрофорез ДНК
    • 3. 9. Трансфекция
    • 3. 10. Транспозиция
    • 3. 11. Получение препаратов фага М
    • 3. 12. Определение тигра бактериофагов
    • 3. 13. Конъюгация
    • 3. 14. Спот-тест
  • 4. Экспериментальная часть
    • 4. 1. Определение оптимальных условий выделения плазмидной ДНК
    • 4. 2. Анализ плазмидных профилей изучаемых штаммов. 71 4.3 Анализ обнаруженных плазмид на наличие генов токсинообразования
    • 4. 4. Рестрикционный анализ плазмид, кодирующих токсинообразование
    • 4. 5. Определение молекулярной массы плазмид
    • 4. 6. Определение копийности изучаемых плазмид
    • 4. 7. Изучение влияния дозы гена на уровень продукции токсинов
    • 4. 8. Изучение возможности переноса генов токсинообразования между различными штаммами Е. col
  • 5. Обсуждение результатов
  • 6. Выводы
  • 7. Практические предложения

Актуальность темы

:

Во многих районах земного шара острые диарейные заболевания до сих пор остаются нерешенной проблемой ветеринарии и медицины. Они являются причиной высокой смертности у людей, сельскохозяйственных животных, в том числе и пушных зверей. При этом большинство вспышек токсикоинфекций обусловлено энтеротоксигенными штаммами Е. coli (ЕТЕС), которые продуцируют токсины, вызывающие диарейный синдром.

В большинстве случаев жертвами токсикоинфекции становятся дети младшего возраста и молодняк сельскохозяйственных животных. По данным ВОЗ, из 1млрд. ежегодно заболевающих детей умирает более 3-х млн.

Серьезную проблему представляют диареи, вызываемые ЕТЕС и в сельском хозяйстветак даже в хорошо налаженных свиноводческих хозяйствах США от 2,5 до 5% новорожденных поросят погибают от диарейного токсикоза.

В отечественном пушном звероводстве токсикоинфекции являются основной причиной дорегистрационного отхода новорожденных щенков и гибель молодняка в период отсадки.

Многочисленными исследованиями было установлено, что ведущую роль в патогенезе диарейных заболеваний играют так называемые цитотонические токсины: термолабильный (LT) и термостабильные (STI, STII).

Этот факт, по-видимому, явился причиной своеобразного перекоса в их изучении, так как длительное время основное внимание уделялось изучению химической структуры самых токсинов и различных аспектов их взаимодействия с макроорганизмом. Значительно меньше освещены вопросы, связанные с изучением структуры и локализации кодирующих их генов. Первые же работы в этом направлении показали большое сходство как в строении самих токсинов, продуцируемых таксономически отдаленными группами микроорганизмов, так и в первичной структуре их генов (Смирнов, 1984). Было установлено, что в большинстве случаев гены, кодирующие токсинообразование, локализованы на плазмидахвнехромосомных генетических элементах, способных к автономной репликации с варьирующими размерами и числом копий. Однако имеющиеся данные о таких плазмидах носят далеко не полный характер и относятся в основном к плазмидам, изолированным из штаммов, выделенных от людей. Значительно меньше изучены плазмиды, кодирующие токсинообразование в штаммах, ведущих происхождение от сельскохозяйственных животных, и полностью отсутствуют данные о генетических детерминантах токсигенности штаммов, поражающих пушных зверей.

Наблюдаемое в последние 10−15 лет бурное развитие биотехнологии и генной инженерии дает возможность не только изучения, но и использования генетических детерминант токсигенности при создании диагностических и лечебно-профилактических препаратов.

Исходя из вышесказанного, изучение генетических детерминант токсинообразования в штаммах, изолированных из патологического материала, полученного от пушных зверей, представляется весьма актуальными своевременным.

Цель исследования:

Целью нашей работы стало изучение генетических детерминант токсинообразования, их физико-химических и молекулярно-генетических свойств у штаммов эшерихий, изолированных от пушных зверей.

Для этого было необходимо решить следующие задачи:

1. Определить наличие внехромосомных элементов в клетках токсигенных штаммов, изолированных от пушных зверей.

2. Изучить плазмидные профили токсигенных штаммов и локализовать гены, кодирующие токсинообразование.

3. Провести анализ молекулярно-генетических характеристик плазмид, кодирующих токсинообразование, и определить: а) физическое строениеб) молекулярную массув) копийность.

4. Установить наличие корреляции между копийностью плазмид и уровнем токсинообразования.

5. Изучить возможность горизонтального переноса генов токсинообразования в популяции энтеробактерий посредством конъюгации.

Объектом исследования являлась коллекция штаммов энтеробактерий, выделенная из патологического материала, полученного от пушных зверей. Была выделена плазмидная ДНК, проведен анализ плазмидных профилей, установлены пггаммы, содержащие tox-плазмиды, получены рестрикционные карты, определена устойчивость к антибиотикам, определена молекулярная масса и копийность, определено наличие в геноме F-фактора.

Научная новизна исследования:

В представленной работе впервые изучены молекулярно-генетические особенности детерминант токсинообразования у энтеробактерий, изолированных от пушных зверей в зверохозяйствах РФ.

Данная работа является одной из первых, посвященной изучению внехромосомных факторов инфекционной наследственности токсигенных штаммов Е. coli, выделенных от пушных зверей в зверохозяйствах РФ.

В ходе работы был проведен анализ плазмидных профилей и установлена локализация генов, кодирующих токсинообразование, изучены молекулярно-генетические характеристики плазмид, кодирующих продукцию цитотонических токсинов (физическое строение, молекулярная масса, копийность) и установлена корреляция между копийностыо и уровнем токсинообразования. Также изучена возможность горизонтального переноса генов токсинообразования в популяции энтеробактерий посредством конъюгации.

Практическая ценность работы:

Результаты диссертационных исследований могут служить методологической основой для создания комплекса диагностических и лечебно-профилактических средств для борьбы с токсикоинфекциями, обусловленными энтеротоксигенными эшерихиями.

Материалы настоящего исследования могут быть использованы при написании методических рекомендаций, а также в лекционном курсе по микробиологии.

Основные положения, которые выносятся на защиту:

Изучение молекулярно-генетических характеристик внехромосомных факторов наследственности, кодирующих токсинообразование у ЕТЕС.

Определение корреляции между копийностыо токсигенных плазмид и уровнем продукции энтеротоксинов.

Исследование возможности горизонтального переноса генов токсинообразования посредством конъюгации в популяции энтеробактерий.

6. Выводы.

1 .Проведенное нами изучение генетических детерминант токсинообразования у штаммов E. coli, изолированных от пушных зверей, показало, что продукция всех трех известных цитотонических токсинов связано с наличием в клетках токсигенных штаммов плазмид.

2.Изучение молекулярно-генетических особенностей этих плазмид показало их гетерогенность как по молекулярной массе (от 9,8 до 69,9 MD), копийности (от 1 до 22 копий на клетку) и физическому строению, изученному посредством рестрикционного анализа, так и по спектру кодируемых ими токсинов. Такая их гетерогенность говорит о различном происхождении и подтверждает транспозонную теорию плазмид.

3.Установлено, что копийность плазмид является одним из определяющих факторов уровня токсинообразования энтеротоксигенных штаммов E. coli, что связано с эффектом дозы гена.

4.Показана возможность переноса генов, кодирующих токсинообразование между различными штаммами E. coli, посредством конъюгации, что может служить одним из механизмов их распространения в популяциях энтеробактерий.

7. Практические предложения.

1. Материалы диссертационной работы могут быть использованы в научных целях, при составлении учебных и справочных пособий, чтении лекций и ведении лабораторных занятий по курсу микробиологии.

2. Результаты проведенных исследований целесообразно использовать при создании диагностических и лечебно-профилактических средств для борьбы с токсикоинфекциями, обусловленными энтеротоксигенными эшерихиями.

Показать весь текст

Список литературы

  1. В. М. Факторы патогенности бактерий и их роль в развитии инфекционного процесса // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 1999. — № 5. — С. 34−39.
  2. В. М., Мавзютов А. Р. Типы секреции регуляции функциональной активности молекул, ассоциированных с патогенностью энтеробактерий // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 2002. — № 5. — С. 86−91.
  3. В. М., Мавзютов А. Р., Golkocheva Е. Секретируемые факторы патогенности энтеробактерий // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 2002. — № 1.1. С. 84−90.
  4. В. М., Мавзютов А. Р., Габидуллин 3. Г. термостабильные энтеротоксины условно патогенных представителей Enterobacteriaceae // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии -1998. № 3. — С. 104−107.
  5. Ю. В. Бактериальные токсины: биологическая сущность и происхождение // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 1996. — № 3. — С. 43−46.
  6. ., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение // М., Мир 2002. — 589с.
  7. М. В., Фиш Н. П. Белковые токсины микробов 1980. -224с.
  8. И. В. Вирулентность бактерий как функция адаптации // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии-1997. -№ 4-С. 16−20.
  9. И. В. Некоторые проблемы адаптации патогенных бактерий к окружающей среде // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 1997. — № 4. — С. 31−35.
  10. К. К. Рецепторы эукариотических клеток для токсинов и энтеротоксинов некоторых патогенных бактерий // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии -1992. № 7.1. С.55−60.
  11. П. В., Прозоров А. А. Изучение переноса плазмидных и хромосомных генов у Bacillus subtilis и Escherichia coli при естественной трансформации // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология -1990. № 1. — С.29−31.
  12. Кудлай Д. J1. Эписомы и инфекционная наследственность бактерий. М., -1969. 223с.
  13. А. Р., Фиалкина С. В., Бондаренко В. М. «Острова» патогенности условно-патогенных энтеробактерий // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 2002. — № 6. -С.5−9.
  14. Г. Бактериальные плазмиды. М. 1976. — 238с.
  15. А. В., Доморадская Т. И., Филиппов С. А., Добрынин В. Н., Коробко В. Г. Клонирование и экспрессия гена термостабильного энтеротоксина Escherichia coli // Биоорганическая химия -1992. № 18. — С.63−70.
  16. Г. Г. Эпидемиологическая обстановка в России в 1991—1996 годах по заболеваемости социально обусловленными инфекционными заболеваниями // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 1998. — № 1. — С.24−40.
  17. JI. И. Экспрессия генов. М., 2000. 527с.
  18. В. Г., Бондаренко В. М. Адгезины энтеротоксигенных кишечных палочек: роль в патогенезе диарей и генетический контроль // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии -1990. № 5. — С. 110−117.
  19. В. Г., Бондаренко В. М. Энтеротоксины энтеротоксигенных Escherichia coli: характеристика, механизм действия и генетический контроль // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 1990. — № 7. — С. 92−98.
  20. А. П. Основы плазмидологии. М. 1996. — 232с.
  21. В. Л., Ригер П., Сокуренко Е. В. Регуляция экспрессии пилей 1-го типа на примере штамма Ml 7 Escherichia coli // Бюл. эксперим биологиии медицины 2001. — № 131. — С. 427−431.
  22. Akker F., Sarfaty S., Twiddy E. M., Connell T. D., Holmes R. K., Hoi W. G. Crystal structure of a new heat-labile enterotoxin, LT-IIb // Structure -1996. № 4. — P. 665−678.
  23. Akltories K. Rho proteins targets for bacteria toxins // Trends Microbiol 1997. — № 5. — P. 282−288.
  24. Almenoff J. S., Jurka J., and Schoolnik G. K. Induction of heatstable enterotoxin receptor activity by a human Alu repeat // J. Biol. Chem 1994. — № 269. — P. 16 610−16 617.
  25. Altuvia S. et al. Alternative mRNA structures of the с 111 gene of bacteriophage 1 determine the rate of its translational initiation // J. Mol. Biol. 1989. -№ 210.-P. 265−280.
  26. Arduino R. C., and DuPont H. L. Traveler’s diarrhoea. // Baillieres Clin. Gastroenterol 1993. — № 7. — P. 365−385.
  27. Arp L. Virulence mechanisms of bacterial pathogenesis. // Ed. A. Roth. Washington — 1988. — № 3 — P. 27.
  28. Bergh O., Borsheim K. Y. Bratbak G., Heldal M. High abundance of viruses found in aquatic environments // Nature 1989. -№ 340.-P. 467−468.
  29. Black R. E. Epidemiology of traveler’s diarrhea and relative importance of various pathogens // Rev. Infect. Dis. 1990. — № 12(Suppl. 1). -P. 73−79.
  30. Buysse J.M., Stover C.K., Oaks E.V. et al. Molecular cloning of invasion plasmid antigen (ipa) genes from Shigella flexneri: analysis of ipa gene products and genetic mapping // J. Bacteriol. 1987. — № 169. -P.2561−2569.
  31. Carpick B. W., and Gariepy J. The Escherichia coli heat-stable enterotoxin is a long-lived superagonist of guanylin // Infect. Immun. 1993. -№ 61.-P. 4710−4715.
  32. Cassels F. J., and Wolf M. K. Colonization factors of diarrheagenic E. coli and their intestinal receptors // J. Ind. Microbiol. 1995. — № 15. -P.214−226.
  33. Celemin C., Anguita J., Naharro G., Suarez S. Evidence that Escherichia coli isolated from the intestine of healthy pigs hybridize with LT-TI, ST-Ib and SLT-IT DNA probes //Microb. Pathog. 1994. — № 16.1. P. 77−81.
  34. Centers for Disease Control and Prevention. Foodborne diseases active surveillance network, 1996 // Morbid. Mortal. Weekly Rep. 1997. -№ 46. -P. 258−261.
  35. Chassy B. M., Mercenier A., Flickinger J. Transformation of bacteria by electroporation // Trends Biotechnol. 1988. — № 6. — p.303−309.
  36. Clewell D. B. Movable genetic elements and antibiotic resistance in enterococci // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 1990. — № 9.1. P.90−102.
  37. Clewell D. B., Weaver K. E. Sex pheromones andplasmid transfer inEnterococcus faeculis I I Plasmid 1989. — № 21. — P. 175−84.
  38. Cohen G., Schiffman D., Mevarech M., Aharonowitz Y. Microbial isopenicillin N synthase genes: structures, function, diversity and evolution // Treiuls Biotechnol. 1990. — № 8. — P. 105−111.
  39. Cohen S., Chang A.C., Boyer H.W. Construction of biologically functional bacterial plasmides in vitro // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1973. -№ 70.-P. 3240−3244.
  40. Colicelli J., Birchmeier C. Michaeli T, O’Neill K., Riggs M., et al. Isolation and characterization of a mammalian gene encoding a high-affinity cAMP phosphodiesterase // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1989. -№ 86.-P. 599−603.
  41. Dallas W. S. Conformity between heat-labile toxin genes from human and porcine enterotoxigenic Escherichia coli // Infect, and Immun. -1983.-№ 40.-P. 647−652.
  42. Dallas W. S., Gill D. M., Falkow S. Cistrons encoding Escherichia coli heat-labile toxin // J. Bact. -1979. № 139 — P. 850−858.
  43. De Graaf F. K., Mooi F. R. Fimbrial adhesions of Escherichia coli // Adv. Microb. Physiol. -1986. -№ 28. P. 66−143.
  44. De Graaf F. K., and Gaastra W. Fimbriae of enterotoxigenic Escherichia coli, In P. Klemm (ed.), Fimbriae: adhesion, genetics, biogenesis, and vaccines. CRC Press, Inc., Boca Raton, Fla. 1994. — P. 58−83.
  45. Dickinson B.L., Clements J.D. Dissociation of Escherichia coli heat-labile enterotoxin adjuvanticity from ADP-ribosyltransferase activity. // Tnfect. Tmmun. 1995. — № 63. — P. 1617−1623.
  46. Donta S. T., Tomicic T., and Holmes R. K. Binding of class II Escherichia coli enterotoxins to mouse Y1 and intestinal cell. // Infect. Immun. -1992. № 60. — P. 2870−2873.
  47. Dreyfus L. A., Harville B., Howard D. E., Shaban R., Beatty D. M., and Morris S. J. Calcium influx mediated by the Escherichia coli heat-stable enterotoxin B (STB) // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. -1993. № 90.1. P.3202−3206.
  48. Dubnau D. The regulation of genetic competence in Bacillus subtilis // Mol. Microbiol. -1991. -№ 5. -P.ll-18.
  49. DuPont H. L., and Ericsson C. D. Prevention and treatment of traveler’s diarrhea N. Engl. // J. Med. -1993. № 328. -P. 1821−1827.
  50. Endo Y., Tsurugi K., Yutsucio T. et al. Site of action of a Verotoxin (VT2) from Escherichia coli 0157. H7 and Shiga toxin in eucaryotic ribosomes // Eur. J. Biochem. 1998. — № 17. — P.45−50.
  51. Eslava C., Navarro-Garcia F., Czeczulin J. et al. Pet, an autotransporter enterotoxin from enteroaggregative Escherichia coli // Infect. Immun. 1998. — № 66. — P.3155−3163.
  52. Evans J., Dyke K. G. H. Characterization of the conjugation system associated with the Siaphylococcus aureus plasmid pJEI. // J. Gen. Microbiol. -1988.-№ 134.-P.l-8.
  53. Finlay B.B., Falkow S. Common themes in microbial pathogenicity revisied. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 1997. — № 6.1. P.136−169.
  54. Flatau G., Lemichez E., Gauthier M. et al. Toxin-induced activation of the G protein p21 Rho by deamidation of glutamine // Nature. 1997. — № 387. — P.729−733.
  55. Fujii Y., Okamuro Y., Hitotsubashi S., Saito A., Asashi N., and Okamoto K. Effect of alterations of basic amino acid residues of Escherichia coli heat-stable enterotoxin II on enterotoxicity // Infect. Immun. 1994. -№ 62. -P.2295−2301.
  56. Fukuta S., Magnani J. L., Twiddy E. M., Holmes R. K., Ginsburg V. Comparison of the carbohydrate-binding specificities of cholera toxin and Escherichia coli heat-labile enterotoxins LTh-I, LT-IIa and LT-IIb // Infect. Immun. 1988. -№ 56. -P.1748−1753.
  57. Gaastra W., de Graaf F. K. Host-specific adhesions of noninvasive enterotoxigenic Escherichia coli strains // Microbiol Rev. 1982. — № 46. -P.129−161.
  58. Galyov E.E., Wood M.W., Rosqvist R. A secreted effector protein of Salmonella dublin is translocated into eukaryotic cells and mediates inflammation and fluid secretion in infected ileal mucosa II Mol. Microbiol. 1997. -№ 25. -P.903−912.
  59. Gariepy J., Judd A. K., and Schoolnik G. K. Importance of disulfide bridges in the structure and activity of Escherichia coli enterotoxin STlb. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1987. -№ 84. — P.8907- 8911.
  60. Gariepy J., Lane A., Frayman F., Wilbur D., Robien W., Schoolnik G. K., and Jardetzky O. Structure of the toxic domain of the Escherichia coli heat-stable enterotoxin ST I // Biochemistry 1986. — № 25. — P.7854−7866.
  61. Grans-Goldner A., Grans H., Schlacher T., Hogenauer G. The sequences of genes bordering ori T in the enterotoxin plasmid P307: comparison with the sequences of plasmids F and R1. Plasmid 1990.24. -P.l 19−131.
  62. Green B. A., Neill R. J., Ruyechan W. T., Holmes R. K. Evidence that a New Enterotoxin of Escherichia coli, which activates adenylate cyclase in eucaryotic target cells is not plasmid mediated // Infect. Immun. 1983. -№ 41. -P.383−390.
  63. Gumez-Diiarte O. G., Kaper J. B. // A plasmid-encoded regulatory region activates chromosomal eaeA expression in enteropathogenic E. coli // Infect. Immun. 1995. -№ 63. — P. 1767−1776.
  64. Hakansson S., GalyovE.E., Rosqvist R., Wolf-Watz H. The Yersinia YpkA Ser/Thr kinase is translocated and subsequently targeted to the inner, surface of the HeLa cell plasma membrane 11 Ibid. 1996. — № 20. -P.593−603.
  65. Hardt W.D., Galan J.E. A secreted Salmonella protein with homology to an avirulence determinant of plant pathogenic bacteria. // Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1997. -№ 94. -P.9887−9892.
  66. Harville B. A., and Dreyfus L. A. Involvement of 5-hydroxytryptamine and prostaglandin E2 in the intestinal secretory action of Escherichia coli heat-stable enterotoxin B (STb) // Infect. Immun. -1995. -№ 63. -P.745−750.
  67. Hayes W. The Genetics of Bacteria and Their Viruses // Oxford/Edinburgh: Blackwell Sei. 1968. — 925 p.
  68. Henderson I.R., Czeczulin J., Eslava C. et al. Characterization of Pic, a secreted protease of Shigella flexneri and enteroaggregative Escherichia coli // Tnfect. Tmmun. 1999. -№ 67. -P.5587−5596.
  69. Hoe N.P. and Goguen J.D. Temperature sensing in Yersinia pestis: translation of the LcrF activator protein is thermally regulated // J. Bacteriol. 1993. -№ 175. -P.7901−7909.
  70. Holmes R. K., Twiddy E. M., and Pickett C. L. Purification and characterization of type II heat-labile enterotoxin of Escherichia coli. // Infect. Immun. -1986. № 53. — P. 464−473.
  71. Jacewicz M. S., Acheson D. W. K., Mobassaleh M., Donohue-Rolfe
  72. A., Balasubramanian K. A., and Keusch G. T. Maturational regulation of globotriaosylceramide, the Shiga-like toxin 1 receptor, in cultured human gut epithelial cells. // J. Clin. Invest. 1995. — № 96. — P. 1328−1335.
  73. Jann K., and Hoschutsky H. Nature and organization of adhesins. // Curr. Top. Microbiol. Immunol. -1991. -№ 151. P. 55−85.
  74. Johansson J., Cossart P. RNA-mediated control of virulence gene expression in bacterial pathogens // TRENDS in Microbiology 2003. -№ 11.-P. 311−323.
  75. Kaniga K., Uraill J., Bliska J.B., Gala’n J.E. A secreted protein tyrosine phosphatase with modular effector domains in the bacterial pathogen Salmonella typhimurium. // Ibid. -1996. P.633−641.
  76. Keenan K.P., Sharpnack D.D., Collins H., Formal S.B., and
  77. O’Brien A.D. Morphological evaluation of the effects of Shiga toxin and E. coli Shiga-like toxin on the rabbit intestine. // Am. J. Pathol. 1986. — № 125. — P.69−80.
  78. Kenny B., DeVinney R., Stein M. et al. Enteropathogenic E. coli (EPEC) transfers its receptor for intimate adherence into mammalian cells. //Cell -1997. -№ 91. -P.511−520.
  79. Klemm P. Two regulatory Fim denes, FimB and FimE control the phase variation of tipe I fimbriae in Escherichia coli // EMBO J. 1986. -№ 5. -P. 1389−1393.
  80. Klemm P., and Christiansen G. Three Fim genes required for the regulation of length and mediation of adhesion of Escherichia coli type I fimbriae. //Mol. Gen. Genet. 1987. -№ 208. -P.439−445.
  81. Kokjohn T.A. Transduction: mechanism and potential for gene transfer in the environment. // See Ref. 1989. -№ 50. — P.73−97.
  82. Koster M., Bitter W., Tommassen J. Protein secretion mechanisms in Gram-negative bacteria. Int. J. Med. Microbiol. 2000. — № 290. -P.325−331.
  83. Krogfelt K. A., Bergmans H. and Klemm P. Direct evidence that the FimH protein is the mannose specific adhesin of Escherichia coli type 1 fimbriae. // Infect. Immun. 1990. — № 58. — P. 1995−1999.
  84. Kuhsei M.G., Strickland R., Palmer J.D. An ancient group I intron shared by eubacteria and chloroplasts. // Science -1990. № 250.1. P. 1570−1573.
  85. Lacks S.A., Lopez P., Greenberg B., Espinosa M. Identification and analysis of genes for tetracycline resistance and replication functions in the broad-host-range plasmid pLSl. // J. Mol. Biol. 1986. — № 192 — P.753−765.
  86. Lally N.E., Hill R.B., Kieba I.R., Korostoff J. The interaction between RTX toxins and target cells. // Trends Microbiol. 1999. — № 7.1. P. 356−361.
  87. Lorenz M.G., Aardema B.W., Wackernagel W. Highly efficient genetic transformation of Bacillus subtilis attached to sand grains. // J. Gen. Microbiol. 1988. -№ 134. -P.107−112.
  88. Lorenz M.G., Wackernagel W. High frequency of natural transformation of pseudomonas slutzeri in soil extract supplemented with a carbon/energy anil phosphorus source. // Appl. Environ. Microbiol. 1991. -№ 5. — P. 1246−1251.
  89. Manavathu E.K., Hiratsuka K., Taylor D.E. Nucleotide sequence analysis and expression of a tetracycline resistance gene from Campylobacter jejuni. // Gene. 1988. — № 62. -P.17−26.
  90. Marks S., and Roberts T. E. coli 0157: H7 ranks as the fourth most costly foodborne disease. // Food Saf. 199. -P.51−55.
  91. Martinez J.L. and Baquero F. Interactions among strategies associated with bacterial infection: patogenicity, epidemicity, and antibiotic resistance. // Clinical Microbiology Reviews 2002. — № 15. — P.647−679.
  92. Martinez P., Baquero K. Strategies in bacterial infection. // Clin. Microbiol Rev. 2002. — № 15. — P.634−665.
  93. Matthews J.B., Awtrey C.S., Thompson R., Hung T., Tally K.J., and Madara J.L. Na-K-C12 cotransport and C12 secretion evoked by heat-stable enterotoxin is microfilament dependent in T84 cells. // Am. J. Physiol. 1993.-№ 265, — P.370−378.
  94. Mattila L. Clinical features and duration of traveler’s diarrhea in relation to its etiology. // Clin. Infect. Dis. -1994. № 19. -P.728−734.
  95. Mazodier Ph., Davies J. Gene transfer between distantly related bacteria// Annu.Rev.Genet. -1991. № 25. -P.147−171.
  96. McConnell M. M., Smith H. R., Willshaw G. A., Scotland S. H., Rowe B. Plasmids coding for heat-labile enterotoxin production isolated from Escherichia coli 078: comparison of properties. J. Bact., 1980. -№ 143.-P. 158−167.
  97. Merrit E.A., Hoi W.G. AB5 toxins. // Curr. Opin. Struct. Biol. 1995. -№ 5. -P.165−171.
  98. Miller J. F., Mecalanos J. J., Falkow S. Coordinate regulation and sensory transduction in the control of bacterial virulence. // Science. 1989.- № 243. -P.916−922.
  99. Morita M.T. Translational induction of heat shock transcription factor s 32: evidence for a built-in RNA thermosensor.//Genes Dev. 1999.- № 13. -P.655−665.
  100. Morse S.A., Johnson S.R., Biddle J.W., Roberts M.C. High-level telracycline resistance in Neisseria gonorrhoeae is result of acquisition of streptococcal tetM determinant. // Antimikrob. Agents Chemother. 1986. -№ 30. — P.64−70.
  101. Nataro J.P., Kaper J.B. Diarrheagenic Escherichia coli. // Clinical Microbiology Reviews. 1998. -№ 11. -P.142−201.
  102. Nataro J.P., Ylkang D., Vioxkanz D., Walker K. AfgR a transcriptional activator of aggregative adherence fimbria I expression of enteroaggregative Escherichia coli. // J. Bacteriol. 1994. — № 174. -P.4691−4699.
  103. Navarro-Garcia F., Canizalez-Roman A., Luna J., Sears C., and Nataro J.P. Plasmid-encoded toxin of enteroaggregative Escherichia coli is internalized by epithelial cells. // Infection and Immunity. 2001. — № 69.1. P. 1053−1060.
  104. Navarro-Garcia F., Sears C, Eslava C. Cytoskeletal effects induced by Pet, the serine protease enterotoxin of enteroaggregative Escherichia coli. // Infect. Immun. 1999. — № 67. -P.2184−2192.
  105. Novick R.P. Plasmid incompatibility. // Microbiol. Rev. 1987. -№ 51. -P.381−395.
  106. O’Brien A.D., and Holmes R.K. Shiga and Shiga-like toxins. // Microbiol. Rev. -1987. № 51. -P.206−220.
  107. Okamoto K., Fujii Y., Akashi N., Hitotsubashi S., Kurazono H.,
  108. Karasawa T., and Takeda Y. Identification and characterization of heatstable enterotoxin Il-producing Escherichia coli from patients with diarrhea. // Microbiol. Immunol. 1993. — № 37. -P.411−414.
  109. Osek J. Clonal analysis of Escherichia coli strains isolated from pigs with post-weaning diarrhea by pulsed-field gel electrophoresis. //FEMS Microbiology Letters. 2000. — № 186. -P.327−331.
  110. Pai C.H., Kelly J.K., and Meyers G.L. Experimental infection of infant rabbits with verotoxin-producing Escherichia coli. // Infect. Immun. -1986.-№ 51.-P.16−23.
  111. Penalva M.A., Moya A., Dopazo J., Ramon D. Sequences of isopenicillin N synthetase genes suggest horizontal gene transfer from prokaryotes to eukaryotes. // Proc. R. Soc. London Ser. 1990. — № 241. -P. 164−169.
  112. Perry R.D., Straley S.C., Fetherston J.D. et al. DNA sequencing and analysis of the low-Ca response plasmidpCDl of Yersinia pestis KIM 5. // Infect. Immun. 1998. — № 66. — P.4611 — 4623.
  113. Peterson J.W., and Whipp S.C. Comparison of the mechanisms of action of cholera toxin and the heat-stable enterotoxins of Escherichia coli. // Infect. Immun. 1995. — № 63. — P. 1452−1461.
  114. Peterson J.W., Lu Y., Duncan S., Cantu J., and Chopra A.K. Interactions of intestinal mediators in the mode of action of cholera toxin. // J. Med. Microbiol. -1994. № 41. -P.3−9.
  115. Picket C.L., Whitehouse C.A. The cytoletal distending toxin family. // Trends Microbiol. 1999. — № 7. — P.292 — 297.
  116. Pickett C.L., Twiddy E.M., Coker C. Holmes R.K. Cloning, nucleotide sequence and hybridization studies of the type lib heat-labile enterotoxin gene of Escherichia coli. // J. Bacteriol. 1989. — № 171. -P.4945−4952.
  117. Pickett C.L., Twiddy E.M., Coker C., and Holmes R.K. Genetics of type Ha heat-labile enterotoxin of Escherichia coli-. operon fusions, nucleotide sequence, and hybridization studies. // J. Bacteriol. 1987. -№ 169. — P.5180−5187.
  118. Primrose S.B., Twyman R.M. Genomics. Application in human biology. Blackwell Publishing, Cornwall, UK, 2004.
  119. Rasheed J.K., Guzmam-Verduzco L.-M., and Kupersztoch Y.M. Two precursors of the heat-stable enterotoxin of Escherichia coli: evidence of extracellular processing. // Mol. Microbiol. 1990. — № 4. — P.265−273.
  120. Rosenshine I., Tchelet R., Mevarech M. The mechanism of DNA transfer in the mating system of an archaebacterium. // Science. 1989. — № 245. -P. 1387−1389.
  121. Schmidt H., Montag M., Bockemtihl J., Heesemann J., and Karch H. Shiga-like toxin II-related cytotoxins in Citrobacter freundii strains from humans and beef samples. // Tnfect. Immun. 1993. — № 61. — P.534−543.
  122. Sears C. L., and Kaper J.B. Enteric bacterial toxins: mechanisms of action and linkage to intestinal secretion. // Microbiol. Rev. 1996. -№ 60. -P. 167−215.
  123. Seriwatana J., Echeverria P., Taylor D.N., Rasrinaul L., Brown J. E, Peiris J.S., Clayton C.L. Tipe II heat-labile enterotoxin-producing Escherichia coli isolated from animals and humans. // Infect. Immun. 1988. — № 56. — P. 1158−1161.
  124. Shapiro M., Matthews J., Hecht G., Delp C., and Madara J.L. Stabilization of F-actin prevents cAMP-elicited C12 secretion in T84 cells. // J. Clin. Invest. -1991. -№ 87. -P.1903−1909.
  125. Smith D.J., Burnham M.K.R., Bull J.H., Hodgson J.E., Ward J.M. p-lactam antibiotic biosynthetic genes have been conserved in clusters in prokaryotes and eukaryotes. // EMBO J. -1990. № 9. -P.741−747.
  126. Smyth C. Fimbrial variation in E. coli in antigenic variation in infections diseases. // Eds. P. Birkbeck, C. Penn. 1986. — №.19. — P.95−125.
  127. So M., Boyer H. W., Betlach M., Falkow S. Molecular cloning of an Escherichia coli plasmid determinant that encodes for the production of heat-stable enterotoxin. J. Bact, 1976. — № 128. -P.463−472.
  128. So M, Heffron F., Mc Carthy B.J. The E. coli gene encoding heat-stable toxin is a bacterial transposon flanked by inverted repeats of IS1. // Nature 1979. — № 277. — P.453−456.
  129. So M., and McCarthy B.J. Nucleotide sequence of the bacterial transposon TNI681 encoding a heat-stable (ST) toxin and its identification in enterotoxigenic Escherichia coli strains // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1980. № 77.-P.4011−4015.
  130. Soto G. E. and Hultgren S. J. Bacterial adhesins: common themes and variation in architecture and assembly // J. Bacteriology 1999. — № 181. -P. 1059−1071.
  131. Sougakoff N., Papadopoulou B., Norman P., Courvalm P. Nucleotide sequence and distributoin of gene tetO encoding tetracycline resistance in Campilobacter coli. // FEMS Microbiol. Lett. 1987. — № 44. -P.153−159.
  132. Stotzky G., Devanas M. A., Zeph L. R. Methods for studying bacterial gene transfer in soil by conjugation and transduction // Adv. Appl. Microbiol. 1990. — № 35. — P.57−169.
  133. Takao T., Tominaga N., Yoshimura S., Shimonishi Y., Hara S., Inoue T., and Miyama A. Isolation, primary structure and synthesis of heatstable enterotoxin produced by Yersinia enterocolitica. Eur. J. Biochem. -1985. № 152. — P. 199−206.
  134. Takao T., Shimonishi Y., Kobayashi M., Nishimura O., Arita M.,
  135. Takeda T., Honda T., and Miwatani T. Amino acid sequence of heatstable enterotoxin produced by Vibrio cholerae non-01. // FEBS Lett. 1985. -№ 193. -P.250−254.
  136. Tesh V.L., and O’Brien A.D. The pathogenic mechanisms of Shiga toxin and the Shiga-like toxins. // Mol. Microbiol. 1991. — № 5. — P.18I7−1822.
  137. Thomas L., Cravioto A., Scotland S. New fimbria! antigenic type that may represent a colonization factor in enterotoxigenic Escherichia coli in humans. // Infect, and Immun. 1982. — 35. — P. 1119−1124.
  138. Thompson M.R., and Giannella R. A. Revised amino acid sequence for a heat-stable enterotoxin produced by an Escherichia coli strain (18D) that is pathogenic for humans. // Infect. Immun. 1985. — № 47. — P. 834−836.
  139. Thompson M.R., and Giannella R.A. Different crosslinking agentsidentify distinctly different putative Escherichia coli heat-stable enterotoxin rat intestinal cell receptor proteins. J J J. Receptor Res. 1990. — № 10. -P.97−17.
  140. Van Gijsegem F., Genin S., Boucher C. Conservation of secretion pathways for pathogenic determinants of plant and animal bacteria. // Trends Microbiol. 1993. —№ 1. — P. 175−180.
  141. Wagner P.L., Livny J. Bacteriophage control of Shiga toxin 1 producing and release by E.coli. // Mol. Microbiol., 2002. — № 44. -P.957−970.
  142. Wagner P.L., Neely M.N. et al. Role for a phage promoter in Shiga toxin 2 expression from a pathogenic E. coli strains. // J.Bacteriol. 2001. -№ 183. -P.2081−2085.
  143. Walker G.C. Plasmid biology of pKMlOl: role of the mucAB genes. // See Ref. 1986. — № 51. -P.313−321.
  144. Wallace J.S., Cheasty T., and Jones K. Isolation of vero cytotoxin-producing Escherichia coli 0157 from wild birds. // J. Appl. Microbiol. -1997. № 82. — P.399−404.
  145. Weatherall D.J. The new genetics and clinical practice. Oxford Univ. Press. 1991. — 434p.
  146. Weikel C.S., Nellans H.N., and Guerrant R.L. In vivo and in vitro effects of a novel enterotoxin, STb, produced by Escherichia coli. // J. Infect. Dis. 1986. — № 153. -P.893−901.
  147. Weikel C.S., Tiemens K., Moseley S., and Guerrant R.L. Species specificity and lack of production of STb enterotoxin by Escherichia coli strains isolated from humans with diarrheal illness. // Infect. Immun. 1986. -№ 52. — P.323−325.
  148. Whipp S.C., Kokue E., Morgan R.W., Rose R., and Moon H.W. Functional significance of histologic alterations induced by Escherichia colipig-specific, mouse-negative, heat-stable enterotoxin (STb). // Vet. Res. Commun. 1987. -№ 11. -P.41−55.
  149. Willshaw G.A., Barclay E.A., Smith H.R., McConnell M.M., Rowe B. Molecular comparision of plasmid encoding heat-labile enterotoxin isolated from Escherichia coli strains of human origin. J. Bact., 1980,-№ 143.-P.168−175.
  150. Xu M.Q., Kathe S. D, Goodrich-Blair H., Nierzwicki-Bauer S.A., Shub D.A. Bacterial origin of a chloroplast intron: conserved self-splicing group I intron in cyanobacteria. // Science. -1990. -№ 250. P. 1566−1570.
  151. Yamamoto T., Tamura T., Yokota T. Overlapping genes in the heat-labile enterotoxin operon originating from Escherichia coli human strain. // Molec. gen. Genet. -1982. -№ 188. -P.356−359.
  152. Yamamoto T., Yokota T. Escherichia coli heat-labile enterotoxin genes are flanked by repeated deoxyribonucleic acid sequences. // J. Bact. -1981. -№ 145. -P.850−860.
  153. Yamamoto T., Yokota T. Sequence of heat-labile enterotoxin of Escherichia coli pathogenic for humans. J. Bact., 1983. — № 155, -P.728−733.
  154. Zeph L.R., Onaga M.A., Stotzky G. Transduction of Escherichia coli by bacteriophage PI in soil. // Appl. Environ. Microbiol. 1988. — № 54. -P. 1731−1737.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!