Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Исследование взаимосвязи между оптическими характеристиками тромбоцитов человека и их агрегационной и адгезионной активностью

Диссертация: Исследование взаимосвязи между оптическими характеристиками тромбоцитов человека и их агрегационной и адгезионной активностью
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Широко распространенным методом анализа свойств тромбоцитов, проявляемых в объёме жидкой фазы, является изучение их агрегационной активности. В основе метода лежит регистрация увеличения светопропускания суспензии тромбоцитов под действием физических или химических индукторов. Эффект увеличения светопропускания объясняют уменьшением количества рассеивающих объектов с одновременным увеличением… Читать ещё >

Исследование взаимосвязи между оптическими характеристиками тромбоцитов человека и их агрегационной и адгезионной активностью (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
  • ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Активация тромбоцитов
    • 1. 2. Гемостатические реакции тромбоцитов
      • 1. 2. 1. Адгезия тромбоцитов
      • 1. 2. 2. Реакция высвобождения
      • 1. 2. 3. Агрегация тромбоцитов
    • 1. 3. Концентрация и объём тромбоцитов
    • 1. 4. Оптические методы исследования активации тромбоцитов
  • ГЛАВА 2. Материалы и методы
    • 2. 1. Выделение тромбоцитов
      • 2. 1. 1. Забор крови в пробирки
      • 2. 1. 2. Забор крови в контейнеры
    • 2. 2. Определение концентрации тромбоцитов
    • 2. 3. Лазерный дифракционный анализ дисперсионного состава суспензии тромбоцитов
      • 2. 3. 1. «Mastersizer Micro» — блок схема
      • 2. 3. 2. Восстановление распределения частиц по размерам из картины светорассеяния
      • 2. 3. 2. Объёмная концентрация рассеивающих частиц
      • 2. 3. 3. Экспериментальные условия для вычисления углового распределения рассеянного света
      • 2. 3. 4. Вычисление среднего объёма тромбоцитов
      • 2. 3. 5. Вычисление концентрации тромбоцитов
      • 2. 3. 6. Выбор презентации
      • 2. 3. 7. Вычисление среднего объёма и коэффициента преломления тромбоцитов
    • 2. 4. Исследование агрегационной активности тромбоцитов
    • 2. 5. Исследование адгезионной активности тромбоцитов
      • 2. 5. 1. Подготовка образцов
      • 2. 5. 2. Визуализация адгезированных тромбоцитов и параметры оценки адгезионной активности клеток
    • 2. 6. Активация тромбоцитов
      • 2. 6. 1. Добавки АДФ
      • 2. 6. 2. Контакт с поверхностью тромбоцитарных контейнеров
      • 2. 6. 3. Контакт с поверхностью трубок из ПВХ и CP
      • 2. 6. 2. Контакт с поверхностью трубок из ПВХ и CP в условиях потока
    • 2. 7. Статистическая обработка данных
  • ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
    • 3. 1. Исследование взаимосвязи между оптическими характеристиками тромбоцитов человека, их агрегационной и адгезионной активностью
      • 3. 1. 1. Добавки АДФ
      • 3. 1. 2. Контакт с поверхностью тромбоцитарных контейнеров
      • 3. 1. 3. Контакт с поверхностью трубок из ПВХ и CP
      • 3. 1. 4. Контакт с поверхностью трубок из ПВХ и CP в условиях потока
    • 3. 2. Коэффициент преломления тромбоцитов как параметр активации клеток
      • 3. 2. 1. Влияние АИК

Актуальность темы

.

Гемосовместимость материалов и изделий медицинского назначения во многом определяется реакцией тромбоцитов на чужеродную поверхность, т.к. именно эти клетки играют важную роль в поддержании гемостаза и сохранении агрегатного состояния крови [10, 11, 16]. Традиционно функциональное состояние тромбоцитов связывают с протекающими при изменении окружающей среды процессами адгезии, агрегации и высвобождения внутриклеточных биологически активных компонентов [8, 13]. Так, например, адгезия клеток на поверхность имплантата провоцирует реакцию высвобождения тромбоцитарных факторов во внеклеточное пространство, в том числе индукторов агрегации. Это приводит к активации не адгезированных тромбоцитов, что сопровождается интенсификацией процессов адгезии клеток, а также их агрегацией на поверхности и в объеме.

Несмотря на прогресс в изучении механизмов активации тромбоцитов, процессы, протекающие при контакте этих клеток с чужеродным материалом, остаются до конца не изучены. В значительной степени это связано с ограниченностью, трудоёмкостью и иногда недостаточной информативностью имеющихся методологических подходов к изучению свойств и реакций тромбоцитов. В связи с тем, что регистрация активации тромбоцитов в реальном масштабе времени трудно осуществима, функциональное состояние тромбоцитов обычно исследуется до и после того или иного воздействия.

Одним из наиболее информативных методов является исследование характера адгезии клеток с помощью сканирующего электронного микроскопа, что дает возможность одновременно изучать количество и морфологию адгезированных тромбоцитов [15, 16]. Однако эти два параметра не всегда дают полную информацию об изменениях функционального состояния тромбоцитов. Так например, в потоке, при наличии напряжения сдвига, на поверхности материала не всегда удается найти адгезированные тромбоциты. При этом активированные поверхностью тромбоциты могут накапливаться в циркулирующей крови и состояние клеток, таким образом, будет отличным от исходного [34, 35, 38]. Помимо этого, активированные контактом клетки могут иметь большую адгезионную активность, что может реализоваться в образовании тромбов в застойных зонах.

Широко распространенным методом анализа свойств тромбоцитов, проявляемых в объёме жидкой фазы, является изучение их агрегационной активности [4, 23, 28, 43, 64]. В основе метода лежит регистрация увеличения светопропускания суспензии тромбоцитов под действием физических или химических индукторов. Эффект увеличения светопропускания объясняют уменьшением количества рассеивающих объектов с одновременным увеличением их размеров вследствие агрегации тромбоцитов. Однако изменение светопропускания может быть связано не только с изменением количества рассеивающих объектов, а и с изменением оптических свойств (среднего объёма и коэффициента преломления) единичных клеток.

Методика, разработанная в Центре по исследованию биоматериалов ФГУ НИИТиИО Росздрава, позволила привлечь метод лазерного дифракционного анализа для измерения среднего объёма и коэффициента преломления тромбоцитов в суспензии клеток с известной концентрацией [5, 6]. Полноценное использование оптических характеристик тромбоцитов в качестве параметров оценки их функционального состояния невозможно без понимания их взаимосвязи с такими хорошо изученными свойствами клеток, как агрегация и адгезия, что и обусловливает актуальность данной работы.

Необходимость проведения подобного исследования объясняется ещё и тем, что в дальнейшем это, позволит сопоставить степень активации клеток с изменением их оптических характеристик, и, таким образом, появится возможность использования оптических характеристик, как дополнительных параметров активации тромбоцитов.

Целью работы является исследование взаимосвязи между адгезионными, агрегационными свойствами тромбоцитов и их оптическими характеристиками в условиях in vitro. Задачи исследования.

Исходя из поставленной цели, основные задачи работы сводились к следующему:

1. Найти оптимальные экспериментальные условия активации тромбоцитов, позволяющие регистрировать изменения их среднего объёма и/или коэффициента преломления и не приводящие к уменьшению концентрации клеток в суспензии за счёт процессов агрегатообразования на поверхности или в объёме;

2. Исследовать в условиях in vitro влияние поверхности синтетических полимерных материалов и индуктора агрегации тромбоцитов АДФ в малых концентрациях на оптические характеристики тромбоцитов;

3. Исследовать взаимосвязь между оптическими характеристиками активированных тромбоцитов, их агрегационной и адгезионной активностью;

4. Продемонстрировать возможность использования оптических характеристик тромбоцитов как параметров, отражающих активацию клеток.

Научная новизна.

1. Определены экспериментальные условия активации тромбоцитов чужеродной поверхностью или добавками аденозиндифосфата (АДФ), позволяющие по картине светорассеяния для суспензии клеток вычислять их средний объём и коэффициент преломления.

2. В условиях in vitro доказано влияние поверхности полимерных материалов в условиях потока и медленного перемешивания на коэффициент преломления тромбоцитов человека.

3. Обнаружено, что добавки АДФ в малых концентрациях приводят не только к первичной агрегации тромбоцитов в суспензии, но и изменяют оптические характеристики клеток.

4. Установлена взаимосвязь между оптическими параметрами активированных чужеродной поверхностью или добавками АДФ тромбоцитов и изменением их адгезионных и агрегационных свойств.

5. Показана возможность использования коэффициента преломления тромбоцитов в качестве параметра, прогнозирующего изменения их адгезионных и агрегационных свойств.

Практическая значимость.

Разработана методика, позволяющая регистрировать изменение оптических характеристик тромбоцитов в режиме реального времени при контакте с поверхностью материала в условиях потока. Показано, что методика обладает достаточной чувствительностью для того, чтобы определять разницу в степени активации тромбоцитов при контакте с различными полимерами.

Исследовано влияние времени контакта с поверхностью материала на средний объём и коэффициент преломления тромбоцитов человека.

Исследована и установлена взаимосвязь между оптическими характеристиками тромбоцитов и их агрегационной и адгезионной активностью в различных модельных системах: малые добавки АДФ, контакт с поверхностью полимерного материала в условиях перемешивания и в условиях потока.

Проведена апробация возможности оценки активации тромбоцитов пациентов по степени изменения коэффициента преломления тромбоцитов до и после использования аппарата искусственного кровообращения (АИК) при операциях на открытом сердце.

Апробация работы.

Основные материалы диссертационной работы были представлены на следующих семинарах и конференциях:

— межинститутские семинары Центра по исследованию биоматериалов ФГУ НИИ Трансплантологии и искусственных органов Росздрава (2002 г., 2003 г., 2004 г.),.

XLVI Научная конференция МФТИ, 2003,.

— XI научно-техническая конференция с участием зарубежных специалистов «Вакуумная наука и техника» (сентябрь 2004 г., Судак, Украина),.

— XXXth Annual Congress of the European Society for Artificial Organs (ESAO) (September 3−6 2003, Aachen, Germany),.

— XXXIth Annual Congress of the European Society for Artificial Organs (ESAO) (September 8−11 2004, Warsaw, Poland),.

Публикации.

Результаты проведённых исследований отражены в 8 печатных работах, опубликованных в России и за рубежом. Структура и объём диссертации.

выводы.

1. Найдены экспериментальные условия активации тромбоцитов, не приводящие к изменению концентрации клеток в суспензии, что позволяет по картине светорассеяния вычислять средние значения объема и коэффициента преломления тромбоцитов.

2. Обнаружено, что добавки 0.5 цМ АДФ в суспензию тромбоцитов приводят не только к первичной агрегации клеток, но и влияют на средний объём, коэффициент преломления, адгезионную и агрегационную активность тромбоцитов человека.

3. Показано, что изменение коэффициента преломления является более чувствительным параметром, характеризующим активацию тромбоцитов при контакте с чужеродной поверхностью, по сравнению с изменением среднего объема клеток.

4. В условиях in vitro доказано, что при инкубации тромбоцитарной плазмы человека с образцами силиконовой резины и поливинилхлорида медицинского назначения в течение 2 ч. в условиях потока происходит уменьшение коэффициента преломления клеток на 0.015±0.001 и 0.009±0.001, соответственно.

5. Показано, что уменьшение коэффициента преломления активированных чужеродной поверхностью или добавками АДФ тромбоцитов сопровождается статистически достоверным (р < 0.05) увеличением количества сильно активированных адгезированных клеток, с одной стороны, и уменьшением их агрегационной активности, с другой.

6. Проведен анализ результатов активации тромбоцитов поверхностью полимерных материалов и добавками АДФ в условиях in vitro, а также при операциях с применением аппарата искусственного кровообращения. Показана возможность использования коэффициента преломления тромбоцитов в качестве параметра, прогнозирующего изменения их адгезионных и агрегационных свойств активированных клеток.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

В данной работе впервые проведено исследование влияния добавок АДФ на средний объём, коэффициент преломления тромбоцитов, их адгезионную и агрегационную активность. При этом показано, что изменение коэффициента преломления в этом случае может быть вполне информативным, поскольку отражает изменение адгезионной и агрегационной активности клеток.

Проведено исследование изменения коэффициента преломления тромбоцитов человека при контакте с поверхностью полимерного материала в условиях потока и медленного перемешивания с параллельным контролем агрегационной и адгезионной активности клеток. В случае контакта с чужеродной поверхностью так же установлена взаимосвязь между изменением коэффициента преломления тромбоцитов и их гемостатической активности. В работе показано, что методика оценки активации клеток по изменению их коэффициента преломления обладает достаточной для того, чтобы определять разницу в степени активации тромбоцитов при контакте с различными полимерами.

Обоснована возможность использования коэффициента преломления тромбоцитов в качестве параметра, характеризующего изменение функционального состояния клеток. Продемонстрирована возможность оценки активации тромбоцитов пациентов по степени изменения коэффициента преломления тромбоцитов до и после использования аппарата искусственного кровообращения (АИК) при операциях на открытом сердце.

Показать весь текст

Список литературы

  1. К., Хафмен Д. Поглощение и рассеяние света малыми частицами. Москва, «Мир», 1986.
  2. В.К., Петров М. Н. Ультраструктура и функция тромбоцитов человека, Д.: «Наука», 1982.
  3. В.В., Вржещ П. В., Варфоломеев С. Д. Математическое описание кинетики агрегации тромбоцитов. Вестник АМН СССР, 1991, № 10, стр. 20−27.
  4. Габассов З. А, Попов Е. Г., Гаврилов И. Ю., Позин Е. Я., Маркосян Р. А. Новый высокочувствительный метод анализа агрегации тромбоцитов. Лабораторное дело, 1989, № 10, стр. 15−18.
  5. С.Ю. Определение размеров и оптических констант тромбоцитов методом лазерной дифракционной спектроскопии. Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата физико-математических наук, Москва, 2003.
  6. С.Ю., Максаев Г. И., Васин C.JI., Розанова И. Б., Севастьянов В. И. Использование лазерной дифракционной спектроскопии для измерения распределения тромбоцитов человека по размеру. Медицинская техника, 1998, № 3, стр. 43−44.
  7. В.А., Регирер С. А., Шадрина Н. Х. Реология крови. Москва, «Медицина», 1982, стр. 53−66.
  8. Н.Н., Папаян Л. П. Гемостаз: физиологические механизмы, принципы диагностики основных форм геморрагических заболеваний. Учебное пособие, Санкт-Петербург, 1999.
  9. А.Б. Агрегация тромбоцитов: Методы изучения и механизмы. Минск, «Университетское», 1990.
  10. В.И. Гемосовместимость полимерных материалов и первичные стадии их взаимодействия с кровью. Диссертация насоискание ученой степени доктора биологических наук. Москва, 1984.
  11. В.И. Общие представления о процессах взаимодействия чужеродной поверхности с кровью. Биосовместимость. Под ред. Севастьянова В. И. М.: ГУП «Информационный центр ВНИИгеосистем», 1999.
  12. В.В. Оптика биотканей: основы лазерной диагностики и дозиметрии. Медицинская физика. 1997, № 4, (www.telemedica.ru).
  13. А.С. Тромбоцитарный гемостаз. Спб.: СПб ГМУ, 2000.
  14. Abela G.S., Huang R., Ma H., Prieto A.R., Lei M., Schmaier A.H., Schwartz K.A., Davis J.M. Laser-light scattering, a new method for continuous monitoring of platelet activation in circulating fluid. J Lab Clin Med., 2003, Vol. 141(1), p. 50−57.
  15. Adams G.A. Platelet adhesion. Past and present. In: The platelets physiology and pharmacology. Ed. Largrester G. (De). Academic Press Inc, 1985, p. 15−37.
  16. Anderson J.M., Kottke-Marchant K. Platelet interactions with biomaterials and artificial devices. CRC Critical Reviews in Biocompatibility, 1985, Vol. 1(2), p. 111−204.
  17. Ashby В., Daniel J.L., Smith J.B., Mechanisms of platelet activation and inhibition. Hematol Oncol Clin North Am., 1990, Vol 4(1), p. 1−26.
  18. Bath P.M., Buttervvorth R.J. Platelet size: measurement, physiology and vascular disease. Blood Coagul Fibrinolysis., 1996, Vol. 7(2), p. 156−161.
  19. Bath P.M., Missouris C.G., Buckenham Т., MacGregor G.A. Increased platelet volume and platelet mass in patients with atherosclerotic renal artery stenosis. Clin Sci (Lond), 1994, Vol. 87(2), p. 253−257.
  20. Baumgartner H.R. and Muggli R. Adhesion and aggregation: morphological demonstration and quantitation in vivo and in vitro, in Platelets in Biology and Pathology. Ed. Gordon J.L., Elsevier, Amsterdam, 1976.
  21. Bohren C.F., Hunt A.J., Scattering of electromagnetic waves by a charged sphere, Can. J. Phys., 1977. Vol. 55, p. 1930- 1935.
  22. Bolton A.E., Ludlam C.A., Moore S., Pepper D.S., Cash J.D. Three approaches to the radioimmunoassay of human beta-thromboglobulin. Br J Haematol., 1976, Vol. 33(2), p. 233−238.
  23. Born G.V. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal. Nature, 1962, Vol. 194, 927 929.
  24. Boyum A., Stormorken N., Lund-Riise A. Electronic platelet counting. Scand J Clin Lab Invest., 1971, Vol. 28(4), p. 429−433.
  25. Brummitt D.R., Barker H.F., Pujol-Moix N. A new platelet parameter, the mean platelet component, can demonstrate abnormal platelet function and structure in myelodysplasia. Clin Lab Haematol., 2003, Vol. 25(1), p. 5962.
  26. Castle A.G., Crawford N. Platelet microtubule subunit proteins. Thromb Haemost., 1980, vol. 42(5), p. 1630−1633.
  27. Cavallero F. Quantitative valuation of platelet aggregation curves through the calculation of a numerical index, Platelet aggregation in the pathogenesis of cerebrovascular disorders. 1977, Vol. 1, p. 27 32.
  28. Cenni E., Cavedagna D., Falsone G., Mari G., Pizzoferrato A. Numerical and functional modifications in platelets induced by polyester coated by a hydrophilic polymer. Biomaterials, 1993, Vol. 14(8), p. 588−590.
  29. Chen J.H., Wei J., Chang C.Y., Laiw R.F., Lee Y.D. Studies on segmented polyetherurethane for biomedical application: effects of composition and hard-segment content on biocompatibility. J Biomed Mater Res., 1998, Vol. 41(4), p. 633−648.
  30. Chesterman C.N., McGready J.R., Doyle J.J., Morgan F.J. Plasma level of platelet factor 4 measured by radioimmunoassay. Br. J. Haemmatol., 1978, Vol. 40(3), p. 489−500.
  31. Erhart S., Beer J.H., Reinhart W.H. Influence of Aspirin on Platelet Count and Volume in Humans. Acta Haematol., 1999, Vol. 101(3), p. 140−144.
  32. Feinman R.D., Lubovvsky J., Charo I., Zabinski M.P. The lumi-aggregometer: a new instrument for simultaneous measurement of secretion and aggregation by platelets. J Lab Clin Med., 1977, Vol. 90(1), p. 125−129.
  33. Fristma G.A. Haemostasis and thrombosis. In: Hemostasis and thrombosis in the clinical laboratory. Eds. Corriveau D.M., Fristma G.A. Philadelphia, 1988, p.206−228.
  34. Frojmovic M.M., Milton J.G. Physical, chemical and functional changes following platelet activation in normal and «giant» platelets. Blood Cells, 1983, Vol. 9, p. 359−382.
  35. Gemmell C.H. Activation of platelets by in vitro whole blood contact with materials: increases in microparticle, procoagulant activity, and soluble P-selectin blood levels. J Biomater Sci Polym Ed., 2001, Vol. 12(8), p. 933 943.
  36. Giacomini A., Legovini P., Antico F., Valverde S., Salvadego M.M., Manoni F., Gessoni G. Assessment of in vitro platelet activation by Advia 120 platelet parameters. Lab Hematol., 2003, Vol. 9(3), p. 132−137.
  37. Giacomini A., Legovini P., Gessoni G., Antico F., Valverde S., Salvadego M.M., Manoni F. Platelet count and parameters determined by the Bayer ADVIA 120 in reference subjects and patients. Clin Lab Haematol., 2001, Vol 23(3), p. 181−186.
  38. Harms C. Laboratory evaluation of platelet function. In: Platelet Function. Ed. Triplett, D.A. American Society of Clinical Pathologists, Chicago, 1978, p. 35−52.
  39. Havviger J. Mechanisms involved in platelet vessel wall interaction. Thromb Haemost., 1995, Vol. 74(1), p. 369−372.
  40. Henning B.F., Zidek W., Linder В., Tepel M. Mean Platelet Volume and Coronary Heart Disease in Hemodialysis Patients. Kidney Blood Press Res., 2002, Vol. 25(2), p. 103−108.
  41. Holmsen H., Storm E., Day H.J. Determination of ATP and ADP in blood platelets: a modification of the firefly luciferase assay for plasma. Anal Biochem., 1972, Vol. 46(2), p. 489−501.
  42. Ingerman C.M., Smith J.B., Silver M.J. Direct measurement of platelet secretion in whole blood. Thrombosis Research, 1979, Vol. 16(3−4), p. 335−344.
  43. Ito Y., Sisido M., Imanishi Y. Platelet adhesion onto protein-coated and uncoated polyetherurethaneurea having tertiary amino groups in the substituents and its derivatives. J Biomed Mater Res, 1989, Vol. 23(2), p. 191−206.
  44. Jagroop I.Л., Clatworthy I., Lewin J., Mikhailidis D.P. Shape change in human platelets: measurement with a channelyzer and visualisation by electron microscopy. Platelets, 2000, Vol. 11(1), p. 28−32.
  45. Jenkins C.S., Cate J.W., Clemetson K.J. Platelet membrane glycoproteins: a role in the haemostatic process. Neth. J. Med., Vol. 19(6), p. 291 295.
  46. Karpatkin S. Heterogeneity of human platelets. VI. Correlation of platelet function with platelet volume. Blood, 1978, Vol. 51(2), p. 307−316.
  47. Karpatkin S. Platelet sizing. Section I: Hematology. CRC Handbook Series in Clinical Laboratory Science. 1979, Vol. 1, p. 409.
  48. Kinlough-Rathbone R.L., Mustard J.F. Endogenous mediators of platelet activation. In: Platelets in biology and pathology III. Eds: Maclntyre D.E., Gordon, J.L. Elsevier, Amsterdam, The Netherlands, 1987, p. 239−267.
  49. J., Schafer A.I. (Eds.). Thrombosis and Hemorrhage. Boston: Blackwell Scientific- 1994.
  50. Latimer P., Brunsting A., Pyle B.E., Moore C. Effects of aspherecity on single particle scattering, Appl. Opt., 1978, Vol. 17, p. 3152 58.
  51. Lim Y.A., Hyun B.H. Evaluation of platelet parameters on the AD VIA 120 as the quality indicator for stored platelets. Clin Lab Haematol., 2002, Vol. 24(6), p. 377−384.
  52. Ludlam C.A., Moore S., Bolton A.E., Pepper D.S., Cash J.D. The release of a human platelet specific protein measured by a radioimmunoassay, Thromb Res., 1975, Vol. 6(6), p. 543−548.
  53. Macey M.G., Carty E., Webb L., Chapman E.S., Zelmanovic D., Okrongly D., Rampton D.S., Newland A.C. Use of mean platelet component to measure platelet activation on the ADVIA 120 haematology system. Cytometry, 1999, Vol 38(5), p. 250−255.
  54. Maltsev V.P. Scanning flow cytometry for individual particle analysis. Review of Scientific Instruments, 2000, Vol. 71, p. 243−255.
  55. Maltsev V.P., Chernyshev A.V. Method and device for determination of parameters of individual microparticles. US Patent Number: 5,650,847. Date of patent: Jul. 22, 1997.
  56. Martin J.F., Daniel T.D., Trowbridge E.A., Acute and clinic changes in platelet volume and count after cardiopulmonary bypass induced thrombocytopenia in man, Thromb Haemost., 1987, Vol. 57(1), p. 55−58.
  57. Muszbeck L., Adany R. Blood Vessel Wall and Thrombosis: Hemostasis, Vol. 1. Ed. Machovich R., 1988, p. 159−196.
  58. O’Brien J.R. Platelet aggregation. Part II. Some results from a new method of study. J clin Pathol., 1962, Vol. 15(2), 452−458.
  59. O’Malley Т., Ludlam C.A., Fox K.A., Elton R.A. Measurements of Platelet volume using a variety of different anticoagulant and antiplatelet mixtures. Blood Coagul Fibrinolysis, 1996, Vol. 7(4), p. 431−436.
  60. Penington D.G., Lee N.L., Roxburgh A.E., McGready J.R. Platelet density and size: the interpretation of heterogeneity. Br J Haematol., 1976, Vol. 34(3), p. 365−376.
  61. Pizzoferrato A, Arciola CR, Cenni E, Ciapetti G, Sassi S., In vitro biocompatibility of a polyurethane catheter after deposition of fluorinated film. Biomaterials, 1995, Vol. 16(5), p. 361−367.
  62. Reininger A.J., Korndorfer M.A., Wurzinger L.J. Adhesion of ADP-activated platelets to intact endothelium under stagnation point flow in vitro is mediated by the integrin alphallbeta3. Thromb Haemost., 1998, Vol. 79(5), p. 998−1003.
  63. Rendu F., Brohard-Bohn B. The platelet release reaction: granules' constituents, secretion and functions. Platelets, 2001, Vol. 12(5), p. 261 273, Review.
  64. Ruggeri ZM. Mechanisms of shear-induced platelet adhesion and aggregation. Thromb Haemost., 1993, Vol. 70(1), p. 119−23. Review.
  65. Shvalov A.N., Soini J.T., Chernyshev A.V., Tarasov P.A., Soini E., Maltsev V.P. Light-Scattering Properties of Individual Erythrocytes. Applied Optics, 1999, Vol. 38, p. 230−235.
  66. Shvalov A.N., Soini J.T., Surovtsev I.V., Kochneva G.V., Sivolobova G.F., Petrov A.K.,, Maltsev V.P. Individual Escherichia coli cells studied from light scattering with the scanning flow cytometer. Cytometry, 2000, Vol. 41(1), p. 41−45.
  67. Siess W. Molecular mechanisms of platelet activation. Physiol Rev., 1989, Vol. 69(1), p. 58−178.
  68. Slack S.M., Cui Y., Turitto V.T. The effects of flow on blood coagulation and thrombosis. Thromb Haemost., 1993, Vol. 70(1), p. 129−134.
  69. Soini J.T., Chernyshev A.V., Hanninen P.E., Soini E., Maltsev V.P. A New Design of the Flow Cuvette and Optical Set-Up for the Scanning Flow Cytometer. Cytometry, 1998, Vol. 31(2), p. 78−84.
  70. Trowbridge E.A., Reardon D.M., Hutchinson D., Pickering C. The routine measurement of platelet volume: a comparison of light-scattering and aperture-impedance technologies. Clin Phys Physiol Meas., 1985, Vol. 6(3), p. 221−238.
  71. Wahba A., Rothe G., Lodes H., Barlage S., Schmitz G. The influence of the duration of cardiopulmonary bypass on coagulation, fibrinolysis and platelet function. J Torac Cardiovasc Surg., 2001, Vol. 49(3), p. 153−156.
  72. Waples L.M., Olorundare O.E., Goodman S.L., Lai Q.J., Albrecht R.M. Platelet-polymer interactions: morphologic and intracellular free calcium studies of individual human platelets. J Biomed Mater Res., 1996, Vol. 32(1), p. 65−76.
  73. Washington C. Particle size analysis in pharmaceutics and other industries. Theory and practice. Taylor & Francis, 1992.
  74. White J.G. An overview of platelet structural physiology. Scanning microscopy, 1987, Vol. 1(4), p. 1677−1700.
  75. White J.G. In: Cell biology of the secretory process. Ed. Cantin M. Basel, S. Karger, 1984, p. 546−570.
  76. White J.G. Ultrastructural modification in platelet membranes and cytoskeleton following activation. Blood Cells, 1983, Vol. 9(2), p. 237 261.
  77. White J.G., Clawson C.C., Gerrard J.M. Platelet ultrastructure. In: Haemostasis and thrombosis. Eds. Bloom A.L., Thomas D.P. Churchill Livingstone, Edinburgh, 1981, p. 22−49.
  78. МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
  79. ГУ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ТРАНСПЛАНТОЛОГИИ И ИСКУССТВЕННЫХ ОРГАНОВ
  80. Москва, 123 182 Телефон: (095) 196−18−03ул. Щукинская, д. 1 Телефакс: (095) 943−00−081. Ю «Cl/j^CrS 200 f1. f,.1. УТВЕРЖДАЮ"• *
  81. Зам. Директора по научной работе, ' д.м.н., профессор Шальнев Б.И.¦¦¦cbfcf1. ЗАКЛЮЧЕНИЕо результатах практического использования методики определения коэффициента преломления тромбоцитов человека для оценки их активации в условиях in vitro.
  82. Данный метод может быть рекомендован для оценки функциональной активности тромбоцитов с целью выбора медикаментозной тактики.
  83. Зав. отделением искусственного кровообращенияи вспомогательной оксигенации к.м.н. Матвеев Ю.Г.т
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!